专题13 发酵工程（3年汇编）（贵州专用）2024-2026年高考生物真题分类汇编

**基本信息** 专题13发酵工程3年汇编1年模拟，含贵州高考真题及模拟题，聚焦微生物培养与发酵工程应用，情境融合农林生产、工业实践与传统文化。 **题型特征** |题型|题量|知识覆盖|命题特色| |----|----|----------|----------| |选择题|8道|微生物培养（分离、接种、灭菌）、发酵工程（菌种选育、发酵条件控制）|以金龟子绿僵菌生物防治、棘白菌素发酵生产为情境，结合贵州考情考查实验操作与数据分析| |非选择题|1道|微生物分离纯化、基因工程应用|通过奶酪中乳糖酶酵母菌分离流程，综合考查探究实践与科学思维|

专题 13 发酵工程 3年汇编1年模拟 考点分类 贵州考情 命题规律 考点01 微生物的培养与应用 2025贵州(1题) · 情境设置：以昆虫病原真菌的生物防治为素材，紧扣农林生产与生态安全。 · 考查重点：聚焦微生物分离、培养、接种方法及寄生机制，突出实验探究与分析。 · 命题趋势：从传统文化或农业问题切入，综合考查微生物技术与生产实践的衔接。 考点02 发酵工程及其应用 2026贵州(1题) · 情境设置：以基因工程构建的高产菌株结合发酵罐生产为背景，聚焦实际工业生产流程。 · 考查重点：侧重发酵条件控制（如搅拌转速、溶氧）、菌种选育与产量提升原理。 · 命题趋势：发酵工程与基因工程、细胞代谢融合考查，强化实践应用与数据分析能力。 考点1 微生物的培养与应用 1.（2025·贵州·高考真题）金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子（单细胞后代）萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是（　　） A. 可利用Ma开发成微生物杀虫剂 B. 为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样 C. 稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma D. 接种培养Ma时使用的器具需消毒 考点2 发酵工程及其应用 1.（2026·贵州·高考真题）棘白菌素是一类新型抗真菌药物。科研人员在构巢曲霉中导入ecd基因后获得棘白菌素的高产菌株，并用发酵罐分时段控制搅拌转速进行发酵生产。下列叙述正确的是（        ） A. 获取上述高产菌株采用了微生物菌种选育的自然育种技术 B. 该高产菌株在发酵过程中的不同阶段对溶解氧的需求不同 C. 从平板上挑取单菌落直接接种到发酵罐的灭菌培养基中 D. 为防止杂菌污染，不能在发酵过程中向发酵罐添加物质 1.（2026·贵州六盘水·二模）发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品的技术体系。下列叙述错误的是（       ） A. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 B. 微生物的基本培养技术中，固体培养基可用于微生物的分离和计数 C. 以尿素为唯一氮源的培养基，可筛选出能合成纤维素酶的微生物 D. 发酵工程的应用领域广泛，可利用改造的工程菌规模化生产青霉素 2.（2026·贵州贵阳·联考）以高粱为原料制备粮食酒，加工流程为：精挑细选→浸泡蒸煮→摊晾加曲→入窖发酵→蒸馏取酒→陈贮老熟→勾调成型→灌装成瓶。下列叙述错误的是（        ） A. 选料时应选择颗粒饱满、淀粉含量高的高粱籽粒进行浸泡 B. 摊晾可降低高粱的温度，避免高温杀死菌种 C. 入窖发酵过程中发酵液的温度和pH均升高 D. 酿造过程中发酵坛密封不严可能会导致酒变酸 3.（2026·贵州安顺·二模）柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。以玉米粉为原料，利用黑曲霉通过深层通气发酵生产柠檬酸，工业发酵流程如下图。下列分析错误的是（　　） A. 种子培养基为液体培养基，用于对黑曲霉进行扩大培养 B. 发酵培养基和种子培养基加入到发酵罐时需经过严格灭菌处理 C. 发酵时，可用稀释涂布平板法和血细胞计数板检测培养液中黑曲霉的数量 D. 发酵结束之后，可根据柠檬酸的性质将柠檬酸从发酵罐中分离出来 4.（2026·贵州·一模）某生物小组欲利用以下培养基从土壤中分离某种微生物，下列对该实验的后续操作及结果分析正确的是（       ） 成分 葡萄糖 KH2PO4 K2SO4 NaCl CaCO3 MgSO47H2O 蒸馏水 琼脂粉 含量 10g 0.2g 0.2g 0.2g 5g 0.2g 1000mL 20g A. 配制好的培养基先分装到锥形瓶后再进行高压蒸汽灭菌 B. 该培养基灭菌后需冷却至40℃再进行倒平板操作 C. 用无菌水将土样进行系列稀释后用接种环进行接种、计数 D. 该无氮培养基可用于硝化细菌等固氮菌的分离与计数 5.（2026·贵州毕节·二模）中国传统白酒多以泥窖为发酵基础，素有“千年老窖万年糟”、“以窖养糟”、“以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列说法错误的是（　　） A. 传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B. 窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过程不易被杂菌污染 C. 从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时，需在密闭环境中进行 D. 从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出产淀粉酶的微生物 6.（2026·贵州遵义·二模）为延长传统发酵糟辣椒的贮藏期，研究人员采用多种无菌技术对糟辣椒进行处理，实验结果如下。下列叙述错误的是（　　） 贮藏时间/d 不同无菌技术的菌落总数/（×103CFU/g） 对照组 辐射灭菌 巴氏消毒 高压蒸汽灭菌 0 3.01 1.02 2.55 2.46 7 3.55 1.53 3.05 2.89 14 3.87 2.21 3.77 3.32 注：CFU/g指每克糟辣椒中的菌落数 A. 传统发酵糟辣椒以混合菌种的固体发酵或半固体发酵为主 B. 菌落总数可采用稀释涂布平板法计数，该方法计数结果往往偏小 C. 与高压蒸汽灭菌相比，巴氏消毒对营养物质破坏小且抑菌效果好 D. 辐射灭菌的抑菌效果最显著，其长期贮藏应用价值值得深入研究 7.（2026·贵州·学业水平适应性测试）宋人张表臣曾在《珊瑚钩诗话》中说：“中古之时，未知曲蘖，杜康肇造，爱作酒醴，可为酒后，秫酒名也”。这显示出古人已经开始采用糵（发芽的谷物）来发酵产酒，目前该技术仍用于现代啤酒生产。下列叙述正确的是（　　） A. 大麦发芽程度越高，释放的淀粉酶越多越有利于啤酒生产 B. 啤酒酵母的扩大培养与发酵产酒需要控制的条件相同 C. 主发酵过程冷却水流量突然增大会导致的生成量增加 D. 啤酒的后发酵降低发酵温度，有利于次生代谢物的积累 8.（2026·贵州贵阳·一模）乳糖酶缺乏症患者由于体内乳糖酶的分泌量不足，导致患者无法消化母乳或牛乳中的乳糖，易引起非感染性腹泻。利用乳糖酶可以去除奶粉中的乳糖，下图为从奶酪中分离纯化高效生产乳糖酶酵母菌的流程示意图。 回答下列问题。 （1）制备奶酪悬浮液的目的是　　　　　　　　，培养基甲能为酵母菌生长提供的营养物质主要有　　　　　　　　。 （2）在接种到培养基乙之前，要将培养基甲中的菌液进行系列稀释，这样做的目的是　　　　　　　　，稀释后接种所用的工具是　　　　　　　　。 （3）X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是　　　　　　　　。 （4）某同学认为获得无乳糖奶粉的方法不止一种，于是设想利用转基因低乳糖奶牛的乳汁生产乳糖含量较低的奶粉，这样可减少乳糖酶生产环节。培育转基因低乳糖奶牛的核心工作是基因表达载体的构建，其目的是　　　　　　　　（答出1点）。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题 13 发酵工程 考点1 微生物的培养与应用 1.【答案】D 考点2 发酵工程及其应用 1.【答案】B 1.【答案】C 2.【答案】C 3.【答案】B 4.【答案】A 5.【答案】C 6.【答案】C 7.【答案】D 8.【答案】（1）① 将奶酪中的酵母菌释放出来，便于后续接种培养    ② 碳源（如糖类）、氮源（如蛋白胨、酵母膏）、水和无机盐     （2）① 获得单菌落，便于后续分离和纯化高效产乳糖酶的酵母菌    ② 涂布器     （3）蓝色菌落     （4）使目的基因（如抑制乳糖合成的基因）在受体细胞（奶牛细胞）中稳定存在，并能遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用（或 “使目的基因能够在受体细胞中复制、转录和翻译，实现特定性状的表达”）      试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题 13 发酵工程 3年汇编1年模拟 考点分类 贵州考情 命题规律 考点01 微生物的培养与应用 2025贵州(1题) · 情境设置：以昆虫病原真菌的生物防治为素材，紧扣农林生产与生态安全。 · 考查重点：聚焦微生物分离、培养、接种方法及寄生机制，突出实验探究与分析。 · 命题趋势：从传统文化或农业问题切入，综合考查微生物技术与生产实践的衔接。 考点02 发酵工程及其应用 2026贵州(1题) · 情境设置：以基因工程构建的高产菌株结合发酵罐生产为背景，聚焦实际工业生产流程。 · 考查重点：侧重发酵条件控制（如搅拌转速、溶氧）、菌种选育与产量提升原理。 · 命题趋势：发酵工程与基因工程、细胞代谢融合考查，强化实践应用与数据分析能力。 考点1 微生物的培养与应用 1.（2025·贵州·高考真题）金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子（单细胞后代）萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是（　　） A. 可利用Ma开发成微生物杀虫剂 B. 为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样 C. 稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma D. 接种培养Ma时使用的器具需消毒 【答案】D 【解析】 A、金龟子绿僵菌（Ma）作为昆虫病原真菌，可通过寄生导致害虫死亡，符合微生物杀虫剂的特点，可用于生物防治，A正确； B、僵化死亡的昆虫体内含有大量Ma菌体，因此从研磨的僵虫组织取样是分离Ma的合理方法，B正确； C、稀释涂布平板法可通过梯度稀释和菌落形成来分离纯化微生物，适用于分离样品中的Ma，C正确； D、微生物培养中，接种环等直接接触菌种的器具需严格灭菌（如灼烧灭菌），而非仅消毒，消毒无法彻底杀灭微生物的芽孢或孢子，D错误。 故选D。 考点2 发酵工程及其应用 1.（2026·贵州·高考真题）棘白菌素是一类新型抗真菌药物。科研人员在构巢曲霉中导入ecd基因后获得棘白菌素的高产菌株，并用发酵罐分时段控制搅拌转速进行发酵生产。下列叙述正确的是（        ） A. 获取上述高产菌株采用了微生物菌种选育的自然育种技术 B. 该高产菌株在发酵过程中的不同阶段对溶解氧的需求不同 C. 从平板上挑取单菌落直接接种到发酵罐的灭菌培养基中 D. 为防止杂菌污染，不能在发酵过程中向发酵罐添加物质 【答案】B 【解析】 A、该高产菌株是通过人工导入外源ecd基因培育获得的，属于基因工程育种，并非利用自然变异筛选的自然育种技术，A错误； B、搅拌转速可改变发酵液中的溶解氧含量，题干明确说明分时段控制搅拌转速，说明该菌株发酵的不同阶段（如菌体增殖期、产物积累期）对溶解氧的需求不同，B正确； C、从平板挑取的单菌落数量少、活性不足，需先经过种子扩大培养，获得活力适宜、足量的种子液后才能接种到发酵罐，直接接种会延长发酵周期、降低生产效率，C错误； D、发酵过程中可通过无菌操作向发酵罐补充营养物质、调节pH等，并非不能添加任何物质，D错误。 1.（2026·贵州六盘水·二模）发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品的技术体系。下列叙述错误的是（       ） A. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 B. 微生物的基本培养技术中，固体培养基可用于微生物的分离和计数 C. 以尿素为唯一氮源的培养基，可筛选出能合成纤维素酶的微生物 D. 发酵工程的应用领域广泛，可利用改造的工程菌规模化生产青霉素 【答案】C 【解析】 A、微生物纯培养需无菌操作，包括配制培养基、灭菌（杀死杂菌）、接种（引入目标菌种）、分离（如平板划线法）和培养等步骤，A正确； B、固体培养基可形成单菌落，用于微生物分离（如鉴别菌种）和计数（如稀释涂布平板法），B正确； C、以尿素为唯一氮源的培养基属于选择培养基，仅能筛选出合成脲酶的微生物（如尿素分解菌），纤维素酶筛选需以纤维素为唯一碳源，C错误； D、发酵工程中，可利用改造的工程菌规模化生产青霉素，提高青霉素产量，D正确。 故选C。 2.（2026·贵州贵阳·联考）以高粱为原料制备粮食酒，加工流程为：精挑细选→浸泡蒸煮→摊晾加曲→入窖发酵→蒸馏取酒→陈贮老熟→勾调成型→灌装成瓶。下列叙述错误的是（        ） A. 选料时应选择颗粒饱满、淀粉含量高的高粱籽粒进行浸泡 B. 摊晾可降低高粱的温度，避免高温杀死菌种 C. 入窖发酵过程中发酵液的温度和pH均升高 D. 酿造过程中发酵坛密封不严可能会导致酒变酸 【答案】C 【解析】 A、 淀粉可水解为葡萄糖，是酵母菌发酵产酒精的原料，因此选颗粒饱满、淀粉含量高的高粱酿酒，A正确； B、蒸煮后高粱温度较高，摊晾降温可以避免高温杀死酒曲中的发酵菌种，B正确； C、发酵过程中会产生酒精和CO2，CO2会使pH降低，C错误； D、酿造过程应在无氧条件下进行，若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而使酒变酸，D正确。 3.（2026·贵州安顺·二模）柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。以玉米粉为原料，利用黑曲霉通过深层通气发酵生产柠檬酸，工业发酵流程如下图。下列分析错误的是（　　） A. 种子培养基为液体培养基，用于对黑曲霉进行扩大培养 B. 发酵培养基和种子培养基加入到发酵罐时需经过严格灭菌处理 C. 发酵时，可用稀释涂布平板法和血细胞计数板检测培养液中黑曲霉的数量 D. 发酵结束之后，可根据柠檬酸的性质将柠檬酸从发酵罐中分离出来 【答案】B 【解析】 A、液体培养基的营养物质分布均匀，微生物能充分接触并利用营养物质进行繁殖，因此常用于微生物的扩大培养。黑曲霉的种子培养采用液体培养基，可快速增加菌体数量，为后续发酵提供足够的菌种，A正确； B、发酵培养基在加入发酵罐前需要严格灭菌，以避免杂菌污染发酵体系；但种子培养基是已经接种黑曲霉孢子并培养得到的菌种液，若对其进行灭菌处理会杀死黑曲霉，无法进行后续发酵，B错误； C、稀释涂布平板法可以统计发酵液中活菌的数量，血细胞计数板法可以统计发酵液中总菌数（包括活菌和死菌），两种方法都可用于检测发酵液中黑曲霉的数量，C正确； D、发酵结束后，可根据柠檬酸的物理性质（如溶解度）、化学性质（如酸性），采用萃取、离子交换、蒸馏等方法将其从发酵液中分离提纯，D正确。  4.（2026·贵州·一模）某生物小组欲利用以下培养基从土壤中分离某种微生物，下列对该实验的后续操作及结果分析正确的是（       ） 成分 葡萄糖 KH2PO4 K2SO4 NaCl CaCO3 MgSO47H2O 蒸馏水 琼脂粉 含量 10g 0.2g 0.2g 0.2g 5g 0.2g 1000mL 20g A. 配制好的培养基先分装到锥形瓶后再进行高压蒸汽灭菌 B. 该培养基灭菌后需冷却至40℃再进行倒平板操作 C. 用无菌水将土样进行系列稀释后用接种环进行接种、计数 D. 该无氮培养基可用于硝化细菌等固氮菌的分离与计数 【答案】A 【解析】 A、培养基的制备流程为计算、称量、溶化、调pH、分装、灭菌，因此配制好的培养基，分装到锥形瓶，塞好棉塞，用牛皮纸将瓶口包裹好，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌，A正确； B、培养基灭菌后需冷却至50℃左右再进行倒平板操作，40℃时琼脂已接近凝固温度，无法顺利完成倒平板操作，B错误； C、对土样稀释液接种并计数需要用稀释涂布平板法，使用涂布器接种，接种环用于平板划线法，仅能分离纯化微生物，无法用于计数，C错误； D、该培养基不含氮源，属于筛选固氮微生物的选择培养基，但硝化细菌不属于固氮菌，无法利用空气中的氮气作为氮源，D错误。 5.（2026·贵州毕节·二模）中国传统白酒多以泥窖为发酵基础，素有“千年老窖万年糟”、“以窖养糟”、“以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列说法错误的是（　　） A. 传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B. 窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过程不易被杂菌污染 C. 从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时，需在密闭环境中进行 D. 从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出产淀粉酶的微生物 【答案】C 【解析】 A、传统白酒酿造过程中，酿酒酵母负责将糖类转化为酒精，同时还有其他多种微生物参与发酵产生风味物质，属于多种微生物共同作用的发酵过程，A正确； B、老窖池内的微生物群落经过长期演替形成了相对稳定的体系，具备一定的抵抗力稳定性，可抑制外来杂菌的定植繁殖，因此酿造过程不易被杂菌污染，B正确； C、酵母菌是兼性厌氧菌，有氧条件下进行有氧呼吸可大量增殖，因此扩大培养酿酒酵母时需提供有氧环境，密闭环境下酵母菌进行无氧呼吸，增殖速率极慢，无法实现扩大培养的目的，C错误； D、谷物的主要有机成分为淀粉，可在酒糟中生存的微生物需要以淀粉为碳源，因此可从酒糟中分离出产淀粉酶的微生物，D正确。 6.（2026·贵州遵义·二模）为延长传统发酵糟辣椒的贮藏期，研究人员采用多种无菌技术对糟辣椒进行处理，实验结果如下。下列叙述错误的是（　　） 贮藏时间/d 不同无菌技术的菌落总数/（×103CFU/g） 对照组 辐射灭菌 巴氏消毒 高压蒸汽灭菌 0 3.01 1.02 2.55 2.46 7 3.55 1.53 3.05 2.89 14 3.87 2.21 3.77 3.32 注：CFU/g指每克糟辣椒中的菌落数 A. 传统发酵糟辣椒以混合菌种的固体发酵或半固体发酵为主 B. 菌落总数可采用稀释涂布平板法计数，该方法计数结果往往偏小 C. 与高压蒸汽灭菌相比，巴氏消毒对营养物质破坏小且抑菌效果好 D. 辐射灭菌的抑菌效果最显著，其长期贮藏应用价值值得深入研究 【答案】C 【解析】 A、传统发酵糟辣椒利用天然菌群进行发酵，属于混合菌种的固体或半固体发酵，该描述符合传统发酵特点，A正确； B、稀释涂布平板法通过统计菌落数间接计数，但菌落可能重叠或被抑制，导致计数结果偏小，B正确； C、由表可知：巴氏消毒组贮藏14天菌落数为3.77×10³ CFU/g，高压蒸汽灭菌组为3.32×10³ CFU/g，说明巴氏消毒抑菌效果较差，C错误； D、辐射灭菌组初始菌落数最低（1.02×10³ CFU/g），且贮藏期间增长缓慢，抑菌效果显著，具有研究价值，D正确。 故选C。 7.（2026·贵州·学业水平适应性测试）宋人张表臣曾在《珊瑚钩诗话》中说：“中古之时，未知曲蘖，杜康肇造，爱作酒醴，可为酒后，秫酒名也”。这显示出古人已经开始采用糵（发芽的谷物）来发酵产酒，目前该技术仍用于现代啤酒生产。下列叙述正确的是（　　） A. 大麦发芽程度越高，释放的淀粉酶越多越有利于啤酒生产 B. 啤酒酵母的扩大培养与发酵产酒需要控制的条件相同 C. 主发酵过程冷却水流量突然增大会导致的生成量增加 D. 啤酒的后发酵降低发酵温度，有利于次生代谢物的积累 【答案】D 【解析】 A、大麦发芽程度过高时，发芽过程会消耗大量自身储存的糖类等有机物，导致发酵可利用的底物减少，反而不利于啤酒生产，A错误； B、啤酒酵母扩大培养需要有氧条件，目的是让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；发酵产酒需要无氧条件，目的是让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，B错误； C、主发酵过程冷却水流量突然增大会使发酵液温度快速降低，酵母菌呼吸相关酶活性下降，细胞呼吸速率减慢，CO2的生成量减少，C错误； D、啤酒的后发酵降低发酵温度，可抑制酵母菌快速繁殖，减少营养物质的消耗，有利于次生代谢物（风味类物质等）的积累，改善啤酒品质，D正确。 8.（2026·贵州贵阳·一模）乳糖酶缺乏症患者由于体内乳糖酶的分泌量不足，导致患者无法消化母乳或牛乳中的乳糖，易引起非感染性腹泻。利用乳糖酶可以去除奶粉中的乳糖，下图为从奶酪中分离纯化高效生产乳糖酶酵母菌的流程示意图。 回答下列问题。 （1）制备奶酪悬浮液的目的是　　　　　　　　，培养基甲能为酵母菌生长提供的营养物质主要有　　　　　　　　。 （2）在接种到培养基乙之前，要将培养基甲中的菌液进行系列稀释，这样做的目的是　　　　　　　　，稀释后接种所用的工具是　　　　　　　　。 （3）X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是　　　　　　　　。 （4）某同学认为获得无乳糖奶粉的方法不止一种，于是设想利用转基因低乳糖奶牛的乳汁生产乳糖含量较低的奶粉，这样可减少乳糖酶生产环节。培育转基因低乳糖奶牛的核心工作是基因表达载体的构建，其目的是　　　　　　　　（答出1点）。 【答案】（1）① 将奶酪中的酵母菌释放出来，便于后续接种培养    ② 碳源（如糖类）、氮源（如蛋白胨、酵母膏）、水和无机盐     （2）① 获得单菌落，便于后续分离和纯化高效产乳糖酶的酵母菌    ② 涂布器     （3）蓝色菌落     （4）使目的基因（如抑制乳糖合成的基因）在受体细胞（奶牛细胞）中稳定存在，并能遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用（或 “使目的基因能够在受体细胞中复制、转录和翻译，实现特定性状的表达”）      【解析】 微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 (1)小问详解： 制备奶酪悬浮液的目的是：将奶酪中的酵母菌释放出来，便于后续接种培养（或 “使奶酪中的酵母菌分散到液体中，形成菌悬液，方便后续操作”）。 培养基甲（液体培养基）为酵母菌生长提供的主要营养物质有：碳源（如糖类）、氮源（如蛋白胨、酵母膏）、水和无机盐。 (2)小问详解： 系列稀释的目的是：获得单菌落，便于后续分离和纯化高效产乳糖酶的酵母菌（或 “降低菌液浓度，使接种后在培养基乙上形成单个菌落，方便筛选”）。稀释后接种到培养基乙（固体培养基）所用的工具是：涂布器（若用平板划线法则为接种环，本题流程为稀释后涂布，故为涂布器）。 (3)小问详解： 应挑选的是：蓝色菌落。 因为 X-gal 被乳糖酶分解后产生蓝色的溴靛蓝，只有能高效产乳糖酶的酵母菌才能使菌落显蓝色，便于筛选。 (4)小问详解： 基因表达载体构建的核心目的是：使目的基因（如抑制乳糖合成的基因）在受体细胞（奶牛细胞）中稳定存在，并能遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用（或 “使目的基因能够在受体细胞中复制、转录和翻译，实现特定性状的表达”）。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $