精品解析：内蒙古自治区乌兰察布市集宁区第二中学2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题

集宁二中2025-2026学年下学期高二年级期中检测卷 生物 注意：本试卷包含Ⅰ、Ⅱ两卷。第Ⅰ卷为选择题，所有答案必须用2B铅笔涂在答题卡中相应的位置。第Ⅱ卷为非选择题，所有答案必须填在答题卷的相应位置。答案写在试卷上均无效，不予记分。 一、单选题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题给出的4个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸 B. 酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精 C. 泡菜腌制利用的乳酸菌是异养厌氧型生物 D. 腐乳制作利用了毛霉等微生物将蛋白质分解 2. 培养基灭菌常用的方法是（　　） A. 巴氏消毒法 B. 紫外线消毒法 C. 高压蒸汽灭菌法 D. 酒精消毒法 3. 如图为烟草植物组织培养过程的流程图，下列有关叙述错误的是（ ） A. 过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达 B. 过程②应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行 C. 对过程①获取的根组织块应做消毒处理 D. 植物组织培养的理论基础是植物细胞一般具有全能性 4. 草莓通过匍匐茎无性繁殖时，病毒易逐代累积，导致植株矮化、糖度与风味下降，培育脱毒苗可解决病毒积累问题。下列叙述正确的是（　　） A. 可取草莓的茎尖作为外植体 B. 实验操作过程中应利用紫外灯对超净工作台进行灭菌 C. 在相同的培养基上诱导生芽和生根 D. 需对脱毒苗进行抗病毒能力检测 5. 下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A. 定期更换培养液可以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 B. 培养箱气体环境为，的作用是维持培养液的 C. 使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分 D. 部分细胞能够悬浮在培养液中生长增殖 6. 研究表明，向分化的体细胞中导入特定转录因子进行重编辑，可获得iPS细胞，再诱导iPS细胞分化为胰岛B细胞，用于糖尿病治疗。下列相关叙述错误的是（　　） A. 胰岛B细胞与iPS细胞相比，基因组成与基因表达产物均不相同 B. iPS细胞又叫诱导多能干细胞，在功能上类似于胚胎干细胞 C. iPS细胞用病人自身体细胞制备，规避了伦理问题和免疫排斥反应 D. 重编辑过程中导入转录因子可能会引起突变，增加患癌风险 7. 科学家利用小鼠的成纤维细胞成功培育了克隆鼠，培育过程如图。下列叙述错误的是（　　） A. 克隆鼠的成功培育体现了动物体细胞核的全能性 B. 利用胚胎干细胞作为核供体更易培育克隆鼠 C. 克隆鼠的遗传物质只来自小鼠成纤维细胞 D. 克隆动物可作为模型动物用于疾病和药物研究 8. 下列有关受精及胚胎早期发育的叙述错误的是（ ） A. 动物排出的卵子可能是初级或次级卵母细胞 B. 观察到两个极体或雌雄原核是受精的标志 C. 桑葚胚和囊胚的任意一个细胞都能发育成完整个体 D. 囊胚期如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育 9. 作为基因的运输工具-载体，必须具备的条件之一及理由是（　　） A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C. 具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合 D. 对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA鉴定和选择 10. 如图表示蛋白质工程的操作过程，下列相关说法不正确的是（　　） A. a、b过程分别是转录、翻译 B. 蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作 C. 蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D. 蛋白质工程中可能构建出一种全新基因 11. 下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现紫色 B. 利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA C. DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物 D. 整个提取过程中可以不使用离心机 12. 限制性内切核酸酶是基因工程常用的工具酶，下列有关该酶的叙述正确的是（ ） A. 只能识别由6个核苷酸组成的序列 B. 主要从原核生物中提取、分离和纯化 C. 可切割DNA双链分子中碱基之间的氢键 D. 在识别序列的中轴线处切割可形成黏性末端 13. 科学家制备抗HPV（人乳头瘤病毒）单克隆抗体用于开发诊断试剂。下列叙述错误的是（ ） A. 可用灭活的病毒诱导细胞融合 B. 用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞均能产生抗HPV抗体 D. 该单克隆抗体识别HPV特定抗原 14. 抗体-药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述错误的是（ ） A. ADC的抗体具有靶向运输作用，可以将药物输送到靶细胞 B. 制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测 C. 用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可以确定肿瘤的复发与转移 D. 与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 15. 研究人员探究不同处理方式（M和N）对体外受精胚胎发育的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 卵裂过程中细胞总数不断增加，胚胎总体积不增大 B. 受精卵发育到囊胚后期，透明带会破裂，胚胎从其中伸展出来 C. 实验结果表明M和N均能提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率 D. 体外收集的卵母细胞可直接与获能的精子发生透明带反应 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的4个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16. 科学家将番茄和马铃薯细胞利用图示技术获得了“番茄—马铃薯”植株。下列有关叙述正确的是（　　） A. 图示技术涉及的原理有细胞质膜的流动性、植物细胞的全能性等 B. 过程②可用电融合法、聚乙二醇法或灭活的病毒诱导原生质体融合 C. 过程④⑤需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等 D. f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同 17. HCG是人体怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，抗HCG单克隆抗体可用于早孕的检测，以下是制备抗HCG单克隆抗体的基本流程。下列说法正确的是（　　） A. 第一步多次给小鼠注射HCG的目的是诱导机体产生更多的抗体 B. 第二步可用灭活病毒或聚乙二醇诱导细胞融合 C. 第三步需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 D. 第四步需要用95%O2和5%CO2混合气体培养杂交瘤细胞 18. 科研人员利用二倍体白鼠和二倍体黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体鼠的简要流程如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. 过程①去除了囊胚的滋养层，从中分离出黑鼠和白鼠的卵裂球 B. 过程②，黑鼠和白鼠卵裂球的细胞彼此融合，利用了细胞膜的流动性 C. 对代孕母鼠进行同期发情处理可提升过程③胚胎移植的成功率 D. 黑白嵌合体鼠体内的细胞均为含4个染色体组的细胞 19. 科研人员想利用发绿色荧光的大肠杆菌来快捷检测出水中的毒物，将毒物诱导型启动子S插入如图所示的质粒的P区，构建基因表达载体前需要利用PCR技术扩增启动子S。据图分析，下列叙述正确的是（ ） A. 扩增启动子S时，所用引物1上最好有限制酶XhoⅠ的识别序列 B. 若该重组质粒能在大肠杆菌中稳定遗传，则图中质粒还应有复制原点 C. 为了便于筛选，所选用大肠杆菌原本不能具有抗氨苄青霉素的特性 D. 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，两者的结合不受外因影响 20. 人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，产量低且保存困难。如果通过基因工程技术将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，利用大肠杆菌发酵生产可以快速生产大量可以延长保存时间的干扰素分子。原理如图所示，下列说法错误的是（　　） A. 基因工程核心步骤需要工具酶有质粒、限制酶、DNA连接酶 B. 通过显微注射技术将重组质粒导入大肠杆菌后，干扰素基因就能表达 C. 酵母菌或大肠杆菌都可作受体菌，二者生产的干扰素在结构上完全一样 D. 为延长保存时间，对干扰素进行改造，需通过改造干扰素基因来实现 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，其营养价值位列各种牧草之首，但耐酸性差，青饲易造成家畜臌胀病：二倍体的百脉根又称“瘠地苜蓿”，耐酸性强，因富含缩合单宁饲喂时可防止家畜臌胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗臌胀病的新型苜蓿。回答下列问题： （1）步骤①需用______去除细胞壁步骤②可采用聚乙二醇融合法，还有______法。 （2）步骤④为______过程，步骤⑤为______过程。 （3）植物体细胞杂交技术原理：______ 22. 单克隆抗体的制备过程如图所示： （1）植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备，都应用了细胞融合技术，电激和聚乙二醇都可以诱导相应的细胞融合，在诱导动物细胞融合时，还可以用_____。细胞融合的原理是_____。 （2）融合后的细胞，仅由 2 个细胞互相融合的类型有_____种，其中符合要求的细胞是_____，其特点为_____。 （3）由单克隆抗体研制成的“生物导弹”由两部分构成，其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是_____，其特点为_____。 23. 试管动物技术正广泛应用于畜牧业生产。请根据试管牛的生产流程图回答相关问题： （1）①②过程分别表示________、__________。 （2）对供体母牛的要求是______________，通常母牛每次只排出一枚卵母细胞。 （3）在体外培养受精卵时，需要满足以下条件：______________、营养、温度和pH以及气体环境。 （4）生产上常用____________期的胚胎进行②过程。 24. 用重组DNA技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中要使用多种工具酶，其中4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。回答下列问题： （1）题图中______酶切割形成的末端为黏性末端，______酶切割形成的末端为平末端。 （2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是______。常用的DNA连接酶有______和______，其中后者连接具有平末端的DNA片段的效率更高。 （3）重组DNA技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中______；质粒DNA分子上有______，便于外源DNA的插入；质粒DNA分子上有标记基因（如氨苄青霉素抗性基因），利用抗生素可初步筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是______。 25. 柑橘树生长过程中易受某种革兰氏阴性菌感染，严重危害柑橘产量。科研人员将M基因转入柑橘中，该基因控制合成的酶可抑制该种革兰氏阴性菌的生长与繁殖。如图是培育转基因柑橘的过程示意图。回答下列问题。 （1）构建重组质粒时需要使用PCR技术扩增目的基因，扩增时除加入原料、含Mg2+的缓冲液、引物外，还需添加______（答两点）。扩增M基因应选择图1中的引物______（填序号）。质粒载体中启动子的作用是______。 （2）限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶存在于原核生物中的主要作用是______。如图2所示，为使目的基因与质粒连接，在设计PCR引物扩增M基因时，需在引物的______端添加限制酶XhoI的识别序列。 （3）将目的基因导入柑橘细胞可以采用农杆菌转化法，该方法利用的原理是______。为筛选出成功导入重组DNA分子的受体细胞，可将受体细胞接种到含______的固体培养基上培养。 （4）将筛选出的含有重组DNA的柑橘细胞采用植物组织培养技术培养，为检测目的基因是否成功转化表达，在个体生物学水平上的操作方法是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 集宁二中2025-2026学年下学期高二年级期中检测卷 生物 注意：本试卷包含Ⅰ、Ⅱ两卷。第Ⅰ卷为选择题，所有答案必须用2B铅笔涂在答题卡中相应的位置。第Ⅱ卷为非选择题，所有答案必须填在答题卷的相应位置。答案写在试卷上均无效，不予记分。 一、单选题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题给出的4个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸 B. 酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精 C. 泡菜腌制利用的乳酸菌是异养厌氧型生物 D. 腐乳制作利用了毛霉等微生物将蛋白质分解 【答案】A 【解析】 【详解】A、醋酸菌是严格好氧型细菌，发酵全程需要有氧环境，无氧条件下醋酸菌代谢受抑制甚至死亡，无法利用乙醇产生醋酸，A错误； B、酵母菌是兼性厌氧型微生物，无氧条件下可通过无氧呼吸将葡萄汁中的葡萄糖分解为酒精和二氧化碳，B正确； C、泡菜腌制的主要菌种是乳酸菌，乳酸菌为异养厌氧型生物，在无氧环境下可将有机物分解为乳酸，C正确； D、腐乳制作的主要微生物是毛霉，毛霉等微生物可分泌蛋白酶，将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，D正确。 2. 培养基灭菌常用的方法是（　　） A. 巴氏消毒法 B. 紫外线消毒法 C. 高压蒸汽灭菌法 D. 酒精消毒法 【答案】C 【解析】 【详解】A、巴氏消毒法属于低温消毒手段，仅能杀死部分病原微生物，不能达到灭菌标准，多用于牛奶、啤酒等食品的消毒，不适用于培养基灭菌，A错误； B、紫外线消毒法属于消毒方法，穿透力极弱，仅能杀灭空气或物体表面的微生物，常用于接种室、超净工作台的环境消毒，无法对培养基实现彻底灭菌，B错误； C、高压蒸汽灭菌法通过高温高压的环境，可彻底杀灭包括芽孢、孢子在内的所有微生物，是培养基灭菌最常用的方法，C正确； D、酒精消毒法属于消毒方法，常使用75%浓度的酒精对实验者手部、小件实验器具表面进行消毒，无法实现灭菌效果，也不能用于培养基处理，D错误。 3. 如图为烟草植物组织培养过程的流程图，下列有关叙述错误的是（ ） A. 过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达 B. 过程②应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行 C. 对过程①获取的根组织块应做消毒处理 D. 植物组织培养的理论基础是植物细胞一般具有全能性 【答案】A 【解析】 【详解】A、②将植物组织块培养成愈伤组织是脱分化，③将愈伤组织培养成胚状体是再分化，A错误； B、不同植物对培养基，pH、温度、光照的要求往往不同，在外植体形成愈伤组织的过程中，即②脱分化不需要光照，B正确； C、对过程①获取的根组织块应做消毒处理，防止杂菌污染，C正确； D、植物组织培养将植物细胞培养成植物个体，体现了细胞的全能性，D正确。 4. 草莓通过匍匐茎无性繁殖时，病毒易逐代累积，导致植株矮化、糖度与风味下降，培育脱毒苗可解决病毒积累问题。下列叙述正确的是（　　） A. 可取草莓的茎尖作为外植体 B. 实验操作过程中应利用紫外灯对超净工作台进行灭菌 C. 在相同的培养基上诱导生芽和生根 D. 需对脱毒苗进行抗病毒能力检测 【答案】A 【解析】 【详解】A、草莓茎尖属于分生区，细胞分裂旺盛，病毒极少甚至无病毒，因此可作为培育脱毒苗的外植体，A正确； B、紫外灯照射只能对超净工作台进行消毒，无法达到杀灭全部微生物的灭菌效果，且实验操作过程中需要关闭紫外灯避免损伤实验人员，B错误； C、诱导生芽需要细胞分裂素/生长素的比值更高，诱导生根需要生长素/细胞分裂素的比值更高，二者所需培养基的激素配比不同，不能使用相同培养基，C错误； D、脱毒苗是指几乎不携带积累的病毒的植株，本身不具备抗病毒能力，因此不需要检测抗病毒能力，仅需检测是否携带目标病毒即可，D错误。 5. 下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A. 定期更换培养液可以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 B. 培养箱气体环境为，的作用是维持培养液的 C. 使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分 D. 部分细胞能够悬浮在培养液中生长增殖 【答案】B 【解析】 【详解】A、定期更换培养液可以补充消耗的营养物质，同时清除细胞产生的代谢废物，避免代谢物积累对细胞造成毒害，A正确； B、动物细胞培养箱的气体环境为95%空气（为细胞有氧呼吸提供所需O₂）+5%CO₂，CO₂的作用是维持培养液pH，95%O₂为高浓度氧气，会对细胞产生毒害作用，选项表述错误，B错误； C、当前人工合成的培养基无法完全满足动物细胞的所有营养需求，使用合成培养基时需添加动物血清等天然成分，补充细胞所需的未知营养因子，C正确； D、动物细胞培养时，多数细胞贴壁生长，少部分细胞如淋巴细胞可悬浮在培养液中生长增殖，D正确。 6. 研究表明，向分化的体细胞中导入特定转录因子进行重编辑，可获得iPS细胞，再诱导iPS细胞分化为胰岛B细胞，用于糖尿病治疗。下列相关叙述错误的是（　　） A. 胰岛B细胞与iPS细胞相比，基因组成与基因表达产物均不相同 B. iPS细胞又叫诱导多能干细胞，在功能上类似于胚胎干细胞 C. iPS细胞用病人自身体细胞制备，规避了伦理问题和免疫排斥反应 D. 重编辑过程中导入转录因子可能会引起突变，增加患癌风险 【答案】A 【解析】 【详解】A、胰岛B细胞与iPS细胞相比，基因组成相同，但基因表达产物不完全相同，A错误； B、iPS细胞又叫诱导多能干细胞，在功能上类似于胚胎干细胞，具有发育的全能性，B正确； C、用病人的体细胞诱导形成的多能干细胞治疗疾病，由于细胞来自自身，其表面的组织相容性抗原与自身一致，可避免免疫排斥反应；iPS细胞的获得不需要使用卵细胞或者胚胎，规避了伦理问题，C正确； D、重编辑过程中导入外源转录因子，相关基因插入可能会引起基因突变，增加患癌风险，D正确。 7. 科学家利用小鼠的成纤维细胞成功培育了克隆鼠，培育过程如图。下列叙述错误的是（　　） A. 克隆鼠的成功培育体现了动物体细胞核的全能性 B. 利用胚胎干细胞作为核供体更易培育克隆鼠 C. 克隆鼠的遗传物质只来自小鼠成纤维细胞 D. 克隆动物可作为模型动物用于疾病和药物研究 【答案】C 【解析】 【详解】A、克隆培育成功证明了已分化的动物体细胞的细胞核仍具有发育成完整个体的潜能，即体现了动物体细胞核的全能性，A正确； B、胚胎干细胞由于其分化程度低，全能性表现更容易，进行核移植更容易成功，B正确； C、由于重组细胞的细胞核来自鼠成纤维细胞，因此克隆鼠的遗传物质主要来自鼠成纤维细胞，但细胞质来自细胞A，细胞质线粒体中也有少部分的遗传物质，C错误； D、克隆动物基因型高度一致，可以作为模型动物用于疾病研究和药物测试，D正确。 8. 下列有关受精及胚胎早期发育的叙述错误的是（ ） A. 动物排出的卵子可能是初级或次级卵母细胞 B. 观察到两个极体或雌雄原核是受精的标志 C. 桑葚胚和囊胚的任意一个细胞都能发育成完整个体 D. 囊胚期如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育 【答案】C 【解析】 【详解】A、不同动物排卵时卵子成熟程度不同，部分动物排出初级卵母细胞，部分排出次级卵母细胞，均需发育至减数第二次分裂中期才具备受精能力，A正确； B、当在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，或观察到雌雄原核形成时，可作为受精的标志，B正确； C、桑葚胚阶段细胞未分化，均具有发育全能性，可发育为完整个体，但囊胚阶段细胞已经分化为滋养层细胞和内细胞团，仅内细胞团细胞具有发育全能性，滋养层细胞只能发育为胎膜和胎盘，无法发育为完整个体，C错误； D、囊胚期透明带破裂、胚胎从透明带中伸展出来的过程为孵化，只有完成孵化胚胎才能继续发育，若不能正常孵化则胚胎发育停滞，D正确。 9. 作为基因的运输工具-载体，必须具备的条件之一及理由是（　　） A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C. 具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合 D. 对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择 【答案】A 【解析】 【详解】A、运载体能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，插入的目的基因会随运载体的复制同步扩增，可提供大量目的基因，A正确； B、运载体具有多个限制酶切点的作用是便于目的基因插入，目的基因的表达依赖运载体上的启动子、终止子等调控元件，与限制酶切点无关，B错误； C、运载体具有标记基因的作用是筛选含有重组DNA的受体细胞，目的基因与运载体结合依靠限制酶切割出相同黏性末端、DNA连接酶催化连接完成，和标记基因无关，C错误； D、运载体对宿主细胞无伤害是为了保证宿主细胞正常的生命活动不被破坏，重组DNA的鉴定和选择依赖标记基因的功能，和运载体无毒性无关，D错误。 10. 如图表示蛋白质工程的操作过程，下列相关说法不正确的是（　　） A. a、b过程分别是转录、翻译 B. 蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作 C. 蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D. 蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因 【答案】C 【解析】 【详解】A、a过程是以DNA的一条链为模板合成mRNA的转录过程，b过程是以mRNA为模板合成具有一定氨基酸顺序的多肽链的翻译过程，A正确； B、蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，因此蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作，B正确； C、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，C错误； D、蛋白质工程中，可能根据已经明确的蛋白质的结构构建出一种全新的基因，D正确。 11. 下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现紫色 B. 利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA C. DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物 D. 整个提取过程中可以不使用离心机 【答案】A 【解析】 【详解】A、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，A错误； B、DNA不溶于酒精，而部分蛋白质可溶于酒精，利用二者在酒精中的溶解度差异，可以析出DNA、溶解杂质，初步分离DNA，B正确； C、DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，可通过调节NaCl溶液浓度去除杂质，纯化DNA粗提物，C正确； D、若选择植物作为实验材料，可通过研磨、过滤获取含DNA的滤液，加入酒精后静置即可析出DNA，整个提取过程可以不使用离心机，D正确。 12. 限制性内切核酸酶是基因工程常用的工具酶，下列有关该酶的叙述正确的是（ ） A. 只能识别由6个核苷酸组成的序列 B. 主要从原核生物中提取、分离和纯化 C. 可切割DNA双链分子中碱基之间的氢键 D. 在识别序列的中轴线处切割可形成黏性末端 【答案】B 【解析】 【详解】A、限制性内切核酸酶大多能识别由6个核苷酸组成的序列，少数能识别4个、8个或其他数量的核苷酸序列，A错误； B、限制性内切核酸酶主要从原核生物（如细菌）中提取、分离和纯化。这类酶是原核生物的 “防御武器”，可切割入侵的噬菌体 DNA，保护自身，B正确； C、限制性内切核酸酶切割DNA双链分子中的磷酸二酯键，C错误； D、当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是黏性末端；当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端，D错误。 13. 科学家制备抗HPV（人乳头瘤病毒）单克隆抗体用于开发诊断试剂。下列叙述错误的是（ ） A. 可用灭活的病毒诱导细胞融合 B. 用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞均能产生抗HPV抗体 D. 该单克隆抗体识别HPV特定抗原 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞融合的常用诱导方法包括聚乙二醇诱导、电融合法、灭活的病毒诱导法，因此可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，A正确； B、细胞融合后体系中存在未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞，选择培养基可淘汰上述不需要的细胞，仅筛选出杂交瘤细胞，B正确； C、初步筛选得到的杂交瘤细胞是由多种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的，并非都能产生抗HPV的抗体，还需进行抗体检测和克隆化培养，才能筛选出能分泌抗HPV抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、单克隆抗体具有特异性强的特点，只能识别HPV的特定抗原，D正确。 14. 抗体-药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述错误的是（ ） A. ADC的抗体具有靶向运输作用，可以将药物输送到靶细胞 B. 制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测 C. 用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可以确定肿瘤的复发与转移 D. 与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 【答案】D 【解析】 【详解】A、ADC由抗体、接头和药物组成，其中抗体的主要作用是靶向运输，即通过与靶细胞表面的特异性抗原结合，将连接的药物精准输送到靶细胞，A正确； B、制备单克隆抗体时，杂交瘤细胞需克隆化培养（获大量细胞）和抗体检测（选能产生所需抗体的细胞），以筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、用荧光标记肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可通过荧光定位肿瘤细胞，确定复发与转移，C正确； D、与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更小。因为ADC中的抗体能特异性识别靶细胞，将药物精准输送到靶细胞，减少对正常细胞的损伤，D错误。 15. 研究人员探究不同处理方式（M和N）对体外受精胚胎发育的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 卵裂过程中细胞总数不断增加，胚胎总体积不增大 B. 受精卵发育到囊胚后期，透明带会破裂，胚胎从其中伸展出来 C. 实验结果表明M和N均能提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率 D. 体外收集的卵母细胞可直接与获能的精子发生透明带反应 【答案】D 【解析】 【详解】A、卵裂是受精卵早期的连续有丝分裂，该过程发生在透明带内细胞总数不断增加，胚胎总体积基本不增大，A正确； B、受精卵发育到囊胚后期，透明带会破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化，B正确； C、对比对照组可知，M、N处理组的卵裂率、囊胚发育率均高于对照组，说明M和N均能提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率，C正确； D、体外收集的卵母细胞需要培养到M Ⅱ期才能与获能的精子发生受精作用，D错误。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的4个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16. 科学家将番茄和马铃薯细胞利用图示技术获得了“番茄—马铃薯”植株。下列有关叙述正确的是（　　） A. 图示技术涉及的原理有细胞质膜的流动性、植物细胞的全能性等 B. 过程②可用电融合法、聚乙二醇法或灭活的病毒诱导原生质体融合 C. 过程④⑤需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等 D. f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、植物体细胞杂交过程中涉及原生质体的融合和植物组织培养，前者的原理是细胞质膜的流动性，后者的原理是细胞的全能性，A正确； B、诱导原生质体融合的方法有物理融合法和化学融合法，可用电融合法、聚乙二醇法，不能用灭活的病毒处理，B错误； C、④（脱分化）、⑤（再分化）需要营养成分（包括无机营养和有机营养）和植物激素等条件，C正确； D、e中发生脱分化，f中再分化出根、芽，脱分化和再分化过程所需生长素和细胞分裂素的比例不同，D正确。 故选ACD。 17. HCG是人体怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，抗HCG单克隆抗体可用于早孕的检测，以下是制备抗HCG单克隆抗体的基本流程。下列说法正确的是（　　） A. 第一步多次给小鼠注射HCG的目的是诱导机体产生更多的抗体 B. 第二步可用灭活病毒或聚乙二醇诱导细胞融合 C. 第三步需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 D. 第四步需要用95%O2和5%CO2混合气体培养杂交瘤细胞 【答案】BC 【解析】 【详解】A、多次注射抗原（HCG）的目的，是刺激小鼠体内的B淋巴细胞增殖分化，产生更多能分泌抗HCG抗体的浆细胞（效应B细胞），而不是直接诱导产生更多抗体，A错误； B、动物细胞融合的常用诱导方法包括： 化学法，聚乙二醇（PEG）；生物法，灭活的病毒；物理法，电融合法，B正确； C、细胞融合后，体系中会有多种细胞（未融合的B细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B-B融合细胞、瘤-瘤融合细胞、杂交瘤细胞）。 因此这一步就是要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，C正确； D、动物细胞培养的气体环境是95%空气 + 5%CO₂： 95%空气（含氧气）用于细胞有氧呼吸5% CO₂的作用是维持培养液的pH，D错误。 18. 科研人员利用二倍体白鼠和二倍体黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体鼠的简要流程如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. 过程①去除了囊胚的滋养层，从中分离出黑鼠和白鼠的卵裂球 B. 过程②，黑鼠和白鼠卵裂球的细胞彼此融合，利用了细胞膜的流动性 C. 对代孕母鼠进行同期发情处理可提升过程③胚胎移植的成功率 D. 黑白嵌合体鼠体内的细胞均为含4个染色体组的细胞 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、卵裂球是早期胚胎（卵裂期）的细胞，而囊胚阶段才出现滋养层和内细胞团的分化。 早期胚胎（卵裂球阶段）根本还没形成囊胚，自然不存在 “去除滋养层” 的操作，A错误； B、细胞融合会形成杂种细胞（单核、染色体数加倍），但嵌合体只是两种细胞 “拼在一起”，细胞本身并未融合。 细胞膜的流动性是细胞融合的原理，这里根本没有发生细胞融合，B错误； C、过程③是胚胎移植，对代孕母鼠进行同期发情处理，可以让供体和受体的生理环境保持一致，为胚胎移入受体提供相同的生理环境，从而显著提升胚胎移植的成功率，C正确； D、黑白嵌合体鼠的体内，同时存在两种细胞： 来自白鼠的二倍体细胞（2 个染色体组） 来自黑鼠的二倍体细胞（2 个染色体组）两种细胞只是共存，并未融合，所以不存在 “含 4 个染色体组的细胞”，D错误。 19. 科研人员想利用发绿色荧光的大肠杆菌来快捷检测出水中的毒物，将毒物诱导型启动子S插入如图所示的质粒的P区，构建基因表达载体前需要利用PCR技术扩增启动子S。据图分析，下列叙述正确的是（ ） A. 扩增启动子S时，所用引物1上最好有限制酶XhoⅠ的识别序列 B. 若该重组质粒能在大肠杆菌中稳定遗传，则图中质粒还应有复制原点 C. 为了便于筛选，所选用大肠杆菌原本不能具有抗氨苄青霉素的特性 D. 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，两者的结合不受外因影响 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、启动子S内部存在EcoRⅠ和SmaⅠ的酶切位点，若使用这两种酶处理会破坏启动子S的结构，因此只能选择P区的BamHⅠ和XhoⅠ完成酶切和连接；为保证启动子S插入后转录方向朝向绿色荧光蛋白基因，需要在引物1上添加XhoⅠ的识别序列，引物2上添加BamHⅠ的识别序列，A正确； B、复制原点是质粒能够在宿主细胞内自主复制、稳定遗传的必需元件，图中质粒未标注复制原点，因此还需要具备复制原点才能在大肠杆菌中稳定遗传，B正确； C、氨苄青霉素抗性基因是重组质粒的标记基因，用于筛选成功导入质粒的大肠杆菌，若受体大肠杆菌原本就具有抗氨苄青霉素的特性，则无法完成筛选，因此所选用的大肠杆菌原本不能具有该特性，C正确； D、该启动子为毒物诱导型启动子，RNA聚合酶和它的结合会受到毒物这一外界因素的影响，D错误。 20. 人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，产量低且保存困难。如果通过基因工程技术将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，利用大肠杆菌发酵生产可以快速生产大量可以延长保存时间的干扰素分子。原理如图所示，下列说法错误的是（　　） A. 基因工程核心步骤需要的工具酶有质粒、限制酶、DNA连接酶 B. 通过显微注射技术将重组质粒导入大肠杆菌后，干扰素基因就能表达 C. 酵母菌或大肠杆菌都可作受体菌，二者生产的干扰素在结构上完全一样 D. 为延长保存时间，对干扰素进行改造，需通过改造干扰素基因来实现 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、基因工程核心步骤是基因表达载体的构建，需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶，质粒是运载体，A错误； B、将重组质粒导入大肠杆菌的常用方法是Ca²⁺处理，显微注射技术主要用于将目的基因导入动物细胞；且导入后还需目的基因成功转录、翻译，干扰素基因才能表达，并非导入就一定表达，B错误； C、酵母菌是真核生物，大肠杆菌是原核生物（没有内质网和高尔基体），干扰素是糖蛋白，蛋白质的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的，所以二者生产的干扰素在结构上会存在一定的区别，C错误； D、为延长保存时间，对干扰素进行的改造属于蛋白质工程，需要通过改造干扰素基因来实现，D正确。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，其营养价值位列各种牧草之首，但耐酸性差，青饲易造成家畜臌胀病：二倍体的百脉根又称“瘠地苜蓿”，耐酸性强，因富含缩合单宁饲喂时可防止家畜臌胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗臌胀病的新型苜蓿。回答下列问题： （1）步骤①需用______去除细胞壁。步骤②可采用聚乙二醇融合法，还有______法。 （2）步骤④为______过程，步骤⑤为______过程。 （3）植物体细胞杂交技术原理：______。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 物理方法（如离心、振动，电击） （2） ①. 脱分化 ②. 再分化 （3）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 【解析】 【分析】分析题图：其中①表示去壁获取原生质体的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；③表示再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。 【小问1详解】 步骤①为制备原生质体的过程，因植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；②为原生质体融合的过程，该过程常用的化学试剂是聚乙二醇，此外还有物理方法（如离心、振动，电击）等。 【小问2详解】 步骤④为杂种细胞重新形成愈伤组织的过程，为脱分化过程；步骤⑤是再分化过程。 【小问3详解】 植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有细胞膜的流动性（原生质体融合）、植物细胞的全能性（杂种细胞成长为完整植株）。 22. 单克隆抗体的制备过程如图所示： （1）植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备，都应用了细胞融合技术，电激和聚乙二醇都可以诱导相应的细胞融合，在诱导动物细胞融合时，还可以用_____。细胞融合的原理是_____。 （2）融合后的细胞，仅由 2 个细胞互相融合的类型有_____种，其中符合要求的细胞是_____，其特点为_____。 （3）由单克隆抗体研制成的“生物导弹”由两部分构成，其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是_____，其特点为_____。 【答案】（1） ①. 灭活的病毒 ②. 细胞膜具有一定的流动性 （2） ①. 3 ②. 杂交瘤细胞 ③. 既能产生特异性抗体，又能无限增殖 （3） ①. 抗体与抗原特异性结合 ②. 特异性强、灵敏度高 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。 【小问1详解】 诱导动物细胞融合特有的方式是灭活的病毒诱导。细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。 【小问2详解】 融合后的细胞，仅由 2 个细胞互相融合的类型有2种同型融合和1种杂交瘤细胞，共3种，其中符合要求的细胞是杂交瘤细胞，其特点为既能产生特异性抗体，又能无限增殖。 【小问3详解】 由单克隆抗体研制成的“生物导弹”由两部分构成，其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是利用抗体与抗原特异性结合，使药物能够定向作用于病灶。单克隆抗体特点为特异性强、灵敏度高。 23. 试管动物技术正广泛应用于畜牧业生产。请根据试管牛的生产流程图回答相关问题： （1）①②过程分别表示________、__________。 （2）对供体母牛的要求是______________，通常母牛每次只排出一枚卵母细胞。 （3）在体外培养受精卵时，需要满足以下条件：______________、营养、温度和pH以及气体环境。 （4）生产上常用____________期的胚胎进行②过程。 【答案】 ①. 体外受精 ②. 胚胎移植 ③. 遗传性状优良、生产能力强 ④. 无菌、无毒的环境 ⑤. 桑椹胚或囊胚 【解析】 【分析】分析题图：图示为试管牛的生产流程图，其中①表示体外受精过程，该过程包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、受精；②表示胚胎移植过程。 【详解】（1）分析题图：图示为试管牛的生产流程图，其中①表示体外受精过程，该过程包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、受精；②表示胚胎移植过程。 （2）培育试管动物首先选择遗传性状优良、生产能力强的母牛，通常母牛每次只排出一枚卵母细胞。 （3）体外培养受精卵时，首先需要无菌、无毒的环境，防止被污染，还要有一定的营养物质及适宜的外界环境条件。 （4）生产上常用桑椹胚（或囊胚）期的胚胎进行②胚胎移植进程。 【点睛】本题考查体外受精、胚胎移植和胚胎干细胞的相关知识，要求考生识记体外受精的基本过程；识记胚胎移植的概念和基本程序是胚胎干细胞的来源及特点，能结合所学的知识准确答题。 24. 用重组DNA技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中要使用多种工具酶，其中4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。