内容正文:
专题精准强化22细胞工
1.湘九味指的是百合、玉竹、黄精、山银花、枳
壳、博落回、茯苓、杜仲和湘莲,是湖南地区
特有的九种中药材。这些药材各具特色,广
泛应用于中医临床,深受医学界和民众的认
可,可用植物组织培养技术实现脱毒和快速
繁殖。下列叙述错误的是
)
A.流水冲洗后的外植体可先用酒精消毒,
再用无菌水冲洗,再用次氯酸钠处理后
立即用无菌水冲洗
B.若利用茎尖组织培育技术对百合进行作
物脱毒,可获得抗病毒植株
C.可利用单倍体育种选育新品种
D.以上湘九味在快速繁殖过程中产生的体
细胞突变可通过无性生殖遗传
2.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后
胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗
HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下列
叙述正确的是
(
A.杂交瘤细胞分泌的抗HCG克隆抗体能
与HCG发生特异性结合
B.用特定选择培养基进行第一次筛选时,
融合细胞均能大量增殖
C.杂交瘤细胞体外培养出现接触抑制现象
时需先酶解再分瓶培养
D.灭活病毒诱导法是唯一可以诱导骨髓瘤
细胞与B淋巴细胞融合的方法
3.甲植物细胞的核基因具有耐盐碱效应,乙植
物细胞的质基因具有高产效应。某研究小
组用甲、乙两种植物(均为二倍体)进行体细
胞杂交相关研究,最终获得了高产、耐盐碱
的杂种植株丙,其基本操作流程如图。为获
得目的植株,下列相关操作正确的是(
)
R-6G处理
细胞质失去活性
甲植株A甲原
顶芽细胞生质体
鑫-P雪
种植株丙
细胞核失去活性
紫外线照射
21
⑧错题序号:
©错因分析:
A.对外植体消毒时,使用体积分数为95%
的酒精比70%的酒精消毒效果更好
B.过程A可用纤维素酶和果胶酶处理,且
在低渗溶液中进行以防止失水死亡
C.过程C中需用聚乙二醇(PEG)来诱导原
生质体再生出新的细胞壁
D.过程D通常不需光照,形成的杂种植株
还需做个体水平鉴定才能筛选出目的
植株
4.线粒体替代疗法(MRT)是一种细胞质替换
技术,将目标细胞核转移到健康去核细胞中
以预防细胞质基因遗传病,主要包括受精卵
细胞核移植(PNT)和卵母细胞纺锤体一染
色体复合物移植(ST)两种方法。已知在卵
母细胞中,纺锤体区域的线粒体数量较少,
而受精卵中线粒体均匀分布。下列说法正
确的是
A.与ST相比,PNT的操作时间较早,细胞
较为脆弱,因此成功率比ST低
B.与PNT相比,ST能够更好地避免线粒
体DNA的遗传
C.只有通过PNT获得的胚胎才可能拥有
三个个体的遗传物质
D.ST没有对胚胎进行操作,因此ST结束
后不需要对重构胚进行激活处理
5.MDCK细胞系是一种源自狗肾的细胞系,
具有癌细胞特点,对多种病毒具有较高的感
染效率。下列叙述错误的是
)
A.MDCK细胞系可用于某些病毒的扩增和
纯化,以用于生产疫苗
B.培养MDCK细胞时,会出现接触抑制和
贴壁生长等现象
C.培养MDCK细胞时,混合气体中的CO2
利于维持培养液pH的稳定
D.培养MDCK细胞需添加血清,提供MDCK
细胞所需营养物质
6.邳州是中国著名的“银杏之乡”。银杏的槲
皮素具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤能力。科研
人员制备单克隆抗体用于快速检测槲皮素,
其基本操作过程如图所示。相关叙述错误
的是
细胞甲
一]2⊙⊙⊙一大一图
⊙年乙年瑞两组面T
骨髓瘤细胞
5
A.槲皮素属于初生代谢物,对植物适应环
境具有重要作用
B.步骤①需要多次注射抗原以获得特定的
B细胞
C.步骤②可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导
D.步骤③筛选出杂交瘤细胞,步骤④是克
隆化培养和抗体检测
7.(不定项)如图为经过体外受精和胚胎分割
移植以培育优质奶牛的过程。下列叙述正
确的是
(
分割针
胚胎Q
移植6
→
囊胚
B
A.A为次级卵母细胞,必须在体外进行成
熟培养
B.B为内细胞团,将来可以发育为奶牛的各
种组织
C.进行胚胎分割时,应选择发育良好的囊
胚或原肠胚
D.移植的实质是早期胚胎在相同条件下空
间位置的转移
8.(不定项)山羊乳中3乳球蛋白(BLG)是引
起人体过敏反应的一种主要致敏原,为实现
羊乳“人源化”改造,研究人员利用
CRISPR/Cas9系统敲除了山羊乳腺细胞中
BLG基因,同时在相应位点导入人乳铁蛋
白(hLF)基因。如图为利用该技术获得转
基因山羊的操作过程。下列叙述错误的是
sgBLG/Cas9
sgBLG/Cas9
复合物1
2是台阅2
B队G基因
hLF基因
母羊甲的
某条DNA片段
hLF基因
转基因母羊乙成纤维细胞②
40
早期胚胎
③
⑤
母羊丁子官
母羊丙卵细胞
转基因山羊
A.Cas9与限制酶作用类似,可识别DNA
分子特定的核苷酸序列
B.过程①②运用到的技术有显微注射、
DNA重组技术,过程③④⑤中,运用到
的技术有细胞核移植、动物细胞培养、胚
胎移植等
216
C.去除细胞核的目的是确保重构胚的核遗
传物质来自母羊乙成纤维细胞
D.筛选后得到的早期胚胎细胞中没有检测
到该蛋白,说明目的基因没有成功导入
并表达
9.小鼠是科学研究中不可或缺的动物模型,具
有容易饲养、世代周期短、繁殖率高、组织器
官结构和细胞功能与人类接近等特点。下
面是关于小鼠的一系列科学研究工作,回答
问题:
(1)在器官再生方面,小鼠胚胎干细胞具有
显著的能力。体外培养胚胎干细胞一般需
要定期更换培养液,这样做的目的是
(2)为保留小鼠A的优良性状,可进行体细
胞核移植。以小鼠A的体细胞和小鼠B卵
母细胞为材料进行操作,以获得重构胚,主
要操作步骤是
进行小鼠胚胎工程操作时,要在光控周期下
饲养成年雌鼠,并注射
,促进排卵。
从雄鼠采集的精子需进行
处理。
体外受精后,在适宜条件下培养受精卵,用
于胚胎移植。进行胚胎移植的优势是
(3)若将外源基因导入小鼠受精卵,则外源
基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中,
这种受精卵有的可发育成转基因小鼠,有的
却死亡。请分析外源基因插入导致受精卵
死亡的最可能原因是
(4)在药物研究过程中,研究者发现因小鼠
与人类亲缘关系较远,很多在小鼠体内有效
的候选药物,用在人身上不一定有效,或有
很大副作用。通过以上分析,在药物研究的
实验动物方面研究的方向是专题精准强化21发酵工程
1.B[土壤样品加入含有PAHs的液体培养基,可以对
PAHs降解菌进行富集培养,A正确;多环芳烃(PAHs)
含有碳元素,PAHs降解菌能以培养基的PAHs作为碳
源,其他杂菌均不能以培养基的PAHs作为碳源,B错
误:培养细菌时,涂布有样品的培养皿放入恒温培养箱
中进行倒置培养,C正确:培养基上能生长良好的菌落对
PAHs的降解能力较强,挑取生长良好的菌落培养,检测
菌株的PAHs降解能力,D正确。]
2.D[煮沸可使酒花和桂花中的成分溶于醪液,同时去除
部分杂菌,A正确;酵母菌是真菌,在培养过程中加入抗
生素可抑制细菌的生长,起到防止杂菌污染的作用,B正
确;桂花中含有一定量的糖,可作为酵母菌发酵的底物,
因此可能影响到酒精的产量,C正确:酵母菌的繁殖需要
氧气和适宜的温度,而酒精发酵需要无氧条件,且由题
图可知,发酵后期需要降温至5℃,D错误。]
3.C「传统红酸汤发酵主要是乳酸菌厌氧发酵,装坛不装
满是为了防止溢出,A错误:传统发酵技术不需要严格
的灭菌,B错误;传统发酵技术和发酵工程的菌种都可以
来自天然存在的菌种,除此之外发酵工程的菌种来源还
可以是诱变育种或基因工程育种获得,C正确:发酵工程
生产时排出的废弃物对环境污染小,D错误。]
4.C[细菌培养通常需要中性或弱碱性的环境,因此培养
基的DH一般调至中性或弱碱性,A正确;筛选培养基需
以DEHP为唯一碳源,仅允许能分解DEHP的细菌生
长,从而实现选择培养,B正确:接种环可通过灼烧灭菌
法灭菌,但培养皿需用干热灭菌法灭菌,灼烧会损坏培
养皿,C错误:液体培养基能扩大菌种数量,便于后续实
验或保存,因此可用液体培养基扩大培养降解菌,
D正确。」
5.B[分解尿素的细菌能合成脲酶,在脲酶的催化下能将
尿素分解成NH,和二氧化碳,A错误;振荡可使土样中
的微生物均匀分布在无菌水中,有利于后续的梯度稀
释,B正确;稀释涂布平板法既能分离微生物,也能统计
样品中活菌的数目,但不能统计所有菌的数目,只能统
计特定菌的数目,C错误;图中纯化培养得到的微生物未
必都具有分解尿素的能力,如固氨菌也能在此培养基
(以尿素为唯一氯源)中生长,因此还需要对得到的微生
物进行鉴定,D错误。]
6.D「分析题图可知,以纤维素为碳源的培养基中拟杆菌
X数量最多,故若要尽快扩大培养拟杆菌X,选择以纤维
素为碳源的培养基,A正确:研究人员扩大培养拟杆菌X
前,需对培养基进行灭菌,对培养基的灭菌一般采用湿
热灭菌法,B正确;拟杆菌X为深海微生物,通常需要在
无氧条件下进行培养,C正确;实验结束后,使用过的培
养基不能直接丢弃,应经灭菌处理后再丢弃,以免污染
环境,D错误。]
7.BC[微生物生长需要碳源、氨源、水、无机盐等营养物
质,所以培养基中应含有微生物生长所需的碳源、水等
营养物质,A正确;一般情况下,抑菌圈越大,说明滤纸
片上物质M的浓度越高,对微生物的抑制作用越强。含
大肠杆菌的培养基中,滤纸片的抑菌圈面积关系是A>
C>B,所以滤纸片上物质M的浓度关系应该是A>C>
B,B错误;不同微生物对物质M的敏感程度可能不同,
滤纸片C和D的抑菌圈大小相同,但由于大肠杆菌和金
黄色葡萄球菌对物质M的敏感性不一定一样,所以C和
D中物质M的浓度不一定相等,C错误;滤纸片F的周
围未出现抑菌圈,有可能是该浓度下的物质M对金黄色
葡萄球菌无抑菌效果,D正确。]
31
练习册参考答案
8.ACD[工业化生产是为获得专一的产物,同时为了获
得更高的经济效益,在工业化生产之前需要进行青霉菌
纯培养,筛选青霉素分泌量高的优良菌种,A正确;青霉
素本身具有杀菌作用,但不能杀灭所有的微生物,在青
霉素生产过程中也会发生杂菌污染,因此,发酵罐需要
严格灭菌,B错误:由题干信息“在青霉素与头孢霉素的
合成过程中、它们有一个共同的前体,这个前体经过两
种不同酶的作用分别合成两种产物”可知,对青霉菌株
中控制其中一种酶的合成基因进行敲除,则青霉菌只能
产生另一种酶,故青露菌只产生一种产物,C正确;青霉
菌是需氧型微生物,血红蛋白能运输氧气,将血红蛋白
基因转入青霉菌中是一种保证发酵过程中高效供氧的
思路,D正确。」
9.(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同
(2)稀释涂布平板检查培养基平板灭菌是否合格
(3)90mL无菌水1mL注入9mL无菌水中1.75×10
(4)振荡培养能提高培养液的溶解氧含量:振荡培养可
使菌体与培养液充分接触,提高培养液中营养成分的利
用率
专题精准强化22细胞工程
1.B[在植物组织培养中,流水冲洗后的外植体通常先用
酒精消毒,用无菌水冲洗,再用次氯酸钠处理后立即用
无菌水冲洗,以减少杂菌污染,A正确;植物的茎尖无毒
或病毒极少,可以组织培养获得无病毒植株,即脱毒苗,
但抗病毒植株是通过基因工程获得的,B错误;单倍体育
种可以缩短育种年限,提高育种效率,可利用单倍体育
种选育湘九味的新品种,C正确;植物组织培养属于无性
生殖,湘九味在快速繁殖(植物组织培养)过程中产生的
体细胞突变可通过无性生殖遗传,D正确。]
2.A[杂交瘤细胞分泌的抗HCG单克隆抗体能与HCG
发生特异性结合,即抗原与抗体发生特异性结合,进而
可对早孕做出诊断,A正确;用特定选择培养基进行第
一次筛选时,只有杂交瘤细胞才能大量增殖,B错误;杂
交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的无限增殖特性,无接触抑制
现象,无需酶解处理,C错误;除灭活病毒法外,聚乙二醇
(PEG)也可诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,
D错误。]
3.D[不同的酒精浓度有不同的用途,对外植体消毒,使
用70%的酒精效果更好,A错误;植物细胞壁的主要成
分是纤维素和果胶,用纤维素酶和果胶酶处理可去除细
胞壁,获得原生质体,但不能在低渗溶液中进行,否则原
生质体会吸水涨破,B错误:PEG诱导原生质体融合,而
不是诱导原生质体再生出细胞壁,C错误;过程D是脱
分化过程,该过程通常不需要光照,但还需在个体水平
做鉴定才能筛选出高产、耐盐碱的杂种植株丙,D正确。]
4.B「PNT是受精卵细胞核移植,受精卵比卵母细胞发育
程度高,操作时间较晚,A错误:因为卵母细胞中纺锤体
区域线粒体数量较少,ST将卵母细胞纺锤体一染色体
复合物移植到去核卵母细胞中,能更好地避免线粒体
DNA的遗传,B正确;PNT是将受精卵的细胞核移植到
去核的健康细胞中,ST是将卵母细胞的纺锤体一染色
体复合物移植到去核卵母细胞中,这两种方法获得的胚
胎都拥有供核方、供质方以及精子来源方三个个体的遗
传物质,C错误:不管是PNT还是ST,重构胚都需要进
行激活处理才能正常发育,D错误。」
5.B「由于MDCK细胞系对多种病毒具有较高的感染效
率,所以MDCK细胞系可用于某些病毒的扩增和纯化,
进而利用这些病毒生产疫苗,A正确;MDCK细胞具有
癌细胞特点,细胞表面的糖蛋白减少,细胞的黏着性降
1生物学
低,对MDCK细胞悬浮培养时,不会出现接触抑制和贴
壁生长现象,B错误;培养MDCK细胞时,用到的混合气
体是95%的空气和5%的CO2,其中CO2利于维持培养
液pH的稳定,C正确;血清中营养物质比较齐全,有
MDCK细胞所需的营养物质,D正确。]
6.A[槲皮素属于次生代谢产物,A错误:步骤①需要多
次注射抗原以获得特定的B细胞(产生抗槲皮素抗体的
B细胞),B正确;步骤②诱导动物细胞融合可用聚乙二
醇或灭活的病毒诱导,C正确;步骤③筛选出杂交瘤细
胞,步骤④是克隆化培养和抗体检测,D正确。]
7.AD[A为次级卵母细胞,必须在体外进行成熟培养,
A正确:B为囊胚腔,B错误:进行胚胎分割时,应选择发
育良好的桑葚胚或囊胚,C错误:胚胎移植的实质是早期
胚胎在相同条件下空间位置的转移,D正确。]
8.ACD[Cas9蛋白可切割DNA,类似于基因工程中常用
到的限制酶,但Cs9蛋白没有限制性核酸内切酶所具有
的专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性,A错误;
上图过程①是基因重组,②是将目的基因导入受体细
胞,用到DNA重组技术和显微注射技术:过程③是核移
植,④是早期胚胎培养,⑤为胚胎移植,用到的技术有细
胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等,B正确;去除细胞
核的目的是确保重构胚的核遗传物质全部来自转基因
母羊乙的成纤维细胞,C错误;筛选后得到的早期胚胎细
胞中没有检测到该蛋白,可能是目的基因成功导入但没
有表达,D错误。]
9.(1)清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身
造成危害
(2)将小鼠B卵母细胞培育到MⅡ期,通过显微操作去
核,将小鼠A体细胞注入去核的小鼠B卵母细胞,通过
电刺激方法使两细胞融合,小鼠A体细胞核进入小鼠B
卵母细胞,形成重构胚促性腺激素获能充分发挥
雌性优良个体的繁殖潜力
(3)外源基因的插人使受精卵内生命活动必需的某些基
因不能正常表达
(4)培育大批具有相同遗传背景的与人类亲缘关系较近
动物(如克隆猴)
专题精准强化23基因工程
1.B[引物长度影响与模板结合的特异性,GC含量高则
退火温度高,两者均影响PCR效率,A正确;PCR组分
添加后需充分混匀并短暂离心,确保反应液集中管底。
仅轻吸混匀可能混合不均,且未离心直接运行易导致反
应不充分,B错误;Tag DNA聚合酶需分装低温保存以
避免反复冻融失活,符合保存要求,C正确;电泳缓冲液
维持pH稳定并提供离子导电性,确保DNA迁移,
D正确。]
2.D[图中形成的是黏性末端,而E,coli DNA连接酶连
接黏性末端效率高:T4DNA连接酶既可连接平末端,又
可连接黏性末端,A正确;由于引物只能引导子链从5′到3′,
且引物与模板链的3'端互补,根据碱基互补配对原则,
其中一个引物序列为5一TGCGCAGT一3,B正确;用
步骤①的酶对载体进行酶切,使用了NheI和CfoI进
行切割,根据他们的识别位点以及原本DNA的序列,切
割之后至少获得了2个片段,C正确;根据三种酶的酶切
位,点,左侧的黏性末端是使用NheI切割形成的,右边
的黏性末端是用CfoI切割形成的,D错误。]
3.C「Cs9蛋白相当于限制酶,能作用于脱氧核糖和磷酸
之间的磷酸二酯键,A错误;若要将目的基因从目标
DNA上切除,一般需要设计2种不同的sgRNA,分别结
合在目标基因两侧,进而将目标基因切割下来,B错误:
31
为了降低免疫排斥反应,研究者借助CRISPR/Cas9技术
对移植的猪肾脏敲除了a一Gal基因,a一Gal基因控制
的蛋白质可能是猪的主要组织相容性抗原,C正确;由于
《链与识别序列的互补序列互补,故相应的识别序列为
…AGGTGTTAG…,D错误。]
4.D「绿色荧光蛋白是由绿色荧光蛋白基因控制合成的,
A正确:蛋白质工程需要根据预期功能设计蛋白质三维
结构,推导出多肽链,进而推出mRNA序列和DNA序
列,所以图中的a和b分别指多肽链和mRNA,B正确;
蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能
的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋
白质进行基因改造,或制造一种新的蛋白质,故蛋白质
工程可合成天然不存在的蛋白质,C正确:蛋白质工程是
通过改造或修饰基因来实现的,可见蛋白质工程是通过
对基因操作实现的,D错误。]
5.B[根据图示可知,甲是只有双雌来源(两个卵细胞结
合)的孤雌小鼠,乙是只有双雄来源(两个精子结合)的
孤雄小鼠,因此甲和乙中均含有两个染色体组,均为二
倍体,A正确;卵细胞内的性染色体只有X,而精子中的
性染色体为X或Y,故孤雌小鼠的性染色体组成为XX,
与XY杂交的后代有XX、XY,因此孤雌小鼠的后代既有
雌性又有雄性,同理孤雄小鼠的性染色体组成为XX或
XY或YY,与XX杂交的后代有XX、XY,即孤雄小鼠的
后代有雄性,也有雌性,B错误;孤雄小鼠的获得利用了
动物细胞培养、基因编辑、早期胚胎培养、胚胎移植等技
术,即利用了动物细胞工程、基因工程、胚胎工程相关技
术,C正确:结合题干该技术可成功培育出世界上首例只
有双雌来源的孤雌小鼠和双雄来源的孤雄小鼠,实现了
哺乳动物的同性繁殖,未来为拯救仅存单一性别的濒危
哺乳动物提供了可能性,有利于相关科学研究发展,
D正确。]
6.D[乳腺生物反应器是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基
因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方
法导入哺乳动物的受精卵中,A错误:生长素是植物激
素,对动物不起作用。将外源生长激素基因导入鲤鱼
中,可提高鲤鱼的生长速度,B错误;目前的技术水平还
无法通过基因组编辑技术设计出完美的试管婴儿,且
“设计试管婴儿”存在伦理争议等诸多问题,C错误;子代
受精卵中的细胞质几乎全部来自母方,转入叶绿体中的
基因不会随花粉传递给子代,研究转基因农作物时应采
取多种方法防止转基因花粉的传播,避免基因污染,符
合生物技术的安全与伦理规范,D正确。]
7,BD[癌症产生的原因是原癌基因和抑癌基因发生突
变,故可以通过检测cDNA中相关基因来进行癌症的筛
查,A正确:提取cfDNA进行基因修改后直接输回血液,
该基因并不能正常表达,不可用于治疗遗传病,B错误;
胚胎在发育过程中细胞脱落破碎,这是由基因控制的细
胞程序性死亡,属于细胞调亡,C正确:提取孕妇血液中
的cffDNA,因其含有胎儿的遗传物质,故可通过DNA
测序技术检测其是否含有某种致病基因,用于某些遗传
病的产前诊断,D错误。]
8.ABD[目的基因两侧含有限制酶XhoI、NheI的识别
序列,将目的基因插入质粒中时,需要用到的限制酶
XhoI、NheI切割目的基因和质粒,再用DNA连接酶
将目的基因和质粒连接在一起,A正确;将目的基因导
入受体细胞时,需要用Ca+处理大肠杆菌,使其处于易
于吸收周围环境中DNA分子的状态,B正确;按图示构
建的重组质粒导入大肠杆菌后,由于目的基因的转录方
向和启动子的方向相反,大肠杆菌不能正常表达该目的基