精品解析：山西省晋中市榆次区第二中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

高二生物试卷 满分100分，时间75分钟 注意事项： 1．答题前，考生务必将自己的姓名，准考证号填写在答题卡上。 2．不得随意在答题卡上涂改、乱画。使用黑色中性笔，认真规范答题，不得使用涂改液、修正带、透明胶等方法改错。 3．考试结束后，试卷本人留存将答题卡交回。 一、选择题本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。下列叙述错误的是（　　） A. 传统发酵时，葡萄酒的发酵过程中存在的菌种有葡萄果皮上的多种微生物 B. 工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵 C. 通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状 D. 大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数 2. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让微生物逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。以下说法错误的是（　　） A. 用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏的土壤，以增加获得目的菌的概率 B. 物质X是敌敌畏，培养基B用于鉴别分解敌敌畏能力较强的微生物 C. 可以通过测定培养基C中敌敌畏的剩余量，确定微生物分解敌敌畏能力的大小 D. 培养基D上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 3. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 B. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 C. 制作泡菜时，泡菜坛口盖上一层纱布，可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 D. 制作红枣醋时，酒精发酵完成后继续密封一段时间即可将酒精转化为醋酸 4. 我国是全球最大的发酵产品生产国，图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 扩大培养时常用液体培养基，有利于微生物的增殖 B. 通过发酵工程可以生产多种抗生素、氨基酸、激素和疫苗等 C. 发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，果醋发酵时需不断通入无菌空气 D. 如果要获得单细胞蛋白，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品 5. 下列关于不同微生物代谢与应用的叙述，正确的是（ ） A. 酵母菌与醋酸菌代谢类型均为异养需氧型，发酵后形成的溶液都呈酸性 B. 硝化细菌和蓝细菌都是原核生物，均可利用光能将无机物合成有机物 C. 取泡菜汁样品，利用平板划线法对乳酸菌进行分离和计数 D. 选育出高产青霉菌，经扩大培养后才可接种到发酵罐中用于发酵工程工业化生产青霉素 6. 下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ） ①发酵工程的中心环节是灭菌，发酵设备必须经过严格的灭菌 ②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 ③利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长 ④发酵工程所用的菌种大多是混合菌种 ⑤生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉 ⑥用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 A. 4项 B. 5项 C. 2项 D. 3项 7. 下列关于微生物培养技术及应用的叙述，正确的是（ ） A. 微生物的纯培养操作顺序为：配制培养基→灭菌→调pH→接种→分离和培养等 B. 接种后需立即倒置培养以避免皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 C. 以尿素为唯一氮源且含刚果红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D. 显微镜直接计数时，统计结果比实际数值偏大 8. 通过植物细胞工程技术获得次生代谢物，可以满足化妆品市场对原料高质量及植物资源可持续性发展的要求。下列说法错误的是（　　） A. 利用植物细胞工程获取其有效成分的过程中可使用液体培养基 B. 培养基中的糖类既能为细胞提供能量，也可用于多种有机物的合成 C. 利用中草药植物的外植体培育愈伤组织时，培养基中需添加生长素和细胞分裂素 D. 该技术主要利用促进细胞生长的培养条件来提高单个细胞中次生代谢物的含量 9. 下列关于酒精在实验中使用的说法中，正确的是（ ） A. 色素的提取和分离实验中可用体积分数为95%的酒精替代无水乙醇 B. DNA粗提取实验中可用无水乙醇使DNA析出 C. 低温诱导染色体数目加倍实验中可用体积分数95%的酒精洗去根尖上的卡诺氏液 D. 植物组织培养过程中可用体积分数为95%的酒精对外植体消毒 10. 科学家将雄性小鼠A的皮肤细胞，转化为诱导多能干细胞（iPS细胞），再通过基因编辑将其转化为卵细胞，与另一只雄性小鼠B的精子结合形成受精卵，在代孕母鼠的协助下，最终孕育出健康的小鼠。下列叙述错误的是（　　） A. 培养iPS细胞使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分 B. 可直接将特定蛋白导入小鼠A的皮肤细胞中诱导其形成iPS细胞 C. 小鼠B的精子要进行获能处理，才能用于体外受精 D. 代孕母鼠孕育出的健康小鼠的性染色体组成为XY 11. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法正确的是（　　） A. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 B. 转基因体细胞培养应置于充满CO2气体的培养箱中培养 C. 对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的成熟卵子 D. 用高Ca2+-高pH法激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程 12. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠，流程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 可以采用机械法对来自黑鼠的成块组织进行分散处理 B. 黑鼠体细胞转化为iPS细胞的过程中核酸发生了改变 C. 可以取重组囊胚中的滋养层细胞来鉴定图中克隆鼠的性别 D. 制备iPS细胞的诱导因子可以是特定基因、蛋白或某些小分子化合物 13. 以下关于生物工程技术内容的观点表述正确的是（ ） A. 果醋发酵——利用醋酸菌在氧气充足、糖源充足时将乙醇转化为乙酸 B. 细胞产物工程化生产——目的是生产植物生命活动所需的初生代谢产物 C. 动物细胞培养——5%CO2可以维持培养液的pH呈酸性，有利于细胞的生长和增殖 D. 植物组织培养——对外植体的消毒通常用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%的次氯酸钠 14. 某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一种抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测蛋白S的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法错误的是（　　） A. 注射蛋白S后，可从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞 B. 制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，也可冻存 D. 单克隆抗体A和单克隆抗体B都能特异性识别蛋白S 15. 大肠杆菌pUC118质粒是基因工程中常用的一种运载体，具有氨苄青霉素抗性基因，该质粒中某限制酶的唯一切点位于lacZ基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ基因被破坏，则菌落呈白色。关于图中操作的说法不正确的是（　　） A. 试管1中应加入DNA连接酶处理 B. 试管2中需要使用Ca2+处理大肠杆菌，以便重组载体导入不含lacZ基因的大肠杆菌 C. 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则质粒未导入大肠杆菌 D. 培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素 16. 一种天然蛋白t-PA能高效降解血栓，但大剂量注射会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸（密码子：UGU）换成丝氨酸（密码子：UCU），能显著降低其副作用。先对天然t-PA基因的碱基序列进行改造，然后再表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。下列说法正确的是（　　） A. 构建重组质粒时需要选用限制酶XmaⅠ和NheⅠ切割质粒pCLY11 B. 改造后的基因中决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为AGA C. 使用T4DNA连接酶不能将t-PA改良基因与质粒pCLY11连接 D. 成功导入重组质粒的受体细胞在含有新霉素的培养基上能存活，且呈现蓝色 二、非选择题（本题共4小题，共52分） 17. 植物甲（2N=24）具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙（2N=32）的细胞质中存在抗除草剂基因。研究人员通过植物细胞工程技术将乙细胞质中的抗性基因引入甲中，获得杂种植株，实验流程如下图所示。回答下列问题： （1）A过程选择顶芽细胞的原因有_________（至少答2点）；在进行B过程之前，先要将甲、乙植株顶芽的细胞进行A过程处理，原因是_________。 （2）图中用于培养和筛选的培养基，除了加入必需的营养物质外，还需加入_________以达到筛选的目的。研究人员_________（选填“能”或“不能”）根据细胞中染色体数目和形态来筛选出杂种细胞，理由是_________。 （3）培养出的杂种植株具有_________的性状特征，说明实验取得了成功。 18. 1965年我国科学家人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素，但胰岛素的生产存在着过程复杂、产量低等问题。为解决这些问题，科学家利用现代生物工程技术研发了大规模生产胰岛素的两条途径，过程如图甲： （1）利用转基因技术生产人胰岛素的核心步骤是_____，为了保证目的基因的正确连接，需要选择限制酶_____完成对人胰岛素基因及质粒的切割。 （2）途径1利用转基因牛作为乳腺生物反应器生产人胰岛素时，先将人胰岛素基因与_____（填调控元件）等重组在一起，通过_____的方法导入受精卵中，使转基因牛通过分泌乳汁来生产胰岛素。 （3）途径2中为进一步筛选构建的质粒，以1～4号菌株中提取的质粒为模板，对胰岛素基因进行PCR扩增，PCR产物的电泳结果如图乙。在第5组的PCR反应中，使用无菌水代替实验组的模板DNA，目的是检验PCR反应中是否有_____的污染。初步判断实验：_____（从“1～4”中选填）的质粒中成功插入了人胰岛素基因，理由是_____。 19. 随着石油危机的出现，乙醇作为可再生资源中比较理想的液态燃料正受到人们越来越多的关注。自然界中可再生的木质纤维素资源极为丰富，其主要成份之一是半纤维素。半纤维素容易被酸或者酶水解，其水解产物中的85%~90%为木糖。因此利用木糖发酵生产乙醇具有重要的用研究价值。酵母菌是传统的乙醇生产菌株，因其缺乏转化木糖的酶系而不能很好地利用木糖。自然界中某些酿酒酵母能利用木糖进行酒精发酵，某研究小组欲从土壤中分离这种酵母菌并对产酶活性进行测定，实验基本流程为：取土样→制取土壤悬液→扩大培养→选择培养→菌种分离→酶活性鉴定。回答下列问题； （1）扩大培养又称富集培养，可增加___________，以确保能从样品中分离得到所需要的微生物。 （2）获得纯净培养物的关键是_____________。该研究小组将扩大培养后的混合菌液适当稀释后接种于___________的选择培养基，倒置放入培养箱培养。常用的接种方法有___________两种。若划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。第二划线区域的第一条线上无菌落的原因可能是___________。 （3）为进一步确定目的菌株的最佳产酶条件，该研究小组选取培养基初始pH、培养温度、摇床转速以及装液量4个因素进行实验。其中，培养基初始pH、培养温度会影响菌株产酶主要是因为____________。摇床转速因影响___________进而影响菌株产酶。 20. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术 研究及应用的相关情况，供体 1 是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回 答下列问题： （1）应用1中获得的良种小牛性别为 _____。 （2）在应用 2、3、4 中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其___________。得到的卵母细胞需要发育至 ________时期才能受精。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和_____。 （3）应用 3 可解决良种动物快速大量繁殖的问题，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将________均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （4）应用 4 中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养 过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、 无机盐、维生素、核苷酸、激素，还要加入_____；向培养液中通入 95%空气和 5%二 氧化碳，空气中的氧气参与细胞的代谢，二氧化碳可以维持培养基的 _____ 。 （5）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或_____所进行的多种显微操作和处理技术， 其中_____技术是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物试卷 满分100分，时间75分钟 注意事项： 1．答题前，考生务必将自己的姓名，准考证号填写在答题卡上。 2．不得随意在答题卡上涂改、乱画。使用黑色中性笔，认真规范答题，不得使用涂改液、修正带、透明胶等方法改错。 3．考试结束后，试卷本人留存将答题卡交回。 一、选择题本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。下列叙述错误的是（　　） A. 传统发酵时，葡萄酒的发酵过程中存在的菌种有葡萄果皮上的多种微生物 B. 工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵 C. 通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状 D. 大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数 【答案】B 【解析】 【详解】A、传统葡萄酒发酵利用的是葡萄果皮上附着的野生酵母菌等多种微生物，无需额外人工接种菌种，A正确； B、酵母菌是兼性厌氧菌，工业化生产时，酵母菌扩大培养需要在有氧条件下进行，促进酵母菌有氧呼吸大量繁殖，仅酒精发酵阶段需要无氧条件，B错误； C、诱变育种可通过诱导基因突变获得优良变异菌株，基因工程育种可定向改造菌种的遗传性状，二者都能改良葡萄酒发酵菌种的性状，C正确； D、大规模发酵时，温度、pH值会影响微生物酶活性，罐压和发酵产生的CO2积累有关，溶解氧会影响酵母菌的呼吸类型，这些参数都会影响发酵效率和产物品质，需要实时监测，D正确。 2. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让微生物逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。以下说法错误的是（　　） A. 用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏的土壤，以增加获得目的菌的概率 B. 物质X是敌敌畏，培养基B用于鉴别分解敌敌畏能力较强的微生物 C. 可以通过测定培养基C中敌敌畏的剩余量，确定微生物分解敌敌畏能力的大小 D. 培养基D上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 【答案】B 【解析】 【详解】A、该实验目的是筛选高效降解敌敌畏的微生物，故用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏的土壤，这样能够增加获得目的菌的概率，A正确； B、驯化时向培养液中逐步加入的物质X是敌敌畏，图中培养基可以得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物，其他微生物无法生长和繁殖，因此该培养基按照功能进行分类，属于选择培养基，B错误； C、该实验目的是筛选高效降解敌敌畏的微生物，可以通过测定培养基C中敌敌畏的剩余量，确定微生物分解敌敌畏能力的大小，C正确； D、培养基D是经梯度稀释后涂布接种得到的，稀释度足够高时，一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，D正确。 3. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 B. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 C. 制作泡菜时，泡菜坛口盖上一层纱布，可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 D. 制作红枣醋时，酒精发酵完成后继续密封一段时间即可将酒精转化为醋酸 【答案】B 【解析】 【详解】A、制作葡萄酒的核心菌种是葡萄皮上附着的野生型酵母菌，若对葡萄汁进行高压蒸汽灭菌会杀死目标菌种，无法完成酒精发酵，A错误； B、制作腐乳的发酵过程有毛霉、青霉、酵母菌等多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶、脂肪酶可分解豆腐中的蛋白质和脂肪，B正确； C、乳酸菌是厌氧型微生物，制作泡菜时需要严格的无氧环境，泡菜坛需密封（通常用水封法隔绝空气），若仅盖纱布会使氧气进入，抑制乳酸菌代谢，还易造成杂菌污染，C错误； D、将酒精转化为醋酸的醋酸菌是好氧型微生物，酒精发酵完成后需要通入无菌空气、适当升高温度才能产生醋酸，密封会导致醋酸菌缺氧死亡，无法完成醋酸发酵，D错误。 4. 我国是全球最大的发酵产品生产国，图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 扩大培养时常用液体培养基，有利于微生物的增殖 B. 通过发酵工程可以生产多种抗生素、氨基酸、激素和疫苗等 C. 发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，果醋发酵时需不断通入无菌空气 D. 如果要获得单细胞蛋白，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品 【答案】D 【解析】 【详解】A、扩大培养菌种时，液体培养基可让微生物充分接触营养物质，更利于微生物增殖，A正确； B、发酵工程可生产多种类型产品，包括抗生素、氨基酸、激素、疫苗等，B正确； C、发酵罐内的发酵是发酵工程产生目的产物的核心环节，属于中心环节；果醋发酵的菌种醋酸菌是好氧菌，发酵过程需要不断通入无菌空气，C正确； D、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，获得单细胞蛋白通过过滤、沉淀等方法分离收集菌体，D错误。 5. 下列关于不同微生物代谢与应用的叙述，正确的是（ ） A. 酵母菌与醋酸菌代谢类型均为异养需氧型，发酵后形成的溶液都呈酸性 B. 硝化细菌和蓝细菌都是原核生物，均可利用光能将无机物合成有机物 C. 取泡菜汁样品，利用平板划线法对乳酸菌进行分离和计数 D. 选育出高产青霉菌，经扩大培养后才可接种到发酵罐中用于发酵工程工业化生产青霉素 【答案】D 【解析】 【详解】A、酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型，并非异养需氧型，仅醋酸菌为异养需氧型，A错误； B、硝化细菌是化能自养型生物，依靠氧化氨释放的化学能将无机物合成有机物，无法利用光能，只有蓝细菌可利用光能合成有机物，B错误； C、平板划线法仅能实现微生物的分离纯化，无法对活菌进行计数，对微生物分离并计数应使用稀释涂布平板法，C错误； D、选育得到的高产青霉菌初始数量较少，需要先经过扩大培养提升菌种数量后，才能接种到发酵罐中进行工业化发酵生产，D正确。 6. 下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ） ①发酵工程的中心环节是灭菌，发酵设备必须经过严格的灭菌 ②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 ③利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长 ④发酵工程所用的菌种大多是混合菌种 ⑤生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉 ⑥用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 A. 4项 B. 5项 C. 2项 D. 3项 【答案】D 【解析】 【详解】①发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，灭菌是发酵前的无菌操作步骤，目的是防止杂菌污染，①错误； ②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物（如抗生素、柠檬酸）、酶制剂、菌体本身（如单细胞蛋白）三类，②正确； ③根瘤菌肥中的根瘤菌可与豆科植物共生固氮，为植物提供氮源，可促进植物生长，③正确； ④发酵工程为避免杂菌竞争、保证产品纯度，所用菌种大多为单一纯种，④错误； ⑤工业生产柠檬酸常用黑曲霉作为发酵菌种，需要筛选产酸量高的菌株以提升生产效率，⑤正确； ⑥单细胞蛋白本身就是微生物菌体，制备微生物饲料时直接收获菌体即可，不需要从微生物细胞中提取，⑥错误。 故选D。 7. 下列关于微生物培养技术及应用的叙述，正确的是（ ） A. 微生物的纯培养操作顺序为：配制培养基→灭菌→调pH→接种→分离和培养等 B. 接种后需立即倒置培养以避免皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 C. 以尿素为唯一氮源且含刚果红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D. 显微镜直接计数时，统计结果比实际数值偏大 【答案】D 【解析】 【详解】A、微生物纯培养的正确操作顺序为配制培养基→调pH→灭菌→接种→分离和培养，若灭菌后再调pH易引入杂菌污染培养基，A错误； B、接种后需等接种液完全被培养基吸收后再倒置培养，立即倒置会使未吸收的接种液流动，影响菌种分离效果，B错误； C、鉴别尿素分解菌需添加酚红指示剂，尿素分解产生的氨会使酚红变红；刚果红是鉴别纤维素分解菌的试剂，C错误； D、显微镜直接计数时会同时统计活菌和死菌，因此统计结果比实际活菌数值偏大，D正确。 8. 通过植物细胞工程技术获得次生代谢物，可以满足化妆品市场对原料高质量及植物资源可持续性发展的要求。下列说法错误的是（　　） A. 利用植物细胞工程获取其有效成分的过程中可使用液体培养基 B. 培养基中的糖类既能为细胞提供能量，也可用于多种有机物的合成 C. 利用中草药植物的外植体培育愈伤组织时，培养基中需添加生长素和细胞分裂素 D. 该技术主要利用促进细胞生长的培养条件来提高单个细胞中次生代谢物的含量 【答案】D 【解析】 【详解】A、获取植物次生代谢物时常用液体培养基进行细胞悬浮培养，液体培养基能让细胞与营养物质充分接触，有利于细胞增殖和代谢产物积累，A正确； B、培养基中的糖类作为碳源，既可以为细胞生命活动提供能量，也可以作为碳骨架参与多种有机物的合成，B正确； C、外植体脱分化形成愈伤组织的过程需要生长素和细胞分裂素的调控，因此培养基中需要添加这两种植物激素，C正确； D、该技术主要通过促进细胞增殖增加细胞总数，进而提高次生代谢物的总产量，并非提高单个细胞中次生代谢物的含量，且次生代谢物的积累通常需要特定诱导条件，不是仅通过促进细胞生长就能实现，D错误。 9. 下列关于酒精在实验中使用的说法中，正确的是（ ） A. 色素的提取和分离实验中可用体积分数为95%的酒精替代无水乙醇 B. DNA粗提取实验中可用无水乙醇使DNA析出 C. 低温诱导染色体数目加倍实验中可用体积分数95%的酒精洗去根尖上的卡诺氏液 D. 植物组织培养过程中可用体积分数为95%的酒精对外植体消毒 【答案】C 【解析】 【详解】A、绿叶中色素提取的原理是色素易溶于无水乙醇等有机溶剂，95%的酒精含有水分，会降低色素的溶解度，不能直接替代无水乙醇，若要使用需额外添加无水碳酸钠除去水分，A错误； B、DNA粗提取实验中，利用DNA不溶于冷却的体积分数为95%的酒精的特性使DNA析出，实验不使用无水乙醇，B错误； C、低温诱导染色体数目加倍实验中，卡诺氏液的作用是固定细胞形态，固定完成后需要用体积分数95%的酒精冲洗根尖2次，洗去残留的卡诺氏液，C正确； D、植物组织培养过程中，外植体消毒使用的是体积分数70%的酒精，95%的酒精会使微生物表面蛋白质快速凝固形成保护膜，无法进入微生物内部发挥消毒作用，消毒效果差，D错误。 10. 科学家将雄性小鼠A的皮肤细胞，转化为诱导多能干细胞（iPS细胞），再通过基因编辑将其转化为卵细胞，与另一只雄性小鼠B的精子结合形成受精卵，在代孕母鼠的协助下，最终孕育出健康的小鼠。下列叙述错误的是（　　） A. 培养iPS细胞使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分 B. 可直接将特定蛋白导入小鼠A的皮肤细胞中诱导其形成iPS细胞 C. 小鼠B的精子要进行获能处理，才能用于体外受精 D. 代孕母鼠孕育出的健康小鼠的性染色体组成为XY 【答案】D 【解析】 【详解】A、由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，A正确； B、制备iPS细胞时，可以借助载体将特定基因导入雄性小鼠体细胞而获得，也可以直接将特定蛋白导入雄性小鼠体细胞中获得，这是目前常用的方法，B正确； C、体外受精前精子需获能处理以激活其受精能力，C正确； D、小鼠A的皮肤细胞（XY）经基因编辑形成卵细胞，性染色体为X或Y，与小鼠B的精子（X或Y）结合后，存活后代性染色体可能为XX或XY，D错误。 11. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法正确的是（　　） A. 胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 B. 转基因体细胞培养应置于充满CO2气体的培养箱中培养 C. 对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的成熟卵子 D. 用高Ca2+-高pH法激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程 【答案】C 【解析】 【详解】A、胚胎分割技术的作用是提高胚胎的利用率，获得多个基因型相同的胚胎，不能提高移植胚胎的成活率，A错误； B、动物细胞培养应置于含95%空气和5% CO2的混合气体的培养箱中，CO2的作用是维持培养液pH，B错误； C、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，培养形成成熟卵子，以便后续进行核移植操作，C正确； D、重构胚需要用物理或化学方法（如电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，完成细胞分裂和发育进程，高Ca2+-高pH法是诱导细胞融合的方法，D错误。 12. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠，流程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 可以采用机械法对来自黑鼠的成块组织进行分散处理 B. 黑鼠体细胞转化为iPS细胞的过程中核酸发生了改变 C. 可以取重组囊胚中的滋养层细胞来鉴定图中克隆鼠的性别 D. 制备iPS细胞的诱导因子可以是特定基因、蛋白或某些小分子化合物 【答案】C 【解析】 【详解】A、分散动物成块组织时，可使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，也可采用机械法（如剪切、吹打等）进行分散处理，A正确； B、黑鼠体细胞转化为iPS细胞的过程为去分化，该过程中基因的选择性表达情况改变，转录产生的mRNA种类和数量发生变化，核酸包括DNA和RNA，因此核酸发生了改变，B正确； C、重组囊胚的滋养层细胞来自灰鼠的囊胚，克隆鼠的遗传物质来自黑鼠的iPS细胞，二者遗传物质不同，取滋养层细胞只能鉴定灰鼠的性别，无法鉴定克隆鼠的性别，C错误； D、制备iPS细胞时，特定基因、对应的调控蛋白或某些小分子化合物都可作为诱导因子，诱导体细胞去分化为iPS细胞，D正确。 13. 以下关于生物工程技术内容的观点表述正确的是（ ） A. 果醋发酵——利用醋酸菌在氧气充足、糖源充足时将乙醇转化为乙酸 B. 细胞产物工程化生产——目的是生产植物生命活动所需的初生代谢产物 C. 动物细胞培养——5%CO2可以维持培养液的pH呈酸性，有利于细胞的生长和增殖 D. 植物组织培养——对外植体的消毒通常用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%的次氯酸钠 【答案】D 【解析】 【详解】A、醋酸菌在氧气充足、糖源充足时会直接将葡萄糖分解为乙酸，仅当糖源不足、氧气充足时，才会将乙醇转化为乙醛再进一步转化为乙酸，A错误； B、细胞产物工程化生产的产物既包含植物生命活动所需的初生代谢产物，也包含次生代谢产物（如紫杉醇等药用成分），B错误； C、动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH稳定，多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4，故培养基的pH并不呈酸性，C错误； D、植物组织培养过程中，对外植体消毒的常规操作为：先用体积分数70%的酒精处理，再用质量分数5%的次氯酸钠处理，最后用无菌水冲洗掉残留消毒剂，D正确。 14. 某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一种抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测蛋白S的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法错误的是（　　） A. 注射蛋白S后，可从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞 B. 制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，也可冻存 D. 单克隆抗体A和单克隆抗体B都能特异性识别蛋白S 【答案】B 【解析】 【详解】A、注射抗原蛋白S后，小鼠发生特异性体液免疫，脾脏是重要的免疫器官，其中存在可产生抗S蛋白抗体的B淋巴细胞，因此可从小鼠脾脏中分离出所需B淋巴细胞，A正确； B、题干明确说明蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一种抗原决定基刺激机体产生一种抗体，单克隆抗体A和B针对的是S蛋白上不同的抗原决定基，二者不是相同的单克隆抗体，B错误； C、杂交瘤细胞同时具备B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特点，既可以产生特异性抗体，又具备无限增殖的能力，因此可进行传代培养，也可冷冻保存，C正确； D、单克隆抗体A和B均是以S蛋白为抗原制备的抗-S单克隆抗体，二者都能特异性识别蛋白S（分别识别S蛋白上不同的抗原决定基），D正确。 15. 大肠杆菌pUC118质粒是基因工程中常用的一种运载体，具有氨苄青霉素抗性基因，该质粒中某限制酶的唯一切点位于lacZ基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ基因被破坏，则菌落呈白色。关于图中操作的说法不正确的是（　　） A. 试管1中应加入DNA连接酶处理 B. 试管2中需要使用Ca2+处理大肠杆菌，以便重组载体导入不含lacZ基因的大肠杆菌 C. 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则质粒未导入大肠杆菌 D. 培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素 【答案】C 【解析】 【详解】A、试管1中为酶切后的质粒和目的基因，需要加入DNA连接酶催化二者连接形成重组DNA分子，A正确； B、试管2中用Ca2+处理，使大肠杆菌属于感受态，这样可将重组载体导入不含lacZ基因的大肠杆菌中，B正确； C、若大肠杆菌的菌落为蓝色，说明若lacZ基因没有被破坏，则导入大肠杆菌是普通质粒，C错误； D、由题干信息可知标记基因是氨苄青霉素抗性基因，因此培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素，D正确。 16. 一种天然蛋白t-PA能高效降解血栓，但大剂量注射会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸（密码子：UGU）换成丝氨酸（密码子：UCU），能显著降低其副作用。先对天然t-PA基因的碱基序列进行改造，然后再表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。下列说法正确的是（　　） A. 构建重组质粒时需要选用限制酶XmaⅠ和NheⅠ切割质粒pCLY11 B. 改造后的基因中决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为AGA C. 使用T4DNA连接酶不能将t-PA改良基因与质粒pCLY11连接 D. 成功导入重组质粒的受体细胞在含有新霉素的培养基上能存活，且呈现蓝色 【答案】B 【解析】 【详解】A、根据碱基互补配对原则，t-PA基因的左端黏性末端为CCGG-，为XmaⅠ酶切得到，t-PA基因的右端黏性末端为GATC-，为BglⅡ酶切得到，质粒需要用相同的酶进行酶切以得到与目的基因相同的黏性末端，因此质粒需选用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割质粒pCLY11，A错误； B、由题意可知，是将t-PA第84位的半胱氨酸（密码子：UGU）换成丝氨酸（密码子：UCU），丝氨酸密码子为 UCU，根据碱基互补配对原则，模板链碱基序列为 AGA，B正确； C、T4DNA连接酶能连接黏性末端，还可以连接平末端，使用T4DNA连接酶能将t-PA改良基因与质粒pCLY11连接，C错误； D、t-PA能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而成的血栓，成功转入重组质粒的受体细胞在培养基上会出现具有抗性的白色菌落，D错误。 二、非选择题（本题共4小题，共52分） 17. 植物甲（2N=24）具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙（2N=32）的细胞质中存在抗除草剂基因。研究人员通过植物细胞工程技术将乙细胞质中的抗性基因引入甲中，获得杂种植株，实验流程如下图所示。回答下列问题： （1）A过程选择顶芽细胞的原因有_________（至少答2点）；在进行B过程之前，先要将甲、乙植株顶芽的细胞进行A过程处理，原因是_________。 （2）图中用于培养和筛选的培养基，除了加入必需的营养物质外，还需加入_________以达到筛选的目的。研究人员_________（选填“能”或“不能”）根据细胞中染色体数目和形态来筛选出杂种细胞，理由是_________。 （3）培养出的杂种植株具有_________的性状特征，说明实验取得了成功。 【答案】（1） ①. 分裂能力强；分化程度低，全能性容易表达；茎尖分生组织细胞无病毒或病毒少 ②. 植物细胞存在细胞壁不能融合 （2） ①. 一定比例的生长素、细胞分裂素 ②. 不能 ③. 杂种细胞的染色体数目与植物甲相同 （3）抗除草剂 【解析】 【小问1详解】 植物顶芽细胞属于分生组织，分裂能力强；分化程度低，全能性容易表达；茎尖分生组织细胞无病毒或病毒少，故A过程制备原生质体时选择植物顶芽细胞。由于植物细胞具有细胞壁，不能直接融合，因此需要进行A过程处理去除细胞壁。 【小问2详解】 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性植物激素，用于培养和筛选的培养基中，除了加入必需的营养物质外，还需加入一定比例的生长素、细胞分裂素以达到筛选的目的。结合图示和题干信息可知，植物甲的细胞质失去活性，植物乙的细胞核失去活性，因此融合后的细胞染色体数目与植物甲相同，不能根据细胞中染色体数目和形态来筛选出杂种细胞。 【小问3详解】 植物甲（2N=24）具有由核基因控制的多种优良性状，植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，将乙细胞质中的抗性基因引入甲中，获得杂种植株，因此培养成的植株具有甲的优良性状且抗除草剂。 18. 1965年我国科学家人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素，但胰岛素的生产存在着过程复杂、产量低等问题。为解决这些问题，科学家利用现代生物工程技术研发了大规模生产胰岛素的两条途径，过程如图甲： （1）利用转基因技术生产人胰岛素的核心步骤是_____，为了保证目的基因的正确连接，需要选择限制酶_____完成对人胰岛素基因及质粒的切割。 （2）途径1利用转基因牛作为乳腺生物反应器生产人胰岛素时，先将人胰岛素基因与_____（填调控元件）等重组在一起，通过_____的方法导入受精卵中，使转基因牛通过分泌乳汁来生产胰岛素。 （3）途径2中为进一步筛选构建的质粒，以1～4号菌株中提取的质粒为模板，对胰岛素基因进行PCR扩增，PCR产物的电泳结果如图乙。在第5组的PCR反应中，使用无菌水代替实验组的模板DNA，目的是检验PCR反应中是否有_____的污染。初步判断实验：_____（从“1～4”中选填）的质粒中成功插入了人胰岛素基因，理由是_____。 【答案】（1） ①. 基因表达载体的构建 ②. BamHⅠ和HindⅢ （2） ①. 乳腺中特异表达的基因的启动子 ②. 显微注射 （3） ①. 外源DNA ②. 2 ③. 质粒长度为6.7kb，重组质粒为7.9kb，推测人胰岛素基因大小为1.2kb，位于1000—2000bp之间 【解析】 【小问1详解】 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，能让目的基因在受体细胞中稳定存在、遗传并表达。为了防止目的基因和质粒自身环化、反向连接，需选择两种不同的限制酶切割。从图中可以看出：人胰岛素基因两端有EcoR Ⅰ位点，会影响目的基因的准确连接，Sma Ⅰ会破坏人胰岛素基因和破坏标记基因，因此选择BamH Ⅰ和Hind Ⅲ完成对人胰岛素基因及质粒的切割。 【小问2详解】 在利用转基因牛作为乳腺生物反应器生产人胰岛素时，需要将人胰岛素基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组在一起，这样才能使目的基因在乳腺细胞中特异性表达。将目的基因导入动物受精卵中的方法是显微注射法，通过这种方法可使转基因牛通过分泌乳汁来生产胰岛素。 【小问3详解】 对照组用无菌水代替模板DNA，目的是检验PCR反应中是否有外源DNA污染，如果对照组出现条带，说明存在污染。由题意可知，质粒长度为6.7kb，重组质粒为7.9kb，推测人胰岛素基因大小为1.2kb，位于1000-2000bp之间，而电泳结果可以看出，只有实验组2的质粒片段的大小在1000-2000bp之间，因此可初步判断，2的质粒中成功插入了人胰岛素基因。 19. 随着石油危机的出现，乙醇作为可再生资源中比较理想的液态燃料正受到人们越来越多的关注。自然界中可再生的木质纤维素资源极为丰富，其主要成份之一是半纤维素。半纤维素容易被酸或者酶水解，其水解产物中的85%~90%为木糖。因此利用木糖发酵生产乙醇具有重要的用研究价值。酵母菌是传统的乙醇生产菌株，因其缺乏转化木糖的酶系而不能很好地利用木糖。自然界中某些酿酒酵母能利用木糖进行酒精发酵，某研究小组欲从土壤中分离这种酵母菌并对产酶活性进行测定，实验基本流程为：取土样→制取土壤悬液→扩大培养→选择培养→菌种分离→酶活性鉴定。回答下列问题； （1）扩大培养又称富集培养，可增加___________，以确保能从样品中分离得到所需要的微生物。 （2）获得纯净培养物的关键是_____________。该研究小组将扩大培养后的混合菌液适当稀释后接种于___________的选择培养基，倒置放入培养箱培养。常用的接种方法有___________两种。若划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。第二划线区域的第一条线上无菌落的原因可能是___________。 （3）为进一步确定目的菌株的最佳产酶条件，该研究小组选取培养基初始pH、培养温度、摇床转速以及装液量4个因素进行实验。其中，培养基初始pH、培养温度会影响菌株产酶主要是因为____________。摇床转速因影响___________进而影响菌株产酶。 【答案】（1）目的菌株数量 （2） ①. 防止外来杂菌的入侵 ②. 以木糖为唯一碳源 ③. 平板划线法和稀释涂布平板法 ④. 接种环灼烧灭菌后未冷却即进行划线操作（或第一次划线未从第一区域末端开始） （3） ①. 培养基初始pH、培养温度会影响酶活性 ②. 溶氧量、菌种获取营养物质的概率 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法： (1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 (2）稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质)、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。 【小问1详解】 扩大培养又称富集培养，一般采用液体培养基，液体培养基能够增加营养物质和菌体的接触，从而达到增加菌种数量的目，以确保能够从样品中分离得到所需微生物。 【小问2详解】 为获得纯净培养物，必须防止外来杂菌的入侵，否则培养物中会混杂很多不需要的菌种，影响实验效果。由题干“半纤维素容易被酸或者酶水解，其水解产物中的85%~90%为木糖。因此利用木糖发酵生产乙醇具有重要的用研究价值”可知，需要筛选出能分解木糖的目的菌株，因此要将扩大培养后的混合菌液适当稀释后接种于以木糖为唯一碳源的选择培养基，倒置放入培养箱培养。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种。若划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。第二划线区域的第一条线上无菌落的原因是接种环灼烧灭菌后未冷却即进行划线操作、未从上次划线末端开划线。 【小问3详解】 培养基初始pH、培养温度会影响酶活性;摇床转速因影响溶氧量、菌种获取营荞物质的几率进而影响菌株产酶。 【点睛】本题考查微生物的分离和培养，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题干信息准确答题。 20. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术 研究及应用的相关情况，供体 1 是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回 答下列问题： （1）应用1中获得的良种小牛性别为 _____。 （2）在应用 2、3、4 中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其___________。得到的卵母细胞需要发育至 ________时期才能受精。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和_____。 （3）应用 3 可解决良种动物快速大量繁殖的问题，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将________均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （4）应用 4 中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养 过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、 无机盐、维生素、核苷酸、激素，还要加入_____；向培养液中通入 95%空气和 5%二 氧化碳，空气中的氧气参与细胞的代谢，二氧化碳可以维持培养基的 _____ 。 （5）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或_____所进行的多种显微操作和处理技术， 其中_____技术是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。 【答案】 ①. 雌性 ②. 获能 ③. 减数第二次分裂中期（MⅡ中期） ④. 卵细胞膜反应（卵细胞膜封闭作用） ⑤. 内细胞团 ⑥. 动物血清（或血浆） ⑦. pH ⑧. 配子 ⑨. 胚胎移植 【解析】 【分析】应用1中：供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛。应用二中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖。应用3中：采用了胚胎分割技术。应用四中：从早期胚胎中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养，分化形成组织器官。 【详解】（1）由以上分析可知应用1中获得的小牛为克隆牛，其细胞核遗传物质来源于供体1，因此性别与供体1相同，为雌性。 （2）精子受精前需要进行获能处理，卵母细胞需要发育至减数第二次分裂中期才有受精能力。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。 （3）对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （4）动物细胞培养时，需要加入动物血清或血浆；动物细胞培养需要一定的气体环境，5%的CO2可维持培养液的PH。 （5）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，其中胚胎移植技术是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。 【点睛】本题主要考察胚胎工程的相关知识，熟记原理及过程是解答本题关键。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $