精品解析：福建省厦门市第六中学2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题

厦门六中2022级高二4月考 生物 满分：100分考试时间：75分钟 一、选择题40分（本题共16小题，1-12题每题2分，13-16题每题4分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的） 1. 下图1是果酒和果醋制作的简易装置，图2是果酒或果醋制作过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ） A. 制作果酒时，葡萄的处理步骤为：去梗→清洗→灭菌→榨汁→装瓶 B. 果酒发酵时，气阀a和气阀b应同时处于打开或关闭状态 C. 果酒发酵阶段，若开错气阀，可能会导致发酵液溢出 D. 果醋发酵阶段，发酵液中糖类充足时，醋酸菌进行④过程 【答案】C 【解析】 【详解】A、制作果酒时，需利用葡萄皮表面的野生型酵母菌发酵，不需要灭菌，且正确处理步骤为清洗→去梗→榨汁→装瓶，先去梗再清洗易造成葡萄破损、增加杂菌污染概率，A错误； B、果酒发酵为酵母菌无氧呼吸过程，需要保持无氧环境，因此进气阀a应全程关闭，发酵产生的CO₂需要定期打开排气阀b排出，二者不需要同时打开或关闭，B错误； C、果酒发酵阶段会产生大量CO₂，瓶内压强较高，气阀a的导管深入发酵液，若错误打开气阀a，发酵液会在压强作用下溢出，C正确； D、果醋发酵时，糖类充足的条件下，醋酸菌直接将葡萄糖分解为醋酸，对应图2的⑤过程；④过程是糖源不足时，醋酸菌将酒精转化为醋酸的过程，D错误。 2. 泡菜中亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物,泡菜制作过程中亚硝酸盐峰值一般出现在第5天。现用不同体积分数的食醋对泡菜进行处理,测定其亚硝酸盐的含量变化,结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 本实验亚硝酸盐峰值出现在第3天,推测原因可能为本实验的温度更为适宜 B. 不同体积分数的食醋会影响亚硝酸盐的峰值，但对峰值出现的时间无影响 C. 食醋体积分数越大,对泡菜中亚硝酸盐产生的抑制效果越明显 D. 健康饮食应选择食用在此条件下酿制10天左右的泡菜 【答案】C 【解析】 【分析】题图分析：在1、2、3号坛中，亚硝酸盐的含量变化都表现为先增加后下降的趋势，其中在第三天亚硝酸盐含量最高，此后逐渐下降，在第10天左右降为0。在泡菜腌制的初期，坛内环境有利于硝酸盐还原菌的繁殖，这些细菌可以促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随着腌制时间的增加，乳酸菌也大量繁殖，对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用，使其生长繁殖受影响，造成泡菜中亚硝酸盐含量又有所下降。 【详解】A、根据题干“泡菜制作过程中亚硝酸盐峰值一般出现在第5天”，而本实验亚硝酸盐峰值出现在第3天，推测原因可能为本实验温度更为适宜，A正确； B、题图显示，本实验亚硝酸盐峰值出现的时间均为第3天，说明不同体积分数的食醋会影响亚硝酸盐的峰值，但对峰值出现的时间无影响，B正确； C、分析题图可知，图中体积分数为0.60%的食醋对泡菜中亚硝酸盐产生的抑制效果最明显，根据实验结果不能说明食醋体积分数越大,对泡菜中亚硝酸盐产生的抑制效果越明显，C错误； D、图中显示，酿制10天左右的泡菜中亚硝酸盐的含量基本为0，所以健康饮食应选择食用在此条件下酿制10天左右的泡菜，D正确。 故选C。 3. 甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ） 粉状硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100ml MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ + + + + - + + + Ⅱ + + + - + + + + Ⅲ + + + + + + + + A. 甲、乙、丙都是异养微生物 B. 甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物 C. 甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物 D. 甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物 【答案】D 【解析】 【分析】选择培养基：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 【详解】Ⅰ培养基缺少无N源，而甲能在此培养基中生长，说明甲能固氮，属于固氮微生物；Ⅱ培养基中缺少C源，而乙能在此培养基中生长，说明乙能合成有机物，属于自养微生物；丙是不能在I、Ⅱ培养基生长，可以在Ⅲ培养基生长，因此是异养微生物。 故选D。 4. 某实验小组利用滤膜法检测饮料中微生物的数量，原理是将待测样品通过微孔滤膜过滤富集后，再将滤膜置于培养基上培养，根据滤膜上的菌落数推算出样品中微生物的数量。过程如图所示。 下列说法错误的是（ ） A. 实验用到滤膜和水样都需要提前灭菌处理 B. 应选取菌落数为30~300的平板进行计数 C. 统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少 D. 滤膜孔径过大可能导致平板上长不出菌落 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数渐减少，最后可能形成单个菌落；②将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、实验用到滤膜需要提前灭菌处理，水样不能灭菌，A错误； B、对微生物进行计数时，为了保证结果准确，通常选择菌落数在30~300的平板进行计数，B正确； C、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，导致统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，C正确； D、滤膜孔径过大，微生物可能没有被过滤出来，因而可能导致平板上长不出菌落，D正确。 故选A。 5. 紫草宁具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。图1是运用二级细胞悬浮培养法培养紫草细胞制备紫草宁的流程，图2记录了过程②中紫草细胞产量、紫草宁产量随着培养时间发生的变化。下列叙述正确的是（ ） A. 图1流程中所使用的培养皿、培养瓶、镊子及紫草外植体等均要进行灭菌处理 B. 图1中的①过程需要给予适宜的光照，以诱导脱分化 C. 图1中的②过程表示悬浮培养，使用的是固体培养基 D. 由图2可知，限制紫草宁产量的原因是紫草细胞的数量和培养时间 【答案】D 【解析】 【分析】在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。 灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 外植体用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30 min后，立即用无菌水清洗2~3次。 【详解】A、图1流程中所使用的培养皿、培养瓶、镊子等均要进行灭菌处理、紫草外植体需要消毒，不需要灭菌处理，A错误； B、脱分化过程中不能给予光照，否则会影响愈伤组织的形成，B错误； C、图1中的②过程表示悬浮培养，使用的是液体培养基，C错误； D、由图2可知，随着培养天数增加，紫草宁产量逐渐增加；并且紫草细胞产量与紫草宁产量呈正相关，因此可以看出限制紫草宁产量的原因是紫草细胞的数量和培养时间，D正确。 故选D。 6. 花椰菜（2n=18）易患黑腐病导致减产，黑芥（2n=16）则有较好的黑腐病抗性。下图是科研人员培育具有黑腐病抗性的花椰菜植株m、n和s的过程，已知植株m、n和s均含有花椰菜的全部染色体。下列相关叙述错误的是（ ） A. ①过程需用酶解法处理，融合的原生质体需要具有再生细胞壁的能力 B. 对黑芥进行紫外线处理可能会使黑芥细胞发生染色体变异 C. ②过程是植物组织培养，获得的杂种植株含有两个染色体组 D. ③过程需接种黑腐病菌从而筛选获得具有抗黑腐病的植株m、n、s 【答案】C 【解析】 【详解】A、①过程为植物原生质体融合，首先需用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁获得原生质体，融合后的原生质体只有再生出细胞壁，才能进一步进行植物组织培养获得植株，A正确； B、紫外线属于诱变因素，处理黑芥可能引发其染色体结构或数目变异，这也是后续杂种植株染色体总数少于18+16=34的原因，B正确； C、②过程是植物组织培养，杂种植株含有花椰菜的全部染色体（2个染色体组，共18条），还含有黑芥的部分染色体，因此染色体组数大于2，C错误； D、本实验目的是获得抗黑腐病的花椰菜，因此③过程接种黑腐病菌，可筛选出具有抗性的植株m、n、s，D正确。 7. 培养基是微生物、植物组织和动物细胞生长繁殖需要的营养基质。下列有关这三类培养基及其特点的说法错误的是（ ） A. 三类培养基都含有无机盐，添加特定营养物的培养基可用于选择培养 B. 植物组织培养的培养基中要添加特定植物激素才能诱导试管苗形成 C. 培养动物细胞的培养基中不能添加凝固剂，但要添加适量抗生素 D. 这三类培养基中都需要添加有机物作为碳源，且在接种前都应高温灭菌 【答案】D 【解析】 【分析】选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激素。 【详解】A、许多无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动都有重要作用，因此培养微生物、植物组织和动物细胞的培养基中都要加入无机盐，添加特定营养物的培养基可用于选择培养，如添加尿素作为唯一氮源可用于筛选尿素分解菌，A正确； B、植物激素可调节细胞的生长、分裂和分化，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，因此植物组织培养的培养基中要添加特定植物激素才能诱导试管苗形成，B正确； C、培养动物细胞的培养基一般是液体培养基，不能添加凝固剂，但要添加适量抗生素，以防止杂菌污染，C正确； D、若培养的微生物是自养微生物，则不需要添加有机物作为碳源，D错误。 故选D。 8. 利用工业废甲醇作为碳源可培养特定种类的酵母，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程。有关叙述正确的是（　　） A. 若需要调节培养基的pH，则应在培养基灭菌后进行 B. 玻璃器皿、金属用具和培养基等选择干热灭菌法 C. 步骤③、④过程中使用的培养基均以甲醇作为唯一的碳源 D. 步骤③中将温度下降至30℃左右的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后再倒置培养 【答案】C 【解析】 【分析】据图分析，①称量土样，里面含有需要分离的酵母菌；②表示梯度稀释，③④表示平板划线法，进行纯化培养。 【详解】A、调节培养基的pH需在培养基灭菌前进行，A错误； B、培养基需要采用高压蒸汽灭菌，B错误； C、步骤③、④过程是分离纯化能利用甲醇的酵母，因此应使用均以甲醇作为唯一的碳源的培养基，C正确； D、在步骤③中将培养基温度冷却到50℃倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养，若温度下降至30℃左右培养基已经凝固，无法倒出，D错误。 故选C。 9. 下图1表示植物激素X和植物激素Y的浓度比对未分化细胞群变化情况的影响，图2为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N）培育高产耐酸植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出根 B. ①是利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁的过程，此过程应在低渗溶液中进行 C. ②是在植物激素X与Y的浓度比为1的培养基上诱导杂种细胞发生脱分化的过程 D. 植物丙是六倍体可育植株，其成功培育说明植物甲和乙不存在生殖隔离 【答案】C 【解析】 【分析】在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。因此图中激素Y是生长素，激素X是细胞分裂素。 【详解】A、激素Y是生长素，激素X是细胞分裂素，当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出芽，A错误； B、植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，酶具有专一性，故可用纤维素酶和果胶酶去细胞壁，但此过程应在等渗溶液中进行，如果在低渗溶液中进行会导致原生质体吸水膨胀甚至涨破，B错误； C、当植物激素X与Y的浓度比为1时，未分化的细胞群经分裂形成愈伤组织，也就是杂种细胞的脱分化的过程，C正确； D、根据题意可知，某种耐酸植物甲有四个染色体组，高产植物乙有两个染色体组，因此丙植物体细胞中有6个染色体组，丙是可育的，但甲和乙之间仍存在生殖隔离，D错误。 故选C。 10. 2019年1月，中国科学家首次利用CRISPR/Cas9技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。并通过体细胞克隆技术，获得5只生物节律紊乱的猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示（①②表示操作过程）。下列说法错误的是（ ） A. 在核移植操作前，应对成纤维细胞进行动物细胞培养 B. ①是利用显微操作技术去核，去核前需要先将采集的卵母细胞培养至MⅡ时期 C. ②可以通过电融合法使两细胞融合，形成重组胚 D. 该技术得到的敲除 BMAL1基因的克隆猕猴的遗传物质与猕猴甲相同 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件营养：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基，称为合成培养基。（通常需要加入血清等一些天然成分）无菌、无毒的环境：添加抗生素温度、pH和渗透压：36.5±0.5℃ 7.2~7.4。气体环境：O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。 动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、在核移植操作前，应将成纤维细胞置于适宜条件下进行动物细胞培养，A正确； B、①是利用显微操作技术去核，去核前需要先将采集的卵母细胞培养至MⅡ时期，MⅡ时期细胞具备受精能力，B正确； C、②可以通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重组胚，C正确； D、该技术得到的敲除 BMAL1基因的克隆猕猴的遗传物质主要来自猕猴甲，少量来自卵母细胞细胞质，D错误。 故选D。 11. 干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），培养iPS细胞得到的眼结膜组织可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法不正确的是（ ） A. 导入的基因具有促使体细胞恢复分裂能力的作用 B. 利用iPS细胞获得眼结膜组织时，应加入分化抑制因子 C. 利用iPS细胞治疗人类疾病理论上可避免免疫排斥反应 D. iPS细胞可在一定程度上避免胚胎干细胞涉及的伦理问题 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞，iPS与ES细胞一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。 【详解】A、根据题文，导入的基因能促使已分化的体细胞成为诱导多能干细胞（iPS细胞），体细胞无分裂能力，而干细胞是一类有分裂能力的细胞，故导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力，A正确； B、iPS可分化为多种细胞，加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，B错误； C、iPS细胞可以来自于病人自身，诱导成的组织进行移植，可以避免免疫排斥反应，C正确； D、iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞，只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，没有伦理学的问题，D正确。 故选B。 12. 下表细胞工程技术应用中各组所选择的实验材料及材料特点与实验目的匹配错误的是（ ） 组别 实验目的 实验材料 材料特点 1 克隆高产奶牛 次级卵母细胞与体细胞 次级卵母细胞去核留质 2 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变 3 培育西红柿-马铃薯超级杂种 花粉粒 易于获取，易于组织培养 4 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥 A. 1和2 B. 2和3 C. 3和4 D. 1和4 【答案】B 【解析】 【分析】卵母细胞适于作为受体细胞，因为卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。愈伤组织细胞分化程度低，全能性较高，细胞分裂能力强。花粉粒能用于单倍体育种，但不能用于植物体细胞杂交。 【详解】克隆动物用次级卵母细胞作为受体细胞，因为卵细胞大，营养丰富，且细胞质物质能有效调控核发育，1组正确；培育脱毒草莓时，应选用根尖或茎尖的材料，选材的原因是茎尖含病毒很少，甚至不含毒，但诱发突变不是选材的原因，2组错误；培育番茄—马铃薯超级杂种植株，应选用两种植物的体细胞，不能选用花粉粒，3组错误；烧伤患者的皮肤移植，可以选用自己的生发层细胞，分裂能力强，不会发生排斥反应，4组正确。 综上所述，2和3错误，B符合题意。 故选B。 13. 新冠病毒抗原检测试剂盒可以作为核酸检测的补充手段，用于特定人群的筛查。它的外观如图A所示，只需要将采集制备的样液滴在点样口（S）处，15分钟后，若T线和C线处同时显示横杠即阳性，要即时隔离、核查就医。它的内部结构如B所示（胶体金法），结合垫，T线和C线处分布有不同种类抗体，其中抗体1、3均能与待测抗原结合，抗体2能与抗体4结合，如果有被聚集沉淀的胶体金则会显色，出现横杠。下列关于该抗原检测试剂盒的推测，不正确的是（ ） A. 使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性 B. 抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是不同的 C. 点样后，结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散 D. T线C线均不显示横杠即为阴性，没有感染病毒 【答案】D 【解析】 【分析】根据题干可知，T线和C线处同时显示横杠，即阳性，若样品中不含病毒，样品经过结合垫时由于不存在病毒抗原，则不存在抗原抗体特异性结合，显色组分仍会随样品继续向前运动，由于不存在病毒抗原，抗体3不能与待测抗原结合，故在T线不会显色即不显示横杠；在到达C线时，抗体2能与抗体4结合从而显色，C线出现横杠，即为阴性。 【详解】A、单克隆抗体的特异性强，灵敏度高，使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性，A正确； B、抗体1、3均能与待测抗原结合，抗体1位于结合垫位置，先与抗原结合，抗体3位于T线位置，后与抗原结合，抗体1、3均能与待测抗原（同一种抗原）结合，说明抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是不同的，B正确； C、吸水垫在右侧，点样后，结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散，C正确； D、据分析可知，T线（抗体3与抗原结合）不会显色即不显示横杠，抗体2能与抗体4结合（C线出结合），如果有被聚集沉淀的胶体金则会显色，出现横杠，即C线变红显示横杠，即为阴性，没有感染病毒，D错误。 故选D。 14. CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验。 下列叙述不正确的是（　　） A. 多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞 B. 步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合 C. 经筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞 D. 对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体 【答案】D 【解析】 【分析】 1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】A、多次进行步骤①的目的是加强免疫，获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞，A正确； B、诱导动物细胞融合可以利用聚乙二醇或灭活的病毒，B正确； C、经两次筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞，C正确； D、对照组应在巨噬细胞＋肿瘤细胞共培养体系中不加入单克隆抗体，D错误。 故选D。 15. 某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如右图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 大肠杆菌抗链霉素的性状是由链霉素的选择作用引起的 B. 1号和5号采用平板划线法将菌种接种在相应选择培养基上 C. 4号与8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大 D. 该实验缺乏对照实验，无法确定抗链霉素性状属于可遗传的变异 【答案】C 【解析】 【分析】1．影印培养法实质上是使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法。通过影印培养法，可以从在非选择性条件下生长的细菌群体中，分离出各种类型的突变种。 2．基因突变是随机的、不定向的，自然选择是定向的，微生物的抗药性突变是自发产生的，环境只能对抗药性突变进行选择。 【详解】A、大肠杆菌是原核生物，其可遗传变异只有基因突变，大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的，A错误； B、1号和5号采用稀释涂布平板法将菌种接种在相应选择培养基上，B错误； C、4号与8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大，C正确； D、本实验有对照实验，无链霉素的培养基为对照，可以确定抗链霉素性状属于可遗传的变异，D错误。 故选C。 【点睛】本题以“影印培养法”为主线，考查了微生物的培养等知识点，解题关键是对影印培养法操作步骤的理解，并从实验现象中分析得出大肠杆菌抗链霉素性状的产生与是否接触链霉素无关。 16. 人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①~④表示相关的操作，EcoRI、BamHI为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。下列有关叙述正确的是（ ） 限制酶 识别序列及切割位点 EcoRI G↓AATTC BamHI G↓GATCC A. 过程①所需的两种引物中分别加上GAATTC和GGATCC序列有利于后续操作 B. 构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行复制 C. 过程③利用的是T-DNA的特性将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA中 D. 过程④需利用液体培养基进行培养，可通过PCR技术检测干扰素基因是否表达 【答案】A 【解析】 【分析】Ti质粒是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种核区DNA外的自主复制的环形双链DNA分子。是一种存在于根癌土壤杆菌中可引起双子叶植物根部致癌的质粒。细菌从双子叶植物的受伤根部侵入根部细胞后，最后在其中裂解，释放出Ti质粒，其上的T-DNA片段会与植物细胞的核基因组整合。 【详解】A、结合图示可知，PCR的产物用EcoR I和BamHI来酶切，因此在基因的引物两侧加上识别序列GAATTC和GGATCC，A正确； B、启动子负责与RNA聚合酶结合启动表达，终止子负责终止表达，因此构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行表达，B错误； C、过程③是利用T-DNA的特性将目的基因导入到农杆菌中，农杆根瘤菌是原核生物，无染色体，C错误； D、过程④需利用固体培养基进行培养，可通过分子杂交技术检测干扰素基因是否表达，D错误。 故选A。 二、非选择题60分（本题共4小题） 17. 以我国科学家为主的科研团队将OSNL（即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写）导入黑羽鸡胚成纤维细胞（CEFs），诱导其重编程为诱导多能干细胞（iPS），再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞（iPGCs），然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。 （1）CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用____________处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加____________等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。 （2）体外获取OSNL的方法有____________（答出2种）。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和____________等。其中启动子是____________的部位，驱动目的基因的表达。 （3）iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是______________________。 （4）该实验流程中用到的生物技术有______________________（答出2点即可）。 【答案】（1） ①. 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 ②. 动物血清 （2） ①. PCR技术、人工合成法 ②. 终止子 ③. RNA聚合酶识别和结合 （3）基因的选择性表达 （4）基因工程、动物细胞培养 【解析】 【小问1详解】 动物细胞间依靠蛋白质类细胞外基质粘连，剪碎鸡胚组织后，使用胰蛋白酶 / 胶原蛋白酶分解细胞间粘连蛋白，使组织分散为单细胞悬液；不能用胃蛋白酶，胃蛋白酶最适pH为酸性，细胞培养液为中性环境。合成培养基能提供糖、氨基酸、无机盐等基础营养，但缺少细胞生长必需的未知生长因子、激素、细胞因子；因此需要添加动物血清这类天然成分，满足细胞增殖需求。 【小问2详解】 获取目的基因（OSNL）的两种常用方法① PCR技术：已有少量模板DNA时，体外大量扩增目的基因；② 人工合成法：基因序列已知、片段较短时，直接化学合成DNA片段。此外基因组文库 /cDNA文库法也可。完整基因表达载体必备元件载体五要素：目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。启动子位于目的基因上游，是RNA聚合酶识别、结合的位点，RNA聚合酶结合后启动转录。 【小问3详解】 iPS 细胞分化为 iPGCs，二者遗传物质完全相同，但细胞形态、结构、功能存在差异。根本原因是在细胞分化过程中，基因选择性表达，不同细胞开启、关闭不同基因，合成的mRNA与蛋白质种类不同，最终造成细胞性状差异。 【小问4详解】 实验用到的技术①基因工程（转基因技术）：将OSNL四个外源基因导入鸡胚成纤维细胞 CEFs，构建表达载体、转化细胞；②动物细胞培养：体外培养CEFs、iPS细胞、iPGCs，全程依赖动物细胞培养技术。 18. 杨梅营养价值高，但其鲜果不耐储存，以新鲜杨梅酿制的杨梅酒具有开胃消食、利尿排毒等多种功效。杨梅酒的品质很大程度上取决于所选择的酵母性能。科研人员为挖掘某杨梅主产区的酵母资源，筛选出酒精转化率高、酒精耐受力强的优质杨梅酿酒酵母，进行以下研究。请回答下列问题： （1）图中过程②③④⑤所用培养基为适于酵母菌生长的YPD培养基，其成分包括1%酵母膏、2%蛋白胨、2%葡萄糖等，其中蛋白胨提供的主要营养有____________（写出两点）。与过程②所用培养基相比，过程③所用培养基中还添加了____________（成分）。 （2）过程③以10倍梯度稀释时，先分别向A、B、C三支试管中加入____________，再依次加入酵母菌培养液的上清液或稀释液1mL，并摇匀。取多个稀释倍数的酵母菌培养液0.1mL分别接种到多个平板上，其中在105稀释倍数下的4个平板，菌落数分别是142、155、165、138，则1mL培养液中含有的酵母菌数量约为____________个。 （3）如果划线区域a上几乎无菌落生长，原因可能是______________________。 （4）分离获得的酵母菌还需经过多级筛选才能获得理想菌株。科研人员利用DY5、RY1、JW14三种菌株分别发酵制作杨梅酒，并进行酒精耐受性检测，结果如下： 菌株名称 酒精度/% 总糖/g·L⁻1 总酸/g·L⁻1 DY5 7.0 34.23 12.045 RY1 9.0 15.01 12.675 JW14 6.5 33.64 12.099 杨梅汁 — 78.80 10.737 根据上述结果分析：三种菌株中，最适于杨梅酒发酵的是（ ），判断依据是（ ）。 【答案】（1） ①. 碳源、氮源、维生素 ②. 凝固剂（或琼脂） （2） ①. 9mL无菌水 ②. 1.5×108 （3）接种环灼烧后未冷却就划线、未从第一（或上一）区域末端开始划线 （4） ①. RY1 ②. RY1的酒精转化率高、酒精耐受力强 【解析】 【小问1详解】 蛋白胨提供的主要营养有碳源、氮源、维生素。过程②用的是液体培养基，过程③则是固体培养基，所以过程③所用培养基中还添加了凝固剂（或琼脂）。 【小问2详解】 每支试管先加9mL无菌水，再加入1mL菌液，总体积 10mL，刚好稀释10倍。由题意知，平均菌落数=(142+155+165+138)÷4=150个，涂布0.1mL，稀释度105。每毫升活菌数 = 平均菌落数 ÷ 涂布体积 × 稀释倍数=150÷0.1×105=1.5×108个 /mL 【小问3详解】 结合图示，该题采用平板划线法，第二次操作应在上一次划线末端开始，首尾区不相连，所以划线的起始区域为b。若区域a上几乎无菌落生长，则可能是接种环灼烧后未冷却就划线或未从第一（或上一）区域末端开始划线。 【小问4详解】 分析图示和表格数据可知，经RY1发酵的杨梅酒酒精度高，对酒精的耐受力强，所以最适于杨梅果酒发酵的是RY1。 19. 目前，临床上开始采用重组人血清白蛋白（rHSA）替代人血清白蛋白（HSA）。图1为工业化生产rHSA的过程示意图。回答下列问题： （1）依据图1和下表所示分析，在获取目的基因时，最好选择限制酶____________和____________共同切割质粒，双酶切法的优点有____________________________________________________________（答出2点）。除图示中的启动子之外，构建的表达载体还需要具有的结构有________________________（答出2点）。 限制酶 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G T↓GATCA ACTAG↑T ↓GTAC CATG↑ A↓AGCTT TTCGA↑A （2）PCR扩增时，要设计一对引物（引物1和引物2），根据图2中HSA基因的两端序列，需要设计的引物序列分别是________________________（从以下四个选项中选择）。如PCR过程完成四次循环，则所需引物的总数为____________个。 A.5'-AATGGATCCTTC-3' B.3'-AATGGATCCTTC-5' C.3'-GTAAGTTAAGAG-5' D.5'-GTAAGTTAAGAG-3' （3）可采用______________________________将重组基因表达载体导入大肠杆菌。然后在含四环素和氨苄青霉素的两种培养基上分别筛选，筛选出具有____________________________________________________________特点的是含HSA基因表达载体的目标菌。 （4）AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子，只能在以甲醇为唯一碳源的培养基中正常表达。从生产控制的角度分析，选用AOX1作为HSA基因的启动子的优点是______________________________________________________________________________。 【答案】（1） ①. Ⅱ ②. Ⅳ ③. 避免目的基因和质粒反向连接；避免目的基因和质粒自连 ④. 目的基因、标记基因、终止子 （2） ①. AC ②. 30 （3） ①. Ca2+处理法 ②. 抗四环素不抗氨苄青霉素 （4）可以通过控制培养液中甲醇的有无来控制HSA基因的表达 【解析】 【小问1详解】 由于质粒上没有限制酶Ⅲ的识别位点，故不能选用限制酶Ⅲ；由于氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因均含有限制酶Ⅰ的识别位点，故不能使用限制酶Ⅰ，所以选用Ⅱ和Ⅳ切割目的基因和质粒，选用双酶切法，可有效避免基因的反向连接和自身环化。构建基因表达载体需要有启动子（起始转录）、目的基因、标记基因（便于筛选）、终止子（终止转录）等。 【小问2详解】 PCR中需要一对引物，该引物能与目的基因碱基互补配对，子链延伸时从引物的 5'向 3'端延伸，所以两个引物分别为：5'-AATGGATCCTTC-3'，3'-GTAAGTTAAGAG-5'，AC正确，BD错误。PCR过程完成一次循环产生两个DNA分子，所需引物为2个，完成第二次循环产生四个DNA分子，所需引物为4个，以此类推，完成第四次循环产生16个DNA 分子，所需引物为16个，所以PCR过程完成四次循环所需引物的总数为：2+4+8+16=30。 【小问3详解】 将重组基因表达载体导入大肠杆菌常用Ca2+处理法。根据图1所示，HSA基因插入质粒时破坏了抗氨苄青霉素基因，其标记基因为四环素抗性基因，所以导入重组基因表达载体的大肠杆菌抗四环素不抗氨苄青霉素。 【小问4详解】 AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子，生产中常以其作为HSA基因的启动子，则在以甲醇为唯一碳源的培养基中HSA基因正常表达，无甲醇时该基因不表达，故而选用AOX1作为rHSA基因的启动子时可以通过控制培养液中甲醇的有无来控制HSA基因的表达。 20. 人类乳头瘤病毒（HPV）有多种亚型，HPV45属于高危型，与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白，科研人员进行了抗HPV45L1蛋白单克隆抗体的制备及研究。其基本操作过程如图所示。回答下列问题： （1）上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有____________。 （2）上述实验步骤①是____________。细胞甲需从小鼠的____________中获取。细胞甲、乙、丙、丁中可能产生抗L1蛋白抗体的细胞有____________。 （3）图中过程③需用选择培养基进行细胞培养，其结果是只有____________细胞才能在培养基上生长。图中过程④依据的原理是____________，其中检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释到2~5个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液____________mL，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。 （4）下图为一种检测待测抗原中目标抗原相对含量的方法，据图分析回答下列问题： ①检测之前，将目标抗原的单克隆抗体固定在支持物上形成固相抗体，然后向该检测体系中加入一定量的待测抗原和等量酶标记抗原，目的是让待测抗原中的目标抗原、酶标记抗原与抗体____________结合。 ②保温一段时间后洗涤，向检测体系中加入一定量的白色底物，若____________，则说明待测抗原中目标抗原的含量越高。 【答案】（1）动物细胞培养、动物细胞融合 （2） ①. 向小鼠体内注射L1蛋白 ②. 脾脏 ③. 甲乙丙丁 （3） ①. 杂交瘤 ②. 抗原抗体特异性结合 ③. 0.2 （4） ①. 竞争性结合 ②. 检验体系的蓝色越浅 【解析】 【小问1详解】 单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合。 【小问2详解】 在抗L1蛋白单克隆抗体的制备过程中，提取HPV45的L1蛋白（抗原），注射到小鼠体内，其目的是诱导小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞。步骤①是向小鼠体内注射L1蛋白。细胞甲是已免疫的B细胞，需从小鼠的脾脏中获取。细胞甲（已免疫的B淋巴细胞）、乙（含杂交瘤细胞）、丙（第一次筛选的杂交瘤细胞）、丁（第二次筛选的能产生所需抗体的杂交瘤细胞）都可能产生抗L1蛋白抗体。 【小问3详解】 图中过程③是用选择培养基进行第一次筛选，选择培养基可以淘汰未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞，只有杂交瘤细胞在该培养基上能生长；过程④是利用克隆化培养和抗体检测进行第二次筛选，目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，依据的原理是抗原和抗体的特异性结合，其中检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释到2~5个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液0.2mL，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。 【小问4详解】 ①根据图示反应原理，酶标记抗原和待测抗原都能与单克隆抗体特异性结合，即让待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合单克隆抗体； ②标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物，所以如果待测抗原中目标抗原越多，则酶标记抗原和抗体结合得越少，催化生成的蓝色产物就越少，检测体系蓝色就越浅，反之若检测体系蓝色越深，则说明待测抗原中目标抗原越少。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 厦门六中2022级高二4月考 生物 满分：100分考试时间：75分钟 一、选择题40分（本题共16小题，1-12题每题2分，13-16题每题4分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的） 1. 下图1是果酒和果醋制作的简易装置，图2是果酒或果醋制作过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ） A. 制作果酒时，葡萄的处理步骤为：去梗→清洗→灭菌→榨汁→装瓶 B. 果酒发酵时，气阀a和气阀b应同时处于打开或关闭状态 C. 果酒发酵阶段，若开错气阀，可能会导致发酵液溢出 D. 果醋发酵阶段，发酵液中糖类充足时，醋酸菌进行④过程 2. 泡菜中亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物,泡菜制作过程中亚硝酸盐峰值一般出现在第5天。现用不同体积分数的食醋对泡菜进行处理,测定其亚硝酸盐的含量变化,结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 本实验亚硝酸盐峰值出现在第3天,推测原因可能为本实验的温度更为适宜 B. 不同体积分数的食醋会影响亚硝酸盐的峰值，但对峰值出现的时间无影响 C. 食醋体积分数越大,对泡菜中亚硝酸盐产生的抑制效果越明显 D. 健康饮食应选择食用在此条件下酿制10天左右的泡菜 3. 甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ） 粉状硫 10g K2HPO4 4g FeSO4 0.5g 蔗糖 10g （NH4）2SO4 0.4g H2O 100ml MgSO4 9.25g CaCl2 0.5g Ⅰ + + + + - + + + Ⅱ + + + - + + + + Ⅲ + + + + + + + + A. 甲、乙、丙都是异养微生物 B. 甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物 C. 甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物 D. 甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物 4. 某实验小组利用滤膜法检测饮料中微生物的数量，原理是将待测样品通过微孔滤膜过滤富集后，再将滤膜置于培养基上培养，根据滤膜上的菌落数推算出样品中微生物的数量。过程如图所示。 下列说法错误的是（ ） A. 实验用到滤膜和水样都需要提前灭菌处理 B. 应选取菌落数为30~300的平板进行计数 C. 统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少 D. 滤膜孔径过大可能导致平板上长不出菌落 5. 紫草宁具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。图1是运用二级细胞悬浮培养法培养紫草细胞制备紫草宁的流程，图2记录了过程②中紫草细胞产量、紫草宁产量随着培养时间发生的变化。下列叙述正确的是（ ） A. 图1流程中所使用的培养皿、培养瓶、镊子及紫草外植体等均要进行灭菌处理 B. 图1中的①过程需要给予适宜的光照，以诱导脱分化 C. 图1中的②过程表示悬浮培养，使用的是固体培养基 D. 由图2可知，限制紫草宁产量的原因是紫草细胞的数量和培养时间 6. 花椰菜（2n=18）易患黑腐病导致减产，黑芥（2n=16）则有较好的黑腐病抗性。下图是科研人员培育具有黑腐病抗性的花椰菜植株m、n和s的过程，已知植株m、n和s均含有花椰菜的全部染色体。下列相关叙述错误的是（ ） A. ①过程需用酶解法处理，融合的原生质体需要具有再生细胞壁的能力 B. 对黑芥进行紫外线处理可能会使黑芥细胞发生染色体变异 C. ②过程是植物组织培养，获得的杂种植株含有两个染色体组 D. ③过程需接种黑腐病菌从而筛选获得具有抗黑腐病的植株m、n、s 7. 培养基是微生物、植物组织和动物细胞生长繁殖需要的营养基质。下列有关这三类培养基及其特点的说法错误的是（ ） A. 三类培养基都含有无机盐，添加特定营养物的培养基可用于选择培养 B. 植物组织培养的培养基中要添加特定植物激素才能诱导试管苗形成 C. 培养动物细胞的培养基中不能添加凝固剂，但要添加适量抗生素 D. 这三类培养基中都需要添加有机物作为碳源，且在接种前都应高温灭菌 8. 利用工业废甲醇作为碳源可培养特定种类的酵母，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程。有关叙述正确的是（　　） A. 若需要调节培养基的pH，则应在培养基灭菌后进行 B. 玻璃器皿、金属用具和培养基等选择干热灭菌法 C. 步骤③、④过程中使用的培养基均以甲醇作为唯一的碳源 D. 步骤③中将温度下降至30℃左右的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后再倒置培养 9. 下图1表示植物激素X和植物激素Y的浓度比对未分化细胞群变化情况的影响，图2为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N）培育高产耐酸植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出根 B. ①是利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁的过程，此过程应在低渗溶液中进行 C. ②是在植物激素X与Y的浓度比为1的培养基上诱导杂种细胞发生脱分化的过程 D. 植物丙是六倍体可育植株，其成功培育说明植物甲和乙不存在生殖隔离 10. 2019年1月，中国科学家首次利用CRISPR/Cas9技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。并通过体细胞克隆技术，获得5只生物节律紊乱的猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示（①②表示操作过程）。下列说法错误的是（ ） A. 在核移植操作前，应对成纤维细胞进行动物细胞培养 B. ①是利用显微操作技术去核，去核前需要先将采集的卵母细胞培养至MⅡ时期 C. ②可以通过电融合法使两细胞融合，形成重组胚 D. 该技术得到的敲除 BMAL1基因的克隆猕猴的遗传物质与猕猴甲相同 11. 干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），培养iPS细胞得到的眼结膜组织可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法不正确的是（ ） A. 导入的基因具有促使体细胞恢复分裂能力的作用 B. 利用iPS细胞获得眼结膜组织时，应加入分化抑制因子 C. 利用iPS细胞治疗人类疾病理论上可避免免疫排斥反应 D. iPS细胞可在一定程度上避免胚胎干细胞涉及的伦理问题 12. 下表细胞工程技术应用中各组所选择的实验材料及材料特点与实验目的匹配错误的是（ ） 组别 实验目的 实验材料 材料特点 1 克隆高产奶牛 次级卵母细胞与体细胞 次级卵母细胞去核留质 2 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变 3 培育西红柿-马铃薯超级杂种 花粉粒 易于获取，易于组织培养 4 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥 A. 1和2 B. 2和3 C. 3和4 D. 1和4 13. 新冠病毒抗原检测试剂盒可以作为核酸检测的补充手段，用于特定人群的筛查。它的外观如图A所示，只需要将采集制备的样液滴在点样口（S）处，15分钟后，若T线和C线处同时显示横杠即阳性，要即时隔离、核查就医。它的内部结构如B所示（胶体金法），结合垫，T线和C线处分布有不同种类抗体，其中抗体1、3均能与待测抗原结合，抗体2能与抗体4结合，如果有被聚集沉淀的胶体金则会显色，出现横杠。下列关于该抗原检测试剂盒的推测，不正确的是（ ） A. 使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性 B. 抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是不同的 C. 点样后，结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散 D. T线C线均不显示横杠即为阴性，没有感染病毒 14. CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验。 下列叙述不正确的是（　　） A. 多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞 B. 步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合 C. 经筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞 D. 对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体 15. 某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如右图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 大肠杆菌抗链霉素的性状是由链霉素的选择作用引起的 B. 1号和5号采用平板划线法将菌种接种在相应选择培养基上 C. 4号与8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大 D. 该实验缺乏对照实验，无法确定抗链霉素性状属于可遗传的变异 16. 人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①~④表示相关的操作，EcoRI、BamHI为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。下列有关叙述正确的是（ ） 限制酶 识别序列及切割位点 EcoRI G↓AATTC BamHI G↓GATCC A. 过程①所需的两种引物中分别加上GAATTC和GGATCC序列有利于后续操作 B. 构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行复制 C. 过程③利用的是T-DNA的特性将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA中 D. 过程④需利用液体培养基进行培养，可通过PCR技术检测干扰素基因是否表达 二、非选择题60分（本题共4小题） 17. 以我国科学家为主的科研团队将OSNL（即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写）导入黑羽鸡胚成纤维细胞（CEFs），诱导其重编程为诱导多能干细胞（iPS），再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞（iPGCs），然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。 （1）CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用____________处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加____________等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。 （2）体外获取OSNL的方法有____________（答出2种）。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和____________等。其中启动子是____________的部位，驱动目的基因的表达。 （3）iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是______________________。 （4）该实验流程中用到的生物技术有______________________（答出2点即可）。 18. 杨梅营养价值高，但其鲜果不耐储存，以新鲜杨梅酿制的杨梅酒具有开胃消食、利尿排毒等多种功效。杨梅酒的品质很大程度上取决于所选择的酵母性能。科研人员为挖掘某杨梅主产区的酵母资源，筛选出酒精转化率高、酒精耐受力强的优质杨梅酿酒酵母，进行以下研究。请回答下列问题： （1）图中过程②③④⑤所用培养基为适于酵母菌生长的YPD培养基，其成分包括1%酵母膏、2%蛋白胨、2%葡萄糖等，其中蛋白胨提供的主要营养有____________（写出两点）。与过程②所用培养基相比，过程③所用培养基中还添加了____________（成分）。 （2）过程③以10倍梯度稀释时，先分别向A、B、C三支试管中加入____________，再依次加入酵母菌培养液的上清液或稀释液1mL，并摇匀。取多个稀释倍数的酵母菌培养液0.1mL分别接种到多个平板上，其中在105稀释倍数下的4个平板，菌落数分别是142、155、165、138，则1mL培养液中含有的酵母菌数量约为____________个。 （3）如果划线区域a上几乎无菌落生长，原因可能是______________________。 （4）分离获得的酵母菌还需经过多级筛选才能获得理想菌株。科研人员利用DY5、RY1、JW14三种菌株分别发酵制作杨梅酒，并进行酒精耐受性检测，结果如下： 菌株名称 酒精度/% 总糖/g·L⁻1 总酸/g·L⁻1 DY5 7.0 34.23 12.045 RY1 9.0 15.01 12.675 JW14 6.5 33.64 12.099 杨梅汁 — 78.80 10.737 根据上述结果分析：三种菌株中，最适于杨梅酒发酵的是（ ），判断依据是（ ）。 19. 目前，临床上开始采用重组人血清白蛋白（rHSA）替代人血清白蛋白（HSA）。图1为工业化生产rHSA的过程示意图。回答下列问题： （1）依据图1和下表所示分析，在获取目的基因时，最好选择限制酶____________和____________共同切割质粒，双酶切法的优点有____________________________________________________________（答出2点）。除图示中的启动子之外，构建的表达载体还需要具有的结构有________________________（答出2点）。 限制酶 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G T↓GATCA ACTAG↑T ↓GTAC CATG↑ A↓AGCTT TTCGA↑A （2）PCR扩增时，要设计一对引物（引物1和引物2），根据图2中HSA基因的两端序列，需要设计的引物序列分别是________________________（从以下四个选项中选择）。如PCR过程完成四次循环，则所需引物的总数为____________个。 A.5'-AATGGATCCTTC-3' B.3'-AATGGATCCTTC-5' C.3'-GTAAGTTAAGAG-5' D.5'-GTAAGTTAAGAG-3' （3）可采用______________________________将重组基因表达载体导入大肠杆菌。然后在含四环素和氨苄青霉素的两种培养基上分别筛选，筛选出具有____________________________________________________________特点的是含HSA基因表达载体的目标菌。 （4）AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子，只能在以甲醇为唯一碳源的培养基中正常表达。从生产控制的角度分析，选用AOX1作为HSA基因的启动子的优点是______________________________________________________________________________。 20. 人类乳头瘤病毒（HPV）有多种亚型，HPV45属于高危型，与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白，科研人员进行了抗HPV45L1蛋白单克隆抗体的制备及研究。其基本操作过程如图所示。回答下列问题： （1）上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有____________。 （2）上述实验步骤①是____________。细胞甲需从小鼠的____________中获取。细胞甲、乙、丙、丁中可能产生抗L1蛋白抗体的细胞有____________。 （3）图中过程③需用选择培养基进行细胞培养，其结果是只有____________细胞才能在培养基上生长。图中过程④依据的原理是____________，其中检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释到2~5个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液____________mL，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。 （4）下图为一种检测待测抗原中目标抗原相对含量的方法，据图分析回答下列问题： ①检测之前，将目标抗原的单克隆抗体固定在支持物上形成固相抗体，然后向该检测体系中加入一定量的待测抗原和等量酶标记抗原，目的是让待测抗原中的目标抗原、酶标记抗原与抗体____________结合。 ②保温一段时间后洗涤，向检测体系中加入一定量的白色底物，若____________，则说明待测抗原中目标抗原的含量越高。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $