黑龙江省大庆实验中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

大庆实验中学2025—2026学年度下学期高二年级阶段考试 生物试题 第Ⅰ卷（选择题，共50分） 一、单项选择题：本大题共35小题，每小题1分，共35分，在每小题给出的四个选项中，只有一个符合题目要求。 1．无菌技术在生产和科研实践中应用广泛，下列不需要用到无菌技术的是（ ） A．花药离体培养 B．发酵工程生产青霉素 C．DNA的粗提取与鉴定 D．体外受精与胚胎移植 2．柑橘果醋的发酵工艺主要分为一次发酵法和二次发酵法两种，其中二次发酵法的发酵工艺过程如下图所示，下列说法正确的是（ ） A．酒精发酵转为醋酸发酵时，需要适当降低发酵温度并通入无菌空气 B．若醋酸菌以酒精发酵的产物作为主要碳源，其发酵过程不会产生大量气泡 C．果酒发酵时，用斐林试剂检测柑橘果汁中还原糖的变化，砖红色沉淀会日益增多 D．醋酸菌吸收的氧气除了参与醋酸发酵外，还在线粒体中参与有氧呼吸 3．一种大肠杆菌菌群的培养基配方如下：胰蛋白胨10 g/L+酵母提取物5 g/L+氯化钠10 g/L+琼脂粉15 g/L，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000 mL。下列说法错误的是（ ） A．可采用稀释涂布平板法对大肠杆菌的菌落进行计数 B．根据培养基的用途来看，该培养基属于固体培养基 C．配制好的培养基转移至锥形瓶后可放到高压蒸汽灭菌锅中灭菌 D．培养大肠杆菌时需要将该培养基的PH调至中性或弱碱性 4．病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量下降和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列说法正确的是（ ） A．脱分化和再分化过程一般都需要光照，且需要添加蔗糖作为能源物质 B．切取的植株茎尖用酒精消毒30 min后，需用无菌水进行清洗 C．获得的脱毒苗具有抗病毒性状并且可以通过无性繁殖遗传 D．植株茎尖细胞中不含或含少量病毒的原因可能是其胞间连丝不发达 5．紫杉醇是红豆杉产生的一种次生代谢物，具有显著的抗癌功效。研究人员开展了悬浮培养红豆杉细胞合成紫杉醇的工程技术研究，结果如表所示，下列说法错误的是（ ） 蔗糖浓度（g/L） 20 30 40 50 60 细胞干重（g/L） 12.5 15.3 18.6 14.2 10.1 紫杉醇产量（g/L） 8.2 12.7 15.4 10.8 6.5 A．紫杉醇不是红豆杉细胞生长、增殖等生命活动所必需的 B．40 g/L蔗糖浓度下，单个红豆杉细胞中紫杉醇含量最高 B．蔗糖浓度过高可能使培养液渗透压升高，抑制细胞生长 C．据表可知，红豆杉的细胞干重与紫杉醇产量呈正相关 6．女性甲患有严重的线粒体遗传病，现用线粒体置换技术从其卵母细胞中取得“细胞核”，植入女性乙的去核卵母细胞中，经体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，最后生育出健康婴儿。下列说法错误的是 （ ） A．对女性乙的卵母细胞“去核”可采用紫外线短时间照射的方法 B．可用肝素、Ca²+载体等处理使体外培养的精子获得受精的能力 C．卵裂期胚胎总体积不增加，发育到囊胚阶段胚胎会孵化 D．线粒体置换技术能去除来自女性甲卵母细胞的全部致病基因 7．关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验中，下列说法正确的是（ ） A．DNA分子较大时，可适当降低凝胶浓度来提高其迁移速率 B．PCR产物经电泳后，凝胶上出现的蓝色条带即是目的基因 C．需将扩增的PCR产物与内含核酸染料的缓冲液混合进行加样 D．DNA在电泳缓冲液中带正电荷，电泳时从负极向正极迁移 8．限制酶Bbs I的识别序列为5′-GAAGAC-3′，但切割位点在该序列下游两个碱基之后（如图，N表示任一碱基）。经Bbs I切割后会产生含4个碱基的黏性末端。相关说法正确的是（ ） A．经Bbs I酶切产生的黏性末端理论上最多有48种 B．识别序列的下游碱基序列不同，则产生的黏性末端不同 C．将Bbs I酶切后的DNA片段进行连接，重组DNA中可能不含5′-GAAGAC-3′序列 D．Bbs I酶是从两端降解DNA的，不能切割DNA内部的磷酸二酯键 9．尿素在高温下易分解，也能被脲酶分解，分解产物能使酚红指示剂变红。为从土壤中筛选出尿素分解菌，实验人员配制不含氮源的培养基（添加酚红指示剂），向其中加入过滤除菌的尿素后用HCL调至橙黄色，然后倒平板，将1 g土壤样品溶于99 mL无菌水后再稀释10⁴倍，取菌液0.1 mL涂布于上述平板并培养，统计平均菌落数为120个。下列说法错误的是（ ） A．制备培养基时，应先对培养基灭菌再加入尿素 B．涂布接种时，用涂布器蘸取0.1 mL菌液并均匀地涂布在平板上 C．红色圈与菌落直径比值大的菌落中的菌株分解尿素能力强 D．1 g土壤样品中尿素分解菌的数目约为1.2×103个 10．毛花猕猴桃为二倍体，果实大，维生素C含量高，软枣猕猴桃为四倍体，极耐寒，在-40℃下可安全越冬，农科所想利用下图技术流程培育兼具这两种猕猴桃优点的新品种，下列叙述错误的是（ ） A．①过程可用含纤维素酶和果胶酶的略高渗溶液处理 B．新品种的体细胞含6个染色体组，为可育的异源六倍体 C．植物体细胞杂交技术成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁 D．获得新品种的过程能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 11．通过动物细胞工程技术，可以利用患者自身细胞在体外诱导发育成特定的组织器官，然后再移植回患者体内以达到治疗目的。图1和图2表示利用患者自身细胞进行器官移植的两种方法，下列说法正确的是 （ ） A．两种方法都需要运用动物细胞培养技术，需要将细胞置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的培养箱中 B．利用两种方法所获得的组织器官的遗传物质均与患者完全相同，移植后不会发生免疫排斥反应 C．可利用Ca2+处理法或显微注射法将Oct3/4基因、Sox基因、c-Myc基因和Klf基因导入成纤维细胞 D．图2中患者的体细胞可不用去除细胞质，将整个体细胞注入去核的卵母细胞中 12．基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响，下列有关说法正确的是（ ） A．大多数的限制酶由6个核苷酸序列组成 B．用作载体的质粒都来源于原核细胞且经过人工改造 C．含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要用植物组织培养技术 D．抗生素合成基因可作为标记基因来检测与筛选目的基因是否导入受体细胞 13．下图表示三类生物技术的包含关系，下列叙述错误的是（ ） A．若③为微生物培养技术，②为培养基制备技术，①为琼脂固体培养基配制，则符合图示关系 B．若③为植物细胞工程，②为植物体细胞杂交技术，①为植物体细胞融合，则符合图示关系 C．若③为胚胎工程，②为胚胎移植技术，①为胚胎分割操作，则符合图示关系 D．若③为发酵工程，②为菌种选育技术，①为诱变育种，则符合图示关系 14．某研究团队利用CRISPR/dCas9系统的单碱基编辑技术（不断裂DNA双链，只改变单个碱基），通过胞嘧啶碱基编辑器（C编辑）修复某基因L35P点突变，使该蛋白35号位由脯氨酸替换为亮氨酸，基本原理如图所示，下列说法正确的是（ ） A．经C编辑完成点突变修复，至少需经过3次DNA复制 B．图示修复过程中，有磷酸二酯键的断裂和重新生成 C．为保证点突变修复的准确性，可适当延长gRNA的长度 D．经C编辑修复后的该基因表达的肽链长度发生改变 15．苹果富含多种维生素，口感脆，苹果切开后不久颜色便会加深，这种现象称为“褐变”，褐变是由位于细胞的多酚氧化酶（PPO）催化位于液泡中的多酚类物质生成棕色色素所致。据此，科研人员培育出了抗褐变的转基因苹果，其工作流程如图所示，下列相关叙述错误的是（ ） A．想获得抗褐变的转基因苹果，目的基因可以是抑制PPO基因表达的基因 B．过程①是基因工程的核心步骤，需要限制性内切核酸酶和DNA聚合酶的参与 C．在步骤④之前，需用酒精和次氯酸钠溶液对苹果嫩叶碎片进行消毒处理 D．用导入不含目的基因的质粒的植株作对照，评估目的基因对抑制苹果褐变的效果 16．生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列说法正确的是（ ） A．生殖性克隆是利用克隆技术产生特定的细胞来修复或替代受损的细胞 B．试管婴儿必需的技术有体外受精、植入前的遗传学诊断和胚胎移植等 C．转基因食品中的DNA会与人体细胞的DNA发生基因重组，并可遗传给下一代 D．生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，其致病能力强，攻击范围广 17．丁酰胆碱酯酶一般是由肝脏细胞合成后在血液中发挥作用，可治疗有机磷中毒，研究人员设计了多种生物反应器和工程菌对其进行生产，下列说法错误的是（ ） A．与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受受体生物性别和年龄限制 B．选取相应生物反应器个体的耳部细胞进行体细胞克隆，可实现扩大繁育 C．利用乳腺生物反应器和大肠杆菌所获得的丁酰胆碱酯酶都能直接使用 D．制备乳腺生物反应器应用乳腺中特异表达的基因的启动子构建基因表达载体 18．下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是（ ） A．携带目的基因的重组质粒只有整合到受体细胞的DNA上，才会在受体细胞内复制 B．启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，是转录的起始位点 C．蛋白质工程需构建基因表达载体，改造后的蛋白质的性状可遗传给后代 D．将抗虫基因整合到某植物的线粒体DNA中，可通过花粉传播，从而引起基因污染 19．研究表明，DNA连接酶能够封闭DNA双螺旋骨架上的切口（图a），却无法封闭缺口（图b），下列叙述正确的是（ ） A．用限制酶产生磷酸二酯键切口时，还必须与解旋酶配合使用 B．DNA连接酶封闭切口时，需要识别DNA片段特定的核苷酸序列 C．DNA连接酶的封闭是指催化核糖核苷酸之间磷酸二酯键的形成 D．修复缺失的核苷酸缺口，可用DNA聚合酶沿缺口5′→3′方向进行 20．PCR过程中，可通过引物设计对PCR扩增产物序列大小进行调整，图1和图2表示用不同的两对引物对目的序列进行扩增，下列说法错误的是（ ） A．图1中PCR扩增n轮理论上需要消耗2n+1-2个引物 B．图2中4轮复制后获得最终想要的DNA片段有8个 C．图2第4轮循环产物中只含有引物3的DNA片段占15/16 D．图1引物可使扩增产物序列增大，图2引物可使扩增产物序列减小 21．无缝克隆技术（In—Fusion技术）是一种先进的DNA重组技术，用于将目标DNA片段插入载体中，如图为利用无缝克隆In—fusion技术构建含P基因的重组载体，P基因左右两侧的序列是不同的。In—fusion酶具有3′→5′外切酶活性，从DNA的3′端切除15个核苷酸，进而出现单链区域，最终实现目的基因与线性化质粒连接，下列关于该技术的叙述错误的是（ ） 注：引物A、B“”中“—”表示与模板链互补的序列，“/”表示未与模板链互补的序列。 A．应选用引物1和4进行PCR2扩增，从而获得线性化质粒 B．形成重组质粒时，如果温度远高于50℃，单链区域的碱基不容易互补配对 C．按照以上流程构建图示重组载体时，可避免目的基因与载体的反向连接 D．当目的基因内部有多种限制酶识别序列时，In—Fusion技术将无法使用 22．苏云金芽孢杆菌中的杀虫晶体蛋白Cry具有杀虫毒性，但Cry蛋白存在杀虫谱窄、毒力有限等问题，制约了其在农业生产中的进一步应用，科学家通过定点突变，将Cry蛋白第168位的组氨酸替换为精氨酸后，Cry蛋白对烟草天蛾的毒性提高了3倍；将Cry蛋白第282位、第283位的丙氨酸和亮氨酸分别替换成甘氨酸和丝氨酸后，Cry蛋白对烟草天蛾的毒性提高了7倍，下列有关叙述错误的是（ ） A．对Cry蛋白的改造不能通过直接替换Cry蛋白中的氨基酸来实现 B．Cry蛋白的毒性提高了3或7倍的原因可能是改变了该蛋白质的空间结构 C．改造Cry蛋白应从Cry蛋白基因的脱氧核苷酸序列出发设计其特有的结构 D．使用蛋白质工程改造Cry蛋白过程中需要使用限制酶和DNA连接酶 23．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化棉花，在棉花叶绿体内构建一条新的代谢途径，提高棉花产量。下列叙述正确的是（ ） A．四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译 B．OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的不同单链为模板 C．应选用含卡那霉素的培养基筛选农杆菌转化的棉花细胞 D．利用农杆菌把目的基因导入棉花细胞标志着转化成功 24．脂肪（甘油三酯）可以氧化分解，其彻底氧化分解后的产物为二氧化碳和水，同时合成大量ATP。脂肪细胞中的甘油三酯和脂肪酸循环如图所示，已知血浆游离脂肪酸水平升高时，会通过提高血浆酮体水平减少甘油三酯的分解，下列叙述正确的是（ ） A．通过图示信息可知，在脂肪细胞中脂肪与糖类之间可以相互转化 B．血液中脂肪酸含量的稳定存在负反馈调节 C．相比于糖类，相同质量的脂肪彻底氧化分解所消耗的氧气更少，产生的ATP更多 D．已知长时间运动时脂肪供能比例会提高，糖的消耗降低，这样会导致高血糖，对健康不利 25．细胞学说是19世纪自然科学的三大发现之一，下列说法正确的是（ ） A．细胞学说揭示了生物体结构的统一性以及真核细胞、原核细胞的统一性 B．细胞是生物体结构的基本单位，都能独立完成生物体的各项生命活动 C．“胡萝卜韧皮部细胞在适宜条件下能发育成新的植株”支持细胞学说的观点 D．细胞学说使动植物结构统一于分子水平，有力地证明了生物之间存在亲缘关系 26．下列关于支原体、酵母菌、蓝细菌、新型冠状病毒、水绵的叙述中，正确的是（ ） A．以上所有生物生命活动所需要的蛋白质都是在细胞中的核糖体上合成 B．蓝细菌和水绵都能进行光合作用，但它们叶绿体中光合色素的类型有差异 C．溶菌酶能抑制细菌细胞壁的形成，可与抗生素混合使用来治疗支原体感染引起的疾病 D．除新型冠状病毒外，其余4种生物均同时含DNA和RNA，且DNA都参与构成染色体 27．核孔（NPC）是介导大分子进出细胞核的唯一通道，核糖体前体的组装起始于核仁，经加工后通过NPC转运至细胞质最终形成成熟的核糖体，下列叙述正确的是（ ） A．核膜是细胞核的边界，其主要作用是将细胞质与外界环境分隔开 B．组成核糖体的蛋白质经NPC入核，与rRNA在核仁组装成核糖体前体 C．物质通过NPC自由进出细胞核，实现核质之间的物质交换和信息交流 D．动物细胞的DNA存在于细胞核中，也存在于细胞质的线粒体和叶绿体中 28．蛋白质是生命活动的主要承担者，核酸是遗传信息的携带者，下列叙述正确的是（ ） A．蛋白质和DNA都可承担催化化学反应的功能，都是生命活动的产物 B．蛋白质和RNA的组成元素都含有碳、氢、氧、氮，都可能含有磷 C．蛋白质和DNA分子各自独特的空间结构都是形成其多样性的原因 D．蛋白质和核酸都是生物大分子，它们及其单体都是以碳链为基本骨架 29．细胞膜的结构与功能是相适应的，图1为真核细胞膜的亚显微结构模式图，图2表示细胞间信息交流的一种方式，根据图示和所学的知识，下列说法正确的是（ ） A．细胞膜功能的复杂程度主要与结构①的种类和数量有关 B．③为糖被，是分布在细胞膜外表面的糖蛋白，参与细胞识别 C．②在细胞膜中分布不均匀，但都能运动，与细胞膜的流动性有关 D．图2中的A可以表示胰岛A细胞，B表示肝细胞 30．科学家David Baker因在蛋白质设计领域的杰出贡献而获2024年诺贝尔化学奖，他设计构建了一种球状蛋白分子，其氨基酸侧链的极性基团分布在分子的外侧，而非极性基团分布在内侧。下列叙述正确的是 （ ） A．该球状蛋白易溶于汽油等有机溶剂，难溶于水 B．该球状蛋白分子的氮元素主要存在于R基中 C．该球状蛋白合成后的加工过程中可能有氢键形成 D．蛋白质彻底水解的产物可与双缩脲试剂发生紫色反应 31．下列关于原核细胞的叙述错误的是（ ） A．细菌细胞壁具有支持保护作用，还可避免酒精导致细胞蛋白质变性 B．硝化细菌属于原核生物，没有叶绿素，但可将CO2和H2O合成糖类 C．原核细胞的拟核DNA没有游离的磷酸基团，但也能与蛋白质形成复合物 D．限制性内切核酸酶主要从原核细胞中分离获取，能够切开磷酸二酯键 32．下列关于科学实验或研究的叙述，正确的是（ ） A．施莱登和施旺运用不完全归纳法得出一切生物都是由细胞构成的 B．细胞质膜成分和结构的探索过程，多次用到“提出假说”的科学方法 C．研究细胞质膜的流动性时，用到了放射性同位素标记的方法 D．科学家拍摄细胞膜结构的电镜微照片属于构建物理模型的方法 33．下列关于细胞核的结构和功能的叙述正确的是（ ） A．核仁储存着大量遗传信息，是细胞代谢和遗传的控制中心 B．酶和RNA通过核孔进出细胞核时不需要消耗能量 C．细胞核内部含有A、T、C、G的核苷酸共7种 D．核膜和细胞膜都是由4层磷脂分子组成的 34．人们用乙醇梭菌厌氧发酵生产单细胞蛋白和乙醇，该细菌产生乙醇的代谢过程如图所示。在含CO2的环境中，接种在基础培养基上的某乙醇梭菌突变株无法产生乙醇，下列相关叙述正确的是（ ） A．乙醇梭菌的内质网和高尔基体参与单细胞蛋白的合成和加工过程 B．筛选获得乙醇梭菌优良菌种是发酵工程的中心环节 C．发酵过程中进行搅拌有利于乙醇梭菌与营养物质充分接触 D．突变株在加入中间产物2的基础培养基中正常生长，可推测突变株是T酶缺陷型 35．科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该重组质粒的部分结构如图甲，其中V5编码序列表达标签短肽V5。该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙，下列说法正确的是（ ） A．RNA聚合酶可与图甲中的启动子识别并结合，但不能识别终止子 B．图乙中，条带2的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了J蛋白 C．为检测J基因是否正确插入到图甲所示的位置，需用引物F1和R1进行PCR D．若图甲中转录的模板链为b链，则引物F2与图甲中a链相应部分的序列相同 二、不定项选择题：本大题共5小题，每小题3分，共15分，在每小题给出的四个选项中，至少有一个符合题目要求，每道题全对得3分，部分选对得1分。 36．蛋白质合成后，第一个氨基酸会被氨基肽酶水解除去，然后由氨酰-tRNA蛋白转移酶把一个信号氨基酸加到多肽链的氨基端，若该信号氨基酸为丝氨酸、苏氨酸等八种氨基酸之一时，该蛋白质可长时间发挥作用；若为其他氨基酸，不久后会被多个泛素（一种小分子蛋白）结合，进而进入呈筒状的蛋白酶复合体中被水解。下列说法错误的是（ ） A．信号氨基酸由mRNA的第一个密码子控制合成，可决定蛋白质的寿命 B．多肽链与信号氨基酸的脱水缩合发生在肽链的羧基和氨基酸的氨基之间 C．筒状蛋白酶复合体中的水解产物均以代谢废物的形式排出细胞外 D．泛素可能是一种信号分子，起到蛋白质死亡标签的作用 37．称取等量新鲜的花菜、辣椒和蒜黄剪碎后分别均分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下，两组均保存24 h后，将各组的DNA的粗提取物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，用相关试剂进行鉴定，结果如表所示。据表分析下列叙述错误的是（ ） 材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄 20℃ ++ + +++ -20℃ +++ ++ ++++ 注：“+”越多表示蓝色越深。 A．该实验可用于探究不同材料和不同温度对DNA粗提取量的影响 B．若采用离心法对DNA进行粗提取，2次离心后DNA都分布在上清液中 C．等量的不同实验材料，在相同保存温度下，辣椒中提取DNA量最少 D．低温下保存时DNA提取量更多，可能是低温抑制了蛋白酶的活性所致 38．《周礼·天官》中描述道：“酒政举酒之改令……五齐之名：一曰泛齐，二曰醴齐，三曰盎齐，四曰醍齐，五曰沉齐。”古人把酿酒过程分为五个阶段，“泛齐”：发酵开始产生大量气体，将发酵物冲到液面；“醴齐”：糖化作用旺盛起来，醪味变甜，并有薄薄酒味；“盎齐”：发酵旺盛，气浪很多，伴有嘶嘶响声；“醍齐”：酒精成分继续增多，颜色逐渐转红；“沉齐”：发酵完成，酒糟下沉。下列叙述错误的是（ ） A．“醍齐”阶段酒精继续增多，密闭的时间越长，单位时间产生的酒精量越多 B．“沉齐”后因储酒不当，酒变酸且表面有一层菌膜，可能是产膜酵母发酵的结果 C．“泛齐”和“盎齐”阶段产生的气体都是CO₂，两阶段CO₂产生的主要场所不同 D．“醴齐”是指酿谷物酒时，需先将淀粉水解为葡萄糖，而酿葡萄酒一般不经历此过程 39．T蛋白和J蛋白是转录调控因子，为研究T、J蛋白对S蛋白基因表达的调控作用，研究人员构建了图1所示四种质粒，将质粒1与其他质粒组合后，通过农杆菌转化法分别导入烟草细胞，检测发现各组REN表达量基本不变，但荧光强度相对值如图2所示。下列叙述正确的是（ ） A．RNA聚合酶识别和结合启动子后，可驱动DNA的双链解旋 B．图1所示四种质粒片段均需位于农杆菌的Ti质粒的T-DNA中 C．J蛋白可通过与S蛋白基因启动子结合，导致LUC基因几乎不表达 D．T蛋白可通过与S蛋白基因启动子结合，促进LUC基因的表达 40．FSHD是一种罕见的神经肌肉疾病，该病是由于DUX4基因突变产生对骨骼肌有毒的DUX4蛋白。研究发现利用反义疗法可治疗该病，即将DUX4的反义基因导入患病组织，从而达到抑制DUX4基因表达的目的。构建DUX4反义基因表达载体的过程如下图所示，已知DUX4的反义基因与DUX4基因的碱基序列相同，但转录的模板链不同。下列说法错误的是（ ） A．可采用显微注射法将DUX4反义基因表达载体导入患病组织细胞 B．利用图中信息构建反义基因表达载体时，选择的限制酶应为Hind Ⅲ和BamHⅠ C．DUX4反义基因通过抑制DUX4基因的转录过程来抑制DUX4基因的表达 D．利用DUX4基因序列制备的引物进行PCR可检测DUX4反义基因是否导入受体细胞 第Ⅱ卷（非选择题，共50分） 三、简答题：本题共5小题，共50分。把答案填在答题卡的相应位置。 41．细胞膜作为细胞的边界，在细胞的生命活动中具有多项作用，与其自身的组成成分密切相关。下图为某生物细胞膜的亚显微结构图，回答下列问题： （1）辛格和尼科尔森根据观察和实验证据，提出了细胞膜的__________________模型，细胞膜的基本支架是__________________。 （2）图中的来自某细胞的信号分子能与细胞膜上的膜蛋白A结合，进而调节细胞的生命活动，这体现了细胞膜具有的功能是__________________。 （3）胆固醇在动物体内除了可以构成动物细胞膜调节膜的流动性之外，还可以参与__________________的运输。血浆中（细胞外的）胆固醇含量过高，易引发高胆固醇血症（FH）。科研人员研制了一种治疗FH的药物X，为评估其药效，征集志愿者（均为FH患者）若干，随机均分为5组，分别注射不同剂量的药物X，一段时间后，检测每组患者的血浆的相关指标，结果见下表。 注射物质（1次/周） 药物X（mg/周） 0 30 100 200 300 胆固醇含量相对值（注射后/注射前） 100% 94.5% 91.2% 76.8% 50.6% 转氨酶活性 + + + + ++++ 转氨酶活性是肝功能检测的一项重要指标，一定程度上其活性大小与肝细胞受损程度呈正相关。根据表中数据判断，给FH患者注射药物X的最佳剂量为__________，理由为__________________________________________________________________________________________。 42．一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，将两株不同杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体；PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白；CD28是T细胞表面受体。PSMA×CD28的双特异性抗体既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的生产流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。 （1）据图1分析，双特异性抗体PSMA×CD28生产过程中，应先将______________分别注射到小鼠体内，一段时间后获取小鼠脾脏并用__________酶进行处理分离出B淋巴细胞，双杂交瘤细胞在进行传代培养前，_______（填“需要”或“不需要”）用上述酶处理。 （2）图1过程中用到的动物细胞工程技术主要有__________________________（答出两点） （3）抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构。据图2分析，杂交瘤细胞AB在理论上产生的双抗仍具有较大的随机性，原因是__________________________。 （4）若将PSMA抗体和CD28抗体的轻链与重链的DNA序列通过PCR技术连接在一起，导入受体细胞来生产双特异性抗体，这属于__________工程。 43．PCR技术应用非常广泛，可用于扩增目的基因，制作探针，引入定点突变，定量检测DNA等。完成下列有关PCR技术和相关应用的问题： （1）PCR技术可用于基因工程四个基本步骤中的__________和__________步骤。 （2）在正常变性和复性之后研究某TaqDNA聚合酶的催化效率，得到了下列表格 22℃ 37℃ 55℃ 70℃ 78℃ 83℃ 子链延伸速率（个核苷酸·秒-1·酶分子-1） 0.25 1.5 22 60 250 0 83℃下没有产物的原因是____________________。 （3）PCR产物用琼脂糖凝胶电泳鉴定，DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子的_________________等有关（答出两点）。在电泳前需要将PCR产物与凝胶载样缓冲液相混合，凝胶载样缓冲液中应添加______以便判断停止电泳的时间。 （4）不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链探针DNA的方法，这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物，其最佳比例一般为1∶50～1∶100，在PCR反应的最初10～15个循环中，其扩增产物最初主要是双链DNA，但当限制性引物消耗完后，非限制性引物引导的PCR就会产生大量的单链DNA，假设反应体系中原来有m个模板DNA，最初12个循环扩增产生双链DNA，后18个循环均只扩增单链探针，整个过程中需要消耗限制性引物__________个。 44．微生物吸附是重金属废水的处理方法之一，金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。回答下列问题： （1）根据枣树的MTcDNA的核苷酸序列设计了相应的引物（图1甲），通过PCR扩增MT基因。已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置，选用的引物组合应为_________________。 （2）本实验中，PCR所用的DNA聚合酶扩增出的MT基因的末端为平末端，由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。 ①选用_________________酶将载体P切开，为了尽量提高连接效率，应选用__________连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。 ②载体P′不具有表达MT基因所需的_________________，应选用_________酶组合对载体P′和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用DNA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到大肠杆菌，筛出MT工程菌。 （3）MT基因在工程菌的表达量如图2所示，结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由___________________________________________________。 45．木糖醇被摄入后不会引起血糖升高，尤适于糖尿病患者。为构建高产木糖醇工程菌，科研人员将毕赤酵母中的木糖醇脱氢酶（XDH）基因和绿色荧光蛋白（GFP）基因融合，并利用pET-28a质粒构建基因表达载体，转入大肠杆菌中表达，相关示意图如下： （1）为设计XDH基因的PCR引物，可利用________便捷地检索到XDH基因的序列信息，并从________中提取总DNA作为模板来扩增XDH基因。 （2）融合XDH-GFP基因片段时，PCR1和PCR2不能在同一个PCR体系中进行的原因是________________________________________________；引物R1的序列应包含________（填序号）。 ①XDH基因部分序列 ②GFP基因部分序列 ③限制酶的识别序列 （3）为使XDH-GFP融合基因正确插入pET-28a质粒，对融合基因进行扩增时用到的两种引物的碱基序列分别是________（填序号）。 ①5′-GGATCCACTGCTAAC-3′ ②5′-GGATCCTGACGATTG-3′ ③5′-GAATTCTCGTACCTA-3′ ④5′-GAATTCAGCATGGAT-3′ （4）为筛选目标大肠杆菌利用（3）中设计的引物进行PCR和电泳，理论上目标菌落的PCR产物长度应为________。 学科网（北京）股份有限公司 $