第46期 选择性必修3 模块测试（一）-【数理报】2025-2026学年高二生物选择性必修3 生物技术与工程同步学案（人教版）

高中生物选择性必修3第45~48期 数理极 答案详解 2025~2026学年高中生物选择性必修3第45~48期(2026年6月) 第45期3版题参考答案 成危害，B正确；新型的致病菌属于生物武器的一种，应坚决杜 1.D基因工程可创造出更符合人们需要的新的生物类 绝转基因技术应用于制造新型的致病菌，C错误；销售转基因 型和产品：转基因产品是指利用基因工程技术而获得的生物制 生物的产品不含转基因成分也需要标注，以确保消费者的知情 品，故通过转基因育种，按照人们的需要，可增加或消除原有生 权，D错误。 物品种的某些性状，A正确；在基因表达载体上，除了有目的基 5.B外源基因可通过花粉传递到它的近亲作物上，造成 因、启动子、终止子等外，还需要标记基因，故转基因食品风险 “基因污染”，A正确；“基因污染”是一种可以扩散的污染，B 评估时还需考虑标记基因的安全性问题，B正确；转基因作物 错误；在种植抗虫作物的同时种植少量非抗虫作物，可以减缓 所携带的外源基因在使得作物高产的同时，也可能会向自然界 抗性基因频率的增加，C正确：转基因生物带有外来基因，有可 扩散，从而打破自然界原有的物种平衡，严格选择种植区域可 能成为“人侵的外来物种”，威胁生态系统的稳定性，D正确. 减少转基因作物发生外源基因扩散的可能性，C正确；若有证 6.B设计试管婴儿是通过体外将卵细胞与精细胞结合 据表明某种转基因食品是有害的，可以禁止相关食品生产，也 而获得许多胚胎，在移植入母体进行胚胎着床前对胚胎的基因 可以利用该转基因食品进行进一步的科学研究，而不是全面禁 进行处理，把一些不良基因筛选出来并进行切除与替换，从而 止，D错误 减少初生婴儿因遗传因素导致的缺陷.此设计需要体外受精、 2.B外源基因插人宿主基因组的部位往往是随机的，有 早期胚胎培养及胚胎移植等技术的支持，A正确；对胚胎进行 可能会出现意想不到的后果，A不符合题意；转基因食品被食 DNA分析鉴定，应将早期胚胎培养至囊胚期，取少量滋养层细 用后，其成分会被消化道中的酶内水解并被人体吸收，其基因！ 胞做DNA分析鉴定，而不是取胚胎干细胞，B错误；抗维生素 不会进人人体基因组，B符合题意；转基因生物合成的某些新 D佝偻病是伴X显性遗传病，假设该病由等位基因D/d控制， 的蛋白质有可能成为某些人的过敏原，C不符合题意：转基因 则男方患者的基因型为XY,健康女方的基因型为XX,可知 植物可能与野生植物发生杂交而出现基因交流，对当地生态安 两者女性后代均患有抗维生素D佝偻病，男性后代正常，因此 全的影响可能是长远的，D不符合题意 可以筛选出无遗传疾病的男胎植入母体子宫，C正确：设计试 3.C转基因技术是一把双刃剑，转基因农作物对于解决 管婴儿成功率受配子、胚胎、子宫内膜的品质及胚胎植入的位 粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险，A正 置影响，D正确 确；由于不同的人在经济、文化和伦理道德观念等方面存在差 7.B转基因食品的安全性需要关注，转基因作物的环境 异，所以不同的人对转基因技术会有不同的看法，B正确；转基 安全性同样需要关注，A错误；治疗性克隆处于某种目的进行 因技术存在一定的负面影响，C错误；转基因技术是一把双刃 生殖性克隆，因而不会像生殖性克隆那样产生严重的道德、伦 剑，最重要的是要科学合理的利用这项技术，要在清晰地了解 理、社会或法律问题，B正确；试管婴儿不同于设计试管婴儿， 转基因技术的原理和操作规程的基础上来讨论转基因技术的 但它们与“克隆人”不同，属于有性生殖，C错误；生物武器对人 相关问题，D正确， 的伤害不仅仅是身体上的，还会对人的心理健康造成不良影 4.B为避免对环境和人类造成危害，培养病毒的培养基 响，甚至会对生态环境造成破坏，D错误， 应经彻底灭菌后再处理，A错误；进行转基因研究要采取措施 8.C对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广 防止基因污染，以避免转基因产品对于环境、食物的安全性造 :泛和取得实际应用成果最多的领域，这是因为微生物具有生理 一1一 高中生物选择性必修3第45~48期 结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进时会带来伦理问题，需要监管，C错误；研究转基因农作物时应 行遗传物质操作等优点 采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染，D正确。 9.A克隆技术不成熟，也存在伦理问题，A错误；将病人 14.D国际上大多数国家在转基因食品上只注明原料来 的细胞在一定的条件下，通过离体培养和诱导分化形成胰岛细 自于转基因生物，并未注明可能的危害，A错误；治疗性克隆和 胞以治疗糖尿病，属于治疗性克隆，B正确：生殖性克隆是指通 生殖性克隆均属于有性生殖，B错误；转基因食品中含有外源 过克隆技术产生独立生存的新个体，治疗性克隆是指利用克隆 基因，要经过消化吸收才能进入身体，故食用后目的基因不能 技术产生特定的细胞、组织和器官，用它来修复或替代受损的 进入人体细胞并改变人体遗传物质，C错误；生物武器种类包 细胞、组织和器宫，从而达到治疗疾病的目的，两者都要用到克 括致病菌、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌，D正确 隆技术，而克隆技术主要通过细胞核移植技术实现的，故两者 15.B生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等， 都要用到体细胞核移植技术，C正确；我国允许生殖性克隆动 例如，天花病毒、波特淋菌、霍乱弧菌和炭疽杆菌都可以用来制 物，但禁止生殖性克隆人，D正确 造生物武器，A正确；人体对利用转基因技术制造的新型致病 10.B转基因产品通常导入了外来基因，由于基因间的互 菌可以产生免疫反应，B错误；转基因微生物可用于制备生物 作机制等原因，故对进口的转基因产品进行严格的安全检测是 武器，由于人类没有接触过这些致病菌，导致对其进行预防和 必需的，A正确；增加农业转基因技术的研发，应是趋利避害， 治疗比较困难，C正确；经过基因重组的生物武器，是经过定向 不能因噎废食，故减少农业转基因技术和治疗性克隆的研发， 改造之后产生的，因此可能使受害国居民感染而施放者不易感 不是我国为保证生物技术产品的安全性和伦理性采取的措施， 染，D正确 B错误；我国成立了国家农业转基因生物安全委员会，加强农 16.(1)不能抗虫基因具有专一性 业转基因技术研发和监管，在确保安全的基础上慎重推广，C (2)转基因植物：基因工程、植物组织培养；转基因动物： 正确；我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克 基因工程、动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植 隆人实验，以保证生物技术伦理性等，D正确 (3)减少了化学农药的使用量，降低了环境污染 11.A生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂 解析：(1)由于抗虫基因具有专一性，因此抗虫棉不能抗 类等，与常规武器、核武器和化学武器相比，生物武器成本低 病毒、细菌和真菌 廉、容易获得，A错误；生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、 (2)转基因植物的制备用到的技术主要有基因工程、植物 生化毒剂类等，造价低廉，使用简便，B正确；生物武器直接或 组织培养；转基因动物的制备用到的技术主要有基因工程、动 通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成 物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植 大规模杀伤后果，C正确；生物武器直接或通过食物、生活必需 (3)从环境保护角度出发，转基因抗虫棉与普通棉相比在 品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果，所 害虫防治方面的优越性有减少了化学农药的使用量，降低了环 以要禁止生物武器的使用，D正确 境污染。 12.D我国已批准上市的转基因食品是通过一系列的安 17.(1)限制酶和DNA连接酶便于检测目的基因是否导 全性评价，符合相应标准才能上市的，所以可放心食用，A正 人受体细胞 确；我国对于生物武器采取的态度是不发展、不生产、不储存生 (2)促进模板DNA解旋使目的基因的扩增更加充分 物武器、并反对生物武器及其技术和设备的扩散，B正确；我国 (3)一段已知目的基因的核苷酸序列26-2 支持和发展试管婴儿等辅助生殖技术，C正确：中国政府不赞 (4)错误转基因品种经检测含有目的基因并能稳定表 成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，但是不 达，且有生物活性后才能上市 反对治疗性克隆，D错误。 解析：(1)构建重组载体时，需要用限制酶切割供体DNA 13.C利用核移植技术获得胚胎分离出ES细胞治疗白 和质粒以产生相应的黏性末端，然后用DNA连接酶进行连接， 血病会产生伦理问题，A正确；新型鼠痘病毒属于生物武器，会 所以需要限制酶和DNA连接酶；构建的重组基因表达载体中 威胁人类的安全，B正确；干细胞的研究可治疗很多疾病，但同： 的标记基因，可用于检测目的基因是否导入受体细胞，从而将 -2 高中生物选择性必修3 第45~48期 含有目的基因的细胞筛选出来 (3)受精卵胚胎移植有性生殖 (2)图示中预变性及后延伸的作用分别是促进模板DNA (4)遗传学诊断（将胚胎细胞取出，进行特定基因的检测） 解旋，使目的基因的扩增更加充分 解析：(1)富商甲将自己的体细胞核移植到一枚去核的卵 (3)利用PCR技术体外扩增目的基因时，需要有一段已知 母细胞中，然后将它在体外发育成的胚胎移植到母体子宫中， 目的基因的核苷酸序列作为引物：35次循环，共形成25个 最后得到了一个健康的男婴，该过程属于无性生殖；我们把获 DNA分子，共有2×25条链，除去原来的两条链，新形成的链都 得富商甲后代的过程称为生殖性克隆；从获得水平看，做出判 需要引物，故需2×25-2=26-2个引物. 断的依据是该过程从个体水平来获得人的复制品. (4)转基因品种经检测含有目的基因并能稳定表达，且有 (2)我国政府对待克隆人的态度是不赞成、不允许、不支 生物活性后才能上市，所以该说法是错误的. 持、不接受任何生殖性克隆人实验， 18.(1)受精卵乳腺蛋白基因的启动子内质网和高尔 (3)“试管婴儿”和“设计试管婴儿”个体发育的起点都是 基体 受精卵；两者都需进行早期胚胎的培养和胚胎移植；因此二者 (2)①蛋白质的结构由基因编码，蛋白质不能复制，基因 均属于有性生殖。 可以遗传；②对基因的改造比对蛋白质的改造要容易操作 (4)“试管婴儿”和“设计试管婴儿”相比，设计试管婴儿需 (3)受精卵基因检测胚胎移植 要符合更多的条件，故在胚胎移植入母体前，还需进行遗传学 解析：(1)若想建立乳腺生物反应器，可以借助基因工程， 诊断（将胚胎细胞取出，进行特定基因的检测）。 用显微注射的方法将目的基因（千扰素基因）导入到受精卵 20.(1)颁布相关的法规、成立国家农业转基因生物安全 中.启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，用于驱动基因的 委员会等 转录，为保证干扰素基因只在乳腺细胞内表达，在构建表达载 (2)限制酶、DNA连接酶、载体 体时，需在干扰素基因前端加上在乳腺中特异性表达的乳腺蛋 (3)传染性强污染面广难以防治 白基因的启动子.干扰素需要依次在内质网和高尔基体中进行 (4)不赞成、不允许、不支持 加工后才具有生物活性，原核细胞中没有内质网和高尔基体， 解析：(1)我国对转基因技术进行严格管理，坚持依法监 所以一般不选择原核细胞作为受体细胞来生产干扰素。 管.国家有关部门制定实施了一系列的法规，我国还成立了专 (2)对干扰素进行改造，应该通过对干扰素基因的操作来 门的国家农业转基因生物安全委员会， 实现，原因是：①蛋白质的结构都是由基因编码的，改造了基因 (2)基因工程所需工具包括限制酶、DNA连接酶、载体等， 也就是对蛋白质进行了改造，蛋白质不能复制，基因可以遗传 (3)生物武器具有传染性强、污染面广、难以防治等特点。 ②对基因进行改造比对蛋白质直接进行改造要容易操作，难度 (4)中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、 小 不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验)，但不反对 (3)试管动物是通过人工操作使卵子在体外受精，经培养 治疗性克隆 发育为早期胚胎后，再进行移植产生的个体，试管婴儿的培育 第46期3版题参考答案 与试管动物类似.可见，试管婴儿技术和母亲正常怀孕生育过 1.C生产酱油时利用霉菌（黑曲霉）产生蛋白酶将蛋白 程的相同之处是都是以受精卵为发育起点，不同之处在于试管 质分解成小分子的肽和氨基酸，A正确；霉菌是需氧型生物，生 婴儿是在体外进行受精后，在试管中进行胚胎培养.如果要设 产酱油时补充充足的氧气可以防止乳酸菌发酵产生乳酸，防止 计试管婴儿，还需要对胚胎进行基因检测，最后选取健康的胚 酱油发酸，B正确：加盐酿制的目的是抑制发酵过程杂菌生长， 胎进行胚胎移植，保证生出健康的孩子。 同时提高酱油的鲜味，C错误；发酵后通过淋洗、添加着色剂、 19.(1)无性生殖生殖性该过程从个体水平来获得人 增味剂等调制成酱油，D正确， 的复制品 2.D肺炎支原体的遗传物质是DNA,新冠病毒的遗传物 (2)不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实 质是RNA,A错误；青霉素是能破坏细菌细胞壁的一类抗生素， 验 对新冠病毒引发的肺炎和支原体肺炎均无治疗作用，B错误； 3 高中生物选择性必修3第45~48期 与肺炎支原体相比，新冠病毒的主要结构特点是无细胞结构，：量繁殖提供适量的氧气，又防止发酵旺盛时汁液溢出，此外还 C错误；病毒无细胞结构，无法在培养基上繁殖，故依据菌落特 有效地利用了空间，D错误 征可判断病人是否有支原体感染，D正确 7.A核移植时应将供体细胞核注人去核的卵母细胞中， 3.B酵母菌是兼性厌氧型生物，可进行有氧呼吸，也可 :A错误；由表信息分析可知，与饥饿0d相比，2d时卵裂率和囊 进行无氧呼吸，都有C02产生，酿酒过程中，发酵液出现的气 i 胚率相对较高，所以适当地对供体细胞进行饥饿处理有利于重 泡主要是酵母菌产生的，A正确；在酿酒的过程中，糖类即使未 组胚构建，B正确；由表信息可知，当饥饿处理8d时，卵裂率和 耗尽，酵母菌的发酵过程也会停止，原因可能是pH降低和酒 囊胚率都较低，可能是过度的饥饿处理导致营养成分不足，使 精含量增多，对发酵起抑制作用，导致酵母菌发酵停止，B错 细胞发生凋亡，C正确；胚胎移植是指将雌性动物体内的早期 误；酒变酸是醋酸菌发酵的结果，发酵装置密封不严，导致醋酸 胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种 菌混入发酵液中，产生果醋，C正确；用显微镜计数法统计酵母 的、生理状态相同的其他唯性动物的体内，使之继续发育为新 菌数量，统计的是显微镜下能看到的酵母菌，包括活酵母菌和 个体的技术，所以获得的囊胚可以移植到生理状态相同的野猪 死的酵母菌，所以测得结果比实际数量偏大，D正确 子宫内继续发育，D正确 4.D甲醇蛋白是毕赤酵母的胞内蛋白，筛选能高效利用 8.C若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术或PEG诱 甲醇的毕赤酵母时，应以甲醇为唯一碳源，A正确；微生物培养 导等方法使处理①和②后获得的原生质体融合，A正确；采集 的核心是防止杂菌污染，因此，虽然甲醇对多数微生物有毒性， 到的卵母细胞和精子要分别在体外进行成熟培养和获能处理， 发酵生产甲醇蛋白时也需检测是否有杂菌污染，B正确；发酵 然后才能用于体外受精，B正确；若为动物细胞核移植过程，需 时，发酵温度、培养液的渗透压和pH均会影响毕赤酵母的生 将供体细胞①注人去核的卵母细胞②，两细胞融合后形成重构 长繁殖，因此也会影响甲醇蛋白产量，C正确；饲料微生物是指 胚，C错误；若为动物细胞融合过程，形成的③需置于95%的空 做为畜、禽和鱼类的饲料以及适用于加工或改善饲料质量的微 气和5%的C0,混合气体中培养，其中CO,的主要作用是维持 生物，因此用作动物饲料时，需要直接培养毕赤酵母菌体，D错 培养液的pH,D正确 误。 9.B动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需 5.D酵母菌是兼性厌氧菌，可进行有氧呼吸和无氧呼 要添加血清等物质，A正确；植物细胞培养的目的主要是获得 吸，通入氧气后，酵母菌进行有氧呼吸，通入其他气体，酵母菌 植物细胞的次生代谢产物，次生代谢不是生物生长所必需的， 进行无氧呼吸，故改变通人气体种类可以研究呼吸作用类型对 B错误；胚胎工程可用于稀有动物的种族延续和培育生物制药 发酵的影响，A正确；果酒发酵中期通入氮气，装置中氧气减 的反应器，C正确；诱导人成纤维细胞重编程为肝细胞的成果 少，使酵母菌从有氧呼吸转变为无氧呼吸，B正确；温度影响酶 表明，已分化细胞的状态是可以改变的，D正确、 的活性，故果醋的发酵周期与实验设定的温度有密切关系，C 10.C细胞核移植时去核是去掉卵母细胞中的纺锤体 正确；气体入口管通入液面以下，气体出口管在液面以上，不能！ 染色体复合物，A错误；若子代为克隆动物，则其核遗传物质与 交换使用，D错误 细胞核供体相同，但细胞质遗传物质不同，B错误；试管动物、 6.D果酒的制作利用的微生物是酵母菌.酵母菌在无氧 转基因动物的培养可能都经过体外受精、胚胎移植的过程，C 条件下可以产生酒精和二氧化碳，在有氧条件下可以产生二氧 正确；受体动物对外来胚胎一般不发生免疫排斥反应，胚胎移 化碳和水，并大量增殖，因此酵母菌属于兼性厌氧型微生物，A 植过程受体动物不需要使用免疫抑制剂，D错误。 正确；果酒发酵需要适宜的温度，制作果酒时，需要将温度严格 11.B限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的 控制在18~30℃范围内，B正确：甲装置与一个盛有氢氧化钠 几率就越大，A错误；一CATG↓一和一G↓GATCC-一序列被限 的试管相接，用于吸收二氧化碳.与乙装置相比，甲装置能及时 制酶切出的黏性末端碱基数相同，都是4个，B正确；用不同的 吸收发酵产生的和原有的二氧化碳，相比乙装置，甲装置与空 !限制酶处理含目的基因的片段和质粒，也可能形成相同的黏性 气接触的机率更小，故可以减少被杂菌污染的机会，C正确；葡 末端，再用DNA连接酶也可能形成重组质粒，C错误；用限制 萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这既为酵母菌大：酶从一个DNA分子中部获取一个目的基因时，需要切开两个 4 高中生物选择性必修3第45~48期 切口，断裂4个磷酸二酯键，D错误. 解析：(1)面汤中含有丰富的糖类，可以为乳酸菌发酵提 12.B幼嫩的叶片、子叶、胚轴等分裂旺盛的组织作为外 供碳源和能源 植体更容易再生成转基因植株，A正确；M期细胞基因位于高 (2)由于酸浆发酵中需要加盖（无氧），而醋酸杆菌是好氧 度螺旋化的染色体上，相比S期的细胞外源基因难以插入完成 菌，故发酵过程中发挥主要作用的微生物是乳酸菌.该微生物 转化，B错误；为了获得转基因植株，所选择的外植体应易于组 不能在热烫后马上加人的原因是防止温度过高，杀死乳酸菌。 织培养且有较强的再生能力，C正确；经切割处理的外植体分 (3)分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法， 泌大量的酚类化合物，从而有利于吸引农杆菌并接纳T一DNA: 而只有稀释涂布平板法同时可以用于计数.1mL悬液中活菌 片段，D正确 数量为(39+41+42+43+45)/5×10/0.1=4.2×107个，这 13.D久置的洋葱管状叶其内的色素会分解，特别是叶 样的计数方法所得结果比实际值偏小的原因是当两个或多个 绿素分解较多，叶片变黄，在“绿叶中色素的提取和分离”实验 细胞连在一起时，平板上只有一个菌落 中，滤纸条从上至下分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿 17.(1)次生不是不能 素b,用久置的洋葱管状叶做材料，滤纸条上仍然会出现前两 (2)脱分化特有的结构和功能 个条带，A错误；DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，B (3)纤维素酶和果胶提高培养液中的溶氧量；使细胞与 错误；低温诱导染色体数目加倍的机制是抑制纺锤体形成，C 营养物质充分接触，提高营养物质的利用率 错误；质壁分离的过程中，洋葱鳞片叶外表皮的细胞液浓度逐 (4)不占用耕地；几乎不受季节、天气等的限制；有利于保 渐升高，所以吸水能力逐渐增大，D正确。 护濒危植物红豆杉 14.C动物细胞培养用胰蛋白酶处理细胞间的胶原蛋白 解析：(1)紫杉醇不是红豆杉体内维持细胞生命活动所必 使之分散开，应用了酶的单一性，只分解胶原蛋白，A正确；单 需基本代谢物，不是出生代谢产物，是次生代谢产物.利用植物 克隆抗体技术需要进行B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，体现 细胞培养技术进行细胞产物的工作化生产不能体现植物细胞 了细胞膜的流动性，B正确；PCR技术的复性过程是运用碱基 全能性。 互补配对原理使引物结合在DNA模板链的3'端，子链的延伸 (2)①表示脱分化过程，在此过程中，已经分化的红豆杉 方向为5'3'，C错误；细胞核移植一般选用去核卵细胞提供 细胞将失去特有的结构和功能，转变成未分化的细胞 细胞质，因为细胞质可调控细胞核基因表达，D正确 (3)②过程将愈伤组织分散成单个细胞，需使用纤维素酶 15.D反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术 和果胶酶，因为植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶.分散 选择性设计婴儿，造成性别不均，A正确；当今社会与我国政府 成单个细胞后，在液体培养基中悬浮振荡培养.振荡的目的是 的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆，但治 提高培养液中的溶氧量；使细胞与营养物质充分接触，提高营 疗性克隆也需要政府审批，B正确；转基因生物的安全性问题 养物质的利用率。 有食物安全（滞后效应、过敏原、营养成分改变）、生物安全（对 (4)植物细胞培养技术获得紫杉醇的优点是不占用耕地； 生物多样性的影响)、环境安全（对生态系统稳定性的影响） 几乎不受季节、天气等的限制；有利于保护濒危植物红豆杉 等，应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害 18.(1)胚胎干细胞 的物质，C正确；生物武器是用致病菌、病毒、生化毒剂，以及经 (2)无菌无毒的环境、适宜的温度、pH和渗透压作为载 过基因重组的致病菌等来形成杀伤力，而干扰素是免疫活性物 体，将目的基因（外源基因）导入小鼠成纤维细胞（受体细胞） 质，D错误。 中 突变或过量表达0ct3/4、Sox2、和KIf40ct3/4、Sox2、 16.(1)面汤中含有丰富的糖类，可以为乳酸菌发酵提供 f4和c-Myc 碳源和能源 解析：(1)干细胞主要包括成体干细胞和胚胎干细胞 (2)乳酸菌防止温度过高，杀死乳酸菌 (2)①进行细胞培养时，需要提供必需的营养、适宜的温 (3)稀释涂布平板4.2×10'？当两个或多个细胞连在一 度、H和渗透压、气体环境以及保证细胞处于无菌、无毒的环 起时，平板上只生长有一个菌落 境 5 高中生物选择性必修3第45~48期 ②逆转录病毒可以通过逆转录合成DNA,并且将合成的接，质粒与质粒的连接 DNA整合到宿主细胞的DNA上，在该实验中，逆转录病毒的 (2)胰蛋白酶或胶原蛋白防止处理时间过长，影响细胞 作用是做为载体，将关键（外源）基因(Oct3/4、Sox2、KI4、c- 的完整性 My沁)送入小鼠成纤维细胞 (3)显微注射选择培养基培养动物体细胞核移植技 ③原癌基因主要作用是调节细胞周期，控制细胞生长和分 术，早期胚胎培养技术，胚胎移植 裂的进程，当原癌基因突变或过量表达时，会导致相应蛋白质 解析：(1)通过向细胞中导入MSTN基因的反义基因也可 活性过强，可能导致细胞癌变.由于将c-Myc导入成纤维母细 实现MSTN基因表达沉默，使MSTN基因不表达，机理可能是 胞诱导获得的ps具有患恶性肿瘤的风险，因此研究c-Myc MSTN基因的反义基因转录形成的mRNA与MSTN基因转录 在诱导获得PS细胞的过程中是否必需可进行对照实验设计， 形成的mRNA互补配对，导致下一步的翻译不能进行，从而使 一组有c-Myc基因导人，一组没有，观察诱导情况.具体实验 基因表达沉默；同种限制酶会产生相同的黏性末端，所以对目 设计思路为：将导入Oct3/4、Sox2和Kf4的小鼠成纤维细胞， 的基因和质粒分别进行切割后连接，可能会有目的基因与目的 与导入Oc3/4、Sox2、K4和c-Myc的小鼠成纤维细胞的诱导 基因的连接，目的基因与质粒的连接，质粒与质粒的连接，因此 情况进行比较. 需要对重组质粒进行筛选， 19.(1)5'CCTAGGTA一3'：5'-GTCGACTT--3'琼脂糖 (2)通过无菌手术取35日龄的山羊胎儿组织，再用胰蛋 凝胶电泳 白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，但要严格控制 (2)构建基因表达载体不能会破坏CaLasLYS的完整 处理时间，其原因是防止处理时间过长，影响细胞的完整性，并 性 制成细胞悬液进行培养 (3)向组培苗接种柑橘韧皮部杆菌 (3)采用显微注射的方法将目的基因导入山羊胎儿成纤 (4)造成基因污染；引起食用者过敏反应 维细胞，利用选择培养基培养的方法可筛选出MSTN基因突变 解析：(1)引物引导子链合成的方向是5’3′，根据碱基互 的细胞株作为供核细胞，再依次通过动物体细胞核移植技术 补配对原则可知，利用PCR技术扩增CaL.asLYS需要设计引 早期胚胎培养技术、胚胎移植技术最终获得具有“双肌”表型 物，各包含8个碱基的一对引物为：5'一CCTAGGTA-一3'：5'一 的山羊 GTCGACTT-一3'.PCR扩增完成后可用琼脂糖凝胶电泳法来鉴 第47期3版题参考答案 定产物，其原理是根据DNA的分子量大小实现对不同DNA片 1.D微生物的纯培养物就是由单一个体繁殖所获得的 段的分离 微生物群体，A错误；平板划线法可以用于微生物的纯培养，不 (2)为使获得的目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗 可用于微生物计数，B错误；利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋 传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用，需要进行 白属于微生物菌体，可制成微生物饲料，C错误；在农牧业中， 的操作是构建基因表达载体.CaLasLYS是目的基因，含有该操 利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物，D 作所选用的限制酶的识别序列，否则会破坏CaLasLYS的完整 正确， 性 2.C在自然界中寻找目的菌株时，要根据它对生存环境 (3)经植物组织培养获得的组培苗为个体，故可通过向组 的要求，到相应的环境中去寻找，应在富含聚乙烯的海洋环境 培苗接种柑橘韧皮部杆菌来确定CaLasLYS是否赋予了组培苗 中筛选所需的海洋真菌，A正确；用接种环在培养基表面对样 抗柑橘黄龙病的特性 品连续划线、逐步稀释，纯化海洋微生物，B正确：筛选和纯化 (4)转基因柑橘存在转基因，可能造成基因污染、引起食 该类微生物的培养基应以聚乙烯为唯一碳源，C错误；后期可 用者过敏反应等风险 进一步利用基因工程方法增强微生物降解聚乙烯的能力，D正 20.(1)MSTN基因的反义基因转录形成的mRNA与 确 MSTN基因转录形成的mRNA互补配对，导致下一步的翻译不 3.D啤酒生产需要筛选产酒精量高的酵母菌，因此使用 能进行目的基因与目的基因的连接，目的基因与质粒的连 基因工程改造的啤酒酵母，产酒精量较高，可以加速发酵过程， 6 高中生物选择性必修3第45~48期 缩短生产周期，A正确：在生产实践中，培养基的配方需以满足：作用，C正确：用适宜浓度的生长素类似物处理未受粉的番茄 培养菌种的生存为前提，兼顾成本和原材料获取的方便程度， 雌蕊，促进子房发育成果实，可获得无子番茄，D正确 要经过反复试验才能最终确定，B正确；培养基和发酵设备都 8.C动物细胞培养时需在含有5%的C02中进行，目的 必须经过严格灭菌，防止杂菌污染影响产量，C正确：利用发酵 是维持培养液的pH,A正确；动物细胞培养需要保证无菌无 工程获得发酵产品时，通常要经过菌种的选育、扩大培养、培养 毒，定期更换培养液的目的是防止代谢产物积累对细胞产生毒 基的配制和灭菌、接种、发酵、产品的分离和提纯等步骤，其中， 害，B正确；正常体细胞在培养过程中会出现接触抑制和贴壁 发酵是发酵工程的中心环节，D错误 生长现象，但癌细胞能无限增殖，故在培养过程中不会出现接 4.C啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酵母 触抑制的现象，C错误；动物细胞培养材料大都取自胚胎或出 菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段 生不久的幼龄动物的器官或组织，主要原因是幼龄动物的器官 完成，A正确：加大酵母菌菌种的接种量，会使发酵进程加快 或组织细胞分裂能力强，D正确， 发酵时间缩短，B正确；使用耐热的酿酒酵母，能在较高温度下 9.D诱导杂交瘤细胞A和B融合可以用电融合法、PEG 进行发酵，可降低发酵时冷凝的成本，C错误；用赤霉素处理大 诱导融合法和灭火病毒诱导法，A正确：可利用抗原一抗体杂 麦，可以使大麦种子无须发芽就能产生-淀粉酶，简化了操 交法筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞，B正确；双杂交瘤细胞 作程序，节约发酵成本，D正确 AB由杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B融合而来，本身就能产生 5.D取附着在手机上细菌进行取样培养后，对菌液进行 相应抗体，因此无需识别α、B抗原就能产生双特异性抗体，C 系列梯度稀释的目的是将微生物分散成单个细胞，进而获得单 正确：双杂交瘤细胞AB不会出现接触抑制现象，传代培养时 个的菌落，A正确；牛肉膏、蛋白胨提供的主要营养是氮源、维 无需用机械的方法或胰蛋白酶处理，D错误 生素和生长因子，A平板上生长的菌落有多种形态，说明附着 10.B大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数 在手机细菌种类较多，该培养基很可能是牛肉膏蛋白胨培养 限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，A 基，B正确；分析题意可知，伊红一亚甲蓝染液可使大肠杆菌菌 错误；限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且 落呈深紫色，由图可知3号菌落为大肠杆菌菌落，C正确；为保 使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，即一条链断1个磷 证没有其他微生物的干扰，需要对培养基和培养皿进行灭菌，！ 酸二酯键，产生1个游离的磷酸基团，所以限制酶切割DNA分 但培养基的灭菌方法是湿热灭菌，通常用高压蒸汽灭菌法，D 子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团，B 错误。 正确；T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性 6.D若A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体，则杂种细 末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶 胞C需经脱分化和再分化后才能形成杂种植株，脱分化过程切开的磷酸二酯键，而不是氢键，C错误；作为载体的质粒通常 需要避光培养，A错误；若A、B分别表示B淋巴细胞和骨髓瘤 采用抗性基因（四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因）作为 细胞，诱导融合之后的细胞需先借助选择培养基筛选出杂交瘤 标记基因，便于重组DNA分子的筛选，D错误， 细胞，再利用抗原一抗体杂交筛选出可分泌特定抗体的C,B 11.B灭活病毒处理是为了促进体细胞的细胞膜与卵母 错误；若A、B分别表示精子和卵细胞，则C需培养至桑葚胚或 细胞的细胞膜融合，A错误；动物组织培养需要一定浓度C02 囊胚阶段再进行胚胎分割，C错误；若A、B分别表示体细胞和 适宜的温度和pH等条件，B正确；用胎猴的体细胞进行克隆的 去核卵母细胞，则C的细胞核遗传物质来自A,细胞质遗传物 成功率显著高于成年猴的体细胞，C错误；遗传物质相同的个 质来自A和B,D正确. 本形状表现不一定完全相同，还受环境因素的影响，D错误。 7.A提高培养基中细胞分裂素与生长素的比值可促进 12.C若只用一种限制酶切割目的基因和T质粒，会产 愈伤组织分化生芽，A错误；双子叶植物比单子叶植物更敏感， 生相同的末端而导致反问连接，A正确；培育转Z基因的新品 2,4-D可杀死禾谷类田间双子叶杂草是由于双子叶植物对 系的过程利用了叶片作为外植体培育成植株，体现了植物细 2,4-D的敏感性高，B正确；生长素能抑制双子叶植物花、叶 胞的全能性，B正确；成功转入重组Ti质粒的叶片细胞培育成 和果实的脱落，乙烯能促进植物花、叶和果实的脱落，二者相互 的植株中基因乙不一定能稳定遗传和表达，还要进行进一步的 7 高中生物选择性必修3第45~48期 筛选，C错误；重组DNA技术将不同来源的基因按预先设计的 (2)实验室内测定野油菜黄单胞杆菌数量的方法有显微 蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，最终达到 镜计数法和稀释涂布平板法；用稀释涂布平板法计数时，当两 定向改变生物的性状的目的，D正确， 个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故 13.D预冷酒精溶液的作用有：抑制核酸水解酶的活性， 统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少 防止DNA降解；降低分子运动，易于形成沉淀使DNA析出等， (3)黄原胶不是植物生长必须的，属于次生代谢物；生产 A正确；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mo/ 黄原胶的微生物是细菌，因此生产黄原胶的发酵罐内的pH需 L的NaCI溶液中溶解度较高，B正确；蛋白质杂质会使丝状提 调至中性或弱碱性， 取物变黄，若提取出白色丝状物，说明DNA中杂质少，C正确； (4)用发酵工程工业化生产黄原胶时，若要获得黄原胶可 碱性染料甲紫用于染色观察染色体，提取出来的DNA需用二 根据其性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。 苯胺试剂鉴定，D错误。 17.(1)让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给 14.D基因表达载体包括启动子、目的基因(B-珠蛋白 下一代；使目的基因能够表达和发挥作用限制酶磷酸二酯 基因)、标记基因（抗四环素基因）、终止子等，A正确；B一珠蛋 键 白基因属于目的基因，可以正常小鼠DNA分子为模板，利用 (2)发育的全能性囊胚将内细胞团均等分割 PCR技术扩增，B正确；标记基因是四环素抗性基因，因此可用 (3)外源基因、去核卵母细胞中的细胞质 含有四环素的培养基筛选出已经导入B一珠蛋白编码序列的 解析：(1)构建基因表达载体的目的是让目的基因在受体 大肠杆菌，C正确；标记基因是四环素抗性基因，说明受体细胞 细胞中稳定存在，并且遗传给下一代：使目的基因能够表达和 大肠杆菌本身不具有四环素抗性，D错误。 发挥作用.构建基因表达载体时切割DNA的工具酶是限制酶， 15.C设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合 这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开. 伦理道德的，可能会存在负面影响，A正确；设计试管婴儿是指 (2)由于受精卵具有发育的全能性，因此培育转基因动物 体外受精形成的胚胎在植人母体孕育前，根据人们的需要，将 时常将目的基因导人受精卵.胚胎发育过程中，当胚胎的内部 胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测，设计试管婴儿利用 出现含有液体的腔，此时期的胚胎叫作囊胚，若要分割该阶段 了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技 的胚胎，要注意将内细胞团均等分割，防止因分割不均匀影响 术，B正确；设计试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准， 胚胎发育， 以防该技术滥用，试管婴儿技术为许多不孕夫妇解决了不育问 (3)动物乙含有受体细胞2的遗传物质（或基因）、去核卵 题，同样也需要得到政府的审批，C错误；将设计试管婴儿技术 母细胞的细胞质中的遗传物质（或基因）以及导入受体细胞2 滥用于设计婴儿性别也是该技术引发争议的原因之一，D正 中的外源基因，而受体细胞2的遗传物质与提供受体细胞2的 确。 动物相同，因此动物乙与提供受体细胞2的动物的遗传物质存 16.(1)水、碳源、氮源和无机盐湿热灭菌（或高压蒸汽 在差异。 灭菌) 18.(1)成熟筛管细胞I、Ⅱ不完全B这种细胞 (2)稀释涂布平板法少当两个或多个细胞连在一起 直处在不断增殖的状态，容易受到培养条件和诱变因素的影响 时，平板上观察到的只是一个菌落 产生突变 (3)次生中性或弱碱性 (2)I脱分化PS细胞来自病人的体细胞，不发生免 (4)提取、分离和纯化 疫排斥（或无需破坏胚胎，不涉及伦理问题） 解析：(1)虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含 (3)否动物细胞培养只涉及细胞增殖，不涉及细胞分化 有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和 解析：(1)由于成熟筛管细胞没有细胞核，而表皮细胞和 无机盐，故培养黄原胶的培养基中含有的营养物质有水、碳源、 叶肉细胞都有细胞核，所以在所给细胞中不能作为外植体的是 氮源和无机盐等；对培养基进行灭菌的方法是湿热灭菌（或高 成熟筛管细胞.根据图示分析可知，过程【是脱分化，过程Ⅱ是 压蒸汽灭菌)。 再分化，在I、Ⅱ阶段中都会发生基因选择性表达.A、B细胞的 —8— 高中生物选择性必修3第45~48期 分化状态不同，所以两个细胞中的蛋白质种类不完全相同.由 (6)微生物培养的关键是无菌技术，对培养基进行灭菌的 于B细胞处于未分化的状态，这种细胞一直处在不断增殖的 常用方法是高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）；为防止皿盖上冷凝水 状态，容易受到培养条件和诱变因素的影响产生突变，所以若 落入培养基造成污染，同时为避免水分蒸发，需要将培养基倒 要培育半夏新品种，常常用射线、化学物质等处理图中的B细 置 胞 (7)由于当两个或者多个细胞连在一起时，平板上观察到 (2)根据题干信息可知，PS细胞增殖分化后能形成多种 的只是一个菌落，故计算的数据要比实际活菌的数目少 组织细胞，PS细胞是未分化的细胞，所以将4种基因导人小鼠 20.(1)DNA聚合促性腺激素减数第二次分裂中(M 成纤维细胞后，经过I阶段的变化产生PS细胞，由分化后的 Ⅱ)同期发情 小鼠成纤维细胞转变为未分化的PS细胞，该过程类似于植物 (2)抗原一抗体杂交法未使用无毒的前体药物更昔洛 组织培养的脱分化过程.因为PS细胞来自病人的体细胞，不 韦(GCV) 发生免疫排斥（或无需破坏胚胎，不涉及伦理问题），所以科学 (3)使含Y染色体的受精卵不能发育，从而筛选出雌性胚 家普遍认为PS细胞的应用前景优于胚胎干细胞 胎 (3)根据图示分析可知，过程I是脱分化，过程Ⅱ是再分 解析：(1)TK酶可将无毒的前体药物更昔洛韦(GCV)转 化.因为动物细胞培养只涉及细胞增殖，不涉及细胞分化，所以 化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞分裂，DNA 上述流程不可以表示动物细胞培养技术的流程。 复制时，DNA聚合酶的作用就是形成磷酸二酯键，从而延伸 19.(1)兼性厌氧 DNA链.为了获得更多的卵母细胞，需对奶山羊乙注射促性腺 (2)18~30℃每隔12小时拧松瓶盖一次 激素，并将获得的卵母细胞培养至减数第二次分裂中(MⅡ)期 (3)将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸 去核.对早期胚胎移植前需对奶山羊丙进行同期发情处理，便 (4)乳酸菌0.4%~0.8% 于移植胚胎的正常发育。 (5)选择 (2)TK基因成功表达的产物是蛋白质，可采用的检测方 法是抗原一抗体杂交技术.TK酶可将无毒的前体药物更昔洛 (6)高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）防止皿盖上冷凝水落入 韦(GCV)转化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞 培养基造成污染：避免水分蒸发 分裂，最终使细胞凋亡.检测结果显示细胞中TK基因正常表 (7)当两个或者多个细胞连在一起时，平板上观察到的只 达，但细胞仍能正常分裂，原因是未使用无毒的前体药物更昔 是一个菌落 洛韦(GCV),从而缺少有毒性的物质。 解析：(1)酵母菌既能进行有氧呼吸，也能进行无氧呼吸， (3)将TK基因插入奶山羊的Y染色体上，含Y染色体的 是一类兼性厌氧微生物， 受精卵会因为TK酶的存在而无法分裂，不含Y染色体的受精 (2)利用酵母菌发酵制作葡萄酒时一般将温度控制在18 卵则能正常完成胚胎发育，因此此研究中“TK-GCV”自杀基 ~30℃；酵母菌呼吸作用会产生二氧化碳，发酵过程中，定期 因系统在奶山羊育种中的意义是使含Y染色体的受精卵不能 排气的方法是每隔12小时拧松瓶盖一次 发育，从而筛选出雌性胚胎 (3)当缺少糖源时，醋酸发酵原理是：将乙醇转化为乙醛， 第48期3版题参考答案 再将乙醛变为乙酸。 1.A酵母菌在有氧条件下能快速增殖，无氧条件下能分 (4)泡菜发酵所需的菌种是乳酸菌；发酵期间，酸性物质 解葡萄糖产生酒精并产生CO2·为了增加酵母菌的浓度，并防 不断积累，当它的质量分数达到0.4%~0.8%时，泡菜口昧 止发酵旺盛时发酵液溢出，酿酒前葡萄汁不能装满发酵瓶，要 品质最佳， (5)在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时 留有约了的空气，A错误；酿酒的原理是酵母菌无氧呼吸产生 抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基， 酒精和C02,所以酿造过程中产生的气泡是酵母菌细胞呼吸的 可以通过提高培养基中盐的浓度来筛选被调查细菌，这种培养 产物CO2,B正确；橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇 基被称为选择培养基 发生化学反应，变成灰绿色，所以可用于酒精的检测，C正确； 高中生物选择性必修3第45~48期 在酿造葡萄酒时，发酵瓶适当通气有利于酵母菌有氧呼吸产生基因工程，最后培养得到的是完整植株，能体现细胞的全能性， 更多的能量，有利于酵母菌的生长和繁殖，D正确 D正确， 2.C试管口等容易被污染的部位通过火焰灼烧5秒钟属 7.D在体外培养细胞时，必须保证环境是无菌，无毒的， 于灼烧灭菌，A错误；培养皿等玻璃器皿放入干热灭菌箱中加 !A正确；02是细胞代谢（细胞呼吸）所必需的，C02有利于维持 热1~2小时属于干热灭菌，B错误；牛奶等不耐高温的液体在 培养液H的稳定，故动物细胞培养时需要有95%的空气和 62~65℃条件下煮30分钟属于巴氏消毒法，C正确；含培养基 5%的C02,B正确：使用合成培养基时，通常要加人血清、血浆等 的锥形瓶放人高压蒸汽灭菌锅加热20分钟属于高压蒸汽灭 一些天然的成分，以利于动物细胞生长，C正确；细胞体外培养 菌，是湿热灭菌的一种，D错误 的适宜温度和动物体温相近，哺乳动物动物多以36.5±0.5℃ 3.C筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，应在被原油 为宜，多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4，D错误。 污染的土壤中获取，所以应配制来源于被原油污染的土壤稀释 8.A感染非洲猪瘟病毒后，病毒是胞内寄生物，因此机 液作为菌液进行接种，A正确；配制选择性培养基，该培养基与 体依赖体液免疫和细胞免疫等特异性免疫过程清除病毒，A错 通用培养基成分的主要区别应该是以原油（多环芳烃）为唯一 误；制备单克隆抗体时，诱导动物细胞融合常用聚乙二醇 碳源，这样在该培养基上只有能分解原油的微生物能在该培养 (PEG)融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等方法，B正确；杂 基上生长，而其他微生物的生长被抑制，B正确；在无菌环境 交瘤细胞培养时不会出现接触抑制现象，C正确；单克隆抗体 下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，若将士壤稀释液灭菌 具有特异性强，灵敏度高的特点，故可利用该单克隆抗体快速 则会杀死原有菌种，导致实验失败，C错误；有些细菌可以利用 准确地检测出家猪是否感染了ASFV,D正确 原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈，据此可知， 9.A在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法 在选择性培养基上能形成分解圈的可能为所需菌种，D正确。 (如电刺激、C+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等)激活受体 4.B发酵罐内发酵才是发酵工程的中心环节，A错误；在 细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，用电融合法、聚乙二醇融 发酵工程中选育出优良的菌种，要扩大培养后才能接种到发酵 合法处理可促进皮肤细胞与去核卵母细胞融合，A错误；“大 罐内发酵，B正确；发酵过程糖蜜浓度太高会使嗜盐单胞菌失 蒜”与亲代猫的细微差异可能是受细胞质基因的影响，因为核 水过多而死亡，C错误；嗜盐单胞菌产生的PHA在营养物质丰 移植过程使两者的核基因相同，B正确；动物细胞的全能性受 富时会贮存在细胞中，因此直接将培养液过滤无法从滤液中获 到限制，所以不直接用皮肤细胞进行克隆，C正确：皮肤细胞核 得PHA,D错误 移植到去核卵母细胞后需激活以使重构胚正常发育，D正确 5.D①过程需对外植体进行消毒以防止后续培养过程 10.D胚胎细胞分化程度低，胚胎细胞核移植的难度低 中杂菌污染，且有利于获得脱毒苗，A错误；愈伤组织是一团没 于体细胞核移植，A正确；兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞 有特定结构和功能，排列疏松而无规则，高度液泡化的不定形 核表达全能性的物质，故用去核后的兔子卵母细胞作为受体细 的薄壁组织团块.愈伤组织是由外植体脱分化形成，它要经过 胞，B正确；融合后的重组胚胎，需要用物理或化学的方法进行 再分化才能形成植物个体，因此愈伤组织是未分化的，具有分 激活，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；卵母细胞去核的 裂分化能力，B错误；盐酸会杀死细胞，不能用盐酸分离细胞，C 方法是显微操作法，还可以用紫外光短时间照射等方法，D错 错误；在脱分化过程中一般不需要光照，利于形成愈伤组织，再 误 分化过程中光可诱导叶绿素的合成，可诱导植物形态建成，D 11.B同源染色体间非姐妹染色单体的互换，发生在减数 正确， 第一次分裂前期，因此Holliday连接体出现在减数第一次分裂 6.C在基因工程中，将目的基因导人受体细胞后，可通 前期，A正确；光学显微镜下可以观察到染色体，但是该过程中 过相应的选择培养基或其他方式初步筛选出含SOD基因的新 染色体的大小，形态和长度并未发生改变，因此无法借助光学 细胞，A正确；②过程形成愈伤组织，因此表示脱分化，脱分化 显微镜对分子交叉互换的结果进行观察，B错误；同源染色体 需要避光培养，B正确；③过程是再分化，所用激素的比例与脱 间互换中存在染色体的断裂和重新连接，断裂时需要限制酶的 分化时所用的比例不一样，C错误；该过程既有细胞工程也有： 催化，重新连接需要DNA连接酶的催化，C正确；同源染色体 10 高中生物选择性必修3第45~48期 非姐妹DNA间的交叉互换过程发生了基因重组，基因重组为 16.(1)细菌选择 有性生殖生物的进化提供了丰富的原材料，D正确， (2)碳源、无机盐蛋白质、核酸 12.C将含有目的基因的表达载体导人牛胚胎成纤维细 (3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉 胞(BEF)作为核供体细胞，A正确：胚胎移植的胚胎应是具有 被水解，形成透明圈 全能性的胚胎，因此需要将重组细胞体外培养至早期囊胚再进 (4)乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差 行胚胎移植，B正确；高产赖氨酸转基因克隆奶牛的核物质来 悬殊，结果的重复性差 自核供体奶牛，因此性状与核供体牛极为相似，C错误；克隆奶 17.(1)能够引起机体产生特异性免疫反应的物质动物 牛体内是否导入目的基因，可用DNA分子杂交技术检测，D正 细胞融合、动物细胞培养 确。 (2)聚乙二醇(PEG)融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 13.D人凝血因子基因与载体的结合通常是黏性末端的 等5 相互连接，涉及碱基互补配对，A正确；该转基因羊是由含有人 (3)杂交瘤细胞不能无限增殖 凝血因子基因的重组克隆细胞培养形成的，正常情况下，所有 (4)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型（或“筛 体细胞均含有人凝血因子基因，产生的生殖细胞中可能会含有 选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体”) 人凝血因子基因，B正确；基因工程中，目的基因导入动物细胞 (5)注射到小鼠腹腔内增殖 通常用显微注射法，C正确；用基因工程技术培育转基因羊作 解析：(1)能够引起机体产生特异性免疫反应的物质叫做 为乳腺生物反应器是让该羊所有乳腺细胞均可能产生人凝血 抗原.根据单克隆抗体制备流程可知，该过程涉及到的技术有 因子，乳腺生物反应器所指对象为转基因个体羊，而将含有人 动物细胞融合技术、动物细胞培养技术。 凝血因子基因的表达载体导人羊乳腺细胞中，只是让受体乳腺 (2)过程②诱导融合的方法是聚乙二醇(PEG)融合法、电 细胞可能产生人凝血因子，不是乳腺生物反应器，D错误。 融合法和灭活病毒诱导法等.仅考虑某两个细胞的融合，则可 14.B蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出 能形成骨髓瘤细胞一骨髓瘤细胞、B淋巴细胞一B淋巴细胞、 发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到 骨髓瘤细胞一B淋巴细胞3种融合细胞；另外，还有部分B淋 并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获 1 巴细胞、骨髓瘤细胞不发生融合，总共形成5种类型的细胞， 得所需要的蛋白质.因此新木聚糖酶是科学家依据蛋白质的功 (3)HAT培养基是特定的选择性培养基，只有杂交瘤细胞 能改造其结构得到的，A正确；基因突变具有不定向性，B错 能在其上生长，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 误；组成蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序不同会影响 都会死亡.未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是 蛋白质的功能，因此已知木聚糖酶的氨基酸序列是预测其空间 能恶性增殖的细胞，即不能无限增殖， 结构的重要基础，C正确；改造后的耐高温、耐碱的木聚糖酶基 (4)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型（筛选得 因，可通过基因工程获得目的微生物进行培养，从而保存在基 到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体)，因此经过程 因文库中代代传递，D正确， ③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中继续进行过程④， 15.C基因库是指一个种群所有个体的全部基因，种植地 (5)获得的单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外条件下培养 所有棉铃虫的抗虫基因不能构成一个基因库，A错误；抗性基 或注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出大量的双特异性单克隆 因的产生在抗虫棉之前就已发生，抗虫棉的种植只是选择并保 抗体。 存抗性强的个体，B错误；在大田中种植转基因抗虫棉的同时， 18.(1)花药（花粉）离体培养通过单倍体育种，可快速 间隔种植少量非转基因的棉花或其他作物，供棉铃虫取食，这 获得纯合子 种做法的主要目的是减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度，从 (2)细胞膜具有一定的流动性bc2可以克服远缘杂 而延缓具有抗性基因的棉铃虫新品种的出现，C正确；转Bt基 交不亲和的障碍 因抗虫棉中的抗虫基因可能扩散到非转基因生物中，进而对其 解析：(1)图中育种方法为单倍体育种，采用花药（或花 它生物产生危害，D错误 粉)离体培养的方法来获得单倍体植株，然后人工诱导使这些 11 高中生物选择性必修3第45~48期 植株的染色体数目加倍，恢复到正常植株的染色体数目.用这的恒定区序列设计引物，通过PCR扩增16SDNA片段并测序， 种方法培育得到的植株，不但能够正常生殖，而且每对染色体 将测序结果与数据库中相关数据进行比较而鉴定.该方法从分 上成对的基因都是纯合的，自交的后代不会发生性状分离，因 子水平确定溶藻菌A为假交替单胞菌属， 此，能明显缩短育种年限。 20.(1)一个至多个限制酶便于重组DNA分子的筛选 (2)①诱导原生质体融合的原理是细胞膜具有一定的流 (2)为TaqDNA聚合酶提供结合位点、限定所扩增的DNA 动性。 区段5'一ICTAGAGG一3'切割和回收 ②紫罗兰和油菜的体细胞染色体条数分别为14和38，杂 (3)精子需要获能、卵子需要发育到MⅡ期才有受精能力 交细胞中的染色体数应为52条，可通过测定杂交细胞中的染 (4)显微注射法受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排 色体数量筛选“油菜一紫罗兰”杂种细胞，a正确；紫罗兰和油 斥反应 菜均是二倍体植物，都有2个染色体组，杂交细胞中含有4个 (5)检其尿液中是否含有GH不受年龄、性别和生理周 染色体组，可通过测定杂交细胞中的染色体组数筛选“油菜一 期的影响 紫罗兰”杂种细胞，b正确；紫罗兰和油菜的体细胞DNA数分 解析：(1)Cre-LoxP载体具有一个至多个限制酶切割位 别为14和38，杂交细胞中的DNA数应为52，可通过测定杂交 点，供外源DNA片段插入；有特殊的标记基因，便于重组DNA 细胞中的DNA数量筛选“油菜一紫罗兰”杂种细胞，c正确；真 分子的筛选；此外，还具有复制原点、启动子和终止子等结构， 核细胞中的核苷酸数量都是8种，d错误。 其中启动子位于目的基因的上游，启动转录过程，终止子位于 ③将“油菜一紫罗兰”杂种细胞置于特定培养基培养，经 目的基因的下游，终止转录过程. 过脱分化和再分化过程最终获得杂种幼苗，诱导脱分化和再分 (2)利用PCR技术扩增GH基因时，需根据GH基因设计 化所用的培养基不同，所以该过程需更换2次培养基。 两种引物，引物是一段能与DNA母链的一段碱基序列互补配 ④与传统有性杂交方式相比，植物体细胞杂交具有的优点 对的短单链核酸，引物的作用有为Taq DNA聚合酶提供结合 是打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍， 位点，、限定所扩增的DNA区段.已知GH基因编码链的编码区 19.(1)富营养化高压蒸汽灭菌 序列是：5一CTCGAGATGCTGCAG…GGATCCTCTAGA- (2)蛋白质、核酸平板划线法或稀释涂布平板 3',扩增GH基因的编码区段时，根据碱基互补配对原则，结合 (3)16SDNA基因的恒定区分子 到编码链上的引物序列是5'一TCTAGAGG一3'，获得GH基因 解析：(1)由题干信总可知，某研究团队以某种蓝藻为研 产物后需要进行琼脂糖凝胶电泳进行检测，将符合要求的条带 究对象，从水体中分离获得具有溶藻作用的溶藻菌.淡水和海 切割和回收以便提取、纯化并进行测序。 水的富营养化水体中蓝藻数量较多，溶藻菌的数量多，因此应 (3)精子需要获能、卵子需要发育到MⅡ期才有受精能 在淡水和海水的富营养化水体中取水样.培养基一般采用高压 力，因此从公猪和母猪体内取出的精子和卵子，还不能立刻进 蒸汽灭菌 行体外受精. (2)蛋白质的基本组成元素是C、H0、N,核酸的组成元素 (4)分析题图可知，②过程为将目的基因导入受体细胞， 是C、H、O、N、P,因此培养基中的N是微生物合成蛋白质、核酸 受体细胞不同，导人的方法也不一样，若受体细胞为动物细胞， 等物质必需的元素.接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂 常用显微注射法；④过程表示胚胎移植，将供体胚胎移植到受 布平板法，因此将所得的溶藻菌A以平板划线法或稀释涂布 体子宫的免疫学基础是受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排 平板法接种在BPM固体培养基上，倒置培养一段时间 斥反应 (3)细菌的16SDNA基因包含多个恒定区和可变区，不同 (5)为检测转基因猪是否培育成功，在个体水平的检测是 细菌的16SDNA基因的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨 检测其尿液中是否含有GH,与乳腺生物反应器相比，膀胱生物 基酸序列，而可变区序列具有物种特异性.因为细菌群落包含 反应器的优点是不受年龄、性别和生理周期的影响 很多细菌，为鉴定溶藻菌A所属类群，应该利用16SDNA基因 12《生物技术与工程》综合测试（一） ◆数理报社试题研究中心 BSEP女2210 第I卷（选择题） 一、选择题（本题共15小题，每小题3分，共45分.每小题给出的四个选项中，只有一个选 耐 项是最符合题目要求的) 郑 1.广州的“天顶头抽”是以黄豆为主要原料，利用传统发酵技术加盐酿制成的深褐色的酱 油调味品，味鲜色浓、醇香馥郁、体凝浓厚，享誉中外，成为当地重要的调味品之一.下列叙述错 误的是 A.生产酱油时利用霉菌产生蛋白酶分解蛋白质 B.生产酱油时补充充足的氧气可以防止酱油发酸 C.加盐酿制主要的目的是为微生物生长提供无机盐 D.发酵后通过淋洗、添加着色剂、增味剂等调制成酱油 2.肺炎支原体和新冠病毒都是引起人类肺炎的病原体，可经飞沫传染.青霉素是能破坏细 菌细胞壁的一类抗生素.下列相关叙述正确的是 ( A.肺炎支原体和新冠病毒都含有蛋白质和核酸，它们的遗传物质主要是DNA B.青霉素不能治疗新冠病毒引发的肺炎，但可作为治疗支原体肺炎的有效药物 C.与肺炎支原体相比，新冠病毒的主要结构特点是没有以核膜为界限的细胞核 D.采集病人痰液进行微生物培养，依据菌落特征可判断病人是否有支原体感染 3.最初醋的制法是用麦曲使小麦发酵，生成酒精，再利用醋酸菌的作用将酒精氧化成醋酸， 所以醋在古代还被称为“苦酒”.下列有关叙述错误的是 ( 一画 A.酿酒过程中，发酵液出现的气泡主要是酵母菌产生的 B.酿酒过程中，pH上升和酒精含量增多导致发酵停止 解 C.若发酵装置密封不严，酿酒过程中可能会出现醋味 D.用显微镜计数法统计活酵母菌的数量时，结果比实际数量高 4.甲醇蛋白是毕赤酵母的胞内蛋白，可用甲醇作碳源培养毕赤酵母生产甲醇蛋白.毕赤酵 母无毒性，甲醇对大多数微生物有毒性.下列说法错误的是 A.筛选能高效利用甲醇的毕赤酵母时，应以甲醇为唯一碳源 B.虽然甲醇对多数微生物有毒性，发酵生产甲醇蛋白时也需检测是否有杂菌污染 C.发酵时，发酵温度、培养液的渗透压和pH均会影响甲醇蛋白产量 D.用作动物饲料时，需从毕赤酵母菌体中分离纯化甲醇蛋白 5.右图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图.下列叙述错误的是 气体出口 培养基入口 ( 气体入口 A.改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响 B.果酒发酵中期通入氮气，酵母菌的呼吸类型将从有氧呼吸转变为 无氧呼吸 C.果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关 D.气体入口与气体出口可以交换使用 6.下图为酿制葡萄酒的两个简易装置.下列说法错误的是 NaOH溶液 A.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存，所以它属于兼性厌氧 微生物 B.制作果酒时，一般将温度控制在18~30℃ C.与乙装置相比，甲装置的优点是既能及时吸收（发酵产生的）C02,又能减少被杂菌污染 的机会 D.葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约)的空间，既能为酵母菌大量紫殖提供适量的0，又 能防止发酵旺盛时汁液溢出 7.为研究血清饥饿处理对重组胚构建的影响，科研人员用经不同时间血清饥饿处理后的野 猪成纤维细胞作为供体，以野猪卵母细胞作为受体进行核移植.结果如下表.以下说法错误的是 () 饥饿时间/d 卵裂率(%) 囊胚率(%) 0 75.8 7.7 2 82.7 24.2 4 81.2 22.8 8 70.4 9.1 注：卵裂率指进行分裂的重组细胞占全部重组细胞的比例，囊胚率指获得的囊胚占全部重 组细胞的比例 A.核移植时应将供体细胞核注入排出了第一极体的卵母细胞 B.实验结果表明适当地对供体细胞进行饥饿处理有利于重组胚构建 C.过度的饥饿处理导致营养成分不足，可能使细胞发生凋亡 D.获得的囊胚可以移植到生理状态相同的野猪子宫内继续发育 8.右图为现代生物技术与工程操作常涉及的流程，下列说法错误 ① 的是 A.若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术使处理①和②后获得 的原生质体融合 B.若为试管牛生产流程，体外受精时，卵母细胞①和精子②要分别进行成熟培养和获能处 理 C.若为动物细胞核移植过程，需将供体细胞①注入卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚 D.若为动物细胞融合过程，形成的③需置于95%的空气和5%的C0,混合气体中培养 9.下列关于胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是 ( A.动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质 B.植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物 C.胚胎工程可用于稀有动物的种族延续和培育生物制药的反应器 D.诱导人成纤维细胞重编程为肝细胞的成果表明，已分化细胞的状态是可以改变的 10.通过细胞工程、胚胎工程、基因工程，人们可以培育试管动物、克隆动物、转基因动物等， 进而满足生产或科研的需求，下列分析正确的是 A.细胞核移植时去核就是去掉卵母细胞中被核膜包被起来的细胞核 B.若子代为克隆动物，则其遗传物质与细胞核供体的相同 C.试管动物、转基因动物可能都经过体外受精、胚胎移植的过程 D.胚胎移植过程需使用免疫抑制剂来防止受体动物发生免疫排斥反应 11.下列有关限制酶的叙述，正确的是 A.限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小 B.一CATG↓一和一G↓GATCC-一序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同 C.只有用相同的限制酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒 D.用限制酶切割DNA分子中部，获得一个目的基因时被水解的磷酸二酯键有2个 12.用于植物基因转化操作的受体通常称为外植体，外植体选择的主要依据是受体细胞的 转化能力.下列关于外植体选择和处理的叙述错误的是 A.可优先考虑幼嫩的叶片、子叶、胚轴等分裂旺盛的组织 B.处于M期的细胞比S期的细胞更易被外源基因转化 C.所选的外植体应易于组织培养且有较强的再生能力 D.对外植体的周围切割处理有利于吸引农杆菌并接纳T-DNA片段 13.生物学实验中不仅讲究“同材异用”还喜欢“一材多用”.洋葱是常见的生物学实验材 料，其管状叶浓绿色，鳞片叶有紫色和白色等类型，茎短缩成盘状，下面生有须根.下列叙述正确 的是 A.用久置的洋葱管状叶做材料进行“绿叶中色素的提取和分离”实验，滤纸条上不会出现 最上面两条色素带 B.进行“DNA的粗提取与鉴定”实验时，向洋葱鳞片叶研磨离心后获取的上清液中加入冷 酒精可促进DNA的溶解 C.用低温处理洋葱的根尖分生组织细胞，诱导细胞内染色体数目加倍的机制是低温抑制 了细胞壁的形成 D.选取洋葱鳞片叶外表皮进行“探究植物细胞的吸水和失水”实验，质壁分离过程中细胞 的吸水能力逐渐增大 14.下列有关生物技术与工程中所用技术操作与原理的叙述，错误的是 A.动物细胞培养一一应用酶的专一性原理可对所需材料用胰蛋白酶进行处理 B.制备单克隆抗体—一应用细胞膜流动性原理对B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合 C.PCR技术的复性一一运用碱基互补配对原理使引物结合在DNA模板链的5'端 D.细胞核移植一一细胞质可调控细胞核基因表达，选用卵细胞质使重组细胞表现出全能 性 15.生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点.下列叙述，错误的是 A.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 B.当今社会的普遍观点是禁止生殖性克隆人的实验，但不反对治疗性克隆 C.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 D.生物武器是用微生物、毒素、干忧素及重组致病菌等来形成杀伤力 第Ⅱ卷（非选择题） 二、非选择题（本题包括5小题，共55分）》 16.(9分)酸浆是一种经微生物自然发酵，形成的淡黄色或乳白色的液体.我国食用酸浆和 利用酸浆进行农产品加工的历史悠久，西北地区的地方特色食物浆水面就是以蔬菜浆水为主要 配料制作而成.蔬菜浆水的制作过程如下图所示.请据图回答： 西粉→西汤 [造茱→济流→切段→热烫→冷却→入缸十加益发酵]→选茱浆水 (1)制作蔬菜浆水时向缸中加入面汤的主要目的是 (2)发酵好的蔬菜浆水呈乳白色，味酸，某研究小组测定其pH为3.7~4.9，结合其制作过 程，你认为发酵过程中发挥主要作用的微生物是 (填“乳酸菌”或“醋酸杆菌”).该微生 物不能在热烫后马上加入的原因是 (3)为验证上述推测是否正确，研究小组用 法分离蔬菜浆水中的微生物，通过观 察菌落特征来鉴别微生物种类.同时，该方法也可用来统计样品中的活菌数，某兴趣小组采用此 方法对蔬菜浆水中该微生物进行了计数.若将10L的蔬菜浆水悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为103的样液接种到5个培养基上，培养一段时间后统计的菌落数分别为39、41、 42、43、45,则1mL悬液中活菌数量为」 个，这样的计数方法所得结果比实际值偏小的原 因是 17.(12分)如图为科研人员利用植物细胞培养技术获取紫杉醇的流程图.回答下列问题： 外信教盘技二零茶聚"“念鲜严零物时 (1)紫杉醇是红豆杉体内的一种 (填“初生”或“次生”)代谢物，该物质 (填“是”或“不是”)生物生长所必需的.利用植物细胞培养技术进行细胞产物的工厂化生产 (填“能”或“不能”)体现植物细胞全能性 (2)①过程为 在此过程中，已经分化的红豆杉细胞将失去 ,转变成未分 化的细胞 (3)②过程将愈伤组织分散成单个细胞，需使用 酶.分散成单个细胞后，在液体培 养基中悬浮振荡培养.振荡的目的是 (4)与从红豆杉的树皮和树叶中提取紫杉醇相比，利用植物细胞培养技术获得紫杉醇的优 点是 (答出1点即可) 18.(10分)干细胞的应用前景吸引众多科学家投入到相关研究中.请回答下列问题： (1)人体干细胞主要包括成体干细胞和 (2)科学家将Oc3/4、Sox2、K4和c-Myc基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中， 然后在特定培养基中培养可获得PS细胞， ①在进行细胞培养时除了提供充足的营养和所需气体环境外，还需满足的条件有 (答两点内容) ②实验中逆转录病毒的作用是 ③已知c-MyC是原癌基因，研究表明将诱导PS细胞获得的神经干细胞移入小鼠体内会 增加发生恶性肿瘤的风险，推测可能的原因是细胞中原癌基因 导致相应蛋白 质活性过强.当实验对象是人类成纤维细胞时，为提高应用PS细胞的安全性，可通过设计实验 判断c-MyC在诱导获得PS细胞的过程中是否必需，思路如下：将导入 的小 鼠成纤维细胞，与导入 的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较 19.(10分)柑橘是南方重要的水果，由柑橘韧皮部杆菌引起的柑橘黄龙病对柑橘产业带来 了巨大的经济损失.研究人员利用基因工程技术，导入外源抗病基因以防治柑橘黄龙病.请回答 问题： (I)研究人员从NCBI数据库中获得了包含噬菌体裂解酶基因(CaLasLYS)的一段DNA序 列，利用PCR技术扩增CaLasLYS需要设计引物，请写出各包含8个碱基的一对引物 PCR扩增完成后可用 (填方法名称)鉴定 产物. CaLLYS- 3GGATCCAT TGTGTAT·AATCTTA 5CCTAGGTATACACATA-TTAGAATIAAGTCGAC-3 (2)基因工程中为使获得的CaLasLYS在柑橘细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，需要进 行的操作是 ,CaLasLYS (选填“能”或“不能”)含有该操作所选用的限制酶的 识别序列，原因是 (3)将CaLasLYS导人柑橘细胞，经植物组织培养获得组培苗，通过 来确定CaLasLYS是否赋予了组培苗抗柑橘黄龙病的特性 (4)从基因工程安全性角度考虑，转基因柑橘可能存在的风险有 (答出1点即 可) 20.(14分)肌肉生长抑制素(MSTN)可抑制成肌细胞的增殖，该基因突变能引起骨骼肌含 些 量增加，产生“双肌”症状.科研人员为获得“双肌”表型的山羊，利用基因编辑技术突变山羊的 MSTN基因，实现了MSTN基因表达沉默或表达产物失活，然后构建基因表达载体，转染山羊胎 儿成纤维细胞，筛选MSTN基因突变的细胞株作为供核细胞，再进行体细胞核移植，获得“双 肌”表型的克隆羊.回答下列问题： (I)通过向细胞中导人MSTN基因的反义基因也可实现MSTN基因表达沉默，即将MSTN 基因反向连接到质粒上，推测反义基因能导致基因表达沉默的机理是 ·在构建基因表达载体时，若采用同种限制酶对目的基因和质粒分别进行切割后连接，可能 出现的结果有 (写出三种情况)，因此需要对重组质粒进行筛选. (2)通过无菌手术取35日龄的山羊胎儿组织，再用 酶处理，使其分散成 单个细胞，但要严格控制处理时间，其原因是 ,并制成细胞悬液进 行培养。 (3)采用 的方法将目的基因导入山羊胎儿成纤维细胞，利用 的方法可筛 选出MSTN基因突变的细胞株作为供核细胞，再依次通过 (答三 点)技术，最终获得具有“双肌”表型的山羊 参考答案见48期