专题十三 考点三 基因工程(题组一)-【创新教程】2022-2026五年高考生物真题分类特训试卷

考点三基因工程（题组一） 一、选择题 1.(2026·安徽卷，12)为研究某种鱼中新发现的R基因的功能，对该种鱼的受精卵进行基因敲 除，使R基因的编码序列缺失4个连续的碱基成为Rˉ，获得1条能正常生长的F。代个体 (RR),经杂交培育获得了纯合突变体。与野生型相比，纯合突变体的体型变小，体色变为浅 红色。下列叙述错误的是 () A.选用受精卵进行基因敲除，目的是确保突变的基因可以遗传给子代 B.用F。个体进行杂交培育，最早可以在F,获得纯合突变体 C.Rˉ编码的氨基酸序列发生改变，纯合突变体可用于R基因功能的研究 D.突变体有多种表型变异，说明一个基因的功能可能影响多个性状 2.（2026·湖南卷，7)将物种A的启动子与物种B的生长激素基因编码序列重组，导入到鲤鱼受 精卵，获得多条转基因鱼。与对照组相比，转基因鱼生长速率加快。下列叙述错误的是() A.来源不同的启动子和基因编码序列可重新组合并表达 斯 B.不同转基因鱼中重组生长激素基因的表达水平相同 C.外源基因整合到染色体DNA上是其在受体细胞中稳定遗传的关键 D.调控启动子活性可验证转基因鱼的生长速率与生长激素基因表达水平的关系 3.(2026·河南卷，13)胰蛋白酶可水解精氨酸与下一位氨基酸（脯氨酸除外）之间的肽键。抗体 甲的第27、96位均为精氨酸。通过蛋白质工程将第27位替换为苯丙氨酸，第97位替换为脯 氨酸。改造后的甲不被胰蛋白酶水解，并保持抗体活性。下列叙述错误的是 () 置 A.甲的设计改造需要遵循遗传信息传递的一般规律 B.胰蛋白酶不能水解改造后的甲，体现了酶的专一性 和 C.第96位氨基酸未被替换的原因可能是该位点与抗体功能相关 D.由于密码子的简并性，改造后编码甲的基因序列不一定改变 4.(不定项)(2025·江苏卷，19)图示人体正常基因 adⅢ HindⅢ HindⅢ A突变为致病基因a及HimdⅢ切割位点。Alu I基因热 5AAGCTT --200bp-- AAGCTTI TTCGAA ---400bp---- 限制酶识别序列及切制位点为，下列 HindⅢ 突变↓ HindⅢ 因 .-200bp -- AACCTG TTCGAC --400bp---- AAGCTTI3' TTCGAA5 製 相关叙述正确的有 阳 A.基因A突变为a是一种碱基增添的突变 B.用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同 C.用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致 D.产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定 5.(2024·河北卷，13)下列相关实验操作正确的是 A.配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料 B.利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果 C.将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D.将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 6.(2024·新课标卷，5)某种二倍体植物的P1和P2植株杂交得F1,F1自交得F2。对个体的 DNA进行PCR检测，产物的电泳结果如图所示，其中①~⑧为部分F2个体，上部2条带是一 对等位基因的扩增产物，下部2条带是另一对等位基因的扩增产物，这2对等位基因位于非同 源染色体上。下列叙述错误的是 () P:P2 F1 ①②③④⑤⑥⑦⑧ 电源负极 二- 电源正极 153 A.①②个体均为杂合体，F,中③所占的比例大于⑤ B.还有一种F,个体的PCR产物电泳结果有3条带 C.③和⑦杂交子代的PCR产物电泳结果与②⑧电泳结果相同 D.①自交子代的PCR产物电泳结果与④电泳结果相同的占1/2 7.(2023·新课标，6)某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基 因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。 限制酶的切割位点如图所示。 酶3 酶2 5-GAATTC-3'5-GGATCC-3'5-CCCGGG-3'5-AGATCT-3' 抗生素 3'-CTTAAG-5'3'-CCTAGG-53'-GGGCCC-5 3-TCTAGA-5 抗性基因 酶4 酶1 酶2 酶3 酶4 下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是 ( A.质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接 B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA连接酶连接 C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA连接酶连接 D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接 二、非选择题 8.(2026·安徽卷，20)肿瘤化疗通过诱导肿瘤细胞的DNA损伤，引发肿瘤细胞死亡。肿瘤细胞 会激活DNA损伤修复途径，导致肿瘤对化疗药物耐药。为探究P基因在乳腺癌中的作用机 制，科研人员进行了相关研究。回答下列问题。 (1)培养细胞时，若恒温培养箱内CO,不足，会导致培养液 异常；乳腺癌细胞培养时 (填“会”或“不会”)出现接触抑制现象；细胞传代培养时需要用胰蛋白酶处理，使贴壁细 胞分散成单个细胞，操作时需要控制处理时间，原因是 (2)P基因及转录方向、质粒图谱及目的基因插入位点的相关信息如图1所示（实线方框内横 线处表示限制酶的识别序列，箭头处表示酶切位点)。为构建重组质粒，扩增P基因时，应选择 的一对引物为 (填图2中序号)。为探究P基因对乳腺癌细胞增殖的影响，将重组质 粒导入乳腺癌细胞的处理组作为实验组，对照组的处理是 0 P基因 5…CCGTGT…ATGCCT…-3 3.…GGCACA.…TACGGA-5 转录方向 BglⅡ BamHI SpeI HindⅢ 5-ACAGATCTCGGATCCCACTAGTCAAGCTTAACG-3 D5'-..GGATCCAGGCAT-3' 目的基因插入位点， ②5-…AGATCTTCCGTA-3' 启动子 ③5-…AGATCTAGGCAT-3 终止子 ④5'-…ACTAGTCCGTGT-3' BamH I 质粒 ⑤5'-…ACTAGTGGCACA-3' HindⅢ ⑥5'-…AAGCTTCCGTGT-3' 复制原点 扰程殊责 图2 图1 (3)S基因主要通过抑制DNA损伤修复途径来抑制肿瘤增殖，引发肿瘤细胞死亡。研究发现， P蛋白能诱导S基因的启动子甲基化。这表明P基因 S基因的转录， (填“促 进”或“抑制”)肿瘤耐药。 154 9.(2026·云南卷，21)UW4菌株可表达ACC脱氨酶减少植物乙烯合成，促进植物生长，但定殖 植物根部能力较弱。现欲将增强定殖能力的五肽整合到UW4中ACC趋化受体(ACCR)的羧 基端。 回答下列问题： 第一步：构建pEX质粒（图a),复制原点(ori)不能在UW4菌株中启动复制（质粒不复制 策略)。 插入位点 UW4菌株ACCR基因 前端后端 PCR扩增 ■ 前端后端 庆大霉素蔗糖致 重叠延伸PCR 抗性基因死基因 构建pEX质粒 前端 后端 KpnI酶切位点 EcoR I酶切位点orn 前端后端 五肽对应的碱基序列 pnI酶切位点五肽EcoR I酶切位点 以下简称五肽 KpnI酶切位点EcoR I酶切位点 pEX质粒 图a (1)PCR每次循环一般可以分为变性、复性和 三步。 (2)构建pEX质粒时，用2种限制酶的目的是 (答出2点)。 第二步：将pEX质粒导人UW4菌株中，利用DNA同源区段可发生交换的原理，改造得到工程 菌UW4-2(图b)。 五肽后端 前端五肽后端 后端 前端后端 pEX质粒 前端后端 后端五肽前端 第一次同源交换 第一次筛选 统在高凳爵 第 UW4-1菌株拟核DNA UW4南株拟核DNA 另一种菌株 ,第二次筛选 另一种同源交换形式 另一种质粒 + 另一种菌株 次同源交换 前端 ☑ 前端后端 在凭器 五肽前端 第二次筛选 2■ 后端五肽前端 UW4-2菌株拟核DNA 统精亮 后端五肽前端 图b (3)我国科学家将来自玉米的α一淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，使花粉失活，防止转 基因花粉传播；在UW4-2菌株构建中使用了质粒不复制策略。此类设计的主要目的 是 (4)要获得UW4-2菌株，需筛选三次。第一次在培养基中添加 即可筛选出 UW4-1菌株，筛选的原理是 ;在第二次筛选培养基中添加 。筛选后，培养基中仍同时存在两种菌株，第一种菌株是UW4-2,另一种菌株的拟 核DNA结构是 (填图c中序号)；可以通过设计特异性引物进行PCR扩增相 应序列并 前端后端 前端后端 ori ori 工 前端五肽后端 前端五肽后端 ① ③ 图c 155 10.(2026·河北卷，22)黑曲霉中的淀粉酶R能直接将不经高温处理的淀粉降解为葡萄糖。R基 因的表达受CreA蛋白抑制。研究者利用基因工程手段，抑制了黑曲霉CrA基因的表达，并进行 了相关检测。 回答下列问题： (1)黑曲霉菌种的分离纯化应选用 (填“固体”或“液体”)培养基。 (2)细胞中具有特定结构的双链RNA可被相关酶识别并降解为小片段。RNA小片段可识别 与自身序列互补的mRNA,引导该mRNA发生降解。如图1所示，为使含片段A和C的转 录产物能按照 原则自身折叠形成双链，扩增CrA基因D片段时，可在两个引 物的 端分别添加两个限制酶识别序列。一部分PCR产物用限制酶KpnI和SpI酶 切连接到载体中A所在的位置，另一部分再用限制酶①和②构建到载体中C所在的位置。 E好 因此可判断，限制酶①应该是 载体的部分结构及其RNA产物： CreA片段D的引物及限制酶识别位点： Kpn I Spe I Nco I Sac I 启动子ABC终止子 限制酶①KnI 引物1 转录后RNA形成 链内双链结构 D A mmm黑B降解令CreA mRNA 引物Ⅱ 降解 SpeI限制酶② 图1 (3)构建的基因表达载体除含有启动子、终止子和目的基因外，还需具有 基因，以 使表达载体转入受体细胞后可利用 培养基筛选出转基因成功的菌株。 (4)构建的表达载体转入菌株G获得G1,将G和G1在相同且适宜的条件下培养，对其生长 状况和菌液的淀粉酶活力进行检测，实验结果（图2）表明 (答出两点) 20,·G生物量◆G淀粉酶活力 1500 ·G1生物量◆G1淀粉酶活力 400 12 300 吴 200 4 100 0 0 24 487296120144 时间h 图2 (5)传统工艺中需对淀粉进行高温糊化、淀粉酶液化和糖化酶糖化等处理，才可获得葡萄糖。 相较于传统工艺，对淀粉酶R的研发利用所体现的优势是 (答出两，点) 156区)和DNA连接酶（连接缺口）。该过程不需要添加引 物，原因是：同聚物尾配对后存在可直接延伸的3'端 DNA聚合酶可直接从该末端延伸合成互补链，无需引 物起始。 (4)检测基因W是否表达出相应蛋白，由于基因表达的 产物是蛋白质，分子水平检测蛋白质方法是抗原一抗 体杂交。 答案：(1)启动子复制原点 (2)KpnI、XhoI (3)DNA聚合酶、DNA连接酶不需要同聚物尾配 对后存在可直接延伸的3'端，DNA聚合酶可直接从该 末端延伸合成互补链，无需引物起始 (4)抗原一抗体杂交 16.解析：单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使 之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B 淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培 养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生 特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基 培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹 水中获取单克隆抗体。 (1)一般认为，已免疫的脾细胞（含浆细胞）中已含足够 数量的能产生特异性抗体的效应B细胞，不需要通过 原代培养扩大细胞数量。 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，用特定的选择培养基进 行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具 有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才 能生长。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行 杂交，是运用了抗原一抗体杂交技术，抗体检测呈阳性 的细胞，即为所需的杂交瘤细胞。 答案：(1)不需要使细胞接触处的磷脂分子重新排 布，细胞膜打开，细胞发生融合 (2)未融合的亲本细胞融合的具有同种核的细胞 (3)通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交 瘤细胞 17.解析：(2)无瓣海桑是速生乔木，种植后由于其生长速 度较快，在与互花米草在阳光等的竞争中占据优势，能 有效抑制互花米草的蔓延。 (3)根据表格数据可知，随着时间的推移，无瓣海桑群 落中植物种类逐渐减少，林下没有无瓣海桑和秋茄更 新幼苗，则无瓣海桑的种群数量不再增加，可能会被本 地物种所替代，所以不会引起新的入侵植物。 (4)通过适当控制引进树种规模，扩大本土树种的种 植，增加物种，使营养结构变得复杂，可提高生态系统 的稳定性，还能防止新的物种的入侵。 答案：(2)无瓣海桑生长快，比互花米草高，在竞争中占 优势 (3)随着时间的推移，无瓣海桑群落中植物种类逐渐减 少，林下没有无瓣海桑和秋茄更新幼苗，可能会被本地 物种所替代，所以不会引起新的入侵植物 (4)适当控制引进树种规模，扩大本土树种的种植，增 加物种，提高生态系统的稳定性 考点三基因工程（题组一）》 1.B受精卵具有发育的全能性，选用受精卵进行基因敲 除，突变的基因可随细胞分裂传递给子代个体，A正确； F。个体基因型为RR,杂交培育时，F的基因型为RR、 RR,无法获得纯合突变体(RR),最早需在F2中获 得，B错误；R基因编码序列缺失4个碱基，会导致移码 突变，使编码的氨基酸序列改变，纯合突变体可用于研 究R基因的功能，C正确；突变体体型变小、体色变浅， 说明R基因的功能影响多个性状，体现了一因多效， D正确。 22 2.B基因工程的核心是构建基因表达载体，不同来源的 启动子和基因编码序列可以重新组合，由转基因鱼生长 速率加快可知，转入的重组生长激素基因成功表达，A 正确。启动子是驱动基因转录的位点，不同转基因鱼中 启动子活性不一定相同，因此重组生长激素基因表达水 平不一定相同，B错误。若外源基因游离在细胞质中，细 胞分裂时容易丢失；只有外源基因整合到染色体DNA 上后，才能够随染色体复制和分配，稳定遗传给子代， C正确。启动子是调控基因转录的关键DNA片段，通 过调控启动子活性改变生长激素基因表达水平，检测转 基因鱼的生长速率是否发生相应变化，可以验证两者的 关系，D正确。 3.D蛋白质工程从预期蛋白质功能出发，经结构设计、氨 基酸序列推导最终改造对应基因，再通过基因表达获得 改造蛋白，整个过程遵循中心法则即遗传信息传递的一 般规律，A正确；酶的专一性指酶只能催化一种或一类 化学反应，胰蛋白酶仅能识别特定序列的肽键，改造后 的甲无其可作用的位点因此不能被水解，体现了酶的专 一性，B正确；改造后甲仍保持抗体活性，第96位精氨酸 未被替换，推测该位点可能与抗体的功能密切相关，替 换后可能导致抗体活性丧失，C正确；密码子简并性是指 同一种氨基酸可对应多种密码子，但本次改造中第27 位、97位的氨基酸种类发生了改变，不同氨基酸对应的 密码子存在差异，因此改造后编码甲的基因序列一定发 生改变，D错误。 4.BD对比A基因和a基因的序列，A基因中“AAGCTT”变 为a基因中“AAGCTG”,是碱基替换(T→G),并非碱基增 添，A错误；HindⅢ切割产生黏性末端，AluI切割后产 生的是平末端，二者末端类型不相同，B正确；观察图中 a基因，HindⅢ有2个切割位点，切割后会产生1个片 段，AluI有3个切割位，点，切割后会产生2个片段，一 个片段长度是200bp左右，另一个是400bp左右，用两 种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小不一致， C错误；因为正常基因A和致病基因a的HindⅢ切割位 ,点不同，所以产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限 制酶开展酶切鉴定，D正确。 5.B配制PCR反应体系时，应加入4种脱氧核糖核苷酸 溶液作为扩增原料，A错误；凝胶中的DNA分子通过染 色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，故B 正确；配制的酵母培养基先进行高压蒸汽灭菌处理，然 后再倒平板，C错误：烧红的接种环需在酒精灯火焰旁冷 却后才能蘸取菌液，否则会杀死菌种，D错误。 6.D由题可知，P1、P2为纯合子，F1为杂合子，且两对等 位基因的遗传符合自由组合定律，假设基因由上到下依 次为A、a、B、b,则P1基因型为AAbb,P2基因型为 aaBB,F1基因型为AaBb,据此分析选项。 ①基因型为AaBB,②基因型为Aabb,均为杂合子， F2中，③基因型为AABb,占比1/8，⑤基因型为AABB, 占比1/16，③占比大于⑤，A正确；据图分析，图中缺少 aaBb的基因型对应的电泳图像，其电泳结果为3条带， 分别为第2条带、第3条带和第4条带，B正确；由题可 知，③X⑦对应杂交类型为AABb×aabb,因此后代基因 型为AaBb、Aabb,对应②基因型为Aabb,⑧基因型为 AaBb,电泳结果相同，C正确；①基因型为AaBB,其自交 后代基因型及比例为AABB:AaBB:aaBB=1:2:1, ④的基因型为aaBB,因此①自交子代与④电泳结果相同 的占比1/4，D错误。 7,C构建基因表达载体是基因工程的关键步骤，选择好 工具是这一步的关键。选择酶的时候需要满足：①质粒 与目的基因形成的末端是可以配对的。需要注意不一 定用同一种酶，只要末端可以连接即可；②T4DNA连接 酶能连接两种末端，而E.coli DNA连接酶只能连接黏 性末端；③不能破坏质粒上所需要的结构，比如标记基 因、启动子等等。A.E.coli DNA连接酶不能连接平末 端，A错误；B.末端不相同，不能连接，B错误；C.用两种 酶切割，可以防止反向连接，是效率比较高的选择，C正 确：D.酶4会破坏抗生素抗性基因也就是破坏了标记基 因，不能使用，D错误。 8.解析：(1)恒温培养箱内的CO2用于维持培养液的pH, 若CO2不足，培养液pH会异常；乳腺癌细胞为癌细胞， 失去了接触抑制现象：胰蛋白酶可分解细胞间的蛋白 质，使贴壁细胞分散，处理时间过长会分解细胞膜上的 蛋白质，导致细胞损伤或死亡。 (2)构建重组质粒时，结合P基因转录方向与质粒酶切 位，点，上游、下游引物依次选择③和④：探究P基因的作 用时，对照组应将不含P基因的空质粒导入乳腺癌细 胞，排除质粒载体本身对实验的干扰。 (3)S基因可抑制肿瘤增殖，P蛋白能诱导S基因的启动 子甲基化，基因启动子甲基化会抑制基因的转录，因此P 基因抑制S基因的转录，解除S基因对肿瘤增殖的抑制 作用，进而促进肿瘤耐药。 答案：(1)pH;不会；胰蛋白酶会分解细胞膜上的蛋白质，处 理时间过长会导致细胞损伤或死亡 (2)③和④；将不含P基因的空质粒导入乳腺癌细胞（或 不导人质粒的乳腺癌细胞) (3)抑制：促进 9.解析：(1)PCR技术是一项根据DNA半保留复制的原 理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件， 对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。PCR 每次循环一般可以分为变性、复性和延伸三步。 (2)构建基因表达载体时，用两种限制酶切割，能使目的 基因两端、质粒两端产生不同的黏性末端，这样可以防 止目的基因自身环化，防止质粒自身环化，还能防止目 的基因与质粒反向连接。 (3)在基因工程中，对转基因生物的安全性要进行严格 控制，在UW4-2菌林构建中使用质粒不复制策略，此类 设计的主要目的是防止工程菌（或重组质粒）扩散到环 境中，造成基因污染。 (4)据图a可知，质粒上含有庆大霉素抗性基因，所以第 一次在培养基中添加庆大霉素，由于pEX质粒上含有庆 大霉素抗性基因，导入pEX质粒的UW4-1菌株能在含 庆大霉素的培养基上生长，即可筛选出UW4-1菌株；第 二次筛选要利用DNA同源区段可发生交换的原理，应 在培养基中添加蔗糖，原因是pEX质粒上带有蔗糖致死 基因，未发生第二次同源交换的菌株仍保留该基因，在 含蔗糖的培养基中会被杀死，发生第二次同源交换的菌 株会丢失蔗糖致死基因，能在含蔗糖的培养基上存活； 筛选后，培养基中仍同时存在两种菌株，第一种菌株是 UW4-2,另一种菌株的拟核DNA结构是②，图示中给出 的同源重组类型是切后端然后重组，另外一种类型应该 是切前端重组；可以通过设计特异性引物进行PCR扩增 相应序列并测序来鉴定。 答案：(1)延伸(2)防止目的基因自身环化、防止质粒 自身环化、防止目的基因与质粒反向连接 (3)防止工程菌（或重组质粒）扩散到环境中，造成基因 污染 (4)庆大霉素pEX质粒上含有庆大霉素抗性基因，导 入pEX质粒的UW4-1菌株能在含庆大霉素的培养基上 生长蔗糖②测序 10.解析：(1)固体培养基能实现单菌落分离，是微生物纯 化的关键，故黑曲霉菌种的分离纯化应选用固体培 养基。 (2)根据题图1所示，片段A和片段C的转录产物可以 进行碱基互补配对形成链内双链结构，最终造成CreA 22 mRNA降解，使其不能翻译出CreA蛋白。在引物上添 加限制酶识别序列时，应添加到引物的5′端。根据题 千信息，CreA基因D片段PCR扩增的部分产物酶切后 连接到载体中A所在的位置时，选用的限制酶为 KpnI和SpeI;另一部分PCR扩增的产物应反向构 建到载体中C的所在位置，这样两个片段的转录产物 才可以互补配对，形成RNA链内双链结构，所以限制酶 ①应该是SacI。 (3)基因表达载体包括启动子、终止子、复制原点、目的 基因和标记基因等。标记基因一般是抗生素抗性基 因，故进行筛选时需要在培养基中添加相应的抗生素， 利用选择培养基筛选出转基因成功的菌株。 (4)根据题图2，G1淀粉酶活力远远高于G淀粉酶活 力，但G1生物量和G生物量比较接近。 (5)传统工艺将淀粉变成葡萄糖需要一系列步骤，而基 因工程获得的菌株G1淀粉酶活性高，可以简化操作流 程，同时可以在较温和的条件下快速获得更多葡萄糖。 答案：(1)固体 (2)碱基互补配对5'SacI (3)标记选择 (4)G1淀粉酶活力远远高于G淀粉酶活力；G1生物量 与G生物量比较接近 (5)不需要复杂的工艺化处理，简化了步骤；作用条件 较温和且产量高 考点三基因工程（题组二） 1.AB某患病男孩其母亲没有患病，可知该病为伴X染 色体隐性遗传病，该病患者中男性显著多于女性，在男 性中发病率为1/3500，则该致病基因d频率为1/3500， 正常基因D基因频率为3499/3500，女性中携带者的占 比为2×1/3500×3499/3500，A错误；该男孩的母亲 为携带者，基因型为X”X,该男孩基因型为XY,该男 孩的染色体倒位，故用R1和R2不能扩增出产物来，母 亲有正常的H基因，有产物，故对母亲和患儿DNA进行 PCR检测的结果不同，B错误；该男孩的染色体倒位，故 与正常男性相比，患病男孩X染色体上的基因排列顺序 发生改变，C正确；利用S1和S2进行PCR检测，有产物 则含有正常D基因，若无产物，则含有致病基因，故可诊 断母亲再次孕育的胎儿是否患该病，D正确。 2.C使用氯化钙处理大肠杆菌，可使其处于感受态，提高 转化效率，即更多的大肠杆菌能吸收质粒，无论吸收的 是含目的基因的重组质粒（可能形成白色菌落）还是未 重组的质粒K(形成蓝色菌落)，都可增加筛选平板上白 色和蓝色菌落数，A正确；如果筛选平板中仅含卡那霉 素，能生长出的菌落都具有卡那霉素抗性，白色菌落可 能是导入了重组质粒（含目的基因），也可能是其他情况 导致B一半乳糖苷酶基因不能正常表达而呈现白色，所 以不可判定为含目的基因的菌株，B正确；筛选平板中长 出的白色菌落，可能是导入了重组质粒（含目的基因）， 但也可能是虽然导入了质粒但目的基因没有成功表达 目标蛋白，不能仅仅因为是白色菌落就判定为表达目标 蛋白的菌株，C错误；若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因 可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌，因 为自身环化的质粒K中B一半乳糖苷酶基因完整，能表 达活性B一半乳糖苷酶，分解X一gl形成蓝色菌落， D正确。 3.D制备DNA探针时需要模板和引物，所以加入的单链 DNA要做为模板和引物。①组将两段DNA移动，使其 碱基互补配对，得到5'一GCCGATCTTTATA一3,3 CACCGGCTAGAAA-5′，由于DNA只能由5'→3'延 长，所以上述片断是得不到扩增产物的。同理②也不 行；③反应管经多轮扩增后可得到3'一AGGGCTAG GCATA一5，两端带有A,能产生被荧光标记的DNA探