精品解析：辽宁省营口市普通高中2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

6月练习卷 高二生物学 本卷满分100分，考试时间75分钟。 ☆注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡的指定位置。考试结束后，将答题卡交回。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。 3.回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每个小题给出的四个选项中，只有一个是符合题目要求的。 1. 甲流病毒是季节性流感爆发和流行的主要元凶，分为多种亚型，通过血凝素和神经氨酸酶两种蛋白质的变异不断“变身”，防控难度较大。下列叙述错误的是（　　） A. 最基本的生命系统中不包括甲流病毒的各种亚型 B. 多种病毒亚型的元素组成均含有C、H、O、N、P C. 血凝素和神经氨酸酶变异后空间结构发生改变 D. 用完全培养基培养病毒使其增殖为科研提供材料 2. 某人的午餐中含有纤维素、淀粉、蛋白质、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、无机盐、水等多种成分。下列叙述正确的是（　　） A. 两类脂肪酸均可为人体提供能量，但无机盐、水不能 B. 纤维素在消化道中消化成葡萄糖后被人体吸收利用 C. 淀粉和蛋白质分别来源于植物性食物和动物性食物 D. 食物中的水只能以结合水的形式参与人体的生命活动 3. 农谚中有“粮为酒之基，水为酒之血，曲为酒之骨”“发酵不控温，酒酸又浑浊”之说。下列叙述正确的是（　　） A. “粮”只能为菌种的代谢和繁殖提供碳源 B. “水”中的矿物质、“水”的酸碱度会影响酿酒的成败和质量 C. “曲”中含有酵母菌等微生物，制酒时必须全程无氧 D. 发酵温度过低，容易出现“酒酸又浑浊”的现象 4. 养殖场普遍使用诺氟沙星防治感染性疾病。未被动物代谢的部分随粪便排出后，粪便作为有机肥施入农田会使抗生素残留于土壤中。现要从土壤中分离筛选耐诺氟沙星的微生物，下列叙述错误的是（　　） A. 可在施用养殖场有机肥的土壤中进行样本采集 B. 筛选所用的培养基必须含有诺氟沙星 C. 筛选时对照组与实验组所用培养基相同，但不接种 D. 筛选出的微生物并非纯种，可利用菌落特征进行鉴定 5. 胞质杂交是植物体细胞杂交的一个重要方面。如图为将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙，从而获得抗病品种丙的实验流程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①使用的酶为果胶酶和蛋白酶 B. 过程②可以用灭活的病毒进行诱导融合 C. 目标杂种原生质体应同时具备叶绿体和细胞核 D. 品种丙能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状 6. 关于菊花的组织培养，下列叙述正确的是（　　） A. 用酒精或次氯酸钠对外植体消毒后，必须用蒸馏水清洗 B. 用封口膜或瓶盖封盖培养瓶后，要适时打开进行通气 C. 从激素的浓度和比例来看，培养过程中要用到三种培养基 D. 接种外植体后，每日都需要给予适当时间和强度的光照 7. 关于动物细胞的悬浮培养，下列叙述正确的是（　　） A. 不进行传代培养 B. 不发生接触抑制 C. 不通过离心法收集细胞 D. 不利用CO2培养箱培养 8. 2026年3月25日至4月5日，西藏（当雄）金丝野牦牛繁育研究基地迎来第二批克隆牦牛，实现10头体细胞克隆牦牛批量受孕并全部自然分娩，其中黑牦牛3头、白牦牛7头，分属于两种不同性别，这些幼犊生理指标均达到预期标准并稳步增重。关于克隆牦牛的过程，下列叙述正确的是（　　） A. 对卵母细胞要进行去除“纺锤体—染色体复合物”的处理 B. 要使精子获能，并使卵母细胞培养至MⅡ期 C. 利用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等诱导形成重构胚 D. 这3头黑牦牛和7头白牦牛有可能来自同一个供核个体 9. 某研究团队开发了一种工程化囊泡靶向修复心脏损伤的新技术，流程如图所示，其中血小板的膜具有较好的靶向能力。下列叙述正确的是（　　） A. 工程化囊泡的精准输送可能与生物膜间的识别有关 B. 截至目前，只有成纤维细胞能被诱导为iPS细胞 C. iPS细胞属于胚胎干细胞，有发育成个体的潜能 D. 利用该技术修复受损心脏时，患者需频繁注射免疫抑制剂 10. 受精阶段，某些过程可以防止多个精子进入同一个卵细胞，这些过程包括（　　） ①精子释放出多种酶溶解卵细胞膜外的一些结构 ②借助自身的运动接触卵细胞膜 ③精子的细胞膜与卵细胞膜融合，卵细胞膜外的透明带发生某种生理反应 ④精子入卵后，卵细胞膜会立即发生某些生理反应 ⑤精子入卵后，雌雄原核形成并相向移动并彼此靠近 A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ④⑤ 11. 自然条件下，陶赛特羔羊发育到18月龄左右发情，2周岁左右生产第一胎羔羊，而在青海省海北州科技示范园区，利用高原型藏羊作为代孕母羊通过体外受精和胚胎移植，六个半月的陶赛特幼年母羊已经成为羊羔的亲妈妈。下列叙述错误的是（　　） A. 该研究对高原型藏羊进行了超数排卵处理 B. 需要对这两个品种的母羊进行同期发情处理 C. 胚胎移植得到的羔羊与高原型藏羊的基因型不同 D. 若对囊胚进行胚胎分割，内细胞团必须均等分割 12. 在聚合酶链式反应体系中，引物主要承担界定目标DNA片段、赋予DNA聚合酶延伸起始位点以及保障扩增特异性与长度的关键职能。下列与引物相关的叙述，错误的是（　　） A. 耐高温的DNA聚合酶从引物的3′端催化DNA链的延伸 B. 所用引物的长度和G—C碱基对的含量都会影响扩增的效果 C. 聚合酶链式反应体系中的引物在不同循环中可重复使用 D. 符合要求的引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应 13. 将一种双链DNA分子用两种不同的限制酶切割，切割产物经PCR后进行电泳分离，结果如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 据图判断，加样孔位于图示上方 B. 要在紫外灯下检测DNA，需要用核酸染料对DNA染色 C. 根据图示结果无法判断该双链DNA分子是链状还是环状 D. 若用NotⅠ单独切割得到两个片段，则大小为1 kb和9 kb 14. T4溶菌酶耐热性差，科学家对该酶的第3位氨基酸进行改造，并使第3位氨基酸和第97位氨基酸之间形成1个二硫键，大大提高了其耐热性。下列叙述错误的是（　　） A. 改造后的T4溶菌酶空间结构发生了改变 B. 新基因是在生物体内经过逆转录过程合成 C. 通过蛋白质工程改造T4溶菌酶建立在基因工程的基础上 D. 改造后的T4溶菌酶需要进行功能鉴定才能应用于生产实践 15. 下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，正确的是（　　） A. 截至2017年，在我国，转基因棉花和番木瓜是获准商业化种植的转基因植物 B. 设计试管婴儿属于生殖性克隆的一种 C. 把抗虫基因整合到叶肉细胞叶绿体基因组中，产生的生殖细胞中将不含抗虫基因 D. 生物武器包括两种类型，一种是致病菌类，另一种是病毒类 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 某植物幼苗期水的含量明显高于成熟期，而幼苗期Mg和P的含量却明显低于成熟期，其他无机盐在植物不同发育时期的含量也存在差异。下列叙述错误的是（　　） A. 除了总含水量，幼苗期自由水和结合水的比值也高于成熟期 B. Mg是组成叶绿素和类胡萝卜素的重要元素，故幼苗期叶片颜色明显浅于成熟期 C. 推测成熟期的开花和结果与P含量高有关，与其他元素的含量高低无关 D. 细胞液的渗透压大小与无机盐在植物不同发育时期的含量存在差异有关 17. 无菌操作的必要性主要体现在防止杂菌污染、保障目标菌纯度、维护实验人员安全等方面。如图为平板划线的具体操作过程，下列与无菌操作相关的叙述，错误的是（　　） A. 图①所示的灭菌方法为灼烧灭菌 B. 图③操作在平板划线接种过程中只进行一次 C. 图中所示的每项操作都符合无菌操作要求 D. 图⑦每次划线前后灼烧接种环的目的完全相同 18. 烟草为四倍体，含48条染色体，是植物组织培养的模式植物，广泛用于基础科研。在利用植物组织培养进行育种、尼古丁（次生代谢物，主要用作杀虫剂和医药工业原料）生产等方面，烟草也有着广泛的应用。如图为通过植物组织培养利用烟草的4条不同方式，甲、乙、丙植株均为四倍体。下列叙述正确的是（　　） A. 方式①若为培养脱毒苗，可以体现植物细胞的全能性 B. 方式②可以利用物理和化学方法诱变等手段实现定向诱导 C. 方式③的原生质体若来自烟草花粉细胞，则染色体加倍必须用秋水仙素诱导 D. 尼古丁是烟草的次生代谢物，可通过植物细胞培养进行生产 19. 某同学要进行有机物鉴定的实验，实验材料、待鉴定物质、鉴定试剂、操作要点及现象如表所示，其中存在错误的是（　　） 选项 实验材料 待鉴定物质 鉴定试剂 实验条件及观察方法 预期实验现象 A 白梨汁 还原糖 斐林试剂（甲液+乙液，现用现配） 常温，肉眼观察 砖红色沉淀 B 稀释的豆浆 蛋白质 双缩脲试剂A液+B液（混匀后加入） 常温，肉眼观察 紫色 C 浸泡后的花生种子匀浆 脂肪 苏丹Ⅲ染料 常温染色 橘黄色 D 洋葱研磨液 DNA 二苯胺试剂 沸水浴加热 蓝色 A. A B. B C. C D. D 20. 基因工程中的载体分为克隆载体和表达载体。克隆载体用来克隆和扩增DNA片段，而表达载体是使外源基因在宿主细胞中有效表达。图1为利用乳腺生物反应器生产某种药用蛋白过程中使用的一种载体，其中含有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）、四环素抗性基因（Tetr）及多种限制酶的识别位点；图2为目的基因及限制酶的识别位点。下列相关叙述错误的是（　　） A. 图1具有启动子和终止子，属于一种表达载体 B. 构建重组质粒时限制酶的最好选择为BamHⅠ和HindⅢ C. 该重组质粒的受体细胞和目的基因表达的细胞不是同一种细胞 D. 选出导入重组质粒的受体细胞所用培养基都含氨苄青霉素 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 棉花是一种可以自留种的农作物，但需要注意选择合适的品种留存并做到科学管理，才能取得更好的种植效果。回答下列问题： （1）棉花种子需要在低温、干燥条件下贮藏。这种贮藏条件能降低________________________，从而减少养分消耗；低温干燥条件还能抑制某些真菌和细菌等滋生，从而防止棉花发霉变质。从细胞结构上看，真菌和细菌分别属于________________生物；从代谢的角度分析，种子滋生的这两类菌都为________（填“自养”或“异养”）生物，两类菌的存在都会使种子的萌发率降低。 （2）为预防苗期病害，要在播种前选晴天摊晒种子2～3天，还可用一定浓度的高锰酸钾、次氯酸钠等对种子进行浸种，摊晒和药物浸种分别是用物理和化学方法对棉花种子进行________________处理。另外，光作为________________可以提高棉花种子的发芽率。 （3）棉花种子中的脂肪含量远高于小麦。萌发初期，棉花种子几乎不从土壤溶液吸收无机盐，但其干重不降反增，导致干重增加的主要元素是________________，相对于小麦种子，棉花种子的播种深度应该浅一些，原因是________________________________________。 （4）正常条件下，棉花5～7天开始出苗，7～10天齐苗。为了探究棉花种子萌发时的最佳种子含水量，某同学将不同含水量的棉花种子置于28℃温度条件下进行萌发，实验时氧气、环境含水量等条件相同并适宜，记录7天后种子的萌发情况，结果如下表所示。 种子含水量/% 20 30 40 50 60 70 80 种子萌发率/% 8 16 33 56 73 86 81 由表中数据得到的结论是_________________________________________。 22. 谷氨酸棒状杆菌等微生物就像一座座微型工厂，通过特定的代谢途径把原料加工成我们熟悉的味精的主要成分——谷氨酸。图1为谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的途径，图2为发酵过程中对微生物进行数量检测的方法。回答下列问题： （1）谷氨酸增多时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，这种调节机制属于________________________；增加细胞膜的通透性能使细胞中的谷氨酸及时排出，大大提高谷氨酸的产量。生物素缺陷型菌种不能产生生物素，导致细胞膜磷脂合成不足，通透性增加，这种类型的菌可从自然界中获取，也可通过_____________（写出两种）等方法培育。 （2）现利用生物素缺陷型谷氨酸棒状杆菌作为菌种进行谷氨酸的生产。制备发酵用培养基时，除了充足的碳源、氮源、无机盐和水，还需要加入适量的__________，以维持菌种的正常生长。培养谷氨酸棒状杆菌时，一般需要将培养基pH调至________________________。 （3）谷氨酸棒状杆菌严格好氧，发酵过程中控制有氧条件可采取的措施有________________（答两点）。用图2所示方法检测培养液中的微生物数量时，若A、B、C三个培养皿的菌落数在正常范围内，则将三个培养皿的菌落数________后，所得数据需要乘以10n，才可表示样品中目的菌的数量（单位：个/mL），则n=____________。 （4）谷氨酸属于______________类发酵产品，发酵结束后，需要通过提取、分离、纯化等措施获得产品。 23. 鼠源单抗药物是指通过小鼠免疫系统制备的单克隆抗体，目前多用于科研和部分临床场景，并逐步被人源化抗体替代。如图是鼠源单抗的部分制备过程示意图，回答下列问题： （1）对小鼠进行免疫时，要多次注射特定抗原，其目的是_________________。图中①过程可利用灭活的病毒进行诱导，灭活是指______________________。 （2）图中②过程所用的培养基从功能和物理性质上看，分别属于________________培养基。经②过程筛选后，还需进行③筛选过程的原因是________________________。将得到的能产生所需抗体的杂交瘤细胞在___________（答出两种培养途径），再将抗体提取出来。 （3）小鼠单克隆抗体会使人产生免疫反应，从而导致它的治疗效果大大降低，科学家将小鼠抗体上结合抗原的区域“嫁接”到人的抗体上，经过这样改造的抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多，该技术属于_____________工程的范畴。现阶段已生产出全人源单克隆抗体，全人源抗体制备的方法之一是噬菌体展示技术。该技术是将抗体基因序列插入到噬菌体外壳蛋白的结构基因中，使抗体基因与外壳蛋白基因一起表达。噬菌体DNA进入受体细胞后通过____________（两个过程）合成出单克隆抗体，提取出的抗体可利用____________技术进行鉴定。 24. 苏云金杆菌产生的Bt毒素蛋白具有杀虫能力，科研人员将Bt毒素蛋白基因（Bt基因）进行改造并导入棉花细胞中，成功培育出转基因抗虫棉。目的基因改造过程如图所示（数字表示基因序列中对应的核苷酸序号），其中穿梭质粒（由天然Ti质粒改造而来）载体含T-DNA但不含Vir基因（可辅助T-DNA转移）。回答下列问题： 注：F1～F3、R1～R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。 （1）以提取的DNA作模板，选用图中所示的________________引物进行PCR，可扩增完整的Bt基因。进行PCR时，除提供DNA模板和引物外，反应体系中还应加入__________________，并在一定的缓冲液中才能进行。PCR不同阶段及控制的温度条件分别为________________。 （2）去除与毒性无关的部分序列，可减小分子量，使重组DNA便于导入受体细胞；另一方面，由于细菌和棉花对密码子的偏好有所不同，还需人工合成部分基因序列与Bt基因中的一个片段拼接，拼接后的基因比原基因减少______________对碱基，该剪接过程用到的酶有__________________________。人工合成的基因序列控制合成的氨基酸序列不变，但会使_______________的碱基序列发生改变。 （3）为了使重组质粒分子量较小，转化率高，研究者设计了穿梭质粒和辅助质粒（含Vir基因但不含T-DNA），并将二者均导入农杆菌，推测设计的Vir基因的作用是___________________，使目的基因插入染色体DNA中。 （4）若选择培养基中抗生素浓度________________，通常会出现较多假阳性植株，一些未成功导入重组质粒的细胞也能存活下来。为检测目的基因是否成功导入植株，可提取总DNA作模板进行PCR，则可选用的引物为________________________。 25. 人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的胰岛素原，切除部分肽段（C肽段）后才会形成成熟的胰岛素，如图1所示。利用基因工程生产人胰岛素时可采用两种方法，方法一：根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素；方法二：利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。已知这两种方法都使用图2所示的同一种质粒作为载体，β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质，大肠杆菌菌落一般情况下呈白色。回答下列问题： （1）若氨基酸的平均分子量为100，胰岛素原形成胰岛素后，相对分子量减少________________。基于基因的选择性表达，方法2中mRNA取自人体的_________细胞。 （2）图2是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。在设计PCR引物时应添加限制酶__________的识别序列。为了提高限制酶识别及切割的效率，可以在引物限制酶识别序列的5′端添加保护碱基序列GGG。结合图2信息，适合的上游引物为______________。 a：5′—GTAGTCGAACAATTGGGG—3′ b：5′—GGGCAATTGGTAGTCGAA—3′ c：5′—GGGCTCGAGATGCCAATC—3′ d：5′—ATGCCAATCCTCGAGGGG—3′ （3）若用大肠杆菌生产胰岛素，将重组质粒导入大肠杆菌时，可用Ca2+处理大肠杆菌细胞，目的是________________。 （4）研究人员还可通过乳腺生物反应器批量生产人胰岛素，通过________________________法将重组质粒导入将来发育为雌性个体（如牛、羊）的受精卵中，经早期胚胎培养后进行________________________，待其出生并发育至泌乳期后可获得产物。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 6月练习卷 高二生物学 本卷满分100分，考试时间75分钟。 ☆注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡的指定位置。考试结束后，将答题卡交回。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。 3.回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每个小题给出的四个选项中，只有一个是符合题目要求的。 1. 甲流病毒是季节性流感爆发和流行的主要元凶，分为多种亚型，通过血凝素和神经氨酸酶两种蛋白质的变异不断“变身”，防控难度较大。下列叙述错误的是（　　） A. 最基本的生命系统中不包括甲流病毒的各种亚型 B. 多种病毒亚型的元素组成均含有C、H、O、N、P C. 血凝素和神经氨酸酶变异后空间结构发生改变 D. 用完全培养基培养病毒使其增殖为科研提供材料 【答案】D 【解析】 【详解】A、最基本的生命系统是细胞，病毒不是细胞，A正确； B、多种病毒亚型的蛋白质中均含有C、H、O、N，核酸中含有C、H、O、N、P，B正确； C、血凝素和神经氨酸酶都是蛋白质，变异后蛋白质的种类改变，空间结构也会发生改变，C正确； D、病毒的繁殖依赖于宿主细胞，不能用完全培养基培养，D错误。 故选D。 2. 某人的午餐中含有纤维素、淀粉、蛋白质、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、无机盐、水等多种成分。下列叙述正确的是（　　） A. 两类脂肪酸均可为人体提供能量，但无机盐、水不能 B. 纤维素在消化道中消化成葡萄糖后被人体吸收利用 C. 淀粉和蛋白质分别来源于植物性食物和动物性食物 D. 食物中的水只能以结合水的形式参与人体的生命活动 【答案】A 【解析】 【详解】A、脂肪酸在人体内可以氧化分解，也可以转化为糖类等物质，故可为人体提供能量，无机盐和水均为无机物，无机物不会为细胞生命活动提供能量，A正确； B、人的消化液中不含纤维素酶，不能消化纤维素，B错误； C、淀粉和纤维素来源于植物性食物，植物性食物和动物性食物中都含有蛋白质，C错误； D、结合水与自由水可相互转化，故食物中的水可以以两种形式参与人体的生命活动，D错误。 3. 农谚中有“粮为酒之基，水为酒之血，曲为酒之骨”“发酵不控温，酒酸又浑浊”之说。下列叙述正确的是（　　） A. “粮”只能为菌种的代谢和繁殖提供碳源 B. “水”中的矿物质、“水”的酸碱度会影响酿酒的成败和质量 C. “曲”中含有酵母菌等微生物，制酒时必须全程无氧 D. 发酵温度过低，容易出现“酒酸又浑浊”的现象 【答案】B 【解析】 【详解】A、“粮”可为菌种的代谢和繁殖提供碳源、氮源等多种营养，A错误； B、矿物质是微生物代谢和繁殖必需的物质，水中矿物质的含量影响发酵效率、微生物活性、口感风味等，酸碱度影响酶等物质的活性，也会影响酿酒的成败和质量，B正确； C、酵母菌为兼性厌氧微生物，前期繁殖过程需要有氧环境，C错误； D、醋酸发酵的温度高于酒精发酵，酿酒时温度过高，容易出现“酒酸又浑浊”的现象，D错误。 4. 养殖场普遍使用诺氟沙星防治感染性疾病。未被动物代谢的部分随粪便排出后，粪便作为有机肥施入农田会使抗生素残留于土壤中。现要从土壤中分离筛选耐诺氟沙星的微生物，下列叙述错误的是（　　） A. 可在施用养殖场有机肥的土壤中进行样本采集 B. 筛选所用的培养基必须含有诺氟沙星 C. 筛选时对照组与实验组所用培养基相同，但不接种 D. 筛选出的微生物并非纯种，可利用菌落特征进行鉴定 【答案】C 【解析】 【详解】A、施用养殖场有机肥的农田中容易含有诺氟沙星，适于分离筛选耐诺氟沙星的微生物，A正确； B、耐诺氟沙星的微生物可在含诺氟沙星的培养基中成活并繁殖，B正确； C、筛选时对照组所用培养基与实验组的不同，不含诺氟沙星，其他与实验组相同，C错误； D、凡是耐诺氟沙星的微生物在含诺氟沙星的选择培养基上都能生长，故筛选出的不是纯种，鉴定微生物可以利用菌落特征，D正确。 5. 胞质杂交是植物体细胞杂交的一个重要方面。如图为将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙，从而获得抗病品种丙的实验流程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①使用的酶为果胶酶和蛋白酶 B. 过程②可以用灭活的病毒进行诱导融合 C. 目标杂种原生质体应同时具备叶绿体和细胞核 D. 品种丙能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程①是去除细胞壁获得原生质体，蛋白酶会破坏细胞膜等含有蛋白质的结构，应选择纤维素酶和果胶酶，A错误； B、用灭活的病毒诱导是动物细胞融合常用的方法，该方法不能用于植物细胞融合，B错误； C、本实验目的是获得含品种乙细胞核、品种甲叶绿体的抗病品种丙，因此过程②需要筛选同时具备叶绿体和细胞核的原生质体，C正确； D、该过程仅将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙，品种甲核基因控制的性状并未转移给丙，因此丙不可能获得甲的所有优良性状，D错误。 6. 关于菊花的组织培养，下列叙述正确的是（　　） A. 用酒精或次氯酸钠对外植体消毒后，必须用蒸馏水清洗 B. 用封口膜或瓶盖封盖培养瓶后，要适时打开进行通气 C. 从激素的浓度和比例来看，培养过程中要用到三种培养基 D. 接种外植体后，每日都需要给予适当时间和强度的光照 【答案】C 【解析】 【详解】A、用酒精或次氯酸钠对外植体消毒后，要用无菌水清洗，A错误； B、植物组织培养中封口膜和瓶盖透气不透菌，不需要进行通气，B错误； C、从激素的浓度和比例来看，培养过程中要用到诱导菊花愈伤组织的培养基、诱导菊花生芽的培养基及诱导菊花生根的培养基，C正确； D、接种外植体后，诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照，D错误。 7. 关于动物细胞的悬浮培养，下列叙述正确的是（　　） A. 不进行传代培养 B. 不发生接触抑制 C. 不通过离心法收集细胞 D. 不利用CO2培养箱培养 【答案】B 【解析】 【详解】A、悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需要对细胞进行分瓶培养，让细胞继续增殖，也就是进行传代培养，A错误； B、悬浮在培养液中生长增殖的细胞不发生接触抑制，B正确； C、悬浮培养的细胞直接用离心法收集，C错误； D、悬浮培养也要在CO2培养箱中进行，D错误。 故选B。 8. 2026年3月25日至4月5日，西藏（当雄）金丝野牦牛繁育研究基地迎来第二批克隆牦牛，实现10头体细胞克隆牦牛批量受孕并全部自然分娩，其中黑牦牛3头、白牦牛7头，分属于两种不同性别，这些幼犊生理指标均达到预期标准并稳步增重。关于克隆牦牛的过程，下列叙述正确的是（　　） A. 对卵母细胞要进行去除“纺锤体—染色体复合物”的处理 B. 要使精子获能，并使卵母细胞培养至MⅡ期 C. 利用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等诱导形成重构胚 D. 这3头黑牦牛和7头白牦牛有可能来自同一个供核个体 【答案】A 【解析】 【详解】A、卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物。要对卵母细胞去核后再进行核移植，“去核”就是去除该复合物，A正确； B、核移植无形成受精卵的过程，不需要进行精子获能处理，B错误； C、用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，形成重构胚是通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，C错误； D、这3头黑牦牛和7头白牦牛分属于两种不同性别，且毛色也为两种，不可能来自同一个供核个体，D错误。 9. 某研究团队开发了一种工程化囊泡靶向修复心脏损伤的新技术，流程如图所示，其中血小板的膜具有较好的靶向能力。下列叙述正确的是（　　） A. 工程化囊泡的精准输送可能与生物膜间的识别有关 B. 截至目前，只有成纤维细胞能被诱导为iPS细胞 C. iPS细胞属于胚胎干细胞，有发育成个体的潜能 D. 利用该技术修复受损心脏时，患者需频繁注射免疫抑制剂 【答案】A 【解析】 【详解】A、工程化囊泡融合了血小板细胞膜，血小板膜具有靶向受损部位的能力，本质是膜上的特定分子（如蛋白质）能与受损部位细胞膜上的特定受体特异性识别、结合，A正确； B、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导转化为iPS细胞，B错误； C、iPS细胞是一种类似胚胎干细胞的细胞，但不属于胚胎干细胞，C错误； D、该技术使用的成纤维细胞来自患者自身，不会引发免疫排斥反应，因此无须使用免疫抑制剂，D错误。 10. 受精阶段，某些过程可以防止多个精子进入同一个卵细胞，这些过程包括（　　） ①精子释放出多种酶溶解卵细胞膜外的一些结构 ②借助自身的运动接触卵细胞膜 ③精子的细胞膜与卵细胞膜融合，卵细胞膜外的透明带发生某种生理反应 ④精子入卵后，卵细胞膜会立即发生某些生理反应 ⑤精子入卵后，雌雄原核形成并相向移动并彼此靠近 A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ④⑤ 【答案】C 【解析】 【详解】获能后的精子与卵子相遇时，首先它释放出多种酶，以溶解卵细胞膜外的一些结构，同时借助自身的运动接触卵细胞膜。随之，精子的细胞膜与卵细胞膜融合，卵细胞膜外的透明带发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带。精子入卵后，卵细胞膜也会立即出现生理反应，拒绝其他精子再进入卵内。雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失。综上分析，③④符合题意，C正确。 11. 自然条件下，陶赛特羔羊发育到18月龄左右发情，2周岁左右生产第一胎羔羊，而在青海省海北州科技示范园区，利用高原型藏羊作为代孕母羊通过体外受精和胚胎移植，六个半月的陶赛特幼年母羊已经成为羊羔的亲妈妈。下列叙述错误的是（　　） A. 该研究对高原型藏羊进行了超数排卵处理 B. 需要对这两个品种的母羊进行同期发情处理 C. 胚胎移植得到的羔羊与高原型藏羊的基因型不同 D. 若对囊胚进行胚胎分割，内细胞团必须均等分割 【答案】A 【解析】 【详解】A、高原型藏羊的母羊为代孕母羊，不进行超数排卵，自然条件下，陶赛特羔羊发育到18月龄左右发情，2周岁左右生产第一胎羔羊，使6个半月的陶赛特幼年母羊排卵，要进行超数排卵处理，A错误； B、胚胎移植前，需要对供体（陶赛特母羊）和受体（高原型藏羊）进行同期发情处理，使两者生理状态一致，保证胚胎能正常着床，B正确； C、胚胎移植的羔羊与高原型藏羊基因型不同，代孕母羊仅提供孕育环境，C正确； D、对囊胚进行胚胎分割时，内细胞团必须均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，D正确。 12. 在聚合酶链式反应体系中，引物主要承担界定目标DNA片段、赋予DNA聚合酶延伸起始位点以及保障扩增特异性与长度的关键职能。下列与引物相关的叙述，错误的是（　　） A. 耐高温的DNA聚合酶从引物的3′端催化DNA链的延伸 B. 所用引物的长度和G—C碱基对的含量都会影响扩增的效果 C. 聚合酶链式反应体系中的引物在不同循环中可重复使用 D. 符合要求的引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应 【答案】C 【解析】 【详解】A、耐高温的DNA聚合酶能催化脱氧核苷酸加到引物的3′端，A正确； B、引物的长度过短，易导致非特异性结合，引物过长会导致复性温度变高，结合到模板DNA上的效率可能会降低，从而影响PCR的扩增效率。G—C碱基对含量过低会减弱引物和模板结合的稳定性，B正确； C、延伸后得到的产物（包含引物部分）又可以作为下一个循环的模板，引物无法游离出来再次使用，故引物在不同循环中不能重复使用，C错误； D、若模板的非目的位点引发DNA聚合反应，则DNA聚合酶延伸起始位点以及保证扩增长度的关键职能将会受到明显影响，D正确。 13. 将一种双链DNA分子用两种不同的限制酶切割，切割产物经PCR后进行电泳分离，结果如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 据图判断，加样孔位于图示上方 B. 要在紫外灯下检测DNA，需要用核酸染料对DNA染色 C. 根据图示结果无法判断该双链DNA分子是链状还是环状 D. 若用NotⅠ单独切割得到两个片段，则大小为1 kb和9 kb 【答案】D 【解析】 【详解】A、琼脂糖凝胶电泳中，DNA片段因分子量不同而迁移速率不同，分子量越小迁移越远。由图可知，1 kb的条带位于最下方，8 kb的条带位于最上方，说明加样孔位于图示上方，DNA片段从加样孔向下方迁移，A正确； B、凝胶中的DNA分子通过染色，才可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，B正确； C、据图可知，EcoRⅠ切割该DNA时得到了两个片段，若这两个片段是切割一个位点得到，则该DNA分子为链状，若这两个片段是切割两个位点得到，则该DNA分子为环状，且无论DNA为环状还是链状，按上述切法，两酶（EcoRⅠ+NotⅠ）一起切割时的结果与图中结果相同，因此无法判断该双链DNA分子是链状还是环状，C正确； D、若DNA为链状，用NotⅠ单独切割得到两个片段，大小为1kb和9kb或3kb和7kb，若DNA为环状，用NotⅠ单独切割得到的是一个大小为10kb的链状DNA分子，D错误。 14. T4溶菌酶耐热性差，科学家对该酶的第3位氨基酸进行改造，并使第3位氨基酸和第97位氨基酸之间形成1个二硫键，大大提高了其耐热性。下列叙述错误的是（　　） A. 改造后的T4溶菌酶空间结构发生了改变 B. 新基因是在生物体内经过逆转录过程合成 C. 通过蛋白质工程改造T4溶菌酶建立在基因工程的基础上 D. 改造后的T4溶菌酶需要进行功能鉴定才能应用于生产实践 【答案】B 【解析】 【详解】A、改造后的T4溶菌酶第3位氨基酸和第97位氨基酸之间形成1个二硫键，空间结构发生了改变，A正确； B、新基因是在生物体外经过逆转录等方法合成，B错误； C、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，C正确； D、改造后的蛋白质需要进行功能鉴定，确认耐热性等符合要求后才能应用于生产实践，D正确。 15. 下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，正确的是（　　） A. 截至2017年，在我国，转基因棉花和番木瓜是获准商业化种植的转基因植物 B. 设计试管婴儿属于生殖性克隆的一种 C. 把抗虫基因整合到叶肉细胞叶绿体基因组中，产生的生殖细胞中将不含抗虫基因 D. 生物武器包括两种类型，一种是致病菌类，另一种是病毒类 【答案】A 【解析】 【详解】A、截至2017年，我国只有转基因棉花和番木瓜获准商业化种植，A正确； B、设计试管婴儿属于有性生殖，不属于生殖性克隆，B错误； C、把抗虫基因整合到叶肉细胞叶绿体基因组中，产生的雌性生殖细胞中含抗虫基因，C错误； D、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，D错误。 故选A。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 某植物幼苗期水的含量明显高于成熟期，而幼苗期Mg和P的含量却明显低于成熟期，其他无机盐在植物不同发育时期的含量也存在差异。下列叙述错误的是（　　） A. 除了总含水量，幼苗期自由水和结合水的比值也高于成熟期 B. Mg是组成叶绿素和类胡萝卜素的重要元素，故幼苗期叶片颜色明显浅于成熟期 C. 推测成熟期的开花和结果与P含量高有关，与其他元素的含量高低无关 D. 细胞液的渗透压大小与无机盐在植物不同发育时期的含量存在差异有关 【答案】BC 【解析】 【详解】A、幼苗期生长迅速，代谢速率高于成熟期，自由水和结合水的比值也高于成熟期，A正确； B、Mg是组成叶绿素的重要元素，但类胡萝卜素中不含Mg，B错误； C、成熟期P的含量高于幼苗期，推测成熟期的开花和结果与P含量高有关，与其他元素含量高低的关系无法判断，C错误； D、液泡中含有多种无机盐，无机盐与渗透压的大小有关，因此细胞液的渗透压大小与无机盐在植物不同发育时期的含量存在差异有关，D正确。 故选BC。 17. 无菌操作的必要性主要体现在防止杂菌污染、保障目标菌纯度、维护实验人员安全等方面。如图为平板划线的具体操作过程，下列与无菌操作相关的叙述，错误的是（　　） A. 图①所示的灭菌方法为灼烧灭菌 B. 图③操作在平板划线接种过程中只进行一次 C. 图中所示的每项操作都符合无菌操作要求 D. 图⑦每次划线前后灼烧接种环的目的完全相同 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、图①是对接种环进行灼烧灭菌，防止杂菌污染，A正确； B、图③操作为将试管口通过火焰，该操作在接种环蘸取菌液之前、塞上棉塞之前都要进行一次，B错误； C、图⑥为划线过程，应在酒精灯火焰附近进行接种划线操作，C错误； D、图⑦操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D错误。 18. 烟草为四倍体，含48条染色体，是植物组织培养的模式植物，广泛用于基础科研。在利用植物组织培养进行育种、尼古丁（次生代谢物，主要用作杀虫剂和医药工业原料）生产等方面，烟草也有着广泛的应用。如图为通过植物组织培养利用烟草的4条不同方式，甲、乙、丙植株均为四倍体。下列叙述正确的是（　　） A. 方式①若为培养脱毒苗，可以体现植物细胞的全能性 B. 方式②可以利用物理和化学方法诱变等手段实现定向诱导 C. 方式③的原生质体若来自烟草花粉细胞，则染色体加倍必须用秋水仙素诱导 D. 尼古丁是烟草的次生代谢物，可通过植物细胞培养进行生产 【答案】AD 【解析】 【详解】A、培养脱毒苗是利用烟草幼叶细胞经脱分化、再分化发育成完整植株甲，已分化的植物细胞发育为完整植株，体现了植物细胞的全能性，A正确； B、物理、化学诱变属于基因突变，基因突变具有不定向性，无法实现定向诱导突变，只能筛选符合需求的突变体，B错误； C、诱导染色体加倍的方法除秋水仙素外，还可以使用低温诱导，并非必须使用秋水仙素，C错误； D、尼古丁是烟草的次生代谢物，工业生产中不需要培育成完整植株，可以直接通过植物细胞培养（培养愈伤组织细胞）提取生产，D正确。 19. 某同学要进行有机物鉴定的实验，实验材料、待鉴定物质、鉴定试剂、操作要点及现象如表所示，其中存在错误的是（　　） 选项 实验材料 待鉴定物质 鉴定试剂 实验条件及观察方法 预期实验现象 A 白梨汁 还原糖 斐林试剂（甲液+乙液，现用现配） 常温，肉眼观察 砖红色沉淀 B 稀释的豆浆 蛋白质 双缩脲试剂A液+B液（混匀后加入） 常温，肉眼观察 紫色 C 浸泡后的花生种子匀浆 脂肪 苏丹Ⅲ染料 常温染色 橘黄色 D 洋葱研磨液 DNA 二苯胺试剂 沸水浴加热 蓝色 A. A B. B C. C D. D 【答案】AB 【解析】 【详解】A、斐林试剂检测还原糖时，将试管放入盛有50～65℃温水的大烧杯中水浴加热约2min，才能观察到砖红色沉淀，A错误； B、使用双缩脲试剂时，要先将A液注入放有豆浆的试管，摇匀后再加入双缩脲试剂B液，B错误； C、若用浸泡后的花生种子匀浆作为材料，则不需要使用显微镜观察，结果为橘黄色，C正确； D、用洋葱研磨液作为材料进行DNA的粗提取和鉴定的实验，鉴定时利用的试剂为二苯胺，用沸水浴加热后会呈现蓝色，D正确。 20. 基因工程中的载体分为克隆载体和表达载体。克隆载体用来克隆和扩增DNA片段，而表达载体是使外源基因在宿主细胞中有效表达。图1为利用乳腺生物反应器生产某种药用蛋白过程中使用的一种载体，其中含有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）、四环素抗性基因（Tetr）及多种限制酶的识别位点；图2为目的基因及限制酶的识别位点。下列相关叙述错误的是（　　） A. 图1具有启动子和终止子，属于一种表达载体 B. 构建重组质粒时限制酶的最好选择为BamHⅠ和HindⅢ C. 该重组质粒的受体细胞和目的基因表达的细胞不是同一种细胞 D. 选出导入重组质粒的受体细胞所用培养基都含氨苄青霉素 【答案】D 【解析】 【详解】A、启动子能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质，终止子使转录在所需要的地方停下来，具有启动子和终止子的载体属于表达载体，A正确； B、据图可知，SmaⅠ会破坏目的基因，故不能选择该酶进行酶切，且目的基因两端都有EcoRⅠ酶，为避免切出的末端与质粒反向连接，基因表达载体构建时最好选择BamHⅠ和HindⅢ，B正确； C、由于受精卵的全能性最高，故重组质粒的受体细胞是受精卵，利用乳腺生物反应器生产某种药用蛋白，目的基因表达的细胞是乳腺细胞，C正确； D、选出导入重组质粒的受体细胞所用培养基一个含氨苄青霉素，一个含四环素，D错误。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 棉花是一种可以自留种的农作物，但需要注意选择合适的品种留存并做到科学管理，才能取得更好的种植效果。回答下列问题： （1）棉花种子需要在低温、干燥条件下贮藏。这种贮藏条件能降低________________________，从而减少养分消耗；低温干燥条件还能抑制某些真菌和细菌等滋生，从而防止棉花发霉变质。从细胞结构上看，真菌和细菌分别属于________________生物；从代谢的角度分析，种子滋生的这两类菌都为________（填“自养”或“异养”）生物，两类菌的存在都会使种子的萌发率降低。 （2）为预防苗期病害，要在播种前选晴天摊晒种子2～3天，还可用一定浓度的高锰酸钾、次氯酸钠等对种子进行浸种，摊晒和药物浸种分别是用物理和化学方法对棉花种子进行________________处理。另外，光作为________________可以提高棉花种子的发芽率。 （3）棉花种子中的脂肪含量远高于小麦。萌发初期，棉花种子几乎不从土壤溶液吸收无机盐，但其干重不降反增，导致干重增加的主要元素是________________，相对于小麦种子，棉花种子的播种深度应该浅一些，原因是________________________________________。 （4）正常条件下，棉花5～7天开始出苗，7～10天齐苗。为了探究棉花种子萌发时的最佳种子含水量，某同学将不同含水量的棉花种子置于28℃温度条件下进行萌发，实验时氧气、环境含水量等条件相同并适宜，记录7天后种子的萌发情况，结果如下表所示。 种子含水量/% 20 30 40 50 60 70 80 种子萌发率/% 8 16 33 56 73 86 81 由表中数据得到的结论是_________________________________________。 【答案】（1） ①. 代谢水平（或呼吸作用） ②. 真核生物和原核 ③. 异养 （2） ①. 消毒 ②. 信号 （3） ①. O ②. 棉花种子含脂肪较多，脂肪氧化分解需要更多氧气，浅播能保证种子萌发时的氧气供应 （4）棉花种子萌发的最佳含水量处于60%～80%之间（或各组实验中，70%种子含水量最有利于种子萌发） 【解析】 【小问1详解】 干燥使总水量和自由水比例都大幅下降，可以降低代谢水平，而低温使酶活性降低，也会降低代谢水平（或呼吸作用），从而减少种子中有机物的消耗。真菌，属于真核生物，细菌属于原核生物。从代谢的角度分析，滋生的这些菌都需要利用种子中的有机物，故均为异养型。 【小问2详解】 晴天摊晒种子和高锰酸钾、次氯酸钠浸种都能起到消毒作用，前者为物理方法，后者为化学方法。光作为信号，可以提高棉花的发芽率。 【小问3详解】 棉花种子富含脂肪，萌发初期脂肪发生水解反应，脂肪+水→甘油+脂肪酸，脂肪的元素组成以 C、H 为主，O 含量极低；水解过程中，水分子（含 H、O）中的氧大量进入水解产物（甘油、脂肪酸）中。此时种子呼吸消耗的有机物质量小于吸收的水参与水解带来的质量增量，因此干重增加的主要元素是氧（O）；棉花种子含脂肪较多，小麦种子含淀粉较多，相同质量的脂肪和糖类相比，脂肪氧化分解需要更多氧气，浅播能保证棉花种子萌发时获得充足的氧气。 【小问4详解】 要探究种子含水量对种子萌发的影响，温度、氧气浓度等都要相同且适宜，实验控制在28℃下进行，说明28℃是棉花种子萌发的适宜温度。由表中数据可知，在一定范围内，种子含水量越高，萌发率越高，种子含水量在70%左右时萌发率最高，说明棉花种子萌发的最佳含水量处于60%～80%之间。 22. 谷氨酸棒状杆菌等微生物就像一座座微型工厂，通过特定的代谢途径把原料加工成我们熟悉的味精的主要成分——谷氨酸。图1为谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的途径，图2为发酵过程中对微生物进行数量检测的方法。回答下列问题： （1）谷氨酸增多时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，这种调节机制属于________________________；增加细胞膜的通透性能使细胞中的谷氨酸及时排出，大大提高谷氨酸的产量。生物素缺陷型菌种不能产生生物素，导致细胞膜磷脂合成不足，通透性增加，这种类型的菌可从自然界中获取，也可通过_____________（写出两种）等方法培育。 （2）现利用生物素缺陷型谷氨酸棒状杆菌作为菌种进行谷氨酸的生产。制备发酵用培养基时，除了充足的碳源、氮源、无机盐和水，还需要加入适量的__________，以维持菌种的正常生长。培养谷氨酸棒状杆菌时，一般需要将培养基pH调至________________________。 （3）谷氨酸棒状杆菌严格好氧，发酵过程中控制有氧条件可采取的措施有________________（答两点）。用图2所示方法检测培养液中的微生物数量时，若A、B、C三个培养皿的菌落数在正常范围内，则将三个培养皿的菌落数________后，所得数据需要乘以10n，才可表示样品中目的菌的数量（单位：个/mL），则n=____________。 （4）谷氨酸属于______________类发酵产品，发酵结束后，需要通过提取、分离、纯化等措施获得产品。 【答案】（1） ①. （负）反馈调节 ②. 诱变育种、基因工程 （2） ①. 生物素 ②. 中性或弱碱性 （3） ①. 通入无菌空气、搅拌 ②. 取平均值 ③. 6 （4）代谢物 【解析】 【小问1详解】 谷氨酸是在谷氨酸脱氢酶的催化下产生，谷氨酸增多时又会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，这属于反馈调节。性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。 【小问2详解】 由于利用的菌种为生物素缺陷型，故培养基中需要加入适量的生物素，维持菌种的正常生长。谷氨酸棒状杆菌为细菌，在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性。 【小问3详解】 通入无菌空气和搅拌可控制发酵过程的有氧环境。统计三个培养皿中的菌落数后，需要将计数的菌落数取平均值。据图可知，样品10倍稀释了5次，涂布时取0.1 mL进行滴加，故所得数据需要乘以106，即n=6。 【小问4详解】 谷氨酸属于谷氨酸棒状杆菌的代谢物，发酵结束后，需要通过提取、分离、纯化等措施获得产品。 23. 鼠源单抗药物是指通过小鼠免疫系统制备的单克隆抗体，目前多用于科研和部分临床场景，并逐步被人源化抗体替代。如图是鼠源单抗的部分制备过程示意图，回答下列问题： （1）对小鼠进行免疫时，要多次注射特定抗原，其目的是_________________。图中①过程可利用灭活的病毒进行诱导，灭活是指______________________。 （2）图中②过程所用的培养基从功能和物理性质上看，分别属于________________培养基。经②过程筛选后，还需进行③筛选过程的原因是________________________。将得到的能产生所需抗体的杂交瘤细胞在___________（答出两种培养途径），再将抗体提取出来。 （3）小鼠单克隆抗体会使人产生免疫反应，从而导致它的治疗效果大大降低，科学家将小鼠抗体上结合抗原的区域“嫁接”到人的抗体上，经过这样改造的抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多，该技术属于_____________工程的范畴。现阶段已生产出全人源单克隆抗体，全人源抗体制备的方法之一是噬菌体展示技术。该技术是将抗体基因序列插入到噬菌体外壳蛋白的结构基因中，使抗体基因与外壳蛋白基因一起表达。噬菌体DNA进入受体细胞后通过____________（两个过程）合成出单克隆抗体，提取出的抗体可利用____________技术进行鉴定。 【答案】（1） ①. 得到较多的能产生所需抗体的B淋巴细胞 ②. 用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。 （2） ①. 选择和液体 ②. ②过程筛选得到的杂交瘤细胞有多种（②过程筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体有多种） ③. 体外培养或注射到小鼠腹腔内培养 （3） ①. 蛋白质 ②. 转录和翻译 ③. 抗原-抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 多次注射可得到较多的能产生所需抗体的B淋巴细胞。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。 【小问2详解】 图中①过程得到的细胞有B细胞之间融合的细胞、骨髓瘤细胞和B细胞融合的细胞、骨髓瘤细胞之间融合的细胞，利用选择培养基能筛选出杂交瘤细胞，动物细胞培养所用的培养基都是液体培养基。②过程筛选后得到的杂交瘤细胞不单是产生所需抗体的细胞，需要经克隆化培养和抗体检测多次筛选，才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【小问3详解】 将小鼠抗体上结合抗原的区域“嫁接”到人的抗体上，是改造现有蛋白质，属于蛋白质工程。单克隆抗体是蛋白质，基因控制蛋白质合成是通过转录和翻译实现的。提取出的抗体需要利用抗原—抗体杂交技术进行鉴定。 24. 苏云金杆菌产生的Bt毒素蛋白具有杀虫能力，科研人员将Bt毒素蛋白基因（Bt基因）进行改造并导入棉花细胞中，成功培育出转基因抗虫棉。目的基因改造过程如图所示（数字表示基因序列中对应的核苷酸序号），其中穿梭质粒（由天然Ti质粒改造而来）载体含T-DNA但不含Vir基因（可辅助T-DNA转移）。回答下列问题： 注：F1～F3、R1～R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。 （1）以提取的DNA作模板，选用图中所示的________________引物进行PCR，可扩增完整的Bt基因。进行PCR时，除提供DNA模板和引物外，反应体系中还应加入__________________，并在一定的缓冲液中才能进行。PCR不同阶段及控制的温度条件分别为________________。 （2）去除与毒性无关的部分序列，可减小分子量，使重组DNA便于导入受体细胞；另一方面，由于细菌和棉花对密码子的偏好有所不同，还需人工合成部分基因序列与Bt基因中的一个片段拼接，拼接后的基因比原基因减少______________对碱基，该剪接过程用到的酶有__________________________。人工合成的基因序列控制合成的氨基酸序列不变，但会使_______________的碱基序列发生改变。 （3）为了使重组质粒分子量较小，转化率高，研究者设计了穿梭质粒和辅助质粒（含Vir基因但不含T-DNA），并将二者均导入农杆菌，推测设计的Vir基因的作用是___________________，使目的基因插入染色体DNA中。 （4）若选择培养基中抗生素浓度________________，通常会出现较多假阳性植株，一些未成功导入重组质粒的细胞也能存活下来。为检测目的基因是否成功导入植株，可提取总DNA作模板进行PCR，则可选用的引物为________________________。 【答案】（1） ①. F1和R3 ②. 4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶 ③. 变性温度90℃以上、复性温度50℃左右、延伸温度为72℃左右 （2） ①. 1692 ②. 限制酶和DNA连接酶 ③. mRNA（或密码子） （3）合成出特定蛋白质，切割穿梭质粒上的T-DNA （4） ①. 低 ②. F3和R2 【解析】 【小问1详解】 要扩增完整的Bt基因，根据PCR引物的设计原则（引物要与目的基因两端的序列互补配对），从图中可知应选用引物F1和R3。PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。不同阶段控制的温度条件为变性温度90℃以上、复性温度为50℃左右、延伸温度为72℃左右。 【小问2详解】 拼接后替换了1～1362位片段的基因序列，切除了1849～3540片段的基因序列，故切除后比原基因减少的碱基为1692对。将Bt基因切成三段需要限制性内切核酸酶催化，将人工合成的片段与Bt基因中的中间片段拼接需要DNA连接酶催化。由于细菌和棉花对密码子的偏好有所不同，还需人工合成部分碱基序列，以进一步得到不同的mRNA（或密码子）序列，从而提高基因表达中翻译过程的效率。 【小问3详解】 由题干信息可知，Vir基因可辅助T-DNA转移，联系Vir基因发挥作用后，目的基因会插入到染色体DNA中，推测Vir基因的作用是合成出特定蛋白质，切割穿梭质粒上的T-DNA。 【小问4详解】 若选择培养基中抗生素浓度过低，通常会出现较多假阳性植株（因为抗生素浓度低不能有效抑制未转化的细胞生长，一些未成功导入重组质粒的细胞也可能存活下来）。由图可知，该目的基因是由人工合成的1～1362基因序列与1363～1848基因序列拼接而成的，PCR扩增目的基因时，引物应在目的基因的两端，所以为检测棉花植株是否导入目的基因，应选用的引物是F3和R2。 25. 人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的胰岛素原，切除部分肽段（C肽段）后才会形成成熟的胰岛素，如图1所示。利用基因工程生产人胰岛素时可采用两种方法，方法一：根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素；方法二：利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。已知这两种方法都使用图2所示的同一种质粒作为载体，β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质，大肠杆菌菌落一般情况下呈白色。回答下列问题： （1）若氨基酸的平均分子量为100，胰岛素原形成胰岛素后，相对分子量减少________________。基于基因的选择性表达，方法2中mRNA取自人体的_________细胞。 （2）图2是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。在设计PCR引物时应添加限制酶__________的识别序列。为了提高限制酶识别及切割的效率，可以在引物限制酶识别序列的5′端添加保护碱基序列GGG。结合图2信息，适合的上游引物为______________。 a：5′—GTAGTCGAACAATTGGGG—3′ b：5′—GGGCAATTGGTAGTCGAA—3′ c：5′—GGGCTCGAGATGCCAATC—3′ d：5′—ATGCCAATCCTCGAGGGG—3′ （3）若用大肠杆菌生产胰岛素，将重组质粒导入大肠杆菌时，可用Ca2+处理大肠杆菌细胞，目的是________________。 （4）研究人员还可通过乳腺生物反应器批量生产人胰岛素，通过________________________法将重组质粒导入将来发育为雌性个体（如牛、羊）的受精卵中，经早期胚胎培养后进行________________________，待其出生并发育至泌乳期后可获得产物。 【答案】（1） ①. 2852 ②. 胰岛B （2） ①. XhoⅠ和MunⅠ ②. c （3）使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 （4） ①. 显微注射 ②. 胚胎移植 【解析】 【小问1详解】 胰岛素原的相对分子质量为100×86-18×85-2×3=7064，胰岛素的相对分子质量为100×51-18×49-2×3=4212，7064-4212=2852。由于基因的选择性表达，胰岛素由胰岛B细胞合成并分泌，因此指导胰岛素合成的mRNA仅在胰岛B细胞中存在，故此mRNA从胰岛B细胞中获取。 【小问2详解】 目的基因插入方向需与载体上lacZ基因方向一致（图2中箭头指示转录方向），目的基因中存在SalⅠ和NheⅠ限制酶的识别、切割位点，标记基因中存在EcoRⅠ限制酶的识别、切割位点，为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可根据模板链的情况在5′端添加限制酶XhoⅠ和MunⅠ的识别序列；为避免引物被降解或影响酶切效率，保护碱基序列应加在5′端，上游引物需包含保护碱基序列（GGG）、XhoⅠ识别序列（CTCGAG）及目的基因部分序列，选项c符合要求。 【小问3详解】 若用大肠杆菌生产胰岛素，将重组质粒导入大肠杆菌时，可用Ca2+处理大肠杆菌细胞，目的是使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 【小问4详解】 向动物受精卵中导入重组质粒用显微注射法，受精卵一般发育至桑葚胚或囊胚时将胚胎移植到受体子宫中，转基因动物出生后发育至泌乳期可从乳汁中获得产物。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $