2025-2026学年 高二生物下学期期末自编模拟卷（人教版选三模块） (11)

**基本信息** 2025-2026学年高二生物下学期期末模拟卷（人教版选三），以基因工程、细胞工程、胚胎工程等核心知识为载体，融合核移植、蛋白质工程等科研案例，通过图表分析与实验设计考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|15/30|基因工程工具酶（第7题）、细胞融合（第14题）|结合珍稀动物克隆（第1题）等情境，考查基础操作原理| |不定项|5/15|原生质体培养（第16题）、单克隆抗体制备（第19题）|多选项设计区分易混概念，如胚胎发育阶段（第17题）| |非选择题|5/55|不对称体细胞杂交（21题）、反义基因构建（22题）|以科研流程图为载体，综合考查实验设计（23题融合蛋白纯化）与结果分析（24题AFB单抗检测）|

2025-2026学年 高二生物下学期期末自编模拟卷（人教版选三模块） 答案解析附后页 1、 单选题（共15小题，每小题2分，共30分） 1．为探究某种珍稀哺乳动物的成纤维细胞作为核供体克隆动物的可行性，科研人员利用该珍稀哺乳动物甲及其近亲乙和丙(繁殖能力强)进行了如图所示的研究。下列说法正确的是(      ) A.可通过电刺激法、蛋白质合成促进剂激活重构胚 B.B部位细胞将来发育为胎儿的胎盘和胚层 C.对乙的卵母细胞去核时应将第二极体一并去除 D.可用梯度离心、紫外线短时间照射等方法去除核 2．研究人员将胰岛素B链的第28位氨基酸替换为天冬氨酸，抑制了胰岛素聚合，从而获得速效胰岛素类似物。下列叙述正确的是(      ) A.该产品是通过直接改造胰岛素来生产的 B.改变氨基酸的种类不会影响胰岛素的空间结构 C.可通过定向诱导胰岛素基因碱基增添达到改造目的 D.胰岛素改造的基本思路与天然蛋白质合成过程相反 3．科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白（GFP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如图1所示。随机挑取5个品系细胞通过PCR验证GFP的导入情况，结果如图2所示。据此推测在进行PCR扩增时，所选择的引物为(      ) A.F1，R1 B.F2，R1 C.F1，R2 D.F2，R2 4．甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的甘草西定具有抗癌作用。通过植物细胞工程对甘草进行相关处理，过程如图所示。下列相关叙述错误的是(      ) A.过程①为接种外植体，过程②应避光处理从而获得愈伤组织 B.过程③④培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 C.过程⑤获得原生质体的过程需要用到纤维素酶和果胶酶 D.过程⑥获得大量的甘草西定体现了愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点 5．转录因子Gh1和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是(      ) A.提高培养基中生长素和细胞分裂素的比例可促进愈伤组织形成芽 B.抑制Gh1基因的表达会促进愈伤组织分化为根、芽等器官 C.促进GhE1基因的表达可促进愈伤组织再分化 D.Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达 6．与传统发酵不同，科学家进行了酒精、醋酸同步发酵实验：在苹果酒发酵的不同时期接入醋酸菌，每天定时检测培养液中的产酸量，结果如下图。下列相关叙述正确的是(      ) A.对照组与实验组中醋酸菌利用的碳源物质完全相同 B.对照组中接入醋酸菌的时间应在苹果酒发酵结束后 C.醋酸菌与酵母菌代谢类型相同，同步发酵时周期缩短 D.同步发酵时，接入醋酸菌的时间越早，产酸量越高 7．T4DNA连接酶是基因工程的一种工具酶，可将任意2个具有相同黏性末端的DNA片段连接在一起。下列叙述错误的是(      ) A.T4DNA连接酶作用的底物有多种，但其仍具有专一性 B.T4DNA连接酶在催化前后组成成分没有发生改变 C.T4DNA连接酶在连接目的基因与载体时能够恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 D.T4DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于E.coliDNA连接酶的 8．水蛭素是水蛭分泌的特异抑制剂，对凝血酶有较强的抑制作用，临床上常用于治疗某些血栓相关疾病。将水蛭素第47位的天冬酰胺变成赖氨酸，赖氨酸与分子内第4位或第5位的苏氨酸之间就能形成氢键，从而提高抗凝血效率。下列叙述错误的是(      ) A.对水蛭素进行改造的过程不遵循碱基互补配对原则 B.改造水蛭素的过程中需要用到限制酶和DNA连接酶 C.改造水蛭素时可对水蛭素的基因进行修饰或人工合成 D.对水蛭素进行分子设计必须从预期水蛭素的功能特点入手 9．细胞核移植疗法可用于阻断线粒体基因突变的母婴遗传，部分过程如图所示。下列相关叙述错误的是(      ) A.a、b分别表示患病母亲和正常的卵母细胞 B.采集到的精子即可与重组卵母细胞完成受精作用 C.核移植前，一般将采集的卵母细胞培养至MⅡ期 D.胚胎的遗传物质来自三个亲本，可能面临伦理争议 10．解脂耶氏酵母是工业微生物领域备受关注的菌种。研究人员对解脂耶氏酵母进行扩大培养并用等量的该菌种分别处理一定量的色拉油废水和餐饮油废水，在适宜条件下检测实验过程中的菌体生物量和油质量浓度（可反映油脂降解程度），结果如图。下列叙述错误的是(      ) A.色拉油废水的油脂降解速率始终高于餐饮油废水，说明解脂耶氏酵母对色拉油的亲和力更强 B.可将保存的解脂耶氏酵母接种于液体培养基中进行振荡培养，使其大量增殖 C.菌体生物量达到稳定期后，油质量浓度仍持续下降，表明酵母主要通过胞外酶降解油脂而非同化吸收 D.可分别使用湿热灭菌法和干热灭菌法对液体培养基和培养瓶进行灭菌 11．为制备带有荧光标记的DNA探针，研究人员在反应系统内只添加了DNA聚合酶、缓冲液、H2O和4种dNTP（dN—Pα～Pβ～Pγ，其中dGTP被荧光标记）的反应管①～③中分别加入适量单链DNA（如图）。形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。下列分析正确的是(      ) 反应管①：5′-GGCTATAGCCAGA-3′ 反应管②：5′-GTTTCGCGATGGC-3′；3′-AGCGCTACCGATG-5′ 反应管③：5′-CCAGGAGATTGC-3′；3′-CCTCTAACGATC-5′ A.实验中需要用荧光物质对dGTP的γ位磷酸基团进行标记 B.DNA聚合酶沿模板链将dNTP逐个连接到引物的5′端 C.反应管②的反应系统内因缺乏模板或引物不能进行PCR扩增 D.实验结束后，能得到带有荧光标记DNA探针的反应管只有③ 12．我国科学家研发的蛋白质生成大模型NewOrigin能通过AI高精度生成蛋白质的氨基酸序列，推动了蛋白质工程的发展。下列相关叙述正确的是(      ) A.设计新的蛋白质时首先应从其基因的碱基序列出发 B.AI可通过改变氨基酸序列设计符合预期功能的蛋白质 C.模型NewOrigin可生产出满足人类特定需求的蛋白质 D.该模型能分析基因组数据进而精准找到遗传病的病因 13．2024年世界园艺博览会的吉祥物“桐妹儿”的核心创意来自中国特有的孑遗植物珙桐，珙桐有“植物活化石”之称，是国家一级重点保护植物。研究发现珙桐叶中含有具有抗肿瘤功效的次生代谢物——槲皮素，但野生珙桐资源有限，下图是利用植物细胞工程等技术手段进行珙桐的扩大培养以及生产槲皮素的设想，图中的序号代表相应的处理过程。下列相关的判断中正确的是(      ) A.通过①②④获得植株丙可定向改变植株丙的性状 B.通过①②③获得植株乙可快速繁殖，植株乙不会有变异 C.PEG处理过程也依赖于细胞膜具有流动性 D.通过⑥过程生产槲皮素利用了愈伤组织全能性高的特点 14．研究人员用花椰菜(BB，2n=18)根与黑芥(CC，2n=16)叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有34条染色体。下列相关的判断中正确的是(      ) A.植株N并不一定能表现出花椰菜和黑芥的优良特性 B.获得的原生质体要保存在无菌水中，以免被杂菌污染 C.花椰菜和黑芥的原生质体能融合，表明两种植物没有生殖隔离 D.植株N的染色体不能正常联会配对，无法产生可育的配子 15．如图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关叙述错误的是(      ) A.卵子减数分裂Ⅱ是在精子和卵子结合的过程中完成的 B.防止多精入卵的屏障依次是透明带反应和卵细胞膜反应 C.在进行步骤③时，应选择发育良好的原肠胚来操作 D.胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 二、不定项（共5小题，每小题3分，共15分） 16．苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用，科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是(      ) A.下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B.过程①需要光照，有利于离体细胞进行光合作用 C.由无毒下胚轴切段经过程①②③所得苦参幼苗具有抗病毒的特性 D.过程④不同于过程①②③，需选用液体培养基 17．线粒体置换术可用于预防母系线粒体遗传病，操作流程如图所示。下列叙述正确的是(      ) A.吸出的次级卵母细胞细胞核实际上是纺锤体—染色体复合物 B.重组次级卵母细胞可以用乙醇和蛋白酶合成抑制剂等进行激活 C.重组次级卵母细胞在体外培养至减数第二次分裂中期才能受精 D.图示胚胎发育至原肠胚阶段，其内细胞团细胞仍然具有全能性 18．某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，某些细菌能降解A。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0.1mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个。下列叙述错误的是(      ) A.实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 B.③过程涂布时用涂布器蘸取0.1mL菌液均匀涂布于平板上 C.乙平板中大小不同的菌落是分解菌分解能力不同导致的 D.乙平板上菌落数平均为240个，菌液稀释倍数为105 19．现已建立一种简便快捷、适用于诺如病毒常见流行株的胶体金免疫层析检测方法。即用常见流行株GII.4型诺如病毒的衣壳蛋白P颗粒作为抗原利用小鼠制备单克隆抗体1B10（浓度为5mg/mL）和1D6（浓度2.2mg/mL）。利用羊制备羊抗鼠抗体作为质控线组装成胶体金试纸条（见图）。下列说法正确的是(      ) A.单克隆抗体1B10和单克隆抗体1D6特异性识别同一种抗原 B.胶体金试纸条上使用的三种抗体由同一种杂交瘤细胞合成并分泌 C.检测时，在控制线和检测线出现两条色带时，表示结果阳性 D.胶体金试纸条可以用来检测所有类型诺如病毒感染导致的胃肠炎 20．利用转基因技术将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到表达Gata3-GFP蛋白质的杂合子小鼠，交配获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。 下列叙述不正确的是(      ) A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因表达 B.翻译时先合成GFP蛋白，再合成Gata3蛋白 C.2号小鼠是Gata3-GFP基因的纯合子，4号小鼠是野生型 D. 用引物1和引物3进行PCR，能更好区分杂合子和纯合子 三、非选择题：本题共5小题，共55分 21．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 (1)过程①中需将植物组织用________________消毒后接种到MS培养基上。 (2)过程②中将愈伤组织加入____________________酶去除细胞壁后获得原生质体。对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为____________________。 (3)过程③常用的化学试剂是______________________，经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______________________。 (4)过程④中，再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X的名称是______________________。 22．双孢蘑菇中的多酚氧化酶(PPO)基因表达出的PPO能催化酚类物质氧化成醌，使双孢蘑菇在采摘后发生褐变。为了减少褐变，增加双孢蘑菇贮藏加工性能，研究人员构建了反义PPO基因表达载体(将PPO基因与载体反向连接)，获得了抗褐变双孢蘑菇新品种，具体过程如图所示。回答下列问题： (1)构建反义PPO基因表达载体时，若科研人员需将PPO基因反向连接整合到图2中质粒上，应使用限制酶__________切割图中质粒，使用限制酶__________切割图中含PPO基因的DNA片段，以获得能反义表达PPO基因的重组质粒，再将重组质粒导入农杆菌。之后将处理过的农杆菌接种在含__________的培养基上，待长出菌落后再影印接种到含__________的培养基上，即可筛选出导入重组质粒的农杆菌。 (2)为确定反义PPO基因进入受体细胞后是否成功转录出mRNA，研究人员拟采用分子杂交技术，利用DNA探针进行检测。不对称PCR常用于制备DNA探针，其原理是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)用作探针，加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物，含量较多的被称为非限制性引物。PCR的最初的若干次循环中，其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA)，但当限制性引物消耗完后，就会产生大量的ssDNA.非限制性引物应选用上图1中的引物__________。为精确控制产物生成量，研究人员尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是 。 (3)抗褐变双孢蘑菇新品种褐变现象明显减少，试推测机理： 。 23．LL-37是人体内一种重要抗菌肽，但易被蛋白酶分解。为解决上述问题，科研人员利用生物技术将LL-37包裹在类弹性蛋白多肽(ELP)纳米纤维内部，制备自组装纳米胶束。ELP具有显著热响应性，当温度低于T时ELP呈溶解状态，反之则沉淀。图1为构建融合蛋白(ELP-LL-37)表达载体的部分流程，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因。回答下列问题： (1)与质粒中的启动子结合的酶是________________。为使LL-37基因正确连接到PUC19质粒中，并将ELP表达至LL-37抗菌肽的羧基端，利用PCR技术扩增LL-37基因时需在X链、Y链引物的5′端分别添加限制酶________________的识别序列，引物的作用是________________。 (2)将基因表达载体导入大肠杆菌，再用含________的培养基进行初步筛选，得到导入质粒的大肠杆菌。已知LL-37基因长度为1500bp，ELP基因长度为900bp，质粒上相关酶切位点的距离如图2。请在图3中画出构建成功的重组质粒经SacI、SmaI酶切后的电泳条带。 (3)为分离纯化ELP-LL-37融合蛋白，将大肠杆菌培养24h后，将培养液离心→取细菌→破坏细胞→离心→取上清液→调节温度→分离。要分离出融合蛋白，调节后的温度应________(填“大于”或“小于”)T。该过程中需反复升降温循环几次，依据的原理是________________。 24．黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中残留的AFB，科研人员开展下列研究。 (1)科研人员利用小鼠制备抗AFB的单克隆抗体（即AFB单抗），运用了动物细胞融合和____________________技术，前者常用的诱导方法与植物原生质体融合不同的是用____________________。 (2)AFB单抗的制备过程如图1，杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ____________________和Ⅲ____________________检测，经过多次筛选获得。 (3)食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）。若想确认上述流程获得的AFB单抗具有极强的特异性，应补充的检测是：AFB单抗与________________进行抗原-抗体杂交，预测相应的实验结果为 。(开放题） (4)科研人员拟将AFB单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料M稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图2，探针发光性能与物质P的浓度关系如图3。依据图3结果，科研人员选择物质P的浓度为0.8mg/mL作为生产检测探针的条件，原因是____________________ 。 (5)科研人员制备定量检测AFB的免疫试纸，如图4。试纸的T线处固定的物质是AFB，C线处固定的物质是抗AFB单抗的抗体。在加样处滴加的样液会向右扩散经过T线和C线。若滴加样液中含有MP-AFB单抗探针和高浓度的AFB，T线的发光性为_____________（填“发荧光”或“不发荧光”）。 (6)单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用？____________________。 25．研究表明，基因S参与水稻盐碱胁迫的应答过程，该基因过表达可降低水稻植株对盐碱胁迫的敏感性。现利用基因S获得过表达基因SP（由强启动子驱动S基因的编码区过表达），从而培育耐盐碱水稻新品种。请回答下列问题： (1)如图1所示，可利用____________________技术从水稻基因组DNA中扩增目的基因S，欲使获得的基因S两端携带限制酶识别序列，需要在引物的__________端添加。 (2)(关键环节）构建如图基因表达载体时，需用____________________酶切割目的基因和质粒，酶切后质粒上保留的黏性末端序列应为5＇-____________________-3＇和 5＇-____________________-3＇。潮霉素抗性基因和基因S转录时的模板链___________（填“是”或“不是”）同一条链。 (3)据信息可知，过表达基因SP由____________________（答出2部分即可）组成，可使用____________________筛选导入Ti质粒的根瘤农杆菌。 (4)已知水稻细胞中也存在基因S，由于其启动子为普通启动子而无法高效表达，导致水稻无法耐盐碱。现获得有上述抗生素抗性水稻甲～丁，为进一步鉴定甲～丁的基因型，通过PCR技术将相应启动子与基因S整体扩增出来，应选择图2中的引物组合是__________。部分序列信息及可选用的酶切位点如图3所示，PCR产物利用KpnⅠ完全酶切后的电泳结果如图4所示。据图可判断甲的基因型为_________________。 参考答案 1．答案：D 解析：A、重构胚激活可通过电刺激法、钙离子载体、蛋白质合成抑制剂等，蛋白质合成促进剂不能激活，A错误； B、囊胚B部位为内细胞团，将来发育为胎儿的各种组织器官；滋养层细胞发育为胎盘和胎膜，B错误； C、卵母细胞去核时，需去除细胞核，第二极体不含细胞核，无需一并去除，C错误； D、去除卵母细胞核可采用梯度离心、紫外线短时间照射、显微操作法等，D正确。 故选D。 2．答案：D 解析：A、该改造通过改造胰岛素基因实现（蛋白质工程），并非直接改造胰岛素蛋白质，直接改造蛋白质无法遗传且效果不稳定，A错误； B、氨基酸种类改变会导致胰岛素肽链结构改变，进而影响其空间结构，空间结构改变导致功能改变（抑制聚合），B错误； C、改造是替换第28位氨基酸，对应基因中碱基对替换，并非碱基增添，碱基增添会导致肽链延长，C错误； D、天然蛋白质合成是基因→mRNA→蛋白质，蛋白质工程（改造胰岛素）是预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→改造基因，思路与天然合成相反，D正确。 故选D。 3．答案：A 解析：A、PCR引物需分别结合目的基因上下游模板链，方向相反。GFP基因整合到P基因一端，模板链需F1（正向，结合P基因上游）和R1（反向，结合GFP基因下游），可扩增出整合片段，A正确； B、F2结合P基因下游、R1结合GFP下游，无法覆盖整合区域，不能扩增目标片段，B错误； C、F1结合P上游、R2结合GFP上游，引物方向冲突，无法扩增，C错误； D、F2结合P下游、R2结合GFP上游，无法扩增整合片段，D错误。 故选A。 4．答案：D 解析：A、①接种外植体，②脱分化形成愈伤组织，脱分化需避光，防止分化，A正确； B、③再分化、④愈伤组织培养，培养基含植物激素、无机盐、蔗糖（碳源/能源），B正确； C、⑤去除细胞壁获原生质体，需纤维素酶+果胶酶，C正确； D、⑥仅培养愈伤组织获得产物，未发育为完整植株，未体现全能性，D错误。 故选D。 5．答案：B 解析：A、生长素/细胞分裂素比例高→促根、低→促芽、适中→愈伤组织，A错误； B、Gh1抑制分化，抑制Gh1表达→解除抑制，促愈伤组织分化为根、芽，B正确； C、GhE1抑制分化，促进GhE1表达→抑制再分化，C错误； D、Gh1与GhE1共同作用调控GhPs基因，单独作用无效，D错误。 故选B。 6．答案：B 解析：对照组为传统果醋发酵，即先完成酒精发酵，再接入醋酸菌制果醋，对照组的醋酸菌利用的碳源物质主要是酒精，实验组即同步发酵，醋酸菌利用的碳源物质包括培养液中的糖类、酒精等，A项错误、B项正确。醋酸菌是异养需氧型，而酵母菌是异养兼性厌氧型，C项错误。据图可知，同步发酵时，与第2、3天接入醋酸菌相比，第1天接入醋酸菌的产酸量低，D项错误。 7．答案：D 解析：A、T4DNA连接酶可连接相同黏性末端的DNA片段，底物为DNA片段，具有专一性(只能催化DNA片段连接，不能催化其他反应)，作用底物虽有多种，但仍遵循专一性，该叙述正确； B、酶作为催化剂，在催化反应前后，自身的组成成分、结构和数量均不发生改变，T4DNA连接酶也符合酶的这一特性，该叙述正确； C、限制酶切割DNA时断裂磷酸二酯键，T4DNA连接酶可催化断开的磷酸二酯键重新形成，从而连接目的基因与载体，该叙述正确； D、E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端；T4DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端，只是连接平末端的效率低于黏性末端，因此T4DNA连接酶连接平末端效率高于E.coliDNA连接酶，该叙述错误。 故选D。 8．答案：A 解析：A、对水蛭素进行改造属于蛋白质工程，其核心是改造基因，基因改造过程中(如限制酶切割、DNA连接酶连接、PCR扩增)均遵循碱基互补配对原则，该叙述错误； B、改造水蛭素需先构建改造后的水蛭素基因表达载体，构建过程中需用限制酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接，该叙述正确； C、蛋白质工程中，改造现有蛋白质可通过修饰原有基因实现，也可根据预期蛋白质结构人工合成新基因，因此改造水蛭素可修饰基因或人工合成，该叙述正确； D、蛋白质工程的基本途径是：从预期蛋白质功能出发→设计预期蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)，因此分子设计必须从预期功能入手，该叙述正确。 故选A。 9．答案：B 解析：A、细胞核移植阻断线粒体基因突变遗传，需患病母亲（提供细胞核）、正常女性（提供去核卵母细胞），故a为患病母亲、b为正常卵母细胞，A正确； B、采集的精子需获能处理，卵母细胞需培养至MⅡ期，才能完成受精作用，B错误； C、核移植前，卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期（MⅡ期），此时具备受精能力，C正确； D、胚胎细胞核来自患病母亲、线粒体来自正常卵母细胞、精子来自父亲，遗传物质来自三个亲本，存在伦理争议，D正确。 故选B。 10．答案：A 解析：A、色拉油废水油脂浓度下降慢，餐饮油下降快，说明餐饮油降解更快，酵母对餐饮油亲和力更强，A错误； B、液体振荡培养增氧，利于酵母增殖，B正确； C、菌体稳定后油脂仍降解，说明酵母分泌胞外酶分解油脂，C正确； D、液体培养基湿热灭菌、培养瓶干热灭菌，D正确。 故选A。 11．答案：D 解析：A、dNTP的γ位磷酸基团参与DNA合成，标记γ位不影响合成，A正确； B、DNA聚合酶将dNTP连接到引物3'端，B错误； C、反应管②有模板和引物，可合成短链，C错误； D、反应管③双链不足9bp，不能合成，仅①可合成，D错误。 故选A。 12．答案：B 解析：A、蛋白质工程的基本途径是：从预期蛋白质功能出发→设计预期蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），并非先从基因碱基序列出发，A错误； B、蛋白质工程可通过改造基因或合成新基因，改变氨基酸序列，进而设计符合预期功能的蛋白质，AI生成氨基酸序列本质是改变氨基酸序列设计蛋白质，B正确； C、模型NewOrigin只能生成蛋白质的氨基酸序列，不能直接生产蛋白质，蛋白质的合成需要细胞内的核糖体、酶、原料等条件，C错误； D、该模型用于生成蛋白质氨基酸序列，无法分析基因组数据精准定位遗传病病因，遗传病病因分析需基因测序、基因检测等技术，D错误。 故选B。 13．答案：C 解析：A、④为诱变育种，原理是基因突变，基因突变具有不定向性，无法定向改变植株丙的性状，A错误； B、①②③为植物组织培养，过程中可能发生基因突变、染色体变异，植株乙会有变异，B错误； C、PEG诱导原生质体融合，依赖细胞膜具有流动性，使两个原生质体融合为一个杂种细胞，C正确； D、⑥为愈伤组织培养生产槲皮素，利用愈伤组织细胞代谢产生次生代谢物，未发育成完整植株，未体现细胞全能性，D错误。 故选C。 14．答案：A 解析：A、植物体细胞杂交获得的杂种植株，基因表达具有随机性，不一定能表现出花椰菜和黑芥的优良特性，A正确； B、原生质体无细胞壁，需保存在等渗溶液中，无菌水为低渗溶液，会导致原生质体吸水涨破，B错误； C、原生质体融合仅说明细胞膜具有流动性，花椰菜和黑芥存在生殖隔离，自然状态下不能杂交产生可育后代，C错误； D、花椰菜（2n=18）和黑芥（2n=16），杂种细胞染色体数18+16=34，植株N染色体组来自两个物种，减数分裂时染色体联会紊乱，理论上不可育，但题干未提及染色体加倍，不能绝对化，且A选项表述更准确，D错误。 故选A。 15．答案：C 解析：A、卵子的减数分裂Ⅱ在受精时完成，即精子和卵子结合过程中，次级卵母细胞完成减数分裂Ⅱ，形成卵细胞和第二极体，A正确； B、受精时，精子接触透明带引发透明带反应，阻止后续精子进入；精子进入卵细胞膜后引发卵细胞膜反应，两道屏障依次防止多精入卵，B正确； C、胚胎移植应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，原肠胚分化程度高，移植成功率低，C错误； D、胚胎移植可将优良母畜的胚胎移植到普通母畜子宫内，让优良母畜超数排卵、多次配种，充分发挥其繁殖潜力，D正确。 故选C。 16．答案：ABC 解析：A、外植体消毒需用体积分数70%酒精（快速消毒）和5%次氯酸钠（深度消毒），无水乙醇会使外植体细胞失水死亡，不能用于消毒，A错误； B、过程①为脱分化，形成愈伤组织，脱分化过程需避光培养，光照会诱导愈伤组织分化，不利于愈伤组织形成，B错误； C、无毒下胚轴切段培育的幼苗仅去除了病毒，未导入抗病毒基因，不具备抗病毒特性，仅能避免病毒病，C错误； D、过程④为工厂化细胞培养提取苦参碱，需用液体培养基，液体培养基能充分接触细胞，利于营养物质吸收和代谢产物释放；①②③为植物组织培养，需固体培养基支撑外植体，D正确。 故选ABC。 17．答案：ABC 解析：A、次级卵母细胞停在减Ⅱ中期，无成形细胞核，吸出的是纺锤体-染色体复合物。A正确； B、重组卵母细胞需激活才能继续分裂，乙醇+蛋白酶抑制剂可模拟受精激活，正确。B正确； C、次级卵母细胞只有到减Ⅱ中期才具备受精能力，重组后仍需培养至MⅡ中期才能受精。C正确； D、原肠胚内细胞团已分化为外、中、内三胚层，全能性丧失，只能分化为相应组织，不能发育为完整个体。D错误。 故选ABC。 18．答案：ABC 解析：A、淤泥含目的菌，不能灭菌，A错误； B、涂布器需先冷却再蘸菌液，B错误； C、菌落大小反映分解能力，C正确； D、240×105×10=2.4×108，稀释倍数105，D正确。 故选ABC。 19．答案：AC 解析：A、单克隆抗体1B10和1D6均针对GII.4型诺如病毒的衣壳蛋白P颗粒，特异性识别同一种抗原，A正确； B、一种杂交瘤细胞只能合成并分泌一种特异性抗体，三种抗体由不同杂交瘤细胞产生，B错误； C、检测时，检测线出现色带说明有病毒抗原，控制线出现色带说明试纸条有效，两条色带均出现为阳性结果，C正确； D、该试纸条仅针对GII.4型诺如病毒，不能检测所有类型诺如病毒，D错误。 故选AC。 20．答案：ABD 解析：A、GFP基因与Gata3基因融合，受Gata3基因启动子调控，可正常表达，A错误； B、融合基因翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B错误； C、2号小鼠只有大片段，为纯合子；4号小鼠只有小片段，为野生型，C正确； D、引物1和引物3无法有效区分杂合子与纯合子，引物1和引物2可区分，D错误。 故选ABD。 21．答案：(1)酒精和次氯酸钠 (2)纤维素酶、果胶酶；X射线、碘乙酰胺 (3)PEG/聚乙二醇；杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞恢复正常分裂 (4)细胞分裂素 解析：（1）植物组织培养之前需要对外植体进行消毒，故科研人员剥离红豆杉和柴胡种子的胚作为外植体经消毒后接种于MS培养基上，诱导形成愈伤组织，消毒过程需用酒精和次氯酸钠消毒，而后需要通过无菌水冲洗。 （2）过程②中将愈伤组织通过酶解法获得原生质体，植物细胞的细胞壁主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可以用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体。X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂，碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，单独的红豆杉和柴胡细胞都不能分裂，要想培育能产生紫杉醇的柴胡，结合题意可知对红豆杉和柴胡的原生质体进行的A、B处理分别为X射线、碘乙酰胺。 （3）③过程为诱导细胞融合的过程，该过程中常用的化学试剂是聚乙二醇/PEG，X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂，碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂，单独的红豆杉和柴胡细胞都不能分裂，杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞恢复正常分裂，因此只有异源融合的细胞可持续分裂形成再生细胞团。 （4）过程①为脱分化，脱分化过程通常需要避光，有利于愈伤组织的形成和生长，过程④为再分化，再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X的名称是细胞分裂素，Y为生长素，当生长素含量高时有利于根的分化。 22．答案：(1)KpnⅠ和MfeI；KpnⅠ和EcoRI；卡那霉素；潮霉素 (2)①；引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏 (3)反义PPO基因转录的mRNA可与PPO基因转录的mRNA发生碱基互补配对，从而抑制翻译过程，导致PPO合成减少或无法合成 解析：(1)构建反义表达载体，需反向连接目的基因。质粒上KpnⅠ和MfeⅠ酶切位点位于启动子与终止子之间；目的基因两端为KpnⅠ和EcoRI位点，MfeⅠ与EcoRI切割后产生相同黏性末端，因此用KpnⅠ和MfeⅠ切割质粒，KpnⅠ和EcoRI切割目的基因；质粒含卡那霉素抗性基因，重组质粒含潮霉素抗性基因，筛选时先接种含卡那霉素培养基（筛选含质粒菌），再影印至含潮霉素培养基（筛选含重组质粒菌）。 (2)反义PPO基因转录模板链为引物②对应链，制备探针需与模板链互补，非限制性引物选引物①；高复性温度下短引物不能结合模板，原因是引物越短，与模板结合的氢键数量越少，高温下氢键易断裂，无法稳定结合模板链。 (3)反义PPO基因转录的mRNA与PPO基因转录的mRNA碱基互补配对，形成双链RNA，阻止核糖体与mRNA结合，抑制PPO基因翻译，导致PPO无法合成，酚类物质不能被氧化为醌，褐变减少。 23．答案：(1)RNA聚合酶；SacI、NcoI；能使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 (2)氨苄青霉素 (3)大于；根据ELP的热响应性，在温度高于T时沉淀，实现分离融合蛋白；低于T时溶解，通过反复的升降温循环实现纯化 解析：(1)转录时，RNA聚合酶与基因的启动子结合，驱动基因转录，因此与质粒中启动子结合的酶是RNA聚合酶。为使LL-37基因正确连接，且ELP在氨基端、LL-37在羧基端，需在X链引物5′端加SacI，Y链引物5′端加NcoI，保证基因定向插入。引物的作用是使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，为DNA复制提供起始点。 (2)重组质粒含氨苄青霉素抗性基因（Ampr），将载体导入大肠杆菌后，用含氨苄青霉素的培养基筛选，只有导入质粒的大肠杆菌能存活。LL-37基因1500bp，ELP基因900bp，质粒7000bp，SacI和SmaI酶切后，产生片段为900+1500=2400bp、5500bp，电泳条带对应2400bp和5500bp位置。 (3)ELP温度高于T时沉淀，因此调节温度大于T，使融合蛋白沉淀，实现分离。反复升降温的原理是ELP具有热响应性，温度高于T时沉淀、低于T时溶解，通过多次循环去除杂蛋白，纯化融合蛋白。 24．答案：(1)动物细胞培养；灭活病毒 (2)克隆化培养；抗体 (3)黄绿青霉素（或“CIT”）、伏马菌素（或“FB”）；结果为不能杂交（或“阴性”“无杂交带”） (4)在物质P浓度为0.8mg/mL时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，可节省成本。 (5)不发荧光 (6)治疗疾病、运载药物 解析：(1)单克隆抗体制备：动物细胞融合+动物细胞培养；动物细胞融合特用灭活病毒诱导（植物用PEG、电融合）。 (2)杂交瘤细胞筛选：克隆化培养+抗体检测，获得能产特异性抗体的细胞。 (3)验证特异性：用CIT、FB与AFB单抗杂交；结果无杂交带（阴性），说明特异性强。 (4)P浓度0.8mg/mL时，发光性能接近最大值，浓度再高效果提升小、成本增加，性价比最高。 (5)样液含高浓度AFB，与探针MP-AFB单抗结合，探针无法结合T线AFB，T线不发荧光。 (6)单克隆抗体用途：治疗疾病、靶向运载药物、诊断疾病。 25．答案：(1)PCR；5' (2)SacⅠ和EcoRⅠ；AGCT；AATT；不是 (3)强启动子和基因S编码区；潮霉素 (4)C和D；SPS 解析：(1)扩增目的基因用PCR技术；引物5'端添加限制酶识别序列（不影响3'端延伸）。 (2)由图1酶切位点，用SacⅠ和EcoRⅠ切割；SacⅠ切后黏性末端5'-AGCT-3'，EcoRⅠ切后5'-AATT-3'；潮霉素抗性基因与S基因启动子方向相反，模板链不是同一条。 (3)过表达基因SP由强启动子+S基因编码区组成；标记基因为潮霉素抗性基因，用潮霉素筛选含Ti质粒的农杆菌。 (4)扩增启动子+S基因，选C（启动子上游）、D（S基因下游）引物；KpnⅠ酶切后，甲有2条带（强启动子+S），基因型为SPS。 学科网（北京）股份有限公司 $