精品解析：四川南江县实验中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

南江县实验中学2025-2026学年度春学期半期考试 高二生物学题卷 说明：满分100分，考试时间75分钟 一、单选题（每题2分，共60分） 1. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　） ①灼烧接种环 ②冷却接种环，拔出试管棉塞 ③试管口通过火焰 ④接种环蘸取菌液 ⑤试管口通过火焰 ⑥接种环划线操作 ⑦接种环划线方法 ⑧平板正置培养 A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤ 2. 以下有关传统发酵食品的叙述，错误的是（ ） A. 腐乳是豆腐经过毛霉、曲霉等混合菌种发酵制作的食品 B. 制作泡菜时，要用煮沸后冷却的白开水浸没新鲜蔬菜 C. 果酒发酵瓶内留有1/3空间，可以促进酵母菌的繁殖 D. 醋酸菌将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气 3. 以下关于动物体细胞核移植技术与克隆动物的表述错误的是（　　） A. 重构胚具有发育成完整个体的能力 B. 激活重构胚常用的方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 C. 克隆动物的遗传物质全部来自供体细胞 D. 目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，克隆技术仍需改进 4. 我国在现代生物技术领域取得了多项世界瞩目的成就，下列成果由我国科学家主导研究的是（ ） A. 小鼠细胞单克隆抗体制备过程 B. 毛曼陀罗的花粉粒发育而来的胚 C. 农杆菌转化法培育转基因烟草 D. 体细胞克隆猴“中中”和“华华” 5. 在生产生活实践中人们经常需要用到消毒或杀菌的方法以避免微生物大量繁殖，下列关于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶适宜采用的消毒或杀菌方法依次是（ ） ①化学药物消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤湿热灭菌⑥巴氏消毒 A. ⑤③②④①⑥ B. ③⑤②①④⑥ C. ⑤③②①④⑥ D. ③⑤④②①⑥ 6. 下图是科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体小鼠的流程，下列叙述不正确的是（ ） A. 图中早期胚胎可用冲卵的方法从母鼠输卵管内获得 B. 过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的透明带 C. 过程②中可利用灭活的病毒诱导卵裂球细胞发生融合 D. 嵌合胚胎发育到囊胚期细胞开始出现分化 7. 如图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关时期。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程a表示卵裂，该时期细胞数量和体积不断增加 B. 过程b细胞逐渐分化，Ⅱ分为内胚层、中胚层和外胚层 C. 过程c表示孵化，孵化后发育形成Ⅲ时期表示原肠胚 D. 早期胚胎发育过程中滋养层细胞会发育成胎儿的各种组织 8. 下列关于对微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ） A. 用含酚红的培养基筛选出能分解尿素的菌株 B. 用不含碳源的培养基筛选出自养微生物 C. 利用高温培养条件筛选耐热的Taq细菌 D. 用高浓度NaCl的培养基筛选耐盐突变菌株 9. 下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的说法，正确的是（ ） A. 筛选尿素分解菌的培养基是在牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素配制而成的 B. 单菌落是指培养基上肉眼可见的一个细胞群，可能由一个或多个细胞繁殖而来 C. 可同时培养一个空白培养基，检验培养基灭菌是否合格 D. 若要鉴定分解尿素的细菌是否筛选成功，可加入甲基绿指示剂 10. 科研人员为了获得具有高效降低COD能力的菌株，先从某污水处理系统中分离出多种细菌，经图示流程获得目的菌。下列相关叙述正确的是（ ） 注：COD是衡量污水中有机污染物含量的重要指标 A. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需要在倒平板后进行灭菌操作 B. 有菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种时用到了接种环 C. 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是扩大化培养菌株 D. 锥形瓶中的污水和培养基都应采用湿热灭菌，而接种工具应采用干热灭菌 11. 发酵辣椒酱一般是利用附着在辣椒表面的微生物进行自然发酵而成的，味美可口，健胃消食，在贵州、湖南、湖北、四川、江西等地家庭广泛制作。湖南发酵辣椒酱工业化生产一般工艺流程为：原料→去蒂→入池腌制（按一层辣椒一层盐腌制，并不时用水泵将下层盐水抽出从表面淋下）→存放发酵（最好是满池存放，表面用膜覆盖密封）→出池清洗→磨酱→拌料调味→灌装→高温杀菌→成品。下列叙述错误的是（ ） A. 生产发酵辣椒酱利用了醋酸菌发酵产生醋酸 B. 去蒂完全与否会影响到最终辣酱的细腻程度 C. 用水泵将下层盐水抽出从表面淋下以利于腌制均匀 D. 传统生产辣椒酱无法满足工业化大规模生产和食品安全的需要 12. 人们在生活中常利用微生物发酵生产制作多种美味食品。下列相关叙述正确的是（ ） A. 酵母菌和乳酸菌能够在缺氧和呈酸性的发酵液中繁殖 B. 腐乳制作过程中加入料酒可抑制杂菌生长，而促进毛霉生长 C. 泡菜制作的中期乳酸菌通过无丝分裂快速繁殖 D. 泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响 13. 下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（　　） A. 是碳源的物质不可能同时是氮源 B. 微生物培养所需的培养基都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可 C. 牛肉膏蛋白胨培养基主要用于培养酵母菌 D. 微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落 14. 下列有关传统发酵技术的叙述，正确的是（ ） A. 在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，这样才可以洗得彻底 B. 果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在果酒发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳 C. 豆腐上布满毛霉菌丝后，需加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬 D. 制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，不需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖 15. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B. 菊花组织培养中，需要三种培养基，其营养成分中的碳源应该是有机碳源 C. 组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富 D. 愈伤组织是离体的植物器官、组织或细胞经过细胞增殖与分化形成的 16. 下图为动物细胞培养过程的示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 动物细胞培养过程中需要在培养液中添加一定量的抗生素以保证无毒环境 B. 进行动物细胞培养时要通入95%空气和5%CO2的混合气体刺激细胞呼吸 C. ①通常选用幼龄动物组织，其细胞分化程度低，增殖能力强，更易于培养 D. ③需要添加血清，④不需要添加血清 17. 利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ） A. 利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B. 植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C. 次生代谢物是植物所必需的，含量少，不能或难以通过化学合成途径得到 D. 紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种初生代谢物，不具有高抗癌活性 18. 酿酒过程中所用酿酒酵母菌种的性能是决定果酒品质的重要因素。如图表示从土壤中筛选酿酒酵母的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 步骤①应从表层土壤取样，并对样品进行高压蒸汽灭菌 B. 步骤②振荡培养20分钟的目的是增加酵母菌的数量 C. 步骤④接种方法为稀释涂布平板法，接种工具为接种环或涂布器 D. 若多个平板上菌落数的平均值为32，则10g土壤样品中所含酵母菌数量约为3.2×107 19. 下面有关微生物培养、分离、菌种保存等的叙述，错误的是（　　） A. 用滤膜法来测定饮用水中的大肠杆菌的数目，要求样品中的微生物数量很少 B. 检测同种水样中细菌的数量时，设置未接种培养基检验培养基是否被污染 C. 对于需要长期保存的菌种，可用甘油管藏法置于-4°C的冷冻箱中保存 D. 对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但菌种容易变异 20. 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，下列叙述正确的是（　　） 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 KHPO4 指示剂 琼脂 含量（g） 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A. 根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B. 蛋白胨可为目标微生物提供氮源 C. 根据用途划分，该培养基属于选择培养基 D. 该培养基的制备流程为灭菌→加入琼脂→倒平板 21. 我国许多传统美食制作都利用了传统发酵技术，下列叙述错误的是（ ） A. 传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 馒头制作过程中利用了酵母菌呼吸作用产生的CO2 C. 白酒酿造中后期需密封容器以保证酵母菌无氧呼吸 D. 酱油酿造过程中乳酸菌将蛋白质水解成肽和氨基酸 22. 现有科学小组利用屠宰场提取的奶牛瘤胃内容物，对其进行分离计数，过程如下图。相关叙述错误的是（ ） A. 将5g内容物加入45mL无菌水制成滤液，并继续进行系列浓度梯度稀释 B. 取不同浓度稀释液各0.1mL，用涂布平板法接种到培养基上，需在有氧条件下培养 C. 若在稀释倍数为105的三个培养基中，菌落数分别是151、164、180，则每克内容物中尿素分解菌的数目为1.65×108个 D. 在饲料中添加尿素后，奶牛小肠总蛋白质增加 23. 研究人员用无机盐、琼脂和石油配制培养基，从被石油污染的土壤中筛选石油降解菌。下列分析正确的是（　　） A. 该培养基属于鉴别培养基，能通过颜色变化区分目的菌 B. 石油降解菌因能分解石油而成为培养基中的优势菌群 C. 培养基中需额外添加葡萄糖以加速微生物生长 D. 未被污染的土壤中无法通过此培养基筛选出石油降解菌 24. 我国利用不同微生物发酵制作食品的历史悠久。下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作，说法正确的是（　　） A. 发酵过程中有机物的含量和种类都下降 B. 发酵过程都需在适宜温度下进行，腐乳制作温度最高 C. 泡菜坛内的白膜和变酸的果酒表面的菌膜所含菌种不同 D. 传统发酵利用的是天然存在的菌种，所生产的食品安全性更高 25. “当归补血汤”是出自《内外伤辨惑论》的中药配方，主要组成中药是当归和黄芪，具有一定的补气生血的功效。科研人员想利用现代生物技术将当归与黄芪进行体细胞杂交，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①需要用纤维素酶或胰蛋白酶获得原生质体 B. 过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例相同 C. 过程②结束后，原生质体融合代表植物体细胞杂交成功 D. 过程②可以用聚乙二醇或高Ca2+-高pH诱导融合 26. 泡菜，古称“菹”，《齐民要术》中较为系统地介绍了泡渍蔬菜的加工方法：“收菜时，即择取好者，菅蒲束之。作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内瓮中。若先用淡水洗者，菹烂。洗菜盐水，澄取清者，泻者瓮中，令没菜把即止，不复调和。”下列相关叙述正确的是（ ） A. 加入的盐水需要煮沸，目的是减少盐水中溶氧量和除去盐水中的部分杂菌 B. 制作泡菜过程中需将被腌制的材料做灭菌处理以防止杂菌的污染 C. 葡萄中的糖类物质为微生物发酵提供了碳源和氮源 D. 菹在发酵早期会出现一些气体，需要定期打开坛盖排气 27. CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6—5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列有关叙述错误的是（ ） 注：吞噬指数越大，代表吞噬能力越强。 A. 图示①步骤中多次用CD47处理小鼠，目的是使小鼠产生更多的抗CD47抗体和记忆细胞 B. 获得所需的杂交瘤细胞至少需要进行两次筛选，但两次筛选原理不同 C. 图示②步骤中可以利用PEG融合法促进细胞融合，体现了细胞膜的结构特点 D. 肿瘤细胞中存在CD47的受体基因 28. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列 说法正确的是（　　） 限制酶 BamH Ⅰ Hind Ⅲ EcoR Ⅰ Sma Ⅰ 识别序列及 切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶 B. 只有用同种限制酶切割DNA产生的黏性末端才能互补 C. 用图中质粒和外源基因DNA构建重组质粒，可使用SmaⅠ切割 D. 质粒一般具有一个或多个限制酶切割位点且能自我复制，常作为运载体 29. 益生菌是一类食用后能在肠道内发挥调节功能的活菌。市售的益生菌产品质量参差不齐，某益生菌品牌宣传其产品中活菌数不少于107个/g。研究小组尝试检测该品牌益生菌中的活菌含量是否与宣传一致，实验步骤为：制备培养基→调节pH→灭菌→倒平板→梯度稀释样品→接种→培养→计数。下列叙述错误的是（ ） A. 空白平板和接种后的平板培养时均需要倒置 B. 若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养 C. 培养箱中氧含量的变化会影响所培养的益生菌的繁殖和代谢 D. 对该品牌益生菌进行计数时，稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略大 30. 动物体细胞融合后染色体核型不稳定，来自某一方的染色体往往随机丢失一至多条，这种现象常应用于基因的定位。在甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象。不考虑基因互作和其他变异，下列叙述错误的是（ ） A. B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得 B. 在筛选杂交瘤细胞的选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均死亡 C. 与亲代杂交瘤细胞相比较，若减少某条染色体后分泌单克隆抗体的功能缺失，则该抗体的基因就位于这条染色体上 D. 利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞经克隆化培养后都具有持续产生甲流抗体的能力 二、综合题 31. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导多能干细胞（iPS细胞），继续利用iPS细胞培育出克隆鼠，流程如下图。请回答： （1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为_______。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的_______中进行培养。 （2）胚胎发育过程中，聚集在胚胎一端的细胞会形成内细胞团将来发育成胎儿的_______；囊胚______后，将发育成原肠胚。 （3）研究证实克隆鼠与黑鼠的遗传特性基本相同，但与灰鼠不同，原因是_______。 （4）若将病人的成纤维细胞诱导成iPS细胞，再使它转化为需要的细胞，用这些细胞给该病人治病，不会引起_______反应。 （5）体外培养细胞及胚胎时，培养基中除了添加必要的营养物质外，通常需要加入_______等天然成分。该培养过程中需要多次分瓶并更换培养基，作用是_______（答出2点即可）。 32. 若下图表示细胞工程操作中的某些过程，请回答下列问题：    I．同源四倍体的紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病；二倍体的百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。如果上图为我国科学家利用紫花苜蓿和百脉根为材料，培育抗鼓胀病的苜蓿新品种进行的实验流程图，请回答以下问题： （1）如果A、B分别是紫花苜蓿和百脉根的原生质体，那么①过程需要使用的酶是__________，图中②过程可使用__________（PEG）作为诱导剂，融合后得到的杂种细胞含有__________个染色体组（仅考虑两两融合情况）。 （2）C细胞再生出细胞壁后需要通过植物组织培养技术才能发育成杂种植株。若D为愈伤组织，③过程到④过程需要更换新的培养基，其主要原因是诱导形成愈伤组织和诱导分化形成试管苗所需的_______不同。 II．若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的部分步骤，请回答以下问题： （3）若B细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则A细胞表示__________细胞。②过程的常用方法与诱导植物原生质体融合相比，特有的诱导方法为_______诱导法。 （4）③过程为第一次筛选，只有__________细胞才能生长，然后经过④过程中的克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的E细胞，E细胞的特点_______。 33. 纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作美味食品。根据相关知识，回答下列问题： （1）以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示，请分析回答： ①图1中甲过程利用的微生物是_____，其细胞结构中_____（填“含有”或“不含有”）线粒体。甲过程发酵温度控制在18～25℃，经过10～12d，样液中是否含有酒精，可以用_____来检验，其原理是在_____条件下，该物质和酒精反应呈现_____色。乙过程发酵的最适温度范围是_____。 ②若利用图2所示装置制果醋，制作过程中进气口应_____，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是_____。 ③利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是_____。 （2）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由。_____。 34. Ⅰ．水是生命之源，生活用水的微生物安全性日常检测也是非常重要的。为了调查某河流的水质状况，某研究小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，做了如下实验。请回答下列问题： （1）在实验室中培养大肠杆菌所用的培养基一般用湿热灭菌法中的_____法灭菌。检测样品中大肠杆菌的含量时，需将样品用_____进行一系列的梯度稀释。 （2）某同学将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0.1mL稀释液。经适当培养后， 3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为_____。 （3）实验室中微生物的分离、纯化和培养试验结束后，为了防止病原微生物污染环境或感染科研工作者，应采取的防护措施有_____。（答出一点即可） Ⅱ．产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株。科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： （4）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是_________。 编号 ① ② ③ ④ 物品 培养基 接种环 培养皿 涂布器 灭菌方法 高压蒸汽 火焰灼烧 干热 臭氧 A. ① B. ② C. ③ D. ④ （5）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以_________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径较大的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。 （6）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株_________进行后续相关研究，理由是_________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 南江县实验中学2025-2026学年度春学期半期考试 高二生物学题卷 说明：满分100分，考试时间75分钟 一、单选题（每题2分，共60分） 1. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　） ①灼烧接种环 ②冷却接种环，拔出试管棉塞 ③试管口通过火焰 ④接种环蘸取菌液 ⑤试管口通过火焰 ⑥接种环划线操作 ⑦接种环划线方法 ⑧平板正置培养 A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤ 【答案】D 【解析】 【分析】微生物平板划线和培养的过程中要保证始终没有杂菌的污染，接种环、培养基、试管等都需要进行灭菌，实验操作过程应该在酒精灯火焰旁进行。 【详解】由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧中平板应倒置培养。①③④⑤正确。 故选D。 2. 以下有关传统发酵食品的叙述，错误的是（ ） A. 腐乳是豆腐经过毛霉、曲霉等混合菌种发酵制作的食品 B. 制作泡菜时，要用煮沸后冷却的白开水浸没新鲜蔬菜 C. 果酒发酵瓶内留有1/3空间，可以促进酵母菌的繁殖 D. 醋酸菌将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气 【答案】B 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、腐乳的制作需要毛霉、曲霉等混合菌种参与，A正确； B、制作泡菜时，要用煮沸后冷却的盐水浸没新鲜蔬菜，B错误； C、果酒发酵瓶内留有1/3空间，保证发酵初期有氧气供应，可以促进酵母菌的繁殖，C正确； D、醋酸菌是好氧菌，将果酒中的糖和乙醇转化为乙酸需要消耗氧气，D正确。 故选B。 3. 以下关于动物体细胞核移植技术与克隆动物的表述错误的是（　　） A. 重构胚具有发育成完整个体的能力 B. 激活重构胚常用的方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 C. 克隆动物的遗传物质全部来自供体细胞 D. 目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，克隆技术仍需改进 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因；克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。 【详解】A、重构胚可以发育成一个完整个体，A正确； B、使用电刺激、Ca2+载体等方法可以激活重构胚, 使其完成细胞分裂和发育过程，B正确； C、克隆动物的核遗传物质全部来自供体细胞，细胞质遗传物质来自供体细胞和去核卵母细胞，C错误； D、目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，如体型过大、异常肥胖等，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决，D正确。 故选C。 4. 我国在现代生物技术领域取得了多项世界瞩目的成就，下列成果由我国科学家主导研究的是（ ） A. 小鼠细胞单克隆抗体制备过程 B. 毛曼陀罗的花粉粒发育而来的胚 C. 农杆菌转化法培育转基因烟草 D. 体细胞克隆猴“中中”和“华华” 【答案】D 【解析】 【分析】2017年，我国科学家在体细胞克隆技术领域取得了重大突破，成功培育出全球首例体细胞克隆猴--“中中”和“华华”。这一成就不仅标志着我国在克隆技术领域的领先地位，也为生物医学研究开启了新的篇章。 【详解】A、1975年，德国学者Kohler和英国学者Milstein两位学者首次完成了小鼠细胞单克隆抗体制备过程，A不符合题意； B、1964年，印度科学家在培养毛曼陀罗的花药时，首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚，B不符合题意； C、1983年，美国科学家首次实现农杆菌转化法培育转基因烟草，C不符合题意； D、2017年，我国科学家应用体细胞克隆技术，成功培育得到克隆猴“中中”和“华华”，D符合题意。 故选D。 5. 在生产生活实践中人们经常需要用到消毒或杀菌的方法以避免微生物大量繁殖，下列关于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶适宜采用的消毒或杀菌方法依次是（ ） ①化学药物消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤湿热灭菌⑥巴氏消毒 A. ⑤③②④①⑥ B. ③⑤②①④⑥ C. ⑤③②①④⑥ D. ③⑤④②①⑥ 【答案】C 【解析】 【分析】1、实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。 2、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】培养基宜用湿热灭菌法灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌法灭菌；接种环可用灼烧灭菌法灭菌，以达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药物进行消毒，如用酒精擦拭双手；对于空气，可用紫外线消毒法；为了不破坏牛奶的营养成分，可采用巴氏消毒法对其进行消毒，C正确，ABD错误。 故选C。 6. 下图是科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体小鼠的流程，下列叙述不正确的是（ ） A. 图中早期胚胎可用冲卵的方法从母鼠输卵管内获得 B. 过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的透明带 C. 过程②中可利用灭活的病毒诱导卵裂球细胞发生融合 D. 嵌合胚胎发育到囊胚期细胞开始出现分化 【答案】C 【解析】 【分析】图中①表示获取早期胚胎中的卵裂球，②表示将两个早期胚胎重组，③表示胚胎移植。 【详解】A、图中早期胚胎可用冲卵的方法从母鼠输卵管内获得，A正确； B、过程①中要获得卵裂球，需要利用相关技术去除早期胚胎外的透明带，B正确； C、过程②中是将两个胚胎重组，而不是将卵裂球细胞融合，C错误； D、在囊胚期，嵌合胚胎细胞开始出现分化，D正确； 故选C。 7. 如图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关时期。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程a表示卵裂，该时期细胞数量和体积不断增加 B. 过程b细胞逐渐分化，Ⅱ分为内胚层、中胚层和外胚层 C. 过程c表示孵化，孵化后发育形成Ⅲ时期表示原肠胚 D. 早期胚胎发育过程中滋养层细胞会发育成胎儿的各种组织 【答案】C 【解析】 【分析】据图分析：I是桑葚胚，II是囊胚，III是原肠胚。 【详解】A、过程a表示卵裂，该时期细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不增加，细胞体积变小，A错误； B、过程b细胞逐渐分化，Ⅱ时期表示囊胚期，内胚层、中胚层和外胚层存在于原肠胚时期，B错误； C、据图可知，III是原肠胚，过程c表示孵化，孵化后发育形成III时期表示原肠胚，C正确； D、早期胚胎发育过程中滋养层细胞会发育成胎膜和胎盘，内细胞团发育成胎儿的各种组织，D错误。 故选C。 8. 下列关于对微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ） A. 用含酚红的培养基筛选出能分解尿素的菌株 B. 用不含碳源的培养基筛选出自养微生物 C. 利用高温培养条件筛选耐热的Taq细菌 D. 用高浓度NaCl的培养基筛选耐盐突变菌株 【答案】A 【解析】 【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。 【详解】A、尿素分解菌可以将尿素分解成氨，使酚红指示剂呈红色，应用以尿素为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的菌株，可以用含酚红的培养基进行鉴别，A错误； B、不含碳源的培养基能筛选出自养型的微生物，异养型的缺乏碳源不能存活，故可用不含碳源的培养基筛选出自养微生物，B正确； C、高温能抑制细菌生长，但耐热的Taq细菌可在高温中正常生长，因此可利用高温起到筛选作用，C正确； D、高浓度的NaCl抑制细菌生长，可能造成细菌脱水死亡，但耐盐突变菌株可在高浓度NaCl培养基中生长，故可用高浓度NaCl筛选耐盐突变菌株，D正确。 故选A。 9. 下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的说法，正确的是（ ） A. 筛选尿素分解菌的培养基是在牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素配制而成的 B. 单菌落是指培养基上肉眼可见的一个细胞群，可能由一个或多个细胞繁殖而来 C. 可同时培养一个空白培养基，检验培养基灭菌是否合格 D. 若要鉴定分解尿素的细菌是否筛选成功，可加入甲基绿指示剂 【答案】C 【解析】 【详解】A、筛选尿素分解菌的选择培养基需要以尿素为唯一氮源，牛肉膏蛋白胨培养基本身含有蛋白胨等氮源，无法起到筛选尿素分解菌的作用，A错误； B、单菌落是指由单个微生物细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，由多个细胞繁殖而来的细胞群不属于单菌落，B错误； C、同时培养空白培养基，若空白培养基上无菌落产生说明培养基灭菌合格，若有菌落产生说明培养基被杂菌污染、灭菌不合格，该操作可检验培养基灭菌是否合格，C正确； D、鉴定尿素分解菌需加入酚红指示剂，尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解为氨，使培养基pH升高，酚红指示剂变红，D错误。 10. 科研人员为了获得具有高效降低COD能力的菌株，先从某污水处理系统中分离出多种细菌，经图示流程获得目的菌。下列相关叙述正确的是（ ） 注：COD是衡量污水中有机污染物含量的重要指标 A. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需要在倒平板后进行灭菌操作 B. 有菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种时用到了接种环 C. 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是扩大化培养菌株 D. 锥形瓶中的污水和培养基都应采用湿热灭菌，而接种工具应采用干热灭菌 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。选择培养基根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。 【详解】A、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需要先进行灭菌操作，待培养基冷却到50℃左右时倒平板，A错误； B、有菌落分布情况可知，该方法是稀释涂布平板法，在该固体培养基上接种时用到了涂布器，B错误； C、图示固体培养基上可获得纯净培养物，液体培养基可用于扩大培养，C正确； D、接种工具应采用灼烧灭菌，D错误。 故选C。 11. 发酵辣椒酱一般是利用附着在辣椒表面的微生物进行自然发酵而成的，味美可口，健胃消食，在贵州、湖南、湖北、四川、江西等地家庭广泛制作。湖南发酵辣椒酱工业化生产一般工艺流程为：原料→去蒂→入池腌制（按一层辣椒一层盐腌制，并不时用水泵将下层盐水抽出从表面淋下）→存放发酵（最好是满池存放，表面用膜覆盖密封）→出池清洗→磨酱→拌料调味→灌装→高温杀菌→成品。下列叙述错误的是（ ） A. 生产发酵辣椒酱利用了醋酸菌发酵产生醋酸 B. 去蒂完全与否会影响到最终辣酱的细腻程度 C. 用水泵将下层盐水抽出从表面淋下以利于腌制均匀 D. 传统生产辣椒酱无法满足工业化大规模生产和食品安全的需要 【答案】A 【解析】 【分析】 乳酸菌是厌氧菌，在无氧情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于泡菜的腌制、乳制品的发酵。 【详解】A、存放发酵时需要用膜覆盖密封，说明生产发酵辣椒酱的菌种不是醋酸菌，而是厌氧的乳酸菌，A错误； B、若去蒂不完全，会影响到最终辣椒酱的细腻程度，B正确； C、用水泵将下层盐水抽出从表面淋下有利于腌制均匀，C正确； D、发酵辣椒酱的传统生产工艺主要是利用了天然乳酸菌发酵产生乳酸，再辅以低盐来保存产品，存在生产周期长，产品品质不稳定，亚硝酸盐等有害物质的含量超标等严重问题，无法满足工业化大规模生产和食品安全的需要，D正确。 故选A。 12. 人们在生活中常利用微生物发酵生产制作多种美味食品。下列相关叙述正确的是（ ） A. 酵母菌和乳酸菌能够在缺氧和呈酸性的发酵液中繁殖 B. 腐乳制作过程中加入料酒可抑制杂菌生长，而促进毛霉生长 C. 泡菜制作的中期乳酸菌通过无丝分裂快速繁殖 D. 泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响 【答案】A 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、酵母菌是兼性厌氧菌，乳酸菌是厌氧菌，酵母菌和乳酸菌能够在缺氧和呈酸性的发酵液中都能繁殖，A正确； B、实验中加入料酒抑制杂菌生长，毛霉生长也受到抑制，B错误； C、无丝分裂是真核细胞分裂方式之一，泡菜制作主要依赖乳酸菌发挥作用，乳酸菌是原核生物，不能进行无丝分裂，C错误； D、泡菜制作过程中，温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，故在泡菜的制作过程中温度、时间、食盐用量等都会影响亚硝酸盐的含量，D错误。 故选A。 13. 下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（　　） A. 是碳源的物质不可能同时是氮源 B. 微生物培养所需的培养基都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可 C. 牛肉膏蛋白胨培养基主要用于培养酵母菌 D. 微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落 【答案】D 【解析】 【分析】微生物的营养需求及培养基的组成及功能：培养基的组成成分包括碳源、氮源、水和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气。 【详解】A、是碳源的物质同时也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误； B、并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源，如自养的微生物不需要碳源、固氮微生物不需要氮源，B错误； C、牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的培养基，主要用于培养细菌、放线菌等，C错误； D、固体培养基可用于微生物的分离鉴定，微生物在固体培养基表面生长，可形成肉眼可见的菌落，D正确。 故选D。 14. 下列有关传统发酵技术的叙述，正确的是（ ） A. 在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，这样才可以洗得彻底 B. 果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在果酒发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳 C. 豆腐上布满毛霉菌丝后，需加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬 D. 制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，不需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖 【答案】C 【解析】 【分析】果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵，果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变成醋酸的代谢，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸发酵。 【详解】A、在果酒的制作过程中，应先进行冲洗，然后再去除葡萄的枝梗，且冲洗时不能反复冲洗，A错误； B、果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在果醋发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳，及果醋发酵时排出剩余的气体，B错误； C、豆腐上长了毛霉以后，需要加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬，C正确； D、制作泡菜时要选用火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的泡菜坛子，坛子需要加水密封目的是隔绝空气，为乳酸菌发酵提供无氧环境，D错误。 故选C。 15. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B. 菊花组织培养中，需要三种培养基，其营养成分中的碳源应该是有机碳源 C. 组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富 D. 愈伤组织是离体的植物器官、组织或细胞经过细胞增殖与分化形成的 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养技术： 1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。 2、原理：植物细胞的全能性。 3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒，先用70%酒精，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误； B、菊花组织培养中，共需配制三种培养基，分别是脱分化培养基、生芽培养基和生根培养基，这些培养基需要的碳源是蔗糖，是有机碳源，B正确； C、组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石比较松软，持水性也较好，有利于幼苗的生根和叶片的生长，C错误； D、乙是愈伤组织，愈伤组织的形成过程是脱分化，脱分化过程只进行细胞增殖不进行细胞分化，D错误。 故选B。 16. 下图为动物细胞培养过程的示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 动物细胞培养过程中需要在培养液中添加一定量的抗生素以保证无毒环境 B. 进行动物细胞培养时要通入95%空气和5%CO2的混合气体刺激细胞呼吸 C. ①通常选用幼龄动物组织，其细胞分化程度低，增殖能力强，更易于培养 D. ③需要添加血清，④不需要添加血清 【答案】C 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。 【详解】A、抗生素可抑制细菌细胞壁的形成，具有防止杂菌污染的作用，不能保证无毒环境，A错误； B、进行动物细胞培养时要通入95%空气和5%CO2的混合气体，O2是细胞代谢必需的，CO2维持培养液的PH，B错误； C、①通常选用幼龄动物组织，其细胞分化程度低，增殖能力强，更易于培养 ，C正确； D、④传代培养时培养液中仍需要添加血清等天然成分，D错误。 故选C。 17. 利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ） A. 利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B. 植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C. 次生代谢物是植物所必需的，含量少，不能或难以通过化学合成途径得到 D. 紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种初生代谢物，不具有高抗癌活性 【答案】A 【解析】 【分析】由于植物细胞的次生代谢物含量很低，从植物组织提取会大量破坏植物资源，有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到，因此人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、有些产物不能或难以通过化学合成途径得到，故可利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物，A正确； B、利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物，故可通过该技术进行植物细胞产物的工厂化生产，B错误； C、次生代谢不是植物生长所必需的，初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，C错误； D、紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，D错误。 故选A。 18. 酿酒过程中所用酿酒酵母菌种的性能是决定果酒品质的重要因素。如图表示从土壤中筛选酿酒酵母的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 步骤①应从表层土壤取样，并对样品进行高压蒸汽灭菌 B. 步骤②振荡培养20分钟的目的是增加酵母菌的数量 C. 步骤④接种方法为稀释涂布平板法，接种工具为接种环或涂布器 D. 若多个平板上菌落数的平均值为32，则10g土壤样品中所含酵母菌数量约为3.2×107 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图可知，①称量土样，里面含有需要分离的酿酒酵母，②③表示梯度稀释，④⑤表示分离纯化和筛选。 【详解】A、酿酒酵母为兼性厌氧微生物，繁殖需要氧气，故步骤①应从表层土壤取样，但是对土壤样品进行高压蒸汽灭菌会将其中的酿酒酵母杀死，将不能获得酿酒酵母的纯培养物，A错误； B、步骤②振荡培养20分钟的目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，B错误； C、步骤④接种方法为稀释涂布平板法，接种工具为涂布器，C错误； D、分析题图可知，该过程中菌液的稀释倍数为104，涂布时所用稀释液体积为0.1mL，若多个平板上菌落数的平均值为32，则1g土壤样品所含酵母菌数量约为32÷0.1×104=3.2×106，则10g土壤样品中所含酵母菌数量约为3.2×107，D正确。 故选D。 19. 下面有关微生物培养、分离、菌种保存等的叙述，错误的是（　　） A. 用滤膜法来测定饮用水中的大肠杆菌的数目，要求样品中的微生物数量很少 B. 检测同种水样中细菌的数量时，设置未接种培养基检验培养基是否被污染 C. 对于需要长期保存的菌种，可用甘油管藏法置于-4°C的冷冻箱中保存 D. 对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但菌种容易变异 【答案】C 【解析】 【分析】培养基的概念及营养构成 ： （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、滤膜法的基本原理是通过过滤水样，使水样中的细菌留在滤膜上，然后将滤膜转移到特定的培养基上培养，最后通过统计培养基上的菌落数目来计算原始水样中的大肠杆菌数量。为了确保计数的准确性，需要控制样品中的微生物数量，避免因微生物数量过多而导致计数误差或无法准确统计每个菌落的归属。故用滤膜法来测定饮用水中的大肠杆菌的数目时，要求样品中的微生物数量很少，A正确； B、检测同种水样中细菌的数量时，设置未接种的空白培养基的目的是检验培养基制备是否被污染，B正确； C、对于需要长期保存的菌种，应采用甘油管藏法，并将其置于-20°C的冷冻箱中保存，C错误； D、对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，该方法保存的菌种易被污染或产生变异，不适宜长期保存 ，D正确。 故选C。 20. 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，下列叙述正确的是（　　） 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 KHPO4 指示剂 琼脂 含量（g） 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A. 根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B. 蛋白胨可为目标微生物提供氮源 C. 根据用途划分，该培养基属于选择培养基 D. 该培养基的制备流程为灭菌→加入琼脂→倒平板 【答案】B 【解析】 【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基;鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。 【详解】A、从配方上看，该培养基有琼脂，因此为固体培养基，A错误； B、蛋白胨（含有蛋白质成分等）可为目标微生物主要提供氮源，B正确； C、根据表格可知，该培养基含有指示剂，属于鉴别培养基，C错误； D、该培养基的制备流程为加入琼脂→灭菌→倒平板，D错误。 故选B。 21. 我国许多传统美食制作都利用了传统发酵技术，下列叙述错误的是（ ） A. 传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 馒头制作过程中利用了酵母菌呼吸作用产生的CO2 C. 白酒酿造中后期需密封容器以保证酵母菌无氧呼吸 D. 酱油酿造过程中乳酸菌将蛋白质水解成肽和氨基酸 【答案】D 【解析】 【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸；脂肪酶将脂肪分解为甘油和脂肪酸。 【详解】A、传统发酵技术中利用的微生物一般为天然菌种，大多都含有多种菌种，因此传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，A正确； B、发面作馒头，馒头松软好吃，是利用了酵母菌进行作用呼吸产生的二氧化碳，B正确； C、酿酒即要利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，需要在无氧条件下进行，故该过程需要密封以制造无氧环境,以保证酵母菌的无氧呼吸，C正确； D、酱油酿造过程中是乳酸菌发酵产生蛋白质水解酶，使原料中部分蛋白质水解成肽和氨基酸，D错误。 故选D。 22. 现有科学小组利用屠宰场提取的奶牛瘤胃内容物，对其进行分离计数，过程如下图。相关叙述错误的是（ ） A. 将5g内容物加入45mL无菌水制成滤液，并继续进行系列浓度梯度稀释 B. 取不同浓度稀释液各0.1mL，用涂布平板法接种到培养基上，需在有氧条件下培养 C. 若在稀释倍数为105的三个培养基中，菌落数分别是151、164、180，则每克内容物中尿素分解菌的数目为1.65×108个 D. 在饲料中添加尿素后，奶牛小肠总蛋白质增加 【答案】B 【解析】 【分析】瘤胃中高度缺氧，所以生活在其中的微生物主要是异养厌氧型的微生物。筛选尿素分解菌分解菌需要以尿素为唯一碳源的选择培养基；微生物接种的方法常用的有平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法先进行一系列的梯度稀释，再将一定体积稀释液涂布在平板上；稀释涂布平板法可用于微生物的计数。 【详解】A、将5g内容物加入45ml无菌水制成滤液，这样可以将内容物稀释10倍，并继续进行系列浓度梯度稀释，A正确； B、由于瘤胃中的尿素分解菌为厌氧型，因此需要在无氧条件下培养，B错误； C、若在稀释倍数为105的三个培养基中，菌落数分别是151、164、180，则每克内容物中尿素分解菌的数目为[（151+164+180）/3]÷0.1×105=1.65×108个，C正确； D、在饲料中添加尿素后，增加了瘤胃中微生物的氮源，被其中的微生物利用合成微生物蛋白质，故奶牛小肠总蛋白质增加，D正确。 故选B。 23. 研究人员用无机盐、琼脂和石油配制培养基，从被石油污染的土壤中筛选石油降解菌。下列分析正确的是（　　） A. 该培养基属于鉴别培养基，能通过颜色变化区分目的菌 B. 石油降解菌因能分解石油而成为培养基中的优势菌群 C. 培养基中需额外添加葡萄糖以加速微生物生长 D. 未被污染的土壤中无法通过此培养基筛选出石油降解菌 【答案】B 【解析】 【详解】A、该培养基以石油为唯一碳源，属于选择培养基，而非通过颜色变化鉴别的培养基，A错误； B、石油降解菌能利用石油作为碳源生长繁殖，因此在选择培养基中成为优势菌群，B正确； C、若添加葡萄糖，其他微生物可能优先利用葡萄糖生长，干扰石油降解菌的筛选，C错误； D、未被污染的土壤中可能含有少量天然石油降解菌，仍可通过此培养基筛选，D错误。 故选B。 24. 我国利用不同微生物发酵制作食品的历史悠久。下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作，说法正确的是（　　） A. 发酵过程中有机物的含量和种类都下降 B. 发酵过程都需在适宜温度下进行，腐乳制作温度最高 C. 泡菜坛内的白膜和变酸的果酒表面的菌膜所含菌种不同 D. 传统发酵利用的是天然存在的菌种，所生产的食品安全性更高 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。 2、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 3、果醋制作过程中的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，在氧气、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成醋酸，糖原不足时可以将乙醇转化成乙醛再转化成醋酸，最适宜醋酸菌生长繁殖的温度是30～35℃。 【详解】A、发酵过程中有机物的种类增多，A错误； B、发酵过程都需在适宜温度下进行，果醋制作温度最高，B错误； C、泡菜坛内的白色菌膜是酵母菌繁殖所致，果酒表面的菌膜是醋酸菌繁殖所致，C正确； D、传统发酵利用的是天然存在的菌种，所生产的食品安全性不高，D错误。 故选C。 25. “当归补血汤”是出自《内外伤辨惑论》的中药配方，主要组成中药是当归和黄芪，具有一定的补气生血的功效。科研人员想利用现代生物技术将当归与黄芪进行体细胞杂交，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①需要用纤维素酶或胰蛋白酶获得原生质体 B. 过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例相同 C. 过程②结束后，原生质体融合代表植物体细胞杂交成功 D. 过程②可以用聚乙二醇或高Ca2+-高pH诱导融合 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 2、植物体细胞杂交过程分析：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成； （3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 3、分析题图可知，①表示获取原生质体，②表示诱导原生质体融合，③表示获得杂种细胞，④表示去分化过程，⑤表示再分化获得杂种植物。 【详解】A、过程①需要用纤维素酶和果胶酶获得原生质体，A错误； B、过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例不相同，B错误； C、过程②结束后，细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成，即新的细胞壁生成代表植物体细胞杂交成功，C错误； D、过程②表示人工诱导原生质体融合，方法可以分为两大类—物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等，D正确。 故选D。 26. 泡菜，古称“菹”，《齐民要术》中较为系统地介绍了泡渍蔬菜的加工方法：“收菜时，即择取好者，菅蒲束之。作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内瓮中。若先用淡水洗者，菹烂。洗菜盐水，澄取清者，泻者瓮中，令没菜把即止，不复调和。”下列相关叙述正确的是（ ） A. 加入的盐水需要煮沸，目的是减少盐水中溶氧量和除去盐水中的部分杂菌 B. 制作泡菜过程中需将被腌制的材料做灭菌处理以防止杂菌的污染 C. 葡萄中的糖类物质为微生物发酵提供了碳源和氮源 D. 菹在发酵早期会出现一些气体，需要定期打开坛盖排气 【答案】A 【解析】 【分析】乳酸菌属于厌氧菌。无氧呼吸的场所是细胞质基质，乳酸菌无氧呼吸产物为乳酸。 【详解】A、盐水煮沸的目的一是排出氧气，降低溶氧量；二是除去盐水中部分杂菌，A正确； B、在泡菜制作过程中，菌种主要来源于附着在蔬菜表面的野生乳酸菌，不需要对被腌制的材料做灭菌处理，B错误； C、葡萄中的糖类物质为微生物发酵提供了碳源，不能提供氮源，C错误； D、泡菜在发酵时，需要提供无氧环境，不能打开坛盖排气，D错误。 故选A。 27. CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6—5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列有关叙述错误的是（ ） 注：吞噬指数越大，代表吞噬能力越强。 A. 图示①步骤中多次用CD47处理小鼠，目的是使小鼠产生更多的抗CD47抗体和记忆细胞 B. 获得所需的杂交瘤细胞至少需要进行两次筛选，但两次筛选原理不同 C. 图示②步骤中可以利用PEG融合法促进细胞融合，体现了细胞膜的结构特点 D. 肿瘤细胞中存在CD47的受体基因 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【详解】A、图示①步骤中需反复用CD47处理小鼠，使小鼠体内产生更多的能分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞，A错误； B、图示③步骤中需要对杂交瘤细胞进行两次筛选，第一次筛选可以选择出杂交瘤细胞，第二次筛选应用了抗原抗体特异性结原理，选择可以分泌抗CD47抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、图示②步骤中可以利用PEG融合法促进细胞融合，体现了细胞膜的流动性，C正确； D、CD47受体基因在每个细胞中都存在，在吞噬细胞中特异性表达，D正确。 故选A。 28. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列 说法正确的是（　　） 限制酶 BamH Ⅰ Hind Ⅲ EcoR Ⅰ Sma Ⅰ 识别序列及 切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶 B. 只有用同种限制酶切割DNA产生的黏性末端才能互补 C. 用图中质粒和外源基因DNA构建重组质粒，可使用SmaⅠ切割 D. 质粒一般具有一个或多个限制酶切割位点且能自我复制，常作为运载体 【答案】D 【解析】 【分析】限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，自然界中限制酶的天然作用是破环外来基因，限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。 【详解】A、重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶，前者可以切割目的基因所在DNA和质粒，后者可以将目的基因和质粒进行连接，A错误； B、某些不同的限制酶切割DNA能够产生相同的黏性末端，这些黏性末端可以互补，B错误； C、由于目的基因内部和抗生素抗性基因内部都含有SmaI的切割位点，故不能使用SmaI切割目的基因和外源基因DNA，C错误； D、质粒一般具有一个或多个限制酶切割位点，供目的基因的插入，且质粒能自我复制，保证目的基因能在受体细胞稳定存在，故常作为运载体，D正确。 故选D。 29. 益生菌是一类食用后能在肠道内发挥调节功能的活菌。市售的益生菌产品质量参差不齐，某益生菌品牌宣传其产品中活菌数不少于107个/g。研究小组尝试检测该品牌益生菌中的活菌含量是否与宣传一致，实验步骤为：制备培养基→调节pH→灭菌→倒平板→梯度稀释样品→接种→培养→计数。下列叙述错误的是（ ） A. 空白平板和接种后的平板培养时均需要倒置 B. 若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养 C. 培养箱中氧含量的变化会影响所培养的益生菌的繁殖和代谢 D. 对该品牌益生菌进行计数时，稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略大 【答案】D 【解析】 【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。由于两个或多个细胞连在一起，观察到的只是一个菌落，因此其统计的数值往往比实际数目偏低。 【详解】A、空白平板和接种后的平板均需要倒置，防止冷凝水对培养基造成污染，A正确； B、若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养，如果出现了菌落，则说明培养基制作不合格，被污染，B正确； C、益生菌主要在肠道内发挥调节功能，所以其代谢类型是厌氧型，因此培养箱中氧含量的变化会影响所培养的益生菌的繁殖和代谢，C正确； D、由于两个或多个细菌可能会形成一个菌落，所以稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略小，D错误。 故选D。 30. 动物体细胞融合后染色体核型不稳定，来自某一方的染色体往往随机丢失一至多条，这种现象常应用于基因的定位。在甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象。不考虑基因互作和其他变异，下列叙述错误的是（ ） A. B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得 B. 在筛选杂交瘤细胞的选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均死亡 C. 与亲代杂交瘤细胞相比较，若减少某条染色体后分泌单克隆抗体的功能缺失，则该抗体的基因就位于这条染色体上 D. 利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞经克隆化培养后都具有持续产生甲流抗体的能力 【答案】D 【解析】 【详解】A、多次间歇注射甲型流感疫苗可刺激动物发生特异性免疫反应，诱导产生能分泌抗甲流抗体的B淋巴细胞，该类细胞可从免疫动物的脾脏中筛选获得，A正确； B、选择培养基的作用是筛选杂交瘤细胞，未融合的B淋巴细胞高度分化，无无限增殖能力，无法在培养基中长期存活；未融合的骨髓瘤细胞存在核苷酸合成途径缺陷，无法在选择培养基上完成核酸合成从而死亡，因此两类细胞均无法在选择培养基上存活，B正确； C、杂交瘤细胞编码抗体的基因来自B淋巴细胞，若丢失某条来自B淋巴细胞的染色体后，细胞分泌抗体的功能缺失，在不考虑基因互作和其他变异的前提下，可判断控制该抗体合成的基因位于这条丢失的染色体上，C正确； D、题干明确说明杂交瘤细胞克隆化培养过程中会随机丢失来自B淋巴细胞的染色体，若丢失携带甲流抗体基因的染色体，细胞就会失去合成甲流抗体的能力，因此并非所有克隆化培养获得的杂交瘤细胞都能持续产生甲流抗体，D错误。 二、综合题 31. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导多能干细胞（iPS细胞），继续利用iPS细胞培育出克隆鼠，流程如下图。请回答： （1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为_______。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的_______中进行培养。 （2）胚胎发育过程中，聚集在胚胎一端的细胞会形成内细胞团将来发育成胎儿的_______；囊胚______后，将发育成原肠胚。 （3）研究证实克隆鼠与黑鼠的遗传特性基本相同，但与灰鼠不同，原因是_______。 （4）若将病人的成纤维细胞诱导成iPS细胞，再使它转化为需要的细胞，用这些细胞给该病人治病，不会引起_______反应。 （5）体外培养细胞及胚胎时，培养基中除了添加必要的营养物质外，通常需要加入_______等天然成分。该培养过程中需要多次分瓶并更换培养基，作用是_______（答出2点即可）。 【答案】（1） ①. 原代培养 ②. CO2培养箱 （2） ①. 各种组织 ②. 孵化 （3）重组囊胚中来自灰鼠囊胚的内细胞团经特殊处理后不发育，诱导黑鼠体细胞获得的iPS细胞却能继续发育成克隆鼠 （4）免疫排斥 （5） ①. 血清 ②. 防止接触抑制现象的存在而细胞停止生长；清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 【解析】 【分析】动物细胞培养过程取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为贴壁生长。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞组织培养。试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【小问1详解】 原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞组织培养，因此从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为原代培养，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为接触抑制，此后需要对细胞进行处理获得单细胞悬液后进出传代培养。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 【小问2详解】 胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养。囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来,这一过程叫孵化，囊胚孵化后，将发育成原肠胚。 【小问3详解】 重组囊胚中来自灰鼠囊胚的内细胞团经特殊处理后不发育，诱导黑鼠体细胞获得的iPS细胞却能继续发育成克隆鼠，所以克隆鼠与黑鼠的遗传特性基本相同，但与灰鼠不同。 【小问4详解】 若将病人的成纤维细胞诱导成iPS细胞，再使它转化为需要的细胞，由于在诱导转化的过程中细胞的遗传物质没有发生变化，理论上产生的还是“自体”细胞，所以不会引起免疫排斥反应。 【小问5详解】 为了提高动物细胞培养的成功率，通常需要加入血清等天然成分；多次分瓶并更换培养基，可以防止接触抑制现象的存在而细胞停止生长；清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。 32. 若下图表示细胞工程操作中的某些过程，请回答下列问题：    I．同源四倍体的紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病；二倍体的百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。如果上图为我国科学家利用紫花苜蓿和百脉根为材料，培育抗鼓胀病的苜蓿新品种进行的实验流程图，请回答以下问题： （1）如果A、B分别是紫花苜蓿和百脉根的原生质体，那么①过程需要使用的酶是__________，图中②过程可使用__________（PEG）作为诱导剂，融合后得到的杂种细胞含有__________个染色体组（仅考虑两两融合情况）。 （2）C细胞再生出细胞壁后需要通过植物组织培养技术才能发育成杂种植株。若D为愈伤组织，③过程到④过程需要更换新的培养基，其主要原因是诱导形成愈伤组织和诱导分化形成试管苗所需的_______不同。 II．若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的部分步骤，请回答以下问题： （3）若B细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则A细胞表示__________细胞。②过程的常用方法与诱导植物原生质体融合相比，特有的诱导方法为_______诱导法。 （4）③过程为第一次筛选，只有__________细胞才能生长，然后经过④过程中的克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的E细胞，E细胞的特点_______。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 聚乙二醇 ③. 6 （2）生长素和细胞分裂素的比例和浓度 （3） ①. B（淋巴） ②. 灭活病毒 （4） ①. 杂交瘤 ②. 既能迅速大量增殖，又能产生所需（抗丙肝病毒）抗体 【解析】 【小问1详解】 过程①是原生质体的获取过程，需要使用的酶是纤维素酶和果胶酶。过程②为原生质体的融合，可使用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。紫花苜蓿是四倍体，百脉根为二倍体，融合后得到的杂种细胞含有六个染色体组（仅考虑两两融合情况）。 【小问2详解】 C细胞再生出细胞壁后需要通过植物组织培养技术才能发育成杂种植株。若D为愈伤组织，③过程到④过程需要更换新的培养基，其原因是诱导形成愈伤组织（③过程）和诱导分化形成试管苗（④过程）所需的生长素和细胞分裂素的比例和浓度不同。 【小问3详解】 本图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的部分步骤，若B细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则A细胞表示B淋巴细胞。②过程的常用方法与诱导植物原生质体融合相比，特有的诱导方法为灭活病毒诱导法。 【小问4详解】 单克隆抗体的制备至少需要两次筛选，③过程为第一次筛选，只有（融合的）杂交瘤细胞D才能生长，D细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生抗体。④过程为第二次筛选（多次筛选），需要对D细胞进行克隆化培养和抗体检测，才能筛选得到符合要求的E细胞，E细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生所需（抗丙肝病毒）抗体。 33. 纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作美味食品。根据相关知识，回答下列问题： （1）以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示，请分析回答： ①图1中甲过程利用的微生物是_____，其细胞结构中_____（填“含有”或“不含有”）线粒体。甲过程发酵温度控制在18～25℃，经过10～12d，样液中是否含有酒精，可以用_____来检验，其原理是在_____条件下，该物质和酒精反应呈现_____色。乙过程发酵的最适温度范围是_____。 ②若利用图2所示装置制果醋，制作过程中进气口应_____，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是_____。 ③利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是_____。 （2）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由。_____。 【答案】 ①. 酵母菌 ②. 含有 ③. 重铬酸钾 ④. 酸性 ⑤. 灰绿 ⑥. 30～35℃ ⑦. 打开 ⑧. 避免空气中其他微生物进入发酵装置（或防止空气中的微生物污染） ⑨. ⑩. 支持A的观点，乳酸菌代谢过程中不产生气体 【解析】 【分析】果酒和果醋发酵过程采用的菌种不同，果酒发酵利用的酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型，因此发酵过程中，要先通气，让酵母菌大量繁殖，后期创造无氧环境，进行产酒精的无氧呼吸；而果醋发酵利用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧型细菌，进行果醋发酵时要注意通气。 【详解】（1）①甲是果酒发酵过程，参与果酒制作的微生物是酵母菌，酵母菌为真核生物，含有线粒体，甲过程发酵温度控制在18～25℃，经过10～12d，可产生酒精，可以用重铬酸钾来检验，其原理是橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。乙过程为醋酸发酵，其最适温度范围是30～35℃。 ②参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作过程中充气口应打开，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，防止空气中的微生物污染。 ③当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是 （2）乳酸菌为严格的厌氧型微生物，其无氧呼吸的产物为乳酸，没有气体产生，支持A的观点，应该是其他杂菌污染导致的。 【点睛】本题重点考查果酒和果醋的制作原理以及发酵过程的注意事项，要求考生能够辨析果酒和果醋的发酵两大过程，重点培养考生的理解与表达能力。 34. Ⅰ．水是生命之源，生活用水的微生物安全性日常检测也是非常重要的。为了调查某河流的水质状况，某研究小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，做了如下实验。请回答下列问题： （1）在实验室中培养大肠杆菌所用的培养基一般用湿热灭菌法中的_____法灭菌。检测样品中大肠杆菌的含量时，需将样品用_____进行一系列的梯度稀释。 （2）某同学将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0.1mL稀释液。经适当培养后， 3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为_____。 （3）实验室中微生物的分离、纯化和培养试验结束后，为了防止病原微生物污染环境或感染科研工作者，应采取的防护措施有_____。（答出一点即可） Ⅱ．产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株。科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： （4）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是_________。 编号 ① ② ③ ④ 物品 培养基 接种环 培养皿 涂布器 灭菌方法 高压蒸汽 火焰灼烧 干热 臭氧 A. ① B. ② C. ③ D. ④ （5）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以_________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径较大的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。 （6）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株_________进行后续相关研究，理由是_________。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 无菌水 （2）3.8×107 （3）①对操作台，实验用品进行清洁，无菌处理；②对丢弃物进行无菌处理；③对防护服进行无菌处理；④用肥皂洗手后再用清水冲洗 （4）D （5）脂肪##油脂 （6） ①. B ②. 菌株B增殖速度快，单细胞蛋白的产量也高，同时降解脂肪的能力强，净化效果更好 【解析】 【小问1详解】 在实验室中培养大肠杆菌所用的培养基一般用湿热灭菌法中的高压蒸汽灭菌法灭菌。检测样品中大肠杆菌的含量时，需将样品用无菌水进行一系列的梯度稀释。 【小问2详解】 3个平板上的菌落数分别为39、38和37，平均数为38个，说明1ml稀释液细菌数量为380个，菌液进行了100倍的稀释，因此每升水样中的活菌数为380×100×1000=3.8×107。 【小问3详解】 实验室中微生物的分离、纯化和培养试验结束后，为了防止病原微生物污染环境或感染科研工作者，应采取的防护措施有①对操作台，实验用品进行清洁，无菌处理；②对丢弃物进行无菌处理；③对防护服进行无菌处理；④用肥皂洗手后再用清水冲洗。 【小问4详解】 涂布器一般用干热灭菌或灼烧灭菌法进行灭菌，④错误。 【小问5详解】 为了进一步提高酵母菌产酶能力，可对分离得到的产脂肪酶酵母菌菌株进行射线辐射，为了能筛选出符合要求的产脂肪酶酵母菌突变株，将辐射处理的酵母菌涂布在以脂肪为唯一碳源的固体培养基上，形成单菌落。产脂肪酶能力越强的酵母菌，分解利用脂肪的能力越强，菌落生长越好，一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选取直径较大的菌落即可。 【小问6详解】 据题图分析可知，相同时间内，菌株B的细胞密度高于菌株A，而菌株B的脂肪剩余量低于菌株A的脂肪剩余量，故进行相关研究可选择菌株B，原因是菌株B增殖速度快，单细胞蛋白的产量也高，同时降解脂肪的能力强，净化效果更好。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $