精品解析：陕西省西安市鄠邑区第四中学2025-2026学年高二下学期期末考试生物试卷

绝密 启用前 2025-2026学年第二学期高二期末质量检测 生物 本卷满分:100分，考试时间:75分钟 注意事项： 1.本试卷共10页，二大题，31小题。 2.答卷前考生务必浏览试卷和答题卡，检查印刷和页码数。务必规范、完整填写卷头。 3.答案必须填写在答题卡上，在试题上作答无效。考试结束后，只交答题卡。 4.考生作选择题时，请使用2B铅笔将正确答案涂在答题卡对应位置。非选择题请用0.5毫米黑色签字笔在答题卡对应题号的答题区域内作答。（注：五号宋体加粗） 第Ι卷 客观题（共60分） 一、选择题（本题共25小题，50分） 1. 发酵食品是中国传统食品中一个重要的类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。请结合所学发酵知识和生活经验，指出下列不属于经发酵得到的食品是（ ） A. 泡菜和酸奶 B. 奶酒和干酪 C. 豆腐和果汁 D. 味精和酱油 【答案】C 【解析】 【分析】细菌、真菌等微生物能引起发酵现象。发酵食品是指人们利用有益微生物加工制造的一类食品。 【详解】泡菜和酸奶是利用乳酸菌发酵产生的；奶酒是利用酵母菌发酵产生的，干酪是利用乳酸菌发酵产生的；豆腐是豆类经过加工形成的，果汁是通过果肉破碎来的，均未经过微生物的发酵作用；味精利用谷氨酸生产菌（棒状杆菌）发酵制成的，酱油是利用米曲霉菌发酵产生的。综上所述，C符合题意，A、B、D不符合题意。 故选C。 【点睛】本题考查微生物发酵，关键是掌握常见食品涉及到的微生物。 2. 下列有关果酒、果醋、酸奶、泡菜和腐乳等制作的叙述，正确的是（ ） A. 参与腐乳形成的主要微生物是毛霉，属于原核细胞 B. 果酒发酵和果醋发酵中，主要发酵菌所需的适宜温度较高的是后者 C. 制作泡菜时，坛内形成的白色菌膜是乳酸菌大量增殖的结果 D. 果酒、果醋、酸奶和泡菜制作利用的菌种均具有生物膜系统 【答案】B 【解析】 【分析】制作果酒的酵母菌、制作果醋的醋酸菌、制作泡菜和酸奶的乳酸菌和制作腐乳的毛霉中，酵母菌和毛霉都是真核生物，只有乳酸菌不能进行有氧呼吸，它们都是利用现成的有机物为营养和能量来源，也属于异养微生物；制作果酒的适宜温度是18℃～25℃、制作果醋的适宜温度是30℃～35℃、制作泡菜的适宜温度是18℃～20℃、制作腐乳的适宜温度是15℃～18℃。 【详解】A、毛霉、曲霉和酵母菌都属于真菌，属于真核生物，A错误； B、果酒发酵的适宜温度是18~30℃，果醋发酵的适宜温度是30~35℃，B正确； C、泡菜坛里，发酵液表面的白色菌膜是酵母菌繁殖的结果，C错误； D、醋酸菌、乳酸菌为原核生物，而原核生物没有生物膜系统，D错误。 故选B。 3. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ） A. 用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精 B. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 C. 腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵 D. 泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水溶液检测产生的二氧化碳，用酸性重铬酸钾溶液鉴定酒精，A错误； B、乳酸菌是厌氧菌，因此利用乳酸菌制作酸奶过程中都要密封发酵，B错误； C、腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵，C正确； D、泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量先升高后降低，发酵10天以上的泡菜中亚硝酸盐含量相对较低，可以食用，D错误。 故选C。 4. 下列关于微生物的分离和培养的叙述中，正确的是（ ） A. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B. 进行微生物培养前，需对培养基进行消毒处理 C. 平板划线法和稀释涂布平板法都可对细菌进行分离计数 D. 用含刚果红的尿素培养基筛选鉴别出能分解尿素的菌株 【答案】A 【解析】 【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。 【详解】A、获得纯净培养物的关键是防止杂菌感染，A正确； B、进行微生物培养时需要对培养基进行灭菌，B错误； C、平板划线法不能对微生物进行计数，C错误； D、尿素分解菌可以将尿素分解成氨使酚红指示剂呈红色，因此用含酚红的尿素培养基筛选出能分解尿素的菌株，D错误。 故选A。 5. 需要在火焰旁操作的有（　　） ①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液　④涂布平板　⑤微生物的培养 A. ①②③④⑤ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ②③④⑤ 【答案】B 【解析】 【分析】微生物培养的关键是无菌操作，在酒精灯含有周围因高温可以形成一个无菌区，微生物筛选与接种的应该操作可以在此区域进行，以防止杂菌污染。 【详解】①土壤是微生物的天然培养基，土壤取样时不需要在酒精灯含有旁操作，①错误； ②称取土壤时，为避免杂菌污染，需要在酒精灯火焰旁进行操作，②正确； ③稀释土壤溶液时为避免杂菌污染，需要在酒精灯火焰旁进行，③正确； ④进行涂布平板接种操作时需要在酒精灯火焰旁进行，④正确； ⑤微生物的培养需要在一定温度的恒温箱中进行，⑤错误。 综上②③④正确。 故选B。 6. 营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质（如氨基酸、维生素）的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株，可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿上，一段时间后将菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿中，进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 影印培养法使用的是液体培养基进行微生物培养 B. 甲丙两种培养基中均添加了特殊营养物质 C. 乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株 D. 甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异 【答案】B 【解析】 【分析】①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。 【详解】A、由菌落的分布情况可知，将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为稀释涂布平板法，故影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养，A错误； B、根据甲丙两种培养基中菌落位置可知，甲中的菌种在丙培养基中均能生长，再结合乙培养基中菌落的生长情况，可推测甲培养基和丙培养基都添加了某种特殊物质，B正确； C、结合题意可知，乙培养皿中不能生长的为所需的营养缺陷型菌株，C错误； D、甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变，不可能发生染色体变异，因为大肠杆菌是原核生物，不含染色体，D错误。 故选B。 7. 急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量是有效预防疾病发生的必要措施，如图表示检验微生物的简要步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. 根据图1的微生物接种方法，可得到图2所示的四种菌落分布图 B. 为保证统计的菌落数目更加准确，同一稀释度下需要至少设置三个平板 C. 培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，应在灭菌后进行pH调整 D. 可用平板划线法和稀释涂布平板法对大肠杆菌进行鉴定和计数 【答案】B 【解析】 【分析】据图1分析：表示稀释涂布平板法纯化大肠杆菌的过程。据图2分析：a、b、c三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，d培养皿属于平板划线法接种。 【详解】A、图1所用的接种方法为稀释涂布平板法，而图2所示的四种菌落分布图中，a、b、c三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，d培养皿属于平板划线法接种，A错误； B、同一稀释度下需要培养三个培养皿，分别计数3次，取平均值，以保证统计的菌落更加准确，B正确； C、培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，有利于微生物的生长，但是应在灭菌前进行pH调整，以防止杂菌污染，C错误； D、平板划线法不可用于计数，稀释涂布平板法可用于计数，伊红-美蓝可对大肠杆菌进行鉴定，D错误。 故选B。 8. 无菌技术是获得纯净微生物的关键。下列相关叙述错误的是（ ） A. 消毒和灭菌在杀菌程度上存在差异 B. 紫外线对接种室有较好的灭菌作用 C. 鲜奶一般使用湿热灭菌法进行灭菌 D. 过滤除菌法可大量制备无菌空气 【答案】C 【解析】 【详解】A、消毒只能杀灭物体表面或内部的部分微生物，不包含芽孢和孢子，灭菌可杀灭物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子，二者杀菌程度存在明显差异，A正确； B、紫外线可破坏微生物的核酸结构，能有效杀灭接种室空气、物体表面的微生物，对接种室有较好的灭菌效果，B正确； C、湿热灭菌法（如高压蒸汽灭菌）处理温度较高，会破坏鲜奶的营养成分和风味，鲜奶通常采用巴氏消毒法处理，不使用湿热灭菌法，C错误； D、过滤除菌法通过特殊滤膜截留微生物，可对空气进行除菌处理，能够大量制备无菌空气，常用于发酵工程的无菌空气制备，D正确。 9. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（　　） 比较内容 植物细胞工程 动物细胞工程 A 特殊处理 酶解法去除细胞壁 用胰蛋白酶处制成细胞悬浮液 B 融合方法 物理方法、化学方法、生物方法 物理方法、化学方法 C 典型应用 人工种子、种间杂种植物 单克隆抗体的制备 D 培养基区别 植物激素具有重要作用 动物血清不可缺少 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【分析】细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程，植物细胞工程的技术包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术；动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。 【详解】A、在植物细胞融合前需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，A正确； B、植物细胞融合的方法用物理方法（离心、振动、电激）和化学方法（聚乙二醇），而动物细胞融合除了可用物理方法与化学方法以外，还可以用生物方法（灭活的病毒）来进行，B错误； C、植物细胞工程可用于人工种子、种间杂种植物培育等，可以利用动物细胞融合技术进行单克隆抗体的制备，C正确； D、植物细胞培育时，常用蔗糖作为离体组织的碳源，同时需要添加生长素、细胞分裂素等，而动物细胞培养时动物血清不可缺少，D正确。 故选B。 10. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，简要流程如图。下列有关叙述正确的是（ ） A. 过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术 B. 细胞培养中需提供5%CO2，目的是调节细胞外液的渗透压 C. 胚胎干细胞可来源于囊胚中的内细胞团，具有发育的全能性 D. 将图中获得的组织器官移植给个体A，不会发生免疫排斥反应 【答案】C 【解析】 【分析】1、治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。 2、分析题图：①是核移植技术，②是早期胚胎培养。 【详解】A、据图分析，过程①、②分别应用了核移植技术和早期胚胎培养技术，A错误； B、细胞培养中需提供95%的空气和5%CO2，其中CO2可以维持培养液的pH，B错误； C、胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团或原始性腺，具有发育的全能性，C正确； D、图中获得的组织器官的遗传物质主要来自B，因此将图中获得的组织器官移植给个体A，会发生免疫排斥反应，D错误。 故选C。 11. 基因工程的主要操作步骤依次是（　　） ①筛选导入目的基因的受体细胞 ②构建基因表达载体 ③使目的基因在受体细胞中成功表达 ④筛选和获取目的基因 ⑤将表达载体导入受体细胞 A. ①②③④⑤ B. ④②⑤①③ C. ④⑤②③① D. ③②④⑤① 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、表达载体的构建、导入受体细胞、筛选及检测表达。 【详解】基因工程主要操作步骤：先筛选和获取目的基因（④），接着构建基因表达载体（②），再将表达载体导入受体细胞（⑤），之后筛选导入目的基因的受体细胞（①），最后使目的基因在受体细胞中成功表达（③），顺序为④②⑤①③ ，B正确，ACD错误。 故选B。 12. 在基因工程的操作中，需要三种工具，分别是“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”，关于这三种工具的叙述，不正确的是（ ） A. “分子手术刀”指的是限制性内切核酸酶，可以断开 DNA 的磷酸二酯键 B. “分子缝合针”指的是 DNA 聚合酶，可以催化生成断裂的磷酸二酯键 C. “分子运输车”指的是载体，常用的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体 D. “分子手术刀”主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的 DNA 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体、动植物病毒。 【详解】A、“分子手术刀”是限制性内切核酸酶（限制酶/限制性核酸内切酶），能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割使磷酸二酯键断裂，A正确； B、“分子缝合针”是DNA连接酶，能将具有相同末端的DNA片段连接起来，B错误； C、基因工程中的“运输车”即运载体有质粒、动植物病毒、噬菌体，其中质粒是基因工程中最常用的运载体，C正确； D、“分子手术刀”，主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的DNA，可能是不含有该序列或者含有该序列，但被修饰，D正确。 故选B。 13. 蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（ ） A. 用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B. 科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C. 在凝胶中DNA分子的迁移速率不只与DNA分子的大小有关 D. 若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可能在其乳汁检测到蛛丝蛋白 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的主要步骤：①获取目的基因；②目的基因与运载体的结合；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、据题图分析可知，磷酸基团为DNA的5'端，羟基为DNA的3'端，由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，所以在PCR扩增中引物与DNA模板链的3'端结合进行延伸，故选择图中引物②和引物③，A错误； B、为了使蛛丝蛋白基因在羊的乳腺中特异性表达，科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，这样启动子可以启动蛛丝蛋白基因在乳腺细胞中表达，B正确； C、在凝胶中DNA分子的迁移速率除了与DNA分子的大小有关外，还与DNA分子的构象等因素有关，比如超螺旋结构、线性结构的DNA在凝胶中的迁移速率会有差异，C正确； D、电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，意味着在其乳腺细胞中蛛丝蛋白基因可能会表达，用抗原 - 抗体结合法可能在其乳汁中检测到蛛丝蛋白，D正确。 故选A。 14. 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（　　） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 【答案】A 【解析】 【详解】①是氢键，是解旋酶的作用位点； ②是磷酸二酯键，限制酶可将其断裂；③是磷酸二酯键，DNA连接酶可催化其形成，BCD错误，A正确。 15. 下列关于PCR的叙述，正确的是（ ） A. PCR是体外复制DNA技术，关键酶是解旋酶和DNA聚合酶 B. DNA聚合酶从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸 C. 第三轮循环产物中出现位于两种引物之间的DNA片段 D. 延伸过程需要酶、ATP和4种核糖核苷酸 【答案】C 【解析】 【详解】A、PCR技术通过高温破坏氢键使DNA解旋，不需要解旋酶，所需关键酶为耐高温的DNA聚合酶，A错误； B、DNA聚合酶只能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，子链沿5′→3′方向延伸，B错误； C、PCR前两轮循环得到的DNA片段两条链不等长，第三轮循环产物中会首次出现两种引物之间的固定长度的目标DNA片段，C正确； D、PCR延伸过程合成的是DNA，需要的原料是4种脱氧核糖核苷酸，而不是核糖核苷酸，且不需要额外提供ATP，能量由脱氧核苷三磷酸（dNTP）水解提供，D错误。 16. 某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述，错误的是（ ） A. 步骤①所代表的过程是逆转录 B. 步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，制备感受态细胞 C. 检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原－抗体反应试验 D. 可以在培养基中直接培养禽流感病毒 【答案】D 【解析】 【详解】A、步骤①是以RNA为模板合成DNA的过程，该过程为逆转录，A正确； B、将重组质粒导入大肠杆菌时，可用CaCl2处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，便于吸收外源DNA分子，B正确； C、禽流感康复的鸡的血清中含有针对禽流感病毒蛋白的特异性抗体，可通过抗原—抗体特异性反应检测Q蛋白是否生成，C正确； D、病毒无细胞结构，营寄生生活，必须寄生在活细胞内才能完成增殖等生命活动，无法在普通培养基中直接培养，D错误。 17. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是 A. 生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞 B. 乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养 C. 细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行 D. 灭活病毒可使细胞相互凝聚并让细胞膜上的分子重新排布 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，不同的技术手段的应用不同。 【详解】生物导弹是把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，单克隆抗体是导向作用，将药物定向的带到癌细胞位置，药物杀死细胞，A错误。癌细胞无限增殖，乳腺癌细胞比乳腺细胞比更容易进行离体培养，B错误。细胞核移植除了在同种动物、同种组织的细胞之间进行，也可以在不同动物的不同组织间进行，C错误。灭活病毒诱导细胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，是细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，D正确。 18. 关于生物技术的安全与伦理问题在我国相关法规明令禁止的是（ ） A. 试管动物的培育 B. 转基因食品的生产 C. 治疗性克隆的研究 D. 生物武器的发展和生产 【答案】D 【解析】 【分析】1、我国政府一再重申 四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。 2、2010年，在第65 届联合国大会上，我国政府重申支持《禁止生物武器公约》的宗旨和目标，全面、严格履行公约义务，支持不断加强公约的约束力，并主张全面禁止和彻底销毁生物武器等各类大规模杀伤性武器。 【详解】A、试管动物的培育属于胚胎工程，没有禁止，A正确； B、我国目前不反对转基因的食品的生产，B正确； C、中国政府禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，C正确； D、生物武器致病能力强、攻击范围广，世界范围内应全面禁止生物武器，D错误。 故选D。 19. 下图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是（ ） A. 基因工程的原理是基因重组 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. 农杆菌转化法是指上图中的②→③的过程 D. 基因工程的操作程序中核心步骤是目的基因的筛选与获取 【答案】A 【解析】 【分析】农杆菌转化法的原理是：农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入Ti质粒上的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA分子中。 【详解】A、基因工程的原理是基因重组，A正确； B、③侵染植物细胞后，重组Ti质粒的T-DNA整合到④的染色体上，B错误； C、农杆菌转化法是指将目的基因插入 Ti 质粒的 T - DNA 上，通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞并整合到植物细胞染色体的 DNA 上，应该是图中的①→②→③→④的过程，C错误； D、基因工程的操作程序中核心步骤是基因表达载体的构建，D错误。 故选A。 20. 关于DNA粗提取与鉴定的实验，下列叙述错误的是（ ） A. 洋葱、香蕉、菜花、猪血可作为理想的实验材料 B. 用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA去除不溶杂质 C. 用95%的冷酒精析出DNA，去除蛋白质等杂质 D. 溶解粗提取的DNA加入二苯胺试剂沸水浴，溶液呈蓝色 【答案】A 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的实验原理： 1、DNA的溶解性 （1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 （2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响．大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 【详解】A、猪是哺乳动物，其成熟的红细胞中不含细胞核和细胞器，即不含DNA，因此猪血不能作为实验材料来提取DNA，A错误； B、DNA能溶解于2mol/L的NaCl溶液中，因此可用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA去除不溶杂质，B正确； C、DNA不溶于95%的冷酒精，而其它杂质如蛋白质溶于酒精，因此可用95%的冷酒精析出DNA，去除蛋白质等杂质，C正确； D、溶解粗提取的DNA加入二苯胺试剂后需要沸水浴，才会呈现蓝色，D正确。 故选A。 21. 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是 A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B. 质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有 C. 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖快 D. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 【答案】C 【解析】 【分析】1、基因工程的工具： （1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 （2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 （3）运载体：常用的运载体有质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 2、基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、重组DNA技术所用的工具是限制酶、连接酶和运载体，其中工具酶是限制酶和连接酶，A错误； B、质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些真核细胞中也具有，但不存在于病毒中，B错误； C、细菌细胞体积小，繁殖周期短，遗传物质少，所以可选用细菌作为重组质粒的受体细胞，C正确； D、目的基因进入受体细胞中，由于操作失误和不可预测的干扰等，并不是所有受体细胞都能按照预先设计方案进行重组和表达，真正能有效表达的只是一小部分，而且细胞中的基因也是选择性表达的，D错误。 ​故选C。 【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。 22. 动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品，大致过程如图所示。下列有关说法错误的是（ ） A. 通过③形成的重组质粒具有人的药用蛋白基因、启动子、终止子和标记基因等 B. ④通常为农杆菌转化法 C. 转基因母牛乳腺细胞中人的药用蛋白基因才会得以表达，因此可从乳汁中提取药物 D. 该技术生产药物的优点是产量高、质量好、易提取 【答案】B 【解析】 【详解】A、重组质粒（基因表达载体）的必备结构包括目的基因（人的药用蛋白基因）、启动子、终止子、标记基因等，A正确； B、将重组质粒导入动物受精卵的常用方法是显微注射法，农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法，B错误； C、构建重组质粒时通常将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组，因此药用蛋白基因仅在转基因母牛的乳腺细胞中特异性表达，可从乳汁中提取目标药物，C正确； D、乳腺生物反应器生产的药物由动物乳腺细胞合成，有产量高、蛋白质经真核细胞加工质量好、从乳汁中易提取的优点，D正确。 23. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是（ ） A. 图中①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计， ⑤代表DNA合成 B. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，代表中心法则内容的是①② C. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计 D. 从图中可以看出蛋白质工程的基本途径与中心法则是相反的 【答案】C 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求．（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。 2、蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。 3、基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行（注意：目的基因只能用人工合成的方法）。 【详解】Ａ、①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表 DNA合成，Ａ正确； Ｂ、代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，代表中心法则内容的是①②，Ｂ正确； Ｃ、蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或修饰实现，Ｃ错误； D、蛋白质工程是根据具有相应功能的蛋白质结构推测氨基酸序列，进而推测出脱氧核苷酸序列，因此蛋白质工程的基本途径与中心法则是相反的，D正确。 故选C。 24. 基因工程、发酵工程等现代生物技术广泛应用于农牧业、医药卫生和食品工业等方面。下列相关叙述，错误的是（　　） A. 利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的化学防治 B. 采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白 C. 通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌发酵生产乙肝疫苗 D. 通过导入肠乳糖酶基因的奶牛分泌出乳糖含量低的乳汁 【答案】A 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A 、利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的生物防治，而不是化学防治，A 错误；’ B 、单细胞蛋白是通过发酵获得的微生物菌体，例如细菌、酵母菌等。这些微生物含有丰富的蛋白质，可以作为食品或饲料的蛋白质来源。采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白，B 正确； C 、通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌，会合成病毒的抗原，可生产乙肝疫苗，C 正确； D 、通过导入肠乳糖酶基因的奶牛，可以合成肠乳糖酶，分泌出乳糖含量低的乳汁，D 正确。 故选A。 25. 作物脱毒、改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质、性别鉴定依次是下列哪项生物技术的应用　 ①基因工程     ②细胞工程     ③蛋白质工程     ④胚胎工程 A. ①②②③④④ B. ②①②③②④ C. ②①①③②④ D. ②①②④③② 【答案】C 【解析】 【详解】作物脱毒是植物组织培养技术，属于②细胞工程；改善畜产品的品质，将乳糖酶基因导入奶牛基因组，使得转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，属于①基因工程；抗除草剂是DNA重组技术，属于①基因工程；保存干扰素，干扰素是一种蛋白质，治疗癌症和病毒感染，很难保存，运用③蛋白质工程；检测有毒物质，判断某物质的毒性，利用②细胞工程中动物细胞的培养；性别鉴定，在囊胚中取滋养层细胞，做分析，属于④胚胎工程。故选C。 第Ⅱ卷 主观题（共50分） 二、简答题（本题共6小题，50分） 26. 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂 含量(g) 10．0 5．0 5．0 2．0 0．2 12．0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL （1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____________。 （2）若根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？________________________________。 （3）在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基进行_______________________。 （4）图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是： ____________和____________________。 （5）以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有_______。 A．制作果酒　　 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳 【答案】 ①. 分解者 ②. 鉴别 ③. 将蛋白胨改成尿素 ④. 灭菌 ⑤. 稀释涂布平板法 ⑥. 平板划线法 ⑦. BC 【解析】 【分析】1、选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。 2、接种微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。 【详解】（1）生态系统的成分包括生产者、消费者、分解者、非生物的物质与能量，大肠杆菌利用现成的有机物，属于分解者。 （2）从配方表中可看出，该培养基中含有指示剂，可以用来鉴别微生物，故该培养基属于鉴别培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分应该以尿素为唯一氮源，故要将蛋白胨改为尿素。 （3）在微生物培养的过程中，无菌技术是获得纯净培养物的关键，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行严格灭菌。 （4）图1和图2是培养大肠杆菌的结果图，则获得图2效果的接种方法是平板划线法，图1所示接种方法为稀释涂布平板法。 （5）A、制作果酒所用的菌种是酵母菌，酵母菌是真核生物，与大肠杆菌在细胞结构上有明显的差异，A错误； B、由果酒制作果醋所用的菌种是醋酸菌，醋酸菌和大肠杆菌一样属于原核生物，细胞结构中没有真正的细胞核，与题意相符，B正确； C、制作泡菜所用的菌种为乳酸菌，乳酸菌与大肠杆菌都属于原核生物，细胞结构相似，与题意相符，C正确； D、制作腐乳所用的主要菌种为毛霉，毛霉属于真核生物，与大肠杆菌在结构上有明显的不同，D错误。 故选BC。 【点睛】熟知微生物培养技术和操作规程是解答本题的关键，能结合图示正确分析图中的接种方法是解答本题的前提，分解尿素的微生物的分离原理也是本题的考查点。 27. 尿素是一种重要的农业氮肥，但是并不能直接被农作物吸收。土壤中含大量微生物，其中就有尿素分解菌。某兴趣小组欲从土壤中分离该类细菌，并进行后续培养研究，设计了如下实验： 请回答有关问题： （1）称取土壤、梯度稀释、接种微生物需要在火焰旁进行，其目的是___________________。 （2）该兴趣小组设计了A、B两种培养基（成分见下表）： 葡萄糖 无机盐 尿素 琼脂 酚红溶液 水 培养基A ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 培养基B ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 注：＋表示有，－表示无 据表分析，两种培养基的碳源是_______________；接种的微生物中是否含有尿素分解菌，可通过观察酚红指示剂_________进行初步鉴定。 （3）加入培养基的无机盐含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是_____________和________________。接种环的灭菌方法是_________________。 （4）若用平板划线法接种微生物，在培养基上共画了4个区域，则至少需要_________次灼烧接种环。 （5）下图表示某培养基中的部分菌落，白色部分为抑菌圈，黑点代表大小不同的菌落。 ①图中培养基的接种方式用到的接种工具是__________。 ②已知三个培养基上的菌落数分别为36、44和40，每升土壤浸出液中的该细菌活菌数约为4×109个，涂布时每个培养基滴加的样液体积为0.1mL，则土壤浸出液的稀释倍数为________倍。③图中的甲、乙、丙三个菌落中的细菌，对嗜盐菌抑制效果最好的是___________。 【答案】（1）防止杂菌污染 （2） ①. 葡萄糖 ②. 是否变红 （3） ①. 为细菌生长提供营养物质 ②. 调节pH值 ③. 火焰灼烧灭菌 （4）5 （5） ①. 涂布器（或“涂布棒”） ②. 104 ③. 乙 【解析】 【小问1详解】 微生物培养的关键是无菌操作，称取土壤、梯度稀释、接种微生物需要在火焰旁进行，其目的是防止杂菌污染。 【小问2详解】 由表可知，两种培养基的碳源是葡萄糖；由鉴定分解尿素细菌的原理可知，尿素分解菌能产生脲酶，将尿素分解产生NH₃，使培养基pH升高，酚红指示剂在碱性条件下由黄色变为红色，接种的微生物中是否含有尿素分解菌，可通过观察酚红指示剂是否变红进行初步鉴定。 【小问3详解】 加入培养基的无机盐含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是为细菌生长提供营养物质，调节pH值。接种环的灭菌方法是采用酒精灯火焰灼烧灭菌。 【小问4详解】 采用平板划线法纯化微生物时，每次划线之前都要灼烧接种环，划线结束后还需灼烧接种环，若划线时在培养基上共画了4个区域，则需要5次灼烧接种环。 【小问5详解】 ①图中菌落分布均匀，且有明显的抑菌圈，采用的是稀释涂布平板法，所用工具是涂布器（或“涂布棒”）； ②若稀释倍数为X，涂布的0.1 mL，每升土壤浸出液中的该细菌活菌数约为4×109个，建立等式（36+44+40）÷3÷0.1×X×1×103=4×109，土壤浸出液的稀释倍数为 X=104，图中抑菌圈（白色透明区域）越大，表明该菌落产生的抑菌物质扩散越远，对嗜盐菌的抑制能力越强。对比甲、乙、丙三个菌落周围抑菌圈的大小，乙菌落周围的抑菌圈直径最大。对嗜盐菌抑制效果最好的是乙。 28. 学习下列材料，回答（1）～（4）题。 纳米酶 目前已有 8000多种酶被发现。天然酶稳定性差，通常难以制备和保存，只有约2%能用于大规模生产。科学家通过现代生物技术改善酶的催化性能，取得一定效果。例如，通过蛋白质工程将丙糖磷酸异构酶（T酶）第14位和第78位的两个天冬酰胺分别变为苏氨酸和异亮氨酸，使酶的热稳定性大幅提高。但目前仍无法从根本上解决酶的工业应用问题，科学家一直在探索可以代替天然酶的物质。 2007年，我国科学家率先发现Fe3O4纳米颗粒具有类似过氧化物酶的催化活性。这类材料能够基于特定纳米结构催化天然酶的底物，被称为“纳米酶”，主要有金属氧化物纳米酶、碳纳米酶等。 纳米酶催化效率高，且具有高稳定性。例如，辣根过氧化物酶在pH低于5或温度高于40℃的环境中孵育2h,会完全丧失催化活性；而Fe3O4纳米酶在pH为1～12或温度4～90℃的环境中孵育2h,仍保持良好的催化活性。 纳米酶专一性较差。例如，过氧化物纳米酶能催化多类物质发生反应；Fe3O4纳米酶可在不同pH条件下催化H2O2发生不同的反应。 纳米酶作为一种绿色环保的催化剂，在化工合成、新能源开发、环境保护等领域具有巨大的应用潜力。有研究者认为“纳米酶可能是生命起源中的酶前催化剂”，深入探究纳米酶可为生命起源研究提供重要信息。 （1）绝大多数酶的化学本质是________。与一般的无机催化剂相比，酶__反应活化能的作用更显著。 （2）酶与纳米酶的相同点是________。 A. 具有高稳定性 B. 具有高效性 C. 只能催化一种反应 （3）利用蛋白质工程改造T酶的基本思路如图。请在①处补充相应内容，并写出②、③表示的过程①________；②________；③________。 【答案】（1） ①. 蛋白质 ②. 降低 （2）B （3） ①. 脱氧核苷酸 ②. 转录 ③. 翻译 【解析】 【小问1详解】 绝大多数酶化学本质是蛋白质，少数酶是RNA；酶催化的原理是能降低化学反应的活化能，与无机催化剂相比，酶可以更显著降低反应的活化能，因而酶具有高效性。 【小问2详解】 AB、纳米酶”，主要有金属氧化物纳米酶、碳纳米酶等，纳米酶催化效率高，且具有高稳定性，但绝大多数酶的化学本质是蛋白质，在过酸、过碱和高温条件下会变性，因此稳定性差，A错误，B正确； C、纳米酶专一性较差，如过氧化物纳米酶能催化多类物质发生反应，C错误。 【小问3详解】 利用蛋白质工程改造T酶的基本思路如下图；首先根据蛋白质的功能设计蛋白质的结构，即设计T酶的结构，进而推测应有的氨基酸序列，根据氨基酸序列结合碱基互补配对原则推测指导T酶合成的基因中应有的脱氧核苷酸序列，进而合成相应的突变基因序列，则理论上在该基因的指导下可指导符合要求的T酶合成，基因指导蛋白质合成过程包括转录和翻译两个步骤，因此图中①、②、③处依次为脱氧核苷酸（碱基）、转录和翻译。 29. 枣树细胞中的金属硫蛋白（MT）具有结合金属的能力，科学家利用基因工程的方法获得可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌用于环境领域。回答下列问题： （1）研究人员可提取枣树细胞的mRNA并进行______来获取MT基因。 （2）若用PCR的方法获取MT基因（其结构如图1所示，A链为转录的模板链），并利用图2所示质粒构建重组DNA分子（相关限制酶切位点已注明）。则PCR时应选择引物______和引物______。为实现MT基因与载体的定向连接，需在引物______（填“5′”或“3′”）末端分别添加限制酶______和 ______的识别序列。 （3）基因工程的核心步骤是___________________。与启动子相比，密码子特有的碱基为______（填中文名称）。 （4）将目的基因导入大肠杆菌时，需用______处理大肠杆菌。导入后在分子水平上可用______方法检测MT是否成功表达。此外，还可用含______的液体培养基培养大肠杆菌并检测其一段时间后的数量变化，从而选择出可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌。 【答案】（1）逆转录 （2） ①. Ⅱ ②. Ⅲ ③. 5' ④. Kpn Ⅰ ⑤. Pst Ⅰ （3） ①. 基因表达载体的构建 ②. 尿嘧啶 （4） ①. Ca2+（或CaCl2） ②. 抗原—抗体杂交 ③. （一定浓度的重金属）镉 【解析】 【小问1详解】 以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录，故研究人员可提取枣树细胞的mRNA并进行逆转录来获取MT基因。 【小问2详解】 PCR过程中，引物与模板链的3'端结合，因此应当选择引物Ⅱ和引物Ⅲ，这样才能使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。由题干可知，A链为模板链，转录的方向是沿着模板链的3'→5'，应将MT基因的右端与启动子一侧连接，分析图2可知，质粒上有两个XhoI的酶切位点，并且这两个酶切位点都在标记基因上，所以为了保证MT基因正向连接到质粒上，应当在MT基因两侧连上不同的限制酶识别序列，故添加的限制酶序列分别是Kpn Ⅰ和Pst Ⅰ限制酶序列，并且应添加在基因的外侧，才能不影响基因的序列，故添加在引物的5'端。 【小问3详解】 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。启动子位于基因的非编码区，密码子位于mRNA上，与启动子相比，密码子特有的碱基为尿嘧啶。 【小问4详解】 大肠杆菌是原核生物，需要Ca2+（或CaCl2）处理，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，从而完成将基因表达载体导入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，即转化过程；导入后，在分子水平上，可用抗原—抗体杂交方法检测MT是否成功表达。此外，还可用含（一定浓度的重金属）镉的液体培养基培养大肠杆菌并检测其一段时间后的数量变化，从而选择出可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌。 30. 下图左图模型图表示细胞融合技术的一些过程，右图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑥表示操作过程。请回答以下问题： （1）若左图过程表示植物体细胞杂交技术部分过程，则a、b细胞是酶解法获取的_____，d细胞还要通过_____生理过程形成杂种植株。 （2）若左图过程表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）部分过程，供体细胞a的性染色体组成可为_____，克隆动物的成功证明了_____ （3）右图中①过程涉及的精子需进行_____处理；②是将某抗病外源基因插入牛受精卵后能培育成转基因牛，鉴定培育是否成功的个体生物学水平方法_____。 （4）欲在短时间内获得更多的良种奶牛，常常在右图④之前采用_____技术进行操作，若进行操作的是囊胚阶段的胚胎，要注意的是_____。 （5）为确保得到雌性奶牛，往往需要对移植的胚胎进行性别鉴定，请写出一种对早期胚胎进行性别鉴定的方法_____ 【答案】（1） ①. 原生质体 ②. 植物组织培养（脱分化和再分化） （2） ①. XX或XY ②. （高度分化的）动物体细胞核具有全能性 （3） ①. 获能 ②. 对培育的转基因牛进行相应（或某）病原体接种，检测是否抗病及抗病程度。（合理即可） （4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团均等分割 （5）取滋养层细胞进行DNA分析（或取滋养层细胞进行染色体分析或取滋养层细胞进行染色体组分析） 【解析】 【分析】右图中：①表示体外受精，②表示转基因技术，③表示早期胚胎培养，④⑤表示胚胎移植。 【小问1详解】 若左图表示植物体细胞杂交的部分过程，则a、b是通过纤维素酶和果胶酶处理获得的原生质体，d杂种细胞还需要通过植物组织培养获得杂种植株。 【小问2详解】 供体细胞a可以是雌性或雄性，故其性染色体组成为XX或XY，克隆动物的成功证明了动物体细胞的核具有全能性。 【小问3详解】 右图中涉及的精子需要进行获能处理；鉴定抗病转基因牛是否培育成功，在个体水平上可以对转基因牛进行病原体接种实验，检测其是否抗病及抗病程度。 【小问4详解】 右图④表示胚胎移植，要在短时间内获得更多的良种奶牛，可以进行胚胎分割进行处理，需要对囊胚的内细胞团进行均等分割。 【小问5详解】 可以取滋养层细胞进行DNA或染色体分析，鉴定早期胚胎的性别。 31. 胚胎工程技术包含的内容很丰富，如下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体 1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题。 （1）在应用1中，获得小牛的过程涉及到的技术手段主要是__________、__________。 （2）在应用2中，为使供体1获得更多的卵子，需要用___________激素处理；牛胚胎发育若在体内进行，则受精作用在___________进行。刚种植在子宫内的胚胎的发育程度一般为___________时期，最终发育的小牛叫___________牛。 （3）在应用4中，通过___________技术获得二分胚①和②。 【答案】（1） ①. 动物体细胞核移植技术 ②. 胚胎移植技术（顺序可互换） （2） ①. 促性腺 ②. 输卵管 ③. 桑葚胚（或囊胚） ④. 试管 （3） 胚胎分割 【解析】 【小问1详解】 应用1为克隆牛培育流程：首先将供体1高产奶牛的体细胞核移入供体2提供的去核卵母细胞中，该步骤为动物体细胞核移植技术；重组细胞经早期培养后，需要通过胚胎移植技术移入受体母牛子宫内完成后续发育，因此核心技术为上述两种。 【小问2详解】 对供体母牛注射促性腺激素可实现超数排卵，获得更多卵母细胞；哺乳动物体内受精的自然场所是输卵管；牛的胚胎移植通常选择发育到桑葚胚或囊胚阶段的胚胎，该阶段胚胎着床成功率高；应用2是经体外受精、胚胎培育后移植获得的后代，属于试管动物。 【小问3详解】 将早期胚胎切割为多等份、获得遗传物质相同的多个胚胎的技术为胚胎分割技术，二分胚是该技术的常见应用。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 绝密 启用前 2025-2026学年第二学期高二期末质量检测 生物 本卷满分:100分，考试时间:75分钟 注意事项： 1.本试卷共10页，二大题，31小题。 2.答卷前考生务必浏览试卷和答题卡，检查印刷和页码数。务必规范、完整填写卷头。 3.答案必须填写在答题卡上，在试题上作答无效。考试结束后，只交答题卡。 4.考生作选择题时，请使用2B铅笔将正确答案涂在答题卡对应位置。非选择题请用0.5毫米黑色签字笔在答题卡对应题号的答题区域内作答。（注：五号宋体加粗） 第Ι卷 客观题（共60分） 一、选择题（本题共25小题，50分） 1. 发酵食品是中国传统食品中一个重要的类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。请结合所学发酵知识和生活经验，指出下列不属于经发酵得到的食品是（ ） A. 泡菜和酸奶 B. 奶酒和干酪 C. 豆腐和果汁 D. 味精和酱油 2. 下列有关果酒、果醋、酸奶、泡菜和腐乳等制作的叙述，正确的是（ ） A. 参与腐乳形成的主要微生物是毛霉，属于原核细胞 B. 果酒发酵和果醋发酵中，主要发酵菌所需的适宜温度较高的是后者 C. 制作泡菜时，坛内形成的白色菌膜是乳酸菌大量增殖的结果 D. 果酒、果醋、酸奶和泡菜制作利用的菌种均具有生物膜系统 3. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ） A. 用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精 B. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 C. 腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵 D. 泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用 4. 下列关于微生物的分离和培养的叙述中，正确的是（ ） A. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B. 进行微生物培养前，需对培养基进行消毒处理 C. 平板划线法和稀释涂布平板法都可对细菌进行分离计数 D. 用含刚果红的尿素培养基筛选鉴别出能分解尿素的菌株 5. 需要在火焰旁操作的有（　　） ①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液　④涂布平板　⑤微生物的培养 A. ①②③④⑤ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ②③④⑤ 6. 营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质（如氨基酸、维生素）的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株，可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿上，一段时间后将菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿中，进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 影印培养法使用的是液体培养基进行微生物培养 B. 甲丙两种培养基中均添加了特殊营养物质 C. 乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株 D. 甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异 7. 急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量是有效预防疾病发生的必要措施，如图表示检验微生物的简要步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. 根据图1的微生物接种方法，可得到图2所示的四种菌落分布图 B. 为保证统计的菌落数目更加准确，同一稀释度下需要至少设置三个平板 C. 培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，应在灭菌后进行pH调整 D. 可用平板划线法和稀释涂布平板法对大肠杆菌进行鉴定和计数 8. 无菌技术是获得纯净微生物的关键。下列相关叙述错误的是（ ） A. 消毒和灭菌在杀菌程度上存在差异 B. 紫外线对接种室有较好的灭菌作用 C. 鲜奶一般使用湿热灭菌法进行灭菌 D. 过滤除菌法可大量制备无菌空气 9. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（　　） 比较内容 植物细胞工程 动物细胞工程 A 特殊处理 酶解法去除细胞壁 用胰蛋白酶处制成细胞悬浮液 B 融合方法 物理方法、化学方法、生物方法 物理方法、化学方法 C 典型应用 人工种子、种间杂种植物 单克隆抗体的制备 D 培养基区别 植物激素具有重要作用 动物血清不可缺少 A. A B. B C. C D. D 10. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，简要流程如图。下列有关叙述正确的是（ ） A. 过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术 B. 细胞培养中需提供5%CO2，目的是调节细胞外液的渗透压 C. 胚胎干细胞可来源于囊胚中的内细胞团，具有发育的全能性 D. 将图中获得的组织器官移植给个体A，不会发生免疫排斥反应 11. 基因工程的主要操作步骤依次是（　　） ①筛选导入目的基因的受体细胞 ②构建基因表达载体 ③使目的基因在受体细胞中成功表达 ④筛选和获取目的基因 ⑤将表达载体导入受体细胞 A. ①②③④⑤ B. ④②⑤①③ C. ④⑤②③① D. ③②④⑤① 12. 在基因工程的操作中，需要三种工具，分别是“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”，关于这三种工具的叙述，不正确的是（ ） A. “分子手术刀”指的是限制性内切核酸酶，可以断开 DNA 的磷酸二酯键 B. “分子缝合针”指的是 DNA 聚合酶，可以催化生成断裂的磷酸二酯键 C. “分子运输车”指的是载体，常用的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体 D. “分子手术刀”主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的 DNA 13. 蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（ ） A. 用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B. 科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C. 在凝胶中DNA分子的迁移速率不只与DNA分子的大小有关 D. 若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可能在其乳汁检测到蛛丝蛋白 14. 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（　　） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 15. 下列关于PCR的叙述，正确的是（ ） A. PCR是体外复制DNA技术，关键酶是解旋酶和DNA聚合酶 B. DNA聚合酶从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸 C. 第三轮循环产物中出现位于两种引物之间的DNA片段 D. 延伸过程需要酶、ATP和4种核糖核苷酸 16. 某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述，错误的是（ ） A. 步骤①所代表的过程是逆转录 B. 步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，制备感受态细胞 C. 检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原－抗体反应试验 D. 可以在培养基中直接培养禽流感病毒 17. 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是 A. 生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞 B. 乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养 C. 细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行 D. 灭活病毒可使细胞相互凝聚并让细胞膜上的分子重新排布 18. 关于生物技术的安全与伦理问题在我国相关法规明令禁止的是（ ） A. 试管动物的培育 B. 转基因食品的生产 C. 治疗性克隆的研究 D. 生物武器的发展和生产 19. 下图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是（ ） A. 基因工程的原理是基因重组 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. 农杆菌转化法是指上图中的②→③的过程 D. 基因工程的操作程序中核心步骤是目的基因的筛选与获取 20. 关于DNA粗提取与鉴定的实验，下列叙述错误的是（ ） A. 洋葱、香蕉、菜花、猪血可作为理想的实验材料 B. 用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA去除不溶杂质 C. 用95%的冷酒精析出DNA，去除蛋白质等杂质 D. 溶解粗提取的DNA加入二苯胺试剂沸水浴，溶液呈蓝色 21. 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是 A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B. 质粒是基因工程常用的运载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有 C. 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细胞繁殖快 D. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 22. 动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品，大致过程如图所示。下列有关说法错误的是（ ） A. 通过③形成的重组质粒具有人的药用蛋白基因、启动子、终止子和标记基因等 B. ④通常为农杆菌转化法 C. 转基因母牛乳腺细胞中人的药用蛋白基因才会得以表达，因此可从乳汁中提取药物 D. 该技术生产药物的优点是产量高、质量好、易提取 23. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是（ ） A. 图中①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计， ⑤代表DNA合成 B. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，代表中心法则内容的是①② C. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计 D. 从图中可以看出蛋白质工程的基本途径与中心法则是相反的 24. 基因工程、发酵工程等现代生物技术广泛应用于农牧业、医药卫生和食品工业等方面。下列相关叙述，错误的是（　　） A. 利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的化学防治 B. 采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白 C. 通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌发酵生产乙肝疫苗 D. 通过导入肠乳糖酶基因的奶牛分泌出乳糖含量低的乳汁 25. 作物脱毒、改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质、性别鉴定依次是下列哪项生物技术的应用　 ①基因工程     ②细胞工程     ③蛋白质工程     ④胚胎工程 A. ①②②③④④ B. ②①②③②④ C. ②①①③②④ D. ②①②④③② 第Ⅱ卷 主观题（共50分） 二、简答题（本题共6小题，50分） 26. 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂 含量(g) 10．0 5．0 5．0 2．0 0．2 12．0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL （1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____________。 （2）若根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？________________________________。 （3）在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基进行_______________________。 （4）图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是： ____________和____________________。 （5）以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有_______。 A．制作果酒　　 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳 27. 尿素是一种重要的农业氮肥，但是并不能直接被农作物吸收。土壤中含大量微生物，其中就有尿素分解菌。某兴趣小组欲从土壤中分离该类细菌，并进行后续培养研究，设计了如下实验： 请回答有关问题： （1）称取土壤、梯度稀释、接种微生物需要在火焰旁进行，其目的是___________________。 （2）该兴趣小组设计了A、B两种培养基（成分见下表）： 葡萄糖 无机盐 尿素 琼脂 酚红溶液 水 培养基A ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 培养基B ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 注：＋表示有，－表示无 据表分析，两种培养基的碳源是_______________；接种的微生物中是否含有尿素分解菌，可通过观察酚红指示剂_________进行初步鉴定。 （3）加入培养基的无机盐含有KH2PO4及Na2HPO4，其作用是_____________和________________。接种环的灭菌方法是_________________。 （4）若用平板划线法接种微生物，在培养基上共画了4个区域，则至少需要_________次灼烧接种环。 （5）下图表示某培养基中的部分菌落，白色部分为抑菌圈，黑点代表大小不同的菌落。 ①图中培养基的接种方式用到的接种工具是__________。 ②已知三个培养基上的菌落数分别为36、44和40，每升土壤浸出液中的该细菌活菌数约为4×109个，涂布时每个培养基滴加的样液体积为0.1mL，则土壤浸出液的稀释倍数为________倍。③图中的甲、乙、丙三个菌落中的细菌，对嗜盐菌抑制效果最好的是___________。 28. 学习下列材料，回答（1）～（4）题。 纳米酶 目前已有 8000多种酶被发现。天然酶稳定性差，通常难以制备和保存，只有约2%能用于大规模生产。科学家通过现代生物技术改善酶的催化性能，取得一定效果。例如，通过蛋白质工程将丙糖磷酸异构酶（T酶）第14位和第78位的两个天冬酰胺分别变为苏氨酸和异亮氨酸，使酶的热稳定性大幅提高。但目前仍无法从根本上解决酶的工业应用问题，科学家一直在探索可以代替天然酶的物质。 2007年，我国科学家率先发现Fe3O4纳米颗粒具有类似过氧化物酶的催化活性。这类材料能够基于特定纳米结构催化天然酶的底物，被称为“纳米酶”，主要有金属氧化物纳米酶、碳纳米酶等。 纳米酶催化效率高，且具有高稳定性。例如，辣根过氧化物酶在pH低于5或温度高于40℃的环境中孵育2h,会完全丧失催化活性；而Fe3O4纳米酶在pH为1～12或温度4～90℃的环境中孵育2h,仍保持良好的催化活性。 纳米酶专一性较差。例如，过氧化物纳米酶能催化多类物质发生反应；Fe3O4纳米酶可在不同pH条件下催化H2O2发生不同的反应。 纳米酶作为一种绿色环保的催化剂，在化工合成、新能源开发、环境保护等领域具有巨大的应用潜力。有研究者认为“纳米酶可能是生命起源中的酶前催化剂”，深入探究纳米酶可为生命起源研究提供重要信息。 （1）绝大多数酶的化学本质是________。与一般的无机催化剂相比，酶__反应活化能的作用更显著。 （2）酶与纳米酶的相同点是________。 A. 具有高稳定性 B. 具有高效性 C. 只能催化一种反应 （3）利用蛋白质工程改造T酶的基本思路如图。请在①处补充相应内容，并写出②、③表示的过程①________；②________；③________。 29. 枣树细胞中的金属硫蛋白（MT）具有结合金属的能力，科学家利用基因工程的方法获得可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌用于环境领域。回答下列问题： （1）研究人员可提取枣树细胞的mRNA并进行______来获取MT基因。 （2）若用PCR的方法获取MT基因（其结构如图1所示，A链为转录的模板链），并利用图2所示质粒构建重组DNA分子（相关限制酶切位点已注明）。则PCR时应选择引物______和引物______。为实现MT基因与载体的定向连接，需在引物______（填“5′”或“3′”）末端分别添加限制酶______和 ______的识别序列。 （3）基因工程的核心步骤是___________________。与启动子相比，密码子特有的碱基为______（填中文名称）。 （4）将目的基因导入大肠杆菌时，需用______处理大肠杆菌。导入后在分子水平上可用______方法检测MT是否成功表达。此外，还可用含______的液体培养基培养大肠杆菌并检测其一段时间后的数量变化，从而选择出可吸附和耐受重金属镉的大肠杆菌。 30. 下图左图模型图表示细胞融合技术的一些过程，右图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑥表示操作过程。请回答以下问题： （1）若左图过程表示植物体细胞杂交技术部分过程，则a、b细胞是酶解法获取的_____，d细胞还要通过_____生理过程形成杂种植株。 （2）若左图过程表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）部分过程，供体细胞a的性染色体组成可为_____，克隆动物的成功证明了_____ （3）右图中①过程涉及的精子需进行_____处理；②是将某抗病外源基因插入牛受精卵后能培育成转基因牛，鉴定培育是否成功的个体生物学水平方法_____。 （4）欲在短时间内获得更多的良种奶牛，常常在右图④之前采用_____技术进行操作，若进行操作的是囊胚阶段的胚胎，要注意的是_____。 （5）为确保得到雌性奶牛，往往需要对移植的胚胎进行性别鉴定，请写出一种对早期胚胎进行性别鉴定的方法_____ 31. 胚胎工程技术包含的内容很丰富，如下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体 1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题。 （1）在应用1中，获得小牛的过程涉及到的技术手段主要是__________、__________。 （2）在应用2中，为使供体1获得更多的卵子，需要用___________激素处理；牛胚胎发育若在体内进行，则受精作用在___________进行。刚种植在子宫内的胚胎的发育程度一般为___________时期，最终发育的小牛叫___________牛。 （3）在应用4中，通过___________技术获得二分胚①和②。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $