精品解析：河南省三门峡市渑池二中2025-2026学年下学期期中考试高二生物

渑池二高2025-2026学年下学期期中考试 高二生物 注意事项： 1、本套试卷满分100分，考试时间75分钟。 2、选择题答案涂在答题卡上，非选择题答在答题卡上。 第Ⅰ卷（选择题，共48分） 一、单项选择题（每题3分，共48分） 1. 传统发酵技术与传统文化紧密相连，是中华饮食文化的重要组成部分。果酒、果醋、泡菜、腐乳、馒头、酸奶的制作等离不开传统发酵技术。下列相关叙述错误的是（ ） A. 果酒、馒头的制作离不开酵母菌 B. 果醋、酸奶、泡菜的酸味都来自醋酸 C. 参与腐乳制作的酵母、毛霉、曲霉都是真核生物 D. 酒精发酵以及泡菜的制作都需要无氧条件 【答案】B 【解析】 【分析】制作果酒利用的是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，在发酵初期通入空气可以使酵母菌进行有氧呼吸并大量繁殖；醋酸菌是好氧微生物，在果醋发酵过程中必须持续通入空气；参与腐乳发酵的青霉、毛霉、曲霉等都属于真核生物；泡菜、酸奶制作过程中使用的乳酸菌是一种厌氧细菌。 【详解】A、酵母菌既能进行有氧呼吸，也能进行无氧呼吸，是一类兼性厌氧微生物，果酒、馒头的制作离不开酵母菌，A正确； B、果醋的酸味来自醋酸，而酸奶、泡菜的酸味都来自乳酸，B错误； C、腐乳的制作过程中，多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，它们都是真核生物，C正确； D、酒精发酵利用的是酵母菌的无氧呼吸，泡菜制作利用的是乳酸菌发酵过程，且乳酸菌为厌氧菌，故酒精发酵以及泡菜的制作都需要无氧条件，D正确。 故选B 2. 某校生命科学社的同学利用学校实验平台进行酵母菌的纯培养，下列操作中正确的有几项（ ） ①在接种室内预先喷洒煤酚皂溶液，并用紫外灯照射进行消毒 ②将食物带入接种室并将课本放入超净工作台 ③实验前用肥皂洗手并用70%酒精对双手消毒 ④为避免杂菌污染，超净工作台需全程开启紫外灯 ⑤将灭菌后的培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 ⑥利用接种环接种前需对其进行灼烧灭菌 ⑦在平板划线时，只有第一次划线后需要对接种环灼烧灭菌 ⑧使用后的培养基可直接丢入垃圾桶 A. 3项 B. 4项 C. 5项 D. 6项 【答案】B 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】① 在接种室内预先喷洒煤酚皂溶液可以减少空气中的尘埃等杂质，用紫外灯照射能够杀灭空气中和物体表面的微生物，起到消毒作用，①正确； ② 接种室是进行无菌操作的场所，不能将食物带入，因为食物可能携带杂菌；课本也不应放入超净工作台，超净工作台应保持洁净，只放置与实验相关的无菌物品，②错误； ③ 实验前用肥皂洗手可以去除手上的污垢等，再用 70% 酒精对双手消毒，能杀灭手上的大部分微生物，③正确； ④ 超净工作台在使用前开启紫外灯进行消毒，在操作过程中不能开启紫外灯，因为紫外灯会对人体造成伤害，④错误； ⑤ 将灭菌后的培养基冷却至 50 ∘ C 左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，酒精灯火焰附近为无菌区域，可以避免杂菌污染，⑤正确； ⑥ 利用接种环接种前需对其进行灼烧灭菌，以杀灭接种环上可能携带的杂菌，⑥正确； ⑦ 在平板划线时，每次划线前后都需要对接种环灼烧灭菌，这样可以保证每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，从而达到分离菌种的目的，⑦错误； ⑧ 使用后的培养基含有微生物，不能直接丢入垃圾桶，需要进行灭菌处理后再丢弃，防止污染环境，⑧错误。 综上①③⑤⑥正确，B正确，ACD错误。 故选B。 3. 两位同学想了解自家花盆中每克土壤中微生物的数量，他们将10g土壤加入90mL无菌水，利用稀释涂布平板法进行检测，主要实验流程及结果如下图所示，下列叙述正确的是（ ） A. 除图中方法外，还可在显微镜下利用细菌计数板直接计数，计数结果即可代表活菌数 B. 利用涂布器将菌液涂布在培养基的过程中，每涂一下均需对涂布器灼烧灭菌 C. 若空白对照组平板上有10个菌落，则实验结果中的平均菌落数应计为200个 D. 若空白对照组平板上无菌落，通过计算可得每克土壤中的微生物数量为2.1×109个 【答案】D 【解析】 【分析】微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、除图中方法外，还可在显微镜下利用细菌计数板直接计数，该方法计数结果包括活菌数和死菌数，A错误； B、利用涂布器将菌液涂布在培养基的过程中，需在涂布完成后对涂布器进行灼烧灭菌，B错误； C、若空白对照组平板上有10个菌落，说明培养基灭菌不彻底或操作过程中有杂菌污染，则实验结果不能用作统计用，需要重新制作平板进行实验，C错误； D、若空白对照组平板上无菌落，通过计算可得每克土壤中的微生物数量为（187+231+212）÷3÷0.1×106=2.1×109个， D正确。 故选D。 4. 科学研究中，人们可以依据实验需求调整培养基的配方。下表为培养某微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ） 成分 NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 葡萄糖 H2O 青霉素 含量 3g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 30g 1L 0.1万单位 A. 依据物理状态划分，该培养基属于液体培养基 B. 依据实验用途划分，该培养基属于选择培养基 C. 若用该培养基培养霉菌，一般需要将培养基调至酸性 D. 若用该培养基培养尿素分解菌，则应将葡萄糖换成尿素 【答案】D 【解析】 【分析】①微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等。有些微生物还需要特殊的营养物质，如维生素、生长因子等。②培养基中含有琼脂的一般为固体培养基。③选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。例如利用细菌对青霉素的敏感性，用含青霉素的培养基抑制细菌生长繁殖，筛选出真菌。 【详解】A、该培养基配方中没有凝固剂，依物理性质划分，该培养基属于液体培养基，A正确； B、该培养基配方中含有青霉素，能抗青霉素的微生物才能生存，因此依用途划分，该培养基属于选择培养基，B正确； C、在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性，C正确； D、若用该培养基培养尿素分解菌（属于细菌），唯一氮源是尿素，因此则应将NaNO3换成尿素，并且除去青霉素，D错误。 故选D。 5. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程②用PEG诱导原生质体融合和细胞壁再生，杂种细胞含有亲本的2个细胞核 B. 过程①用纤维素酶和果胶酶处理时间的差异，可能与两亲本细胞壁结构差异有关 C. 过程④一般不需要光照，脱分化形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块 D. 过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例有差异 【答案】A 【解析】 【详解】A、过程②用PEG诱导原生质体融合，杂种细胞只含有1个细胞核，且细胞壁再生是在融合后的杂种细胞培养过程中，不是PEG诱导时，A错误； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，不同植物的细胞壁结构和成分可能存在差异，因此酶处理时间可能不同，B正确； C、过程④是脱分化过程，该过程一般不需要光照，脱分化形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块，C正确； D、据图可知，过程④表示脱分化形成愈伤组织，过程⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例有差异，D正确。 故选A。 6. 紫杉醇具有高抗癌活性，可广泛用于乳腺癌、宫颈癌的治疗，具有极高的科研及药用价值。为提高紫杉醇产量，我国科研人员以红豆杉为材料，通过植物细胞工程技术获得了紫杉醇高产细胞群。下列相关叙述正确的是（ ） A. 该技术依据的原理是植物细胞具有全能性 B. 该技术具有不受季节、天气等因素限制的优点 C. 紫杉醇是红豆杉植株的一种重要的初生代谢物 D. 红豆杉是自养生物，在细胞培养罐中不需要添加有机养料 【答案】B 【解析】 【分析】初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个生命过程中它一直进行着。初生代谢物有糖类、脂质、蛋白质和核酸等。次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在一定的环境和时间条件下才进行。 【详解】A、植物细胞工程技术获得紫杉醇高产细胞群，并没有培养成完整的植株，没有体现植物细胞的全能性，A 错误； B、植物细胞工程是在离体条件下进行的，其过程不受季节、天气等因素限制，B 正确； C、紫杉醇是红豆杉植株的一种重要的次生代谢物，而不是初生代谢物，初生代谢物是维持细胞正常生命活动所必需的物质，次生代谢物不是植物生长发育所必需的，C 错误； D、红豆杉是植物，但在细胞培养罐中的细胞没有叶绿体，不能进行光合作用，属于异养型，需要添加有机养料，D 错误。 故选B。 7. 胚胎工程的许多技术，实际上是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。因此，了解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分重要。下列相关叙述正确的是（ ） A. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在子宫中完成 B. 胚胎发育早期，细胞的数量不断增加的同时，胚胎的总体积也不断增加 C. 桑葚胚期，会出现透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化 D. 囊胚期，胚胎细胞逐渐分化，形成的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织 【答案】D 【解析】 【分析】哺乳动物胚胎发育的重要阶段：（1）卵裂期：在透明带内进行的，特点是细胞分裂方式为有丝分裂，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，或略有缩小。（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎。（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。 【详解】A、在自然条件下，哺乳动物的受精过程在输卵管中完成，A错误； B、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加的同时，胚胎的总体积基本不变或略有减小，B错误； C、囊胚的扩大会导致透明圈破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫作孵化，发生在囊胚期，C错误； D、囊胚期，细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，D正确。 故选D。 8. 如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是（　　） A. B点之前的培养称为原代培养，B之后的培养称为传代培养 B. AB和DE段发生了接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理 C. 细胞培养应在含95%空气和5%CO2的培养箱中进行培养，CO2的作用是维持培养液的pH D. 分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物组织消化后的初次培养称为原代培养，分瓶后的培养称为传代培养，B点之前为初次培养，B点后为筛选分装后的传代培养，A正确； B、AB段和DE段细胞增殖代数不再增加，是因为细胞发生接触抑制，停止分裂增殖，此时需要用胰蛋白酶处理使细胞分散，以便分瓶继续培养，B正确； C、动物细胞培养的气体环境为95%空气和5%CO2，其中CO2的作用是维持培养液的pH，C正确； D、克隆指的是由单个细胞经有丝分裂形成的遗传特性相同的细胞群，分瓶后的培养瓶中的细胞群来自多个细胞，不属于一个克隆，D错误。 9. 青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程①注射抗原的目的是增加小鼠体内的单克隆抗体的量 B. 过程③常使用选择培养基，融合细胞能生长，未融合细胞均不能生长 C. 若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙、丙、丁在相同分裂期时染色体组数目完全相同 D. 过程④常使用克隆化培养和抗原—抗体杂交技术进行筛选，其筛选原理和目的与过程③相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程①为注射抗原，目的是诱导小鼠产生具有免疫能力的B淋巴细胞，A错误； B、过程③是筛选杂交瘤细胞，常使用选择培养基，杂交瘤细胞能生长，自身融合和未融合细胞均不能生长，B错误； C、因细胞甲和小鼠骨髓瘤细胞均来源于小鼠，两种细胞的染色体组数相同，若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙和经筛选后的丙、丁（都是杂交瘤细胞）的染色体组数一定相同，C正确； D、过程③是筛选杂交瘤细胞，过程④用克隆培养和抗原—抗体杂交技术得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，两者原理和目的不同，D错误。 故选C。 10. 2019年1月，中国科学家首次利用CRISPR/Cas9技术，获得一只生物节律核心基因BMALI敲除的猕猴甲，并通过体细胞核移植技术，获得5只生物节律紊乱的克隆猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示（①②表示操作过程）。下列说法正确的是（　　） A. BMALI基因只存在于下丘脑细胞内并在下丘脑细胞中表达进而影响生物节律 B. 采集到的卵母细胞需在体外培养至MⅡ期，去核后作为动物体细胞核移植的受体细胞 C. ①去核的目的是使克隆猕猴的遗传物质全部来自有价值的供体细胞细胞核 D. ②通过电融合法使两细胞融合形成的重构胚需培养至桑葚胚或原肠胚再转至代孕雌猴子宫内 【答案】B 【解析】 【分析】1、题图是通过核移植技术克隆猕猴的技术流程，①表示显微操作去核，②表示电融合法使两细胞融合。 2、动物细胞培养条件：（1）无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒——一定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。（2）营养成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）。（3）温度、pH：大多数哺乳动物适宜温度为36.5±0.5℃，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、下丘脑与生物节律的控制有关，BMALI基因是生物节律核心基因，存在于动物全身体细胞内，但只在下丘脑相关细胞中表达进而影响生物节律，A错误； B、采集到的卵母细胞需在体外培养至MⅡ期，再进行①显微操作，去核后作为动物体细胞核移植的受体细胞，B正确； C、①去核的目的是使克隆猕猴的细胞核中的遗传物质来自供体细胞细胞核，C错误； D、②通过电融合法使两细胞融合形成重构胚，需用物理法或化学法激活发育至桑葚胚或囊胚阶段后再移植至经同期发情处理的代孕雌猴子宫内，D错误。 故选B。 11. 研究人员仿照制备乳腺生物反应器的思路，制备了一种膀胱生物反应器用其获得人体特殊功能蛋白W，基本过程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 图中①和③过程代表的操作分别是显微注射和胚胎移植 B. 转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的遗传信息不同 C. 需用激素对代孕母体进行同期发情处理 D. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制 【答案】B 【解析】 【详解】A、图中①表示将目的基因导入受体细胞，利用受精卵作为重组表达载体的宿主细胞常采用显微注射的方法将载体注入，③表示胚胎移植，A正确； B、转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞是体细胞有丝分裂再经分化而来，遗传信息相同，B错误； C、对代孕母体进行同期发情处理，以使其子宫处于与供体相同的生理状态，C正确； D、由于只有雌性动物哺乳期才能产奶，因此与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制，D正确。 故选B。 12. 为了研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠（黑鼠）数量，科学家通过诱导模型鼠体细胞转化获得iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 黑鼠的体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程类似植物细胞的再分化过程 B. 为了获得更多的双细胞胚，可对灰鼠注射促性腺激素，使其超数排卵 C. 可取重构胚的滋养层细胞进行性别鉴定，以确定X鼠的性别 D. 图中X鼠的体色可能为白色、灰色或黑色 【答案】B 【解析】 【详解】A、黑鼠体细胞转化为 iPS 细胞是脱分化，类似植物脱分化，不是再分化，A 错误； B、对灰鼠注射促性腺激素可超数排卵，获得更多双细胞胚，B 正确； C、重构胚的滋养层细胞来自于灰鼠，该细胞团与灰鼠性别一致，不决定最后克隆鼠X的性别，C 错误； D、X 鼠遗传物质来自黑鼠，体色应为黑色，D 错误。 故选B。 13. 基因工程是在DNA分子水平上进行的，需要有专门的工具。下列关于基因工程所需基本工具酶的叙述，错误的是（ ） A. 不同限制酶切割后产生的DNA片段可能被某种DNA连接酶连接 B. T4 DNA连接酶可以催化磷酸二酯键形成进而连接黏性末端或平末端 C. 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，并且只在其中一条链的特定部位切割 D. 原核细胞内的限制酶可切割入侵的DNA分子，通常不切割细菌自身的DNA分子 【答案】C 【解析】 【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 【详解】A、不同限制酶切割后产生的DNA片段，若具有相同的末端，则可被某种DNA连接酶连接，A正确； B、T4DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的黏性末端，也可以连接双链DNA片段的平末端，B正确； C、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，C错误； D、原核生物内的限制酶可切割入侵的DNA分子而保护自身，一般不切割自身的DNA分子，D正确。 故选C。 14. 有关“DNA粗提取与鉴定”“DNA扩增”“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，错误的是（　　） A. 提取DNA时，在研磨液中加入切碎的洋葱，充分研磨后过滤取沉淀物进行粗提取 B. 琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离DNA片段的大小 C. PCR扩增反应体系中dNTP（脱氧核糖核苷三磷酸）既可以为扩增提供原料，也可以为子链的合成提供能量 D. 将DNA丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，沸水浴加热5min，试管冷却后溶液呈现蓝色 【答案】A 【解析】 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色。 