精品解析：广西2025-2026学年第二学期高二年级四月阶段性检测生物试卷

高二年级四月阶段性检测 生物学 本试卷满分100分，考试用时75分钟。 注意事项： 1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 4．本试卷主要考试内容：人教版选择性必修3第1章～第3章第1节。 一、选择题：本题共16小题，共40分。第1～12小题，每小题2分；第13～16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 我国各地美食中，利用发酵技术制作的各类特色食品，如泡菜、腐乳等，展现了人民群众的智慧。下列有关叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作过程中，起主要作用的微生物是青霉 B. 腐乳制作过程中，豆腐中有机物的种类减少 C. 泡菜制作过程中，醋酸菌将葡萄糖分解成醋酸 D. 传统泡菜的制作利用的是植物体表面天然的菌种 【答案】D 【解析】 【详解】A、腐乳制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉，A错误； B、蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，豆腐中有机物的种类增多，B错误、 C、泡菜制作过程中，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，C错误； D、传统泡菜的制作，不需要人工接种菌种，利用的是蔬菜表面天然存在的乳酸菌等微生物，在无氧、酸性的环境下，乳酸菌大量繁殖并抑制其他杂菌生长，完成发酵，D正确。 2. 人们将乳酸菌接种到经过处理的牛奶中，通过一系列发酵过程，把牛奶转变为深受大众喜爱的酸奶。下列相关说法正确的是（ ） A. 牛奶煮沸消毒后应立即接种乳酸菌快速发酵 B. 酸奶制作后期，降低温度的目的是使乳酸菌大量繁殖 C. 乳酸菌细胞呼吸产生乳酸的过程发生在细胞质基质 D. 乳酸菌通过无氧呼吸，产生乳酸和少量的二氧化碳 【答案】C 【解析】 【详解】A、牛奶煮沸消毒后不能立即接种，因为高温会杀死乳酸菌，A错误； B、酸奶制作后期，降低温度的目的不是使乳酸菌大量繁殖，降低温度有利于保存酸奶，B错误； C、乳酸菌细胞呼吸产生乳酸的过程发生在细胞质基质，C正确； D、乳酸菌通过无氧呼吸，只产生乳酸，D错误。 3. 苹果树腐烂病由一种真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制该种真菌生长的芽孢杆菌，分离过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 配制图中所用培养基时，培养基pH应调至中性或弱碱性 B. 图中①过程可将5g土壤加入45mL无菌水中制成土壤悬液 C. 每一稀释度下均涂布3个平板是为了减少实验误差，保证结果的准确性 D. 若要筛选出抑菌效果最好的芽孢杆菌，应选择菌落数最多的平板进行后续鉴定 【答案】D 【解析】 【详解】A、芽孢杆菌属于细菌，培养细菌时，培养基的pH通常调至中性或弱碱性，A正确； B、将5g土壤加入45mL无菌水中，总体积为50mL，此时土壤悬液的稀释度为5/50=10-1，符合图中①步骤的10-1稀释要求，B正确； C、每一稀释度下涂布3个平板，取菌落数的平均值计算，能够减少偶然因素造成的实验误差，保证计数结果的准确性，C正确； D、筛选抑菌效果最好的芽孢杆菌，核心是抑菌能力，而非菌落数量多少。应选择抑菌圈最大（抑菌效果最好）的平板进行后续鉴定，而不是菌落数最多的平板，D错误。 4. 发酵工程与农业、食品工业、医药工业等的生产有着密切的联系。下列有关发酵工程的叙述，正确的是（ ） A. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身 B. 发酵工程的菌种只可以来自诱变育种和基因工程育种 C. 发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白作为食品添加剂或制成饲料 D. 发酵工程的中心环节是分离、提纯产物，获得不同产物所采用的方法不同 【答案】A 【解析】 【详解】A、发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身，A正确； B、发酵工程的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以来自诱变育种和基因工程育种，B错误； C、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，C错误； D、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，D错误。 5. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A. 动物细胞培养时，需用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理组织使之分散成单个细胞 B. 需要含95%O2和5%CO2的培养环境，其中CO2的主要作用是维持培养液的渗透压 C. 动物细胞培养时，培养基通常需要加入血清等天然成分 D. 动物细胞培养时，培养液需要定期更换 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物组织的细胞之间依靠蛋白质类成分（如胶原蛋白）连接，用胰蛋白酶、胶原蛋白酶可分解细胞间的连接物质，将组织分散成单个细胞，便于后续培养，A正确； B、动物细胞培养的气体环境是95%空气和5%CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误； C、目前人类尚未完全明确动物细胞所需的全部营养物质，因此培养基中通常需要加入血清、血浆等天然成分，补充细胞所需的未知营养，C正确； D、动物细胞培养过程中会不断产生代谢废物，废物积累会毒害细胞，因此需要定期更换培养液，清除代谢废物同时补充营养，D正确。 6. 青蒿素是治疗疟疾的药物之一，是黄花蒿的次生代谢物。科研人员为了快速繁殖黄花蒿及获取青蒿素，进行了如图所示的操作流程。下列叙述正确的是（　　） A. 青蒿素是黄花蒿基本的生命活动所必需的代谢产物 B. 图中①过程是脱分化，该过程一般需要光照 C. 图中①②④过程体现了植物细胞的全能性 D. 通过④过程获取青蒿素不会大量破坏植物资源 【答案】D 【解析】 【详解】A、题干说明青蒿素是黄花蒿的次生代谢物，次生代谢物不是黄花蒿基本生命活动必需的代谢产物，A错误； B、图中①是脱分化过程，脱分化形成愈伤组织的过程一般不需要光照，B错误； C、植物细胞的全能性是指已分化的细胞发育成完整个体或分化成各种细胞才能体现，①②④过程仅培养到愈伤组织细胞阶段，没有获得完整植株或分化成各种细胞，不能体现植物细胞的全能性，C错误； D、该方法通过工厂化培养植物细胞获取青蒿素，不需要大量采伐野生黄花蒿，不会大量破坏植物资源，D正确。 7. 胚挽救技术是通过离体培养解决植物杂种胚早期败育问题的体外培养技术。该技术的主要流程是在胚发育早期，将其置于人工培养基上进行培养，提供胚生长所需的营养物质、激素以及发育环境，让其继续发育成完整的植株。下列与此有关的叙述，正确的是（　　） A. 胚在培养基上发育成完整植株，体现了植物细胞的全能性 B. 胚在发育过程中，只进行细胞分裂不进行细胞分化 C. 胚挽救技术需要在无菌环境中进行，胚需要灭菌后再培养 D. 人工培养基中需要提供的激素主要是生长素和细胞分裂素 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物细胞全能性的定义是已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，胚本身已经是早期幼胚结构，其自然发育方向就是完整植株，该过程不能体现植物细胞的全能性，A错误； B、胚发育为完整植株的过程中，既通过细胞分裂增加细胞数量，也通过细胞分化形成不同的组织、器官，B错误； C、胚挽救技术需要无菌环境，但灭菌会杀死活的胚细胞，仅需要对操作工具、培养基灭菌，对胚只进行消毒处理即可，C错误； D、植物离体培养的培养基中，主要添加生长素和细胞分裂素，调控细胞的分裂和分化，D正确。 8. 秸秆还田是实现农业可持续发展的重要措施，但秸秆中的纤维素难以被土壤微生物快速分解，影响腐熟效率。科研人员欲从自然界中筛选高效分解纤维素的菌种以加速秸秆腐熟，下列操作错误的是（ ） A. 扩大培养时将菌株接种到固体培养基上以获得更多菌体 B. 筛选时应使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基 C. 挑取透明圈与菌落的直径比值大的菌落进行纯化培养 D. 可从肉食性动物粪便中分离高效纤维素分解菌 【答案】A 【解析】 【详解】A、扩大培养的目的是快速获得大量菌体，应使用液体培养基，使菌体和营养物质充分接触，提升繁殖效率；固体培养基多用于菌种分离、纯化、保藏，无法快速获得大量菌体，A错误； B、筛选纤维素分解菌时，使用纤维素为唯一碳源的选择培养基，只有能分解利用纤维素的微生物可生长繁殖，其他微生物因缺乏碳源无法存活，可起到选择作用，B正确； C、用刚果红染色法筛选时，纤维素被分解的区域会出现透明圈，透明圈与菌落直径的比值越大，说明该菌株分解纤维素的能力越强，因此需要挑取该类菌落进行纯化培养，C正确； D、肉食性动物的粪便中通常含有未被完全消化的纤维素，生存着能够分解纤维素的微生物，所以可以从肉食性动物粪便中分离高效纤维素分解菌，D正确。 9. 以大麦为原料酿造啤酒的流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 焙烤的目的之一是终止淀粉酶的分解作用 B. 包装前进行消毒可以杀死大多数微生物，从而保证啤酒的品质 C. 主发酵阶段应该在发酵液中的糖分完全分解之后终止 D. 图中接种的菌种主要是酵母菌，其能发酵主要是利用了酵母菌的有氧呼吸 【答案】B 【解析】 【详解】A、大麦发芽过程中会产生淀粉酶，焙烤的主要目的是杀死种子的胚、终止发芽，同时赋予啤酒风味；焙烤不会使淀粉酶失活，后续糖化过程仍需要淀粉酶分解淀粉，A错误； B、包装前进行消毒可以杀死啤酒中的大多数微生物，避免杂菌污染导致啤酒变质，从而保证啤酒的品质，B正确； C、主发酵阶段不需要等糖分完全分解后再终止，会残留部分糖分供后发酵阶段利用，糖分完全分解会影响啤酒的风味，C错误； D、啤酒酿造主要利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精，而非有氧呼吸，D错误。 10. 植物细胞工程的几项应用如图所示，下列相关叙述正确的是（ ） A. 若外植体为茎尖分生组织，则脱毒植株a有抗病毒能力 B. 除植株b、c外，另两类植株的基因型一般与外植体相同 C. 突变体植株c的获得说明该过程中能发生定向突变 D. 若外植体为花粉，则得到单倍体植株b的过程即单倍体育种 【答案】B 【解析】 【详解】A、茎尖分生组织病毒极少甚至无病毒，培养得到的脱毒植株a仅不带病毒，不具备抗病毒能力，抗病毒能力需要转入抗病毒基因才能获得，A错误； B、脱毒植株a、植株d均是通过植物组织培养的无性生殖得到的，基因型一般与外植体相同；单倍体植株b是配子发育而来，基因型与外植体不同，突变体植株c发生了基因突变，基因型也发生改变，B正确； C、基因突变具有不定向性，突变体植株c是不定向突变后经人工筛选得到的，C错误； D、单倍体育种包括花药离体培养获得单倍体植株、秋水仙素处理使染色体数目加倍两个步骤，仅得到单倍体植株b的过程不属于单倍体育种，D错误。 11. 图1、2表示洋葱DNA的粗提取和鉴定的部分过程，下列叙述错误的是（　　） A. 试剂甲是体积分数为95%的预冷酒精 B. 试管1作为对照，加入的溶液b为2 mol·L-1的NaCl溶液 C. 