专题13 发酵工程（6年汇编）（湖南专用）2021-2026年高考生物真题分类汇编

**基本信息** 汇编2021-2026年湖南高考真题及模拟题，聚焦微生物培养与应用，以生态修复（耐镉细菌筛选）、传统发酵（黄酒酿造）等真实情境为载体，突出实践能力与跨学科思维考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|7题（含2道多选）|培养基配制、微生物分离、活菌计数、酶固定化|选项设置关联科研场景（如解脂菌脂肪酶活性检测），考查科学思维| |非选择题|2题（高考真题）|发酵流程分析、实验设计与数据解读|以黄酒EC控制、大熊猫粪便菌筛选为线索，整合操作步骤（灭菌方法）与结果分析（菌株降解率比较），契合考情中“解决实际问题”趋势|

专题 13 发酵工程 6年汇编1年模拟 考点分类 湖南考情 命题规律 考点1 微生物的培养与应用 2026湖南(1题)、2022湖南(1题)、2021湖南(1题) · 情境设置：多结合环境修复、传统发酵、动物保护等真实科研及生活情境，强应用性。 · 考查重点：核心考查微生物分离筛选、培养基配制、发酵原理及纤维素分解菌实验操作。 · 命题趋势：情境化加深，跨学科融合（环境、食品、生态），注重解决实际问题能力。 考点1 微生物的培养与应用 1.（2026·湖南·高考真题）（多选）科研人员拟筛选耐镉细菌用于生态修复。下列叙述正确的是（        ） A. 宜从镉污染的土壤或水体中分离耐镉细菌 B. 配制培养基时需添加碳源、氮源和无机盐等营养成分 C. 含氯化镉的培养基可选择耐镉细菌并鉴定其种属 D. 利用稀释涂布平板法计数时，统计的菌落数往往比活菌实际数目多 2.（2022·湖南·高考真题）黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。发酵酒的酿造过程中除了产生乙醇外，也产生不利于人体健康的氨基甲酸乙酯（EC）。EC主要由尿素与乙醇反应形成，各国对酒中的EC含量有严格的限量标准。回答下列问题: （1）某黄酒酿制工艺流程如图所示，图中加入的菌种a是　　　　　　　，工艺b是　　　　　　　（填“消毒”或“灭菌”），采用工艺b的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 （2）以尿素为唯一氮源的培养基中加入　　　　　　　　指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（答出两种即可）。 （3）研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测　　　　　　　　是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素，理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 （4）某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低该黄酒中EC含量的思路　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 3.（2021·湖南·高考真题）大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12~38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题： （1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即　　　　　　　　　。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以　　　　　　　　　为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于　　　　　　　　　培养基。 （2）配制的培养基必须进行　　　　　　　　　　　　　　　灭菌处理，目的是　　　　　　　　　。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是　　　　　　　　　。 （3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路　　　　　　　　　。 （4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株　　　　　　　　　，理由是　　　　　　　　　。 菌株 秸秆总重(g) 秸秆残重(g) 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） A 2.00 1.51 24.50 16.14 B 2.00 1.53 23.50 14.92 C 2.00 1.42 29.00 23.32 消毒 灭菌 概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子） 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 1.（2026·湖南岳阳·二模）尿素需要土壤中尿素分解菌将其分解后才能被农作物吸收，某科研小组欲对某地土壤中尿素分解菌进行培养和研究。下列叙述正确的是（　　） A. 若要分离培养尿素分解菌，需要以尿素为唯一氮源的培养基进行培养，且培养基在灭菌后需要先调整pH再倒平板 B. 若要获得能高效分解尿素的菌种，从富含哺乳动物尿液且植物生长茂盛的地方取样，获得目的菌种的概率更高 C. 土壤中尿素分解菌数量的统计可以通过稀释涂布平板法接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，其上长出的菌落均来源于一个尿素分解菌 D. 研究过程中所有用到的培养器具和使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理 2.（2026·湖南常德·二模）通过在平板的不同区域添加不同营养物质的结晶或粉末可以选择出某种营养缺陷型菌株。营养缺陷型菌株在基本培养基上不能正常生长，只能在完全培养基上正常生长。为分离诱变菌液中氨基酸缺陷型菌株，现将诱变处理后的菌液稀释后接种于某培养基上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A、B培养基上，前后位置及号码相对应，培养后菌落生长情况如下图，下列操作与判断正确的是（　　） A. 实验过程中需在培养皿的皿底划分区域并做好标记 B. 过程①的接种方法为平板划线法，接种环需灼烧灭菌 C. 确定氨基酸缺陷型时，应挑取A中的目标菌落进行后续实验 D. 后续实验中在不同区域添加氨基酸结晶或粉末的培养基为鉴别培养基 3.（2025·湖南益阳·一模）我国科学家通过基因工程改造产甲烷古菌，利用工业废气中的CO2和H2为原料合成生物可降解塑料PHA（PHA是微生物在体内合成的高分子物质，用作能量储备），其工艺流程如下图所示。相关叙述错误的是（　　） A. 改造后的产甲烷古菌的代谢类型是自养厌氧型 B. 改造后的产甲烷古菌在接种前需要利用液体培养基扩大培养 C. 发酵工程的中心环节是灭菌，尤其是发酵罐必须进行严格灭菌 D. 用稀释涂布平板法对产甲烷古菌进行计数，计数的结果往往比实际活菌数少 4.（2026·湖南永州·二模）某科研小组从土壤中分离出一种解脂菌，它能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，而脂肪不能。下列叙述正确的是（       ） A. 配制好固体培养基后依次进行灭菌、调节pH和倒平板等操作 B. 可采用平板划线法对土壤中的解脂菌进行分离与计数 C. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D. 醇溶青琼脂平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 5.（2026·湖南株洲·一模）细菌素是某些细菌产生的具有抑菌活性的多肽类物质，可代替食品防腐剂使用。研究人员将乳酸菌置于液体培养基中发酵，取发酵液上清液滴加到长有金黄色葡萄球菌的固体培养基的孔洞中，测定所形成的抑菌圈直径，结果如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 固体培养基孔洞中滴加的上清液体积需保持一致 B. 培养约8h收获细菌素相对节约成本 C. 整个培养过程中上清液的抑菌活性与乳酸菌密度呈正相关 D. 细菌素进入人体肠道可以被消化酶分解，相对来说，具有一定安全性 6.（2026·湖南邵阳·二模）（多选）我国是世界上最大的柠檬酸生产国。下图是利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸的流程图，相关叙述错误的是（       ） A. 柠檬酸生产和果醋生产所选用的菌种呼吸类型相同 B. 配制扩大培养的培养基时，应该加入质量分数为1.5%～2%的琼脂 C. 培养皿采用的灭菌方法比培养基采用的灭菌方法温度低、时间短 D. 选育菌种时，培养基灭菌后应该调节pH至酸性后再培养 7.（2026·湖南怀化·一模）（多选）色氨酸是某种野生型细菌正常生长繁殖所必需的物质，在细菌内的部分合成途径如图1所示，已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。突变株B、C、E因仅缺乏酶1～酶3中的某一种酶而不能合成色氨酸。实验人员分别将三种突变株划线接种在图2培养基的Ⅰ～Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域两端和Ⅱ区域一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长（菌株并未死亡）。下列叙述正确的是（       ） A. 该培养基中含有琼脂和少量色氨酸，pH为中性或弱碱性 B. 突变株B最可能因缺乏酶2不能合成色氨酸 C. 突变株C能为突变株B提供邻氨基苯甲酸 D. Ⅱ区域接近Ⅰ区域一端的菌株能继续生长增殖 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题 13 发酵工程 考点1 微生物的培养与应用 1.【答案】AB 2.【答案】（1）① 酵母菌    ② 消毒     ③ 杀死黄酒中的大多数微生物，并延长其保存期     （2）① 酚红    ② 化学结合法、包埋法、物理吸附法     （3）① pH     ② 两图中脲酶活力随时间变化的曲线基本一致，而维持pH在6.5不变与pH从6.5降为4.5相比较而言，酶活力值始终要高     （4）方案一：配置一种选择培养基，筛选出产生EC降解酶的细菌，从细菌中分离得到EC降解酶，纯化的EC降解酶进行固定化操作后，加入该黄酒中。方案二：配置一种选择培养基，筛选出产生脲酶的细菌，从细菌中分离得到脲酶，纯化的脲酶进行固定化操作后，在黄酒工艺流程的发酵环节中加入。      3.【答案】① C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶    ② 纤维素    ③ 选择    ④ 高压蒸汽     ⑤ 为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子）    ⑥ 不接种培养（或空白培养 ）    ⑦ 将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测 大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数    ⑧ C    ⑨ 接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大 1.【答案】B 2.【答案】A 3.【答案】C 4.【答案】D 5.【答案】C 6.【答案】BCD 7.【答案】AC 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题 13 发酵工程 6年汇编1年模拟 考点分类 湖南考情 命题规律 考点1 微生物的培养与应用 2026湖南(1题)、2022湖南(1题)、2021湖南(1题) · 情境设置：多结合环境修复、传统发酵、动物保护等真实科研及生活情境，强应用性。 · 考查重点：核心考查微生物分离筛选、培养基配制、发酵原理及纤维素分解菌实验操作。 · 命题趋势：情境化加深，跨学科融合（环境、食品、生态），注重解决实际问题能力。 考点1 微生物的培养与应用 1.（2026·湖南·高考真题）（多选）科研人员拟筛选耐镉细菌用于生态修复。下列叙述正确的是（        ） A. 宜从镉污染的土壤或水体中分离耐镉细菌 B. 配制培养基时需添加碳源、氮源和无机盐等营养成分 C. 含氯化镉的培养基可选择耐镉细菌并鉴定其种属 D. 利用稀释涂布平板法计数时，统计的菌落数往往比活菌实际数目多 【答案】AB 【解析】 A、镉污染的土壤或水体中镉含量高，在长期自然选择下，该环境中耐镉细菌的比例远高于普通环境，因此宜从该类环境中分离目的菌，A正确； B、培养基的基本营养成分一般包含碳源、氮源、无机盐、水，因此配制时需添加碳源、氮源和无机盐等营养成分，B正确； C、含氯化镉的培养基属于选择培养基，仅能筛选出耐镉细菌，无法鉴定其种属，鉴定种属还需要结合形态观察、生理生化检测等其他实验，C错误； D、利用稀释涂布平板法计数时，若两个或多个活菌连在一起，平板上只能形成一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌实际数目少，D错误。 2.（2022·湖南·高考真题）黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。发酵酒的酿造过程中除了产生乙醇外，也产生不利于人体健康的氨基甲酸乙酯（EC）。EC主要由尿素与乙醇反应形成，各国对酒中的EC含量有严格的限量标准。回答下列问题: （1）某黄酒酿制工艺流程如图所示，图中加入的菌种a是　　　　　　　，工艺b是　　　　　　　（填“消毒”或“灭菌”），采用工艺b的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 （2）以尿素为唯一氮源的培养基中加入　　　　　　　　指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（答出两种即可）。 （3）研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测　　　　　　　　是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素，理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 （4）某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低该黄酒中EC含量的思路　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【答案】（1）① 酵母菌    ② 消毒     ③ 杀死黄酒中的大多数微生物，并延长其保存期     （2）① 酚红    ② 化学结合法、包埋法、物理吸附法     （3）① pH     ② 两图中脲酶活力随时间变化的曲线基本一致，而维持pH在6.5不变与pH从6.5降为4.5相比较而言，酶活力值始终要高     （4）方案一：配置一种选择培养基，筛选出产生EC降解酶的细菌，从细菌中分离得到EC降解酶，纯化的EC降解酶进行固定化操作后，加入该黄酒中。方案二：配置一种选择培养基，筛选出产生脲酶的细菌，从细菌中分离得到脲酶，纯化的脲酶进行固定化操作后，在黄酒工艺流程的发酵环节中加入。      【解析】 由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，指示剂变红。 (1) 制造黄酒利用的是酵母菌的无氧呼吸，加入的菌种a是酵母菌。过滤能除去发酵液中部分微生物，工艺b是消毒，目的是杀死黄酒中的大多数微生物，并延长其保存期。 (2) 由于细菌分解尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，故在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴别尿素分解菌。固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上，实现酶的反复利用，并提高酶稳定性，酶的各项特性（如高效性、专一性和作用条件的温和性）依然保持。固定化酶的方法包括化学结合法、包埋法、物理吸附法等。 (3) 对比两坐标曲线，两图中脲酶活力随时间变化的曲线基本一致，说明培养时间不是决定因素；而维持pH在6.5不变与pH从6.5降为4.5相比较而言，酶活力值始终要高，说明pH为6.5时，有利于酶结构的稳定，故pH是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素。 (4) 从坐标图形看，利用脲酶消除其前体物质尿素可降低该黄酒中EC含量。配置一种选择培养基，筛选出产生EC降解酶的细菌，从细菌中分离得到EC降解酶，纯化的EC降解酶进行固定化操作后，加入该黄酒中。或者配置一种选择培养基，筛选出产生脲酶的细菌，从细菌中分离得到脲酶，纯化的脲酶进行固定化操作后，在黄酒工艺流程的发酵环节中加入。 3.（2021·湖南·高考真题）大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12~38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题： （1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即　　　　　　　　　。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以　　　　　　　　　为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于　　　　　　　　　培养基。 （2）配制的培养基必须进行　　　　　　　　　　　　　　　灭菌处理，目的是　　　　　　　　　。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是　　　　　　　　　。 （3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路　　　　　　　　　。 （4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株　　　　　　　　　，理由是　　　　　　　　　。 菌株 秸秆总重(g) 秸秆残重(g) 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） A 2.00 1.51 24.50 16.14 B 2.00 1.53 23.50 14.92 C 2.00 1.42 29.00 23.32 【答案】① C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶    ② 纤维素    ③ 选择    ④ 高压蒸汽     ⑤ 为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子）    ⑥ 不接种培养（或空白培养 ）    ⑦ 将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测 大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数    ⑧ C    ⑨ 接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大 【解析】 1、分解纤维素的微生物分离的实验原理： （1）土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长； （2）在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。 2、消毒和灭菌： （1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。 （2）配制培养基的常用高压蒸汽灭菌，即将培养基置于压力100 kPa、温度121℃条件下维持15～30分钟，目的是为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子）。为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜条件下培养无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。 （3）为测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数，常采用稀释涂布平板法，在适宜的条件下对大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌进行纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水。将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数。 （4）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在适宜的条件下，C菌株在相同的温度和时间下，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。 【点睛】 本题考查微生物的实验室培养，要求考生识记计数微生物的方法；识记培养基的种类及功能；掌握纤维素分解分离和鉴别的原理，能结合所学的知识准确答题。 消毒 灭菌 概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子） 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 1.（2026·湖南岳阳·二模）尿素需要土壤中尿素分解菌将其分解后才能被农作物吸收，某科研小组欲对某地土壤中尿素分解菌进行培养和研究。下列叙述正确的是（　　） A. 若要分离培养尿素分解菌，需要以尿素为唯一氮源的培养基进行培养，且培养基在灭菌后需要先调整pH再倒平板 B. 若要获得能高效分解尿素的菌种，从富含哺乳动物尿液且植物生长茂盛的地方取样，获得目的菌种的概率更高 C. 土壤中尿素分解菌数量的统计可以通过稀释涂布平板法接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，其上长出的菌落均来源于一个尿素分解菌 D. 研究过程中所有用到的培养器具和使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理 【答案】B 【解析】 A、分离尿素分解菌需要用以尿素为唯一氮源的选择培养基，但培养基pH调整需在灭菌前完成，A错误； B、富含哺乳动物尿液的土壤中尿素含量高，尿素分解菌的种群密度更高，因此在此类区域取样获得目的菌种的概率更高，B正确； C、稀释涂布平板法统计菌落时，若两个或多个尿素分解菌粘连在一起，培养基上仅会长出一个菌落，因此长出的菌落不一定都来源于单个尿素分解菌，C错误； D、为防止有害微生物扩散污染环境，使用后的培养器具和培养基丢弃前必须进行灭菌处理，消毒无法杀灭芽孢和孢子，D错误。 2.（2026·湖南常德·二模）通过在平板的不同区域添加不同营养物质的结晶或粉末可以选择出某种营养缺陷型菌株。营养缺陷型菌株在基本培养基上不能正常生长，只能在完全培养基上正常生长。为分离诱变菌液中氨基酸缺陷型菌株，现将诱变处理后的菌液稀释后接种于某培养基上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A、B培养基上，前后位置及号码相对应，培养后菌落生长情况如下图，下列操作与判断正确的是（　　） A. 实验过程中需在培养皿的皿底划分区域并做好标记 B. 过程①的接种方法为平板划线法，接种环需灼烧灭菌 C. 确定氨基酸缺陷型时，应挑取A中的目标菌落进行后续实验 D. 后续实验中在不同区域添加氨基酸结晶或粉末的培养基为鉴别培养基 【答案】A 【解析】 A、本实验需要保证A、B培养基点接的位置、号码一一对应，才能对比生长情况，因此需要在培养皿皿底划分区域并标记（培养皿倒置培养，标记在皿底可避免混淆），A正确； B、据图可知，过程①是将稀释后的菌液接种获得单个均匀分布的待测菌落，该接种方法是稀释涂布平板法，B错误； C、氨基酸缺陷型不能在基本培养基A上生长，A中没有目标菌落，无法挑取，需要从B培养基对应位置挑取目标菌落，C错误； D、该培养基以基本培养基为基础，不同区域添加不同氨基酸，目的是筛选出特定的氨基酸缺陷型菌株（只有对应缺陷型能在对应氨基酸区域生长），属于选择培养基，D错误。 3.（2025·湖南益阳·一模）我国科学家通过基因工程改造产甲烷古菌，利用工业废气中的CO2和H2为原料合成生物可降解塑料PHA（PHA是微生物在体内合成的高分子物质，用作能量储备），其工艺流程如下图所示。相关叙述错误的是（　　） A. 改造后的产甲烷古菌的代谢类型是自养厌氧型 B. 改造后的产甲烷古菌在接种前需要利用液体培养基扩大培养 C. 发酵工程的中心环节是灭菌，尤其是发酵罐必须进行严格灭菌 D. 用稀释涂布平板法对产甲烷古菌进行计数，计数的结果往往比实际活菌数少 【答案】C 【解析】 A、改造后的产甲烷古菌可利用工业废气中的CO2和H2为原料合成生物可降解塑料PHA，PHA是微生物在体内合成的高分子物质，用作能量储备，再结合图可知，代谢类型是自养厌氧型，A正确； B、接种前需要扩大培养增加菌体的数量，扩大培养时使用液体培养基，有利于菌体增殖，B正确； C、发酵工程的中心环节是发酵罐中的发酵，C错误； D、用稀释涂布平板法对产甲烷古菌进行计数，当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，因此计数的结果往往比实际活菌数少，D正确。 故选C。 4.（2026·湖南永州·二模）某科研小组从土壤中分离出一种解脂菌，它能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，而脂肪不能。下列叙述正确的是（       ） A. 配制好固体培养基后依次进行灭菌、调节pH和倒平板等操作 B. 可采用平板划线法对土壤中的解脂菌进行分离与计数 C. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D. 醇溶青琼脂平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 【答案】D 【解析】 A、配制固体培养基时，需先调节pH再灭菌，避免灭菌后pH改变或污染，A错误； B、平板划线法用于菌种分离，但无法精确计数（需用稀释涂布平板法），B错误； C、纯培养物指仅含单一微生物的培养物，并非不含代谢废物（如脂肪酸等），C错误； D、由题干可知，脂肪酸使醇溶青琼脂变蓝，且脂肪酶分解脂肪产生脂肪酸。平板蓝色程度可反映脂肪酸量，进而比较不同解脂菌分泌脂肪酶的能力，D正确。 故选D。 5.（2026·湖南株洲·一模）细菌素是某些细菌产生的具有抑菌活性的多肽类物质，可代替食品防腐剂使用。研究人员将乳酸菌置于液体培养基中发酵，取发酵液上清液滴加到长有金黄色葡萄球菌的固体培养基的孔洞中，测定所形成的抑菌圈直径，结果如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 固体培养基孔洞中滴加的上清液体积需保持一致 B. 培养约8h收获细菌素相对节约成本 C. 整个培养过程中上清液的抑菌活性与乳酸菌密度呈正相关 D. 细菌素进入人体肠道可以被消化酶分解，相对来说，具有一定安全性 【答案】C 【解析】 A、为了遵循单一变量原则，固体培养基孔洞中滴加的上清液体积需保持一致，A正确； B、培养约8h抑菌圈直径相对较大并且对应的乳酸菌密度也较大，此时收获细菌素相对节约成本，B正确； C、结合图示可知，当液体培养基培养时间大于24h时，乳酸菌密度基本不变而抑菌活性会减少，C错误； D、细菌素是某些细菌产生的具有抑菌活性的多肽类物质，进入人体肠道可以被消化酶分解，安全性较高，D正确。 故选C。 6.（2026·湖南邵阳·二模）（多选）我国是世界上最大的柠檬酸生产国。下图是利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸的流程图，相关叙述错误的是（       ） A. 柠檬酸生产和果醋生产所选用的菌种呼吸类型相同 B. 配制扩大培养的培养基时，应该加入质量分数为1.5%～2%的琼脂 C. 培养皿采用的灭菌方法比培养基采用的灭菌方法温度低、时间短 D. 选育菌种时，培养基灭菌后应该调节pH至酸性后再培养 【答案】BCD 【解析】 A、黑曲霉发酵时需通入空气，为异养需氧型，果醋生产使用的菌种是醋酸菌，也为异养需氧型，A正确； B、扩大培养基为液体培养基，不加琼脂，B错误； C、培养皿常用干热灭菌，参数为170℃灭菌2h，培养基常用高压蒸汽灭菌，参数为121℃灭菌30min，因此培养皿灭菌法温度更高、时间更长，C错误； D、微生物培养基配制的操作流程为：计算→称量→溶解→调节pH→灭菌，若灭菌后再调节pH，会引入杂菌污染培养基，D错误。 7.（2026·湖南怀化·一模）（多选）色氨酸是某种野生型细菌正常生长繁殖所必需的物质，在细菌内的部分合成途径如图1所示，已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。突变株B、C、E因仅缺乏酶1～酶3中的某一种酶而不能合成色氨酸。实验人员分别将三种突变株划线接种在图2培养基的Ⅰ～Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域两端和Ⅱ区域一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长（菌株并未死亡）。下列叙述正确的是（       ） A. 该培养基中含有琼脂和少量色氨酸，pH为中性或弱碱性 B. 突变株B最可能因缺乏酶2不能合成色氨酸 C. 突变株C能为突变株B提供邻氨基苯甲酸 D. Ⅱ区域接近Ⅰ区域一端的菌株能继续生长增殖 【答案】AC 【解析】 A、“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，推断培养基中存在少量色氨酸，培养细菌一般将pH调至中性或弱碱性，A正确； BC、已知当图1所示物质在菌体内积累时，菌体会将部分积累的物质分泌到胞外，因此当菌体缺少某一种酶时，该酶催化的底物就会在细胞内积累，进而释放到细胞外，释放出来的物质可被相邻的菌体吸收利用，根据Ⅰ区域两端和Ⅱ区域一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长（菌株并未死亡），可知菌株C和菌株E释放到细胞外的物质可被菌株B吸收利用，因此可推测突变株B缺乏酶1不能合成色氨酸，而菌株C缺少酶2不能合成色氨酸，菌株E缺少酶3，不能合成色氨酸，因此不再生长。由于突变株C能为突变株B提供邻氨基苯甲酸，突变株E能为突变株B提供吲哚，突变株B能以这两种物质为底物最终合成色氨酸，因此Ⅰ区域两端的菌株能继续生长增殖，B错误，C正确； D、菌株C缺少酶2，不能转化形成吲哚，而菌株E缺少酶3，会使细胞内的吲哚积累后而释放，因此菌株C会利用菌株E释放的吲哚合成色氨酸而表现为生长，由于菌株B释放出的分支酸不能被菌株C利用合成色氨酸，因此Ⅱ区域接近Ⅲ区域一端的菌株能继续生长增殖，D错误。 故选AC。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $