内容正文:
第二节 动物细胞工程——动物细胞与组织培养
动物细胞工程作为细胞工程的重要组成部分,主要依据细胞生物学和分子生物学,根据人类的需要,一方面深入探索并改造生物的遗传特性,另一方面应用工程技术手段,大量培养细胞。
用培养的人细胞构建的人造皮肤
学习目标
简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
问题1:如何把动物组织分散成单个细胞进行培养?
问题2: 培养过程中保证无菌环境的措施是什么?
问题3:细胞为什么需要在CO2培养箱中培养?
问题4:什么是原代培养?
进行动物细胞培养的必要性
1.什么是动物细胞与组织培养?
2. 动物细胞与组织培养的材料是什么?为什么选取这些材料进行动物细胞与组织培养?
3.动物细胞与组织培养的原理是什么?
细胞增殖
动物细胞与组织培养
是指在体外模拟动物体内环境,将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养,使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技术过程。
取材
动物胚胎或出生不久的幼龄动物
细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物则相反。
【例1】下列对于动物细胞与组织培养的理解正确的是( )
A.培养液相当于人体的组织液只为细胞或组织提供营养
B.培养的细胞与组织抵抗力强,不需要无菌条件
C.培养的细胞与组织能够进行细胞分裂和分化
D.动物细胞与组织能够维持原有的结构和功能
D
动物细胞培养的过程
1.进行动物细胞培养时为什么要把组织分散成单个细胞?如何分散?
2.胰蛋白酶的作用是什么?
3.胰蛋白酶处理组织成为单个细胞的时间有没有要求?
4.为什么不用胃蛋白酶处理?
5.动物组织培养与动物细胞培养的主要区别是什么?
6.分散细胞在培养瓶中培养的特点是什么?
动物细胞培养的过程
原代培养
传代培养
形成细胞系
过程
原代培养是指动物组织消化后的初次培养。
传代培养是指贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养的过程。
细胞贴壁和接触抑制
细胞培养
组织培养
胰蛋白酶等处理
【例2】下列有关动物细胞培养的过程的叙述中,不正确的是( )
A. 在传代培养时,必须用胰蛋白酶处理附壁生长的细胞,使之成为单细胞
B. 动物细胞培养的材料一般选择幼年动物的细胞,因为幼年动物的细胞没有分化
C. 癌细胞不受“接触抑制”,这可能与它的细胞表面发生变化有关
D. 传代培养的原因是培养瓶中的细胞密度过大或代谢消耗引起营养枯竭
B
动物细胞培养的条件
1.动物细胞培养的环境条件是什么?
2.动物细胞培养的物质条件有哪些?
环境条件是无菌、无毒的环境。
充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。
培养基
人工合成成分+动物血清
动物血清、动物组织提取液、鸡胚汁等
天然培养基
合成培养基
培养条件
温度
PH
气体
营养物质
37℃
7.2~7.4
O2、CO2
葡萄糖、无机盐、氨基酸、维生素、核糖、嘌呤、嘧啶、激素和生长因子等
【例3】下列有关动物细胞培养条件的叙述中,正确的是( )
A. 动物细胞培养时的培养基的定期更换,实现了无菌条件
B. 动物细胞培养时的培养基是液体培养基,并要加入血清
C. 动物细胞培养时温度和pH要适宜,保证细胞全能性的表达
D. 动物细胞培养时要保证氧气供应,不能通二氧化碳
B
动物细胞培养技术的应用
动物细胞培养能够生产哪些生物制品?
为疫苗生产、药物研制、肿瘤防治提供全新手段。
【例4】下列有关动物细胞培养技术应用的叙述,不正确的是( )
A.通过动物细胞培养技术可以生产许多蛋白质生物制品
B.培养动物细胞可以检测有毒物质
C.动物细胞培养可以获得动物的组织或器官
D.培养正常或病变的细胞可用于生理、病理、药理等方面研究
C
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第二节 动物细胞工程——细胞核移植与动物体细胞克隆
多利是如何诞生的?!
学习目标
简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
问题1:什么是动物细胞核移植?
问题2:如何处理构建后的重组胚胎?
问题3:克隆动物在畜牧生产上有什么优势?
动物体细胞克隆
1.什么是克隆?
2. 什么是动物体细胞克隆?
3.为什么要进行动物的核移植?
4.动物体细胞克隆的关键是什么?
5.什么是克隆动物?
细胞核移植与动物体细胞克隆
细胞核移植是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的细胞核移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟卵细胞内的技术。
动物体细胞克隆(body cell clone)是将供体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合,借助于卵细胞的发育能力,经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。
关键是细胞核移植技术
【例1】