四川省南充市西充中学2025-2026学年高二下学期人教版生物周练

**基本信息** 本高二生物周练试题以"基础巩固-能力提升-综合探究"为梯度，通过20道选择+3道综合题，覆盖细胞结构、代谢调节、基因工程等核心模块，融合生命观念与科学思维，适配周测学情诊断需求。 **分层设计** |层次|知识覆盖|设计特色| |----|----------|----------| |基础层|细胞结构、物质运输、酶与ATP|以教材基础实验为情境，如显微镜操作（题1）、质壁分离（题5）| |能力层|基因工程、细胞工程、PCR技术|结合前沿科研案例，如glycoRNA功能分析（题3）、CRT蛋白机制（题4）| |综合层|实验设计与数据分析|设置递进式探究任务，如微生物筛选（题21）、转基因检测（题23）|

高二生物周练试题 一、选择题 1. 青龙湖湿地公园物种丰富度高，水体中常见衣藻、变形虫、蓝细菌、草履虫和酵母菌等微生物，采集湿地水样进行显微观察，结果如下图，结合生物学知识判断以下说法正确的是（ ） A. 视野1中的生物均以DNA为主要的遗传物质 B. 视野2中的生物均有细胞壁防止细胞在水中涨破 C. 将视野1转为视野2需向右移动装片并调大光圈 D. 若视野出现半亮半暗可能是物镜未对准通光孔 2. 《中国居民膳食指南》建议适量摄入全谷物（含纤维素、淀粉）、深海鱼（富含不饱和脂肪酸）、浆果（含果糖、多酚）和根茎蔬菜（含维生素C，具有抗氧化性）。下列叙述正确的是（ ） A. 浆果中的果糖可水解，无法直接被细胞摄取利用 B. 深海鱼的不饱和脂肪酸可参与合成细胞膜成分，减弱膜的流动性 C. 维生素C抑制自由基的产生，能保护生物膜结构，延缓细胞衰老 D. 多糖均由葡萄糖聚合而成，因化学键不同而形成不同的结构 3. 细胞膜上的glycoRNA（糖基化RNA）是一种新发现的生物分子，它由一小段RNA为支架，上面连着聚糖（多糖类分子）。研究发现，glycoRNA主要富集在活细胞的细胞膜外部，推测可能具有与细胞膜上的糖蛋白和糖脂类似的功能。下列相关叙述错误的是（ ） A. glycoRNA主要在细胞膜的外侧，体现了膜结构的不对称性 B. 推测发生癌变的细胞，表面glycoRNA会减少 C. 细胞膜上glycoRNA可能与细胞间的信息传递有关 D. 细胞膜功能的复杂性主要与glycoRNA的种类和数量有关 4. 恶性肿瘤细胞增殖失控，内部常处于缺氧、营养匮乏及低pH的微环境中，导致错误折叠的蛋白质在内质网中大量积累，进而诱发内质网应激（ERS）。ERS可诱导细胞合成CRT蛋白，相关作用机制如下图所示，下列说法正确的是（　） A. 只有正确折叠的蛋白质才能进入囊泡，运往高尔基体 B. 内质网加工蛋白质的速率过快是导致蛋白质错误折叠的直接原因 C. CRT蛋白可能提高了高尔基体对蛋白质的加工与修饰能力 D. 科学家研究分泌蛋白的合成与运输过程的方法是差速离心法 5. 果肉细胞中，液泡膜上的质子泵消耗ATP将H+运入液泡，转运蛋白TST可利用H+浓度梯度在运输H+的同时将蔗糖运入液泡储存，增加果实甜度。下列说法错误的是（　　） A. 质子泵是一种载体蛋白，也是一种能催化ATP水解的酶 B. 质子泵在运输H+的过程中空间结构会发生变化 C. TST运输蔗糖的方向和其运输H+的方向相同 D. H+与蔗糖经TST跨膜运输时都需要与其结合 6. 酶与ATP是细胞代谢有序进行的物质基础。下列叙述正确的是（　　） A. 酶的合成都需要核糖体、内质网和高尔基体共同参与 B. ATP分子中含有三个特殊的化学键，是细胞的直接能源物质 C. 酶通过降低化学反应的活化能来提高化学反应速率 D. 细胞内ATP含量丰富，可满足剧烈运动时的能量需求 7. 研究发现，低浓度NO可促进线粒体的生物合成，提高线粒体数量与呼吸效率；而高浓度NO能与O2竞争性结合细胞色素C氧化酶，同时也会抑制部分与葡萄糖分解相关酶的活性。下列相关叙述正确的是（ ） A. 细胞色素C氧化酶分布在线粒体基质 B. 葡萄糖分解过程中能产生CO2和大量[H] C. 低浓度NO可通过增加线粒体数量，提高单位时间内ATP的生成量 D. 高浓度NO处理后，细胞可通过增强无氧呼吸维持ATP供应稳定 8. 水稻是重要的粮食作物，培育转基因水稻，对创制高产优质新品种意义重大。为检测转基因水稻中的抗除草剂基因d是否会扩散到其他物种导致基因污染，令该转基因水稻与杂草A、B一起种植。取各种植物细胞的DNA经酶切、PCR后进行电泳，结果如图所示，下列有关说法错误的是（　　） 注：A1、B1为对应植株的子一代 A. 由图可知，转基因水稻中的抗除草剂基因d通过基因交流转移到了杂草B1中 B. 抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，从而产生“超级杂草” C. 电泳时，点样孔位于乙侧，电泳条带迁移的速度与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象有关 D. 为避免培育过程中的基因污染，可将外源a-淀粉酶基因与目的基因一起转入水稻中 9. 某生物兴趣小组设计了一个利用作物秸秆生产乙醇的实验。其主要步骤是：①将作物秸秆粉碎后堆放在底部有小孔的托盘中；②喷水浸润后接种菌T，培养一段时间；③用清水淋洗秸秆堆，此时菌T不会流失；④在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。如图所示。下列叙述正确的（ ） A. 菌T能够大量分解作物秸秆是因为其能产生蛋白酶和脂肪酶 B. 发酵液中能使酸性重铬酸钾溶液变成灰绿色的物质不一定是乙醇 C. 淋洗液中营养物质充足，灭菌后可直接用于乙醇发酵 D. 发酵过程中需一直保持瓶盖打开，以排除不断产生的CO2 10. 饮用被细菌污染的水后，细菌在消化道内会繁殖并产生毒素，引起急性肠胃炎。某同学利用图1所示方法，检测饮用水的细菌含量，图2为不同稀释度下得到的平板。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 配制图1所示固体培养基时，需要先调整到适宜的pH，再灭菌 B. 图1中①～③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数即为样品中细菌数 C. 图2是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少 D. 图2所示的平板中，a和c的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数 11. 生物碱为铁皮石斛的次生代谢物。下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是 A. 生物碱是铁皮石斛生长非必需的物质，所有细胞都可以合成 B. 图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为再分化生产生物碱 C. 培养高产细胞系应选择生物碱产量与细胞数量比值大的PLBs D. 该过程运用了植物组织培养技术，原理是植物细胞的全能性 12. 单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基蝶呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞融合后，再加入含氨基蝶呤的培养液。将这些混合物分装于如图所示的细胞培养板小孔中培养。下列说法错误的是（　　） A. 通过PEG融合法可以诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞相互识别而融合 B. 培养液中加入氨基蝶呤的目的是筛选杂交瘤细胞 C. 小孔中的细胞经过增殖后不一定都能产生所需特异性抗体 D. 动物细胞培养是单克隆抗体制备过程所依赖的基础技术 13. 为探究编码酪氨酸酶的T基因对狗毛色的影响，有人通过如图所示过程获得了两只小狗。下列叙述正确的是（ ） A. 采集卵子后立即与获能的精子受精，可有效提高受精率 B. 将胚胎1培养至桑葚胚期，取成纤维细胞完成后续实验 C. 用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，可获得胚胎2和胚胎3 D. 利用现代生物技术获得的两只小狗毛色和性别可能都不一样 14. 针对羊肉掺假常见的三种肉源，研究人员设计了物种特异性的线粒体DNA引物，并构建了基于固定碱基序列公共引物的四重肉源PCR鉴定体系，原理如图所示。该技术能够在一次反应中同步扩增多个特定DNA片段，从而显著提升了检测效率。下列叙述正确的（） A. 该四重肉源PCR鉴定体系中需加入解旋酶和耐高温的DNA聚合酶 B. 引入公共引物可使引物浓度减小，进而降低引物之间相互影响的概率 C. 根据图中引物长度的分析，后25个循环的复性温度应高于前10个循环 D. 若某待测样本的检测结果中只出现羊肉条带，说明该样本一定未掺假 15. 《新时代的中国国家安全》白皮书于2025年5月12日发布，白皮书指出全球安全倡议既是人类命运共同体的“安全篇”，也是总体国家安全观的“世界篇”。下列做法不符合国家安全要求的是（　　） A. 不发展、不生产、不储存生物武器 B. 加强转基因育种研究改良农作物品质 C. 为防止物种入侵禁止进口动植物活体 D. 推进山水林田湖草沙一体化保护和系统治理 16. 接种疫苗是预防传染病的重要措施。下图为一种以人复制缺陷腺病毒（缺失El基因）为载体的某埃博拉病毒病疫苗研制流程示意图。相关叙述错误的是（ ） A. 构建含GP基因的质粒时，需要使用限制酶和DNA连接酶 B. 在重组腺病毒中，GP基因上游必须有启动子以驱动其复制和表达 C. 疫苗在人体内发挥作用的过程中，腺病毒起载体作用 D. 疫苗中的重组腺病毒在人体内不能复制，对接种者比较安全 17. 牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的（ ） A. H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B. 应选用原肠胚做雌雄鉴别 C. 鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D. 用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体 18.. 为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是 A. 过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中 B. 过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化 C. 过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生 D. 原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性 19.. 下列有关下图所示的黏性末端的说法,错误的是（　　） A. 甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的 B. 甲、乙具有相同的黏性末端,可形成重组DNA分子,但甲与丙的黏性末端不互补 C. DNA连接酶的作用位点是b处 D. 切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端互补结合形成的核苷酸序列 20.. 下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是（　　） A. 用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体 B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体 C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体 D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体 二、综合题 21. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。 回答下列问题： （1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。 （2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。 （3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。 （4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。 （5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。 22. 多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的细菌，进行下图所示的实验，其中培养基乙中的PAHs被降解后会形成透明圈。请回答： （1）培养基甲的碳源应为___________________，从功能角度划分，培养基甲属于_________________培养基。 （2）制备培养基乙时，采用的灭菌方法为_____________________；培养接种的培养基乙时，需将一个未接种的同批次培养基乙一起放入恒温箱中培养，其目的是________________________________________。 （3）科研人员在过程④中挑选出了3株能降解PAHs的菌种P1、P2和P3，应选______________________（填“P1”、“P2”或“P3”）进行扩大培养，理由是_________________________________________ _ 。 （4）在5个培养基乙中各接种稀释倍数为的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液中的细菌数为_________________个，该结果往往比原菌液的实际活菌数低，原因是_______________________________________________________________________。 23. 猕猴桃成熟过程中，ACC氧化酶（ACO）会催化乙烯前体物质（ACC）转化成乙烯，大量的乙烯会加速果实软化和腐烂，缩短储藏期。科学家通过基因工程将ACO基因反向连接在启动子后，筛选转反义ACO基因的猕猴桃，达到延长储藏期的效果。操作过程如图。回答下列问题： 注：LB为T-DNA的左边界；RB为T-DNA的右边界；Hyg：潮霉素抗性基因；Kanr：卡那霉素抗性基因 （1）启动子的基本组成单位是________________________，为保证ACO基因能反向连接在重组质粒的启动子后，设计引物时需在ACO基因的上游引物和下游引物分别引入____________和____________限制酶切位点。 （2）从新鲜的猕猴桃叶片上取下若干圆形小片与农杆菌共同培养，Ti质粒上的____________区段可转移到叶片细胞的染色体中；随后，将圆形小片进行组织培养，一段时间后，在培养基中加入____________（填抗生素），可筛选出含目的基因的愈伤组织。 （3）为检测目的基因是否导入受体细胞，____________（填“能”或“不能”）用标记的ACO基因的单链作为探针进行检测，原因是________________________________________________________________。 生物周练答案 1. 【答案】D【详解】A、所有细胞结构的生物遗传物质就是DNA，不存在“主要”的说法，“DNA是主要遗传物质”是针对整个生物界的结论，A错误；B、视野2中的生物包含草履虫、变形虫等原生动物，这类生物没有细胞壁，依靠伸缩泡调节渗透压避免吸水涨破，B错误；C、显微镜物像为倒像，物像偏向哪一侧就需要向哪一侧移动装片，视野2的观察目标位于视野1的左侧，因此需要向左移动装片才能将目标移至视野中央，C错误；D、若物镜未完全对准通光孔，会遮挡部分光路，可能出现视野半亮半暗的情况，D正确。 2. 【答案】C】A、果糖属于单糖，单糖不能发生水解反应，可直接被细胞摄取利用，A错误；B、细胞膜的磷脂分子尾部由脂肪酸构成，不饱和脂肪酸会增大细胞膜的流动性，而非减弱，B错误；C、维生素C具有抗氧化性，可抑制自由基的产生，避免自由基攻击生物膜的组成成分，因此能保护生物膜结构，延缓细胞衰老，C正确；D、多糖并非都由葡萄糖聚合而成，例如几丁质不是由葡萄糖聚合而成，D错误。 3. 【答案】D【详解】A、细胞膜的组分在膜两侧分布不均匀，糖被（糖蛋白、糖脂等）仅分布在细胞膜外侧，glycoRNA主要分布在细胞膜外侧，可体现细胞膜结构的不对称性，A正确；B、由题可知glycoRNA功能与糖蛋白、糖脂类似，而癌细胞细胞膜表面的糖蛋白等物质减少，因此可推测癌变细胞表面glycoRNA会减少，B正确；C、细胞膜上的糖蛋白具有细胞识别、参与细胞间信息传递的功能，glycoRNA功能与糖蛋白类似，因此其可能参与细胞间的信息传递，C正确；D、细胞膜功能的复杂性主要与细胞膜上蛋白质的种类和数量有关，而非glycoRNA，D错误。 4.【答案】A【详解】A、结合图示可知，错误折叠的蛋白质会被滞留在内质网中修复，只有正确折叠的蛋白质才能进入囊泡，运往高尔基体进行下一步加工，A正确； B、题干明确说明恶性肿瘤细胞内缺氧、营养匮乏及低pH的微环境是导致蛋白质错误折叠积累的原因，并非内质网加工蛋白质速率过快，B错误； C、由图可知CRT蛋白的作用是修复内质网中错误折叠的蛋白质，恢复内质网功能，其作用场所是内质网，不会提高高尔基体的加工与修饰能力，C错误； D、研究分泌蛋白的合成与运输过程使用的方法是同位素标记法（同位素示踪法），差速离心法是分离不同细胞器的常用方法，D错误。 5. 【答案】C【详解】A、质子泵可以转运H+，属于载体蛋白，同时其运输H+时消耗ATP，可催化ATP水解，因此也是ATP水解酶，A正确；B、载体蛋白运输对应物质的过程中会发生空间结构的改变，质子泵作为载体蛋白，运输H+时空间结构会发生变化，B正确； C、质子泵消耗ATP将H+运入液泡，说明液泡内H+浓度高于细胞质基质，H+顺浓度梯度运输的方向是从液泡到细胞质基质；而TST将蔗糖运入液泡，因此二者运输方向相反，C错误；D、TST是协同转运的载体蛋白，运输H+和蔗糖时都需要与两种物质结合，通过构象改变完成运输过程，D正确。 6. 【答案】C【详解】A、本质为RNA的酶不在核糖体合成，DNA聚合酶等一些胞内酶也无需内质网、高尔基体加工，A错误；B、ATP分子中含有2个特殊的化学键，B错误； C、酶的作用机理是降低化学反应的活化能，进而提高化学反应速率，C正确；D、细胞内ATP含量很少，依靠ATP和ADP的快速转化持续供能，D错误。 7. C【详】A、细胞色素C氧化酶参与有氧呼吸第三阶段的反应，有氧呼吸第三阶段的场所为线粒体内膜，因此该酶分布在线粒体内膜，A错误；B、葡萄糖在细胞呼吸第一阶段分解仅产生丙酮酸和少量[H]，CO2和大量[H]是有氧呼吸第二阶段丙酮酸与水反应的产物，不属于葡萄糖直接分解的产物，B错误；C、线粒体是细胞有氧呼吸产生ATP的主要场所，题意显示，低浓度NO可促进线粒体的生物合成，提高线粒体数量与呼吸效率，因此可提高单位时间内ATP的生成量，C正确；D、高浓度NO能与O2竞争性结合细胞色素C氧化酶，同时也会抑制部分与葡萄糖分解相关酶的活性，而葡萄糖分解是有氧呼吸和无氧呼吸共有的第一阶段，该阶段受抑制后，无氧呼吸也无法正常进行，不能维持ATP供应稳定，D错。 8. 【答案】C【详解】A、结合图示可知，杂草A和B中不含有基因d，而B1细胞中出现基因d，所以片段A通过基因交流转移到了杂草B1中，A正确；B、抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，使杂草成为用除草剂除不掉的“超级杂草”，B正确；C、小型的DNA移动速度要比大型DNA快，在电泳图上，小型的DNA距离电泳点样孔最远，因此点样孔位于甲侧，电泳条带迁移的速度与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象有关，C错误； D、将α-淀粉酶基因与抗除草剂基因导入细胞核的同一DNA分子后，含有抗除草剂基因的花粉会同时含有α-淀粉酶基因，该类型的花粉会失去活性，从而避免基因污染，D正确。 9. 【答案】B【详解】A、作物秸秆的主要成分是纤维素，几乎不含蛋白质和脂肪，菌T可分解秸秆是因为其能产生纤维素酶等分解纤维素的酶，而非蛋白酶和脂肪酶，A错误；B、酸性重铬酸钾具有强氧化性，可与多种还原性物质反应变为灰绿色，发酵液中可能存在其他还原性代谢产物，因此能使酸性重铬酸钾变灰绿色的物质不一定是乙醇，B正确；C、灭菌后的淋洗液温度较高，若直接接种酵母菌会导致酵母菌被高温杀死，需要冷却后才能用于乙醇发酵，C错误；D、乙醇发酵是酵母菌的无氧呼吸过程，需要保持无氧环境，一直打开瓶盖会使氧气进入，抑制酵母菌无氧呼吸，还会引入杂菌污染，只需密封后定期排出CO2即可，D错误。 10. 【答案】B】A、配制图1所示固体培养基时，需要先调整到适宜的pH，再分装、灭菌，A正确；B、图1中①～③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数再乘以10（各接种0.1mL），即为样品中细菌数，B错误；C、图2是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，C正确；D、为了保证结果准确，在每个稀释浓度内，至少要涂布3个平板，而且选择菌落数在30～300的平板进行记数。图2所示的平板中，a中菌落数太多，c中菌落数太少，a和c的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数，D正确。 11. 【答案】C【详解】A、生物碱是铁皮石斛的次生代谢物，不是细胞进行正常生命活动必需的物质，但并非所有细胞都能合成生物碱，A错误；B、过程①为脱分化形成类似愈伤组织的PLBs，过程②是筛选并培养得到高产细胞系，没有发生再分化（再分化是愈伤组织分化形成根、芽等器官的过程），B错误；C、生物碱产量与细胞数量的比值越大，说明单位细胞的生物碱产量越高，更适合用于培养高产细胞系，C正确；D、该过程运用了植物组织培养技术，但最终没有获得完整植株，没有体现植物细胞的全能性，D错误。 12. 【答案】A【详解】A、PEG（聚乙二醇）是化学诱导融合剂，作用原理是改变细胞膜的流动性以促进细胞融合，不具有诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞相互识别的功能，A错误；B、氨基蝶呤可阻断骨髓瘤细胞的核酸合成途径，未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞均无法存活，未融合的B淋巴细胞无无限增殖能力也无法存活，只有同时具备B淋巴细胞核酸合成旁路途径和骨髓瘤细胞无限增殖特点的杂交瘤细胞可存活，因此加入氨基蝶呤的目的是筛选杂交瘤细胞，B正确；C、注射抗原后小鼠体内产生的B淋巴细胞存在多种类，融合得到的杂交瘤细胞不一定都能分泌针对目标抗原的特异性抗体，后续还需要进行抗体阳性检测，因此小孔中增殖的细胞不一定都能产生所需特异性抗体，C正确；D、单克隆抗体制备属于动物细胞工程的实际运用，使用了动物细胞融合和动物细胞培养技术，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础技术，D正确。 13. 【答案】C【详解】A、采集的卵子需要在体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ 中期）才具备受精能力，不能采集后立即和获能精子受精，否则无法正常完成受精，A错误；B、桑葚胚阶段的细胞尚未分化，还没有成纤维细胞；囊胚仅分化为滋养层细胞和内细胞团，尚未分化形成成纤维细胞，无法直接分离得到成纤维细胞，B错误；C、核移植后形成的重构胚需人工激活以启动发育程序，常用方法包括蛋白酶合成抑制剂、电脉冲或钙离子载体等，可有效诱导胚胎2和胚胎3的形成，C正确；D、成纤维细胞甲与乙均来自同一胚胎1，核遗传物质除T基因外其余都相同，性染色体组成一致，故小狗甲与乙性别一定相同。毛色受T基因影响（编码酪氨酸酶），敲除后可能导致白化表型，但其他毛色相关基因未变，因此毛色“可能不同”，D错误。 14. 【答案】B【详解】A、该四重肉源PCR鉴定体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，不需要解旋酶，A错误； B、该体系检测四种肉源，每个物种对应1种特异性引物，所有物种共用1个公共引物；引入公共引物后，不需要维持多种特异性引物的高浓度，总引物浓度降低，减少了引物之间相互结合的概率，降低了引物间的相互影响，B正确； C、由题图信息可知，后25个循环使用的引物更短，因而复性温度应低于前10个循环，C错误；D、该体系只能检测三种常见的掺假肉源，如果样本掺入了这三种之外的其他肉类，检测结果也只会出现羊肉条带。因此 “只出现羊肉条带” 不能说明样本一定未掺假，D错误。 15. 【答案】C【详解】A、生物武器具有大规模杀伤性，国际公约明确禁止。该做法符合国家安全要求，A正确；B、转基因技术可提高作物抗性、产量等，属于国家支持的生物技术应用，符合粮食安全和生物安全战略，B正确；C、物种入侵可能破坏本地生态平衡，但完全禁止进口会阻碍正常贸易和科研交流。实际管理中需通过检疫、风险评估等科学监管，而非绝对禁止，该表述过于极端，C错误；D、该措施强调生态系统整体保护，符合生物多样性保护和生态安全的国家战略，D正确。 16.【答案】B【详解】A、构建含GP基因的质粒时，需要使用限制酶切割，然后用DNA连接酶连接，形成重组质粒，A正确；B、GP基因的启动子只能启动基因的转录，而不能启动复制，B错误；C、由题干信息可知，疫苗在人体内发挥作用的过程中，腺病毒起载体的作用，C正确；D、由于含GP基因的复制缺陷的重组腺病毒制成的疫苗在人体内不能复制，对接种者比较安全，D正确。 17.【D【详解】A、H-Y单克隆抗体由杂交瘤细胞中的浆细胞分泌，A错误；B、做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；C、由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误D、H-Y抗原免疫母牛体内发生了体液免疫，产生了相应的浆细胞，可获得相应抗体，D正确。 18.. D解】原生质体在30%的蔗糖溶液中会失水皱缩，A错误；②诱导芽分化时，需要提高细胞分裂素的比例，B错误；③可以表示诱导根的分化形成幼苗，此时细胞壁已经形成，C错误；原生质体无细胞壁，但由于含有一整套的遗传物质，故具有全能性，D正确。故选D。 19.. 【答案】C【详解】A、切割产生甲的限制酶的识别序列为：GAATTC∥CTTAAG，切割产生乙的限制酶的识别序列为：CAATTG∥GTTAAC，切割产生丙的限制酶的识别序列为：CTTAAG∥GAATTC。由此可见，甲、乙、丙的黏性末端是由三种限制酶催化产生的，A正确；B、甲、乙的黏性末端相同，因此可在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子；但甲、丙的黏性末端不同，它们之间不能形成重组DNA分子，B正确；C、DNA连接酶催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键，b处是氢键，C错误；D、切割甲的限制酶的识别序列为：GAATTC∥CTTAAG，而甲、乙片段形成的重组DNA分子序列为：GAATTG∥CTTAAC，因此切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，D正确。 20.. 【答案】D解】依题意并分析图示可知：只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体，在构建的重组DNA（重组质粒）中，RNA聚合酶在插入目的基因上的移动方向才与图丙相同，A、B、C均错误，D正确。 21.【答案】 ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 琼脂 ③. 选择 ④. 104 ⑤. S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长 ⑥. 取淤泥加入无菌水，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后计数 ⑦. 水、碳源、氮源和无机盐 22. 【答案】（1） ①. 多环芳烃##PAHs ②. 选择 （2） ①. 湿热灭菌##高压蒸汽灭菌 ②. 检测培养基是否被杂菌污染 （3） ①. P1 ②. P1的透明圈直径与菌圈直径的比值最大，说明其降解能力最强 （4） ①. 5.2×108 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 【解析】 （1）要分离能高效降解PAHs的细菌，需让该类细菌在培养基上生长繁殖，同时抑制或阻止不能降解PAHs的细菌生长。因此，培养基甲的碳源应为多环芳烃（PAHs），从功能角度划分，培养基甲属于选择培养基（选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长）。 （2）培养基常用的灭菌方法为湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）；培养接种的培养基乙时，将未接种的同批次培养基乙一起培养，目的是检测培养基是否被杂菌污染，若未接种的培养基上出现菌落，说明培养基灭菌不彻底或被污染。 （3）透明圈直径与菌圈直径的比值（D/d）反映菌株降解PAHs的能力，比值越大，说明单位菌株降解PAHs量越多，由图可知，P1的透明圈直径与菌圈直径的比值最大，说明其降解能力最强。 （4）平均菌落数=(48+50+54+56+52)/5=52 ，代入公式，即52×103×（1000÷0.1）=5.2×108个/L，该结果往往比原菌液的实际活菌数低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 23. 【答案】（1） ①. 脱氧核苷酸 ②. Sac Ⅰ ③. Bam Ⅰ （2） ①. T-DNA ②. 潮霉素 （3） ①. 不能 ②. 受体细胞基因组中也含有ACO基因，无论目的基因是否导入受体细胞均能检测到杂交信号 【解析】 （1）启动子位于DNA分子上，其基本组成单位是脱氧核苷酸，是RNA聚合酶的结合位点，根据图中启动子和终止子的位置以及质粒上的限制酶种类分析，若要为保证ACO基因能反向连接在重组质粒的启动子后，设计引物时需在ACO基因的上游引物，引入Sac I限制酶切位点，在下游引物引入Bam I限制酶切位点。 （2）目的基因表达载体进入细胞后，Ti质粒上的T-DNA区段可转移到叶片细胞的染色体中，进而实现目的基因的转移。潮霉素抗性基因位于T-DNA上的启动子与终止子之间，可以表达出抗潮霉素的相关物质，因此筛选时，需在猕猴桃愈伤组织培养基中加入潮霉素进行初步选择，能保留下来的是导入了目的基因的细胞。 （3）受体细胞基因组中也含有ACO基因 ，所以⽆论⽬的基因是否导入受体细胞均能检测到杂交信号，所以检测目的基因是否导入受体细胞，不能用标记的ACO基因的单链DNA探针进行检测 8 学科网（北京）股份有限公司 $