回答下列问题： （1）题图中______酶切割形成的末端为黏性末端，______酶切割形成的末端为平末端。 （2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是______。常用的DNA连接酶有______和______，其中后者连接具有平末端的DNA片段的效率更高。 （3）重组DNA技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中______；质粒DNA分子上有______，便于外源DNA的插入；质粒DNA分子上有标记基因（如氨苄青霉素抗性基因），利用抗生素可初步筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是______。 【答案】（1） ①. EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ ②. Sma Ⅰ、EcoR Ⅴ （2） ①. 磷酸二酯键 ②. E·coli DNA连接酶 ③. T4 DNA连接酶 （3） ①. 稳定存在并自我复制 ②. 一个或多个限制性核酸内切酶切割位点 ③. 将宿主细胞接种到含氨苄青霉素的培养基中培养，能存活生长的即为含质粒载体的宿主细胞 【解析】 【小问1详解】 据图中切割位点可知，限制酶EcoR I和Pst I切割形成的是黏性末端，限制酶Sma Ⅰ和EcoR Ⅴ切割形成的是平末端。 【小问2详解】 DNA连接酶的作用是连接DNA片段，形成的化学键是核苷酸之间的磷酸二酯键。基因工程中常用的两种DNA连接酶是E⋅coli DNA连接酶和T4​ DNA连接酶，其中T4​ DNA连接酶连接平末端的效率更高。 【小问3详解】 质粒作为基因工程的载体，复制原点可保证质粒在受体细胞中稳定存在并自我复制；质粒带有一个或多个限制酶切割位点，才能方便外源DNA插入；氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，可通过抗性筛选：将待筛选宿主细胞接种到含氨苄青霉素的培养基中培养，不含质粒（无抗性）的细胞会被杀死，只有含质粒的细胞可以存活，从而完成筛选。 25. 柑橘树生长过程中易受某种革兰氏阴性菌感染，严重危害柑橘产量。科研人员将M基因转入柑橘中，该基因控制合成的酶可抑制该种革兰氏阴性菌的生长与繁殖。如图是培育转基因柑橘的过程示意图。回答下列问题。 （1）构建重组质粒时需要使用PCR技术扩增目的基因，扩增时除加入原料、含Mg2+的缓冲液、引物外，还需添加______（答两点）。扩增M基因应选择图1中的引物______（填序号）。质粒载体中启动子的作用是______。 （2）限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶存在于原核生物中的主要作用是______。如图2所示，为使目的基因与质粒连接，在设计PCR引物扩增M基因时，需在引物的______端添加限制酶XhoI的识别序列。 （3）将目的基因导入柑橘细胞可以采用农杆菌转化法，该方法利用的原理是______。为筛选出成功导入重组DNA分子的受体细胞，可将受体细胞接种到含______的固体培养基上培养。 （4）将筛选出的含有重组DNA的柑橘细胞采用植物组织培养技术培养，为检测目的基因是否成功转化表达，在个体生物学水平上的操作方法是______。 【答案】（1） ①. 模板、耐高温的DNA聚合酶 ②.  2 和3 ③. 作为RNA 聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录出 mRNA   （2） ①. 切割外源DNA，使之失效，从而保护自身 ②. 5' （3） ①. 农杆菌侵染植物细胞时，能将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞中，并将其整合到该细胞的染色体 DNA上      ②. 潮霉素 （4）用该种革兰氏阴性菌感染转基因柑橘，观察柑橘是否出现感染症状（或对比转基因与非转基因柑橘的患病情况） 【解析】 【小问1详解】 PCR技术是一种用于扩增特定DNA片段的技术，PCR扩增目的基因的体系包含模板DNA、引物、原料（dNTP）、缓冲液、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），题干已给出原料、缓冲液、引物，因此还需添加模板DNA和耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的DNA延伸方向为5′→3′，一对引物需要分别结合目的基因两条模板链的3′端才能扩增出完整目的基因，故扩增M基因应选择图1中的引物2、3；启动子是基因表达调控的重要元件，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，能够驱动基因转录出mRNA，从而启动基因的表达。 【小问2详解】 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶能够识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割DNA分子，其主要作用就是切割外源DNA，使之失效，防止外源DNA对自身造成危害，从而保护自身安全；DNA只能从引物的3′端延伸，因此限制酶识别序列需要添加在不影响延伸的引物5′端。 【小问3详解】 农杆菌转化法的基本原理是：农杆菌侵染植物细胞时，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移到被侵染的细胞中，并将其整合到该细胞的染色体 DNA上，进而稳定遗传和表达，即农杆菌转化法利用了农杆菌Ti质粒上T-DNA可转移、整合到植物染色体DNA的特性；由图可知，潮霉素抗性基因位于启动子和终止子之间，而卡那霉素不在该范围内，且目的基因插入后潮霉素抗性基因保持完整，作为标记基因，因此用含潮霉素的培养基筛选阳性受体细胞。 【小问4详解】 个体生物学水平检测直接检测目标性状，本题M基因的功能是抑制致病菌生长，因此直接用该致病菌感染转基因柑橘，观察柑橘是否患病即可验证目的基因是否成功表达。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $