2027届高三生物人教版一轮复习选择性必修3《生物技术与工程》综合自测模拟卷

**基本信息** 选择性必修3《生物技术与工程》综合自测模拟卷，适用于一轮复习，以微生物工程、细胞工程、基因工程为核心，整合“三亲试管婴儿”“体细胞克隆藏羊”等科技前沿情境，全面考查生命观念、科学思维与探究实践。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|16题/48分|微生物培养、发酵工程、细胞融合、基因工程等|结合“深海拟杆菌多糖利用”“PVA分解菌筛选”等真实科研情境，考查结构与功能观、进化与适应观| |非选择题|5题/52分|酵母培养（微生物工程）、植物体细胞杂交（细胞工程）、胚胎工程、基因表达载体构建（基因工程）等|以“鹤甫碱茅与水稻体细胞融合”“RhRCA1基因启动子研究”等实验为载体，设计分层问题，强化科学思维与探究实践能力|

选择性必修3《生物技术与工程》综合自测模拟卷 学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________ 一、单选题（每小题3分，共48分） 1．微生物与人们的日常生活密切相关。下列说法正确的是（     ） A．培养真菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性 B．利用T2噬菌体使大肠杆菌裂解来净化水源，不属于生物消毒法 C．以纤维素为唯一碳源的刚果红培养基可用来选择和鉴别纤维素分解菌 D．在刚果红培养基上面产生透明圈直径最大的菌落，分解纤维素的能力最强 2．豆瓣酱是我国传统发酵美食，制作流程如下图所示，下列叙述错误的是（     ） A．大豆蒸熟的过程既能消灭大豆上的杂菌，还能破坏蛋白质中的氢键 B．米曲霉分泌的蛋白酶能将大豆中的蛋白质水解为小分子肽和氨基酸 C．前期发酵和后期发酵中的微生物均进行无氧呼吸 D．微生物的某些代谢物可使豆瓣酱具有特殊的风味 3．“科学号”科考船在中国南海1146米深海冷泉沉积物（有大量藻类解体后形成的难降解多糖碎屑）采样并分离得到一株新型拟杆菌，科研人员探究该菌株利用5种不同多糖碳源的生长情况如下图。下列叙述错误的是（     ） A．可采用平板划线法和稀释涂布平板法获得该拟杆菌纯种 B．该拟杆菌在以纤维素为碳源时增殖速率最快、菌体密度最高 C．深海样品中微生物难以用培养基分离主要因为添加碳源种类少 D．推测该拟杆菌属于分解者，能推动深海生态系统的碳循环进程 4．聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA。PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈。下图为PVA分解菌的筛选过程，其中SG培养基为一种分离培养基，①~⑤表示过程，I-III表示菌落。下列叙述正确的是（     ） A．过程①接种时，用灭菌后的涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基表面 B．过程③应选菌落II中的菌种进行接种，该菌种分解PVA的能力最强 C．过程①和③所用接种方法可用于菌液中的PVA分解菌的计数 D．丙培养基以PVA作为唯一碳源，对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养 5．如图是在氧气充足的条件下筛选某种营养缺陷型但高产酒精的酿酒酵母的示意图，已知营养缺陷型酵母只能在完全培养基上生长而不能在基本培养基上生长。原位影印是通过无菌绒布将原培养基上菌落保持位置不变接种到新培养基的过程。下列相关描述正确的是（     ） A．进行紫外线处理的目的是对菌液进行消毒 B．①②④均为完全培养基，可采用干热灭菌的方法 C．C过程应将菌株分别转印至培养基③④，然后用涂布器涂布均匀 D．要获得高产酒精的酿酒酵母，应该从④中挑取D菌落进行纯化培养 6．某一生物工程技术操作过程中进行了细胞融合，下列叙述正确的是（     ） A．若为植物体细胞杂交技术，可用PEG诱导两种植物细胞的原生质体融合 B．若为单克隆抗体的制备技术，融合后的细胞经筛选后就可产生单克隆抗体 C．若为动物体细胞核移植技术，融合得到的重构胚可利用电融合法激活 D．若为体外受精技术，以在显微镜下观察到雌、雄原核或两个极体作为受精完成的标志 7．胡萝卜（2n=18）具有健脾和中，滋肝明目，化痰止咳，清热解毒的功效。羊角芹（2n=12）可入药，味苦、辛、性平，有祛风止痛的功效。科研人员利用胡萝卜、羊角芹进行育种，如图为部分育种流程。下列分析正确的是（     ） A．用秋水仙素处理植株①的种子或幼苗可使其染色体数目加倍 B．通过获得植株③④的过程可收获能抗病毒的脱毒苗 C．获得植株④，需用不同比例的生长素和细胞分裂素依次诱导生根和发芽 D．植株⑤不分裂的体细胞中含有4个染色体组，培育过程中可用PEG融合法诱导原生质体融合 8．下图为“三亲试管婴儿”培育路线。相关说法正确的是（     ） A．维生素D佝偻病患者不适合充当卵母细胞捐献者 B．受精完成的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到2个极体 C．胚胎移植前，可取滋养层细胞进行基因检测筛查唐氏综合征 D．三亲婴儿体细胞中来自母亲卵母细胞的DNA所占比例低于1/2 9．模型是人们为了某种特定的目的而对认识对象所作的一种简化的概括性的描述。图模型中①表示处理方法，②表示处理对象，③表示处理结果，下列叙述错误的是（    ） A．①提取、分离和纯化，②酵母菌裂解液，③单细胞蛋白 B．①高Ca2+-高pH，②两种植物的原生质体，③融合细胞 C．①导入特定小分子化合物，②成纤维细胞，③iPS细胞 D．①蛋白酶合成抑制剂，②重构胚，③激活重构胚 10．现有研究表明，向分化的体细胞中导入4个特定转录因子（OCT4、SOX2、c-MYC、KLF4）进行重编程可获得多能干细胞（iPS细胞），这些iPS细胞可被诱导分化为能够分泌胰岛素的胰岛B细胞，用于糖尿病治疗。下列相关叙述错误的是（     ） A．在体外培养iPS细胞时，需定期更换培养液 B．胰岛B细胞与iPS细胞相比，基因组成与基因表达产物均不相同 C．iPS细胞用病人自身体细胞制备，规避了伦理问题和免疫排斥反应 D．重编程过程中导入外源转录因子可能会引起突变，存在导致肿瘤发生的风险 11．下列关于基因工程基本操作程序的叙述，正确的是（     ） A．基因工程的核心步骤是获取目的基因 B．DNA连接酶可将两个DNA片段的黏性末端通过磷酸二酯键连接起来 C．质粒是唯一可用作基因工程载体的DNA分子 D．目的基因导入受体细胞后即可成功表达出所需蛋白质 12．人工合成DNA常用的原料是dNTP（d表示脱氧），包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP，结构与ATP相似。科学研究常用32P标记DNA分子，现用α、β、γ表示ATP或dATP上三个磷酸基团所处的位置，即A—Pα～Pβ～Pγ或dA—Pα～Pβ～Pγ。下列叙述正确的是（     ） A．可用β位磷酸基团为32P的dATP制备32P标记的DNA片段 B．PCR过程中以dNTP作为原料，不需要额外添加ATP供能 C．人体剧烈运动时，细胞内ATP的合成速率远大于其分解速率，ATP水解掉“γ”位磷酸基团时可释放出大量的能量 D．人体内成熟的红细胞中没有线粒体，不能产生ATP 13．下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（     ） A．②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D．④→⑤利用了植物组织培养技术 14．除草剂有效成分草甘膦的作用机理是和PEP竞争性结合EPSP合酶，从而扰乱生物体的正常氮代谢。但作为一种非选择性除草剂，草甘膦对农作物同样具有杀伤作用，这大大限制了其在农业生产中的应用，培育抗草甘膦作物将会解决这一难题。下列说法正确的是（    ） A．长期使用草甘膦除草剂，会导致杂草产生抗除草剂突变，降低除草剂的效果 B．根据草甘膦的作用机理，可通过导入强启动子使EPSP合酶过量表达获得抗草甘膦作物 C．可通过蛋白质工程直接替换EPSP合酶个别氨基酸，使草甘膦无法与EPSP合酶结合 D．在培育抗草甘膦作物时，为避免外源基因流入杂草，最好将外源基因插入细胞核基因组 15．如图列举了几项技术成果。下列叙述正确的是（     ） A．经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B．①用梯度离心法去除卵母细胞的细胞核 C．②能大幅改良动物性状 D．③可通过②技术实现扩大化生产 16．下列关于生物技术的安全性和伦理问题的论述，不符合我国相关法律法规和伦理准则的是（     ） A．我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散 B．我国禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆的相关研究 C．转基因农作物的培育和种植应考虑可能造成的生态风险 D．若基因工程的目的基因来源于自然界，则不存在安全问题 二、非选择题（共52分） 17．（除标注外，每空1分，共8分）酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题： (1)这样通过发酵获得的可作为饲料蛋白来源的菌体称为__________。 (2)实验室中配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，放入__________（填仪器）中进行灭菌。 (3)步骤③中，培养基冷凝后要将培养皿倒置，原因是______________________。 (4)步骤⑤中，应保证__________（填“充足的氧气供应”或“无氧环境”）。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色。用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的______色细胞总数，理论上应不少于________个才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。 (5)可以怎样逐步筛选出甲醇高耐受菌株？_______________________。（2分） 18．（目录1分，共8分）鹤甫碱茅（2n=28）是禾本科的一种植物，能在低湿盐碱地中生长。科研工作者尝试将其体细胞和水稻（2n=24）体细胞进行融合，用于制备耐盐、高产的杂种植株，实验流程如下图所示。请回答下列相关问题： (1)①处理过程用到的酶主要是________________，该过程中发现水稻的原生质体大量破裂，推测原生质体破裂的可能原因有_______________________（至少写出一种）。 (2)融合过程中所依据的原理是_________________。如果只考虑细胞两两融合，则理论上融合细胞在不分裂的情况下，染色体数目为_____________。植物体细胞融合成功的标志是____________________。 (3)诱导原生质体融合的化学法除图示方法外还有_____________。 (4)②过程表示_________。③过程一般要使用高钠的固体培养基，获得的植株最终还要检测其_____________相关性状，才能判断所得植株是否符合预设要求。 19．（每空2分，共14分）欧拉羊获国家地理标志和有机认证，肉质被列为绿色保健食品。青海省河南蒙古族自治县的顶级欧拉藏公羊因数量稀缺，难以快速推广其优质基因，为此西北农林科技大学团队自2018年起开展藏羊胚胎工程应用技术研究，该技术同时利用了湖羊的高繁殖力，于2024年成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生。具体流程如下，①～⑦代表操作过程，请回答下列问题。 (1)受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有______________，受精的标志是_________________。 (2)胚胎移植的实质是早期胚胎在___________条件下空间位置的转移。为提高胚胎利用效率，可进行胚胎分割，在分割胚胎时，要注意将___________均等分割且分割次数不宜过多。 (3)移入的胚胎能在代孕雌羊子宫中存活的生理基础是___________________________。 (4)与F相比，E更具有多样性，其原因是E是_______生殖后代，其培育过程可发生的可遗传变异包括_______________________________。 20．（每空1分，共10分）杜鹃花园艺品种在炎热夏季常出现高温热害症状，RhRCA1基因编码的蛋白质能恢复光合酶部分活性。科研人员从耐热性好的海南杜鹃中获取了RhRCA1基因启动子（prRCA1）并构建了基因表达载体prRCA1-LUS（荧光素酶基因），为研究其调控机制提供了依据，请回答： (1)可用______试剂对从海南杜鹃中提取的DNA进行初步鉴定。prRCA1的作用是______________。 (2)prRCA1内部有限制酶SpeI的识别序列，所用载体示意图如图，图中载体还缺少的组成元件是______，构建prRCA1-LUS表达载体过程中需用到限制酶和______酶，应选择限制酶______对质粒进行切割。已知转录时非模板链的碱基序列为5′-CTACTACCAAGCACCTCCGC……（多个碱基）……AACAGACCCTTGATTTCT-3′，若引物a与prRCA1转录时的模板链互补，请写出引物a的前10个碱基的序列5′-_______________________________-3′。 (3)据图可知，将prRCA1基因转入拟南芥（一种植物）叶片中所用方法为______法。2d后分别进行25℃和37℃处理3h。在叶片反面涂抹萤火虫荧光素后发现，高温37℃热胁迫处理后的拟南芥叶片荧光强度显著高于对照25℃，说明__________________（答出一点）。 (4)将转化后收获的拟南芥种子消毒后播种在含有物质________的培养基中，以筛选抗性苗。后发现第二代植株中抗性分离比为3：1，说明目的基因最可能插入了______（填“一对同源染色体中的1条”或“两对同源染色体中的1条”）上。 21．（除标注外，每空1分，共12分）近年来，北美郊狼濒临灭绝，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较困难。科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。具体流程如下图： (1)获取郊狼的耳廓组织进行培养，剪碎后用______漂洗。在细胞培养过程中，为了防止杂菌污染，通常需在培养液中添加一定量的______。 (2)为了获得遗传物质稳定的卵母细胞，需在家犬卵母细胞的______期进行去核操作。将体细胞注入去核卵母细胞并融合后，重构胚需被激活，使其完成______和发育进程。 (3)与胚胎细胞核移植相比，iSCNT技术难度更______，原因是______（2分）。 (4)郊狼数量增多后，还可通过胚胎工程技术进一步恢复郊狼种群。下列叙述正确的有______。 A．体外受精前需要对郊狼的精子进行获能处理 B．体外受精前常需要对雌性郊狼进行超数排卵处理 C．胚胎早期发育时，桑葚胚内部开始出现含液体的腔 D．胚胎移植时，受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应 (5)为了提高克隆胚胎移植成功率，需对代孕母体进行______处理，使其处于适合胚胎着床的生理状态。若要对胚胎进行性别鉴定，常取______细胞进行DNA分析。 (6)研究发现，异种动物的细胞质环境会影响供体细胞核的基因表达，导致胚胎发育受阻。在利用iSCNT保护濒危动物时，要充分关注______对克隆动物品质的影响。在推广和应用该技术时，必须严格评估和监控其______风险，以确保生态系统的稳定。 试卷第1页（共3页） 试卷第1页（共3页） 学科网（北京）股份有限公司 《选择性必修3《生物技术与工程》综合自测模拟卷》参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C C C B D A D D A B 题号 11 12 13 14 15 16 答案 B B D B D D 1．C 【详解】A、培养霉菌、酵母菌等真菌时，一般需要将培养基pH调至酸性，A错误； B、生物消毒法是指利用生物或其代谢产物除去环境中的部分微生物的方法，利用T2噬菌体使大肠杆菌裂解来净化水源，属于生物消毒法，B错误； C、以纤维素为唯一碳源的刚果红培养基，既是选择培养基，又是鉴别培养基，可选择和鉴别纤维素分解菌，C正确； D、在刚果红培养基上面，透明圈直径/菌落直径最大的，分解纤维素的能力最强，D错误。 2．C 【详解】A、蒸熟大豆的高温可以杀灭大豆表面的杂菌，同时高温会使蛋白质变性，破坏蛋白质空间结构中的氢键，A正确； B、蛋白酶可催化蛋白质水解，将大豆中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，B正确； C、前期发酵过程需要多次翻酱，目的是提高发酵环境的氧气含量，米曲霉是需氧型微生物，该阶段进行有氧呼吸，并非所有阶段微生物都进行无氧呼吸，C错误； D、微生物发酵产生的氨基酸、酯类等代谢产物，可使豆瓣酱具有特殊的风味，D正确。 3．C 【详解】A、平板划线法和稀释涂布平板法是分离纯化微生物、获得纯种菌株的常用方法，A正确； B、由曲线可知，以纤维素为碳源时，细胞数增长曲线的斜率最大，说明增殖速率最快，且曲线的峰值最高，说明菌体密度最高，B正确； C、深海样品中的微生物长期适应高压、低温、低氧等特殊的深海环境，普通培养基的培养条件（压强、温度、氧气含量等）无法满足其生长需求，因此难以分离，并非是添加碳源种类少导致的，C错误； D、该拟杆菌可分解藻类解体产生的多糖碎屑获取能量，属于生态系统中的分解者，可将有机物中的碳转化为无机物返回无机环境，推动深海生态系统的碳循环进程，D正确。 4．B 【详解】A、稀释涂布平板法的正确操作是先将少量菌液滴加在培养基表面，再用灭菌冷却后的涂布器将菌液涂布均匀，并非用涂布器蘸取菌液，A错误； B、透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明菌种分解PVA的能力越强，菌落Ⅱ的该比值大于Ⅰ，菌落Ⅲ无透明圈无分解能力，因此应选菌落Ⅱ的菌种接种，B正确； C、过程①为稀释涂布平板法，可用于微生物计数；过程③为挑取单菌落进行纯化接种，用的是平板划线法，该方法无法用于计数，C错误； D、丙培养基是对筛选得到的PVA分解菌进行扩大培养的液体培养基，此时已经获得目的菌，扩大培养需要提供充足的营养，不需要以PVA为唯一碳源，D错误。 5．D 【详解】A、紫外线处理的目的是诱导酵母菌发生基因突变，筛选出营养缺陷型的突变菌株，消毒是杀灭微生物的操作，和该步骤目的不符，A错误； B、结合题干“营养缺陷型只能在完全培养基生长，不能在基本培养基生长”，图中③是基本培养基（营养缺陷型在③上无法生长，出现无菌落的位置），①②④为完全培养基；但培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，干热灭菌适用于玻璃器皿、金属用具等，不能用于培养基灭菌，B错误； C、C过程是原位影印，要求通过无菌绒布保持菌落位置不变转印，不需要用涂布器涂布，涂布器会打乱菌落位置，不符合原位影印的要求，C错误； D、③是基本培养基，在③上无法生长的营养缺陷型菌株，对应④上的D菌落，因此从④中挑取D菌落进行纯化培养，即可得到目标的营养缺陷型且高产酒精的酿酒酵母，D正确。 6．A 【详解】A、植物体细胞杂交技术中，去除细胞壁获得原生质体后，PEG（聚乙二醇）是常用的化学诱导剂，可诱导两种植物的原生质体融合，A正确； B、单克隆抗体制备过程中，融合后的细胞首先经选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞后，才能生产单克隆抗体，仅初步筛选无法得到符合要求的细胞，B错误； C、动物体细胞核移植技术中，电融合法的作用是诱导供体细胞和去核卵母细胞融合，形成重构胚；重构胚的激活需用电脉冲、钙离子载体等方法，不能用电融合法完成激活，C错误； D、体外受精技术中，观察到卵细胞膜和透明带间隙的两个极体或雌、雄原核是卵子发生受精的标志，受精完成的标志是雌、雄原核融合形成合子，D错误。 7．D 【详解】A、植株①是由胡萝卜花粉发育而来的单倍体，高度不育，无法产生种子，只能用秋水仙素处理幼苗使其染色体加倍，A错误； B、植株③是γ射线诱变处理愈伤组织得到的，属于诱变育种，变异不定向，不一定能获得抗病毒个体；脱毒苗是利用植物分生区（如茎尖）组织培养获得，④过程不能得到脱毒苗，B错误； C、植物组织培养时，需先调整生长素和细胞分裂素的比例诱导生芽，再调整比例诱导生根，C错误； D、胡萝卜是二倍体（含2个染色体组）、羊角芹是二倍体（含2个染色体组），二者体细胞融合得到的植株⑤不分裂的体细胞含有4个染色体组；PEG（聚乙二醇）是诱导原生质体融合的常用化学试剂，D正确。 8．D 【详解】A、维生素D佝偻病是伴X染色体显性遗传病，卵母细胞捐献者提供了细胞质遗传物质，但没提供细胞核遗传物质，所以维生素D佝偻病患者可以充当卵母细胞捐献者，A错误； B、受精完成的标志是雌雄原核融合，B错误； C、唐氏综合征（21三体综合征）是染色体异常遗传病，不能通过基因检测筛查，C错误； D、三亲婴儿体细胞中核DNA来自父母，各占一半，线粒体DNA来自捐献者，故三亲婴儿体细胞中来自母亲卵母细胞的DNA所占比例低于1/2，D正确。 9．A 【详解】A、单细胞蛋白指通过发酵获得的微生物菌体本身，不需要裂解酵母菌，对酵母菌裂解液进行提取、分离和纯化无法得到单细胞蛋白，A错误； B、高Ca2+-高pH是诱导植物原生质体融合的常用化学方法，处理两种植物的原生质体可以得到融合细胞，B正确； C、向成纤维细胞中导入特定小分子化合物，可以诱导其重编程为诱导多能干细胞即iPS细胞，C正确； D、蛋白酶合成抑制剂是激活重构胚的常用化学试剂之一，处理重构胚可实现重构胚的激活，D正确。 10．B 【详解】A、体外培养动物细胞时，细胞代谢产生的废物会在培养液中积累，定期更换培养液可清除代谢废物，为细胞提供适宜的生存环境，A正确； B、胰岛B细胞由iPS细胞分化形成，细胞分化的实质是基因的选择性表达，二者的基因组成完全相同，仅基因表达产物存在部分差异，并非基因组成与表达产物均不相同，B错误； C、用病人自身体细胞制备iPS细胞，无需使用胚胎，规避了胚胎干细胞相关的伦理问题，且细胞来源于患者自身，不会发生免疫排斥反应，C正确； D、重编程过程中导入的外源转录因子可能随机整合到宿主细胞的基因组中，引发基因突变，其中c-MYC属于原癌基因，异常表达存在诱导细胞癌变、导致肿瘤发生的风险，D正确。 11．B 【详解】A、基因工程核心步骤是构建基因表达载体，A错误； B、DNA连接酶连接黏性末端形成磷酸二酯键，B正确； C、载体除质粒外还有λ噬菌体衍生物、动植物病毒等，C错误； D、目的基因导入后不一定能成功表达，D错误。 12．B 【详解】A、DNA合成过程中，dATP作为原料时会脱去β、γ位的两个磷酸基团，仅α位磷酸参与构成DNA的磷酸二酯键，因此用β位磷酸被³²P标记的dATP无法得到³²P标记的DNA片段，A错误； B、PCR过程中dNTP既是合成DNA的原料，其水解脱去两个磷酸基团时特殊化学键断裂可释放能量，因此不需要额外添加ATP供能，B正确； C、人体细胞中ATP的合成速率与分解速率始终处于动态平衡，剧烈运动时两者速率均加快，但不会出现合成速率远大于分解速率的情况，C错误； D、人体成熟红细胞无线粒体，但可在细胞质基质中通过无氧呼吸产生ATP，D错误。 13．D 【详解】A、构建②重组Ti质粒（基因表达载体）时，需要限制酶切割目的基因和Ti质粒、DNA连接酶连接二者的黏性末端/平末端，不需要DNA聚合酶，A错误； B、③农杆菌侵染植物细胞后，仅重组Ti质粒上的T-DNA片段会整合到④植物细胞的染色体上，并非整个重组Ti质粒整合，B错误； C、④的染色体上含抗虫基因，不代表抗虫基因能成功表达出抗虫蛋白，还需检测基因是否转录、翻译，以及进行个体水平的抗虫接种实验，才能确认抗虫植株培育成功，C错误； D、将离体的植物细胞④培养为完整植株⑤，利用了植物组织培养技术，原理是植物细胞的全能性，D正确。 14．B 【详解】A、基因突变具有不定向性，杂草的抗除草剂突变在草甘膦使用前就已产生，草甘膦仅发挥选择作用，不能诱导突变产生，A错误； B、草甘膦与PEP竞争性结合EPSP合酶，若EPSP合酶过量表达，即使部分酶被草甘膦结合，剩余的酶仍可与PEP结合维持正常代谢，可获得抗草甘膦作物，B正确； C、蛋白质工程不能直接替换蛋白质的氨基酸序列，需要先改造控制EPSP合酶合成的基因，再通过基因表达获得改造后的EPSP合酶，C错误； D、细胞核基因可随花粉扩散进入杂草，若要避免外源基因流入杂草，应将外源基因插入细胞质（叶绿体/线粒体）基因组，而非细胞核基因组，D错误。 15．D 【详解】A、胚胎移植过程中受体仅为早期胚胎提供发育的场所，后代的遗传物质来自提供生殖细胞的供体个体，性状与受体基本无关，A错误； B、去除卵母细胞的细胞核是克隆动物（核移植技术）的操作步骤，①试管动物技术属于体外受精的有性生殖技术，不需要对卵母细胞进行去核处理，B错误； C、②克隆动物属于无性繁殖技术，子代的遗传物质与供核个体基本一致，只能保持供体的原有优良性状，无法大幅改良动物性状，C错误； D、获得③转基因动物后，可通过②克隆技术得到大量基因型与原转基因动物一致的个体，从而实现相关产物的扩大化生产，D正确。 16．D 【详解】A、我国对待生物武器的态度是：在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，A正确； B、克隆人违背人的伦理道德，严重威胁着人类社会的稳定，我国禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆的相关研究，B正确； C、转基因农作物的培育和种植可能带来基因污染、影响物种多样性等生态风险，因此需要提前评估考量，C正确； D、若基因工程的目的基因来源于自然界，也可能存在安全问题，D错误。 17．(1)单细胞蛋白 (2)高压蒸汽灭菌锅 (3)防止冷凝水落入培养基中造成污染 (4) 充足的氧气供应 无 50 (5)可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株 【详解】（1）单细胞蛋白指通过发酵获得的微生物菌体，可直接用作饲料蛋白，酵母菌体就属于单细胞蛋白。 （2）培养基常采用高压蒸汽灭菌法灭菌，需要用到的仪器是高压蒸汽灭菌锅。 （3）倒平板后倒置培养皿的主要原因是防止冷凝水回落滴到培养基，造成污染，此外还能减缓培养基水分蒸发。 （4）酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖，因此为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和氧气；活细胞膜具有选择透过性，经等体积台盼蓝染液染色，无色细胞是活细胞才能计数；为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数（假设为n），达到每毫升5×109个活细胞的预期密度，而台盼蓝与菌液等体积加入（相当于稀释2倍），则n÷80×400÷（0.1×10-3）×1000×2=5×109（80为5个中方格含有小方格的总数），n=50。 （5）配制一系列甲醇浓度逐渐升高的选择培养基，将分离得到的酵母菌株依次接种在甲醇浓度逐步升高的培养基上培养，能够在高浓度甲醇培养基上正常生长繁殖的菌株即为甲醇高耐受菌株。 18．(1) 纤维素酶和果胶酶 酶解时间过长、酶浓度过高、（培养液）渗透压不适宜（或过低）等 (2) 细胞膜（生物膜）具有一定的流动性 56、48、52 杂种细胞再生出细胞壁 (3)高Ca2+—高pH融合法 (4) 脱分化 耐盐、高产 【详解】（1）植物细胞壁的组成成分主要是纤维素和果胶，所以去除植物细胞的细胞壁，主要用纤维素酶和果胶酶去除。水稻的原生质体无细胞壁，大量破裂可能是因为酶解时间过长，对原生质体造成过度损伤；也可能是酶浓度过高，破坏了原生质体的结构；或者是渗透压较低，原生质体因吸水而破裂等。 （2）原生质体融合成一个细胞，该过程所依据的原理是细胞膜（或生物膜）具有一定的流动性。如果只考虑细胞两两融合，存在三种类型：鹤甫碱茅细胞-鹤甫碱茅细胞，不分裂时染色体数56；水稻细胞-水稻细胞，不分裂时染色体数48；水稻细胞-鹤甫碱茅细胞，不分裂时染色体数52。植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁。 （3）诱导植物细胞融合的化学方法是：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法。图中诱导原生质体融合的方法是聚乙二醇（PEG）融合法，化学法诱导原生质体融合还可以用高Ca2+—高pH融合法。 （4）②表示融合细胞经脱分化形成愈伤组织的过程。题干信息“科研工作者尝试将其体细胞和水稻（2n=24）体细胞进行融合，用于制备耐盐、高产的杂种植株”可知，③过程一般要使用高钠的固体培养基，获得的植株最终还要检测其耐盐、高产相关性状，才能判断所得植株是否符合预设要求。 19．(1) 透明带反应、卵细胞膜反应 观察到两个极体或雌、雄原核 (2) 相同生理环境 内细胞团 (3)受体雌羊子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应 (4) 有性 基因突变、基因重组和染色体变异 【详解】（1）防止多精入卵有两道先后发生的生理屏障：在精子触及卵细胞膜的瞬间，发生透 明带反应；精子入卵后，发生卵细胞膜反应。多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，因而不会形成两个第二极体，故受精的标志是观察到两个极体或者雌、雄原核。 （2）胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 囊胚阶段的内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，胚胎分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和发育。 （3）受体雌羊子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，是移入的胚胎能在代孕雌羊子宫中存活的生理基础，也是胚胎移植能够成功的核心前提之一。 （4）F是体细胞核移植得到的无性生殖后代，绝大部分遗传物质与供体C体细胞一致，遗传多样性很低。而E是通过体外受精形成受精卵发育而来的有性生殖后代，其亲代在进行减数分裂产生配子的过程中会发生基因重组，产生多种多样的配子，雌雄配子随机结合进一步丰富了后代的遗传多样性，因此E更具有多样性。在其培育过程中，可以发生的可遗传变异包括基因突变、基因重组和染色体变异，这些变异都是生物进化的重要来源，也是生物多样性的基础。 20．(1) 二苯胺 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA (2) 复制原点 DNA连接 HindⅢ和NcoⅠ AAGCTTCTAC (3) 农杆菌转化 prRCA1能够驱动LUS基因表达，具有启动子活性；而且prRCA1能够响应高温胁迫，是热诱导型启动子 (4) 草氨磷 一对同源染色体中的1条 【详解】（1）可用二苯胺试剂对从海南杜鹃中提取的DNA进行初步鉴定，prRCA1作为启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。 （2） 图中载体还缺少的组成元件是复制原点，构建prRCA1-LUS表达载体过程中需用到限制酶和DNA连接酶，由于prRCA1内部含SpeⅠ位点，应选择不切开prRCA1内部的限制酶，如HindIII和NcoI对质粒进行切割。给出的非模板链5′-CTACTACCAAGCAC…-3′，其模板链互补序列为3′-GATGATGGTT…-5′；若引物a与模板链互补，则引物a（5′→3′）前10个碱基应与非模板链相同，为5′-AAGCTTCTAC-3’。 （3）据图可知，将目的基因导入拟南芥叶片最常用的方法是农杆菌转化法。高温37℃下荧光增强，说明prRCA1能够驱动LUS基因表达，具有启动子活性；而且prRCA1能够响应高温胁迫，是热诱导型启动子。 （4）基因载体带有草氨磷抗性基因，故应在含草氨磷的培养基上筛选转基因植株。第二代植株中出现3∶1的抗性分离比，符合1对等位基因的分离定律，说明目的基因最可能插入在一对同源染色体中的1条上。 21．(1) 培养液 抗生素 (2) 减数第二次分裂中期/MⅡ 期 细胞分裂 (3) 大 体细胞分化程度高，表现全能性更困难 (4)AB (5) 同期发情 滋养层 (6) 异种细胞质环境 生态安全 【详解】（1）动物组织培养取材时，剪碎耳廓组织后需要用培养液去除血污等杂质；动物细胞培养中，添加抗生素可以抑制杂菌生长，防止杂菌污染。 （2）为了获得遗传物质稳定的卵母细胞，需在家犬卵母细胞的减数第二次分裂中期（MⅡ 期） 进行去核操作（此时卵母细胞的细胞质中含有促进核全能性表达的物质，且染色体集中在极体附近，便于去除）；将体细胞注入去核卵母细胞并融合后，重构胚激活后，使其完成细胞分裂和发育进程。 （3）高度分化的动物细胞全能性受到了限制，体细胞比胚胎细胞分化程度高，表现全能性更困难，更不容易成功。 （4）A、体外受精前需要对郊狼的精子进行获能处理，获能后的精子才能和减数第二次分裂中期的卵母细胞发生受精作用，A正确； B、体外受精前常需要对雌性郊狼进行超数排卵处理，使其产生更多的卵母细胞，B正确； C、胚胎早期发育时，囊胚内部开始出现含液体的腔，C错误； D 、胚胎移植时，胚胎不会发生免疫排斥反应，这是胚胎移植的基础，D错误。 （5）为了提高克隆胚胎移植成功率，需对代孕母体进行同期发情处理，使其处于适合胚胎着床的生理状态（供体和受体的生理状态一致）。若要对胚胎进行性别鉴定，常取囊胚期的滋养层细胞进行 DNA 分析（内细胞团将来发育为胎儿本体，滋养层细胞将来发育为胎膜胎盘，取样滋养层细胞不会损伤胚胎）。 （6）根据题干信息，异种动物的细胞质环境会影响供核的基因表达，因此需要关注异种细胞质环境对克隆动物品质的影响；在推广和应用该技术时，必须严格评估和监控其生态安全风险，以确保生态系统的稳定。 答案第1页（共2页） 答案第1页（共2页） 学科网（北京）股份有限公司 $