1.2微生物的培养技术及应用练习题2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

### 基本信息 以微生物培养技术为核心，通过基础选择与情境填空分层设计，实现从概念辨析到实验探究的进阶，强化科学思维与探究实践素养。 ### 分层设计 |层次|知识覆盖|设计特色| |----|----------|----------| |基础认知层|培养基成分、灭菌方法等单一知识点|选择题1-5聚焦概念辨析，如培养基配制原则、纯培养关键操作| |技能应用层|筛选、计数等实验技能|选择题6-8结合温泉嗜热菌筛选等情境，填空题9-10考查活菌计数计算与误差分析| |综合探究层|实验流程与结果分析|填空题11整合纤维素分解菌筛选、刚果红染色结果判断，体现完整探究链条|

2026-2027学年高中生物人教版选择性必修三 1.2微生物的培养技术及应用 模拟练习题 一、选择题 1 . 某奶酒以牛奶为主要原料，经微生物发酵酿制而成。为提高发酵效率，需筛选具有乳糖利用率高、乙醇产量高等特性的酵母菌菌株。下列叙述正确的是（        ） A．选择培养基应以葡萄糖为唯一碳源 B．选择培养基中可添加抗生素抑制细菌生长 C．制备固体培养基需先倒平板后再高压蒸汽灭菌 D．接种后的平板应在37℃恒温培养 2 . 下列有关培养基配制原则的表述，错误的是（        ） A．微生物培养基一般含有碳源、氮源、无机盐和水等营养物质 B．为微生物生长提供氮源的物质也可能为微生物提供碳源 C．增加培养基中各种营养物质的浓度能够提高微生物的数量 D．配制培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌处理 3 . 下列关于微生物培养的叙述，错误的是（        ） A．获得纯培养物的关键是防止杂菌污染 B．牛奶等液体常采用高压蒸汽灭菌法灭菌 C．高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子和芽孢 D．培养时应把未接种的平板和接种了微生物的平板一起培养，作为对照 4 . 平板接种是微生物培养常用技术。下列叙述错误的是（　　） A．不含碳源的平板可以用于某些微生物的培养 B．进行平板划线时，接种环使用前必须进行灼烧灭菌 C．使用后的培养基未长出菌落，也需在丢弃前进行灭菌处理 D．以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落一定可以分泌脲酶 5 . 下列关于微生物纯培养的叙述，正确的是（       ） A．配制培养基时，应先进行高压蒸汽灭菌，再调节pH至适宜范围 B．平板划线法接种时，每次划线前和划线结束后，都需要对接种环进行灼烧灭菌 C．将接种后的培养皿放入恒温培养箱中培养时，应将培养皿正置，以防止冷凝水滴落 D．利用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数目时，统计的菌落数往往比实际活菌数偏大 6 . 孝感地区温泉资源丰富，某研究小组计划从汤池温泉中筛选能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，用于工业淀粉加工。其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列说法正确的是（        ） A．温泉的高温环境属于人工选择，可富集嗜热菌 B．甲、乙试管中的液体培养基，主要作用是对目标菌进行筛选和纯化 C．丙中嗜热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件 D．图2中周围显蓝色的菌落，其菌株可高效分解淀粉，是所需的目标菌 7 . 下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（        ） A．选择培养基可以鉴定某种微生物的种类 B．利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌 C．测定土壤中细菌的数量，一般选用102、103、104倍数的稀释液进行平板培养 D．平板涂布时需在酒精灯火焰旁操作，培养皿完全打开，用灭菌后的涂布器进行涂布 8 . 生长圈法是基于营养缺陷型指示菌与目的菌株共生关系建立的微生物筛选技术。目前，工业上用大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌，从土壤中筛选谷氨酸棒状杆菌高产赖氨酸菌株，通过生长圈大小快速初筛，再结合发酵复筛确定生产株。如图表示初筛目的菌株时，某一平板上的菌落及生长圈的形成情况。下列叙述正确的是（        ） A．初筛阶段，应配制pH为酸性且不含有赖氨酸的固体培养基 B．微生物乙、丙、丁为指示菌，甲、戊、己为谷氨酸棒状杆菌 C．若从图中平板初筛高产目的菌株，应选择菌落较大的戊或己 D．发酵复筛目的菌株时，仍需要大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌 二、填空题 9. 尿素是一种重要的农业氮肥，但不能被农作物直接吸收，土壤中尿素分解菌能把尿素分解成NH3。欲从土壤中筛选出能分解尿素的细菌并予以纯化计数，某小组采用了图1所示的基本操作流程。影印接种法的核心原理是利用无菌绒布作为印章，将母平板上的菌落，转移到多个不同培养基的平板上，通过对比不同平板的菌落生长情况，筛选出具有特定性状的突变株。图2是某同学利用影印接种法筛选抗青霉素的大肠杆菌突变株过程。回答下列问题： (1)将10g土壤样品加入90mL无菌水中制成样品悬液，进一步稀释到104倍后，各取0.1mL稀释液涂布到3个平板上，培养后统计得到3个平板的菌落数分别为38、42、40，则每克土壤样品中的目的菌数量约为________个；该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏________（填“高”或“低”），原因是__________________________________________________。 (2)若划线培养后发现第一区域的划线长满菌落，第二区域没有菌落生长，可能的原因是____________________________。实验过程中需要设置未接种的空白培养基一同培养，目的是____________________________；若空白培养基上出现了菌落，可能的原因是_________________（答1点）。 (3)图2中将大肠杆菌在37℃、48h条件下培养的目的是_________________________。③培养基为选择培养基，在其中额外需要添加的物质是________。________（填“甲”或“乙”）菌落是成功选出的目的菌菌落。 10. 尿素是一种重要的农业氮肥，但是并不能直接被农作物吸收。土壤中含大量微生物，其中就有尿素分解菌。某兴趣小组欲从土壤中分离该类细菌，并进行后续培养研究，设计了如下实验： 请回答有关问题： (1)称取土壤、梯度稀释、接种微生物需要在火焰旁进行，其目的是___________________。 (2)该兴趣小组设计了A、B两种培养基（成分见下表）： 葡萄糖 无机盐 尿素 琼脂 酚红溶液 水 培养基A ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 培养基B ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 注：＋表示有，－表示无 据表分析，两种培养基的碳源是_______________；接种的微生物中是否含有尿素分解菌，可通过观察酚红指示剂_________进行初步鉴定。 (3)加入培养基的无机盐含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是_____________和________________。接种环的灭菌方法是_________________。 (4)若用平板划线法接种微生物，在培养基上共画了4个区域，则至少需要_________次灼烧接种环。 (5)下图表示某培养基中的部分菌落，白色部分为抑菌圈，黑点代表大小不同的菌落。 ①图中培养基的接种方式用到的接种工具是__________。 ②已知三个培养基上的菌落数分别为36、44和40，每升土壤浸出液中的该细菌活菌数约为4×109个，涂布时每个培养基滴加的样液体积为0.1mL，则土壤浸出液的稀释倍数为________倍。③图中的甲、乙、丙三个菌落中的细菌，对嗜盐菌抑制效果最好的是___________。 11. 动物的粪便中包含食物残渣、肠道微生物、寄生虫虫卵等。为研究者提供了许多宝贵的信息。研究人员欲从反刍性食草动物的粪便中分离出纤维素分解菌。按照下图流程对获取的粪便进行处理，请分析回答下列问题： (1)从粪便中筛选目的菌需要使用以____________为唯一碳源的培养基，这种培养基从功能上属于____________培养基。 (2)如图1所示流程是通过____________法将菌液接种至培养皿，统计活菌数量。一般选择菌落数目为____________的平板进行计数。 (3)若在纯化培养的三个平板中得到的菌落数分别为204个、206个、208个，则1g粪便中含有的纤维素分解菌数量为____________个。该计数结果一般比实际活菌数偏____________（填“多”或“少”），原因是______________________________________________________________。 (4)在添加刚果红的固体培养基上接种挑选出来的菌种，得到图2所示的菌落和透明圈。其中降解纤维素能力最强的是菌落________________。 答案 一、选择题 1. 答案：B A：筛选高乳糖利用菌株，应以乳糖为唯一碳源，不是葡萄糖，错误。 B：抗生素抑制细菌，不影响酵母菌，可除去杂菌，正确。 C：培养基先高压灭菌，冷却后倒平板，顺序颠倒，错误。 D：酵母菌适宜温度 28℃左右，37℃多为细菌培养温度，错误。 2. 答案：C A：基础培养基均含碳源、氮源、无机盐、水，正确。 B：蛋白胨等有机物既供氮也供碳，正确。 C：营养浓度过高会造成渗透胁迫，抑制微生物生长，错误。 D：先调 pH 再灭菌，灭菌后调易引入杂菌，正确。 3. 答案：B A：纯培养核心是无菌，防止杂菌污染，正确。 B：牛奶不耐高温高压，采用巴氏消毒，不是高压蒸汽灭菌，错误。 C：高温可杀死菌体、芽孢、孢子，彻底灭菌，正确。 D：空白平板对照，判断培养基、操作是否污染，正确。 4. 答案：D A：自养微生物不需外源碳源，无碳源平板可培养，正确。 B：接种环划线前后均灼烧灭菌，正确。 C：废弃培养基必须灭菌后丢弃，防止污染环境，正确。 D：以尿素为唯一氮源只能筛选可利用尿素的菌，不能保证都分泌脲酶（极少数特殊菌），错误。 5. 答案：B A：先调 pH 再灭菌，灭菌后调 pH 易染菌，顺序错，错误。 B：每次划线前灼烧杀死残留菌种，划线结束灼烧灭菌，正确。 C：培养皿倒置，防止冷凝水滴落污染菌落，不是正置，错误。 D：涂布计数结果偏小，两个活菌连在一起只计一个菌落，错误。 6. 答案：C A：温泉是自然环境，属于自然选择，不是人工选择，错误。 B：甲乙液体培养基作用是扩大培养（富集），不是纯化，纯化需固体平板，错误。 C：嗜热菌需高温、充足营养才能快速增殖，正确。 D：分解淀粉的菌落周围淀粉被水解，碘液不变蓝（无蓝色圈），显蓝色说明不能分解，错误。 7. 答案：B A：选择培养基只筛选，鉴别培养基才能鉴定菌种，错误。 B：尿素唯一氮源，只有分解尿素细菌可存活，正确。 C：土壤细菌稀释倍数常用104、105、106，不是102、103、104，错误。 D：涂布时培养皿只打开一条缝隙，不能完全敞开，防止杂菌落入，错误。 8. 答案：C A：谷氨酸棒状杆菌为细菌，适宜中性 / 弱碱性培养基，不是酸性，错误。 B：产生赖氨酸的是目的菌（菌落），外围生长圈是缺陷指示菌，即甲、戊、己为目的菌，乙丙丁为指示菌，选项颠倒，错误。 C：生长圈越大说明产赖氨酸越多，戊、己生长圈更大，是高产菌株，正确。 D：发酵复筛直接测赖氨酸产量，不需要缺陷指示菌，错误。 二、填空题 9 (1) 4000；低；两个或多个活菌连在一起时，平板上只形成一个菌落 计算：(38+42+40)÷3=40，40÷0.1×104÷10=4000 (2) 第二次划线时接种环未冷却，高温杀死菌种（或划线未接触上一区菌液）；检测培养基是否被杂菌污染；培养基灭菌不彻底 / 操作过程引入杂菌 (3) 让大肠杆菌充分增殖；青霉素；甲 10 (1) 防止空气中杂菌污染培养基与菌液 (2) 葡萄糖；周围出现红色圈 (3) 作为缓冲物质维持培养基 pH 稳定；提供钾、磷等无机营养；灼烧灭菌 (4) 5 次（划线前 1 次 + 4 次划线后各 1 次） (5) ①涂布器 ②200 ③甲 计算：平均菌落 40，40÷0.1=400个 /mL，4×109÷400=107个 / L，稀释倍数107÷5×104=200 11 (1) 纤维素；选择 (2) 稀释涂布平板；30～300 (3) 206；少；多个纤维素分解菌粘连在一起，平板上只形成单个菌落 (4) 透明圈与菌落直径比值最大的菌落 学科网（北京）股份有限公司 $