1.2 微生物的培养技术及应用练习题2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

**基本信息** 聚焦微生物培养技术，以基础判断与综合探究分层设计，构建从单一操作到实验全流程的知识巩固路径，强化科学思维与探究实践。 **分层设计** |层次|知识覆盖|设计特色| |----|----------|----------| |基础层|培养基类型、灭菌方法、接种技术|选择题考查概念辨析（如第2题灭菌操作）| |提升层|实验设计、数据计算、筛选流程|填空题综合实验全流程（如第11题芽孢杆菌筛选）|

2026-2027学年高中生物人教版选择性必修三 1.2 微生物的培养技术及应用 模拟练习题 一、选择题 1 . 抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，相关叙述正确的是（        ） A．无透明圈产生的菌株一定不能产生抗生素 B．平板上长出的菌落属于同一种微生物 C．接种测试菌3时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 D．测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素抗性强 2 . 科研人员欲从长期受原油污染的土壤样品中，筛选出能够高效分解石油的微生物。利用以石油作为唯一碳源，添加无机营养物质的固体培养基，最终分离获得了可降解石油的细菌。下列说法正确的是（        ） A．该培养基属于选择培养基，一般需要将其调至酸性 B．配制好的培养基灭菌后再进行倒平板操作 C．对土壤样品进行梯度稀释后，只能用平板划线法完成接种 D．接种后的培养皿需倒置放置，目的是加快培养基水分蒸发 3. 米曲霉中的pyrG基因编码的OMP脱羧酶是尿嘧啶生物合成的关键酶。该酶还能将无毒的5-FOA转化为毒性产物抑制自身生长。pyrG基因发生突变，将无法合成该酶。现有5株米曲霉突变菌株，欲判断其是否为pyrG突变型，将野生菌株（WT）和突变菌株按图1位置接种在不同培养基上，结果如图2~4.下列说法正确的是（　　） A．利用紫外线照射米曲霉，通过定向突变获得突变菌株 B．微生物实验中，只能用稀释涂布平板法将菌接种到培养基上 C．在2培养基的基础上，添加5-FOA配制成4培养基 D．实验结果说明以上5株米曲霉突变菌株均为pyrG突变型 4 . 可从牛的瘤胃中分离出纤维素分解菌，相关筛选过程如图1所示。已知刚果红可以与纤维素反应形成红色复合物，将分离出来的菌落在刚果红培养基平板上进行筛选，筛选结果如图2所示。下列叙述错误的是（        ） A．图1中培养基表面用石蜡密封，说明分离出来的纤维素分解菌为厌氧菌 B．甲、乙、丙培养基都是以纤维素作为唯一碳源的选择培养基 C．透明圈出现的原因是纤维素被分解，菌落周围不能形成红色复合物 D．菌落②中的纤维素分解菌比菌落①③中的菌种更适用于生产实践 5 . 研究人员欲从土壤中筛选高效分解纤维素的菌株来配制微生物菌剂，用于农业与环保。筛选过程如图所示，其中培养基I、II配方相同，且都加入了刚果红（可与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物）。下列叙述错误的是（        ） A．培养基I、II属于选择培养基 B．向培养基I、II进行接种采用的方法是稀释涂布平板法 C．实验中需规范进行无菌操作，操作完成后一定要洗手 D．筛选获得的目的菌株接种到发酵罐前还需进行扩大培养 6 . 金针菇是一种美味的食用菌，属于多细胞的丝状腐生真菌，生产中常用含有马铃薯浸出液、琼脂、蒸馏水等的培养基进行纯化培养。培养基配制、灭菌与接种是金针菇菌丝培养的核心操作。下列叙述错误的是（        ） A．马铃薯浸出物可为金针菇提供碳源、氮源、无机盐等 B．培养基中的琼脂通常为微生物生长提供碳源 C．配制的培养基调节好pH后再进行高压蒸汽灭菌 D．不宜利用平板划线法对金针菇菌丝进行纯化培养 7 . 研究人员采用图1中甲所示流程获得高耐酒精的高产醋酸菌，其中图2是“纯化培养”后的结果图。下列相关叙述错误的是（        ） A．葡萄糖可以为醋酸菌提供碳源和能源 B．产醋酸能力最强的是A菌落处的醋酸菌 C．甘蔗渣无需灭菌，直接加入到醋酸菌培养基中 D．推测纯化培养时使用的培养基是固体培养基 8 . 下列有关微生物的分离、培养及计数的叙述，正确的是（        ） A．配制固体培养基时，应完成灭菌操作后再倒平板 B．干热灭菌法和湿热灭菌法均适用于固体培养基的灭菌 C．微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D．若测得3个平板的菌落数分别为24、236、241，则该菌落的平均值为167 二、填空题 9. 某研究小组欲测定土壤中某细菌的数量，按下图流程进行相关实验。回答下列问题： (1)图示实验所采用的接种方法是_______________________，该方法可以用于统计细菌的数量，其原理是___________________________________________________________________________________________。 (2)图中5号试管的稀释倍数为____________倍，若接种量为0.1 mL，则每克土壤样品中的活菌数为____________个。 (3)实验中所使用的接种工具是____________，对该接种工具采用____________法进行灭菌。 (4)若要进一步鉴定该细菌的种类，可以肉眼观察细菌在固体培养基上所形成菌落的___________________（答出2点）等特征来进行初步判断。某些细菌能分解尿素，其原因是________________________________________________________________________________________，筛选这些细菌时，培养基中应以____________作为唯一氮源。 10. 餐厨废油易造成环境污染，研究人员计划从土壤中筛选高效降解油脂的微生物，配制以油脂为唯一碳源的培养基，筛选流程如下： 采集土壤样品→梯度稀释→涂布接种至培养基→恒温培养→挑取单菌落→纯化培养→菌种鉴定 (1)①配制以油脂作为唯一碳源的培养基，该培养基类型属于_______培养基；设置唯一碳源的筛选原理是_________________________________。 ②培养基配制完成后采用_______法灭菌，倒平板操作在酒精灯火焰旁进行，目的是_________________________________。 (2)取1g土壤溶于9mL无菌水得到101倍的稀释液，等比稀释至106倍。分别取106倍的菌液0.1mL涂布到3个平板，培养后菌落计数结果分别为28、230、242，需要舍弃数值28，理由是______________________；计算得出每克土壤活菌数为_______个。 (3)纯化单菌落可以采用平板划线法，该方法_______（填“可以”或“不可以”）用来统计活菌数量，原因是___________________________。在培养基中加入苏丹Ⅲ染液，若菌落周围出现透明圈，说明该菌株可以降解油脂，透明圈直径/菌落直径的比值越大，代表该菌株降解油脂能力越_______。 (4)若培养后发现培养基上有杂菌生长，分析可能的操作失误：________________（答出1点即可）。 11. 为治疗由真菌感染引起的苹果树腐烂病，科研人员从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，相关流程如图所示。请回答下列问题： (1)实施①锥形瓶中的溶液是约__________mL的___________。 (2)过程③所用培养基的类型是________（从培养基的功能角度考虑），其灭菌应该在调pH________（从“之前”“之后”中选填），用到的接种工具是________。 (3)若10-1、10-2悬液对应平板上菌落完全覆盖培养基，10-3、10-4、10-5对应平板上的菌落平均数分别为389、112、12个，则取样土壤中芽孢杆菌总数约__________个，该估算值比土壤中芽孢杆菌的实际数_____________（从“高”“低”中选填）。 (4)目的菌筛选时，实验组应取直径为5 mm的苹果腐烂病菌菌落移置于培养皿中的____（从“A”“B”中选填）处，将芽孢杆菌接种在__________（从“A”“B”中选填）处。 (5)检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果后，进一步筛选后用于苹果树腐烂病防治。与化学防治相比，该方法的优势有__________（答出两点即可）。 答案 一、选择题答案 + 解析 1 答案：C 解析：接种环灼烧后未冷却，高温会杀死测试菌，对应平板无菌落；无透明圈仅代表对测试菌无抑制，不代表完全不产抗生素；平板会长出多种杂菌；测试菌 5 抑菌圈小、抗性弱，测试菌 2 抗性强。 2 答案：B 解析：培养基调 pH、分装后高压蒸汽灭菌再倒平板；细菌培养基一般调至中性或弱碱性；梯度稀释后可用涂布 / 划线两种接种法；培养皿倒置是防止冷凝水滴落污染菌落，不加速失水。 3 答案：C 解析：2 为基础培养基，添加 5-FOA 后可筛选 pyrG 突变株；基因突变不定向；接种有划线、涂布多种方法；5 株并非全部符合突变株特征。 4 答案：D 解析：透明圈 / 菌落比值越大分解能力越强，①比值大于②，①更适合生产；石蜡隔绝氧气，分离厌氧菌；纤维素唯一碳源为选择培养基；纤维素被分解，刚果红无法结合，形成透明圈。 5 答案：B 解析：图流程为平板划线法，不是稀释涂布；以纤维素唯一碳源 + 刚果红，属于选择培养基；全程无菌操作，实验后洗手；纯化单菌落需扩大培养才能制菌剂。 6 答案：B 解析：琼脂仅作凝固剂，不能提供碳源；马铃薯浸出液含糖、蛋白、无机盐；先调 pH 再高压灭菌；金针菇为丝状菌丝，平板划线难分离，多用稀释涂布。 7 答案：C 解析：甘蔗渣带杂菌，必须灭菌后才能加入培养基；葡萄糖为碳源能源；醋酸产酸越多透明圈越大，A 菌落抑菌 / 产酸能力最强；纯化用固体平板培养基。 8 答案：A 解析：固体培养基灭菌冷却后倒平板；干热仅适用玻璃、金属器皿，不能灭菌培养基；纯培养指单一菌种，不是无代谢废物；24 菌落过少舍弃，均值 =(236+241)÷2=238.5。 二、填空题答案 9 (1) 稀释涂布平板法；稀释度足够高时，一个单菌落由一个活菌增殖而来，统计菌落数可推算活菌数 (2) 106；1.7×108 (3) 涂布器；灼烧灭菌 (4) 大小、颜色（形状 / 隆起度 / 边缘特征任选两点）；细菌可产生脲酶分解尿素；尿素 10 (1) 选择；只有能利用油脂作碳源的微生物才能存活繁殖；高压蒸汽灭菌；防止空气中杂菌落入培养基造成污染 (2) 稀释度过低，菌落密度过大计数误差极大；2.36×10⁹ (3) 不可以；划线法菌液浓度梯度不均，无法准确统计活菌；强 (4) 培养基灭菌不彻底、倒平板操作超火焰无菌区、涂布工具未灭菌（任一点） 11 (1) 45；无菌水 解析：5g 土壤加 45mL 无菌水配成 10⁻¹ 稀释液 (2) 选择；之后；涂布器 (3) 2.32×10⁷；低 解析：多个活菌连在一起只形成 1 个菌落，统计数值偏小 (4) A；B 解析：中心 A 放置腐烂病菌，四周 B 接种芽孢杆菌，观察抑菌圈 (5) 减少农药残留、避免污染土壤水体、不会诱导病菌抗药性、对人畜安全（任两点） 学科网（北京）股份有限公司 $