内容正文:
第一节 生物成分的分离与测定技术
第四章 生物化学与分子生物学技术实践
目
录
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情景导入
学习目标
课前导学
课堂探究
随堂检测
课堂小结
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情景导入
学习目标
1.掌握电泳法分离大分子的原理。(重点)
2.运用常用的方法提取和分离蛋白质。(重、难点)
3.了解芳香油的特点,知道提取芳香油的原理及会设计简单的实验装置进行提取。(重点)
课前导学
离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质
研磨
超声波
完全破碎
1.细胞中蛋白质的释放
在提取蛋白质时,可以采用 与 结合的方法将生物组织或细胞 ,使蛋白质从细胞中释放出来,并使其溶解在适当的抽提液中。
特性
偏碱性
偏酸性
有机溶剂
2.抽提液的选择
要根据蛋白质的 而定,一般酸性蛋白质用
溶液抽提,碱性蛋白质用 溶液抽提,脂蛋白等则可用 抽提。
离心速度
分子大小
密度不同
半透膜
小分子化合物
3.离心沉降法分离蛋白质
通过控制 ,使 、 的蛋白质发生沉降分层,从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。
4.薄膜透析法分离蛋白质
利用蛋白质分子不能透过 的特性,使蛋白质与其他 分离开的纯化蛋白质的方法。
凝胶色谱法分离蛋白质
蛋白质分子的大小
胶体溶液
葡聚糖
琼脂糖
多孔网状
1.凝胶色谱法的概念
是根据 ,对其进行有效分离的方法。
2.凝胶
(1)组成:由 凝结而成的固体物质。
(2)成分:由 、 等多糖类化合物。
(3)结构:小球体内部具有很细微的 结构。
较短
较快
较长
缓慢
3.分离蛋白质的原理
①大分子蛋白质不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙移动,洗脱路程 ,移动速度 ,最先流出柱外。
②小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部的多孔网状结构,洗脱路程 ,移动速度 ,以致较长时间流出柱外。
蒸馏
蒸气
液体
易挥发
不易挥发
沸点
1.蒸馏的概念
将