精品解析：河南省郑州市2025—2026学年高二下学期期末考试生物试卷

2025-2026学年下期期末考试 高二生物试题卷（一） 注意事项 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。考试时间为90分钟，满分100分。考生应首先阅读答题卡上的文字信息，然后在答题卡上作答，在试卷上作答无效。交卷时只交答题卡。 第Ⅰ卷（选择题，共50分） 一、选择题（本题包括25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题意。） 1. 科研人员培养小鼠肝细胞时，发现培养液被微生物污染，镜检观察到支原体、大肠杆菌和酵母菌等。下列相关叙述正确的是（ ） A. 污染前的培养液中所有的细胞属于一个种群 B. 污染后的培养液中所有的细菌属于一个群落 C. 小鼠细胞和支原体均具有DNA、蛋白质，但二者并不都存在DNA-蛋白质复合物 D. 酵母菌和大肠杆菌均有细胞壁，但抑制细胞壁合成的青霉素却不能有效杀灭酵母菌 2. 《本草纲目》记载苦瓜具有明目解毒的功能。下列相关叙述正确的是（ ） A. 苦瓜中富含镁、铁、钾等大量元素，可以补充人体所需的矿物质 B. 苦瓜中富含的纤维素可以促进肠胃蠕动、帮助消化，提供能量 C. 苦瓜籽中特有的苦瓜蛋白属于生物大分子，以碳链为基本骨架 D. 组成苦瓜的元素和化合物在自然界都能找到，但相对含量大不相同 3. 水是生命的介质。科学家在土卫六上收集到液态氨，这让土卫六成为太阳系中最有可能存在非水基生命的候选星球。下列支持液态氨能代替水作为生命介质的理由中正确的是（ ） A. 液态氨之间可形成氢键，氢键易断裂易形成，所以液态氨是良好的溶剂 B. 液态氨的比热容比水分子大，因此有利于维持生命系统的稳定性 C. 液态氨分子一端带正电荷一端带负电荷，因此它的温度相对不容易改变 D. 液态氨有极性，带电荷的分子都容易与它结合，所以它具有流动性 4. 花生是我国重要的油料作物，其种子富含脂肪；玉米是我国三大粮食作物之一，其种子富含淀粉。萌发过程中，呼吸作用、脂肪与糖类的相互转换是影响种子干重的主要因素。下列叙述正确的是（ ） A. 玉米种子萌发初期，种子干重先增加后减少，使干重增加的主要元素是氧元素 B. 玉米种子萌发阶段，吸收的水主要与蛋白质、脂肪等结合，进而提高代谢速率 C. 花生种子萌发阶段，脂肪和糖类会发生大量相互转化，保证萌发的能量供应 D. 花生种子形成阶段，叶片光合作用产生的糖类可转运至种子，用于脂肪合成 5. 生物学实验中常用特定试剂对生物组织中的某些化合物进行鉴定。胰蛋白酶能特异性水解肽链中赖氨酸或精氨酸的羧基端肽键。下列相关叙述正确的是（ ） A. 向稀释的鸡蛋清溶液中加入胰蛋白酶充分反应后，滴加双缩脲试剂不会出现紫色 B. 滴加体积分数为50%的酒精可以洗去浮色，是因为苏丹Ⅲ染液易溶于酒精溶液 C. 依据溴麝香草酚蓝溶液颜色变化的深浅可判断酵母菌培养液中CO2的产生情况 D. 将0.1 g/mLNaOH和0.01 g/mLCuSO4混合后加入样液中，水浴加热检测还原糖 6. 科学界普遍认为生命至少要满足新陈代谢和繁殖两个条件。当科学家创造出能以自身为“种子”形成更多相似蛋白质的类朊病毒蛋白后，引发了同学们对生命起源的讨论。甲同学认为生命起源于核酸，乙同学认为生命起源于蛋白质。下列支持甲、乙同学的观点中，错误的是（ ） A. 甲：核酸由核苷酸构成，其碱基序列中蕴藏遗传信息 B. 甲：切赫和奥尔特曼发现少数RNA也具有生物催化功能，可调节某些细胞代谢 C. 乙：蛋白质由氨基酸组成，绝大多数酶是蛋白质，可参与新陈代谢 D. 乙：类朊病毒蛋白以自身为“种子”形成蛋白质，意味着蛋白质可能可以自我复制 7. 细胞膜成分和结构的探索历程经历了很长时间。下列说法错误的是（ ） A. 欧文顿用不同物质对植物细胞通透性进行实验，推测细胞膜有脂质成分 B. 科学家对哺乳动物红细胞的细胞膜进行化学分析，得知动物细胞膜不含胆固醇 C. 提取人的红细胞的脂质，在空气-水界面上形成的单层分子的面积是细胞表面积的2倍 D. 用磷脂分子制成的双层脂质体在运载药物时，脂溶性药物应被包在两层磷脂分子之间 8. 2025年，哈佛大学首次捕捉到了神经元膜下细胞骨架自发解体—重组的动态过程。细胞骨架由微管、微丝等蛋白组成，微管抑制剂或某些药物可抑制微管的形成与解聚。下列与细胞骨架有关的叙述错误的是（ ） A. 用秋水仙素处理神经细胞后微管解聚、细胞变圆，体现了细胞骨架维持着细胞形态 B. 用药物阻断变形虫微丝的组装后伪足无法形成，体现了细胞骨架可参与细胞运动 C. 加入微管抑制剂后纺锤体形成受阻，细胞分裂停滞，体现了细胞骨架参与细胞分裂 D. 细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，支撑着细胞内的一切物质运输过程 9. 溶酶体是细胞内的物质降解中心，为适应细胞代谢，溶酶体通过不断地融合和分裂重塑其形态与功能。中科院发现hpo-27基因功能缺失造成线虫表皮细胞中累积大量管状溶酶体，形成管状网络。HPO-27蛋白介导溶酶体分裂的机制如下图所示，下列相关说法错误的是（ ） A. HPO-27被RAB-7招募并在膜分裂位点上自组装，介导溶酶体的裂解 B. 管状网络崩溃后内含的水解酶释放到细胞质基质，酶活性可能会降低 C. 溶酶体合成水解酶的过程离不开核糖体、内质网、高尔基体等细胞器 D. 功能正常的溶酶体分解衰老、损伤的细胞器不一定导致细胞程序性死亡 10. 核孔复合体是镶嵌在核膜上的巨型蛋白质机器，是细胞核与细胞质之间大分子物质运输的通道。下列有关叙述错误的是（ ） A. 核膜为双层生物膜结构，其外膜与内质网膜直接相连，上面常常附着有核糖体 B. 核膜将细胞核与细胞质分隔开，保证了细胞代谢互不干扰、生命活动高效有序 C. 核孔复合体介导的运输是有选择性的，该过程存在信号识别、需要消耗能量 D. 核孔复合体保证了核质之间大分子物质的交换，小分子不会通过核孔复合体 11. 水通道蛋白广泛存在于植物叶肉细胞和保卫细胞的细胞膜上。气孔的开闭与保卫细胞的细胞壁伸缩性、水的渗透作用密切相关，保卫细胞吸水时气孔开放，其结构如图1所示。甲同学将图1保卫细胞分别放在不同浓度的蔗糖溶液①、②、③中，气孔状态如图2中的a、b、c所示。乙同学将叶肉细胞放置于一定浓度的乙二醇溶液中，观察一段时间，并测量M值（外界溶液浓度/细胞液浓度），结果如图3所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 保卫细胞吸水的主要方式是协助扩散，水分子需与通道蛋白结合 B. 图2中，保卫细胞b吸水能力小于c；蔗糖溶液的浓度是③＞②＞① C. 图3中t0～t1阶段，细胞的吸水能力逐渐增强，t1后乙二醇进入细胞 D. 乙同学升高温度后重新测量，水分子进出达到动态平衡的时间会提前 12. PepT1是一种主要位于小肠上皮细胞膜上的质子依赖型转运蛋白，主要转运二肽/三肽（寡肽）。PepT1的作用机制如下图所示。已知小肠上皮细胞膜上的Na+-H+交换体（NHE）负责将细胞内H+泵出至肠腔，维持跨膜质子梯度。下列有关叙述正确的是（ ） A. 细胞膜上的钠钾泵在转运Na+、K+时，会发生转运蛋白的磷酸化与去磷酸化 B. 寡肽进入细胞的过程属于主动运输，消耗能量，PepT1承担了运输与催化功能 C. 呼吸抑制剂处理小肠上皮细胞后寡肽转运速率下降，说明该过程直接消耗ATP D. 小肠肠腔中寡肽浓度持续升高时，细胞膜上的PepT1的转运速率也不断升高 13. 人类运动蛋白移动导致肌肉收缩的过程如图所示，下列有关ATP的叙述错误的是（ ） A. 运动时细胞ATP的消耗量远大于其储存量，说明ATP与ADP之间时刻不停地相互转化 B. ATP水解时，末端磷酸基团脱离、携能量与其他分子结合，释放能量 C. 能量通过ATP分子在吸能反应和放能反应之间流通，肌肉收缩需要吸收能量 D. 图中ATP在合成时，能量可来源于光能、有机物氧化分解释放的能量 14. 社团活动课上，老师准备了以下材料：①新鲜的鸡肝研磨液；②质量分数为3%的H2O2溶液；③淀粉酶；④质量分数为3%的淀粉溶液；⑤质量分数为3%的蔗糖溶液；⑥斐林试剂；⑦碘液。请你选择合适的材料开展探究实验，下列对应关系正确的是（ ） A. 选择③④⑦，可探究温度对淀粉酶活性的影响 B. 选择③④⑤⑦，可验证淀粉酶具有专一性 C. 选择③④⑦并补充不同pH缓冲液，可探究pH对淀粉酶活性的影响 D. 选择①②并补充冰块、温水浴锅，可探究温度对酶活性的影响 15. 胰脂肪酶是肠道内脂肪水解过程中的关键酶，板栗壳黄酮可调节胰脂肪酶活性进而影响人体对脂肪的吸收。酶的竞争性抑制剂与底物结构相似、非竞争性抑制剂可以与酶结合进而改变酶的空间结构。为研究板栗壳黄酮（CSF）对胰脂肪酶活性的影响，科研人员进行了下列实验。关于本实验的下列叙述中错误的是（ ） A. 由图可知，板栗壳黄酮能抑制胰脂肪酶活性并使其最适pH升高 B. 若进一步增加脂肪浓度后图1曲线Ⅱ上升与Ⅰ接近，则CSF属于非竞争性抑制剂 C. 若将pH调至8后重新进行图1实验，则A、B两点均会向下方移动并几乎重合 D. 生产实践中可开发以板栗壳黄酮为主要成分的产品用于减肥减脂 16. 玉米种子富含亲水物质，呼吸作用较强，且含有大量不稳定的脂肪，易出现发霉现象。为避免玉米种子在贮存期间霉变，常采用站秆扒皮（扒开玉米棒苞叶，直接晾晒玉米粒）、果穗悬挂贮藏等方法促进脱水。下列有关说法正确的是（ ） A. 站秆扒皮有利于紫外线使霉菌的蛋白质变性，起到灭菌作用，降低了发霉概率 B. 果穗悬挂贮藏可减少种子含水量，使线粒体内膜上的有氧呼吸第二阶段减弱 C. 若细胞呼吸时释放的CO2体积与消耗的O2体积之比小于1，则底物中可能含有脂肪 D. 无氧呼吸时，葡萄糖中的大量能量以热能散失，少量以化学能形式储存在ATP中 17. 1937年，希尔在无CO2的条件下，将离体叶绿体加入到含有氧化剂Fe3+的水溶液中，光照后发现叶绿体释放O2。1963年，贾格道夫将离体叶绿体类囊体置于pH=4的酸性溶液中，平衡后迅速转移到含有ADP和Pi的pH=8的缓冲液中，在黑暗条件下检测到ATP的合成。下列有关分析错误的是（ ） A. 希尔反应中水光解的最终电子受体是Fe3+，光合作用中的最终电子受体是NADP+ B. 希尔实验证明了光合作用中水的光解和糖类的合成不是同一个化学反应 C. 希尔反应是在无CO2时进行的，证明了光合作用产生的氧气全部来自水 D. 贾格道夫实验说明只要有氢离子浓度梯度，即使在黑暗条件下也能合成ATP 18. 研究发现，蓝细菌光合作用的场所是光合片层和细胞质，有氧呼吸场所是细胞膜和细胞质，其细胞结构及相关代谢过程如图所示，①～⑤表示代谢过程，a～f表示物质。羧酶体是蓝细菌里具有半透性的细胞微室，其内部包裹着CO2固定酶Rubisco。下列有关叙述错误的是（ ） A. c代表O2，e代表NADH，④表示有氧呼吸第二阶段 B. 若某时刻物质d浓度突然增加，则物质b在短时间内含量减少 C. 羧酶体的半透性可以阻止CO2逸出和O2进入，提高Rubisco周围的CO2浓度 D. ①②发生的能量转化是光能→ATP、NADPH中的化学能→有机物中的化学能 19. 研究人员在适宜的温度和水分条件下，对甲乙丙丁四种植物的相关生理指标进行了测量，如图所示。下列关于四种植物的说法错误的是（ ） A. 将图1中甲乙置于同一密闭玻璃罩内，甲植株将先于乙死亡 B. 将图1纵轴从O2生成速率改为CO2吸收速率，则a点左移 C. 将图2中丙丁作物间作可形成立体农业，充分利用空间、光照等资源 D. 将图2丙的外界CO2浓度适当提高，则B将左移，C将向右上方移动 20. 研究表明，秸秆还田能显著提高玉米产量，但不同的玉米秸秆还田方式对玉米产量的影响不同。兴趣小组以秸秆不还田为对照（CK），模拟T1～T4四种秸秆还田方式探究最优方案，为测得光合速率，兴趣小组取样每组长势相同的幼苗先暗处理1h，再光照1h测其干重变化。下列有关该实验的叙述正确的是（ ） 表 不同秸秆还田方式下的光合指标 处理 暗处理1h后干重变化/mg 光照1h后干重变化 （与暗处理前相比较）/mg 气孔导度 （mmol·m-2·s-1） 叶面积指数 CK -4 0 0.40 4.32 T1 -3.5 +2 0.41 4.77 T2 -3.5 +4 0.41 4.69 T3 -4 +4 0.42 5.08 T4 -3.5 +3 0.41 4.87 A. T3处理下作物净光合速率最高，CK组净光合速率为5mg/h B. T3处理下，24小时内光照12小时以上玉米才能正常生长 C. 秸秆还田使秸秆中的有机物被作物再次吸收，可提高产量 D. 四种还田方式主要通过影响叶面积指数影响光合速率 21. 区别理念是生物学研究的重要思维方法——通过某种手段将原本难以区分的研究对象标记开来，从而追踪其去向或作用。下列叙述没有体现区别理念的是（ ） A. 利用被3H标记的亮氨酸，研究胰腺腺泡细胞分泌蛋白的合成与运输 B. 利用抗生素抗性基因，在含抗生素的平板上区分出成功导入载体的细胞 C. 利用底物是否消耗或者产物是否生成，区分试管中的酶促反应是否发生 D. 利用红绿荧光染料标记人鼠细胞的膜蛋白，两种颜色荧光均匀分布证明膜的流动性 22. 植物体细胞杂交是将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并培育成完整植株的技术。下列有关叙述错误的是（ ） A. 制备原生质体时可使用蜗牛消化道提取液，原因是其中含有纤维素酶、果胶酶等 B. 诱导原生质体融合时可采用聚乙二醇融合法，融合后的细胞即为所需的杂种细胞 C. 杂种细胞形成的标志是再生出新的细胞壁，在此之前要维持培养液等渗或略高渗 D. 植物体细胞杂交技术的原理包括细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性 23. 2025年，我国科学家利用单细胞测序技术优化了传统杂交瘤筛选流程，成功制备出针对多种病原体的高亲和力单克隆抗体。下列关于单克隆抗体制备的叙述中正确的是（ ） A. 用特定抗原多次免疫小鼠是为使小鼠能产生更多抗体和B淋巴细胞 B. 诱融后获得多种细胞，用特定的选择培养基筛选可得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞 C. 可将抗体检测阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中增殖或在体外条件下大规模培养 D. 制备的单克隆抗体可用于合成ADC，其中的抗体能够发挥杀伤靶细胞的作用 24. 基因工程中常用到的重组载体，包括克隆载体和表达载体等，前者主要用于目的基因的扩增、保存或测序，后者还可使目的基因表达。下列叙述错误的是（ ） A. 通过PCR获取目的基因的关键是根据目的基因两端的核苷酸序列设计适宜的引物 B. 基因工程构建的重组载体必须含有复制原点、启动子、终止子、目的基因、标记基因 C. 使用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞前，后者不能有T-DNA中的标记基因 D. 鉴定基因工程是否成功可利用PCR技术、抗原-抗体杂交技术、个体性状鉴定等方法 25. 下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（ ） A. 设计试管婴儿时，需在胚胎移植前进行遗传学诊断，以降低个体遗传病风险 B. 克隆牛的诞生证明了动物体细胞核具有全能性，电刺激法可激活重构胚 C. 乳腺生物反应器属于转基因动物，需将基因表达载体导入乳腺中特异性表达 D. 工厂化生产植物次生代谢物时，需在MS培养基上添加比例适宜的植物激素 第Ⅱ卷（非选择题，共50分） 二、非选择题（本题包括4个小题，共50分。把答案填在答题卡中的横线上。） 26. 南极大磷虾是一类分布于南极海域的甲壳动物，其体内的脂肪酶可能具有独特的适冷特性。科研人员从南极大磷虾虾头中分离纯化出一种脂肪酶，并对其酶性质进行了研究，部分结果如图所示。回答下列问题： （1）科学研究中通常通过加入高浓度中性盐分离获得蛋白质。为提取南极大磷虾消化道中的脂肪酶，研究员向虾头样液中加入硫酸铵后进行离心，收集___________（填“上清液”或“沉淀物”）纯化脂肪酶。该酶催化脂肪水解的作用机理是___________。 （2）据图1分析，南极大磷虾脂肪酶的最适温度是___________。若研究者据图1分析认为该酶具有低温脂肪酶的催化特性，请你说明理由：___________。 （3）除了温度、离子浓度外，影响酶促反应速率的因素还有________和酶浓度等，其中酶浓度是通过影响________进而影响酶促反应速率。为验证图2结果，研究员进一步实验，结果如图3所示，若曲线①是在最适条件下进行反应，则曲线④可能添加了________，曲线③可能添加了________，与前两者不同的是，曲线②可能添加了________。若Zn2+通过与胰脂肪酶的非活性位点结合发挥作用，请解释其如何影响胰脂肪酶相对活性：________。 27. 苹果酸是生物体内重要的有机酸，参与多重代谢过程。为探究苹果酸对工业大麻细胞代谢的影响，科研人员以“云麻7号”为材料，设置0～4000 mg/L五个苹果酸浓度梯度，分别测定生长指标及光合作用指标。部分实验结果如表所示。回答下列问题： 苹果酸浓度 mg/L 叶绿素含量 mg/g 净光合速率 μmolCO2/（m2·s） 气孔导度 μmolH2O/（m2·s） 胞间CO2浓度 μmolCO2/（m2·s） 蒸腾速率 μmolH2O/（m2·s） 0.00 32.87 3.53 0.08 216 4.88 1000.00 36.20 5.88 0.17 178 5.03 2000.00 41.63 8.21 0.35 148 4.53 3000.00 38.60 6.19 0.19 173 4.95 4000.00 32.53 3.24 0.07 216 5.33 （1）该实验的自变量是__________；对照组应使用__________进行处理。为排除无关变量的干扰，实验过程中除自变量外，其他条件应__________。 （2）据表1分析，随着苹果酸浓度的升高，工业大麻的净光合速率呈__________趋势。当苹果酸浓度为2000 mg/L时，净光合速率达到最大值，此时，叶肉细胞中产生ATP的场所有__________。 （3）苹果酸是C4植物光合作用途径中重要的CO2载体，具体过程如下图所示。C4植物具有的PEP羧化酶能催化CO2和_________生成C4，并由苹果酸运输至_________供碳反应利用。与小球藻等C3植物相比，C4植物光合效率更高的主要原因是_________。 （4）除在光合作用中发挥重要作用外，苹果酸还是呼吸作用的中间产物，参与有氧呼吸第二阶段。请分析补充适宜浓度的苹果酸促进工业大麻生长的可能原因：_________。 28. 过量施用有机磷农药敌敌畏（DDVP）会造成土壤持久性污染，威胁生态环境和人类健康，微生物降解是修复有机磷污染土壤的重要途径。研究人员从某长期受有机磷农药污染的农田土壤中取样，分离获得一株优势降解菌，编号为DDW-1，流程如下图所示。回答下列问题： （1）据图分析，分离该细菌时①～⑥培养基应将_________作为唯一碳源，培养基中含有Na2HPO4、KH2PO4的作用是_________（答出两点）。将微生物依次转接到①～⑤培养基的目的是_________，依据物理性质分类，⑥培养基属于_________培养基。 （2）某同学通过稀释涂布平板法对⑥中的活菌进行计数，将样品稀释105倍后取0.1 mL分别涂布3个平板，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。若计数平板上的菌落数分别为48、58、53，则每毫升原培养液中的活菌数约为_________个。相比较稀释涂布平板法，计数时还可选用_________，该方法计数所得结果_________（填“偏大”或“偏小”），原因是_________。 （3）研究员拟设计实验验证菌株DDW-1降解敌敌畏的酶属于胞内酶还是胞外酶，请你完善实验方案： ①取含DDW-1菌株的液体培养基进行离心，分别收集_________并置于2只试管中，编号甲和乙； ②甲组：胞外提取液； 乙组：用缓冲液洗涤后破碎细胞，离心取上清液，获得_________； ③取等量的②获得的甲乙两组液体，加入等量的DDVP溶液； ④一段时间后，分别测定甲、乙两组中敌敌畏的残余量。 结果预测：若_________，则为胞内酶；反之则为胞外酶。 29. CRISPR/Cas9是一种高效基因编辑工具。外泌体是一类由细胞分泌的囊泡，可携带蛋白质、核酸等物质进行细胞间物质运输和信息传递。为实现对肝脏疾病的精准基因治疗，科研人员构建了一种能靶向肝脏递送CRISPR/Cas9的工程外泌体。基因表达载体的构建如图1所示，外泌体的制备如图2所示。（Cas9蛋白能精准剪辑sgRNA所识别的靶基因，L-C基因是外泌体膜蛋白基因与能特异性识别肝细胞膜蛋白的基因的融合基因）回答下列问题： （1）据图1、2分析可知，获取目的基因时，需要将Cas9基因和L-C基因进行融合，目的是_________。据图1分析，为实现步骤②，引物2和引物3在碱基序列上应具有的特点是_________。若融合后的目的基因在转录时以β链为模板，为使融合后的目的基因与质粒正向连接，设计引物时应分别在引物1和引物4上连接限制酶_________的识别序列。 （2）基因表达载体上的启动子的作用是_________。为便于筛选，实际操作时，科研人员会将红色荧光蛋白基因与Cas9基因进行融合并与同一个启动子重组，相比较潮霉素抗性基因，红色荧光蛋白基因作为标记基因的优点是_________。 （3）培养导入了基因表达载体的受体细胞时要定期更换培养液，目的是_________。据图2可知，离心后，应从试管的_________（填“上清液”或“沉淀物”）中获得外泌体。为检测外泌体是否具有Cas9可用_________进行抗原抗体检测，也可采集外泌体总RNA进行_________获得cDNA，利用PCR法检测是否具有sgRNA，阳性组即可进行体内安全性检测。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年下期期末考试 高二生物试题卷（一） 注意事项 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。考试时间为90分钟，满分100分。考生应首先阅读答题卡上的文字信息，然后在答题卡上作答，在试卷上作答无效。交卷时只交答题卡。 第Ⅰ卷（选择题，共50分） 一、选择题（本题包括25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题意。） 1. 科研人员培养小鼠肝细胞时，发现培养液被微生物污染，镜检观察到支原体、大肠杆菌和酵母菌等。下列相关叙述正确的是（ ） A. 污染前的培养液中所有的细胞属于一个种群 B. 污染后的培养液中所有的细菌属于一个群落 C. 小鼠细胞和支原体均具有DNA、蛋白质，但二者并不都存在DNA-蛋白质复合物 D. 酵母菌和大肠杆菌均有细胞壁，但抑制细胞壁合成的青霉素却不能有效杀灭酵母菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、种群是一定区域内同种生物所有个体的总和，培养液中的小鼠肝细胞是多细胞生物的体细胞，不属于独立的生物个体，因此不构成种群，A错误； B、群落是一定区域内所有生物的总和，污染后的培养液中除细菌外，还存在支原体、酵母菌、小鼠肝细胞等，因此所有细菌不属于群落，B错误； C、小鼠为真核生物，存在染色体（DNA和组蛋白构成的DNA-蛋白质复合物），复制、转录过程中也存在DNA与聚合酶的结合物；支原体为原核生物，虽无染色体，但DNA复制、转录时也会和DNA聚合酶、RNA聚合酶（本质为蛋白质）结合形成DNA-蛋白质复合物，二者都存在该类复合物，C错误； D、大肠杆菌是细菌，细胞壁主要成分为肽聚糖，青霉素通过抑制肽聚糖合成杀灭细菌；酵母菌是真菌，细胞壁主要成分为几丁质等，不含肽聚糖，因此青霉素无法有效杀灭酵母菌，D正确。 2. 《本草纲目》记载苦瓜具有明目解毒的功能。下列相关叙述正确的是（ ） A. 苦瓜中富含镁、铁、钾等大量元素，可以补充人体所需的矿物质 B. 苦瓜中富含的纤维素可以促进肠胃蠕动、帮助消化，提供能量 C. 苦瓜籽中特有的苦瓜蛋白属于生物大分子，以碳链为基本骨架 D. 组成苦瓜的元素和化合物在自然界都能找到，但相对含量大不相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、细胞中的大量元素包括C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg，铁属于微量元素，不属于大量元素，A错误； B、人体缺乏分解纤维素的酶，纤维素无法被人体消化吸收、为人体提供能量，仅能起到促进肠胃蠕动的作用，B错误； C、苦瓜蛋白属于蛋白质，是生物大分子，其基本骨架是碳链，C正确； D、组成苦瓜的化学元素在无机自然界都能找到，体现了生物界与非生物界的统一性，但苦瓜特有的蛋白质、核酸等生物化合物，在无机自然界中不存在，并非所有化合物都能在自然界找到，D错误。 3. 水是生命的介质。科学家在土卫六上收集到液态氨，这让土卫六成为太阳系中最有可能存在非水基生命的候选星球。下列支持液态氨能代替水作为生命介质的理由中正确的是（ ） A. 液态氨之间可形成氢键，氢键易断裂易形成，所以液态氨是良好的溶剂 B. 液态氨的比热容比水分子大，因此有利于维持生命系统的稳定性 C. 液态氨分子一端带正电荷一端带负电荷，因此它的温度相对不容易改变 D. 液态氨有极性，带电荷的分子都容易与它结合，所以它具有流动性 【答案】B 【解析】 【详解】A、液态氨是良好溶剂的原因是其为极性分子，易与带正电荷或负电荷的分子结合，A错误； B、比热容大的物质吸收或释放相同热量时温度变化幅度更小，有利于维持生命系统温度的相对稳定，符合生命介质的要求，B正确； C、液态氨分子一端带正电一端带负电说明其为极性分子，这是其作为良好溶剂的原因，温度不易改变是比热容大的特点，二者无因果关系，C错误； D、液态氨有极性、易结合带电荷分子是其作为良好溶剂的原因，流动性与分子间氢键易断裂、可重新形成，分子能相对移动有关，二者无因果关系，D错误。 故选B。 4. 花生是我国重要的油料作物，其种子富含脂肪；玉米是我国三大粮食作物之一，其种子富含淀粉。萌发过程中，呼吸作用、脂肪与糖类的相互转换是影响种子干重的主要因素。下列叙述正确的是（ ） A. 玉米种子萌发初期，种子干重先增加后减少，使干重增加的主要元素是氧元素 B. 玉米种子萌发阶段，吸收的水主要与蛋白质、脂肪等结合，进而提高代谢速率 C. 花生种子萌发阶段，脂肪和糖类会发生大量相互转化，保证萌发的能量供应 D. 花生种子形成阶段，叶片光合作用产生的糖类可转运至种子，用于脂肪合成 【答案】D 【解析】 【详解】A、玉米种子富含淀粉，萌发初期呼吸作用消耗有机物，干重持续降低，不会出现先增加的现象，干重先增加是脂肪类种子萌发初期的特点，A错误； B、种子萌发阶段吸收的水主要以自由水形式存在，自由水比例升高可提高代谢速率，并非主要与蛋白质结合形成结合水，脂肪不会和水结合，B错误； C、花生种子萌发阶段需要分解有机物供能，仅存在脂肪大量转化为糖类的过程，不存在糖类大量转化为脂肪的过程，并非相互转化，C错误； D、花生种子形成阶段，叶片光合作用产生的糖类作为原料可转运至种子，通过代谢转化为脂肪储存，D正确。 5. 生物学实验中常用特定试剂对生物组织中的某些化合物进行鉴定。胰蛋白酶能特异性水解肽链中赖氨酸或精氨酸的羧基端肽键。下列相关叙述正确的是（ ） A. 向稀释的鸡蛋清溶液中加入胰蛋白酶充分反应后，滴加双缩脲试剂不会出现紫色 B. 滴加体积分数为50%的酒精可以洗去浮色，是因为苏丹Ⅲ染液易溶于酒精溶液 C. 依据溴麝香草酚蓝溶液颜色变化的深浅可判断酵母菌培养液中CO2的产生情况 D. 将0.1 g/mLNaOH和0.01 g/mLCuSO4混合后加入样液中，水浴加热检测还原糖 【答案】B 【解析】 【详解】A、胰蛋白酶的化学本质是蛋白质，且鸡蛋清被水解后生成的多肽也含有肽键，二者都能与双缩脲试剂反应出现紫色，A错误； B、苏丹Ⅲ染液是有机物，易溶于有机溶剂酒精，因此脂肪鉴定实验中可用体积分数为50%的酒精洗去浮色，B正确； C、溴麝香草酚蓝溶液检测CO2时的颜色变化为蓝→绿→黄，通常依据变色的快慢判断CO₂的产生速率，而非颜色深浅，C错误； D、检测还原糖的斐林试剂由0.1g/mL NaOH和0.05g/mL CuSO4等体积混合制成，D错误。 6. 科学界普遍认为生命至少要满足新陈代谢和繁殖两个条件。当科学家创造出能以自身为“种子”形成更多相似蛋白质的类朊病毒蛋白后，引发了同学们对生命起源的讨论。甲同学认为生命起源于核酸，乙同学认为生命起源于蛋白质。下列支持甲、乙同学的观点中，错误的是（ ） A. 甲：核酸由核苷酸构成，其碱基序列中蕴藏遗传信息 B. 甲：切赫和奥尔特曼发现少数RNA也具有生物催化功能，可调节某些细胞代谢 C. 乙：蛋白质由氨基酸组成，绝大多数酶是蛋白质，可参与新陈代谢 D. 乙：类朊病毒蛋白以自身为“种子”形成蛋白质，意味着蛋白质可能可以自我复制 【答案】B 【解析】 【详解】A、甲同学认为生命起源于核酸，其观点的核心是核酸具有储存遗传信息的功能。核酸由核苷酸构成，其碱基序列中蕴藏遗传信息，支持甲的观点，A正确； B、甲同学的观点强调核酸的遗传信息储存功能，而“少数RNA具有生物催化功能”属于RNA的催化作用，与核酸作为遗传物质的核心观点无关，无法支持甲的观点，B错误； C、乙同学认为生命起源于“蛋白质”，其观点的核心是蛋:白质具有催化等重要功能。蛋白质由氨基酸组成，绝大多数酶是蛋白质，可参与新陈代谢，支持乙的观点，C正确； D、乙同学的观点强调蛋白质的自我复制能力，类朊病毒蛋白以自身为“种子”形成蛋白质，表明蛋白质可能具有自我复制的能力，支持乙的观点，D正确。 7. 细胞膜成分和结构的探索历程经历了很长时间。下列说法错误的是（ ） A. 欧文顿用不同物质对植物细胞通透性进行实验，推测细胞膜有脂质成分 B. 科学家对哺乳动物红细胞的细胞膜进行化学分析，得知动物细胞膜不含胆固醇 C. 提取人的红细胞的脂质，在空气-水界面上形成的单层分子的面积是细胞表面积的2倍 D. 用磷脂分子制成的双层脂质体在运载药物时，脂溶性药物应被包在两层磷脂分子之间 【答案】B 【解析】 【详解】A、欧文顿通过大量植物细胞通透性实验，发现脂溶性物质更易通过细胞膜，根据相似相溶原理，推测细胞膜含有脂质成分，A正确； B、对哺乳动物红细胞的细胞膜进行化学分析可知，动物细胞膜的脂质包括磷脂和胆固醇，胆固醇是动物细胞膜的重要组成成分，因此“动物细胞膜不含胆固醇”的说法错误，B错误； C、人成熟红细胞没有细胞核和众多具膜细胞器，提取的脂质全部来自细胞膜的磷脂双分子层，因此在空气-水界面上铺成单层分子的面积是细胞表面积的2倍，C正确； D、磷脂分子的头部亲水、尾部疏水，两层磷脂分子之间是疏水的尾部区域，脂溶性药物可溶于疏水区域，因此脂溶性药物应被包在两层磷脂分子之间，D正确。 8. 2025年，哈佛大学首次捕捉到了神经元膜下细胞骨架自发解体—重组的动态过程。细胞骨架由微管、微丝等蛋白组成，微管抑制剂或某些药物可抑制微管的形成与解聚。下列与细胞骨架有关的叙述错误的是（ ） A. 用秋水仙素处理神经细胞后微管解聚、细胞变圆，体现了细胞骨架维持着细胞形态 B. 用药物阻断变形虫微丝的组装后伪足无法形成，体现了细胞骨架可参与细胞运动 C. 加入微管抑制剂后纺锤体形成受阻，细胞分裂停滞，体现了细胞骨架参与细胞分裂 D. 细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，支撑着细胞内的一切物质运输过程 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞骨架具有维持细胞形态的功能，微管是细胞骨架的重要组分，秋水仙素处理后微管解聚，原本正常形态的神经细胞随之变圆，证明了细胞骨架具有维持细胞形态的功能，A正确； B、伪足是变形虫完成细胞运动的结构基础，微丝是细胞骨架的组分，阻断微丝组装后伪足无法形成，可体现细胞骨架参与细胞运动的功能，B正确； C、纺锤体主要由微管构成，是细胞分裂过程中牵引染色体移动的关键结构，微管抑制剂会抑制纺锤体的形成从而导致细胞分裂停滞，说明细胞骨架参与细胞分裂，C正确； D、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，可参与细胞内的部分物质运输（如囊泡的定向运输），但并非一切物质运输都需要细胞骨架支撑，如自由扩散等跨膜运输不需要细胞骨架的参与，D错误。 9. 溶酶体是细胞内的物质降解中心，为适应细胞代谢，溶酶体通过不断地融合和分裂重塑其形态与功能。中科院发现hpo-27基因功能缺失造成线虫表皮细胞中累积大量管状溶酶体，形成管状网络。HPO-27蛋白介导溶酶体分裂的机制如下图所示，下列相关说法错误的是（ ） A. HPO-27被RAB-7招募并在膜分裂位点上自组装，介导溶酶体的裂解 B. 管状网络崩溃后内含的水解酶释放到细胞质基质，酶活性可能会降低 C. 溶酶体合成水解酶的过程离不开核糖体、内质网、高尔基体等细胞器 D. 功能正常的溶酶体分解衰老、损伤的细胞器不一定导致细胞程序性死亡 【答案】C 【解析】 【详解】A、结合野生型的过程图可知，RAB-7可招募HPO-27，HPO-27在膜分裂位点自组装后介导溶酶体缢缩裂解（分裂），A正确； B、溶酶体内为酸性环境，水解酶的最适pH呈酸性，而细胞质基质pH接近中性，因此管状网络崩溃后水解酶释放到细胞质基质，会因pH不适宜导致酶活性降低，B正确； C、溶酶体是储存水解酶的细胞器，本身不能合成水解酶；水解酶的本质为蛋白质，合成场所是核糖体，C错误； D、功能正常的溶酶体分解衰老、损伤的细胞器是细胞正常的代谢活动，可维持细胞内部环境的稳定，不一定导致细胞程序性死亡，D正确。 10. 核孔复合体是镶嵌在核膜上的巨型蛋白质机器，是细胞核与细胞质之间大分子物质运输的通道。下列有关叙述错误的是（ ） A. 核膜为双层生物膜结构，其外膜与内质网膜直接相连，上面常常附着有核糖体 B. 核膜将细胞核与细胞质分隔开，保证了细胞代谢互不干扰、生命活动高效有序 C. 核孔复合体介导的运输是有选择性的，该过程存在信号识别、需要消耗能量 D. 核孔复合体保证了核质之间大分子物质的交换，小分子不会通过核孔复合体 【答案】D 【解析】 【详解】A、核膜为双层生物膜结构，其外膜可与内质网膜直接相连，且外膜上常附着有核糖体，A正确； B、核膜可将细胞核与细胞质的区域分隔开，避免核内和细胞质内的代谢反应相互干扰，保障生命活动高效有序进行，B正确； C、核孔复合体介导的物质运输具有选择性，大分子物质通过核孔时需要经过信号识别，且该过程需要消耗能量，C正确； D、核孔复合体是核质之间大分子物质交换的主要通道，但部分小分子、离子也可以通过核孔复合体运输，并非小分子完全不能通过核孔复合体，D错误。 11. 水通道蛋白广泛存在于植物叶肉细胞和保卫细胞的细胞膜上。气孔的开闭与保卫细胞的细胞壁伸缩性、水的渗透作用密切相关，保卫细胞吸水时气孔开放，其结构如图1所示。甲同学将图1保卫细胞分别放在不同浓度的蔗糖溶液①、②、③中，气孔状态如图2中的a、b、c所示。乙同学将叶肉细胞放置于一定浓度的乙二醇溶液中，观察一段时间，并测量M值（外界溶液浓度/细胞液浓度），结果如图3所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 保卫细胞吸水的主要方式是协助扩散，水分子需与通道蛋白结合 B. 图2中，保卫细胞b吸水能力小于c；蔗糖溶液的浓度是③＞②＞① C. 图3中t0～t1阶段，细胞的吸水能力逐渐增强，t1后乙二醇进入细胞 D. 乙同学升高温度后重新测量，水分子进出达到动态平衡的时间会提前 【答案】D 【解析】 【详解】A、水分子通过水通道蛋白的运输方式为协助扩散，但通道蛋白转运物质时不需要与转运的分子结合，只有载体蛋白才会与转运物结合，A错误； B、保卫细胞吸水越多气孔越大，因此细胞液浓度b>c，吸水能力与细胞液浓度正相关，故b吸水能力大于c；外界蔗糖溶液浓度越高，细胞失水越多气孔越小，因此蔗糖溶液浓度为a对应浓度>b对应浓度>c对应浓度，B错误； C、乙二醇为脂溶性小分子，可通过自由扩散进入细胞，从t0时刻开始乙二醇就已经进入细胞，不断升高细胞液浓度，使M值下降，并非t1后才进入细胞，C错误； D、适当升高温度会加快分子热运动速率，使水分子跨膜运输、乙二醇进入细胞的速率均加快，因此水分子进出达到动态平衡的时间会提前，D正确。 12. PepT1是一种主要位于小肠上皮细胞膜上的质子依赖型转运蛋白，主要转运二肽/三肽（寡肽）。PepT1的作用机制如下图所示。已知小肠上皮细胞膜上的Na+-H+交换体（NHE）负责将细胞内H+泵出至肠腔，维持跨膜质子梯度。下列有关叙述正确的是（ ） A. 细胞膜上的钠钾泵在转运Na+、K+时，会发生转运蛋白的磷酸化与去磷酸化 B. 寡肽进入细胞的过程属于主动运输，消耗能量，PepT1承担了运输与催化功能 C. 呼吸抑制剂处理小肠上皮细胞后寡肽转运速率下降，说明该过程直接消耗ATP D. 小肠肠腔中寡肽浓度持续升高时，细胞膜上的PepT1的转运速率也不断升高 【答案】A 【解析】 【详解】A、钠钾泵是参与主动运输的转运蛋白，转运Na+、K+的过程中，ATP水解释放的磷酸基团会使钠钾泵发生磷酸化，构象改变完成Na+的转运；结合K+后钠钾泵发生去磷酸化，构象恢复完成K+的转运，过程中存在转运蛋白的磷酸化与去磷酸化，A正确； B、寡肽进入细胞依赖跨膜H+梯度的势能，属于主动运输，但PepT1仅具备转运寡肽和H+的功能，无催化功能，B错误； C、呼吸抑制剂会抑制细胞呼吸减少ATP生成，首先影响钠钾泵功能，进而导致NHE无法维持跨膜H+梯度，最终使寡肽转运速率下降，说明寡肽转运间接依赖ATP，并非直接消耗ATP，C错误； D、细胞膜上PepT1的数量有限，当寡肽浓度升高到一定程度后，转运蛋白会达到饱和状态，转运速率不再随寡肽浓度升高而上升，D错误。 13. 人类运动蛋白移动导致肌肉收缩的过程如图所示，下列有关ATP的叙述错误的是（ ） A. 运动时细胞ATP的消耗量远大于其储存量，说明ATP与ADP之间时刻不停地相互转化 B. ATP水解时，末端磷酸基团脱离、携能量与其他分子结合，释放能量 C. 能量通过ATP分子在吸能反应和放能反应之间流通，肌肉收缩需要吸收能量 D. 图中ATP在合成时，能量可来源于光能、有机物氧化分解释放的能量 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞内ATP的储存量极低，运动时ATP消耗量很大，依靠ATP与ADP之间时刻不停的快速相互转化满足能量供应，A正确； B、ATP水解时，远离腺苷的高能磷酸键断裂，末端磷酸基团脱离，释放能量，该磷酸基团可携带能量结合到其他分子上，B正确； C、ATP是细胞的能量“货币”，能量通过ATP在吸能反应和放能反应之间流通，肌肉收缩需要消耗ATP水解释放的能量，属于吸能反应，C正确； D、人类细胞不能进行光合作用，合成ATP的能量只能来自呼吸作用中有机物氧化分解释放的能量，无法利用光能，D错误。 14. 社团活动课上，老师准备了以下材料：①新鲜的鸡肝研磨液；②质量分数为3%的H2O2溶液；③淀粉酶；④质量分数为3%的淀粉溶液；⑤质量分数为3%的蔗糖溶液；⑥斐林试剂；⑦碘液。请你选择合适的材料开展探究实验，下列对应关系正确的是（ ） A. 选择③④⑦，可探究温度对淀粉酶活性的影响 B. 选择③④⑤⑦，可验证淀粉酶具有专一性 C. 选择③④⑦并补充不同pH缓冲液，可探究pH对淀粉酶活性的影响 D. 选择①②并补充冰块、温水浴锅，可探究温度对酶活性的影响 【答案】A 【解析】 【详解】A、探究温度对淀粉酶活性的实验中，温度为自变量，淀粉酶可催化淀粉水解，碘液遇淀粉变蓝，可通过蓝色深浅判断淀粉剩余量，进而反映淀粉酶活性，材料选择合理，A正确； B、验证淀粉酶专一性时，碘液只能检测淀粉是否被水解，蔗糖及其水解产物均不能和碘液发生颜色反应，无法判断淀粉酶能否催化蔗糖水解，需使用斐林试剂检测，B错误； C、淀粉在酸性条件下会自发水解，会干扰实验结果，因此不适合用淀粉酶和淀粉探究pH对酶活性的影响，C错误； D、探究温度对酶活性的实验中，温度为自变量，温度会影响酶的活性，也会影响H2O2的分解速率，无法区分实验结果中H2O2的分解速率变化是酶活性导致的，还是温度导致的，因此不能用H2O2和鸡肝研磨液中的过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响，D错误。 15. 胰脂肪酶是肠道内脂肪水解过程中的关键酶，板栗壳黄酮可调节胰脂肪酶活性进而影响人体对脂肪的吸收。酶的竞争性抑制剂与底物结构相似、非竞争性抑制剂可以与酶结合进而改变酶的空间结构。为研究板栗壳黄酮（CSF）对胰脂肪酶活性的影响，科研人员进行了下列实验。关于本实验的下列叙述中错误的是（ ） A. 由图可知，板栗壳黄酮能抑制胰脂肪酶活性并使其最适pH升高 B. 若进一步增加脂肪浓度后图1曲线Ⅱ上升与Ⅰ接近，则CSF属于非竞争性抑制剂 C. 若将pH调至8后重新进行图1实验，则A、B两点均会向下方移动并几乎重合 D. 生产实践中可开发以板栗壳黄酮为主要成分的产品用于减肥减脂 【答案】B 【解析】 【详解】A、对比曲线，加入板栗壳黄酮之后酶促反应速率整体下降，说明酶活性被抑制；图2中对照组酶活性峰值pH约7.2，加黄酮组峰值pH右移，最适pH升高，A正确； B、增大底物浓度，曲线Ⅱ能够回升接近曲线Ⅰ，这是竞争性抑制剂特点，底物浓度高可以竞争结合酶的活性部位，减弱抑制效果；非竞争性抑制剂改变酶空间结构，无论底物多高，最大反应速率都不能恢复，B错误； C、pH调至8，由图2可知两组酶活性都降到很低，因此图1中A、B两点均下移，且数值几乎重合，C正确； D、板栗壳黄酮抑制胰脂肪酶活性，减少肠道内脂肪水解，降低脂肪吸收，因此可开发减脂相关产品，D正确。 16. 玉米种子富含亲水物质，呼吸作用较强，且含有大量不稳定的脂肪，易出现发霉现象。为避免玉米种子在贮存期间霉变，常采用站秆扒皮（扒开玉米棒苞叶，直接晾晒玉米粒）、果穗悬挂贮藏等方法促进脱水。下列有关说法正确的是（ ） A. 站秆扒皮有利于紫外线使霉菌的蛋白质变性，起到灭菌作用，降低了发霉概率 B. 果穗悬挂贮藏可减少种子含水量，使线粒体内膜上的有氧呼吸第二阶段减弱 C. 若细胞呼吸时释放的CO2体积与消耗的O2体积之比小于1，则底物中可能含有脂肪 D. 无氧呼吸时，葡萄糖中的大量能量以热能散失，少量以化学能形式储存在ATP中 【答案】C 【解析】 【详解】A、站秆扒皮的作用是促进种子晾晒脱水，降低自由水含量以抑制霉菌和种子的代谢活动，降低发霉概率，但紫外线仅能起到消毒作用，无法实现灭菌，A错误； B、有氧呼吸第二阶段的场所是线粒体基质，线粒体内膜是有氧呼吸第三阶段的场所，B错误； C、糖类作为呼吸底物时，释放的CO2体积与消耗的O2体积之比为1，脂肪的氢含量远高于糖类，氧化分解时消耗的O2更多，若该比值小于1，则底物可能含有脂肪，C正确； D、无氧呼吸时葡萄糖分解不彻底，大部分能量储存在不彻底氧化产物中，仅释放的少量能量中大部分以热能散失，少量储存在ATP中，D错误。 17. 1937年，希尔在无CO2的条件下，将离体叶绿体加入到含有氧化剂Fe3+的水溶液中，光照后发现叶绿体释放O2。1963年，贾格道夫将离体叶绿体类囊体置于pH=4的酸性溶液中，平衡后迅速转移到含有ADP和Pi的pH=8的缓冲液中，在黑暗条件下检测到ATP的合成。下列有关分析错误的是（ ） A. 希尔反应中水光解的最终电子受体是Fe3+，光合作用中的最终电子受体是NADP+ B. 希尔实验证明了光合作用中水的光解和糖类的合成不是同一个化学反应 C. 希尔反应是在无CO2时进行的，证明了光合作用产生的氧气全部来自水 D. 贾格道夫实验说明只要有氢离子浓度梯度，即使在黑暗条件下也能合成ATP 【答案】C 【解析】 【详解】A、希尔反应体系中无CO2，加入的Fe3+作为氧化剂接受水光解产生的电子，是该反应的最终电子受体；正常光合作用的光反应中，水光解产生的电子最终受体是NADP+，用于生成NADPH，A正确； B、希尔实验在无CO2的条件下即可发生水的光解释放O2，而糖类合成是需要CO2参与的暗反应过程，说明二者不是同一个化学反应，B正确； C、希尔反应仅证明水的光解可以和暗反应分开进行，无法证明光合作用产生的氧气全部来自水，该结论是鲁宾和卡门通过同位素标记实验证明的，C错误； D、贾格道夫实验中，类囊体膜两侧形成氢离子浓度梯度后，黑暗条件下也合成了ATP，说明氢离子浓度梯度可以驱动ATP合成，D正确。 18. 研究发现，蓝细菌光合作用的场所是光合片层和细胞质，有氧呼吸场所是细胞膜和细胞质，其细胞结构及相关代谢过程如图所示，①～⑤表示代谢过程，a～f表示物质。羧酶体是蓝细菌里具有半透性的细胞微室，其内部包裹着CO2固定酶Rubisco。下列有关叙述错误的是（ ） A. c代表O2，e代表NADH，④表示有氧呼吸第二阶段 B. 若某时刻物质d浓度突然增加，则物质b在短时间内含量减少 C. 羧酶体的半透性可以阻止CO2逸出和O2进入，提高Rubisco周围的CO2浓度 D. ①②发生的能量转化是光能→ATP、NADPH中的化学能→有机物中的化学能 【答案】B 【解析】 【详解】A、分析题图可知，①为光反应、②为暗反应、⑤为有氧呼吸第一阶段、④为有氧呼吸第二阶段、③为有氧呼吸第三阶段；a是光反应产生的ATP和NADPH，b是暗反应产生的ADP、Pi、NADP+，c是光反应产生的O₂，d是呼吸作用产生的CO₂，e是呼吸作用产生的NADH，f是丙酮酸，A正确； B、d是CO₂，其浓度突然增加时，暗反应中CO₂固定速率加快，C₃生成量增加，C₃还原消耗的ATP、NADPH增多，生成的ADP、Pi、NADP+（即b）增多，短时间内b含量上升而非减少，B错误； C、羧酶体的半透性阻止CO₂逸出、O₂进入，可提高羧酶体内CO₂浓度，有利于Rubisco催化CO₂固定，C正确； D、①光反应将光能转化为ATP和NADPH中的活跃化学能，②暗反应将活跃化学能转化为有机物中的稳定化学能，D正确。 19. 研究人员在适宜的温度和水分条件下，对甲乙丙丁四种植物的相关生理指标进行了测量，如图所示。下列关于四种植物的说法错误的是（ ） A. 将图1中甲乙置于同一密闭玻璃罩内，甲植株将先于乙死亡 B. 将图1纵轴从O2生成速率改为CO2吸收速率，则a点左移 C. 将图2中丙丁作物间作可形成立体农业，充分利用空间、光照等资源 D. 将图2丙的外界CO2浓度适当提高，则B将左移，C将向右上方移动 【答案】B 【解析】 【详解】A、图1中O₂生成速率代表总光合速率，乙的CO₂补偿点更低，密闭玻璃罩中CO₂浓度逐渐降低，会先低于甲的CO₂补偿点，此时甲净光合速率小于0，持续消耗有机物，乙仍可维持净光合速率≥0，因此甲先死亡，A正确； B、CO₂吸收速率代表净光合速率，净光合速率=总光合速率-呼吸速率，净光合速率为0时需要总光合速率等于呼吸速率，所需CO₂浓度高于总光合速率为0时的CO₂浓度，因此曲线与横轴交点（a点）应右移，B错误； C、丙（板栗）为阳生植物，光饱和点高，适合强光环境，丁（茶树）为阴生植物，适合弱光环境，二者间作形成立体农业，可充分利用空间、光照等资源，C正确； D、适当提高丙的外界CO₂浓度，光合速率提升，较低光照即可使光合速率等于呼吸速率，因此B（光补偿点）左移；同时光饱和点升高，最大净光合速率增大，因此C（光饱和点对应点）向右上方移动，D正确。 20. 研究表明，秸秆还田能显著提高玉米产量，但不同的玉米秸秆还田方式对玉米产量的影响不同。兴趣小组以秸秆不还田为对照（CK），模拟T1～T4四种秸秆还田方式探究最优方案，为测得光合速率，兴趣小组取样每组长势相同的幼苗先暗处理1h，再光照1h测其干重变化。下列有关该实验的叙述正确的是（ ） 表 不同秸秆还田方式下的光合指标 处理 暗处理1h后干重变化/mg 光照1h后干重变化 （与暗处理前相比较）/mg 气孔导度 （mmol·m-2·s-1） 叶面积指数 CK -4 0 0.40 4.32 T1 -3.5 +2 0.41 4.77 T2 -3.5 +4 0.41 4.69 T3 -4 +4 0.42 5.08 T4 -3.5 +3 0.41 4.87 A. T3处理下作物净光合速率最高，CK组净光合速率为5mg/h B. T3处理下，24小时内光照12小时以上玉米才能正常生长 C. 秸秆还田使秸秆中的有机物被作物再次吸收，可提高产量 D. 四种还田方式主要通过影响叶面积指数影响光合速率 【答案】D 【解析】 【详解】A、暗处理1h的干重减少值为呼吸速率；光照1h后与暗处理前的干重差值为，则光照1h的净光合速率=+呼吸速率（暗处理后干重为初始值-呼吸速率，光照后干重为初始值+，二者差值为净光合1h的积累量）；则CK组呼吸速率为4mg/h，=0，净光合速率=0+4=4mg/h，不是5mg/h，A错误； B、T3组净光合速率为4+4=8mg/h（根据A项可知），呼吸速率为4mg/h，若要正常生长，需光照t小时的净积累量大于黑暗(24-t)小时的呼吸消耗量，即，解得，即光照8小时以上即可正常生长，B错误； C、作物是自养生物，不能直接吸收有机物，秸秆中的有机物需被分解者分解为无机物后才能被作物吸收利用，C错误； D、四种秸秆还田组的气孔导度差异极小，叶面积指数差异明显，且叶面积指数与光合速率整体呈正相关（CK组、T1组、T2组、T3组和T4组净光合速率分别为4、5.5、7.5、8、6.5），说明四种还田方式主要通过影响叶面积指数影响光合速率，D正确。 21. 区别理念是生物学研究的重要思维方法——通过某种手段将原本难以区分的研究对象标记开来，从而追踪其去向或作用。下列叙述没有体现区别理念的是（ ） A. 利用被3H标记的亮氨酸，研究胰腺腺泡细胞分泌蛋白的合成与运输 B. 利用抗生素抗性基因，在含抗生素的平板上区分出成功导入载体的细胞 C. 利用底物是否消耗或者产物是否生成，区分试管中的酶促反应是否发生 D. 利用红绿荧光染料标记人鼠细胞的膜蛋白，两种颜色荧光均匀分布证明膜的流动性 【答案】C 【解析】 【详解】A、利用³H标记亮氨酸，可将被标记的亮氨酸与细胞内其他未被标记的物质区分开，从而追踪分泌蛋白的合成与运输路径，体现了区别理念，A不符合题意； B、抗生素抗性基因是载体上的标记基因，成功导入载体的细胞具有抗生素抗性，可与未成功导入载体的细胞区分开，体现了区别理念，B不符合题意； C、通过检测底物消耗或产物生成判断酶促反应是否发生，没有对研究对象进行特殊标记以区分原本难以区分的对象，未体现区别理念，C符合题意； D、用红绿荧光分别标记人、鼠细胞的膜蛋白，可将两种来源的膜蛋白区分开，通过荧光分布情况证明细胞膜的流动性，体现了区别理念，D不符合题意。 22. 植物体细胞杂交是将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并培育成完整植株的技术。下列有关叙述错误的是（ ） A. 制备原生质体时可使用蜗牛消化道提取液，原因是其中含有纤维素酶、果胶酶等 B. 诱导原生质体融合时可采用聚乙二醇融合法，融合后的细胞即为所需的杂种细胞 C. 杂种细胞形成的标志是再生出新的细胞壁，在此之前要维持培养液等渗或略高渗 D. 植物体细胞杂交技术的原理包括细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，蜗牛以植物为食，其消化道提取液含纤维素酶、果胶酶，可分解细胞壁制备原生质体，A正确； B、聚乙二醇可诱导原生质体融合，但融合后会产生同种细胞融合的细胞、异种细胞融合的杂种细胞等多种类型，需经筛选才能获得所需杂种细胞，B错误； C、再生出新的细胞壁是杂种细胞形成的标志，未形成细胞壁的原生质体无细胞壁保护，低渗溶液中会吸水涨破，因此需维持培养液等渗或略高渗，C正确； D、植物体细胞杂交技术包括植物细胞融合和植物组织培养，植物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，D正确。 23. 2025年，我国科学家利用单细胞测序技术优化了传统杂交瘤筛选流程，成功制备出针对多种病原体的高亲和力单克隆抗体。下列关于单克隆抗体制备的叙述中正确的是（ ） A. 用特定抗原多次免疫小鼠是为使小鼠能产生更多抗体和B淋巴细胞 B. 诱融后获得多种细胞，用特定的选择培养基筛选可得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞 C. 可将抗体检测阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中增殖或在体外条件下大规模培养 D. 制备的单克隆抗体可用于合成ADC，其中的抗体能够发挥杀伤靶细胞的作用 【答案】C 【解析】 【详解】A、用特定抗原多次免疫小鼠，可刺激机体产生更强的体液免疫应答，得到更多能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误； B、诱融后体系中存在未融合细胞、同种核融合细胞、杂交瘤细胞，特定选择培养基只能筛选出所有杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞不一定能产生所需的特定抗体，还需经过抗体阳性检测才能筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、抗体检测阳性的杂交瘤细胞同时具备无限增殖和分泌特定抗体的能力，可通过注射到小鼠腹腔内增殖（从腹水中提取抗体）或体外大规模培养（从培养液中提取抗体）的方式获得大量单克隆抗体，C正确； D、ADC（抗体药物偶联物）中抗体的作用是特异性识别并结合靶细胞，发挥靶向导向功能，真正杀伤靶细胞的是与抗体偶联的药物，D错误。 24. 基因工程中常用到的重组载体，包括克隆载体和表达载体等，前者主要用于目的基因的扩增、保存或测序，后者还可使目的基因表达。下列叙述错误的是（ ） A. 通过PCR获取目的基因的关键是根据目的基因两端的核苷酸序列设计适宜的引物 B. 基因工程构建的重组载体必须含有复制原点、启动子、终止子、目的基因、标记基因 C. 使用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞前，后者不能有T-DNA中的标记基因 D. 鉴定基因工程是否成功可利用PCR技术、抗原-抗体杂交技术、个体性状鉴定等方法 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据该序列设计特异性引物，引物是PCR特异性扩增的关键，A正确； B、重组载体包括克隆载体和表达载体，克隆载体仅用于目的基因的扩增、保存等，不需要启动子、终止子（仅表达载体需要启动子、终止子以实现目的基因的表达），因此并非所有重组载体都必须含有启动子和终止子，B错误； C、标记基因的作用是筛选成功导入目的基因的受体细胞，若受体细胞本身就含有T-DNA中的标记基因，则无法区分是否导入成功，因此导入前受体细胞不能有该标记基因，C正确； D、鉴定基因工程是否成功，可通过PCR技术检测目的基因是否插入或转录、抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出对应蛋白质，也可在个体水平鉴定是否出现目标性状，D正确。 25. 下列关于生物工程技术的叙述，错误的是（ ） A. 设计试管婴儿时，需在胚胎移植前进行遗传学诊断，以降低个体遗传病风险 B. 克隆牛的诞生证明了动物体细胞核具有全能性，电刺激法可激活重构胚 C. 乳腺生物反应器属于转基因动物，需将基因表达载体导入乳腺中特异性表达 D. 工厂化生产植物次生代谢物时，需在MS培养基上添加比例适宜的植物激素 【答案】C 【解析】 【详解】A、设计试管婴儿为了降低后代患遗传病的风险，需要在胚胎移植前进行遗传学诊断，筛选无目标遗传病的胚胎进行移植，A正确； B、克隆牛是通过动物体细胞核移植技术培育得到，该技术证明了动物体细胞核具有全能性，电刺激是激活重构胚的常用方法之一，B正确； C、乳腺生物反应器的制备，需要将携带乳腺特异性表达启动子的目的基因表达载体导入动物受精卵，待受精卵发育为成体后，目的基因仅在乳腺细胞中特异性表达，C错误； D、工厂化生产植物次生代谢物依赖植物组织培养技术，MS培养基是植物组织培养的常用基础培养基，添加比例适宜的生长素和细胞分裂素可诱导愈伤组织形成、增殖，满足细胞培养获取次生代谢物的需求，D正确。 第Ⅱ卷（非选择题，共50分） 二、非选择题（本题包括4个小题，共50分。把答案填在答题卡中的横线上。） 26. 南极大磷虾是一类分布于南极海域的甲壳动物，其体内的脂肪酶可能具有独特的适冷特性。科研人员从南极大磷虾虾头中分离纯化出一种脂肪酶，并对其酶性质进行了研究，部分结果如图所示。回答下列问题： （1）科学研究中通常通过加入高浓度中性盐分离获得蛋白质。为提取南极大磷虾消化道中的脂肪酶，研究员向虾头样液中加入硫酸铵后进行离心，收集___________（填“上清液”或“沉淀物”）纯化脂肪酶。该酶催化脂肪水解的作用机理是___________。 （2）据图1分析，南极大磷虾脂肪酶的最适温度是___________。若研究者据图1分析认为该酶具有低温脂肪酶的催化特性，请你说明理由：___________。 （3）除了温度、离子浓度外，影响酶促反应速率的因素还有________和酶浓度等，其中酶浓度是通过影响________进而影响酶促反应速率。为验证图2结果，研究员进一步实验，结果如图3所示，若曲线①是在最适条件下进行反应，则曲线④可能添加了________，曲线③可能添加了________，与前两者不同的是，曲线②可能添加了________。若Zn2+通过与胰脂肪酶的非活性位点结合发挥作用，请解释其如何影响胰脂肪酶相对活性：________。 【答案】（1） ①. 沉淀物 ②. 降低脂肪水解反应的活化能 （2） ①. 35℃ ②. 该脂肪酶在5～25℃下仍具有较高且相对稳定的酶活性，因此具有低温脂肪酶的催化特性 （3） ①. 底物浓度、pH ②. 酶与底物的接触 ③. Zn2+（锌离子） ④. 低浓度的Ca2+（低于0.4 mmol/L的Ca2+） ⑤. 脂肪 ⑥. Zn2+通过结合胰脂肪酶的非活性位点、改变酶的空间结构实现降低胰脂肪酶的相对活性 【解析】 【小问1详解】 脂肪酶化学本质是蛋白质，题干信息可通过加入高浓度中性盐分离获得蛋白质，向虾头样液中加入硫酸铵后进行离心，收集沉淀物纯化脂肪酶；酶催化作用的机理是降低化学反应的活化能，即降低脂肪水解反应的活化能。 【小问2详解】 图1可知，南极大磷虾脂肪酶的最适温度是35℃，由于5~25℃时，脂肪酶的相对活性为40%~50%，即脂肪酶在5～25℃下仍具有较高且相对稳定的酶活性，可见具有低温脂肪酶的催化特性。 【小问3详解】 酶活性、酶与底物之间的接触面积都影响酶促反应速率，而温度、pH等影响酶活性，酶浓度与底物浓度影响接触面积，可见除了温度、离子浓度外，影响酶促反应速率的因素还有底物浓度、pH和酶浓度等，其中酶浓度是通过影响酶与底物的接触进而影响酶促反应速率。曲线①是在最适条件下进行反应，但曲线④到达化学反应平衡点的时间延长了，曲线③到达化学反应平衡点的时间缩短了，图2可知，钙离子可促进酶活性，而锌离子可抑制酶活性，则曲线④可能添加了锌离子，曲线③可能添加了钙离子（低于0.4 mmol/L的Ca2+），与前两者不同的是，曲线②改变了化学反应平衡点，只有底物可以改变化学反应的平衡点，曲线②可能添加了底物脂肪。酶在发挥作用过程中，酶的活性部位会发生空间结构的改变（先变再恢复），Zn2+通过与胰脂肪酶的非活性位点结合，会导致脂肪酶的活性部位无法发生空间结构改变（改变酶的空间结构），从而降低脂肪酶的相对活性。 27. 苹果酸是生物体内重要的有机酸，参与多重代谢过程。为探究苹果酸对工业大麻细胞代谢的影响，科研人员以“云麻7号”为材料，设置0～4000 mg/L五个苹果酸浓度梯度，分别测定生长指标及光合作用指标。部分实验结果如表所示。回答下列问题： 苹果酸浓度 mg/L 叶绿素含量 mg/g 净光合速率 μmolCO2/（m2·s） 气孔导度 μmolH2O/（m2·s） 胞间CO2浓度 μmolCO2/（m2·s） 蒸腾速率 μmolH2O/（m2·s） 0.00 32.87 3.53 0.08 216 4.88 1000.00 36.20 5.88 0.17 178 5.03 2000.00 41.63 8.21 0.35 148 4.53 3000.00 38.60 6.19 0.19 173 4.95 4000.00 32.53 3.24 0.07 216 5.33 （1）该实验的自变量是__________；对照组应使用__________进行处理。为排除无关变量的干扰，实验过程中除自变量外，其他条件应__________。 （2）据表1分析，随着苹果酸浓度的升高，工业大麻的净光合速率呈__________趋势。当苹果酸浓度为2000 mg/L时，净光合速率达到最大值，此时，叶肉细胞中产生ATP的场所有__________。 （3）苹果酸是C4植物光合作用途径中重要的CO2载体，具体过程如下图所示。C4植物具有的PEP羧化酶能催化CO2和_________生成C4，并由苹果酸运输至_________供碳反应利用。与小球藻等C3植物相比，C4植物光合效率更高的主要原因是_________。 （4）除在光合作用中发挥重要作用外，苹果酸还是呼吸作用的中间产物，参与有氧呼吸第二阶段。请分析补充适宜浓度的苹果酸促进工业大麻生长的可能原因：_________。 【答案】（1） ①. 苹果酸的浓度 ②. 等量蒸馏水（0 mg/L苹果酸溶液） ③. 保持相同且适宜 （2） ①. 先升后降 ②. 类囊体薄膜、细胞质基质、线粒体 （3） ①. PEP ②. 维管束鞘细胞 ③. C4植物能将低浓度的CO2转化为苹果酸，将其运送至维管束鞘细胞，提高CO2固定效率 （4）苹果酸作为呼吸作用的中间产物，可直接参与有氧呼吸为细胞生长提供更多能量 【解析】 【小问1详解】 自变量是实验中人为改变的变量，本实验目的是探究苹果酸对工业大麻细胞代谢的影响，人为设置了0～4000 mg/L五个苹果酸浓度梯度，因此自变量为苹果酸的浓度。对照组不做实验变量处理，用等量蒸馏水（0mg/L苹果酸溶液）处理。根据单一变量原则，除自变量以外，其他无关变量需要保持相同且适宜，避免无关变量干扰实验结果。 【小问2详解】 观察表格净光合速率数据：3.53（0）→5.88（1000）→8.21（2000）→6.19（3000）→3.24（4000），数值先增大后减小，因此净光合速率呈先升后降的趋势。 苹果酸浓度2000mg/L时，净光合速率＞0，叶肉细胞同时进行光合作用和有氧呼吸：光合作用光反应在类囊体薄膜产生ATP；有氧呼吸第一阶段在细胞质基质、第二、三阶段在线粒体（线粒体基质、线粒体内膜）产生ATP，因此产生ATP的场所有类囊体薄膜、细胞质基质、线粒体。 【小问3详解】 在叶肉细胞中，PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）在PEP羧化酶的催化下和低浓度CO₂结合生成C₄（苹果酸）；苹果酸运输到维管束鞘细胞的叶绿体中分解释放CO₂，供卡尔文循环（C₃途径）利用。相比于C₃植物，C₄植物的PEP羧化酶对CO₂亲和力更高，可以富集低浓度CO₂到维管束鞘细胞，提高暗反应CO₂浓度，减少光呼吸，提升CO₂固定效率，光合效率更高。 【小问4详解】 有氧呼吸第二阶段发生在线粒体基质，苹果酸可以作为中间代谢物进入有氧呼吸过程；补充适宜浓度苹果酸，能够加快有氧呼吸进程，产生更多ATP，为细胞分裂、物质合成等生长过程提供充足的能量，从而促进工业大麻生长。 28. 过量施用有机磷农药敌敌畏（DDVP）会造成土壤持久性污染，威胁生态环境和人类健康，微生物降解是修复有机磷污染土壤的重要途径。研究人员从某长期受有机磷农药污染的农田土壤中取样，分离获得一株优势降解菌，编号为DDW-1，流程如下图所示。回答下列问题： （1）据图分析，分离该细菌时①～⑥培养基应将_________作为唯一碳源，培养基中含有Na2HPO4、KH2PO4的作用是_________（答出两点）。将微生物依次转接到①～⑤培养基的目的是_________，依据物理性质分类，⑥培养基属于_________培养基。 （2）某同学通过稀释涂布平板法对⑥中的活菌进行计数，将样品稀释105倍后取0.1 mL分别涂布3个平板，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。若计数平板上的菌落数分别为48、58、53，则每毫升原培养液中的活菌数约为_________个。相比较稀释涂布平板法，计数时还可选用_________，该方法计数所得结果_________（填“偏大”或“偏小”），原因是_________。 （3）研究员拟设计实验验证菌株DDW-1降解敌敌畏的酶属于胞内酶还是胞外酶，请你完善实验方案： ①取含DDW-1菌株的液体培养基进行离心，分别收集_________并置于2只试管中，编号甲和乙； ②甲组：胞外提取液； 乙组：用缓冲液洗涤后破碎细胞，离心取上清液，获得_________； ③取等量的②获得的甲乙两组液体，加入等量的DDVP溶液； ④一段时间后，分别测定甲、乙两组中敌敌畏的残余量。 结果预测：若_________，则为胞内酶；反之则为胞外酶。 【答案】（1） ①. 敌敌畏 ②. 提供微生物生存所需的磷元素，调节培养基的pH，参与维持培养基的渗透压 ③. 扩大能够分解DDVP的菌种的数量，筛选出能耐受高浓度DDVP的菌株 ④. 固体 （2） ①. 5.3×107 ②. （显微镜）直接计数法 ③. 偏大 ④. 统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和 （3） ①. 上清液、沉淀 ②. 胞内提取液 ③. 若乙组敌敌畏残余量明显少于甲组 【解析】 【小问1详解】 要分离敌敌畏降解菌，①~⑤为选择培养基，需将敌敌畏（DDVP）作为唯一碳源，只有可利用 DDVP 的微生物才能增殖。培养基中的Na2HPO4、KH2PO4，一方面可为微生物生长提供磷元素，另一方面可充当缓冲物质，维持培养基 pH 稳定，还可参与维持培养基的渗透压。将微生物依次转接至 DDVP 浓度不断升高的培养基，能够扩大能够分解DDVP的菌种的数量，筛选出能耐受高浓度DDVP的菌株。⑥号培养基用于平板划线纯化，属于固体培养基。 【小问2详解】 先计算平板平均菌落数：(48+58+53)÷3=53，每毫升原液活菌数=53÷0.1×105=5.3×107个。除稀释涂布平板法，还可以用（显微镜）直接计数法，该方法计数时无法区分活菌与死菌，死菌也会被统计，因此计数结果偏大。 【小问3详解】 本实验目的区分降解酶是胞内酶还是胞外酶。离心培养物后，上清液含有胞外分泌的物质，沉淀为菌体细胞，因此分别收集上清液和菌体沉淀。甲组用上清得到胞外提取液；乙组将菌体洗涤破碎，离心取上清获得胞内提取液。分别加入等量 DDVP，检测残留量。若是胞内酶，则只有胞内提取液具备降解能力，表现为乙组敌敌畏残余量明显少于甲组。 29. CRISPR/Cas9是一种高效基因编辑工具。外泌体是一类由细胞分泌的囊泡，可携带蛋白质、核酸等物质进行细胞间物质运输和信息传递。为实现对肝脏疾病的精准基因治疗，科研人员构建了一种能靶向肝脏递送CRISPR/Cas9的工程外泌体。基因表达载体的构建如图1所示，外泌体的制备如图2所示。（Cas9蛋白能精准剪辑sgRNA所识别的靶基因，L-C基因是外泌体膜蛋白基因与能特异性识别肝细胞膜蛋白的基因的融合基因）回答下列问题： （1）据图1、2分析可知，获取目的基因时，需要将Cas9基因和L-C基因进行融合，目的是_________。据图1分析，为实现步骤②，引物2和引物3在碱基序列上应具有的特点是_________。若融合后的目的基因在转录时以β链为模板，为使融合后的目的基因与质粒正向连接，设计引物时应分别在引物1和引物4上连接限制酶_________的识别序列。 （2）基因表达载体上的启动子的作用是_________。为便于筛选，实际操作时，科研人员会将红色荧光蛋白基因与Cas9基因进行融合并与同一个启动子重组，相比较潮霉素抗性基因，红色荧光蛋白基因作为标记基因的优点是_________。 （3）培养导入了基因表达载体的受体细胞时要定期更换培养液，目的是_________。据图2可知，离心后，应从试管的_________（填“上清液”或“沉淀物”）中获得外泌体。为检测外泌体是否具有Cas9可用_________进行抗原抗体检测，也可采集外泌体总RNA进行_________获得cDNA，利用PCR法检测是否具有sgRNA，阳性组即可进行体内安全性检测。 【答案】（1） ①. 使融合后的基因表达产物既能让Cas9被外泌体高效包裹又能特异性识别肝细胞 ②. 存在互补序列，遵循碱基互补配对原则 ③. PacI和XhoI （2） ①. RNA聚合酶特异性识别并结合的部位，驱动目的基因的转录过程 ②. 既能筛选出导入了重组质粒的受体细胞，又能根据是否有红色荧光判断目的基因是否正常表达 （3） ①. 清除细胞代谢废物，防止细胞代谢物积累对自身造成危害 ②. 上清液 ③. 抗Cas9抗体 ④. 逆转录 【解析】 【小问1详解】 Cas9蛋白能精准剪辑sgRNA所识别的靶基因，L-C基因是外泌体膜蛋白基因与能特异性识别肝细胞膜蛋白的基因的融合基因，将Cas9基因和L-C基因进行融合，目的是使融合后的基因表达产物既能让Cas9被外泌体高效包裹又能特异性识别肝细胞；Cas9基因和L-C基因进行融合，PCR 在扩增两个基因时，两段 PCR 产物依靠引物 2、3 互补区域退火延伸，实现 Cas9 与 L-C 基因融合，即引物2和引物3在碱基序列上应具有的特点是存在互补序列，遵循碱基互补配对原则；目的基因需要插入载体的启动子下游区域，根据载体上的限制酶分布情况，切割载体时，应该选择Pac I和Xho I，Hind Ⅲ位于启动子上游区域不能用，EcoR I会把抗性基因切割不能用，为使融合后的目的基因与质粒正向连接，目的基因两端需要添加Pac I和Xho I，融合后的目的基因在转录时以β链为模板，设计引物时应分别在引物1和引物4上连接限制酶Pac I和Xho I的识别序列。 【小问2详解】 启动子是RNA聚合酶特异性识别并结合的部位，能驱动基因转录过程；标记基因种类很多，如抗性基因、荧光蛋白基因等，相比较潮霉素抗性基因，红色荧光蛋白基因作为标记基因的优点是既能筛选出导入了重组质粒的受体细胞，又能根据是否有红色荧光判断目的基因是否正常表达。 【小问3详解】 培养动物细胞时需要无菌无毒的环境，无毒需要定期更换培养液；培养导入了基因表达载体的受体细胞时要定期更换培养液，目的是清除细胞代谢废物，防止细胞代谢物积累对自身造成危害（毒害细胞）；外泌体是一类由细胞分泌的囊泡，据图2可知，离心后，应从试管的上清液中获得外泌体。抗原与抗体能够特异性结合，为检测外泌体是否具有Cas9可用抗Cas9抗体进行抗原-抗体检测，也可采集外泌体总RNA进行逆转录获得cDNA，利用PCR法检测是否具有sgRNA，阳性组即可进行体内安全性检测。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $