河南省郑州市2025—2026学年高二下学期期末考试生物试卷

郑州市2025—2026学年下期期末考试 高中二年级生物参考答案 一、选择题（本题包括25个小题，每小题只有一个选项符合题意。每小题2分，共50分 ) 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D C B D B B B D C D 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 D A D A B C C B 夕 D 题号 21 22 23 24 25 答案 C ⊙ ⊙ B O 二、非选择题（除注明的外， 每空均为1分，共50分。) 26.(11分) (1)沉淀物 降低脂肪水解反应的活化能 (2)35C 该脂肪酶在5~25℃下仍具有较高且相对稳定的酶活性，因此具有低温脂肪酶的催化 特性（答案合理即可得分） (3)底物浓度、pH(答出任意一项即可得分)酶与底物的接触Zn+(锌离子) 低浓度的Ca2+(低于0.4mmol/L的Ca2+)脂肪 Z+通过结合胰脂肪酶的非活性位点、改变酶的空间结构实现降低胰脂肪酶的相 对活性(2分) 27.(12分) (1)苹果酸的浓度等量蒸馏水(0gL苹果酸溶液)保持相同且适宜 (2)先升后降类囊体薄膜、细胞质基质、线粒体(2分，答全可得2分) (3)PEP维管束鞘细胞 C4植物能将低浓度的C0转化为苹果酸，将其运送至维管束鞘细胞，提高CO2固定 效率(2分，合理即可得分) (4)苹果酸作为呼吸作用的中间产物，可直接参与有氧呼吸为细胞生长提供更多能量 (2分) 28.(13分) (1)敌敌畏提供微生物生存所需的磷元素，调节培养基的H,参与维持培养基的渗 透压(2分，任答出两点即可得分)扩大能够分解DDVP的菌种的数量，筛选出能 耐受高浓度DDVP的菌株(2分) 固体 (2)5.3×10?(显微镜)直接计数法偏大统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和 (3)①上清液、沉淀②胞内提取液 若乙组敌敌畏残余量明显少于甲组 29.（14分) (1)使融合后的基因表达产物既能让Cs9被外体高效包裹又能特异性识别肝细胞(2 分)存在互补序列，遵循碱基互补配对原则（2分)hoI和PacI(2分) (2)RNA聚合酶特异性识别并结合的部位，驱动目的基因的转录过程(2分) 既能筛选出导入了重组质粒的受体细胞，又能根据是否有红色荧光判断目的基因 是否正常表达(2分) (3)清除细胞代谢废物，防止细胞代谢物积累对自身造成危害上清液抗Cs9抗体 逆转录2025-2026学年下期期末考试 高二生物试题卷（一) 注意事项 本试卷分第I卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。考试时间为90分钟，满 分100分。考生应首先阅读答题卡上的文字信息，然后在答题卡上作答，在试卷上作答 无效。交卷时只交答题卡。 第I卷（选择题，共50分） 一、选择题（本题包括25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有，个 选项符合题意。) 1.科研人员培养小鼠肝细胞时，发现培养液被微生物污染，镜检观察到支原 体、大肠杆菌和酵母菌等。下列相关叙述正确的是 A.污染前的培养液中所有的细胞属于一个种群 B.污染后的培养液中所有的细菌属于一个群落 C.小鼠细胞和支原体均具有DNA、蛋白质，但二者并不都存在DNA-蛋白 质复合物 D.酵母菌和大肠杆菌均有细胞壁，但抑制细胞壁合成的青霉素却不能有效 杀灭酵母菌 2.《本草纲目》记载苦瓜具有明目解毒的功能。下列相关叙述正确的是 A.苦瓜中富含镁、铁、钾等大量元素，可以补充人体所需的矿物质 B.苦瓜中富含的纤维素可以促进肠胃蠕动、帮助消化，提供能量 C.苦瓜籽中特有的苦瓜蛋白属于生物大分子，以碳链为基本骨架 D.组成苦瓜的元素和化合物在自然界都能找到，但相对含量大不相同 3.水是生命的介质。科学家在土卫六上收集到液态氨，这让土卫六成为太阳 系中最有可能存在非水基生命的候选星球。下列支持液态氨能代替水作为生命介 质的理由中正确的是 A.液态氨之间可形成氢键，氢键易断裂易形成，所以液态氨是良好的溶剂 B.液态氨的比热容比水分子大，因此有利于维持生命系统的稳定性 C.液态氨分子一端带正电荷一端带负电荷，因此它的温度相对不容易改变 D.液态氨有极性，带电荷的分子都容易与它结合，所以它具有流动性 4.花生是我国重要的油料作物，其种子富含脂肪：玉米是我国三大粮食作物 之一，其种子富含淀粉。萌发过程中，呼吸作用、脂肪与糖类的相互转换是影响 种子干重的主要因素。下列叙述正确的是 高二生物试题卷第1页（共12页） A.玉米种子萌发初期，种子干重先增加后减少，使干重增加的主要元素是 氧元素 B.玉米种子萌发阶段，吸收的水主要与蛋白质、脂肪等结合，进而提高代 谢速率 C.花生种子萌发阶段，脂肪和糖类会发生大量相互转化，保证萌发的能量 供应 D.花生种子形成阶段，叶片光合作用产生的糖类可转运至种子，用于脂肪 合成 5.生物学实验中常用特定试剂对生物组织中的某些化合物进行鉴定。胰蛋白 酶能特异性水解肽链中赖氨酸或精氨酸的羧基端肽键。下列相关叙述正确的是 A.向稀释的鸡蛋清溶液中加入胰蛋白酶充分反应后，滴加双缩脲试剂不会 出现紫色 B.滴加体积分数为50%的酒精可以洗去浮色，是因为苏丹Ⅱ染液易溶于酒 精溶液 C.依据溴麝香草酚蓝溶液颜色变化的深浅可判断酵母菌培养液中CO,的产 生情况 D.将0.1g/nLNaOH和0.01g/mLCuSO4混合后加入样液中，水浴加热检测 还原糖 6.科学界普遍认为生命至少要满足新陈代谢和繁殖两个条件。当科学家创造 出能以自身为“种子”形成更多相似蛋白质的类阮病毒蛋白后，引发了同学们对 生命起源的讨论。甲同学认为生命起源于核酸，乙同学认为生命起源于蛋白质。 下列支持甲、乙同学的观点中，错误的是 A.甲：核酸由核苷酸构成，其碱基序列中蕴藏遗传信息 B.甲：切赫和奥尔特曼发现少数RNA也具有生物催化功能，可调节某些 细胞代谢 C.乙：蛋白质由氨基酸组成，绝大多数酶是蛋白质，可参与新陈代谢 D.乙：类朊病毒蛋白以自身为“种子”形成蛋白质，意味着蛋白质可能可 以自我复制 7.细胞膜成分和结构的探索历程经历了很长时间。下列说法错误的是 A.欧文顿用不同物质对植物细胞通透性进行实验，推测细胞膜有脂质成分 B.科学家对哺乳动物红细胞的细胞膜进行化学分析，得知动物细胞膜不含 胆固醇 C.提取人的红细胞的脂质，在空气-水界面上形成的单层分子的面积是细胞 表面积的2倍 D.用磷脂分子制成的双层脂质体在运载药物时，脂溶性药物应被包在两层 高二生物试题卷第2页（共12页） 磷脂分子之间 8.2025年，哈佛大学首次捕捉到了神经元膜下细胞骨架自发解体一重组的动 态过程。细胞骨架由微管、微丝等蛋白组成，微管抑制剂或某些药物可抑制微管 的形成与解聚。下列与细胞骨架有关的叙述错误的是 A.用秋水仙素处理神经细胞后微管解聚、细胞变圆，体现了细胞骨架维持 着细胞形态 B.用药物阻断变形虫微丝的组装后伪足无法形成，体现了细胞骨架可参与 细胞运动 C.加入微管抑制剂后纺锤体形成受阻，细胞分裂停滞，体现了细胞骨架参 与细胞分裂 D.细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，支撑着细胞内的一切物质运 输过程 9.溶酶体是细胞内的物质降解中心，为适应细胞代谢，溶酶体通过不断地融 合和分裂重塑其形态与功能。中科院发现po-27基因功能缺失造成线虫表皮细胞 中累积大量管状溶酶体，形成管状网络。HPO-27蛋白介导溶酶体分裂的机制如 下图所示，下列相关说法错误的是 野生型 hpo-27功能缺失型 HPO27自组装 管状网络 >丝缩和裂解 A.HPO-27被RAB-7招募并在膜分裂位点上自组装，介导溶酶体的裂解 B.管状网络崩溃后内含的水解酶释放到细胞质基质，酶活性可能会降低 C.溶酶体合成水解酶的过程离不开核糖体、内质网、高尔基体等细胞器 D.功能正常的溶酶体分解衰老、损伤的细胞器不一定导致细胞程序性死亡 10.核孔复合体是镶嵌在核膜上的巨型蛋白质机器，是细胞核与细胞质之间大 分子物质运输的通道。下列有关叙述错误的是 A.核膜为双层生物膜结构，其外膜与内质网膜直接相连，上面常常附着有 核糖体 B.核膜将细胞核与细胞质分隔开，保证了细胞代谢互不干扰、生命活动高 效有序 C.核孔复合体介导的运输是有选择性的，该过程存在信号识别、需要消耗 能量 D.核孔复合体保证了核质之间大分子物质的交换，小分子不会通过核孔复 合体 高二生物试题卷第3页（共12页） 11.水通道蛋白广泛存在于植物叶肉细胞和保卫细胞的细胞膜上。气孔的开闭 与保卫细胞的细胞壁伸缩性、水的渗透作用密切相关，保卫细胞吸水时气孔开放， 其结构如图1所示。甲同学将图1保卫细胞分别放在不同浓度的蔗糖溶液①、②、 ③中，气孔状态如图2中的、b、c所示。乙同学将叶肉细胞放置于一定浓度的 乙二醇溶液中，观察一段时间，并测量M值（外界溶液浓度/细胞液浓度），结 果如图3所示。下列相关叙述正确的是 M值 保卫细胞 t 时间 图1 图2 图3 A.保卫细胞吸水的主要方式是协助扩散，水分子需与通道蛋白结合 B.图2中，保卫细胞b吸水能力小于c:蔗糖溶液的浓度是③>②>① C.图3中tt1阶段，细胞的吸水能力逐渐增强，t1后乙二醇进入细胞 D.乙同学升高温度后重新测量，水分子进出达到动态平衡的时间会提前 12.PepT1是一种主要位于小肠上皮细胞膜上的质子依赖型转运蛋白，主要转 运二肽/三肽（寡肽）。PpT1的作用机制如下图所示。己知小肠上皮细胞膜上的 Na-H交换体(NHE)负责将细胞内H+泵出至肠腔，维持跨膜质子梯度。下列 有关叙述正确的是 二肽/三肽 肠腔 Na epT 水角 ADP+PI A.细胞膜上的钠钾泵在转运Na、K+时，会发生转运蛋白的磷酸化与去磷 酸化 B.寡肽进入细胞的过程属于主动运输，消耗能量，PepT1承担了运输与催 化功能 C.呼吸抑制剂处理小肠上皮细胞后寡肽转运速率下降，说明该过程直接消 耗ATP 高二生物试题卷第4页（共12页） D.小肠肠腔中寡肽浓度持续升高时，细胞膜上的PepT1的转运速率也不 断升高 13.人类运动蛋白移动导致肌肉收缩的过程如图所示，下列有关ATP的叙述 错误的是 运动蛋白 蛋白质发生移动 用于肌肉收缩 A.运动时细胞ATP的消耗量远大于其储存量，说明ATP与ADP之间时 刻不停地相互转化 B.ATP水解时，末端磷酸基团脱离、携能量与其他分子结合，释放能量 C.能量通过ATP分子在吸能反应和放能反应之间流通，肌肉收缩需要吸 收能量 D.图中ATP在合成时，能量可来源于光能、有机物氧化分解释放的能量 14.社团活动课上，老师准备了以下材料：①新鲜的鸡肝研磨液；②质量分数 为3%的HO2溶液：③淀粉酶；④质量分数为3%的淀粉溶液：⑤质量分数为3% 的蔗糖溶液：⑥斐林试剂：⑦碘液。请你选择合适的材料开展探究实验，下列对应 关系正确的是 A.选择③④⑦，可探究温度对淀粉酶活性的影响 B.选择③④⑤⑦，可验证淀粉酶具有专一性 C.选择③④⑦并补充不同pH缓冲液，可探究pH对淀粉酶活性的影响 D.选择①②并补充冰块、温水浴锅，可探究温度对酶活性的影响 15.胰脂肪酶是肠道内脂肪水解过程中的关键酶，板栗壳黄酮可调节胰脂肪酶 活性进而影响人体对脂肪的吸收。酶的竞争性抑制剂与底物结构相似、非竞争性 抑制剂可以与酶结合进而改变酶的空间结构。为研究板栗壳黄酮(C$F)对胰脂 肪酶活性的影响，科研人员进行了下列实验。关于本实验的下列叙述中错误的是 曲线IpH=7.4 A 对照组 0.021f ●对照组◇-加入板栗壳黄酮组 加入板栗壳黄酮组 €0.018 曲线ⅡpH=7.4 塑0.015 0.012 密0.009 0.006 0.003 脂肪浓度 6.8 图1 图2 0/ 高二生物试题卷第5页（共12页） A.由图可知，板栗壳黄酮能抑制胰脂肪酶活性并使其最适pH升高 B.若进一步增加脂肪浓度后图1曲线Ⅱ上升与I接近，则CSF属于非竞 争性抑制剂 C.若将pH调至8后重新进行图1实验，则A、B两点均会向下方移动并 几乎重合 D.生产实践中可开发以板栗壳黄酮为主要成分的产品用于减肥减脂 16.玉米种子富含亲水物质，呼吸作用较强，且含有大量不稳定的脂肪，易出 现发霉现象。为避免玉米种子在贮存期间霉变，常采用站秆扒皮（扒开玉米棒苞 叶，直接晾晒玉米粒)、果穗悬挂贮藏等方法促进脱水。下列有关说法正确的是 A.站秆扒皮有利于紫外线使霉菌的蛋白质变性，起到灭菌作用，降低了发 霉概率 B.果穗悬挂贮藏可减少种子含水量，使线粒体内膜上的有氧呼吸第二阶段 减弱 C.若细胞呼吸时释放的CO2体积与消耗的O2体积之比小于1，则底物中 可能含有脂肪 D.无氧呼吸时，葡萄糖中的大量能量以热能散失，少量以化学能形式储存在 ATP中 17.1937年，希尔在无CO2的条件下，将离体叶绿体加入到含有氧化剂Fe 的水溶液中，光照后发现叶绿体释放O2.1963年，贾格道夫将离体叶绿体类囊 体置于p=4的酸性溶液中，平衡后迅速转移到含有ADP和Pi的pH=8的缓冲液 中，在黑暗条件下检测到ATP的合成。下列有关分析错误的是 A.希尔反应中水光解的最终电子受体是Fet,光合作用中的最终电子受体 是NADP B.希尔实验证明了光合作用中水的光解和糖类的合成不是同一个化学反应 C.希尔反应是在无CO2时进行的，证明了光合作用产生的氧气全部来自水 D.贾格道夫实验说明只要有氢离子浓度梯度，即使在黑暗条件下也能合成 ATP 18.研究发现，蓝细菌光合作用的场所是光 合片层和细胞质，有氧呼吸场所是细胞膜和细 H0 胞质，其细胞结构及相关代谢过程如图所示， ①⑤表示代谢过程，af表示物质。羧酶体是 蓝细菌里具有半透性的细胞微室，其内部包裹 着CO2固定酶Rubisco。下列有关叙述错误的是 C6H1206 A.c代表O2,e代表NADH,④表示有 氧呼吸第二阶段 高二生物试题卷第6页（共12页） B.若某时刻物质d浓度突然增加，则物质b在短时间内含量减少 C.羧酶体的半透性可以阻止CO2逸出和O2进入，提高Rubisco周围的CO, 浓度 D.①②发生的能量转化是光能→ATP、NADPH中的化学能→有机物中的 化学能 19.研究人员在适宜的温度和水分条件下，对甲乙丙丁四种植物的相关生理指 标进行了测量，如图所示。下列关于四种植物的说法错误的是 吸 丙（板栗） 量 丁（茶树） B CO 光照强度 C0浓度 释放量 图1 图2 A.将图1中甲乙置于同一密闭玻璃罩内，甲植株将先于乙死亡 B.将图1纵轴从O2生成速率改为CO2吸收速率，则a点左移 C.将图2中丙丁作物间作可形成立体农业，充分利用空间、光照等资源 D.将图2丙的外界CO2浓度适当提高，则B将左移，C将向右上方移动 20.研究表明，秸秆还田能显著提高玉米产量，但不同的玉米秸秆还田方式对 玉米产量的影响不同。兴趣小组以秸秆不还田为对照(CK),模拟T1~T4四种 秸秆还田方式探究最优方案，为测得光合速率，兴趣小组取样每组长势相同的幼 苗先暗处理1h,再光照1h测其干重变化。下列有关该实验的叙述正确的是 表1不同秸秆还田方式下的光合指标 处理 暗处理1h后干重变化 光照1h后干重变化 气孔导度 叶面积指数 /mg (与暗处理前相比较) (mmolmmol·m-2. /mg s-1) CK 0 0.40 4.32 T1 -3.5 +2 0.41 4.77 T2 -3.5 +4 0.41 4.69 T3 -4 +4 0.42 5.08 T4 -3.5 +3 0.41 4.87 A.T3处理下作物净光合速率最高，CK组净光合速率为5gh B.T3处理下，24小时内光照12小时以上玉米才能正常生长 C.秸秆还田使秸秆中的有机物被作物再次吸收，可提高产量 D.四种还田方式主要通过影响叶面积指数影响光合速率 21.区别理念是生物学研究的重要思维方法一—通过某种手段将原本难以区分 的研究对象标记开来，从而追踪其去向或作用。下列叙述没有体现区别理念的是 高二生物试题卷第7页（共12页） A.利用被H标记的亮氨酸，研究胰腺腺泡细胞分泌蛋白的合成与运输 B.利用抗生素抗性基因，在含抗生素的平板上区分出成功导入载体的细胞 C.利用底物是否消耗或者产物是否生成，区分试管中的酶促反应是否发生 D.利用红绿荧光染料标记人鼠细胞的膜蛋白，两种颜色荧光均匀分布证明 膜的流动性 22.植物体细胞杂交是将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞， 并培育成完整植株的技术。下列有关叙述错误的是 A.制备原生质体时可使用蜗牛消化道提取液，原因是其中含有纤维素酶、 果胶酶等 B.诱导原生质体融合时可采用聚乙二醇融合法，融合后的细胞即为所需的 杂种细胞 C.杂种细胞形成的标志是再生出新的细胞壁，在此之前要维持培养液等渗 或略高渗 D.植物体细胞杂交技术的原理包括细胞膜具有一定的流动性和植物细胞 的全能性 23.2025年，我国科学家利用单细胞测序技术优化了传统杂交瘤筛选流程， 成功制备出针对多种病原体的高亲和力单克隆抗体。下列关于单克隆抗体制备的 叙述中正确的是 A.用特定抗原多次免疫小鼠是为使小鼠能产生更多抗体和B淋巴细胞 B.诱融后获得多种细胞，用特定的选择培养基筛选可得到能产生特定抗体 的杂交瘤细胞 C.可将抗体检测阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中增殖或在体外条件 下大规模培养 D.制备的单克隆抗体可用于合成ADC,其中的抗体能够发挥杀伤靶细胞 的作用 24.基因工程中常用到的重组载体，包括克隆载体和表达载体等，前者主要 用于目的基因的扩增、保存或测序，后者还可使目的基因表达。下列叙述错误的 是 A.通过PCR获取目的基因的关键是根据目的基因两端的核苷酸序列设计 适宜的引物 B.基因工程构建的重组载体必须含有复制原点、启动子、终止子、目的基 因、标记基因 C.使用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞前，后者不能有T-DNA中 的标记基因 D.鉴定基因工程是否成功可利用PCR技术、抗原-抗体杂交技术、个体性 高二生物试题卷第8页（共12页） 状鉴定等方法 25.下列关于生物工程技术的叙述，错误的是 A.设计试管婴儿时，需在胚胎移植前进行遗传学诊断，以降低个体遗传病 风险 B.克隆牛的诞生证明了动物体细胞核具有全能性，电刺激法可激活重构胚 C.乳腺生物反应器属于转基因动物，需将基因表达载体导入乳腺中特异性 表达 D.工厂化生产植物次生代谢物时，需在MS培养基上添加比例适宜的植物 激素 第Ⅱ卷（非选择题，共50分) 二、非选择题（本题包括4个小题，共50分。把答案填在答题卡中的横线上。） 26.(11分)南极大磷虾是一类分布于南极海域的甲壳动物，其体内的脂肪 酶可能具有独特的适冷特性。科研人员从南极大磷虾虾头中分离纯化出一种脂肪 酶，并对其酶性质进行了研究，部分结果如图所示。回答下列问题： 120 120% 100% 100 60% 40 40 20% ·一锰离子 意一毫离日 201 ·一钙离子 152025303540455055606570 0.0 0.10.20.3 0.4 0.5 10 温度（℃） 离子浓度(mmol/L) 图1 图2 (1)科学研究中通常通过加入高浓度中性盐分离获得蛋白质。为提取南极大 磷虾消化道中的脂肪酶，研究员向虾头样液中加入硫酸铵后进行离心，收集 (填“上清液”或“沉淀物”)纯化脂肪酶。该酶催化脂肪水解的作用机 理是 (2)据图1分析，南极大磷虾脂肪酶的最适温度是 。 若研究者据 图1分析认为该酶具有低温脂肪酶的催化特性，请你说明理由： 高二生物试题卷第9页（共12页） 脂 ② 肪酸生成量 ③ ④ 时间 图3 (3)除了温度、离子浓度外，影响酶促反应速率的因素还有 和酶浓 度等，其中酶浓度是通过影响 进而影响酶促反应速率。为验证图2结果， 研究员进一步实验，结果如图3所示，若曲线①是在最适条件下进行反应，则曲 线④可能添加了 ，曲线③可能添加了 与前两者不同的是，曲线 ②可能添加了 。若Z+通过与胰脂肪酶的非活性位点结合发挥作用，请 解释其如何影响胰脂肪酶相对活性： 27.（12分)苹果酸是生物体内重要的有机酸，参与多重代谢过程。为探究 苹果酸对工业大麻细胞代谢的影响，科研人员以“云麻7号”为材料，设置04000 gL五个苹果酸浓度梯度，分别测定生长指标及光合作用指标。部分实验结果如 表所示。回答下列问题： 苹果酸浓 叶绿素含 净光合速率 气孔导度 胞间CO2浓度 蒸腾速率 度mgL 量mg/g umolCO2/ umolH2O/ umolCO2/ umolH2O/ (1m2s) (m·s) (m2s) (1m2s) 0.00 32.87 3.53 0.08 216 4.88 1000.00 36.20 5.88 0.17 178 5.03 2000.00 41.63 8.21 0.35 148 4.53 3000.00 38.60 6.19 0.19 173 4.95 4000.00 32.53 3.24 0.07 216 5.33 (1)该实验的自变量是 对照组应使用 进行处理。为排除无 关变量的干扰，实验过程中除自变量外，其他条件应 (2)据表1分析，随着苹果酸浓度的升高，工业大麻的净光合速率呈 趋 势。当苹果酸浓度为2000gL时，净光合速率达到最大值，此时，叶肉细胞中 的产生ATP的场所有 (3)苹果酸是C4植物光合作用途径中重要的CO2载体，具体过程如下图所 示。C4植物具有的PEP羧化酶能催化CO2和 生成C4,并由苹果酸运输至 供碳反应利用。与小球藻等C3植物相比，C4植物光合效率更高的主要原 因是 高二生物试题卷第10页（共12页） 叶肉细胞 维管束鞘细胞 叶绿体 绿体 C →苹果酸 苹果酸 C,途径 C,途径 低 C02 ADP ATP PEP PEP ∠丙酮酸 丙酮酸 淀粉 (4)除在光合作用中发挥重要作用外，苹果酸还是呼吸作用的中间产物，参 与有氧呼吸第二阶段。请分析补充适宜浓度的苹果酸促进工业大麻生长的可能原 因： 28.(13分)过量施用有机磷农药敌敌畏(DDVP)会造成土壤持久性污染， 威胁生态环境和人类健康，微生物降解是修复有机磷污染土壤的重要途径。研究 人员从某长期受有机磷农药污染的农田土壤中取样，分离获得一株优势降解菌， 编号为DDW-1,流程如下图所示。回答下列问题： 接种至含 依次转接至含200mg/L、 在⑥号无 取 100mg/LDDVP 300mg/L、400mg/L、 机盐培养 置 的①号无机盐液 500mg/L的②-⑤号无机 基上平板 体培养基 盐液体培养基 划线 彩 (1)据图分析，分离该细菌时①⑥培养基应将 作为唯一碳源，培养 基中含有Na2HPO4、KHPO4的作用是 (答出两点)。将微生物依次转接 到①~⑤培养基的目的是 ,依据物理性质分类，⑥培养基属于 培 养基。 (2)某同学通过稀释涂布平板法对⑥中的活菌进行计数，将样品稀释105倍 后取0.1L分别涂布3个平板，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。若计数 平板上的菌落数分别为48、58、53，则每毫升原培养液中的活菌数约为个。 相比较稀释涂布平板法，计数时还可选用 该方法计数所得结果 (填“偏大”或“偏小”)，原因是 (3)研究员拟设计实验验证菌株DDW-1降解敌敌畏的酶属于胞内酶还是胞 外酶，请你完善实验方案： ①取含DDW-1菌株的液体培养基进行离心，分别收集 并置于2只 试管中，编号甲和乙： ②甲组：胞外提取液； 乙组：用缓冲液洗涤后破碎细胞，离心取上清液，获得 ③取等量的②获得的甲乙两组液体，加入等量的DDVP溶液： ④一段时间后，分别测定甲、乙两组中敌敌畏的残余量。 结果预测：若 ，则为胞内酶反之则为胞外酶。 29.(14分)CRISPR/Cs9是一种高效基因编辑工具。外泌体是一类由细胞分 高二生物试题卷第11页（共12页） 必的囊泡，可携带蛋白质、核酸等物质进行细胞间物质运输和信息传递。为实现对 肝脏疾病的精准基因治疗，科研人员构建了一种能靶向肝脏递送CRISPR/Cs9的工 程外泌体。基因表达载体的构建如图1所示，外泌体的制备如图2所示。(Cs9 蛋白能精准剪辑SeRNA所识别的靶基因，L-C基因是外泌体膜蛋白基因与能特异性 识别肝细胞膜蛋白的基因的融合基因)回答下列问题： 1-4代表引物1-引物4 1 Cas9 13 L-C 重组 转染 ① 启动子 Pac I HandⅢ EcoR I 888 2 色盛 潮露素 3知 8 单克隆细胞筛 抗性基因 EcoR I ③ 图1 图2 (1)据图1、2分析可知，获取目的基因时，需要将Cas9基因和L-C基因 进行融合，目的是 。据图1分析，为实现步骤②，引物2和引物3在碱基 序列上应具有的特点是 若融合后的目的基因在转录时以B链为模板，为 使融合后的目的基因与质粒正向连接，设计引物时应分别在引物1和引物4上连 接限制酶 的识别序列。 (2)基因表达载体上的启动子的作用是。为便于筛选，实际操作时， 科研人员会将红色荧光蛋白基因与Cs9基因进行融合并与同一个启动子重组，相 比较潮霉素抗性基因，红色荧光蛋白基因作为标记基因的优点是 (3)培养导入了基因表达载体的受体细胞时要定期更换培养液，目的 是」 。据图2可知，离心后，应从试管的 (填“上清液”或“沉淀 物”)中获得外泌体。为检测外泌体是否具有Cas9可用 进行抗原抗体检 测，也可采集外泌体总RNA进行 获得cDNA,利用PCR法检测是否具有 SgRNA,阳性组即可进行体内安全性检测。 高二生物试题卷第12页（共12页）