专题十三 考点二 细胞工程(题组二)-【创新教程】2022-2026五年高考生物真题分类特训试卷

考点二细胞工程（题组二） 一、选择题 1.(2026·安徽卷，14)动物体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生等领域有着广泛的应用前景。 下列叙述错误的是 ( A.若卵母细胞去核不完全，可能会导致重构胚细胞中染色体数目改变 B.胚胎移植前，需要对核移植获得的重构胚进行遗传筛查和性别鉴定 C.胚胎移植前，需要对受体进行处理，使其生理状态适合胚胎发育 D.克隆动物的核遗传物质与供体相同，但性状与供体不完全相同 2.(2026·黑吉辽蒙卷，13)为模拟胚胎发育过程中子宫的力学环 水凝胶基质， 境，科学家设计了水凝胶材料，小鼠囊胚在其内部生长，如下 水凝胶 (三维网状材料) 图。下列叙述正确的是 ) 培养基 A.囊胚置于水凝胶之前，已经历了桑葚胚阶段 斯 B.胚胎培养时，物质分子由培养基至胚胎单向转移 C.水凝胶基质硬度越大，越有利于胚胎生长 D.囊胚孵化后，与水凝胶接触的部位由滋养层变为透明带 3.(2026·陕晋青宁卷，11)将人类免疫球蛋白(Ig)基因导入小鼠胚胎干细胞后，经核移植技术获 得的转基因小鼠可用于制备单克隆抗体。下列叙述正确的是 () A.核移植受体卵母细胞培养成熟的标志是排出第二极体 留 B.人Ig基因在小鼠胚胎干细胞不表达是因为未接受抗原刺激 C.免疫的B淋巴细胞无需克隆化培养即可与小鼠骨髓瘤细胞融合 和 D.将选择培养基上存活的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体 4.(2026·广东卷，12)中华鲟和长江鲟均为国家重点保护动物，其性成熟时间分别约为20年和5 年。如图示我国科学家运用鱼类生殖干细胞移植技术成功繁殖中华鲟的过程，该技术显著缩 短了繁殖周期。下列分析错误的是 ( ) 生长 1① 长江鲟仔鱼 性成熟 性腺组织 (未移除性腺) 个体 製 1@ 8 阳 ④ 器 胚胎发育 生殖干细胞 成功获得中华鲟后代 A.①示从供体中华鲟分离性腺组织 B.②示用胰蛋白酶处理，获取生殖干细胞 C.③示干细胞移植过程，应在无菌环境中操作 D.④示体外受精，受精卵基因组均与中华鲟的相同 5.(2025·甘肃卷，16)肿瘤坏死因子α(TNF-a)是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究 者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程 如下图。下列叙述正确的是 () 注射了TNF-a的小鼠→B淋巴细胞 融合 ② 杂交瘤细胞 ① ④ 单克隆抗体大规模培养 目标杂交瘤细胞 149 A.①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞 B.②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞 C.③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞 D.④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测 6.(2025·湖北卷，6)利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等 优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研 究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细 胞一XF06。下列叙述错误的是 () A.XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率 B.细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致 C.可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒 D.采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染 7.(2025·河北卷，13)生物工程在社会生产中的应用日益广泛，下列相关技术和方法错误的是() A.利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持 B.在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞培养 C.利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 D.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备 8.(2025·陕晋青宁卷，7)科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了 羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是 () A.为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B.为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C.受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D.对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 9.(2025·江苏卷，7)梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决 此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是() A.采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 B.人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输人雌性生殖道 C.超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 D.母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 10.(2025·黑吉辽蒙卷，9)研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期， 且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是 A.体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B.移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态 C.胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化 D.为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 11.(不定项)(2025·黑吉辽蒙卷，19)下图是制备抗白细胞介素一6(IL一6)单克隆抗体的示意 图。下列叙述错误的是 () 骨髓瘤 细胞 ③ 多种 免按小鼠②某类深 ① 诱导融合细胞 IL-6 巴细胞 ④筛选 抗L一6 分泌特定抗体⑤杂交瘤 单克隆抗体 的杂交瘤细胞筛选细胞 A.步骤①给小鼠注射IL一6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B.步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C.步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D.步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 150 12.(2025·安徽卷，14)细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关 于动物细胞工程的叙述，正确的是 A.从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B.将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成PS细胞 C.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D.采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 13.(2024·湖北卷，5)波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。 生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是 () A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 14.(2024·湖北卷，11)植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植 物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误 的是 () 酶解(1.5小时) 植物甲 甲的 原生 叶片 国 质体 融合 ①混合酶液处理 ②的原 生质 ③杂种④愈伤⑤植物丙 细胞 组织 植物乙 乙的 体 原生 叶片 t年 酶解(2小时) 质体 A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 二、非选择题 15.(2026·山东卷，25)小鼠基因W编码的蛋白质可调节脂肪代谢。研究人员将基因W转入酵 母菌并使其稳定表达，实现了该蛋白的高效合成。该过程中用到末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT),该酶不需要模板，可在DNA的3'端随机添加4种脱氧核苷酸，若只提供1种脱氧核 苷酸，则连续添加多个该种脱氧核苷酸，称为同聚物加尾。相关信息如图所示。 染色体DNA的 部分结构 3'端突出的黏性末端 基因W 同聚物加尾过程 注：限制酶识别序列及切割位点 3 Sal I 3' Pst I 5'-CTGCAG-3 某种脱氧 Kpn I 5'-GGTACC-3 载体的 Pst I Kpn I Xho I Sal I 核苷酸 TdT 部分结构 Xho I 5'-CTCGAG-3' Sal I 5'-GTCGAC-3' NNN(n)3 3'NNN(n) NNN(n):n个某种脱氧核苷酸 (1)载体上RNA聚合酶识别和结合的部位是 ,载体上与其能自我复制相关的结 构是 (2)研究人员选取2种限制酶切开载体，再用TdT分别对基因W和切开的载体进行同聚物 加尾，然后将两者连接；若载体酶切后产生的黏性末端为5'端突出，则需先用DNA聚合酶补 平后再进行同聚物加尾。因后续研究还需要用这2种限制酶将基因W从重组载体中切下， 据图分析，应选取的2种限制酶为 151 (3)基因W和载体两者的同聚物尾配对后形成的重组载体存在部分单链区，为构建完整重组 载体需要的2种酶是 ,该过程中 (填“需要”或“不需要”) 添加引物，原因是 (4)为检测基因W是否在酵母菌中表达出相应蛋白，在分子水平上的检测方法是 16.(2023·湖北，22(1)(2)(3)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳 蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。 基因A 转基因 工程菌 蛋白A 免疫小鼠 免疫的 离体培养的小 脾细胞 鼠骨髓瘤细胞 诱导融合 单克隆抗体筛选 杂交瘤细胞筛选 回答下列问题： (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞） (填“需要”或“不需要”) 通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞 膜的作用是 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对 和 生长具有抑制作用。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是 17.(2023·广东，21(2)(3)(4)上世纪70~90年代珠海淇澳岛红树林植被退化，形成的裸滩被 外来入侵植物互花米草占据，天然红树林秋茄（乔木）-老鼠簕（灌木）群落仅存32hm。为保 护和恢复红树林植被，科技人员在互花米草侵占的滩涂上成功种植红树植物无瓣海桑，现已 营造以无瓣海桑为主的人工红树林600hm。各林龄群落的相关特征见下表。 群落植物树冠层林下互花林下无瓣海桑 林下秋茄 红树林群落（林龄） 高度种类 郁闭度米草密度更新幼苗密度 更新幼苗密度 (m) (种) (%) (株/m2)(株/100m2) (株/100m2) 无瓣海桑群落(3年) 3.2 3 70 30 0 0 无瓣海桑群落(8年) 11.0 80 15 10 0 无瓣海桑群落(16年) 12.5 2 90 0 0 0 秋茄-老鼠簕群落(>50年)5.7 90 0 0 19 回答下列问题： (2)无瓣海桑能起到快速实现红树林恢复和控制互花米草的双重效果，其使互花米草消退的 主要原因是 (3)无瓣海桑是引种自南亚地区的大乔木，生长速度快，5年能大量开花结果，现已适应华南 滨海湿地。有学者认为无瓣海桑有可能成为新的外来入侵植物。据表分析，提出你的观点和 理由 (4)淇澳岛红树林现为大面积人工种植的无瓣海桑纯林。为进一步提高该生态系统的稳定 性，根据生态工程自生原理并考虑不同植物的生态位差异，提出合理的无瓣海桑群落改造建 议 152A.有些产物不能或难以通过化学合成途径得到，故可 利用该技术获得某些无法通过化学合成途径得到的产 物，A正确；B.利用植物细胞培养技术在离体条件下对 单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细 胞的某些次生代谢物，故可通过该技术进行植物细胞 产物的工厂化生产，B错误；C.次生代谢产物不是植物 生长所必需的，其含量少，可以通过增加细胞的数量来 增加次生代谢产物的产量，C错误；D.细胞产物的工厂 化生产主要是利用促进细胞分裂的培养条件，提高了 多个细胞中次生代谢物的含量，不能提高单个细胞中 次生代谢物的含量，D错误。 15.C体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子 的采集和获能、受精。 (1)卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激 素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。 ②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞 或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 (2)精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、 手握法和电刺激法；②对精子进行获能处理：包括培养 法和化学诱导法。 (3)受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过 程。由题干信息可知，该过程通过体外受精获得胚胎， 再通过胚胎移植，使长角羚羊成功妊娠并产仔，因此需 要进行超数排卵、精子获能处理，并对获得的受精卵进 行胚胎培养；由于该过程为有性生殖，因此不需要涉及 细胞核移植，所以C正确、ABD错误。 16.B生态系统的组成成分有：生产者、消费者、分解者和 非生物的物质和能量。A.1周后开始投喂人工饵料， 虾池中有机碎屑含量增加，水体中N、P等无机盐增多， 水体富营养化严重，A错误；B.藻类作为生产者，在物 质循环中占主要地位，B正确；C.浮游动物摄食藻类， 同时浮游动物有摄食细菌和有机碎屑，属于消费者和 分解者，C错误；D.异养细菌依赖虾池生态系统中的沉 积物和有机碎屑提供营养，D错误。 17.解析：(2)①该实验中自变量是药物Z处理的细胞类型 和是否使用药物Z,因变量是细胞的增殖情况。所以可 将细胞培养瓶分为A、B、C、D四组，分别加入细胞培养 液；A、B组加入肝癌细胞悬液，C、D组加入肝细胞悬 液；A、C组不加药物Z,B、D组加药物Z;将上述细胞培 养瓶置于CO2培养箱，培养一段时间后，在显微镜下观 察并计数细胞数，记录并处理所得数据。②据题意可 知，药物Z对肝癌细胞增殖有抑制作用，但对肝细胞增 殖无抑制作用，所以CD组细胞正常增殖，而B组细胞 受到抑制，A组（肝癌细胞十无药培养液）细胞数量较 多，B组（肝癌细胞十含药培养液）细胞数量明显少于A 组，C组（肝细胞十无药培养液）和D组（肝细胞十含药 培养液)细胞数量相近且较多，大致呈现出B组柱形图 高度最低，A组较高，C、D组高度相当且高于B组低于 A组的情况： 细 本 细胞种类 22 答案：(2)①.A、B组加人肝癌细胞悬液，C、D组加入肝细 胞悬液i.A、C组不加药物Z,B、D组加药物ZV.将上 述细胞培养瓶置于CO2培养箱，培养一段时间后，在显微 镜下观察并计数细胞数，记录并处理所得数据 胞 ② A B D 细胞种类 18.解析：结合实验设计的题型考查植物组织培养、微生物 培养等技术。 (2)考查植物组培过程先是脱分化，后再分化。细胞全 能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机 体或分化成其他各种细胞的潜能。 (3)控制变量，因为甲组和乙组的区别是有无固氨菌， 所以要保证培养液中没有氮源，目的即结论，探究的是 接种到试管苗上的根瘤菌是否具有固氦能力，如果甲 长得好，说明接种到试管苗上的根瘤菌具有固氨能力。 (4)微生物肥料除了能够促进植物生长，增加作物产 量，起到肥料的作用之外，能够减少化肥的使用，改良 土壤，减少污染，保护环境。 答案：(2)脱分化再分化细胞经分裂和分化后，仍 具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能 (3)无氮源接种到试管苗上的根瘤菌具有固氮能力 (4)①促进植物生长，增加作物产量；②能够减少化肥 的使用，改良土壤，减少污染，保护生态环境 考点二细胞工程（题组二） 1.B若卵母细胞去核不完全，重构胚细胞中会含有卵母 细胞的核物质，导致染色体数目增加，A正确；在动物体 细胞核移植中，重构胚的核遗传物质来自供体细胞，因 此重构胚的性别是确定的，不需对重构胚进行性别鉴 定，B错误；胚胎移植前，需对受体进行同期发情处理，使 其生理状态适合胚胎发育，C正确；克隆动物的核遗传物 质与供体相同，但细胞质遗传物质来自卵母细胞，且性状 受环境影响，故性状与供体不完全相同，D正确。 2.A小鼠早期胚胎发育依次经历受精卵、桑葚胚、囊胚、 原肠胚阶段，因此囊胚置于水凝胶之前已经历了桑葚胚 阶段，A正确；胚胎培养时，物质分子是双向转移的：培 养基中的营养物质进入胚胎，胚胎代谢产生的废物排出 到培养基中，B错误；水凝胶模拟子宫的力学环境，只有 基质硬度与子宫正常力学环境相近时才有利于胚胎生 长，并非硬度越大越有利，C错误；囊胚孵化是指囊胚扩 大导致透明带破裂、胚胎从透明带中伸展出来的过程， 孵化后透明带消失，与水凝胶接触的部位是滋养层， D错误。 3.C核移植的受体卵母细胞需培养至减数第二次分裂中 期，第二极体是卵母细胞完成受精的标志之一，A错误； 人g基因在小鼠胚胎千细胞中不表达是基因选择性表 达的结果，胚胎干细胞为未分化细胞，缺乏表达g基因 的相关调控条件，与是否接受抗原刺激无关，B错误；单 克隆抗体制备流程中，获取免疫后的B淋巴细胞后，直 接即可与骨髓瘤细胞融合；克隆化培养是融合筛选得到 杂交瘤细胞之后的步骤，且B淋巴细胞是高度分化的细 胞，无法在融合前进行克隆化培养，因此免疫B淋巴细 胞无需克隆化培养即可融合，C正确；选择培养基上存活 的仅为杂交瘤细胞，还未经过抗体阳性检测，不一定能 产生所需的特异性抗体，需筛选出可产生目标抗体的杂 交瘤细胞后，才能注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体， D错误。 4.D本技术的目的是繁殖中华鲟，生殖干细胞存在于性 腺组织中，因此①是从供体中华鲟分离性腺组织，A正 确；动物组织细胞间通过蛋白质类物质连接，用胰蛋白 酶处理可分解胞间连接物质，将性腺组织分散为单个生 殖干细胞，B正确；细胞移植操作需要在无菌环境中进 行，避免杂菌污染导致移植失败，因此③干细胞移植过 程应保持无菌环境，C正确；④表示体外受精作用，受精 卵基因组来自中华鲟和长江鲟，D错误。 5.B骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；B细胞和骨 髓瘤细胞的融合是随机的，可能有些细胞不发生融合， 有些两两融合，有些多个融合，有同种核融合细胞，也有 异种核融合细胞，B正确；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融 合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大 量的，C错误：进行克隆化培养，即用培养基培养和注入 小鼠腹腔中培养，抗体检测不是在小鼠腹腔内进行， D错误。 6.B悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由 增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，提升生产效 率，A正确；XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得 的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于 扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式)，B错误：流感病毒 释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病 毒（上清液），C正确；无成瘤性细胞不含癌基因，可避免 疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性， D正确。 7.B植物组织培养技术可以快速繁殖植物，并且由于是 无性繁殖，能保持母本的优良性状，兰花可以利用组织 培养技术实现快速繁殖和优良性状的保持，A正确；胚 胎千细胞培养时，需要一定浓度的CO2,CO2的作用是 维持培养液的pH,所以不能在没有CO2的环境中进行 胚胎干细胞培养，B错误；诱导动物细胞融合的方法有物 理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）和生物法（如灭活 病毒)，可以利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细 胞融合，C正确；在胚胎工程中，对供体母牛注射促性腺 激素，能使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞用于 胚胎制备，D正确。 8.C促性腺激素可促进供体超数排卵，从而获得更多卵 子，A正确；为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致， 受体与供体需同期发情处理以保证胚胎移植后生理环 境同步，B正确；桑葚胚阶段的细胞通过卵裂增殖，细胞 数量增加，但胚胎总体积不变，或略有减小，C错误；本实 验的自变量是是否对绵羊受精卵进行基因编辑等，其余 为无关变量，对照组与实验组的无关变量（如年龄、性 别)需保持一致，以排除干扰，D正确。 9.C采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精 子会影响计数准确性，且血细胞计数板通常用于已固定 的细胞，A错误；人工授精时，精子在雌性生殖道内自然 获能，无需提前体外处理，B错误；超数排卵通过注射促 性腺激素（如FSH和LH)促进卵泡发育和排卵，C正 确；胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐 受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，D错误。 10.C由于MⅡ期卵母细胞的细胞更大，便于进行技术操 作，细胞质中含有激发细胞核全能性的物质，因此体细 胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A正 确；移植前胚胎发育率低，细胞核来自于已分化的体细 胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的体细胞核 22 不能完全恢复分化前的功能状态，B正确；胚胎移植到 代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能成功在代 孕母鼠子宫内着床，胚胎从透明带中出来称为孵化， C错误；胚胎细胞核全能性高于体细胞，因此为提高胚 胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植， D正确。 11.ABD步骤①给小鼠注射IL一6后，应从小鼠的脾中 获取B淋巴细胞，A错误；步骤②需要在组织中加入胰 蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬 液，B错误；步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入 灭活病毒或PEG诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜 的流动性，C正确；步骤④是在选择培养基上筛选得到 的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产 生所需抗体，步骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选 出了杂交瘤细胞，D错误。 12.B胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A错 误；将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、 Sox2、KIf4和c一Myc)导入已分化的T细胞，可将其诱 导形成PS细胞，B正确：融合细胞有具有同种核的融 合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体 的杂交瘤细胞，C错误；囊胚细胞已开始分化，D错误。 13.D选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体，进 行超数排卵处理，A正确；胚胎移植前，采集部分滋养 层细胞进行遗传学检测，B正确；作为受体的杜泊母绵 羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即可，但山羊 和绵羊是不同的物种，具有生殖隔离，不能将山羊的胚 胎移植到绵羊子宫发育，即普通品质的健康杜泊母绵 羊不适合作为受体，C正确；生产中需选择品质良好的 波尔公山羊提供精子，D错误。 14.B酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处 理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异， A正确；过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生 质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，不能 用于植物，B错误；过程④脱分化和⑤再分化的培养基 中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中 比例不同，C正确；植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂 交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分 析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 15.解析：(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能 够启动下游目的基因的转录过程，是目的基因表达的 必需元件。复制原点位于载体，可以保证载体在受体 细胞中能自我复制。 (2)要保证重组载体中基因W可以被完整切下，需要选 择两种限制酶，使得它们的识别序列在加尾后仍能被 保留。由图可知，基因W和载体上都有SalI的识别 序列和切割位点，如果选用它会破坏W基因的结构，使 W基因失活，因此不能选用。若选用PstI和KpnI, 酶切后产生的黏性末端为3'端突出，若要重新从重组 载体上切下，PstI切割载体后要加同聚物G尾，KpnI 切割载体后要加同聚物C尾，这样在重组载体中才能 出现它们完整的识别序列而再次进行切割。若选用 XhoI,酶切后产生的黏性末端为5'端突出，可以先用 DNA聚合酶补平，若要在重组载体中才能出现它们完 整的识别序列而再次进行切割，则要加同聚物G尾。 为了将质粒和基因W连接到一起，同聚物加尾间要能 发生碱基互补配对，故应选择KpnI和XhoI。 (3)由于用Xh0I进行切割会产生黏性末端为5'端突 出，形成单链区，需要用DNA聚合酶进行补平，此外， W基因和载体形成重组载体时，中间有缺口，补全缺口 后二者才能连接起来形成完整的重组载体，因此构建 完整重组载体需要的2种酶：DNA聚合酶（补全单链 区)和DNA连接酶（连接缺口）。该过程不需要添加引 物，原因是：同聚物尾配对后存在可直接延伸的3'端 DNA聚合酶可直接从该末端延伸合成互补链，无需引 物起始。 (4)检测基因W是否表达出相应蛋白，由于基因表达的 产物是蛋白质，分子水平检测蛋白质方法是抗原一抗 体杂交。 答案：(1)启动子复制原点 (2)KpnI、XhoI (3)DNA聚合酶、DNA连接酶不需要同聚物尾配 对后存在可直接延伸的3'端，DNA聚合酶可直接从该 末端延伸合成互补链，无需引物起始 (4)抗原一抗体杂交 16.解析：单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使 之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B 淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培 养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生 特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基 培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹 水中获取单克隆抗体。 (1)一般认为，已免疫的脾细胞（含浆细胞）中已含足够 数量的能产生特异性抗体的效应B细胞，不需要通过 原代培养扩大细胞数量。 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，用特定的选择培养基进 行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具 有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才 能生长。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行 杂交，是运用了抗原一抗体杂交技术，抗体检测呈阳性 的细胞，即为所需的杂交瘤细胞。 答案：(1)不需要使细胞接触处的磷脂分子重新排 布，细胞膜打开，细胞发生融合 (2)未融合的亲本细胞融合的具有同种核的细胞 (3)通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交 瘤细胞 17.解析：(2)无瓣海桑是速生乔木，种植后由于其生长速 度较快，在与互花米草在阳光等的竞争中占据优势，能 有效抑制互花米草的蔓延。 (3)根据表格数据可知，随着时间的推移，无瓣海桑群 落中植物种类逐渐减少，林下没有无瓣海桑和秋茄更 新幼苗，则无瓣海桑的种群数量不再增加，可能会被本 地物种所替代，所以不会引起新的入侵植物。 (4)通过适当控制引进树种规模，扩大本土树种的种 植，增加物种，使营养结构变得复杂，可提高生态系统 的稳定性，还能防止新的物种的入侵。 答案：(2)无瓣海桑生长快，比互花米草高，在竞争中占 优势 (3)随着时间的推移，无瓣海桑群落中植物种类逐渐减 少，林下没有无瓣海桑和秋茄更新幼苗，可能会被本地 物种所替代，所以不会引起新的入侵植物 (4)适当控制引进树种规模，扩大本土树种的种植，增 加物种，提高生态系统的稳定性 考点三基因工程（题组一）》 1.B受精卵具有发育的全能性，选用受精卵进行基因敲 除，突变的基因可随细胞分裂传递给子代个体，A正确； F。个体基因型为RR,杂交培育时，F的基因型为RR、 RR,无法获得纯合突变体(RR),最早需在F2中获 得，B错误；R基因编码序列缺失4个碱基，会导致移码 突变，使编码的氨基酸序列改变，纯合突变体可用于研 究R基因的功能，C正确；突变体体型变小、体色变浅， 说明R基因的功能影响多个性状，体现了一因多效， D正确。 22 2.B基因工程的核心是构建基因表达载体，不同来源的 启动子和基因编码序列可以重新组合，由转基因鱼生长 速率加快可知，转入的重组生长激素基因成功表达，A 正确。启动子是驱动基因转录的位点，不同转基因鱼中 启动子活性不一定相同，因此重组生长激素基因表达水 平不一定相同，B错误。若外源基因游离在细胞质中，细 胞分裂时容易丢失；只有外源基因整合到染色体DNA 上后，才能够随染色体复制和分配，稳定遗传给子代， C正确。启动子是调控基因转录的关键DNA片段，通 过调控启动子活性改变生长激素基因表达水平，检测转 基因鱼的生长速率是否发生相应变化，可以验证两者的 关系，D正确。 3.D蛋白质工程从预期蛋白质功能出发，经结构设计、氨 基酸序列推导最终改造对应基因，再通过基因表达获得 改造蛋白，整个过程遵循中心法则即遗传信息传递的一 般规律，A正确；酶的专一性指酶只能催化一种或一类 化学反应，胰蛋白酶仅能识别特定序列的肽键，改造后 的甲无其可作用的位点因此不能被水解，体现了酶的专 一性，B正确；改造后甲仍保持抗体活性，第96位精氨酸 未被替换，推测该位点可能与抗体的功能密切相关，替 换后可能导致抗体活性丧失，C正确；密码子简并性是指 同一种氨基酸可对应多种密码子，但本次改造中第27 位、97位的氨基酸种类发生了改变，不同氨基酸对应的 密码子存在差异，因此改造后编码甲的基因序列一定发 生改变，D错误。 4.BD对比A基因和a基因的序列，A基因中“AAGCTT”变 为a基因中“AAGCTG”,是碱基替换(T→G),并非碱基增 添，A错误；HindⅢ切割产生黏性末端，AluI切割后产 生的是平末端，二者末端类型不相同，B正确；观察图中 a基因，HindⅢ有2个切割位点，切割后会产生1个片 段，AluI有3个切割位，点，切割后会产生2个片段，一 个片段长度是200bp左右，另一个是400bp左右，用两 种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小不一致， C错误；因为正常基因A和致病基因a的HindⅢ切割位 ,点不同，所以产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限 制酶开展酶切鉴定，D正确。 5.B配制PCR反应体系时，应加入4种脱氧核糖核苷酸 溶液作为扩增原料，A错误；凝胶中的DNA分子通过染 色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，故B 正确；配制的酵母培养基先进行高压蒸汽灭菌处理，然 后再倒平板，C错误：烧红的接种环需在酒精灯火焰旁冷 却后才能蘸取菌液，否则会杀死菌种，D错误。 6.D由题可知，P1、P2为纯合子，F1为杂合子，且两对等 位基因的遗传符合自由组合定律，假设基因由上到下依 次为A、a、B、b,则P1基因型为AAbb,P2基因型为 aaBB,F1基因型为AaBb,据此分析选项。 ①基因型为AaBB,②基因型为Aabb,均为杂合子， F2中，③基因型为AABb,占比1/8，⑤基因型为AABB, 占比1/16，③占比大于⑤，A正确；据图分析，图中缺少 aaBb的基因型对应的电泳图像，其电泳结果为3条带， 分别为第2条带、第3条带和第4条带，B正确；由题可 知，③X⑦对应杂交类型为AABb×aabb,因此后代基因 型为AaBb、Aabb,对应②基因型为Aabb,⑧基因型为 AaBb,电泳结果相同，C正确；①基因型为AaBB,其自交 后代基因型及比例为AABB:AaBB:aaBB=1:2:1, ④的基因型为aaBB,因此①自交子代与④电泳结果相同 的占比1/4，D错误。 7,C构建基因表达载体是基因工程的关键步骤，选择好 工具是这一步的关键。选择酶的时候需要满足：①质粒 与目的基因形成的末端是可以配对的。需要注意不一 定用同一种酶，只要末端可以连接即可；②T4DNA连接 酶能连接两种末端，而E.coli DNA连接酶只能连接黏