加入试剂甲后，静置2~3 min可析出白色丝状DNA D. 试剂乙为斐林试剂，在沸水浴条件下与DNA反应呈蓝色 【答案】D 【解析】 【详解】A、DNA不溶于体积分数为95%的预冷酒精，而细胞中的杂质可溶于酒精，因此常用预冷的95%酒精提纯DNA，试剂甲就是该酒精溶液，A正确； B、图2中试管1作为空白对照，实验组试管2是含DNA的2mol·L−1的NaCl溶液，因此对照组试管1加入的溶液b为不含DNA的2mol·L−1的NaCl溶液，遵循单一变量原则，B正确； C、DNA不溶于冷酒精，加入酒精静置2~3min后，会析出白色丝状的DNA，C正确； D、鉴定DNA的试剂乙是二苯胺试剂，沸水浴条件下二苯胺与DNA反应呈现蓝色，D错误。 12. 在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，下列相关叙述正确的是（ ） A. 天然质粒只存在于原核细胞中，能在细胞中自我复制 B. 对天然质粒进行改造需要用到限制酶和DNA连接酶 C. 在改造前后的质粒分子中，嘌呤类碱基所占的比例不同 D. 为了便于筛选出重组DNA需要在质粒中添加抗生素基因 【答案】B 【解析】 【分析】质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中。携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。这些质粒上常有特殊的标记基因，如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等，便于重组DNA分子的筛选。 【详解】A、某些真核细胞中也存在天然质粒，如酵母菌细胞，A错误； B、对天然质粒进行改造需要用到限制酶（切割质粒）和DNA连接酶（连接质粒），B正确； C、因为质粒是双链DNA分子，遵循碱基互补配对，因此在改造前后的质粒分子中，嘌呤类碱基所占的比例相同，都是1/2，C错误； D、为了便于筛选出重组DNA需要在质粒中添加抗生素抗性基因，D错误。 故选B。 13. 研究子宫内膜基质细胞的分化过程有助于研究妊娠相关疾病，但所需子宫内膜样本不能从孕妇体内获得。研究者将控制干细胞特性的基因转入成纤维细胞，获得iPS细胞，诱导iPS细胞分化获得子宫内膜基质细胞，实验流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①③④可能都需要用到胰蛋白酶 B. 过程③④中，细胞的遗传物质一般不发生改变 C. 不能从孕妇体内获得子宫内膜的原因之一是涉及伦理问题 D. iPS细胞具备发育全能性和自我更新能力，属于胚胎干细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、将动物组织分散成细胞可能需要用到胰蛋白酶，原代培养如果出现接触抑制，可先用胰蛋白酶消化处理再离心，收集细胞后分瓶传代培养，A正确； B、过程③④涉及有丝分裂和分化，细胞的遗传物质一般保持不变，B正确； C、若从孕妇体内获得子宫内膜，可能影响孕育的胎儿成活或发育，涉及伦理问题，C正确； D、iPS细胞具有发育的全能性，同时具备多方向分化潜能和自我更新能力，具有类似胚胎干细胞的特点，但不属于胚胎干细胞，D错误。 14. 名为“爱达荷宝石”的克隆骡的诞生荣膺3项世界第一：克隆骡、克隆马科动物、克隆杂种动物。它是科学家将供体骡的体细胞核植入去核的母马卵母细胞，再将这种经过“组合”的卵母细胞培养到一定阶段，然后放入母马的子宫内孕育获得的。下列相关叙述正确的是（ ） A. 去核的实质是去除卵母细胞中的“纺锤体—染色体复合物” B. 经过“组合”的卵母细胞可立即开始细胞分裂和发育进程 C. “爱达荷宝石”的遗传物质全部来自供体骡 D. 体细胞核移植的难度一般低于胚胎细胞核移植 【答案】A 【解析】 【详解】A、处于减数第二次分裂中期的卵母细胞核膜已经解体，遗传物质以“纺锤体—染色体复合物”形式存在，去核的实质就是去除该结构，A正确； B、“组合”得到的重组卵母细胞需要经过物理或化学方法激活后，才能启动细胞分裂和发育进程，无法立即开始分裂，B错误； C、“爱达荷宝石”的细胞核遗传物质来自供体骡，但细胞质中的线粒体DNA来自提供去核卵母细胞的母马，并非全部遗传物质都来自供体骡，C错误； D、体细胞分化程度远高于胚胎细胞，全能性更难表达，因此体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，D错误。 15. 人肌红蛋白（Mb）主要存在于心肌及骨骼肌内，心肌受损时释放入血，导致血液中Mb含量升高。Mb分子量低因而具有早期释放特性，是早期诊断急性心肌梗死的标记物。Mb检测要用到抗Mb单克隆抗体，抗Mb单克隆抗体的制备流程如图所示。下列说法错误的是（　　） A. 步骤①后从小鼠脾脏中可以获取所需的B淋巴细胞 B. 步骤②可以表示B细胞和骨髓瘤细胞的融合 C. 步骤③中尽量在每一个孔中多接种几个杂交瘤细胞 D. 步骤⑤后在小鼠腹水中可以获取大量抗Mb单克隆抗体 【答案】C 【解析】 【详解】A、步骤①是将Mb注入到小鼠体内，诱导机体产生免疫应答，目的是为了从小鼠脾脏中获取所需的B淋巴细胞，A正确； B、步骤②是将获取的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，目的是获取杂交瘤细胞，B正确； C、步骤③是利用特定的培养基筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，尽量在每一个孔中接种单个杂交瘤细胞，C错误； D、经过步骤③④获取的杂交瘤细胞可注入到小鼠的腹腔中，杂交瘤细胞在腹腔中增殖、合成并分泌单克隆抗体，最终在小鼠腹水中可以获取大量抗Mb单克隆抗体，D正确。 16. 火龙果外植体表面常有细菌和真菌，易受污染，推测其刺座和绒毛的存在是重要原因。为探究去除刺座及绒毛对外植体培养效果的影响，科研人员选用不同成熟度的茎段，分别进行保留或去除刺座及绒毛处理，统计污染率、褐死率（外植体因褐化而死亡的比例）和成活率，结果如表所示。下列分析错误的是（ ） 外植体 刺座及绒毛 污染率/% 褐死率/% 成活率/% 幼嫩茎段 保留 20.83 16.67 62.50 近成熟茎段 保留 25.83 2.50 71.67 幼嫩茎段 去除 0 62.50 37.50 近成熟茎段 去除 8.33 41.67 50.00 A. 去除刺座及绒毛能完全避免污染，幼嫩茎段去除刺座及绒毛后最适合作为外植体 B. 去除刺座及绒毛会导致组织损伤，因此褐死率升高、成活率降低 C. 幼嫩茎段污染率更低与其携带的细菌和真菌较少有关 D. 保留刺座及绒毛的近成熟茎段虽污染率较高，但成活率最高，比较适合作为外植体 【答案】A 【解析】 【详解】A、由表格数据可知，仅幼嫩茎段去除刺座及绒毛后污染率为0，近成熟茎段去除后仍有8.33%的污染率，因此无法完全避免污染，且幼嫩茎段去除刺座及绒毛后成活率仅37.5%，远低于保留刺座及绒毛的组别，不是最适合的外植体，A错误； B、对比相同成熟度的茎段，去除刺座及绒毛组的褐死率均高于保留组、成活率均低于保留组，原因是去除操作会造成组织损伤，易引发褐化死亡，B正确； C、均保留刺座及绒毛时，幼嫩茎段污染率低于近成熟茎段，推测与其生长时间短，携带的细菌、真菌更少有关，C正确； D、保留刺座及绒毛的近成熟茎段污染率为25.83%，但成活率达71.67%，是所有组别中成活率最高的，整体来看比较适合作为外植体，D正确。 二、非选择题：共60分。考生根据要求作答。 17. 山楂含有的多酚、黄酮对人体有益。山楂果醋是以山楂为主要原料制成的饮品，兼具山楂的营养与醋的功效。其加工流程如下：采摘山楂→选果→清洗→破碎→糖化→酒精发酵→醋酸发酵→灭菌→陈酿→成品。回答下列相关问题： （1）进行酒精发酵的微生物是酵母菌，它与进行醋酸发酵的微生物在细胞结构上的最主要区别是_______。 （2）发酵前将山楂汁装瓶时，要留出大约_______的空间。山楂汁不用做去除杂菌处理，可直接进行酒精发酵的原因：_______。 （3）在同一个发酵容器中，酒精发酵和醋酸发酵不能同时进行，从氧气的角度分析其原因：_______。醋酸发酵过程中，发酵液pH的变化情况是_______。 （4）研究人员测定了山楂带皮发酵和去皮发酵前后多酚和黄酮的含量，结果如表所示。该实验结果说明山楂_______（填“带皮”或“去皮”）发酵效果更好，判断的依据是_______。 类型 多酚含量/(mg·L-1) 黄酮含量/(mg·mL-1) 去皮鲜果 75 0.12 去皮果醋 150 0.48 带皮鲜果 75 0.16 带皮果醋 260 0.93 【答案】（1）酵母菌有以核膜为界限的细胞核 （2） ①. 1/3 ②. 酒精发酵形成的缺氧和酸性环境不利于其他微生物的生长 （3） ①. 酒精发酵需要无氧环境，醋酸发酵需要有氧环境 ②. 逐渐减小，一段时间后基本保持稳定 （4） ①. 带皮 ②. 多酚和黄酮对人体有益，带皮果醋中多酚和黄酮的含量更多 【解析】 【小问1详解】 酵母菌是真核生物，醋酸菌是原核生物，两类生物细胞结构的最核心区别就是有无核膜包被的成形细胞核。 【小问2详解】 发酵前将山楂汁装瓶时留出大约1/3的空间，一是为了让酵母菌在有氧条件下大量繁殖，二是防止发酵过程中产生的二氧化碳导致发酵液溢出。酒精发酵阶段发酵液处于缺氧、酸性的环境，该环境是酵母菌的适宜生存环境，但会抑制绝大多数杂菌的代谢和繁殖，因此无需额外灭菌即可直接发酵。 【小问3详解】 酒精发酵的本质是酵母菌的无氧呼吸，必须在无氧条件下进行；醋酸菌是好氧菌，醋酸发酵需要持续通入氧气，二者对氧气的需求完全相反，因此无法同时进行。醋酸发酵过程中会持续生成醋酸，酸性物质积累会使发酵液pH逐渐降低，一段时间后基本保持稳定。 【小问4详解】 带皮发酵得到的果醋中，多酚含量为260mg·L-1，远高于去皮果醋的150mg·L-1；黄酮含量为0.93mg·mL-1，也远高于去皮果醋的0.48mg·mL-1，两类都是对人体有益的活性成分，因此带皮发酵效果更好。 18. 硝化细菌能将水体中的氨氮（NH3/NH4+）转化为硝酸盐（NO3-），在水产养殖水质调控中具有重要作用。某水产养殖基地出现鱼类浮头、摄食减少现象，检测发现水体中氨氮浓度超标。为筛选高效降解氨氮的硝化细菌，科研人员从该养殖基地的底泥中取样，进行了实验。回答下列问题: （1）科研人员配制了如表所示的筛选培养基。该培养基配方能否用于筛选硝化细菌?请判断并说明理由:______。 成分 NH4Cl 蛋白胨 Na2HPO4 KH2PO4 MgSO4·7H2O FeCl3 琼脂 含量 0.5 g 5.0 g 1.0 g 0.5 g 0.1 g 0.05 g 15.0 g （2）配制好的培养基常用______法进行灭菌。接种前，需将接种工具（如接种环）通过______法进行灭菌。 （3）科研人员将底泥样品稀释后涂布到上述培养基上，培养一段时间后，培养基上出现了多个菌落。若要从中分离出硝化细菌，可采用______法挑取单菌落进行纯化培养。纯化培养的目的是______。 （4）为进一步验证筛选出的菌株的硝化能力（能将氨氮转化为硝酸盐的能力），科研人员将其接种到含一定浓度氨氮的液体培养基中，培养一段时间后测定培养基中的氨氮浓度和硝酸盐浓度，结果如图所示。科研人员分析后认为该菌株具有一定的硝化能力，其判断依据是______。 （5）若将该菌株应用于水产养殖水质调控，需要考虑的环境因素有______（写出2点）。 【答案】（1）不能，该培养基中含有蛋白胨（有机氮源），不能筛选以无机氮（铵盐）为唯一氮源的硝化细菌 （2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 灼烧灭菌 （3） ①. 平板划线##稀释涂布平板 ②. 获得单一菌落（或获得纯种硝化细菌） （4）随培养时间的延长，氨氮浓度降低，硝酸盐浓度升高，说明该菌株能将氨氮转化为硝酸盐 （5）水温、pH、溶氧量、盐度、水体中有机物含量等 【解析】 【小问1详解】 硝化细菌是自养型微生物，可利用无机氮作为唯一氮源生长。该培养基中添加了蛋白胨，异养型微生物也能利用其生长，无法起到选择作用，因此不能用于筛选硝化细菌。 【小问2详解】 配制好的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。接种前，需将接种工具（如接种环）通过灼烧灭菌法进行灭菌。 【小问3详解】 将底泥样品稀释后涂布到上述培养基上，培养一段时间后，培养基上出现了多个菌落。若要从中分离出硝化细菌，则应挑取单菌落并通过平板划线（或稀释涂布平板）法将其接种于培养基上进行纯化培养。纯化培养的目的是获得单一菌落（或获得纯种硝化细菌）。 【小问4详解】 从曲线图可直接观察到，随着培养时间的增加，氨氮浓度持续下降，同时硝酸盐浓度持续上升，二者呈明显的负相关，说明该菌株可将氨氮转化为硝酸盐。 【小问5详解】 将该菌株应用于水产养殖水质调控，需要考虑的环境因素还有水温、pH、溶氧量、盐度等 19. 神舟四号飞船自主飞行期间完成了两项细胞电融合实验，其中一项是黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体融合。回答下列问题： （1）常用________酶降解烟草叶肉细胞细胞壁以获得原生质体，酶解过程在略高渗的溶液中进行，目的是________。 （2）研究者研究了温度对烟草叶肉细胞原生质体活力和细胞壁再生的影响，实验结果如图1、图2所示。该实验结果的启示：要提高实验成功率，在诱导融合前，将烟草叶肉细胞的原生质体保存在10℃，有利于____________；在诱导融合后，将融合的原生质体保存在25℃下，有利于________。 （3）神舟四号飞船（微重力环境）上进行细胞电融合的同时，地面上用于对照的黄花烟草和革新一号烟草原生质体电融合实验也在举行。太空与地面上细胞融合实验的自变量是________，比较二者细胞融合率的结果最可能是________（已知两种植物原生质体密度有一定差异，重力作用下，密度分层导致细胞接触不足）。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 防止原生质体吸水涨破 （2） ①. 保持原生质体活力 ②. 细胞壁再生，促进杂种细胞的形成 （3） ①. 太空中实验处在微重力（失重）条件下，地面上实验处在重力条件下（或是否在微重力环境下进行融合） ②. 飞船上的融合率比地面上的高 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此常用纤维素酶和果胶酶降解细胞壁，获得原生质体。原生质体没有细胞壁保护，在低渗溶液中会吸水涨破。略高渗的溶液可以维持原生质体的渗透压，防止原生质体吸水涨破，保证其结构完整。 【小问2详解】 图 1（原生质体活力）：10℃条件下，原生质体活力下降得比 25℃慢得多。 图 2（细胞壁再生率）：25℃条件下，细胞壁再生率远高于 10℃。 所以诱导融合前，将原生质体保存在 10℃，有利于保持原生质体的活力，为后续融合提供足够多的活细胞。诱导融合后，将融合的原生质体保存在 25℃，有利于细胞壁再生，促进杂种细胞的形成，为后续的脱分化、再分化打下基础。 【小问3详解】 太空与地面实验的唯一变量是重力环境（微重力 / 失重与正常重力），因此自变量是是否处于微重力（失重）环境下进行融合。地面实验中，不同密度的原生质体受重力影响会分层，难以相互接触，融合率低。 太空微重力环境下，重力沉降现象消失，原生质体均匀分布，更容易相互接触并融合。因此飞船上的细胞融合率比地面上的高。 20. 胎盘异常是动物克隆失败的常见原因。滋养层细胞置换技术可用于解决该问题，某研究团队用该技术成功克隆出一只健康的猴，过程如图所示。回答下列问题： （1）在动物细胞的体外培养过程中，通常利用胰蛋白酶对供体细胞进行处理，防止出现________现象。选用去核卵母细胞作为受体细胞是因为其体积大易操作，而且________。 （2）采集的卵母细胞在体外培养至________期，通常使用________法进行去核处理获得去核的卵母细胞。将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内，通过________（答出1种）法使两细胞融合形成重构胚。 （3）检测重组胚胎滋养层细胞________（填“能”或“不能”）确定克隆猴的性别，原因是________。克隆猴的细胞质基因来自猴________。 【答案】（1） ①. 接触抑制 ②. 去核卵母细胞的细胞质中含有能激发细胞核全能性表达的物质 （2） ①. MⅡ ②. 显微操作 ③. 电融合（或PEG融合或灭活病毒诱导） （3） ①. 不能 ②. 克隆猴的各种组织由内细胞团发育而来，其遗传物质与重组胚胎中的内细胞团的一致，与滋养层细胞的不一致 ③. A和B 【解析】 【小问1详解】 在动物细胞体外培养过程中，细胞会贴壁生长，当细胞相互接触时，会停止分裂增殖，这种现象就是接触抑制。用胰蛋白酶处理供体细胞，能使细胞分散成单个细胞，避免出现接触抑制，保证细胞可以继续增殖；选用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是去核卵母细胞体积大，操作起来比较方便，同时它的细胞质中含有能激发细胞核全能性表达的物质，能够让供体细胞的细胞核恢复分裂和分化的能力，发育成完整的个体。 【小问2详解】 采集的卵母细胞需要在体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ中期），这个时期的卵母细胞发育成熟，具备接受细胞核的能力，适合作为核移植的受体细胞；去除卵母细胞的细胞核时，通常使用显微操作法，借助显微操作仪可以精准地将卵母细胞的细胞核去除，同时尽量减少对细胞质的损伤；将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内后，通过电融合（或PEG融合、灭活病毒诱导）的方法，能让两个细胞的细胞膜融合，形成重构胚； 【小问3详解】 检测重组胚胎滋养层细胞不能确定克隆猴的性别，原因是克隆猴的各种组织由内细胞团发育而来，其遗传物质与重组胚胎中的内细胞团的一致，与滋养层细胞的不一致；克隆猴由内细胞团发育而来，由图可知，克隆猴的内细胞团的形成与A猴和B猴有关，克隆猴的细胞质基因来自猴A和B。 21. 限制酶I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的识别序列及其切割位点如下表所示。某质粒、目的基因两端相关限制酶的酶切位点分别如图1，图2所示。回答下列问题： 限制酶 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ 识别序列及 切割位点 （1）只与一个五碳糖连接的磷酸基团称为游离的磷酸基团，一个质粒分子含有__________个游离的磷酸基团。图示质粒经限制酶Ⅰ完全酶切后产生的DNA片段共含有______________个游离的磷酸基团。 （2）限制酶Ⅲ能断开的是下图3中___________（填字母）处的键。若经限制酶Ⅰ切割的DNA末端与经限制酶Ⅱ切割的DNA末端连接，则连接部位的6个碱基对序列为___________。对于连接后的该部位，这两种酶_________（填“都能”“都不能”或“中只有一种能”）将其切开。 （3）若用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，则应选用限制酶__________共同切割，不选用另外两种限制酶的原因分别是________________________________________。 【答案】（1） ①. 0##零 ②. 4##四 （2） ①. a ②. （或） ③. 都不能 （3） ①. Ⅱ、Ⅳ ②. 质粒上不含限制酶Ⅲ的识别序列及其切割位点；选用限制酶Ⅰ可能会使质粒中的启动子丢失（或四环素抗性基因是标记基因之一，若用限制酶Ⅰ处理质粒，则会使该标记基因失去标记作用） 【解析】 【分析】限制性核酸内切酶（限制酶）：(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 【小问1详解】 质粒分子是环状的DNA，每个磷酸基团都与2个五碳糖相连，没有游离的磷酸基团。图示质粒有2个限制酶I的酶切位点，故质粒经限制酶Ⅰ完全酶切后，得到两个链状的DNA，由于每个DNA单链的5’端有一个游离的磷酸基团，因此共有4个游离的磷酸基团。 【小问2详解】 限制酶断开的是两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，对应a。据表可知，限制酶I切割和限制酶Ⅱ切割产生的黏性末端相同，若经限制酶I切割的DNA末端与经限制酶Ⅱ切割的DNA末端连接，则连接部位的6个碱基对序列为 。一种限制酶只能识别特定的序列断开特定的部位，连接后该部位的序列与酶切前的序列不同，这两种酶都不能识别，故都不能将其切开。 【小问3详解】 结合图1和图2可知，质粒上不含限制酶Ⅲ的识别序列及其切割位点，并且选用限制酶Ⅰ可能会使质粒中的启动子丢失（或四环素抗性基因是标记基因之一，若用限制酶Ⅰ处理质粒，则会使该标记基因失去标记作用），因此用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，则应选用限制酶Ⅱ、Ⅳ。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二年级四月阶段性检测 生物学 本试卷满分100分，考试用时75分钟。 注意事项： 1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 4．本试卷主要考试内容：人教版选择性必修3第1章～第3章第1节。 一、选择题：本题共16小题，共40分。第1～12小题，每小题2分；第13～16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 我国各地美食中，利用发酵技术制作的各类特色食品，如泡菜、腐乳等，展现了人民群众的智慧。下列有关叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作过程中，起主要作用的微生物是青霉 B. 腐乳制作过程中，豆腐中有机物的种类减少 C. 泡菜制作过程中，醋酸菌将葡萄糖分解成醋酸 D. 传统泡菜的制作利用的是植物体表面天然的菌种 2. 人们将乳酸菌接种到经过处理的牛奶中，通过一系列发酵过程，把牛奶转变为深受大众喜爱的酸奶。下列相关说法正确的是（ ） A. 牛奶煮沸消毒后应立即接种乳酸菌快速发酵 B. 酸奶制作后期，降低温度的目的是使乳酸菌大量繁殖 C. 乳酸菌细胞呼吸产生乳酸的过程发生在细胞质基质 D. 乳酸菌通过无氧呼吸，产生乳酸和少量的二氧化碳 3. 苹果树腐烂病由一种真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制该种真菌生长的芽孢杆菌，分离过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 配制图中所用培养基时，培养基pH应调至中性或弱碱性 B. 图中①过程可将5g土壤加入45mL无菌水中制成土壤悬液 C. 每一稀释度下均涂布3个平板是为了减少实验误差，保证结果的准确性 D. 若要筛选出抑菌效果最好的芽孢杆菌，应选择菌落数最多的平板进行后续鉴定 4. 发酵工程与农业、食品工业、医药工业等的生产有着密切的联系。下列有关发酵工程的叙述，正确的是（ ） A. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身 B. 发酵工程的菌种只可以来自诱变育种和基因工程育种 C. 发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白作为食品添加剂或制成饲料 D. 发酵工程的中心环节是分离、提纯产物，获得不同产物所采用的方法不同 5. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是（　　） A. 动物细胞培养时，需用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理组织使之分散成单个细胞 B. 需要含95%O2和5%CO2的培养环境，其中CO2的主要作用是维持培养液的渗透压 C. 动物细胞培养时，培养基通常需要加入血清等天然成分 D. 动物细胞培养时，培养液需要定期更换 6. 青蒿素是治疗疟疾的药物之一，是黄花蒿的次生代谢物。科研人员为了快速繁殖黄花蒿及获取青蒿素，进行了如图所示的操作流程。下列叙述正确的是（　　） A. 青蒿素是黄花蒿基本的生命活动所必需的代谢产物 B. 图中①过程是脱分化，该过程一般需要光照 C. 图中①②④过程体现了植物细胞的全能性 D. 通过④过程获取青蒿素不会大量破坏植物资源 7. 胚挽救技术是通过离体培养解决植物杂种胚早期败育问题的体外培养技术。该技术的主要流程是在胚发育早期，将其置于人工培养基上进行培养，提供胚生长所需的营养物质、激素以及发育环境，让其继续发育成完整的植株。下列与此有关的叙述，正确的是（　　） A. 胚在培养基上发育成完整植株，体现了植物细胞的全能性 B. 胚在发育过程中，只进行细胞分裂不进行细胞分化 C. 胚挽救技术需要在无菌环境中进行，胚需要灭菌后再培养 D. 人工培养基中需要提供的激素主要是生长素和细胞分裂素 8. 秸秆还田是实现农业可持续发展的重要措施，但秸秆中的纤维素难以被土壤微生物快速分解，影响腐熟效率。科研人员欲从自然界中筛选高效分解纤维素的菌种以加速秸秆腐熟，下列操作错误的是（ ） A. 扩大培养时将菌株接种到固体培养基上以获得更多菌体 B. 筛选时应使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基 C. 挑取透明圈与菌落的直径比值大的菌落进行纯化培养 D. 可从肉食性动物粪便中分离高效纤维素分解菌 9. 以大麦为原料酿造啤酒的流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 焙烤的目的之一是终止淀粉酶的分解作用 B. 包装前进行消毒可以杀死大多数微生物，从而保证啤酒的品质 C. 主发酵阶段应该在发酵液中的糖分完全分解之后终止 D. 图中接种的菌种主要是酵母菌，其能发酵主要是利用了酵母菌的有氧呼吸 10. 植物细胞工程的几项应用如图所示，下列相关叙述正确的是（ ） A. 若外植体为茎尖分生组织，则脱毒植株a有抗病毒能力 B. 除植株b、c外，另两类植株的基因型一般与外植体相同 C. 突变体植株c的获得说明该过程中能发生定向突变 D. 若外植体为花粉，则得到单倍体植株b的过程即单倍体育种 11. 图1、2表示洋葱DNA的粗提取和鉴定的部分过程，下列叙述错误的是（　　） A. 试剂甲是体积分数为95%的预冷酒精 B. 试管1作为对照，加入的溶液b为2 mol·L-1的NaCl溶液 C. 加入试剂甲后，静置2~3 min可析出白色丝状DNA D. 试剂乙为斐林试剂，在沸水浴条件下与DNA反应呈蓝色 12. 在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，下列相关叙述正确的是（ ） A. 天然质粒只存在于原核细胞中，能在细胞中自我复制 B. 对天然质粒进行改造需要用到限制酶和DNA连接酶 C. 在改造前后的质粒分子中，嘌呤类碱基所占的比例不同 D. 为了便于筛选出重组DNA需要在质粒中添加抗生素基因 13. 研究子宫内膜基质细胞的分化过程有助于研究妊娠相关疾病，但所需子宫内膜样本不能从孕妇体内获得。研究者将控制干细胞特性的基因转入成纤维细胞，获得iPS细胞，诱导iPS细胞分化获得子宫内膜基质细胞，实验流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①③④可能都需要用到胰蛋白酶 B. 过程③④中，细胞的遗传物质一般不发生改变 C. 不能从孕妇体内获得子宫内膜的原因之一是涉及伦理问题 D. iPS细胞具备发育全能性和自我更新能力，属于胚胎干细胞 14. 名为“爱达荷宝石”的克隆骡的诞生荣膺3项世界第一：克隆骡、克隆马科动物、克隆杂种动物。它是科学家将供体骡的体细胞核植入去核的母马卵母细胞，再将这种经过“组合”的卵母细胞培养到一定阶段，然后放入母马的子宫内孕育获得的。下列相关叙述正确的是（ ） A. 去核的实质是去除卵母细胞中的“纺锤体—染色体复合物” B. 经过“组合”的卵母细胞可立即开始细胞分裂和发育进程 C. “爱达荷宝石”的遗传物质全部来自供体骡 D. 体细胞核移植的难度一般低于胚胎细胞核移植 15. 人肌红蛋白（Mb）主要存在于心肌及骨骼肌内，心肌受损时释放入血，导致血液中Mb含量升高。Mb分子量低因而具有早期释放特性，是早期诊断急性心肌梗死的标记物。Mb检测要用到抗Mb单克隆抗体，抗Mb单克隆抗体的制备流程如图所示。下列说法错误的是（　　） A. 步骤①后从小鼠脾脏中可以获取所需的B淋巴细胞 B. 步骤②可以表示B细胞和骨髓瘤细胞的融合 C. 步骤③中尽量在每一个孔中多接种几个杂交瘤细胞 D. 步骤⑤后在小鼠腹水中可以获取大量抗Mb单克隆抗体 16. 火龙果外植体表面常有细菌和真菌，易受污染，推测其刺座和绒毛的存在是重要原因。为探究去除刺座及绒毛对外植体培养效果的影响，科研人员选用不同成熟度的茎段，分别进行保留或去除刺座及绒毛处理，统计污染率、褐死率（外植体因褐化而死亡的比例）和成活率，结果如表所示。下列分析错误的是（ ） 外植体 刺座及绒毛 污染率/% 褐死率/% 成活率/% 幼嫩茎段 保留 20.83 16.67 62.50 近成熟茎段 保留 25.83 2.50 71.67 幼嫩茎段 去除 0 62.50 37.50 近成熟茎段 去除 8.33 41.67 50.00 A. 去除刺座及绒毛能完全避免污染，幼嫩茎段去除刺座及绒毛后最适合作为外植体 B. 去除刺座及绒毛会导致组织损伤，因此褐死率升高、成活率降低 C. 幼嫩茎段污染率更低与其携带的细菌和真菌较少有关 D. 保留刺座及绒毛的近成熟茎段虽污染率较高，但成活率最高，比较适合作为外植体 二、非选择题：共60分。考生根据要求作答。 17. 山楂含有的多酚、黄酮对人体有益。山楂果醋是以山楂为主要原料制成的饮品，兼具山楂的营养与醋的功效。其加工流程如下：采摘山楂→选果→清洗→破碎→糖化→酒精发酵→醋酸发酵→灭菌→陈酿→成品。回答下列相关问题： （1）进行酒精发酵的微生物是酵母菌，它与进行醋酸发酵的微生物在细胞结构上的最主要区别是_______。 （2）发酵前将山楂汁装瓶时，要留出大约_______的空间。山楂汁不用做去除杂菌处理，可直接进行酒精发酵的原因：_______。 （3）在同一个发酵容器中，酒精发酵和醋酸发酵不能同时进行，从氧气的角度分析其原因：_______。醋酸发酵过程中，发酵液pH的变化情况是_______。 （4）研究人员测定了山楂带皮发酵和去皮发酵前后多酚和黄酮的含量，结果如表所示。该实验结果说明山楂_______（填“带皮”或“去皮”）发酵效果更好，判断的依据是_______。 类型 多酚含量/(mg·L-1) 黄酮含量/(mg·mL-1) 去皮鲜果 75 0.12 去皮果醋 150 0.48 带皮鲜果 75 0.16 带皮果醋 260 0.93 18. 硝化细菌能将水体中的氨氮（NH3/NH4+）转化为硝酸盐（NO3-），在水产养殖水质调控中具有重要作用。某水产养殖基地出现鱼类浮头、摄食减少现象，检测发现水体中氨氮浓度超标。为筛选高效降解氨氮的硝化细菌，科研人员从该养殖基地的底泥中取样，进行了实验。回答下列问题: （1）科研人员配制了如表所示的筛选培养基。该培养基配方能否用于筛选硝化细菌?请判断并说明理由:______。 成分 NH4Cl 蛋白胨 Na2HPO4 KH2PO4 MgSO4·7H2O FeCl3 琼脂 含量 0.5 g 5.0 g 1.0 g 0.5 g 0.1 g 0.05 g 15.0 g （2）配制好的培养基常用______法进行灭菌。接种前，需将接种工具（如接种环）通过______法进行灭菌。 （3）科研人员将底泥样品稀释后涂布到上述培养基上，培养一段时间后，培养基上出现了多个菌落。若要从中分离出硝化细菌，可采用______法挑取单菌落进行纯化培养。纯化培养的目的是______。 （4）为进一步验证筛选出的菌株的硝化能力（能将氨氮转化为硝酸盐的能力），科研人员将其接种到含一定浓度氨氮的液体培养基中，培养一段时间后测定培养基中的氨氮浓度和硝酸盐浓度，结果如图所示。科研人员分析后认为该菌株具有一定的硝化能力，其判断依据是______。 （5）若将该菌株应用于水产养殖水质调控，需要考虑的环境因素有______（写出2点）。 19. 神舟四号飞船自主飞行期间完成了两项细胞电融合实验，其中一项是黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体融合。回答下列问题： （1）常用________酶降解烟草叶肉细胞细胞壁以获得原生质体，酶解过程在略高渗的溶液中进行，目的是________。 （2）研究者研究了温度对烟草叶肉细胞原生质体活力和细胞壁再生的影响，实验结果如图1、图2所示。该实验结果的启示：要提高实验成功率，在诱导融合前，将烟草叶肉细胞的原生质体保存在10℃，有利于____________；在诱导融合后，将融合的原生质体保存在25℃下，有利于________。 （3）神舟四号飞船（微重力环境）上进行细胞电融合的同时，地面上用于对照的黄花烟草和革新一号烟草原生质体电融合实验也在举行。太空与地面上细胞融合实验的自变量是________，比较二者细胞融合率的结果最可能是________（已知两种植物原生质体密度有一定差异，重力作用下，密度分层导致细胞接触不足）。 20. 胎盘异常是动物克隆失败的常见原因。滋养层细胞置换技术可用于解决该问题，某研究团队用该技术成功克隆出一只健康的猴，过程如图所示。回答下列问题： （1）在动物细胞的体外培养过程中，通常利用胰蛋白酶对供体细胞进行处理，防止出现________现象。选用去核卵母细胞作为受体细胞是因为其体积大易操作，而且________。 （2）采集的卵母细胞在体外培养至________期，通常使用________法进行去核处理获得去核的卵母细胞。将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内，通过________（答出1种）法使两细胞融合形成重构胚。 （3）检测重组胚胎滋养层细胞________（填“能”或“不能”）确定克隆猴的性别，原因是________。克隆猴的细胞质基因来自猴________。 21. 限制酶I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的识别序列及其切割位点如下表所示。某质粒、目的基因两端相关限制酶的酶切位点分别如图1，图2所示。回答下列问题： 限制酶 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ 识别序列及 切割位点 （1）只与一个五碳糖连接的磷酸基团称为游离的磷酸基团，一个质粒分子含有__________个游离的磷酸基团。图示质粒经限制酶Ⅰ完全酶切后产生的DNA片段共含有______________个游离的磷酸基团。 （2）限制酶Ⅲ能断开的是下图3中___________（填字母）处的键。若经限制酶Ⅰ切割的DNA末端与经限制酶Ⅱ切割的DNA末端连接，则连接部位的6个碱基对序列为___________。对于连接后的该部位，这两种酶_________（填“都能”“都不能”或“中只有一种能”）将其切开。 （3）若用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，则应选用限制酶__________共同切割，不选用另外两种限制酶的原因分别是________________________________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $