专题12 发酵工程（6年汇编）（黑吉辽蒙专用）2021-2026年高考生物真题分类汇编

**基本信息** 聚焦发酵工程专题，汇编2021-2026年黑吉辽蒙高考真题及模拟题，以食品发酵、环境治理、航天安全等真实情境为载体，覆盖传统发酵技术、微生物培养与应用、发酵工程应用核心考点，体现从单一操作到“筛选-鉴定-应用”综合技术链条的命题趋势。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选|15题|传统发酵中酵母菌与醋酸杆菌代谢差异、微生物培养的筛选鉴定（如金霉素降解菌株）、发酵工程曲线分析（如DHA油脂生产）|情境真实（如航天微生物检测），注重实验操作（稀释涂布平板法、灭菌方法）| |多选|6题|微生物培养的选择培养基设计、发酵工程与基因工程整合（如FPS酶基因导入）|综合技术链条，强化工程应用导向（如筛选高耐受菌株）|

专题12 发酵工程 6年真题1年模拟 考点分类 黑吉辽蒙考情 命题规律 考点01 传统发酵技术的应用 2021辽宁（1题） · 情境设置：以果酒、果醋等传统发酵食品制作为背景 · 考查重点：菌种代谢特点（酵母菌厌氧产酒、醋酸杆菌好氧产酸）、接种顺序与操作逻辑 · 命题趋势：单独命题减少，多融入微生物培养或发酵工程综合题中作为基础环节考查，侧重原理理解而非记忆 考点02 微生物的培养与应用 2026黑吉辽蒙（1题）、2025黑吉辽蒙（1题）、2024辽宁（1题）、 2023辽宁（1题）、 2022辽宁（2题） · 情境设置：以食品发酵、环境治理、病害防治、航天安全等真实科研或生产场景为载体 · 考查重点：微生物筛选原理与方法（稀释涂布平板法、选择培养基）、实验操作正误判断、结果分析 · 命题趋势：逐年强化工程应用导向，从单一筛选向"筛选-鉴定-应用"完整技术链条延伸，综合度提升 考点03 发酵工程及其应用 2023辽宁（1题） · 情境设置：以微生物发酵生产高附加值产品（如DHA油脂）为典型情境 · 考查重点：发酵过程曲线分析、代谢物动态变化规律、发酵条件优化 · 命题趋势：考查频次较低但综合性强，未来可能结合发酵工程与基因工程、代谢调控等深度整合命题 考点1 传统发酵技术的应用 1.（2021·辽宁·高考真题）利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述错误的是（　　） A. 乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖 B. 酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖 C. 酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同 D. 接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度 考点2 微生物的培养与应用 1.（2026·黑吉辽蒙·高考真题）（多选）某奶酒以牛奶为主要原料，经微生物发酵酿制而成。为提高发酵效率，需筛选具有乳糖利用率高、乙醇产量高等特性的酵母菌菌株。下列叙述正确的是（　　） A. 选择培养基应以葡萄糖为唯一碳源 B. 选择培养基中可添加抗生素抑制细菌生长 C. 制备固体培养基需先高压蒸汽灭菌再倒平板 D. 接种后的平板应在37℃恒温培养 2.（2025·黑吉辽蒙·高考真题）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（　　） A. 以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B. 逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C. 配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D. 用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 3.（2024·辽宁·高考真题）（多选）某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（　　） A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 4.（2023·辽宁·高考真题）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是（　　） A. 采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B. 细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C. 同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D. 稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 5.（2022·辽宁·高考真题）为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（　　） A. 航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B. 细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C. 在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D. 采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征 6.（2022·辽宁·高考真题）（多选）β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是（　　） A. 所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌 B. 通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌 C. 还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力 D. 该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发 考点3 发酵工程及其应用 1.（2023·辽宁·高考真题）利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（　　）     A. DHA油脂的产量与生物量呈正相关 B. 温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量 C. 葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量 D. 12～60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高 1.（2026·辽宁锦州·一模）（多选）为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母（无法利用赖氨酸），其能在WL培养基上形成奶油状略带绿色、球形的菌落。下列相关说法错误的是（　　） 注：YPD培养基和WL培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL培养基含有指示剂溴甲酚绿 A. III属于鉴别培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种 B. 进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基 C. 从III中挑取菌种接种到IV上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母 D. I、II均为液体培养基，图中重复操作可提升酿酒酵母的酒精发酵能力 2.（2026·辽宁锦州·一模）聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上 B. 步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长越有利 C. 扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株 D. 挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定各菌落中嗜盐细菌的PHA产量 3.（2026·黑龙江哈尔滨·一模）木霉菌可降解环境中的纤维素。将诱变处理后的木霉菌接种到培养基中，筛选纤维素酶高产菌株。下列说法正确的是（　　） A. 不宜通过接种蒸馏水检测所配制的固体培养基是否被污染 B. 培养基中应添加纤维素和刚果红，经倒平板后再湿热灭菌 C. 红色圈的直径与菌落的直径比值越大，降解纤维素的能力越强 D. 筛选纤维素酶高产菌株的选择培养基应以纤维素为唯一氮源 4.（2026·辽宁辽阳·一模）（多选）药物阿莫西林能消炎杀菌，是常用的抗生素。共生放线菌产生的次生代谢产物亦能帮助宿主抵御病原菌侵染，为探究其次生代谢产物乙酸乙酯和正丁醇对S菌是否具有抑菌活性，进行了相关实验，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 实验所用的培养基和培养皿需经湿热灭菌 B. 上述实验设计了两组对照组和两组实验组 C. 逐代挑选抑菌圈边缘细菌进行实验，抑菌圈逐渐缩小 D. 具有抑菌活性的乙酸乙酯是放线菌生长和生存必需的代谢产物 5.（2026·吉林·一模）土壤中的微生物数量与脲酶活性可反映土壤的肥力。科研人员用不同方式进行施肥，探究其对土壤微生物数量和脲酶活性的影响，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A. M、NP和S三种施肥方式中，对土壤微生物数量影响最大的是NP B. 有机肥可以为土壤微生物的生长繁殖和植物的生长提供物质和能量 C. 混合施肥对土壤微生物数量和脲酶活性的影响不一定大于单独施肥的效果 D. 分离土壤中产生脲酶的微生物适宜采用以尿素为唯一氮源的选择培养基 6.（2026·吉林·一模）（多选）火龙果在常温下极易腐败变质，产生醋味。可从火龙果上筛选优质醋酸菌种，用于火龙果深加工，筛选过程如下图。下列叙述正确的是（） A. “富集培养基”为液体培养基，培养时需振荡培养 B. 筛选步骤中培养基中添加的作用是提供碳源和无机盐 C. 醋酸达到一定量会抑制醋酸菌的活性，因此要测定菌株的醋酸耐受性 D. 在菌株鉴定时，添加革兰氏染色剂的培养基属于选择培养基 7.（2026·吉林·一模）青蒿素是一种有效的疟疾治疗药物。研究发现，在黄花蒿产生青蒿素的代谢过程中，某些酶（如FPS酶）起决定性作用；在对黄花蒿进行组织培养时，发现它的愈伤组织中没有青蒿素，但是由愈伤组织再分化形成的芽和苗中均有青蒿素；四倍体黄花蒿体内青蒿素的含量比二倍体高38%。下列有关叙述错误的是（　　） A. 进行植物组织培养时，需要用酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒 B. 可利用基因工程将FPS酶基因导入微生物中，利用发酵工程进行生产 C. 将黄花蒿的愈伤组织通过植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产 D. 采用聚乙二醇融合法将二倍体黄花蒿细胞诱导融合获得四倍体黄花蒿 8.（2026·辽宁沈阳·一模）养殖塘中微囊藻过多时，虾会因微囊藻毒素（MCs，一种含氮化合物）在其肠道积累过多而死亡。研究者欲从虾的肠道中筛选出能降解MCs的细菌，作为其饲料添加剂。下列叙述错误的是（　　） A. 宜选择发生微囊藻水华的养殖塘中的虾用于筛选 B. 筛选时所用培养基应以MCs作为唯一氮源 C. 用细菌计数板计数可研究该降解菌的生长规律 D. 在通气、振荡条件下培养更利于增加降解菌数量 9.（2026·吉林长春·一模）通过土壤管理、种植管理和病虫害防治等方法，可以提高作物产量。下列相关叙述错误的是（　　） A. 有机肥料可增加土壤中的有机质含量，改善土壤结构 B. 合理密植有利于作物充分利用光能，提高光能利用率 C. 除虫可使农田生态系统中的能量更多地流向对人类最有益的部分 D. 照射远红光和紫外光能激活光敏色素，显著提高蔬菜产量 10.（2026·吉林长春·一模）（多选）将能杀灭玉米螟的苏云金杆菌（甲）和能杀灭蚊子的灭蚊球孢菌（乙）作为亲本菌株，进行原生质体融合育种，以得到既能杀蚊又能杀螟的融合菌株。下图为部分育种过程，下列叙述错误的是（　　） A. 育种过程中加入的酶可能是溶菌酶 B. 融合原生质体的形成依赖于生物膜的选择透过性 C. 原生质体融合后需要经过筛选 D. 融合菌株是染色体数目加倍的二倍体 11.（2026·辽宁·二模）在发酵食品生产中，选择合适的灭菌或消毒方法至关重要。下列相关叙述错误的是（　　） A. 果酒发酵中，酵母菌在适宜条件下可成为优势菌种从而抑制杂菌生长 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器属于灭菌，可以杀死容器内的所有微生物 C. 用巴氏消毒法处理牛奶可以杀死大部分微生物并保留牛奶的营养成分 D. 培养基一般采用高压蒸汽灭菌，灭菌后需冷却至适宜温度再倒平板或接种 12.（2026·辽宁·二模）（多选）为筛选适合黄芪（一种中药材）的微生物固氮菌肥的菌种，科研人员进行如下流程的实验： 土壤样品→制备土壤悬液→富集培养→梯度稀释涂布平板→单菌落→菌种鉴定 下列有关叙述正确的是（　　） A. 土壤取样时要在黄芪种植地多点取样且选取0～2cm表层土 B. 为增加固氮菌的浓度，富集培养基中不应添加氮源 C. 涂布操作时应待涂布器冷却后蘸取菌液在平板上涂布 D. 观察菌落形态、颜色等特征可以初步判断固氮微生物的种类 13.（2026·辽宁锦州·二模）羧酸还原酶（CAR）是尼龙合成代谢途径的关键酶，但催化效率低，我国科研团队运用AI技术和蛋白质工程技术成功改造并提升了CAR的活性。改造过程中最先进行的步骤是（　　） A. 用AI技术设计新型CAR的结构模型 B. 用基因工程技术改造CAR基因 C. 依据中心法则推算新型CAR基因序列 D. 利用发酵工程生产新型CAR 14.（2026·辽宁锦州·二模）某些微生物能利用糖类合成油脂，可用于制备生物柴油。研究人员从某土壤样本分离出产油脂的细菌。苏丹黑B可渗入细胞内将油脂颗粒染成黑色。下图是实验流程和结果示意图，1～6表示菌落。 下列叙述正确的是（　　） A. 图中培养基以油脂作为唯一碳源，并添加琼脂等成分 B. 实验用无菌水进行梯度稀释，用平板划线法进行接种 C. 平板上菌落5的生长速率和产油脂速率较菌落4更快 D. 应从滤纸片上挑选出菌落5的菌株进行纯化培养和保存 15.（2026·黑龙江哈尔滨·二模）（多选）“酱豆粒煮软研碎，以手搏成砖形，置于较为温暖之僻静处，经两月余，使发酵后，复以洁水洗之，掰成碎块，曝日中二三日，置缸内，加清洁盐水，经一月后，即成酱色，黑暗或绛褐，味极咸。”以上是东北地区人民制作传统豆酱时普遍遵循的方法。下列说法正确的是（　　） A. “豆粒煮软”可使蛋白质适度变性，易被微生物利用 B. “成砖形，置于温暖僻静处”可保持湿度与温度稳定，利于初期发酵 C. 加盐水的主要目的是促进微生物的生长繁殖 D. “经两月余，使发酵”过程中，豆中的蛋白质可被分解为多肽和氨基酸 16.（2026·黑龙江齐齐哈尔·二模）分离技术是生物学研究中常用的实验手段，下列说法正确的是（　　） A. 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中需对接种环进行灼烧灭菌 B. 差速离心法可以分离细胞中密度不同的线粒体、细胞核等具膜细胞器 C. 探究抗生素对细菌的选择作用应从抑菌圈的边缘挑取菌落 D. 对PCR产物进行凝胶电泳时，加样前应先接通电源 17.（2026·内蒙古包头·二模）某兴趣小组尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。下列操作顺序合理的是（　　） A. 配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 配制培养基→倒平板→灭菌→接种分离→培养 C. 配制培养基→灭菌→接种分离→倒平板→培养 D. 配制培养基→接种分离→倒平板→灭菌→培养 18.（2026·辽宁沈阳·二模）为获得荒漠植物根系周围土壤中的某种优良菌种，研究者利用Ashby固体培养基（见表格）进行选择培养，下列叙述正确的是（　　） 成分 甘露醇C6H14O6 KH2PO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O CaCO3 琼脂 H2O 用量 10g 0.2g 0.2g 0.2g 0.1g 5g 20g 定容至1000mL A. 应选择荒漠植物根系周围的土壤灭菌后制备土壤稀释液 B. 该培养基能为微生物生长提供碳源和氮源等 C. 利用平板划线法可获得固氮菌的单菌落并计数 D. 筛选得到的菌种可用于荒漠植物微生物肥料的研制 19.（2026·吉林长春·二模）某同学在实验中用紫色葡萄制作葡萄酒和葡萄醋。下列相关叙述正确的是（　　） A. 最初添加的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的1/3 B. 随着制酒时间的延长，发酵液的颜色会逐渐变浅 C. 制作葡萄醋过程中，酵母菌和乳酸菌能大量繁殖 D. 葡萄酒制醋时乙醇会转化为乙醛，乙醛再变为乙酸 20.（2026·吉林长春·二模）（多选）DDT（化学式C14H9Cl5）是一种对环境有害、不溶于水的有机氯类杀虫剂。某生物兴趣小组拟通过筛选得到高效降解DDT的细菌，部分过程如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 接种①可将土壤悬浮液中的微生物分离 B. 接种②时使用涂布器挑取候选菌并接种至液体培养基中 C. 接种③时应选择DDT含量最高的培养瓶中菌液用于接种 D. 接种④能扩大培养筛选出的降解DDT的细菌 21.（2026·黑龙江齐齐哈尔·一模）味精是重要的调味品，其主要成分是谷氨酸钠，由谷氨酸棒状杆菌发酵产生谷氨酸后，经中和处理后获得，生产过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 性状优良的菌种可通过诱变育种或基因工程育种获得 B. 培养基配制时需要添加氮源，接种前必须经过灭菌处理 C. 发酵罐内发酵过程中要控制pH为中性或弱碱性条件 D. 发酵完成后采用过滤、沉淀、干燥等方法可获得谷氨酸 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题12 发酵工程 6年真题1年模拟 考点分类 黑吉辽蒙考情 命题规律 考点01 传统发酵技术的应用 2021辽宁（1题） · 情境设置：以果酒、果醋等传统发酵食品制作为背景 · 考查重点：菌种代谢特点（酵母菌厌氧产酒、醋酸杆菌好氧产酸）、接种顺序与操作逻辑 · 命题趋势：单独命题减少，多融入微生物培养或发酵工程综合题中作为基础环节考查，侧重原理理解而非记忆 考点02 微生物的培养与应用 2026黑吉辽蒙（1题）、2025黑吉辽蒙（1题）、2024辽宁（1题）、 2023辽宁（1题）、 2022辽宁（2题） · 情境设置：以食品发酵、环境治理、病害防治、航天安全等真实科研或生产场景为载体 · 考查重点：微生物筛选原理与方法（稀释涂布平板法、选择培养基）、实验操作正误判断、结果分析 · 命题趋势：逐年强化工程应用导向，从单一筛选向"筛选-鉴定-应用"完整技术链条延伸，综合度提升 考点03 发酵工程及其应用 2023辽宁（1题） · 情境设置：以微生物发酵生产高附加值产品（如DHA油脂）为典型情境 · 考查重点：发酵过程曲线分析、代谢物动态变化规律、发酵条件优化 · 命题趋势：考查频次较低但综合性强，未来可能结合发酵工程与基因工程、代谢调控等深度整合命题 考点1 传统发酵技术的应用 1.（2021·辽宁·高考真题）利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述错误的是（　　） A. 乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖 B. 酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖 C. 酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同 D. 接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度 【答案】B 【分析】 1、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧、适宜温度是18～25℃，pH值呈酸性。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。最适温度为30～35℃。 【详解】 A、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，A正确； B、酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸杆菌以二分裂的方式进行增殖，B错误； C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，C正确； D、酵母菌适宜温度是18～25℃，醋酸杆菌最适温度为30～35℃，D正确。 故选B。 考点2 微生物的培养与应用 1.（2026·黑吉辽蒙·高考真题）（多选）某奶酒以牛奶为主要原料，经微生物发酵酿制而成。为提高发酵效率，需筛选具有乳糖利用率高、乙醇产量高等特性的酵母菌菌株。下列叙述正确的是（　　） A. 选择培养基应以葡萄糖为唯一碳源 B. 选择培养基中可添加抗生素抑制细菌生长 C. 制备固体培养基需先高压蒸汽灭菌再倒平板 D. 接种后的平板应在37℃恒温培养 【答案】BC 【详解】 A、本实验目的是筛选乳糖利用率高的酵母菌，选择培养基应以乳糖为唯一碳源，才能保证仅能利用乳糖的菌株存活，以葡萄糖为唯一碳源无法达到筛选目的，A错误； B、抗生素可抑制细菌生长繁殖，酵母菌属于真菌，对抗生素不敏感，因此添加抗生素可排除细菌杂菌的干扰，B正确； C、制备固体培养基的流程为计算→称量→溶化→调pH→高压蒸汽灭菌→倒平板，先灭菌再倒平板可避免杂菌污染，C正确； D、酵母菌的最适培养温度约为28℃，37℃是细菌培养的常用温度，不符合酵母菌的培养要求，D错误。 故选BC。 2.（2025·黑吉辽蒙·高考真题）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（　　） A. 以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B. 逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C. 配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D. 用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 【答案】D 【分析】 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】 A、以金霉素为唯一碳源的选择培养基，仅允许能利用金霉素的微生物生长（其他无法利用金霉素的微生物被抑制），符合选择培养基的设计原理，A正确； B、逐步提高金霉素浓度可模拟环境胁迫，筛选出耐受性更强的菌株（类似“驯化”过程），B正确； C、培养基的pH需根据目标微生物的生长需求调整（如细菌通常中性偏碱，真菌偏酸性），是配制培养基的基本要求，C正确； D、稀释涂布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面，而接种环用于平板划线法（分离单菌落）。用接种环涂布无法保证菌液均匀，D错误。 故选D。 3.（2024·辽宁·高考真题）（多选）某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（　　） A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 【答案】CD 【分析】 1、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技 术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。 2、稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来 统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养 基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活 菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含 有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30〜300 的平板进行计数。 【详解】 A、题干信息：某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，故在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从未感病植株上采集样品，A错误； B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染；将采集的样品充分消毒后，用无菌水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测，B错误； C、题图可知，样品研磨后进行了稀释涂布，可见将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落，C正确； D、题图抗性检测可知，判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组，对照组不接种内生菌得到病原菌菌斑，实验组接种内生菌得到病原菌菌斑，然后比较对照组和实验组的菌斑大小，实验组病原菌菌斑越小表明内生菌抗性效果越好，D正确。 故选CD。 4.（2023·辽宁·高考真题）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是（　　） A. 采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B. 细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C. 同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D. 稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 【答案】D 【分析】 稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。 【详解】 A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确； B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确； C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验的准确性，C正确； D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。 故选D。 5.（2022·辽宁·高考真题）为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（　　） A. 航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B. 细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C. 在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D. 采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征 【答案】C 【分析】 微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】 A、嗜极微生物适应极端环境的特性使它们有在空间暴露环境或地外星球环境中存活的可能，因此航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物，A正确； B、细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀，会腐蚀舱内材料以及设备线路、元器件，B正确； C、对组装车间内的环境进行微生物采样时，采集范围应包括空气、地面，以及器物表面，C错误； D、平板划线法是常用的接种方法，采用平板划线法等分离培养微生物，可实现对环境微生物的监测，D正确。 故选C。 6.（2022·辽宁·高考真题）（多选）β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是（　　） A. 所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌 B. 通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌 C. 还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力 D. 该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发 【答案】ACD 【分析】 选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。 【详解】 A、培养基一般选择高压蒸汽灭菌，接种工具一般用灼烧灭菌，A正确； B、分离纯化酵母菌，操作如下：配制培养基→灭菌→接种→培养→挑选菌落，B错误； C、为了筛选的到目的菌，应该进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力，C正确； D、筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌可应用于白酒新产品的开发，D正确。 故选ACD。 考点3 发酵工程及其应用 1.（2023·辽宁·高考真题）利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（　　）     A. DHA油脂的产量与生物量呈正相关 B. 温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量 C. 葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量 D. 12～60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高 【答案】D 【分析】 1、发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件。 2、题图分析：横坐标为发酵时间，纵坐标为发酵过程各种相关物质的含量及生物量。从图可知，随着发酵的进行，葡萄糖逐渐减少，发酵到96h左右减少至0；蛋白胨在0~12h间快速减少，然后缓慢减少，发酵到96小时左右减少至0；生物量和DHA油脂的产量随着发酵进程逐渐上升。 【详解】 A、由图可知，DHA油脂的产量随着发酵进程逐渐增加，生物量也随着发酵进程逐渐增加，它们的变化呈正相关，A正确； B、由图可知，生物量与DHA油脂的产量呈正相关，温度和溶解氧影响微生物的生长繁殖，进而影响DHA油脂的产量，B正确； C、发酵液中葡萄糖被微生物吸收用于呼吸作用产生能量，供其合成DHA油脂，C正确； D、DHA油脂是一种不饱和脂肪酸，含C、H、O不含N，所以在12～60h，DHA油脂的合成对碳源的需求高，不需要氮源，D错误。 故选D。 1.（2026·辽宁锦州·一模）（多选）为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母（无法利用赖氨酸），其能在WL培养基上形成奶油状略带绿色、球形的菌落。下列相关说法错误的是（　　） 注：YPD培养基和WL培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL培养基含有指示剂溴甲酚绿 A. III属于鉴别培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种 B. 进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基 C. 从III中挑取菌种接种到IV上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母 D. I、II均为液体培养基，图中重复操作可提升酿酒酵母的酒精发酵能力 【答案】CD 【详解】 A、WL培养基Ⅲ含有指示剂溴甲酚绿，且优良酿酒酵母能在其上形成奶油状略带绿色、球形的菌落，属于鉴别培养基，A正确； B、进行酒精耐受力检测时，需要重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基，以此来筛选出酒精耐受力强的酵母菌，B正确； C、优良酿酒酵母无法利用赖氨酸，而培养基Ⅳ是以赖氨酸作为唯一氮源的培养基，因此优良酿酒酵母无法在Ⅳ上生长，C错误； D、YPD培养基Ⅰ一般为固体培养基，YPD培养基Ⅱ为液体培养基；重复操作是为了筛选出更符合要求的酵母菌，不能直接提升其酒精发酵能力，D错误。 2.（2026·辽宁锦州·一模）聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上 B. 步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长越有利 C. 扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株 D. 挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定各菌落中嗜盐细菌的PHA产量 【答案】D 【分析】 1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 2、微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质、pH和O2的需求。 3、培养基按照其物理状态可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。液体培养基常应用于工业或生活生产。 【详解】 A、PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误； B、步骤③培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误； C、扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中无需加入琼脂，C错误； D、要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐细菌，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定各菌落中嗜盐细菌的PHA产量，进行比较，D正确。 故选D。 3.（2026·黑龙江哈尔滨·一模）木霉菌可降解环境中的纤维素。将诱变处理后的木霉菌接种到培养基中，筛选纤维素酶高产菌株。下列说法正确的是（　　） A. 不宜通过接种蒸馏水检测所配制的固体培养基是否被污染 B. 培养基中应添加纤维素和刚果红，经倒平板后再湿热灭菌 C. 红色圈的直径与菌落的直径比值越大，降解纤维素的能力越强 D. 筛选纤维素酶高产菌株的选择培养基应以纤维素为唯一氮源 【答案】A 【详解】 A、检测固体培养基是否被污染的正确方法是将未接种的培养基放在适宜条件下培养，观察是否有菌落生成；若接种蒸馏水，若蒸馏水本身携带杂菌，会干扰对培养基污染情况的判断，A正确； B、培养基的制备流程为配制培养基、调pH、湿热灭菌、倒平板，需先灭菌再倒平板，B错误； C、刚果红可以和纤维素结合形成红色复合物，纤维素被降解的区域会形成透明圈，透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明菌株降解纤维素的能力越强，C错误； D、纤维素属于糖类，只含C、H、O元素，属于碳源，筛选纤维素酶高产菌株的选择培养基应以纤维素为唯一碳源，D错误。 4.（2026·辽宁辽阳·一模）（多选）药物阿莫西林能消炎杀菌，是常用的抗生素。共生放线菌产生的次生代谢产物亦能帮助宿主抵御病原菌侵染，为探究其次生代谢产物乙酸乙酯和正丁醇对S菌是否具有抑菌活性，进行了相关实验，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 实验所用的培养基和培养皿需经湿热灭菌 B. 上述实验设计了两组对照组和两组实验组 C. 逐代挑选抑菌圈边缘细菌进行实验，抑菌圈逐渐缩小 D. 具有抑菌活性的乙酸乙酯是放线菌生长和生存必需的代谢产物 【答案】BC 【详解】 A、培养基一般采用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌），而培养皿等玻璃器材通常采用干热灭菌，A错误； B、本实验中，有空白对照组（无抑菌物质处理）、阿莫西林组（已知有抑菌活性的对照）共2组对照组，乙酸乙酯处理组、正丁醇处理组是待探究抑菌活性的2组实验组，B正确； C、抑菌圈边缘的细菌耐药性更强，逐代筛选后，菌群整体的耐药性会不断升高，能抵抗产物抑菌作用的细菌越来越多，因此抑菌圈会逐渐缩小，C正确； D、据题意可知，该物质是共生放线菌的次生代谢产物，次生代谢产物不是放线菌生长、生存必需的代谢产物，D错误。 5.（2026·吉林·一模）土壤中的微生物数量与脲酶活性可反映土壤的肥力。科研人员用不同方式进行施肥，探究其对土壤微生物数量和脲酶活性的影响，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A. M、NP和S三种施肥方式中，对土壤微生物数量影响最大的是NP B. 有机肥可以为土壤微生物的生长繁殖和植物的生长提供物质和能量 C. 混合施肥对土壤微生物数量和脲酶活性的影响不一定大于单独施肥的效果 D. 分离土壤中产生脲酶的微生物适宜采用以尿素为唯一氮源的选择培养基 【答案】B 【详解】 A、M、NP和S三种施肥方式中，NP组的微生物数量最多，因此对土壤微生物数量影响最大的是NP，A正确； B、有机肥经过土壤微生物的分解转变为无机盐被植物吸收利用，有机肥不能为植物提供能量，B错误； C、S+NP组的脲酶活性和微生物数量均小于NP组，因此，混合施肥对土壤微生物数量和脲酶活性的影响不一定大于单独施肥的效果，C正确； D、尿素的分解需要脲酶的催化，因此只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，D正确。 故选B。 6.（2026·吉林·一模）（多选）火龙果在常温下极易腐败变质，产生醋味。可从火龙果上筛选优质醋酸菌种，用于火龙果深加工，筛选过程如下图。下列叙述正确的是（） A. “富集培养基”为液体培养基，培养时需振荡培养 B. 筛选步骤中培养基中添加的作用是提供碳源和无机盐 C. 醋酸达到一定量会抑制醋酸菌的活性，因此要测定菌株的醋酸耐受性 D. 在菌株鉴定时，添加革兰氏染色剂的培养基属于选择培养基 【答案】AC 【详解】 A、“富集培养基”为液体培养基，培养时振荡培养可以增加培养液中的溶氧量，同时使醋酸菌种与营养物质充分接触，从而提高菌种的浓度，A正确； B、筛选步骤中培养基中添加CaCO₃的主要作用是中和醋酸产生的酸性环境，使菌落周围出现透明圈，便于筛选出产醋酸的菌株，而非主要提供碳源和无机盐，B错误； C、醋酸达到一定量会抑制醋酸菌的活性，因此需要测定菌株的醋酸耐受性，以筛选出适合工业生产的高产菌株，C正确； D、在菌株鉴定时，添加革兰氏染色剂的培养基属于鉴别培养基，而非选择培养基，其作用是通过染色反应区分不同的菌株，D错误。 故选AC。 7.（2026·吉林·一模）青蒿素是一种有效的疟疾治疗药物。研究发现，在黄花蒿产生青蒿素的代谢过程中，某些酶（如FPS酶）起决定性作用；在对黄花蒿进行组织培养时，发现它的愈伤组织中没有青蒿素，但是由愈伤组织再分化形成的芽和苗中均有青蒿素；四倍体黄花蒿体内青蒿素的含量比二倍体高38%。下列有关叙述错误的是（　　） A. 进行植物组织培养时，需要用酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒 B. 可利用基因工程将FPS酶基因导入微生物中，利用发酵工程进行生产 C. 将黄花蒿的愈伤组织通过植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产 D. 采用聚乙二醇融合法将二倍体黄花蒿细胞诱导融合获得四倍体黄花蒿 【答案】C 【详解】 A、植物组织培养需无菌操作，常用酒精和次氯酸钠对外植体消毒，防止微生物污染，A正确； B、FPS酶是合成青蒿素的关键酶，通过基因工程将其基因导入微生物，利用发酵工程可大规模生产该酶，B正确； C、题干指出愈伤组织中无青蒿素，而芽和苗中才有，故通过愈伤组织工厂化生产青蒿素不可行，C错误； D、聚乙二醇（PEG）是诱导植物细胞融合的常用试剂，可促进二倍体细胞融合形成四倍体，D正确。 故选C。 8.（2026·辽宁沈阳·一模）养殖塘中微囊藻过多时，虾会因微囊藻毒素（MCs，一种含氮化合物）在其肠道积累过多而死亡。研究者欲从虾的肠道中筛选出能降解MCs的细菌，作为其饲料添加剂。下列叙述错误的是（　　） A. 宜选择发生微囊藻水华的养殖塘中的虾用于筛选 B. 筛选时所用培养基应以MCs作为唯一氮源 C. 用细菌计数板计数可研究该降解菌的生长规律 D. 在通气、振荡条件下培养更利于增加降解菌数量 【答案】D 【详解】 A、发生微囊藻水华的养殖塘中MCs浓度高，虾肠道内更可能富集能降解MCs的细菌，故选择该环境样本符合筛选目的，A正确； B、MCs为含氮化合物，以MCs作为唯一氮源的培养基可筛选出能利用该物质作为氮源的降解菌，B正确； C、细菌计数板可通过直接计数法测定菌体数量，结合培养时间绘制生长曲线，可研究降解菌的生长规律，C正确； D、虾肠道为厌氧环境，目标降解菌可能为厌氧或兼性厌氧菌。通气、振荡培养会提高溶氧量，可能抑制厌氧菌生长，反而不利于其数量增加，D错误。 故选D。 9.（2026·吉林长春·一模）通过土壤管理、种植管理和病虫害防治等方法，可以提高作物产量。下列相关叙述错误的是（　　） A. 有机肥料可增加土壤中的有机质含量，改善土壤结构 B. 合理密植有利于作物充分利用光能，提高光能利用率 C. 除虫可使农田生态系统中的能量更多地流向对人类最有益的部分 D. 照射远红光和紫外光能激活光敏色素，显著提高蔬菜产量 【答案】D 【详解】 A、有机肥料经微生物分解可增加土壤有机质，促进团粒结构形成，改善通气性和保水性，A正确； B、合理密植能减少漏光损失，通过增加叶面积指数提高光能利用率，B正确； C、除虫可减少害虫对能量的消耗，使能量沿食物链更多地流向农作物，符合人类需求，C正确； D、光敏色素主要吸收红光和远红光（非紫外光），其激活调节植物光周期反应（如开花），但紫外光通常抑制生长（如引起DNA损伤），且远红光单独照射不能直接提高产量，D错误。 故选D。 10.（2026·吉林长春·一模）（多选）将能杀灭玉米螟的苏云金杆菌（甲）和能杀灭蚊子的灭蚊球孢菌（乙）作为亲本菌株，进行原生质体融合育种，以得到既能杀蚊又能杀螟的融合菌株。下图为部分育种过程，下列叙述错误的是（　　） A. 育种过程中加入的酶可能是溶菌酶 B. 融合原生质体的形成依赖于生物膜的选择透过性 C. 原生质体融合后需要经过筛选 D. 融合菌株是染色体数目加倍的二倍体 【答案】BD 【详解】 A、细菌有细胞壁，要获得原生质体需要去除细胞壁，溶菌酶可以溶解细菌的细胞壁，所以育种过程中加入的酶可能是溶菌酶，A正确； B、融合原生质体的形成依赖的是生物膜的流动性，而不是选择透过性，B错误； C、原生质体融合后会有多种类型的融合情况以及未融合的原生质体等，需要经过筛选才能得到所需的融合菌株，C正确； D、苏云金杆菌和灭蚊球孢菌都是原核生物，原核生物没有染色体，不存在染色体数目加倍成为二倍体的说法，D错误。 故选BD。 11.（2026·辽宁·二模）在发酵食品生产中，选择合适的灭菌或消毒方法至关重要。下列相关叙述错误的是（　　） A. 果酒发酵中，酵母菌在适宜条件下可成为优势菌种从而抑制杂菌生长 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器属于灭菌，可以杀死容器内的所有微生物 C. 用巴氏消毒法处理牛奶可以杀死大部分微生物并保留牛奶的营养成分 D. 培养基一般采用高压蒸汽灭菌，灭菌后需冷却至适宜温度再倒平板或接种 【答案】B 【详解】 A、果酒发酵的发酵液为缺氧、酸性环境，多数杂菌无法适应该环境，酵母菌可在此条件下正常繁殖成为优势菌种，从而抑制杂菌生长，A正确； B、开水烫洗容器属于消毒操作，仅能杀死容器表面大部分微生物，无法杀灭芽孢和孢子，灭菌的要求是杀死物体内外所有微生物（包括芽孢和孢子），B错误； C、巴氏消毒法采用较低温度处理牛奶，既能杀死大部分有害微生物，又能避免破坏牛奶中的热敏性营养成分，C正确； D、培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，灭菌后培养基温度较高，需冷却至适宜温度后再倒平板或接种，避免高温杀死待接种的菌种，D正确。 12.（2026·辽宁·二模）（多选）为筛选适合黄芪（一种中药材）的微生物固氮菌肥的菌种，科研人员进行如下流程的实验： 土壤样品→制备土壤悬液→富集培养→梯度稀释涂布平板→单菌落→菌种鉴定 下列有关叙述正确的是（　　） A. 土壤取样时要在黄芪种植地多点取样且选取0～2cm表层土 B. 为增加固氮菌的浓度，富集培养基中不应添加氮源 C. 涂布操作时应待涂布器冷却后蘸取菌液在平板上涂布 D. 观察菌落形态、颜色等特征可以初步判断固氮微生物的种类 【答案】BD 【详解】 A、为黄芪筛选适合的固氮菌肥的菌种，因此要在黄芪种植地多点取样且要去除表层土，A错误； B、要筛选固氮菌增加其浓度，培养基中不应添加氮源，B正确； C、涂布操作时，应先吸取一定量的菌液滴于平板，然后用涂布器涂布而非蘸取，C错误； D、菌落形态、颜色是区分菌种的重要特征，可用于菌种的初步鉴定，D正确。 13.（2026·辽宁锦州·二模）羧酸还原酶（CAR）是尼龙合成代谢途径的关键酶，但催化效率低，我国科研团队运用AI技术和蛋白质工程技术成功改造并提升了CAR的活性。改造过程中最先进行的步骤是（　　） A. 用AI技术设计新型CAR的结构模型 B. 用基因工程技术改造CAR基因 C. 依据中心法则推算新型CAR基因序列 D. 利用发酵工程生产新型CAR 【答案】A 【详解】 蛋白质工程改造蛋白质的第一步是在明确预期功能（提升CAR活性）后，设计新型蛋白质的结构模型，属于改造过程最先进行的步骤，A正确，BCD错误。 14.（2026·辽宁锦州·二模）某些微生物能利用糖类合成油脂，可用于制备生物柴油。研究人员从某土壤样本分离出产油脂的细菌。苏丹黑B可渗入细胞内将油脂颗粒染成黑色。下图是实验流程和结果示意图，1～6表示菌落。 下列叙述正确的是（　　） A. 图中培养基以油脂作为唯一碳源，并添加琼脂等成分 B. 实验用无菌水进行梯度稀释，用平板划线法进行接种 C. 平板上菌落5的生长速率和产油脂速率较菌落4更快 D. 应从滤纸片上挑选出菌落5的菌株进行纯化培养和保存 【答案】C 【详解】 A、本实验目的是分离利用糖类合成油脂的产油脂细菌，若以油脂作为唯一碳源，筛选得到的是能分解利用油脂的微生物，无法获得目标产油菌株，A错误； B、实验中进行了梯度稀释，且平板上得到分散的单个菌落，接种方法应为稀释涂布平板法，B错误； C、相同培养时间下，平板上菌落5比菌落4更大，说明菌落5生长速率更快；苏丹黑B染色后，菌落5对应位置呈深黑色，说明其油脂含量更高，产油脂速率快于菌落4，C正确； D、滤纸片仅用于原位影印染色鉴定产油性，原菌落生长在初始平板上，应从原平板对应位置挑选菌落5的菌株进行纯化，不能从滤纸片挑取，D错误。 15.（2026·黑龙江哈尔滨·二模）（多选）“酱豆粒煮软研碎，以手搏成砖形，置于较为温暖之僻静处，经两月余，使发酵后，复以洁水洗之，掰成碎块，曝日中二三日，置缸内，加清洁盐水，经一月后，即成酱色，黑暗或绛褐，味极咸。”以上是东北地区人民制作传统豆酱时普遍遵循的方法。下列说法正确的是（　　） A. “豆粒煮软”可使蛋白质适度变性，易被微生物利用 B. “成砖形，置于温暖僻静处”可保持湿度与温度稳定，利于初期发酵 C. 加盐水的主要目的是促进微生物的生长繁殖 D. “经两月余，使发酵”过程中，豆中的蛋白质可被分解为多肽和氨基酸 【答案】ABD 【详解】 A、豆粒经过加热煮软后，蛋白质的空间结构会发生改变，出现适度变性，更方便发酵微生物分泌的蛋白酶分解利用，A正确； B、将豆料捏成砖形并放置在温暖僻静处，致密的形状可以减少内部水分蒸发，维持合适的湿度，温暖环境能保证微生物发酵所需的温度，且温度不易产生较大波动，有利于米曲霉等微生物的初期生长发酵，B正确； C、制作豆酱时加入盐水，一方面可以抑制有害微生物的生长繁殖，避免杂菌污染导致豆酱变质，另一方面能调节豆酱的风味，并不是为了促进微生物生长，C错误； D、黄豆中的主要有机物是蛋白质，两个月的发酵过程中，微生物会分泌蛋白酶，将蛋白质逐步分解为小分子的多肽和氨基酸，这些小分子产物让豆酱拥有了特有的鲜味，D正确。 故选ABD。 16.（2026·黑龙江齐齐哈尔·二模）分离技术是生物学研究中常用的实验手段，下列说法正确的是（　　） A. 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中需对接种环进行灼烧灭菌 B. 差速离心法可以分离细胞中密度不同的线粒体、细胞核等具膜细胞器 C. 探究抗生素对细菌的选择作用应从抑菌圈的边缘挑取菌落 D. 对PCR产物进行凝胶电泳时，加样前应先接通电源 【答案】C 【详解】 A、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验采用稀释涂布平板法接种，使用的接种工具是涂布器，需对涂布器进行灼烧灭菌，A错误； B、差速离心法可分离细胞中密度不同的结构，但细胞核属于细胞结构，不属于细胞器，B错误； C、抑菌圈边缘的细菌是对抗生素耐药性更强、存活下来的菌群，探究抗生素对细菌的选择作用时，从抑菌圈边缘挑取菌落可获得耐药菌，用于后续实验观察选择效果，C正确； D、对PCR产物进行凝胶电泳时，应先加样，再接通电源，若加样前接通电源会导致样品无法正常沉降、电泳条带弥散，D错误。 17.（2026·内蒙古包头·二模）某兴趣小组尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。下列操作顺序合理的是（　　） A. 配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 配制培养基→倒平板→灭菌→接种分离→培养 C. 配制培养基→灭菌→接种分离→倒平板→培养 D. 配制培养基→接种分离→倒平板→灭菌→培养 【答案】A 【详解】 配制培养基后先通过高压蒸汽灭菌去除培养基内的杂菌，灭菌后倒平板获得固体培养基，再对酵母菌进行接种分离，最后恒温培养即可得到酵母菌纯培养物，即配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养，A正确，BCD错误。 故选A。 18.（2026·辽宁沈阳·二模）为获得荒漠植物根系周围土壤中的某种优良菌种，研究者利用Ashby固体培养基（见表格）进行选择培养，下列叙述正确的是（　　） 成分 甘露醇C6H14O6 KH2PO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O CaCO3 琼脂 H2O 用量 10g 0.2g 0.2g 0.2g 0.1g 5g 20g 定容至1000mL A. 应选择荒漠植物根系周围的土壤灭菌后制备土壤稀释液 B. 该培养基能为微生物生长提供碳源和氮源等 C. 利用平板划线法可获得固氮菌的单菌落并计数 D. 筛选得到的菌种可用于荒漠植物微生物肥料的研制 【答案】D 【详解】 A、若对土壤进行灭菌会杀死土壤中所有目标菌种，无法后续分离获得目的菌，制备土壤稀释液时不能灭菌土壤，A错误； B、该培养基成分中无含氮的物质，无法为微生物提供氮源，仅能为可自行固氮的微生物提供碳源、无机盐、水等营养，B错误； C、平板划线法可分离获得单菌落，但无法对菌落进行计数，微生物计数需采用稀释涂布平板法，C错误； D、筛选得到的是适应荒漠环境的固氮优良菌种，可固定空气中的氮为植物提供氮源，可用于荒漠植物微生物肥料的研制，D正确。 19.（2026·吉林长春·二模）某同学在实验中用紫色葡萄制作葡萄酒和葡萄醋。下列相关叙述正确的是（　　） A. 最初添加的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的1/3 B. 随着制酒时间的延长，发酵液的颜色会逐渐变浅 C. 制作葡萄醋过程中，酵母菌和乳酸菌能大量繁殖 D. 葡萄酒制醋时乙醇会转化为乙醛，乙醛再变为乙酸 【答案】D 【详解】 A、制作葡萄酒时，添加的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，预留的1/3空间既可以为酵母菌初期有氧呼吸提供O₂以利于酵母菌繁殖，也能防止发酵过程中发酵液溢出，A错误； B、葡萄酒制作过程中，葡萄皮中的花青素等色素会逐渐溶解进入发酵液，随着制酒时间延长，发酵液颜色会逐渐加深，B错误； C、果醋发酵的菌种是醋酸菌，发酵条件为有氧、30~35℃。酵母菌是兼性厌氧菌，在有氧条件下虽能生存，但醋酸发酵的高酸性、有氧环境会抑制酵母菌大量繁殖；乳酸菌是厌氧菌，在有氧环境中无法生存，因此二者都不能在果醋发酵中大量繁殖，C错误； D、以葡萄酒为原料制醋时糖源不足，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸（醋酸），D正确。 20.（2026·吉林长春·二模）（多选）DDT（化学式C14H9Cl5）是一种对环境有害、不溶于水的有机氯类杀虫剂。某生物兴趣小组拟通过筛选得到高效降解DDT的细菌，部分过程如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 接种①可将土壤悬浮液中的微生物分离 B. 接种②时使用涂布器挑取候选菌并接种至液体培养基中 C. 接种③时应选择DDT含量最高的培养瓶中菌液用于接种 D. 接种④能扩大培养筛选出的降解DDT的细菌 【答案】BC 【详解】 A、接种①是将土壤悬浮液接种到固体培养基，目的是获得单菌落，可将土壤中微生物分离，A正确； B、挑取培养基上的单菌落（候选菌）需要使用接种环；涂布器仅用于稀释涂布平板法时涂布菌液，不能用来挑取菌落，B错误； C、所有培养瓶初始DDT含量一致，培养后，降解DDT能力越强的菌株，分解的DDT越多，瓶中剩余DDT含量越低，因此应选择DDT含量最低的培养瓶的菌液接种，C错误； D、接种④是连续转接培养，可扩大目的菌的数量，属于降解DDT细菌的扩大培养，D正确。 21.（2026·黑龙江齐齐哈尔·一模）味精是重要的调味品，其主要成分是谷氨酸钠，由谷氨酸棒状杆菌发酵产生谷氨酸后，经中和处理后获得，生产过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 性状优良的菌种可通过诱变育种或基因工程育种获得 B. 培养基配制时需要添加氮源，接种前必须经过灭菌处理 C. 发酵罐内发酵过程中要控制pH为中性或弱碱性条件 D. 发酵完成后采用过滤、沉淀、干燥等方法可获得谷氨酸 【答案】D 【详解】 A、性状优良的菌种可以通过诱变育种（如紫外线、化学试剂处理）或基因工程育种（定向改造基因）获得，A正确； B、谷氨酸棒状杆菌的生长需要氮源（用于合成蛋白质、核酸等），所以培养基需要添加氮源，同时，微生物培养基在接种前必须经过灭菌处理，避免杂菌污染，B正确； C、谷氨酸棒状杆菌在中性或弱碱性条件下才能大量合成谷氨酸，如果pH为酸性，它会积累谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C正确； D、谷氨酸是细胞代谢产物，发酵完成后，对细胞代谢产物可通过提取、分离和纯化措施来获得产品，而采用过滤、沉淀的方法只能将菌体分离和干燥，D错误。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $函学科网 www.zxxk.com 让教与学更高效 专题12发酵工程 六年真题分类园 考点1传统发酵技术的应用 1.【答案】B 考点2微生物的培养与应用 1.【答案】BC 2.【答案】D 3.【答案】CD 4.【答案】D 5.【答案】c 6.【答案】ACD 考点3发酵工程及其应用 1.【答案】D 一年模拟练测园 1.【答案】CD 2.【答案】D 3.【答案】A 4【答案】BC 5.【答案】B 6.【答案】AC 7.【答案】C 8.【答案】D 9.【答案】D 10.【答案】BD 112 函学科网 www.zxxk.com 让教与学更高效 11.【答案】B 12.【答案】BD 13.【答案】A 14.【答案】C 15.【答案】ABD 16.【答案】c 17.【答案】A 18.【答案】D 19.【答案】D 20.【答案】BC 21.【答案】D 2/2