【详解】A、使用洋葱提取DNA时，先在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐，充分研磨后过滤，取滤液进行粗提取，A错误； B、琼脂糖凝胶浓度影响凝胶孔径大小，浓度高适合分离小片段DNA，浓度低适合大片段，因此需根据待分离DNA片段大小选择浓度，B正确； C、PCR反应中，dNTP作为原料参与子链合成，其特殊的化学键水解可为反应提供能量，C正确； D、DNA溶于2mol/L NaCl溶液后，加入二苯胺试剂，沸水浴加热会与DNA结合显蓝色，步骤描述正确，D正确。 故选A。 15. 农杆菌是一种土壤中的常见微生物，可在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物。农科院的研究员利用农杆菌这一特性成功将耐盐基因导入烟草细胞，最终获得了转基因耐盐烟草植株。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用该方法也可将目的基因导入单子叶植物 B. 构建表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶 C. 构建表达载体时应将耐盐基因插入到T-DNA序列之后 D. 利用该方法可将耐盐基因整合到烟草细胞染色体DNA中 【答案】C 【解析】 【分析】农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上； 【详解】A、农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力，但通过人工改造用该方法也可将目的基因导入单子叶植物，A正确； B、构建表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶，前者被称为基因的剪刀，后者被称为基因针线，B正确； C、构建表达载体时应将耐盐基因插入到T-DNA序列之中，因为T-DNA是可转移的DNA，能将目的基因与受体细胞的染色体整合到一起，C错误； D、利用农杆菌转化法可将耐盐基因整合到烟草细胞染色体DNA中，因为农杆菌质粒中含有T-DNA，D正确。 故选C。 16. 将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因 Pin-Ⅱ导入杨树细胞，可培育抗虫杨树。基因表达载体的构建过程如图所示，其中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，Neo8表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示。下列叙述错误的是（ ） A. 利用PCR技术扩增目的基因时，应该选用引物2和引物3 B. 选用KpnI和SmaI，可提高目的基因与质粒的重组效率 C. 为将表达载体导入农杆菌中，可以使用Ca2+处理该细胞 D. 成功导入目的基因的杨树细胞只对新霉素产生抗性 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程包括四个基本程序：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细 胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3，A正确； B、为使目的基因与质粒高效重组，选用KpnⅠ和HindⅢ比选用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好，因为SmaI切割DNA后形成平末端，T4DNA连接酶连接平末端的效率相对较低，B错误； C、为将表达载体导入农杆菌，可以使用Ca2+处理受体细胞，使其处于能吸收周围环境中DNA分子的状态，然后再将重组质粒导入其中，C正确； D、只有T-DNA区段会导入植物受体细胞，因此氨苄青霉素抗性基因不会导入植物受体细胞中，即成功导入目的基因的杨树细胞只能表现出新霉素抗性，D正确。 故选B。 第Ⅱ卷（非选择题，共52分） 二、非选择题（共52分） 17. 贾氏贡醋是河南三门峡的传统名产，最初以柿子为主，随着工艺的发展，其原料已拓展到苹果、大枣、山楂、葡萄等多种水果，这些不同的原料在酿造的过程中被加入，使贾氏贡醋更加富有营养。贾氏贡醋正是这些原料通过糖化、酒精发酵和醋酸发酵制成。请回答下列问题： （1）贾氏贡醋在酿造过程中一般需经过酒精发酵，此阶段需在________（填“有氧”或“无氧”）条件下进行，其中起主要作用的微生物的代谢类型是________。 （2）在果酒的基础上进行的醋酸发酵过程中，发生的主要反应（写反应方程式）________，该过程改变的条件有________（至少写出2点）。 （3）制作果酒和果醋的过程中，均会引起发酵液的pH________（填“变大”或“变小”），其中涉及到的物质分别是________。 【答案】（1） ①. 无氧 ②. 异养兼性厌氧型 （2） ①. C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量 ②. 通入氧气、升高温度 （3） ①. 变小 ②. 二氧化碳、醋酸 【解析】 【小问1详解】 酒精发酵的核心是酵母菌的无氧呼吸产乙醇，因此需要无氧环境。酵母菌无法自主合成有机物，属于异养生物；同时它在有氧条件下可进行有氧呼吸繁殖，无氧条件下进行无氧呼吸产酒精，因此代谢类型为异养兼性厌氧型。 【小问2详解】 以果酒为底物的醋酸发酵，是醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸，对应反应式：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。醋酸菌为好氧微生物，且最适生长温度（30~35℃）高于酵母菌酒精发酵的最适温度（18~30℃），因此需要调整的条件包括通入氧气、升高发酵温度。 【小问3详解】 果酒发酵过程中，酵母菌呼吸作用产生的CO2溶于发酵液生成碳酸，使pH下降；醋酸发酵过程中生成醋酸，酸性强于碳酸，会进一步降低pH，因此两个过程发酵液pH均变小，对应的影响物质分别是二氧化碳和醋酸。 18. 某化工厂的生产废水中含有一种含氮有机物Y，直接排放会污染土壤，现需将废水中物质Y降解处理后方可排放。某研究小组欲从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。根据所学知识回答下列问题： （1）培养基的配方一般都含有__________等营养物质。若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y作为_________。 （2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙、丙3种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择__________菌落进一步纯化，选择的依据是___________。 （3）上述实验中，乙菌落可正常生长，但周围没有出现透明圈。某同学认为这是由于该菌可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步验证这一说法，请简要写出实验思路并预期结果及结论：________。 【答案】（1） ①. 水、碳源、氮源和无机盐 ②. 唯一氮源 （2） ①. 甲 ②. 甲菌落透明圈直径与菌落直径差值最大，说明其分解Y的效率最高 （3）将乙菌接种在无氮源培养基上，在正常/无菌空气中培养一段时间，发现细菌能生长，说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。（其他合理答案也可给分，不能写在纯氮气中培养） 【解析】 【分析】选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。 【小问1详解】 培养基的配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。该实验目的是从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），因此若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y（一种含氮有机物）作为唯一氮源，在此培养基上不能分解Y的微生物会因为缺乏氮源而不能生长，因此可筛选出降解Y的目标菌。 【小问2详解】 已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。若Y被分解，则会在菌落周围出现透明圈，根据图示可知，甲菌落透明圈直径与菌落直径差值最大，说明其分解Y的效率最高，因此应该选择甲菌落进一步纯化。 【小问3详解】 若该菌可以利用空气中的氮气作为氮源，则在培养基中无氮源的条件下也可以生长，因此要验证乙菌可以利用空气中的氮气作为氮源，则可以将乙菌接种在无氮源培养基上，在正常/无菌空气中培养一段时间，若发现该细菌能生长，说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。 19. 利用植物体细胞杂交技术可培育新的作物品种。科学家尝试将番茄和马铃薯杂交，希望培育出地上结番茄、地下长马铃薯的“超级作物”。操作流程见下图，请回答下列问题： （1）处理A的具体操作为________。诱导原生质体融合的方法有________（至少答出两点）。 （2）由杂种细胞到形成番茄一马铃薯杂种植株的过程利用了_________技术，其中在诱导愈伤组织生芽的培养基中需要添加________（填激素名称）。 （3）与传统育种技术相比，利用植物体细胞杂交技术育种的优点主要是________。 （4）经实践检验，科学家并没有得到地上结番茄、地下长马铃薯的“超级作物”，原因可能是________。 【答案】（1） ①. 利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 ②. 电融合法、离心法、PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等 （2） ①. 植物组织培养 ②. 生长素、细胞分裂素 （3）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 （4）生物体内基因的表达不是孤立的，他们之间是相互调控、相互影响的。杂种植株虽然具有两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达会相互干扰，无法有序表达，故无法实现地上结番茄、地下长马铃薯 【解析】 【分析】利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞，具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。 【小问1详解】 植物细胞去掉细胞壁后为原生质体，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，因此处理A是利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，诱导原生质体融合的方法有电融合法、离心法、PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等。 【小问2详解】 由杂种细胞到形成番茄一马铃薯杂种植株的过程利用了植物组织培养技术。生长素和细胞分裂素可调节细胞的生长和分裂，因此在诱导愈伤组织生芽的培养基中还需要添加生长素、细胞分裂素。 【小问3详解】 植物体细胞杂交技术与传统杂交育种方法相比，优点在于克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍，即打破了生殖隔离。 【小问4详解】 生物体内基因的表达不是孤立的，他们之间是相互调控、相互影响的。“番茄—马铃薯”虽然具有两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再有序表达，所以获得的“番茄—马铃薯”，没有实现地上长番茄、地下结马铃薯。 20. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。胚胎工程技术及4种应用的相关情况如图所示，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛。回答下列问题。 （1）在应用1中，培养细胞A时，需要定期更换培养液，目的是_____。诱导细胞A与细胞B融合的方法通常是_____。 （2）在应用2中，对供体1一般注射_____使其超数排卵。在体外受精过程中，常以_____作为受精的标志。 （3）在应用3中，分割囊胚时要注意将_____，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。若要在移植前对胚胎进行性别鉴定应选用_____细胞。 （4）利用应用1和应用2所生产犊牛的遗传物质组成_____（填“相同”“不完全相同”或“完全不相同”）。 （5）除应用4所利用的干细胞外，干细胞还存在于_____等多种组织和器官中。 【答案】（1） ①. 清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成危害 ②. 电融合法（或PEG、或灭活的病毒） （2） ①. 促性腺激素 ②. 观察到两个极体或雌、雄原核 （3） ①. 内细胞团均等分割 ②. 滋养层 （4）不完全相同 （5）骨髓、脐带血 【解析】 【分析】题图分析，应用1中：供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛；应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；应用3中：采用了胚胎分割移植技术；应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。 【小问1详解】 在应用1中，培养细胞A时，需要定期更换培养液，目的是清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成危害。诱导细胞A与细胞B融合的方法通常是电融合法（或PEG、或灭活的病毒） 【小问2详解】 在应用2中，对供体1一般注射促性腺激素使其超数排卵，以便获得更多的胚胎。在体外受精过程中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志，雌雄原核融合是受精完成的标志。 【小问3详解】 在应用3中，分割囊胚时要注意将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。若要在移植前对胚胎进行性别鉴定应选用滋养层细胞，因为滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜，用该部位细胞进行性别鉴定不会影响胚胎发育。 【小问4详解】 利用应用1和应用2所生产犊牛的遗传物质组成不完全相同，前者是无性生殖，后者为有性生殖。 【小问5详解】 除应用4所利用的干细胞外，干细胞还存在于骨髓、脐带血等多种组织和器官中，这些干细胞具有发育的全能性。 21. 干扰素是一种重要的细胞因子，它可通过刺激机体细胞产生抗病毒蛋白，抑制病毒增殖，临床上被广泛用于病毒感染性疾病的治疗。传统生产干扰素的方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取1mg干扰素，产量极低。科学家将干扰素基因转入大肠杆菌细胞中获得工程菌，再通过工程菌发酵制取干扰素，从而使产量得以明显提升。请回答下列问题： （1）除利用PCR外，还可通过_______获取目的基因（至少答两点）。 （2）用图1所示的质粒和图2所示的干扰素基因构建基因表达载体。为保证目的基因正确拼接到载体上，应选用限制酶_______。然而前期研究发现干扰素基因的两端没有限制酶识别序列，需通过PCR技术添加。根据图2信息，PCR时应选取的引物对是______，若β链为转录的模板链，结合图3限制酶识别序列信息，你所选的与β链互补的引物5’端需要添加的序列为_______。 （3）构建基因表达载体之后，研究人员一般先用________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种______的生理状态，然后将重组的基因表达载体导入大肠杆菌。实践中需要对上述操作得到的大肠杆菌进一步检测与鉴定。将大肠杆菌分离并纯培养之后，分别利用四环素和氨苄青霉素对其进行筛选，性状表现为_________的大肠杆菌即为我们所需的工程菌。 【答案】（1）人工合成、构建基因文库（基因组文库、cDNA文库） （2） ①. BclI和HindⅢ ②. 引物②和引物③ ③. 5'-TGATCA-3' （3） ①. Ca2+ ②. 能吸收周围环境中DNA分子 ③. 四环素抗性且氨苄青霉素敏感（或抗四环素且不抗氨苄青霉素） 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 目的基因的获取方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。因此除利用PCR外，还可通过人工合成、构建基因文库（基因组文库、cDNA文库）等方法获取目的基因。 【小问2详解】 据图1可知，质粒的四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因上均有BamHⅠ的切割位点，若选用BamHⅠ酶切割质粒，则会导致质粒上仅有的两个标记基因均被破坏，会影响后续对导入目的基因的细胞的筛选，若选用一种酶切割质粒，则可能会导致质粒自身环化，因此为保证目的基因正确拼接到载体上，常选用两种不同的限制酶切割质粒，据图可知，应选用限制酶BclI和HindⅢ，为保证目的基因两端带有和质粒切出的两端黏性末端相同的序列，因此扩增目的基因时常在引物的5’端添加相应限制酶的序列，目的基因扩增时，引物需要结合在模板链的3’端，根据图2可知扩增干扰素基因需要选择引物②和③，若β链为转录的模板链，根据模板链的3’端要靠近启动子，因此引物③的5’端需要添加BclI酶的识别序列，即所选的与β链互补的引物5’端需要添加的序列为5'-TGATCA-3'。 【小问3详解】 若受体细胞为大肠杆菌，则将基因表达载体导入受体细胞之前，常用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使之变为容易吸收周围环境中DNA分子得状态，易于基因表达载体进入大肠杆菌。由于干扰素基因的插入破坏了氨苄青霉素抗性基因，因此重组质粒上的标记基因只有四环素抗性基因，故将导入基因表达载体的大肠杆菌分离并纯培养之后，在四环素的培养基上能生长，但在氨苄青霉素的培养基上不能生长，即具有四环素抗性且氨苄青霉素敏感。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 渑池二高2025-2026学年下学期期中考试 高二生物 注意事项： 1、本套试卷满分100分，考试时间75分钟。 2、选择题答案涂在答题卡上，非选择题答在答题卡上。 第Ⅰ卷（选择题，共48分） 一、单项选择题（每题3分，共48分） 1. 传统发酵技术与传统文化紧密相连，是中华饮食文化的重要组成部分。果酒、果醋、泡菜、腐乳、馒头、酸奶的制作等离不开传统发酵技术。下列相关叙述错误的是（ ） A. 果酒、馒头的制作离不开酵母菌 B. 果醋、酸奶、泡菜的酸味都来自醋酸 C. 参与腐乳制作的酵母、毛霉、曲霉都是真核生物 D. 酒精发酵以及泡菜的制作都需要无氧条件 2. 某校生命科学社的同学利用学校实验平台进行酵母菌的纯培养，下列操作中正确的有几项（ ） ①在接种室内预先喷洒煤酚皂溶液，并用紫外灯照射进行消毒 ②将食物带入接种室并将课本放入超净工作台 ③实验前用肥皂洗手并用70%酒精对双手消毒 ④为避免杂菌污染，超净工作台需全程开启紫外灯 ⑤将灭菌后的培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 ⑥利用接种环接种前需对其进行灼烧灭菌 ⑦在平板划线时，只有第一次划线后需要对接种环灼烧灭菌 ⑧使用后的培养基可直接丢入垃圾桶 A. 3项 B. 4项 C. 5项 D. 6项 3. 两位同学想了解自家花盆中每克土壤中微生物的数量，他们将10g土壤加入90mL无菌水，利用稀释涂布平板法进行检测，主要实验流程及结果如下图所示，下列叙述正确的是（ ） A. 除图中方法外，还可在显微镜下利用细菌计数板直接计数，计数结果即可代表活菌数 B. 利用涂布器将菌液涂布在培养基的过程中，每涂一下均需对涂布器灼烧灭菌 C. 若空白对照组平板上有10个菌落，则实验结果中的平均菌落数应计为200个 D. 若空白对照组平板上无菌落，通过计算可得每克土壤中的微生物数量为2.1×109个 4. 科学研究中，人们可以依据实验需求调整培养基的配方。下表为培养某微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ） 成分 NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 葡萄糖 H2O 青霉素 含量 3g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 30g 1L 0.1万单位 A. 依据物理状态划分，该培养基属于液体培养基 B. 依据实验用途划分，该培养基属于选择培养基 C. 若用该培养基培养霉菌，一般需要将培养基调至酸性 D. 若用该培养基培养尿素分解菌，则应将葡萄糖换成尿素 5. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程②用PEG诱导原生质体融合和细胞壁再生，杂种细胞含有亲本的2个细胞核 B. 过程①用纤维素酶和果胶酶处理时间的差异，可能与两亲本细胞壁结构差异有关 C. 过程④一般不需要光照，脱分化形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块 D. 过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例有差异 6. 紫杉醇具有高抗癌活性，可广泛用于乳腺癌、宫颈癌的治疗，具有极高的科研及药用价值。为提高紫杉醇产量，我国科研人员以红豆杉为材料，通过植物细胞工程技术获得了紫杉醇高产细胞群。下列相关叙述正确的是（ ） A. 该技术依据的原理是植物细胞具有全能性 B. 该技术具有不受季节、天气等因素限制的优点 C. 紫杉醇是红豆杉植株的一种重要的初生代谢物 D. 红豆杉是自养生物，在细胞培养罐中不需要添加有机养料 7. 胚胎工程的许多技术，实际上是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。因此，了解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分重要。下列相关叙述正确的是（ ） A. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在子宫中完成 B. 胚胎发育早期，细胞的数量不断增加的同时，胚胎的总体积也不断增加 C. 桑葚胚期，会出现透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化 D. 囊胚期，胚胎细胞逐渐分化，形成的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织 8. 如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是（　　） A. B点之前的培养称为原代培养，B之后的培养称为传代培养 B. AB和DE段发生了接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理 C. 细胞培养应在含95%空气和5%CO2的培养箱中进行培养，CO2的作用是维持培养液的pH D. 分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆 9. 青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程①注射抗原的目的是增加小鼠体内的单克隆抗体的量 B. 过程③常使用选择培养基，融合细胞能生长，未融合细胞均不能生长 C. 若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙、丙、丁在相同分裂期时染色体组数目完全相同 D. 过程④常使用克隆化培养和抗原—抗体杂交技术进行筛选，其筛选原理和目的与过程③相同 10. 2019年1月，中国科学家首次利用CRISPR/Cas9技术，获得一只生物节律核心基因BMALI敲除的猕猴甲，并通过体细胞核移植技术，获得5只生物节律紊乱的克隆猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示（①②表示操作过程）。下列说法正确的是（　　） A. BMALI基因只存在于下丘脑细胞内并在下丘脑细胞中表达进而影响生物节律 B. 采集到的卵母细胞需在体外培养至MⅡ期，去核后作为动物体细胞核移植的受体细胞 C. ①去核的目的是使克隆猕猴的遗传物质全部来自有价值的供体细胞细胞核 D. ②通过电融合法使两细胞融合形成的重构胚需培养至桑葚胚或原肠胚再转至代孕雌猴子宫内 11. 研究人员仿照制备乳腺生物反应器的思路，制备了一种膀胱生物反应器用其获得人体特殊功能蛋白W，基本过程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 图中①和③过程代表的操作分别是显微注射和胚胎移植 B. 转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的遗传信息不同 C. 需用激素对代孕母体进行同期发情处理 D. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制 12. 为了研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠（黑鼠）数量，科学家通过诱导模型鼠体细胞转化获得iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 黑鼠的体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程类似植物细胞的再分化过程 B. 为了获得更多的双细胞胚，可对灰鼠注射促性腺激素，使其超数排卵 C. 可取重构胚的滋养层细胞进行性别鉴定，以确定X鼠的性别 D. 图中X鼠的体色可能为白色、灰色或黑色 13. 基因工程是在DNA分子水平上进行的，需要有专门的工具。下列关于基因工程所需基本工具酶的叙述，错误的是（ ） A. 不同限制酶切割后产生的DNA片段可能被某种DNA连接酶连接 B. T4 DNA连接酶可以催化磷酸二酯键形成进而连接黏性末端或平末端 C. 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，并且只在其中一条链的特定部位切割 D. 原核细胞内的限制酶可切割入侵的DNA分子，通常不切割细菌自身的DNA分子 14. 有关“DNA粗提取与鉴定”“DNA扩增”“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，错误的是（　　） A. 提取DNA时，在研磨液中加入切碎的洋葱，充分研磨后过滤取沉淀物进行粗提取 B. 琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离DNA片段的大小 C. PCR扩增反应体系中dNTP（脱氧核糖核苷三磷酸）既可以为扩增提供原料，也可以为子链的合成提供能量 D. 将DNA丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，沸水浴加热5min，试管冷却后溶液呈现蓝色 15. 农杆菌是一种土壤中的常见微生物，可在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物。农科院的研究员利用农杆菌这一特性成功将耐盐基因导入烟草细胞，最终获得了转基因耐盐烟草植株。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用该方法也可将目的基因导入单子叶植物 B. 构建表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶 C. 构建表达载体时应将耐盐基因插入到T-DNA序列之后 D. 利用该方法可将耐盐基因整合到烟草细胞染色体DNA中 16. 将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因 Pin-Ⅱ导入杨树细胞，可培育抗虫杨树。基因表达载体的构建过程如图所示，其中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，Neo8表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示。下列叙述错误的是（ ） A. 利用PCR技术扩增目的基因时，应该选用引物2和引物3 B. 选用KpnI和SmaI，可提高目的基因与质粒的重组效率 C. 为将表达载体导入农杆菌中，可以使用Ca2+处理该细胞 D. 成功导入目的基因的杨树细胞只对新霉素产生抗性 第Ⅱ卷（非选择题，共52分） 二、非选择题（共52分） 17. 贾氏贡醋是河南三门峡的传统名产，最初以柿子为主，随着工艺的发展，其原料已拓展到苹果、大枣、山楂、葡萄等多种水果，这些不同的原料在酿造的过程中被加入，使贾氏贡醋更加富有营养。贾氏贡醋正是这些原料通过糖化、酒精发酵和醋酸发酵制成。请回答下列问题： （1）贾氏贡醋在酿造过程中一般需经过酒精发酵，此阶段需在________（填“有氧”或“无氧”）条件下进行，其中起主要作用的微生物的代谢类型是________。 （2）在果酒的基础上进行的醋酸发酵过程中，发生的主要反应（写反应方程式）________，该过程改变的条件有________（至少写出2点）。 （3）制作果酒和果醋的过程中，均会引起发酵液的pH________（填“变大”或“变小”），其中涉及到的物质分别是________。 18. 某化工厂的生产废水中含有一种含氮有机物Y，直接排放会污染土壤，现需将废水中物质Y降解处理后方可排放。某研究小组欲从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。根据所学知识回答下列问题： （1）培养基的配方一般都含有__________等营养物质。若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y作为_________。 （2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙、丙3种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择__________菌落进一步纯化，选择的依据是___________。 （3）上述实验中，乙菌落可正常生长，但周围没有出现透明圈。某同学认为这是由于该菌可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步验证这一说法，请简要写出实验思路并预期结果及结论：________。 19. 利用植物体细胞杂交技术可培育新的作物品种。科学家尝试将番茄和马铃薯杂交，希望培育出地上结番茄、地下长马铃薯的“超级作物”。操作流程见下图，请回答下列问题： （1）处理A的具体操作为________。诱导原生质体融合的方法有________（至少答出两点）。 （2）由杂种细胞到形成番茄一马铃薯杂种植株的过程利用了_________技术，其中在诱导愈伤组织生芽的培养基中需要添加________（填激素名称）。 （3）与传统育种技术相比，利用植物体细胞杂交技术育种的优点主要是________。 （4）经实践检验，科学家并没有得到地上结番茄、地下长马铃薯的“超级作物”，原因可能是________。 20. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。胚胎工程技术及4种应用的相关情况如图所示，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛。回答下列问题。 （1）在应用1中，培养细胞A时，需要定期更换培养液，目的是_____。诱导细胞A与细胞B融合的方法通常是_____。 （2）在应用2中，对供体1一般注射_____使其超数排卵。在体外受精过程中，常以_____作为受精的标志。 （3）在应用3中，分割囊胚时要注意将_____，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。若要在移植前对胚胎进行性别鉴定应选用_____细胞。 （4）利用应用1和应用2所生产犊牛的遗传物质组成_____（填“相同”“不完全相同”或“完全不相同”）。 （5）除应用4所利用的干细胞外，干细胞还存在于_____等多种组织和器官中。 21. 干扰素是一种重要的细胞因子，它可通过刺激机体细胞产生抗病毒蛋白，抑制病毒增殖，临床上被广泛用于病毒感染性疾病的治疗。传统生产干扰素的方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取1mg干扰素，产量极低。科学家将干扰素基因转入大肠杆菌细胞中获得工程菌，再通过工程菌发酵制取干扰素，从而使产量得以明显提升。请回答下列问题： （1）除利用PCR外，还可通过_______获取目的基因（至少答两点）。 （2）用图1所示的质粒和图2所示的干扰素基因构建基因表达载体。为保证目的基因正确拼接到载体上，应选用限制酶_______。然而前期研究发现干扰素基因的两端没有限制酶识别序列，需通过PCR技术添加。根据图2信息，PCR时应选取的引物对是______，若β链为转录的模板链，结合图3限制酶识别序列信息，你所选的与β链互补的引物5’端需要添加的序列为_______。 （3）构建基因表达载体之后，研究人员一般先用________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种______的生理状态，然后将重组的基因表达载体导入大肠杆菌。实践中需要对上述操作得到的大肠杆菌进一步检测与鉴定。将大肠杆菌分离并纯培养之后，分别利用四环素和氨苄青霉素对其进行筛选，性状表现为_________的大肠杆菌即为我们所需的工程菌。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $