内容正文:
1.【答案】B
2.【答案】C
3.【答案】C
4.【答案】B
5.【答案】D
6.【答案】A
7.【答案】D
8.【答案】C
9.【答案】C
10.【答案】A
11.【答案】C
12.【答案】A
13.【答案】C
14.【答案】B
15.【答案】D
16.【答案】
(1)高压蒸汽灭菌 将已灭菌未接种的培养基放在恒温培养箱中培养,检验是否有菌落产生
(2)以敌敌畏为唯一碳源 敌敌畏的剩余量
(3) 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活
菌,通过统计菌落数即可推算活菌数
17.【答案】
(1)消毒 茎尖病毒极少,甚至无病毒
(2)脱分化 合成叶绿素
(3)生长素和细胞分裂素比例不同
(4)培养细胞一直处于不断增殖的状态,容易受到培养条件和诱变因素的影响而发生基因突变
18.【答案】
(1)①免疫前小鼠 ②细胞融合 ③克隆化培养和抗体检测 ④小鼠腹腔
(2)①不同 ②棕色的深浅与样品中PTH含量呈正相关
(3)PTH的1-6氨基酸组成的多肽
19.【答案】
(1)卡那霉素和四环素 白
(2)C A
(3)B 将同一菌落的大肠杆菌分别用含卡那霉素和四环素培养基进行培养,两者均不生长则为筛出的大肠杆菌
20.【答案】
(1)基因数据库/序列数据库 使DNA聚合酶(Taq酶)能够从引物的端开始连接脱氧核苷酸(或定位目的基因的扩增区域,提供DNA复制的起始位点)
(2)Gata3 Gata3 终止密码子
(3)1、5 不能 杂合子还是纯合子都含有Gata3-GFP融合基因,用引物1和3扩增均能获PCR产物
(4)无需提取组织或细胞,可在活体状态下实时观察;能在细胞、组织甚至个体水平上动态监测蛋白表达与定位;对细胞或个体无损伤等
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高二生物试卷
(分值:100时间:75分钟)
一、选择题:本题共15小题,每小题3分,共45分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。
1.中国传统白酒多以泥窖为发酵基础,素有“千年老窖万年糟”“以窖养糟,以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列叙述错误的是
A.从谷物原料发酵形成的酒糟中,可分离出产淀粉酶的微生物
B.从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时,需在CO2或N2环境中进行
C.传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的
D.窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系,使酿造过程不易污染杂菌
2.当某单一营养缺陷型菌株所需的营养大类确定后,就要确定其生长所需的特殊营养物质。首先对特殊营养物质进行编组,如表是对15种特殊营养物质进行的编组,编组完成后,将含有组合特殊营养物质的滤纸片放在涂有试验菌甲、乙、丙的培养基上,培养并观察其生长情况,三种试验菌的生长谱如图所示。据图分析,下列叙述错误的是
组别
组合特殊营养物质
A
1
2
3
4
5
B
2
6
7
8
9
C
3
7
10
11
12
D
4
8
11
13
14
E
5
9
12
14
15
A.实验中所用的培养基为不含特殊营养物质的基本培养基
B.试验菌甲、乙自身不能合成特殊营养物质分别是13、2
C.若单缺的特殊营养物质为10或11,则在培养基上均会出现两个生长圈
D.试验菌丙的生长谱结果可能是所加的营养物质浓度过高,产生了抑菌圈
3.利用发酵工程生产蓝莓酒需经过“清洗破碎→酶解→过滤→调整成分→接种→主发酵→倒灌过滤→后发酵→消毒→终止”等主要环节。下列叙述正确的是
A.酶解环节需要添加胰蛋白酶和纤维素酶并控制酶解温度
B.在蓝莓酒发酵旺盛时,醋酸菌能将果汁中的糖发酵为醋酸
C.若发酵装置中初始糖浓度过高,所制得的蓝莓酒酒精浓度反而偏低
D.后发酵时需搅拌处理,以便菌种充分接触营养物质并增加溶解氧的含量
4.图示普通韭菜(2n=16)的花药结构。为了快速获得普通韭菜的纯系,科研人员利用其花药进行单倍体育种。下列相关叙述正确的是
A.花药壁细胞比花粉细胞分化程度低,更容易表现细胞的全能性
B.显微镜观察根尖分生区细胞的染色体,可以鉴定出单倍体幼苗
C.培养基中含植物激素和多种无机盐,还需添加葡萄糖等能源物质
D.秋水仙素处理单倍体幼苗,所得植株的细胞中染色体数都是16
5.图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是
A.步骤①添加盐酸以去除细胞壁
B.步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗
C.台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养
D.原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间
6.从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养,探究高温对卵母细胞成熟的影响,结果如图所示。下列相关叙述正确的是
A.应选取发育状态一致的卵母细胞进行培养
B.体外培养卵母细胞时需加入灭菌后的血清
C.对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞
D.体外培养时高温提高了卵母细胞发育的成熟率
7.下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是
A.通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
B.哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质
C.母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础
D.将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于无性生殖
8.抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如图所示。下列相关叙述正确的是
A.ADC中的抗体主要是发挥治疗效应,直接杀伤靶细胞
B.ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的选择透过性
C.制备ADC中的抗体应用了动物细胞融合和动物细胞培养等技术
D.ADC中的细胞毒素也能识别并杀伤正常细胞,因此ADC具有副作用
9.研究人员利用基因编辑技术,对小鼠卵母细胞的7个甲基化印记控制区域进行DNA甲基化重写,并将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞中,成功创造了孤雌生殖的小鼠。下列叙述错误的是
A.上述甲基化重写没有改变小鼠体内的遗传信息
B.体外培养卵母细胞,为防止污染可以在培养基中加入抗生素
C.移植后的囊胚进一步扩大会导致滋养层破裂,胚胎从其中伸展出来
D.孤雌小鼠的诞生过程没有精子参与,但其基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同
10.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.研磨液离心后弃上清液,取沉淀加入预冷95%的酒精静置
C.提取DNA时,可用猪血替代鸡血细胞
D.提取到的白色丝状物是DNA纯净物
11.以下是限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述错误的是
① ②
A.T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端
C.①②两个黏性末端可以用DNA连接酶连接
D.限制酶通过水解磷酸二酯键对DNA进行切割
12.质粒P含有2个EcoRⅠ、1个SacⅠ和1个BamHⅠ的限制酶切割位点。已知BamHⅠ位点位于2个EcoRⅠ位点的正中间,用上述3种酶切割该质粒,酶切产物的凝胶电泳结果如图,其中泳道①条带是未酶切的质粒P,泳道②③④条带为3种单酶切产物,泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是
A.泳道⑤条带是SacⅠ和EcoRⅠ的双酶切产物
B.DNA分子在该凝胶的迁移方向是从电源正极到负极
C.可确认泳道②③条带分别是SacⅠ和EcoRⅠ的单酶切产物
D.泳道①②说明未酶切质粒的碱基数小于酶切后质粒的碱基数
13.为了获得抗白叶枯病的水稻品种,研究人员构建了含有抗病基因D的重组Ti质粒(如图),通过农杆菌转化法将D基因导入水稻种子诱导的愈伤组织,最终获得抗病植株。下列叙述正确的是
A.水稻愈伤组织细胞中RNA聚合酶无法识别U6启动子
B.愈伤组织再分化获得的含有D基因的幼苗属于抗病植株
C.农杆菌侵染愈伤组织后所用的筛选培养基中需加入潮霉素
D.在含重组Ti质粒的农杆菌中U6启动子能驱动卡那霉素抗性基因表达
14.从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前科研人员想在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是
A.合成编码目的肽的目的基因序列
B.依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽
C.构建含目的肽DNA片段的表达载体
D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
15.生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是
A.开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提
B.我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度
C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿
D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
二、非选择题:本题共5小题,共55分。
16.(10分)微生物驯化是指在微生物培养过程中,逐步加入某种物质,让其逐渐适应,从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选出能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物,并设计了如下实验流程。回答下列问题:
(1)该实验所用培养基需进行____________(灭菌方法),为检测培养基灭菌是否彻底,应采用的检测方法是____________。
(2)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于____________的选择培养基C,培养24小时后,通过测定培养基中____________,可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物。
(3)为统计培养基C中的微生物数量,在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D,统计菌落数分别为253、247、253,每个平板涂布的菌液Y为0.1 mL,由此,培养基C中活菌数为____________个/mL,该方法测定微生物数量的原理是____________。
17.(10分)兰州百合栽培过程中易受病毒侵染,造成品质退化。某研究小组尝试通过植物培养技术获得脱毒苗,操作流程如图所示。据图回答下列问题:
(1)通过该技术培育脱毒苗时,外植体接种前需要进行_______________________(填“消毒”或“灭菌”)处理,选取兰州百合的茎尖作为外植体的理由是______________________。
(2)过程②为____________________,该过程一般不需要光照。在后续的培养过程中,每日给与适当时间和强度的光照,目的是______________________。
(3)过程③④使用的培养基,主要差异是____________________。
(4)在植物的组织培养过程中,易产生突变体,原因是_________________________。
18.(10分)甲状旁腺激素(PTH)是一种含有84个氨基酸的多肽,是调节钙磷代谢的主要激素之一,临床上PTH被作为低钙血症等疾病的重要诊断指标。拟制备抗PTH单克隆抗体(单抗),并建立定量检测PTH的方法。
(1)人工合成PTH肽链1~25氨基酸组成的多肽(A)和39~84氨基酸组成的多肽(B),分别用A、B多次免疫小鼠。
①取免疫后小鼠的血清,以___________________的血清为阴性对照,检测血清中抗PTH抗体的效价(效价越高表明免疫效果越好),以确保小鼠体内产生了能分泌抗PTH抗体的浆细胞。
②取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞混合,加入聚乙二醇促进____________________,并用特定的选择培养基进行筛选。对获得的杂交瘤细胞进行______________________,经多次筛选获得5株能稳定分泌抗PTH单抗的细胞。
③将5个杂交瘤细胞株分别注射到______________________,一段时间后分离获得抗PTH单抗(用A免疫后筛选出的A1,用B免疫后筛选出的B1、B2、B3、B4)。
(2)经抗体配对检测后,筛选出A1、B1用于定量检测PTH。将B1固定在固相载体上作为捕获抗体,用辣根过氧化物酶标记A1,建立定量检测PTH的方法(如图)。
①据图分析,捕获抗体和酶标抗体与待测样本中PTH的关系是捕获抗体和酶标抗体特异性结合于PTH的______________________________(“相同”或“不同”)位点。
②因为在一定范围内______________________________,所以可通过检测显色反应后棕色的深浅来测定PTH的含量。
(3)研究表明,人体内除全长PTH外,还存在PTH的7~84氨基酸肽段,它与全长PTH的生物学功能完全相反。为更准确地检测血清中全长PTH的含量,还应制备针对__________________的单抗作为酶标抗体,避免PTH的7~84氨基酸肽段。
19.(12分)为建立一种效率高、毒性小的基因敲除系统,将图1所示的质粒1和质粒2导入大肠杆菌,质粒2中的sgRNA基因依据目的基因设计,其转录的短链RNA通过与目的基因碱基互补配对,与Cas9蛋白共同作用,敲除大肠杆菌基因组中的目的基因。回答下列问题。
注:SacB蛋白将蔗糖转化为有毒性的化合物,抑制大肠杆菌生长繁殖;质粒2为温度敏感型质粒,在下不能复制。
图1
(1)大肠杆菌LacZ基因的表达产物可催化X-gal生成蓝色物质从而使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。将质粒1与含LacZ基因相应sgRNA基因的质粒2同时转化到大肠杆菌中,涂布到含抗生素__________的平板(含有X-gal)上进行培养。若长出的是____________色菌落则为LacZ基因被敲除的大肠杆菌。
(2)Cas9基因的表达量会影响敲除效率,但其过量表达会对大肠杆菌有毒。为评估毒性和敲除效率,用5种启动子(A、B、C、D和E)启动Cas9的转录,相应检测结果如图2所示。结果表明,启动子_________对细胞毒性最小;综合考量毒性和敲除效率,应选用启动子______________用于该系统。
(3)含有质粒的大肠杆菌在无抗生素选择压力下培养,少数子代细胞会丢失质粒。结合质粒1和质粒2的特点,在成功敲除LacZ基因的大肠杆菌中消除质粒1和质粒2,实验流程如图3所示。
①培养12小时后,图3试管1中大部分的大肠杆菌________(填选项)。
A.含质粒1和质粒2 B.只含质粒1 C.只含质粒2 D.无质粒1和质粒2
②若要从图3平板上筛出质粒1和质粒2均被消除的大肠杆菌,简要写出实验思路和预期结果:__________________________________________________________________________________。
20.(13分)研究显示Gata3基因是大量肿瘤细胞的潜在突变位点,为研究Gata3蛋白在细胞中的定位,科研人员将绿色荧光蛋白(GFP)基因与Gata3基因融合,如图甲所示,构建基因表达载体后转入小鼠受精卵,并整合到受精卵的染色体上,每个受精卵仅导入一个目的基因,获得能正常表达融合蛋白的杂合雌、雄小鼠各一只。荧光蛋白成像系统显示这两只小鼠均为Gata3-GFP融合基因阳性转入小鼠。回答下列问题:
(1)为获取GFP基因,可以从____________中查询基因GFP的编码序列,设计特定引物进行PCR扩增获取,其引物的作用是__________________。
(2)据图甲分析,Gata3-GFP基因翻译时,先合成的蛋白质为__________,因此构建融合基因时,应将__________基因中编码_________________的序列删除。
(3)科研人员将培育出的上述两只杂合小鼠进行交配来获得Gata3-GFP基因纯合的小鼠。为了鉴定交配获得的5只新生小鼠的基因型,科研人员设计了引物1和引物2用于PCR扩增,PCR产物电泳结果如图乙所示。图中个体_______________(填数字)是Gata3-GFP基因纯合的小鼠。若用引物1和3进行PCR扩增,__________(填“能”或“不能”)区分GFP转基因阳性小鼠中的杂合子和纯合子,原因是________________。
(4)相较于传统的物质提取、体外测量方式,对转基因小鼠用荧光蛋白成像系统测量荧光蛋白的优点是________________________________(写出一点)。
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