河南省周口市中英文学校2025—2026学年高二下学期阶段考试生物试题

**基本信息** 以传统发酵技术与现代生物技术为核心，融合《齐民要术》文化传承、口罩降解菌筛选等真实情境，全面考察高二生物核心素养与实验探究能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|传统发酵（1-7题）、微生物培养（8-11题）、植物细胞工程（12-16题）|结合2025发酵产业大会、《齐民要术》古籍原文，考察科学思维与生命观念| |非选择题|5题/52分|植物组织培养（17题）、体细胞杂交（18-19题）、发酵技术应用（20题）、微生物筛选计数（21题）|以桑葚果酒制作、PP分解菌筛选为情境，综合考察实验设计与探究实践能力，体现技术与社会联系|

周口中英文学校2025—2026学年下学期高二月考考试姓名： 班级： 学号： 考场： 座号： 生物试题 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I卷（选择题） 1、 单选题(本题包括16个小题，每小题3分，共48分) 1．2025年全国特色发酵食品产业大会上，多地展示了传统发酵工艺现代化升级成果，下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（　 　） A．传统发酵常常是固体发酵或者是半固体发酵 B．传统发酵利用的微生物一般为天然存在的单一菌种 C．传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得 D．传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题 2．下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（　　） A．制作泡菜时，泡菜坛坛口加水密封的目的是为了抑制乳酸菌的繁殖 B．制作果酒时，发酵液中酒精浓度升高会抑制酵母菌的发酵 C．制作腐乳时，毛霉产生的蛋白酶只能将豆腐中的蛋白质分解为氨基酸 D．制作果醋时，醋酸菌在无氧条件下将酒精转化为醋酸 3．醋，古称“酢”，是重要的调味品。北魏贾思勰的《齐民要术》中详细记载了“作酢法”，“作大酢法：七月七日取水作之。大率麦曲一斗，勿扬簸；水三斗；粟米熟饭三斗，摊令冷。……先下麦曲，次下水，次下饭，直置勿搅之。一七日，旦，著井花水一碗。三七日，旦，又著一碗，便熟。”即利用谷物制醋的工艺。下列有关说法错误的是（　　） A．“粟米熟饭三斗，摊令冷”先煮熟再晾凉，前者是为了杀灭杂菌， 后者是为了保持微生物的活性 B．现在的醋酸发酵阶段需要通入无菌空气，以满足醋酸菌将乙醇氧化为乙酸 C．在醋酸发酵过程中，随着醋酸的积累，发酵液的pH值下降， 这会抑制绝大多数杂菌的生长 D．淋醋前加入适量的食盐，主要目的是调节食醋的风味，对抑制杂菌没有作用 4．以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（     ） A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 5．发酵罐中微生物发酵条件调控直接影响产物产量。下列关于发酵过程控制的叙述，正确的是（　　） A．谷氨酸发酵时，溶氧不足会积累乳酸或琥珀酸 B．青霉素发酵需持续保持严格厌氧环境 C．温度升高一定会提高酶活性，促进产物合成 D．发酵过程中pH无需调节，微生物可自行缓冲 6．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程和传统发酵技术的描述，错误的是（　　） A．传统发酵制作食醋时，需将发酵容器置于通风处并定期搅拌， 以促进醋酸菌发酵产生醋酸 B． 传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，、 发酵工程以单一菌种的液体发酵为主 C． 单细胞蛋白是通过发酵工程从酵母菌等微生物细胞中提取获得的， 可以作为食品添加剂 D． 利用发酵工程生产的微生物农药，可利用微生物或其代谢物防治病虫害， 属于生物防治 7．北魏农学巨著《齐民要术》记载了许多古人在实际生产中积累的经验，也蕴藏着众多生物学知识。请阅读表格中的古籍原文，下列有关叙述正确的是（    ） 工艺名称 古籍原文 酿酒技术 浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷 制醋技术 大率酒斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之……七日后当臭，衣生， 勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成 腐乳制作技术 豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心 泡菜制作 作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，内（纳）瓮中。 其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止，不复调和 A．“衣生”指发酵液表面形成一层菌膜的现象，主要是酵母菌大量繁殖形成的 B．从微生物培养的角度看，豆腐是固体培养基，接种时需要对其进行严格灭菌 C．“令没菜把即止”主要目的是让蔬菜充分吸收盐分，使风味品质更佳 D．“鱼眼汤”是指液面冒出小气泡的现象，主要由微生物呼吸作用释放CO2形成 8．微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　）    A．①②⑤⑥ B．③④⑥⑦ C．①②⑦⑧ D．①③④⑤ 9．下列有关“酵母菌的纯培养”实验的叙述，不合理的是（    ） A．可用干热灭菌法对培养皿进行灭菌处理 B．马铃薯琼脂培养基中葡萄糖是唯一碳源 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板操作 D．使用后的培养基必须灭菌后再丢弃 10．在牙周致病菌研究中，采用1%浓度的羧甲基壳聚糖（碳源）作为培养基添加物，经过18天培养后，牙龈卟啉单胞菌的菌落周围会出现清晰的透明圈，如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．牙龈提取物要放入含有无菌水的锥形瓶中进行适当稀释 B．图示利用平板划线法接种的过程中接种环需灼烧6次 C．培养基上出现透明圈不能说明该培养基以羧甲基壳聚糖为唯一碳源 D．当羧甲基壳聚糖浓度提升至5%时，一定形成菌落及透明圈 11．幽门螺杆菌主要寄生在人体胃黏膜，可引起慢性胃炎、胃溃疡等疾病，在人体的胃中依靠其合成的脲酶分解尿素产生氨，在菌体周围形成弱碱性微环境，中和胃酸，保护细菌免受胃酸的侵蚀。欲提取某慢性胃炎患者的胃液并获得该菌的纯培养物，下列有关操作正确的是（    ） A．为防止杂菌污染，配制培养基时必须在酒精灯火焰附近进行操作 B．可配制以尿素为唯一氮源的选择培养基用于幽门螺杆菌的分离与纯化 C．利用平板划线法不仅可以获得该菌单菌落还能对菌落计数以估计活菌数 D．因幽门螺杆菌可生活在胃中，故将培养基pH调节至酸性有利于其培养 12．山姜属的植物具有养胃、镇痛、抗癌、抗氧化、抗应激等多种效用，下列关于某山姜属植物组织培养的相关叙述正确的是（  ） A．配制培养基时一般需添加一定量的葡萄糖以提供碳源和能源 B．植物组织培养过程中，脱分化与再分化的本质都是发生细胞的分裂 C．接种需在超净工作台进行，期间需注意手部动作，已离开超净工作台的手不可再进入工作台内 D．对外植体消毒时，使用体积分数为95%的酒精处理30s，立即用无菌水清洗2～3次 13．为保护濒危珍稀植物云南红豆杉，并高效提取其抗癌物质紫杉醇，研究人员利用植物细胞工程进行快速繁殖与细胞悬浮培养，相关流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．外植体选择云南红豆杉的幼嫩茎段，是因为该部位细胞的分化程度低和分裂能力强 B．对外植体进行消毒可选择酒精和次氯酸钠溶液，接种操作必须在酒精灯火焰旁进行 C．诱导外植体形成愈伤组织和诱导愈伤组织生芽、生根所用主要植物激素的种类及比例均不同 D．利用细胞悬浮培养提取紫杉醇的方式的主要原理是细胞增殖，几乎不受季节与天气等的限制 14．下列关于植物体细胞杂交技术的叙述，正确的是（　　） A．用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 B．诱导原生质体融合只能用聚乙二醇（PEG） C．杂种细胞再生细胞壁后即成为杂种植株 D．该技术能克服远缘杂交不亲和性，但子代会遗传双亲全部性状 15．某同学利用红叶李果实制作果醋，图示其操作的简易流程。下列相关叙述正确的是（    ） A．果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同 B．过程①中添加适量果胶酶，有利于提高出汁率 C．过程②中，为使菌种充分吸收营养物质，需每日多次开盖搅拌 D．过程③发酵时会产生大量气泡，需拧松瓶盖放气 16．人参皂苷具有抗肿瘤等作用。如图表示利用西洋参种子胚进行工厂化生产人参皂苷的过程示意图，下列相关叙述正确的是（　　） A．①为脱分化过程，在适宜光照下培养得到不定形薄壁组织团块 B．②过程需要用纤维素酶和果胶酶处理得到单个的完整植物细胞 C．过程①与②所用培养基的物理状态相同，植物激素比例不同 D．④过程培养液中的蔗糖浓度过高会导致细胞过度失水而死亡 第II卷（非选择题） 2、 综合题（本题共5个大题，共52分） 17．甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题： (1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是利用了植物细胞的全能性。细胞的全能性是指_____________________________。 (2)图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，形成A的培养基中两种激素及浓度比例为_________________________。由A到B的过程称为___________。 (3) 植物细胞工程技术在生产上具有广泛的应用。其中微型繁殖的优点是____________(答2点)。利用植物细胞培养技术大规模生产紫杉醇等药物，紫杉醇属于________(次生、初生)代谢产物。 18．紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜臌胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后臌胀。科学家用植物体细胞杂交技术，将紫花苜蓿的原生质体和百脉根的原生质体融合，成功地培育出了“紫花苜蓿——百脉根”杂种植株，培育过程如图所示，其中①～⑤表示过程，a～f表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题： (1)进行植物体细胞杂交时会用到原生质体融合和__________________技术，该技术的理论基础是_______________________。 (2)在植物体细胞杂交技术中，过程①常用______________________________酶处理植物细胞以除去细胞壁。图中②过程细胞两两融合时，可出现__________种融合细胞。 (3)百脉根富含单宁，单宁不是百脉根生长和生存所必需的产物，属于__________（填“初生”或“次生”）代谢物，在植物体内含量很低，化学合成困难。单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用，被用于各类产品，可利用__________________________技术工厂化生产单宁。该方法需要将百脉根细胞诱导成__________________，再筛选出能稳定高产单宁的细胞进行培养。 19．利用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”杂种植株，实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄，地下结马铃薯的“超级作物”。 (1)材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用了植物原生质体融合和植物组织培养技术，人工诱导原生质体融合常用的化学方法，除 PEG 融合法外，还有________________________，植物组织培养技术的理论基础是_____________________________。 (2)图中②过程细胞两两融合时，可出现 ______种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有_________________和___________________两类关键激素。 (3)由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④______________和⑤________________过程。 (4)利用马铃薯和番茄的____________得到单倍体植株，然后取单倍体植株的细胞进行体细胞杂交，再用____________________处理之后也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。 20．某研究小组欲制作桑葚果酒和果醋，基本流程如图所示。回答下列问题： (1)制作桑葚果酒和果醋的菌种分别是_______________________________，二者在代谢类型上的主要区别是_______________________________。 (2)冲洗桑葚时，不能反复冲洗的原因是____________________________________________，桑葚果酒经发酵而得，呈现宝石红色，其中红色素存在于桑葚果实细胞的_____（细胞器）中。 (3)进行酒精发酵时，桑葚汁不能装满发酵装置的原因是_______________________________。酒精发酵完成后，可用________________（填试剂名称）检测酒精。进一步发酵制作果醋，若氧气充足、缺乏糖源时，醋酸菌将乙醇转化为__________________之后再氧化乙酸，其反应简式为________________________________________________________。 (4)传统发酵食品的制作过程中，由于杂菌情况不明和发酵过程的控制缺乏标准等，往往造成发酵食品的品质不一，工业上大规模生产时，通常会先通过____________技术获得单一菌种，再将它们接种到物料中进行发酵。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为____________。 21．一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维（PP），某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。图1表示 PP 分解菌分离与计数的过程，6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、601、688；7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97；8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。图2表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌菌落周围出现透明圈的情况。回答下列问题： 注：D表示透明圈直径，d表示菌落直径。 (1)从培养基的用途类型分析，图1、图2所用的培养基分别为______________。使用的培养基采用_______________法灭菌。灭菌后的培养基需要倒平板操作，冷凝后平板需倒置的目的是_________________________________________（1点即可）。在实验室中，可用稀释涂布平板法对某菌种进行计数，原理是__________________________________________________。 (2)图1所用接种方法为______________，操作时都需在_______旁进行，目的是防止杂菌污染。 (3)1g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是_________个，该数值比实际的数量一般_____（填“偏小”“偏大”或“相等”），理由是______________________________________________。 (4)从图2选择目的菌种推广使用，指标是_______________________，选择这一指标的理由是_______________________________________________________。 周口中英文学校2025—2026学年下期高二月考考试 生物试题参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B B D C A C D D B D 题号 11 12 13 14 15 16 答案 B C C A B B 17． (1)细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整个体或分化为各种细胞的潜能和特性 (2)细胞分裂素浓度和生长素浓度相等 再分化 (3)高效快速繁殖、保持优良品种的遗传特性 次生 18． (1) 植物组织培养 植物细胞的全能性 (2)纤维素酶和果胶（酶） 3 (3)次生 植物细胞培养 愈伤组织 19． (1)物理方法（离心、振动等） 植物细胞的全能性 (2)3 生长素 细胞分裂素 (3)脱分化 再分化 (4)花药/雄配子 秋水仙素 20． (1) 酵母菌、醋酸菌 前者是兼性厌氧型，后者是好氧型 (2) 酒精发酵的菌种分布于桑葚的表面 液泡 (3) 发酵装置中的空气（或O2）为酵母菌的有氧呼吸提供原料，有助于其大量繁殖，且防止发酵过程中发酵液溢出 （酸性）重铬酸钾溶液 乙醛 (4) 微生物培养 纯培养物 21． (1)选择培养基、鉴别培养基 高压蒸汽灭菌/湿热灭菌 防止冷凝水滴落污染培养基，同时避免培养基水分过快蒸发 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 (2) 稀释涂布平板法 酒精灯火焰 (3) 7.6×10¹⁰ 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (4) d/D比值大小 这一指标越小说明单个菌株分解PP的能力越强 1．B 【详解】A、传统发酵的发酵基质多为谷物、果蔬等天然原料，发酵形式常为固体发酵或半固体发酵，A正确； B、传统发酵一般利用原材料表面天然存在的微生物进行发酵，通常是多种混合菌种共同发挥作用，并非单一菌种，B错误； C、酱油、醋、泡菜都是我国典型的传统发酵食品，均可通过传统发酵工艺制备获得，C正确； D、传统发酵多为自然接种，无严格的人工灭菌和标准化工艺管控，存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题，D正确。 2．B 【详解】A、制作泡菜时，乳酸菌是厌氧菌，泡菜坛坛口加水密封的目的是营造无氧环境，以促进乳酸菌的繁殖，而非抑制，A错误； B、制作果酒时，酒精浓度过高（超过 12%~16%）会抑制酵母菌的代谢和发酵，甚至导致酵母菌死亡，B正确； C、毛霉产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，并非只分解为氨基酸，C错误； D、醋酸菌是好氧菌，制作果醋时需要在有氧条件下将酒精转化为醋酸，D错误。 3．D 【详解】A、将粟米煮熟可利用高温杀灭原料中的杂菌，避免杂菌污染发酵过程；晾凉是为了防止高温杀死麦曲中的发酵微生物，保持微生物活性，A正确； B、醋酸菌为异养需氧型微生物，有氧条件下可将乙醇氧化为乙酸，因此醋酸发酵阶段需要通入无菌空气满足醋酸菌的有氧呼吸需求，B正确； C、醋酸发酵过程中不断产生醋酸，发酵液pH逐渐降低，酸性条件会抑制绝大多数不耐酸杂菌的生长，C正确； D、淋醋前加入食盐，既可以调节食醋的风味，高浓度的食盐还可通过升高渗透压使微生物细胞失水，从而抑制杂菌的生长繁殖，D错误。 4．C 【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的乳酸菌被杀死，A错误； B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误； C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，为了制造无氧环境，同时可排出初期酵母菌等发酵产生的气体，C正确； D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。 故选C。 5．A 【详解】A、谷氨酸发酵时，溶氧不足会导致微生物进行无氧呼吸，积累乳酸或琥珀酸，A正确； B、青霉素是由青霉菌产生的，青霉菌是需氧型微生物，发酵过程需要有氧环境，B错误； C、酶的活性在一定范围内随温度升高而升高，但超过最适温度后，酶活性会下降，所以温度升高不一定会提高酶活性、促进产物合成，C错误； D、发酵过程中微生物的代谢活动会改变发酵液的pH，需要及时调节pH，微生物自身的缓冲能力有限，D错误。 6．C 【详解】A、醋酸菌为好氧细菌，发酵产醋酸需要充足的氧气，通风和定期搅拌可增加发酵液中的溶氧量，利于醋酸菌发酵，A正确； B、传统发酵通常利用自然环境中的混合菌种，以固体发酵、半固体发酵为主；发酵工程需要严格无菌环境，接种单一纯净的优良菌种，多采用液体发酵以提升发酵效率，B正确； C、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量微生物菌体本身，而非从微生物细胞中提取的物质，可作为食品添加剂或饲料，C错误； D、微生物农药是利用微生物本身或其代谢产物防治病虫害，没有使用化学农药，属于生物防治，D正确。 故选C。 7．D 【详解】A、制醋技术中“衣生”是发酵液表面形成菌膜的现象，菌膜由醋酸菌（好氧型细菌）大量繁殖形成（醋酸菌为果醋发酵的核心微生物，需在有氧的液面生长），A错误； B、腐乳制作中，豆腐可作为毛霉等微生物的生长基质（类似固体培养基），但传统腐乳制作依赖豆腐表面的天然毛霉等微生物，无需严格灭菌（灭菌会杀死发酵所需的毛霉，导致发酵失败），B错误； C、泡菜制作中“令没菜把即止”（盐水完全浸没蔬菜）的核心目的是创造无氧环境，保证乳酸菌（严格厌氧菌）进行无氧呼吸产生乳酸，C错误； D、酿酒技术中“鱼眼汤”是液面冒出小气泡的现象，酒曲中的酵母菌活化后，通过细胞呼吸（有氧呼吸阶段繁殖、无氧呼吸阶段产酒精）释放CO2，从而形成小气泡，D正确。 8．D 【详解】由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧中平板应倒置培养。 ①③④⑤正确，故选D。 9．B 【详解】A、因玻璃器皿耐高温且需保持干燥，培养皿灭菌通常采用干热灭菌法，A正确； B、马铃薯琼脂培养基中，马铃薯本身含有多种含碳有机物，葡萄糖并非唯一碳源，B错误； C、倒平板需待培养基冷却至50℃左右（琼脂未凝固且不烫手），避免高温烫伤操作者或导致凝固过快，C正确； D、使用后的培养基需高压蒸汽灭菌处理，防止杂菌污染环境，D正确。 10．D 【详解】A、牙龈提取物是细菌样品，稀释时应使用无菌水，以避免杂菌污染，A正确； B、用平板划线法分离菌种，划线5个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线完成后也需要灼烧灭菌，共灼烧灭菌6次，B正确； C、培养基上出现透明圈，只能说明该菌能利用羧甲基壳聚糖作为碳源，但不能证明这是唯一碳源，C正确； D、当羧甲基壳聚糖浓度提升至5%时，高浓度的碳源可能抑制细菌生长，或超出该菌分解酶的耐受范围，因此不一定能形成菌落及透明圈，D错误。 11．B 【详解】A、配制培养基时无需在酒精灯火焰附近操作，培养基配制完成后先进行高压蒸汽灭菌，倒平板、接种等灭菌后的操作需要在酒精灯火焰旁的无菌区域进行，以防止杂菌污染，A错误； B、幽门螺杆菌可合成脲酶分解尿素获取氮源，配制以尿素为唯一氮源的选择培养基时，无法利用尿素的杂菌不能生长，仅幽门螺杆菌等可分解尿素的微生物能存活，因此可用于幽门螺杆菌的分离与纯化，B正确； C、平板划线法可通过连续划线获得单菌落，但无法用于活菌计数，对活菌计数常采用稀释涂布平板法，C错误； D、幽门螺杆菌本身适宜在弱碱性环境生存，其能在胃中生存是因为分解尿素产生氨，在菌体周围形成弱碱性微环境中和胃酸，若将培养基pH调为酸性，会抑制幽门螺杆菌的生长，不利于其培养，D错误。 故选B。 12．C 【详解】A、植物组织培养的培养基一般添加蔗糖作为碳源和能源，同时蔗糖可维持培养基渗透压，并非添加葡萄糖，A错误； B、脱分化和再分化过程中会伴随细胞分裂，但二者的本质是基因的选择性表达，并非细胞分裂，B错误； C、接种需在超净工作台的无菌环境中进行，一旦离开超净台的手部会携带杂菌，不可再进入工作台内，避免造成培养基污染，C正确； D、外植体消毒使用的是体积分数为70%左右的酒精，95%的酒精会使菌体表面蛋白质快速凝固形成保护膜，无法有效杀灭微生物，D错误。 故选C。 13．C 【详解】A、植物幼嫩茎段细胞的分化程度低，分裂能力强，更容易脱分化形成愈伤组织，A正确； B、植物组织培养过程中，无菌环境是操作成功的关键，对外植体进行消毒可选择酒精和次氯酸钠溶液处理，消毒后用无菌水冲洗，培养基及器械都要灭菌，接种操作必须在酒精灯火焰旁进行，每次使用后的器械都要灭菌，B正确； C、诱导外植体形成愈伤组织的培养基中，生长素和细胞分裂素的用量基本相同，诱导愈伤组织生芽的培养基中细胞分裂素比例升高，诱导愈伤组织生根的培养基中生长素比例升高，这三个过程所用主要植物激素的种类相同但比例不同，C错误； D、细胞悬浮培养时，利用细胞增殖的原理提取紫杉醇，该技术不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，D正确。 14．A 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，使用纤维素酶和果胶酶可以去除细胞壁，获得原生质体，A正确； B、诱导原生质体融合的方法有物理法（如电融合、离心）和化学法（如聚乙二醇PEG），B错误； C、杂种细胞再生细胞壁后，还需要经过植物组织培养（脱分化、再分化）才能发育成杂种植株，C错误； D、植物体细胞杂交技术能克服远缘杂交不亲和性，但子代不会遗传双亲全部性状，因为基因的表达会受到环境等因素的影响，且细胞融合后部分基因可能沉默，D错误。 15．B 【详解】A、果酒发酵的菌种是酵母菌，是真核生物，果醋发酵的菌种是醋酸菌，是原核生物，两者的细胞结构不同，A错误； B、过程①为榨汁，果胶酶能分解细胞壁中的果胶，添加适量果胶酶，有利于提高出汁率，B正确； C、过程②为果酒发酵，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，若多次开盖会引入氧气抑制无氧呼吸并增加杂菌污染风险，C错误； D、醋酸菌为好氧微生物，发酵过程中要保证通气，不能盖盖，因此不存在拧松瓶盖的操作，D错误。 故选B。 16．D 【详解】A、①为脱分化过程，该过程需在无光条件下进行，培养得到的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块，A错误； B、纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织，破坏了植物的细胞壁，因此得到的悬浮细胞并不是完整的植物细胞，B错误； C、①脱分化所用培养基为固体培养基（含琼脂），②③过程为液体悬浮培养，所用培养基为液体培养基，物理状态不同；同时二者植物激素比例也不同（脱分化和再分化的激素配比有区别），C错误； D、植物细胞培养中的碳源为蔗糖，蔗糖浓度过高会导致细胞过度失水而死亡，不利于培养，D正确。 17．(1) 酵母菌、醋酸菌 前者是兼性厌氧型，后者是好氧型 (2) 酒精发酵的菌种分布于桑葚的表面 液泡 (3) 发酵装置中的空气（或O2）为酵母菌的有氧呼吸提供原料，有助于其大量繁殖，且防止发酵过程中发酵液溢出 （酸性）重铬酸钾溶液 乙醛 (4) 微生物培养 纯培养物 【详解】（1）制作果酒和果醋的菌种分别是酵母菌、醋酸菌，前者是兼性厌氧型，后者是好氧型。 （2）冲洗桑葚时，不能反复冲洗，因为酒精发酵的菌种（酵母菌）分布于桑葚的表面。桑葚果酒经发酵而得，呈现宝石红色，其中红色素存在于桑葚果实细胞的液泡中，即液泡中的色素与花和果实的颜色有关。 （3）进行酒精发酵时，桑葚汁不能装满发酵装置的原因主要有两点：一是发酵装置中的空气（或O2）为酵母菌的有氧呼吸提供原料，有助于为其大量繁殖提供能量，二是防止发酵过程中发酵液溢出。酒精发酵完成后，可用（酸性）重铬酸钾溶液检测酒精，若呈现灰绿色，说明有酒精存在。若氧气充足、糖源充足，醋酸菌可将乙醇直接转化为乙酸，若氧气充足、糖源不足，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛之后再氧化为乙酸，相应的反应简式为：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。 （4）工业上大规模生产时，通常会先通过微生物培养技术获得单一菌种。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。 18．(1)选择培养基、鉴别培养基 高压蒸汽灭菌/湿热灭菌 防止冷凝水滴落污染培养基，同时避免培养基水分过快蒸发 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 (2) 稀释涂布平板法 酒精灯火焰 (3) 7.6×10¹⁰ 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (4) d/D比值大小 这一指标越小说明单个菌株分解PP的能力越强 【详解】（1）图1是筛选PP分解菌的过程，培养基为选择培养基，图2表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，鉴别PP分解菌的过程，所以图乙所用培养基为鉴别培养基，都以PP作为唯一碳源； （2）图1表示 PP 分解菌分离与计数的过程，所用接种方法为稀释涂布平板法，操作时都需在酒精灯火焰旁进行； （3）由于平板计数范围为30-300，故取7号试管中的数量，7号试管的稀释倍数为108，则[（58+73+97）÷ 3]÷0.1×108=7.6×1010，即1 g 土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7.6×1010个，此数值一般偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落； （4）从图2选择目的菌种推广使用，指标是d/D比值大小，可选择图2培养基中D/d较大的菌株（降解圈直径D、菌落直径d），因为这一指标越大说明单个菌株分解PP的能力强，所以可作为目的菌种推广使用。 19．(1)细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整个体或分化为各种细胞的潜能和特性 (2) 细胞分裂素浓度和生长素浓度相等 再分化 (3) 高效快速繁殖、保持优良品种的遗传特性 次生 【详解】（1）细胞全能性是植物组织培养的理论基础。植物体细胞包含该物种全套的遗传信息，因此在适宜条件下，已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，即细胞全能性。 （2）在植物组织培养中，生长素与细胞分裂素的比例调控器官发生：比例相等时，利于愈伤组织的形成与维持； 比例偏高时，促进根的分化； 比例偏低时，促进芽的分化。A为愈伤组织，B为丛芽，由愈伤组织形成丛芽的过程属于再分化。 （3）微型繁殖优点：植物组织培养属于无性繁殖，能保持亲本优良性状；且培养周期短、繁殖速度快，可全年无休生产，不受自然环境限制。 次生代谢产物是植物生长发育非必需的有机化合物（如生物碱、紫杉醇、抗生素等），主要用于防御、通讯等，常通过植物细胞培养技术大量提取。 20．(1) 植物组织培养 植物细胞的全能性 (2) 纤维素酶和果胶（酶） 3 (3) 次生 植物细胞培养 愈伤组织 【详解】（1） 进行植物体细胞杂交时，先让不同植物细胞的原生质体融合，之后利用植物组织培养技术，把杂种细胞培育成完整植株。植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性，即已分化的植物细胞，仍具备发育成完整新个体的潜能。 （2） 在植物体细胞杂交技术中，过程①去除植物细胞的细胞壁，常用纤维素酶和果胶酶，因为植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶 。图中②是细胞融合过程，两两细胞融合时，会出现 “紫花苜蓿原生质体自身融合”“百脉根原生质体自身融合”“紫花苜蓿与百脉根原生质体相互融合” 这3种融合细胞 。 （3） 单宁不是百脉根生长发育必需的物质，属于植物的次生代谢物 。由于单宁在植物体内含量低、化学合成难，可利用植物细胞培养技术，实现单宁的工厂化生产 。该技术需先把百脉根细胞诱导成愈伤组织，愈伤组织分裂能力强，代谢活跃，便于积累次生代谢物单宁，之后再筛选高产单宁的细胞进行培养 。 21．(1) 物理方法（离心、振动等） 植物细胞的全能性 (2) 3 生长素 细胞分裂素 (3) 脱分化 再分化 (4) 花药/雄配子 秋水仙素 【详解】（1）人工诱导原生质体融合常用的化学方法，除PEG融合法外，还有物理方法（离心、振动等），由于植物细胞具有全能性，因此培养植物的细胞即能得到完整的植物体。 （2）图中②过程细胞两两融合时，可出现3种融合细胞，即马铃薯—马铃薯融合细胞、番茄—番茄融合细胞、马铃薯番茄融合细胞；马铃薯—番茄融合细胞为杂交细胞，为促进杂交细胞的分裂生长，培养基中应加入生长素和细胞分裂素。 （3）杂种细胞高度分化，要使其变成植株，需先经④脱分化，然后再经过⑤再分化过程。 （4）单倍体是配子发育来的，利用马铃薯和番茄的花药（雄配子）进行花药离体培养可得到单倍体植株，然后取单倍体植株的细胞进行体细胞杂交，用秋水仙素处理，可以使其染色体加倍，可得到可育的“番茄—马铃薯“杂种植株。 第 2 页 共 8 页 高二月考考试生物 第 1 页 共 7 页 学科网（北京）股份有限公司 $