摘要:
该高中生物学高考复习课件聚焦“微生物的培养技术及应用”专题,依据高考评价体系梳理了培养基配制、无菌技术、纯培养、选择培养与计数四大核心考点,通过近三年模拟题及真题分析,明确“无菌技术操作”“纯培养方法”“选择培养基应用”为高频考点,归纳出选择题、实验分析题等常考题型,体现备考针对性。
课件亮点在于“真题情境+核心素养+应试策略”融合,如以2025年湖南九校联考培养基配方题为例,运用科学思维分析自养型微生物判断依据,结合探究实践指导平板划线灼烧次数及目的。特设“易错点警示”(如灭菌方法混淆)和“计数公式应用”(30-300菌落计数),帮助学生掌握答题技巧,教师可借此系统开展考点突破,提升复习效率。
内容正文:
微生物的培养技术及应用
第2课
D
1.(2024·西安高新一中模拟)在实验室培养微生物,需要人为地为微生物提供适宜的营养和环境条件。下列关于培养基配制的说法正确的是( )
A.培养基中需要碳源、氮源、水和无机盐齐全
B.培养基中必须添加琼脂
C.培养基制备中均需调节pH至酸性
D.无论哪种培养基均需要灭菌
一、培养基
微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物
特殊需求 添加_______ 一般pH调至_____ 一般pH调至
____________ _____
(1)培养基的配方
①主要营养物质:水、 、氮源、 。
②其他条件:pH、 和氧气。如表:
碳源
无机盐
特殊营养物质
维生素
酸性
中性或弱碱性
无氧
牛肉膏和蛋白胨分别提供什么营养?(教材P10)
考点一、微生物的基本培养技术
合成蛋白质、核酸等物质
考点一 微生物的基本培养技术
(2)培养基的种类(按物理性质分)
培养基种类 培养基特点 作用
培养基 加凝固剂,如_____
半固体培养基 容器放倒不致流出,剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定
培养基 不加凝固剂
固体
琼脂
液体
微生物的分离与鉴定,活菌计数
常用于工业生产、微生物的扩大培养
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结合培养基的配制,考查科学思维
1.(2025·湖南九校联考)如表是某培养基的配方。以下说法正确的是( )
√
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
A.往往使用干热灭菌法对培养基进行灭菌
B.此培养基可用来培养自养型微生物
C.制备该培养基过程中,应灭菌后再倒平板
D.培养基中添加KH2PO4的作用只是维持培养基的pH稳定
2.(2024·青岛高三联考)微生物培养时常利用无菌技术避免杂菌的污染。下列相关叙述错误的是
A.配制好的培养基应放入干热灭菌箱中进行干热灭菌
B.实验中避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触
C.接种前后的接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
D.实验结束后对实验室喷洒石炭酸同时配合紫外线照射
A
思考:无菌技术常用方法?
考点一、微生物的基本培养技术
二、无菌技术
考点一、微生物的基本培养技术
涂布器、试管口、瓶口
耐高温需保持干燥物品,如吸管、培养皿、金属用具等)
在照射前喷洒石炭酸或煤酚皂
源于选择性必修3 P10“相关信息”:生物消毒法是指利用生物或其_________除去环境中的部分微生物的方法。
代谢物
消毒和灭菌的实质都是使微生物的蛋白质或核酸变性。
第31页
4.(2025·江门模拟)某生物小组想用以下培养基(见表)从土壤中分离某种微生物,下列对该实验的后续操作及结果分析错误的是( )
A.为获得单个菌落,应在该培养基中加入适量凝固剂
B.配制好的培养基分装于锥形瓶后要进行高压蒸汽灭菌
C.用无菌水将土样进行系列稀释后用涂布器进行涂布接种
D.经培养后硝化细菌比固氮菌更容易在该培养基上形成菌落
√
成分 葡萄糖 K2HPO4 K2SO4 NaCl CaCO3 MgSO4·7H2O 蒸馏水
含量 10 g 0.2 g 0.2 g 0.2 g 5 g 0.2 g 约1 000 mL
考点一、微生物的基本培养技术
3.(2024·东北育才中学模拟)下列关于“酵母菌的纯培养”实验的叙述,错误的是( )
A.马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分
B.接种环灭菌时,顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧
C.平板划线时,接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线
D.完成平板划线后,应将平板立刻倒置培养以免污染培养基
三、微生物的纯培养
固体培养基
一定形态结构
考点一、微生物的基本培养技术
1.概念辨析
考点一 微生物的基本培养技术
2.酵母菌纯培养的操作步骤:
15~20 g琼脂
湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法
干热灭菌
灭菌前调pH
倒平板
考点一 微生物的基本培养技术
2.酵母菌纯培养的操作步骤:
防止水分蒸发过快,防止皿盖上的水珠落入培养基。
倒平板注意事项:
温度:50℃左右
冷凝后平板倒置
操作:在酒精灯火焰附近
考点一 微生物的基本培养技术
平板划线法和稀释涂布平板法
恒温培养箱
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作对照,检测培养基灭菌是否合格
2.酵母菌纯培养的操作步骤:
平板划线法操作步骤
(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤: 。
d→b→f→a→e→c→h→g
考点一、微生物的基本培养技术
平板划线法的过程
①灼烧接种环,直至接种环金属丝烧红
②在火焰旁冷却接种环,拔出酵母菌培养液试管的棉塞
③试管口通过火焰
④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液
⑤试管口通过火焰,并塞上棉塞
⑥将皿盖打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线,盖上皿盖
⑦灼烧接种环,待其冷却后,从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作,作第三、四、五次划线。
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3.(2024·湖南)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示,下列操作正确的是( )
A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦ C.①②⑦⑧ D.①③④⑤
√
第2次划线前灼烧后未冷却;第2次划线时未从1区末端划起。
(1)利用稀释涂布平板法计数
①为了保证结果准确,一般选择菌落数为______________的平板进行计数,并且在同一稀释度下,应至少对____个平板进行重复计数,并求平均值。
②统计结果往往比实际值____。
(2)利用显微镜直接计数
①需用特定的细菌计数板或血细胞计数板。
②统计结果一般是________________的总和。
30~300
3
少
活菌数和死菌数
例:甲同学做实验在稀释倍数105获得3个平板,菌落数分别是80、90、100,涂布平板时均使用0.1ml菌液,试计算每克土壤中细菌数目?
3.微生物的数量测定
③为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌[2022·湖北·T4]。( )
④酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌,但不能灭活真菌[2024·江苏·T9]。( )
⑥可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌[2022·湖北·T4]。( )
⑧将配制的酵母培养基煮沸并冷却后,在酒精灯火焰旁倒平板[2024·河北·T13]。( )
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围绕微生物的培养与纯化,考查科学思维
5.(2025·南京模拟)研究人员发现某除草剂(含氮有机物)不易被降解,且长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤,科研人员按图中程序选育能降解该除草剂的微生物,已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是( )
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A.操作Ⅱ应该将接种环灼烧灭菌5次
B.经过一段时间的培养,培养皿中应该只存在有透明圈的菌落
C.图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法,该方法可用于微生物计数
D.筛选能降解该除草剂的微生物的培养基中该除草剂是唯一的氮源
√
考点二 微生物的选择培养和计数
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作
一、
脲酶
尿素
中性
考点二 微生物的选择培养和计数
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作
一、
脲酶
尿素
中性
菌落数目稳定时
菌落特征
酚红
种类 特点 用途 举例
选择培养基 允许___________________
,同时______________
_______________ 从众多微生物中分离所需的微生物 以尿素为唯一氮源的培养基分离得到尿素分解菌
鉴别培养基 根据微生物的代谢特点在培养基中加入某种指示剂或化学药品,进而产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用伊红—亚甲蓝培养基鉴别大肠杆菌
特定种类的微生物生长
抑制或阻止其他
种类微生物生长
二、区分选择培养基与鉴别培养基
考点二 微生物的选择培养和计数
纤维素
刚果红
红色复合物
三.分解纤维素的微生物的分离
考点二 微生物的选择培养和计数
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2.(2025·泉州模拟)同学甲利用含抗生素的滤纸片进行“探究抗生素对细菌的选择作用”实验(实验1),同学乙利用尿素作为氮源进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验(实验2)。下列相关叙述正确的是( )
A.实验1所用的培养基为选择培养基
B.实验1用接种环将菌液接种到固体培养基表面
C.实验2取土样前要对铁铲和取样纸袋进行灭菌处理
D.实验2得到的菌落形状、大小和颜色等特征均相同
√
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4.(2024·江门模拟)植酸酶能催化分解植酸磷,从而提高植物性饲料中磷的利用率。科研人员从土壤中分离出5种能够产生植酸酶的细菌菌株,分别为a、b、c、d和e。植酸磷被分解后培养基上会出现透明圈,分离的操作过程如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A.可用干热灭菌法对土壤样品进行灭菌
B.该实验采用了平板划线法进行接种
C.e细菌植酸酶的活性比a细菌植酸酶的高
D.经过图示的操作,土壤样品被稀释了104倍
√
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4.(2024·江西)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素,它由吸水链霉菌井冈变种(JGs,一种放线菌,菌体呈丝状生长)发酵而来,在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,正确的是( )
A.JGs可发酵生产井冈霉素,因为它含有能够编码井冈霉素的基因
B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程不影响井冈霉素的产量
C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,会提高井冈霉素的产量
D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化
√
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5.(多选)(2024·吉林)某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是( )
√
A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内,从感病植株上采集样品
B.将采集的样品充分消毒后,用蒸馏水冲洗,收集冲洗液进行无菌检测
C.将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落
D.判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小
√
6.该同学从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,再从稀释菌液中取200 μL涂布平板,菌落计数的结果为100,据此推算细菌原液中细菌浓度为________个/mL。
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