湖南衡阳县四中2025-2026学年下学期高二6月检测生物试卷

**基本信息** 以细胞代谢、基因工程等核心知识为载体，融入双特异性抗体、三亲试管婴儿等科技情境，突出生命观念与科学思维的考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/40分|原核细胞结构（题1）、Na⁺-K⁺泵运输（题4）|结合曲线图分析运动供能（题2），考查科学思维| |非选择题|5题/60分|光合作用（题17）、单克隆抗体制备（题19）|设计乳酸菌筛选实验（题18），体现探究实践；基因工程流程（题21），关联技术应用|

衡阳县四中2025-2026年下期高二6月检测卷 生物学 分值：100 分 时间：75 分钟 一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是 符合题目要求的。 1.下列有关真核细胞和原核细胞的叙述正确的是（ ） A.原核细胞只有核糖体这一种细胞器，因此不可能是自养型生物 B.乳酸菌与人体细胞相比，在结构上最主要的区别是乳酸菌具有细胞壁 C.颤蓝细菌与发菜都能进行光合作用，颤蓝细菌含光合色素，而发菜细胞含叶绿体 D.支原体相较于大肠杆菌，其主要区别是支原体没有细胞壁 2.糖类和脂肪均可以为运动提供能量，随着运动强度的变化，脂肪与糖类的供能比例变化如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A.脂肪中氢原子的数量较糖类中多，氧原子的数量较糖类中少 B.检测脂肪时，生物组织材料不用制成薄片也能在显微镜下观察 C.进行M点对应的运动强度的运动时，脂肪和糖类的供能比例相同，消耗量也相同 D.长时间进行低强度运动时，脂肪可转变为糖类供能，说明脂肪是主要的能源物质 3.蛋白质的分选包括两条途径。途径一是共翻译转运：在游离核糖体上合成一段肽链（信号肽）后，信号肽会引导核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成，再经一系列加工后转运至溶酶体、细胞膜或分泌到细胞外。途径二是翻译后转运：在游离核糖体上完成肽链合成，然后转运至线粒体、叶绿体、细胞核或细胞质基质等处，下列分析正确的是（ ） A.可利用放射性同位素标记法确定某种蛋白质的转运途径，如用3H标记亮氨酸的羧基确定某种蛋白质的转运途径 B.蛋白质分选需由细胞核直接提供信息分子调控 C.共翻译转运途径合成的蛋白质的空间结构比翻译后转运途径合成的蛋白质简单 D.细胞内蛋白质的合成都起始于游离核糖体 4.Na+-K+泵又称Na+-K+ATP酶，通过磷酸化和去磷酸化的交替进行，每次可以逆浓度梯度泵出3个Na+和泵入2个K+。其结构如图所示。乌本苷可抑制Na+-K+泵的活性，而Mg2+会与Na+-K+泵特定部位结合，暴露出酶的活性中心，使其更好地催化ATP水解。下列相关叙述错误的是（ ） A.乌本苷可能通过竞争性结合Na+-K+泵上的离子结合位点来抑制其活性 B.Na+-K+泵转运相关离子属于主动运输过程，ATP的作用仅是为该过程提供能量 C.Mg2+可通过促进ATP水解来提升Na+-K+泵运输相关离子的速率 D.Na+-K+泵在维持动物细胞膜电位和渗透平衡上起着重要作用 5.鱼宰杀后鱼肉中的腺苷三磷酸降解生成肌苷酸，能极大地提升鱼肉鲜味。肌苷酸在酸性磷酸酶（ACP）作用下降解又导致鱼肉鲜味下降。在探究鱼类鲜味下降外因的系列实验中，实验结果如图甲和图乙所示。下列有关叙述正确的是（ ） A.本实验的自变量只有pH和温度，因变量是酸性磷酸酶（ACP）的相对活性 B.不同鱼的ACP的最适温度和pH有差异，根本原因在于不同鱼体内的ACP结构不同 C.pH低于3.8、温度超过60℃，对鳝鱼肌肉酸性磷酸酶（ACP）活性影响的机理不同 D.由图可知，放置相同的时间，鱿鱼在pH等于6.0、40℃条件下，鱼肉鲜味下降最快 6.某运动营养实验室研发了一种新型补剂X，其核心成分可通过影响线粒体功能来调节细胞呼吸。为研究补剂X的作用，研究者将小鼠骨骼肌细胞分为对照组和实验组，在有氧条件下检测细胞呼吸的相关指标，结果如图所示。下列叙述或推测合理的是（ ） 注：细胞呼吸的底物是葡萄糖；各组葡萄糖等量且起始浓度一致；酶乙是ATP合成酶，位于线粒体内膜上。 A.补剂X通过抑制有氧呼吸第一阶段，减少丙酮酸生成 B.实验组CO2释放量升高，说明补剂X促进无氧呼吸第二阶段 C.实验组酶乙活性升高，可加速有氧呼吸第三阶段的ATP生成 D.若将实验条件改为无氧，两组细胞产生的乳酸量会有显著差异 7.某生物小组利用图1装置在光合作用最适温度下培养某植株幼苗，通过测定不同时段密闭玻璃罩内幼苗的O2释放速率来测量光合速率，结果如图2所示，下列说法错误的是（ ） A.若用缺镁的完全培养液培养一段时间，光合作用的光反应减弱，碳反应也减弱 B.曲线中t1~t4时段，玻璃罩内CO2浓度最高点和最低点依次是t1和t4 C.t4时补充CO2，此时叶绿体内C3的含量将增多 D.若t4时玻璃罩内O2的量比t0时增加了128mg，则此阶段植株积累葡萄糖的量为120mg 8.花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示，最多只考虑原生质体两两融合。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述错误的是（ ） A.图1过程①是在无菌水中进行，过程②可以用PEG诱导融合 B.图1培育的杂种植株体细胞染色体数目最多可达到64条 C.图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜 D.病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株 9.双特异性抗体（BsAb）含有两个独立的抗原结合位点。科学家用大鼠（2N）细胞和小鼠（2N）细胞制备出抗T细胞标志物（CD3）和抗肿瘤标志物（EpCAM）的BsAb，用于治疗EpCAM阳性肿瘤，部分过程如下图所示。下列分析错误的是（ ） A.通过细胞克隆化培养和抗体检测，可获得产生特定抗体的杂交瘤细胞 B.同时用CD3和EpCAM免疫小鼠，能获得产生BsAb的B淋巴细胞 C.可用灭活病毒诱导法获得四源杂交瘤细胞，该细胞最多含16个染色体组 D.BsAb通过同时结合EpCAM和CD3，招募并激活T细胞来杀伤肿瘤细胞 10.“三亲试管婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。下列叙述正确的是（ ） A.该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化和精子质量不佳等问题 B.“三亲婴儿”的出生属于有性生殖，该婴儿的遗传物质来自提供细胞核的母亲和提供精子的父亲 C.该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率 D.通常用灭活的病毒诱导精子和卵母细胞融合实现体外受精 11.植物叶片的光合作用强度可通过通气法来测定，如图1所示（装置中通入气体的CO2浓度是可以调节的）。将适量叶片置于同化箱中，在一定的光照强度和温度条件下，让空气沿箭头方向缓慢流动，并用CO2分析仪测定A、B两处气体CO2浓度的变化。下列说法错误的是（ ） A.欲使A、B两处气体CO2浓度相同，可通过控制光照强度、温度等条件来实现 B.如果B处气体CO2浓度低于A处，说明叶片光合作用强度大于呼吸作用强度 C.将该同化箱放在黑暗中测得通入与排出气体的体积差值（设压强恒定），其含义是植物呼吸吸收氧气和产生二氧化碳的差值 D.若该叶片在适宜条件下进行如图2所示的处理，则叶片光合作用制造有机物的量可表示为a+c-b 12.中重度盐碱地逆境胁迫条件下，科研人员利用根瘤农杆菌介导法将水稻Leap启动子（一种强启动子）调控的SNAC1基因导入早粳稻中，成功培育了SNAC1基因耐盐碱水稻。转基因耐盐碱候选品种呈现SNAC1基因超强表达，产品性状及产量明显优于普通水稻，其培育过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A.在提取SNAC1基因的过程中加入体积分数为95%的冷酒精是为了析出DNA B.SNAC1基因以B链为转录模板链 C.为使SNAC1基因在普通水稻植株中超量表达，应选用限制酶BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ切割图中的Ti质粒和DNA片段 D.若将重组质粒导入农杆菌中，农杆菌培养基中需添加卡那霉素 二、选择题：本题共 4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，只有一项或多项是符合题意的。每题全部选对得4分，选对但不全的得2分，选错的得0分。 13．TM4噬菌体可侵染分枝杆菌，分枝杆菌的stpK7基因会显著影响TM4噬菌体对其吸附的能力。科研人员按照噬菌体侵染大肠杆菌的实验流程进行了甲～丁四组实验，结果如表所示。下列说法正确的是(      )     分枝杆菌 TM4噬菌体 离心结果 甲组 未敲除stpK7基因 35S标记 上清液放射性高 乙组 敲除stpK7基因 35S标记 ？ 丙组 未敲除stpK7基因 32P标记 沉淀物放射性高 丁组 敲除stpK7基因 32P标记 上清液放射性高 A.表中“?”对应的离心结果应为沉淀物放射性高 B.甲、丙组对照说明DNA是TM4噬菌体主要的遗传物质 C.丙、丁组对照说明stpK7基因会提高TM4噬菌体对分歧杆菌的吸附能力 D.为标记噬菌体，需分别用含35S和32P的未敲除stpK7基因的分歧杆菌对其进行培养 14．研究者利用拟南芥突变体证实了生长素(IAA)可通过赤霉素(GA)调控根的生长。为探究顶芽合成的IAA促进根生长的具体机理，研究者向拟南芥突变体中转入绿色荧光蛋白(GFP)基因与RGA基因的融合基因，在荧光显微镜下观察转基因拟南芥幼苗的根尖中GFP-RGA融合蛋白的表达情况，结果如图所示。下列说法正确的是(      ) A.本实验选用的突变体是GA不敏感型 B.推测RGA蛋白是一种具有生长促进作用的蛋白质 C.可通过发出荧光的强度来判断RGA蛋白的含量 D.实验结果推测IAA通过GA降解RGA蛋白 15．研究者拟通过有性杂交的方法将簇毛麦(2n＝14)的优良性状导入普通小麦(6n＝42)中。用簇毛麦花粉给数以千计的小麦小花授粉，10天后只发现两个杂种幼胚，将其离体培养，产生愈伤组织，进而获得含28条染色体的大量杂种植株。以下表述正确的是(      ) A.簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离 B.培养过程中幼胚细胞经过脱分化和再分化 C.杂种植株减数分裂时染色体能正常联会 D.杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株 16.抗体结构分为可变区（V区）和恒定区（C区），与抗原特异性结合的区域为CDR区，位于V区中。在医药领域，单克隆抗体在疾病诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，但鼠源的单抗容易在人体内引发人抗鼠抗体反应（HAMA），从而削弱其治疗的有效性。科学家对鼠源杂交抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，主要流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A.鼠—人嵌合抗体至少含有4个游离氨基，其抗体特异性由肽链的C区决定 B.上述表达载体的构建过程主要利用了基因重组的生物学原理 C.为提高嵌合基因与载体的连接效率，扩增时应在两条引物的3′端添加同种限制酶酶切位点 D.鼠—人嵌合抗体的研制过程属于蛋白质工程，图中转染细胞的方法可能是显微注射法 三、非选择题：本大题共 5 小题，共 60分 17.（12分）图1为叶绿体中某种生物膜的部分结构及其上进行的生理过程的简化示意图，其中A、B表示物质。图2表示某绿色植物在一定的光照强度下，叶片呼吸速率和光合速率随温度变化的趋势图。 （1）叶绿体结构中含有吸收光能的色素的生物膜是____________（填“外膜”“内膜”或“类囊体膜”）。可以利用_______________ （填原理）分离绿叶中的色素，其中在滤纸条上分布最宽的条带对应的色素是____________。 （2）图1中A表示的物质是__________，物质B的结构简式可以表示为_________根据图示分析，膜上发生的生理过程将水分解成O2、H+和e-，光能先转化成电能，然后转化为能_________，该过程产生的NADPH和物质B在叶绿体基质中参与暗反应阶段的________过程。 （3）在光合作用过程中，如果突然停止光照，则短时间内C3和C5的含量变化分别是___________。如果光照强度不断增强，通常光合速率的变化趋势是__________________。 （4）图2中该植物叶片在温度为a时有机物的积累速率________（填“>”“<”或“=”）温度为c时的。该植物叶片在温度为b的条件下，经过24小时（光照10小时，黑暗14小时）积累的有机物量的相对值为_______________。 18.（14分）泡菜中存在大量的乳酸解口菌，人体摄入适量的乳酸菌可以促进肠道中有益微生物的生长，抑制有害微生物的生长，从而保持肠道菌群平衡，减少肠道疾病的发生。但泡菜中的乳酸菌要在人体中发挥良好的保健作用，必须有足够数量的活性菌经过胃到达小肠，这就要求乳酸菌对胃肠道中的酸有较强的耐受能力。为此，某实验小组从陈年泡菜水中筛选出对胃酸有较强耐受力的乳酸菌株，并进行抑菌测试，流程如图1所示，回答下列问题。 （1）为了满足乳酸菌的生长繁殖，培养基除了提供主要营养物质碳源、氨源、水和______外，还需要添加________________。接种前，培养基需要通过__________法进行灭菌。 （2）图1过程I中采用的接种方法是____________，需要将接种环在培养基表面连续划线，目的是_________培养一段时间后，可根据菌落的_________________（写出2个即可）等培养特征，来挑选目的菌株。富集培养过程中，培养液的pH应控制在1.5左右，该设置的目的是_________________________________。 （3）实验小组已筛选到了耐酸性较强的菌株JYF2和JYF3.现将JYF2和JYF3乳酸菌菌液分别置于牛津杯孔中（如图2），然后将两种牛津杯分别放在4种培养基上进行混合培养（如图1抑菌测试），若A、B分别表示含等量JYF2和JYF3乳酸菌菌液的牛津杯，则C表示的是__________。上述4种培养基表面分别涂布有大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌，抑菌测试结果如图3，由该实验结果可得到的结论有：_____________________________________。 （4）请根据上述结论，为开发乳酸菌功能性食品提出一个建议：______________________________________________。 19.（11分）人乳头瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。图1是针对HPV衣壳蛋白制备出单克隆抗体的过程；图2是HAT培养基来筛选特定杂交瘤细胞的原理。请回答下列问题： （1）图1中给小鼠注射的特定抗原是___________。产生特异性抗体的淋巴细胞（B淋巴细胞）需要与骨髓瘤细胞融合的原因是___________________________，该融合过程需要进行诱导，与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合的特有方法是_______________。 （2）图1中诱导动物细胞融合后有两次筛选，第一次筛选的目的是___________，其原理如图2所示，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转移酶和激酶，而骨髓瘤细胞中缺乏转移酶。小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中生长的原因是___________________________，杂交瘤细胞可以在HAT培养基中生长的原因是___________________________________________________________。 （3）对第一次筛选出的细胞进行_______培养和抗体检测可以获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。为获取大量的单克隆抗体，抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞有两种培养方法：一是___________________，二是___________________。 20.（12分）同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜鼓胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜鼓胀病的发生。研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗鼓胀病的新型苜蓿。 （注：R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同） （1）培育抗鼓胀病的新型苜蓿依据的生物学原理有____________。培养原生质体时，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________________________________。 （2）在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是________________________________________________________________________________________________。 （3）步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中________________是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。 （4）科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对紫花苜蓿和百脉根原生质体融合率的影响，实验结果如下图。异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。 ①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是____________。 ②实验结果表明诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为____________，理由是____________________________________________________。 21.（11分）研究人员利用图中质粒构建基因表达载体并将其导入大肠杆菌，获得生产胰岛素的工程菌，以期解决胰岛素药源不足的问题。回答下列问题： （1）先提取胰岛β细胞中的总RNA，通过一定方法分离纯化出胰岛素基因的mRNA，经________________过程得到cDNA，然后设计引物并利用PCR扩增胰岛素基因。选择胰岛β细胞提取RNA的原因是__________________________________。 （2）已知胰岛素基因的α链为编码链。据图1分析，利用PCR扩增胰岛素基因时，需对引物①~④进行特殊处理。PCR所需的引物组合是______________，在其中一种引物的__________（填“3'端”或“5'端”）需添加BamH Ⅰ识别序列和强启动子。1个胰岛素基因片段扩增4次，共需消耗引物___________个。 （3）为确保胰岛素基因正确插入图2的载体中，需选择的限制酶组合是_____________，已知胰岛素基因α链的碱基序列为5'-TTTA-AAGGG…-3'，强启动子的碱基序列为5'-GCTGCATG-3'，请写出胰岛素基因上游引物的18个碱基序列：5'-_____________________-3'。 （4）“蓝白斑”法是基因工程中常用的筛选方法。请简述将胰岛素基因导入大肠杆菌并筛选工程菌的过程：___________________________________________________________________________________________________________________。 答案及解析 1.答案：D 解析：原核细胞虽然只有核糖体这一种细胞器，但有些原核生物（如蓝细菌）能进行光合作用，是自养型生物，A错误；乳酸菌属于原核生物，与人体细胞（真核细胞）相比，在结构上最主要的区别是乳酸菌没有以核膜为界限的细胞核，B错误；颤蓝细菌和发菜都能进行光合作用，都含光合色素，属于原核生物，都不含叶绿体，C错误；支原体和大肠杆菌均属于原核生物，支原体相较于大肠杆菌，其主要区别是支原体没有细胞壁，D正确。 2.答案：A 解析：脂肪中氧原子的数量低于糖类，而氢原子的数量高于糖类，A正确；检测脂肪时，生物组织材料必须制成薄片才能在显微镜下观察，B错误；依据曲线图可知，进行M点对应的运动强度的运动时，糖类和脂肪的供能比例相等，但由于同等质量下糖类储存的能量比脂肪少，所以消耗糖类的量多于脂肪，C错误；糖类是主要的能源物质，脂肪是储能物质，D错误。 3.答案：D 解析：H3标记亮氨酸的羧基，在脱水缩合过程中会进入水分子中，无法示踪蛋白质的转运途径，A错误；结合题意可知，蛋白质分选的信息分子由信号肽提供，并不是由细胞核直接提供，B错误；共翻译转运途径合成的蛋白质经过内质网、高尔基体的加工，空间结构会更复杂。翻译后转运，在游离核糖体上完成肽链合成，并未经过内质网、高尔基体加工，空间结构较简单，C错误。 4.答案：B 解析：A、因为少量乌本苷可抑制Na+-K+泵活性，从作用机制推测，有可能是乌本苷通过竞争性结合Na+-K+泵上的离子结合位点，从而影响离子正常结合，进而抑制其活性，A正确； B、Na+-K+泵转运离子属主动运输，ATP不仅供能，还参与磷酸化过程（题干提及磷酸化和去磷酸化交替进行），B错误； C、已知Mg2+会与Na+-K+泵特定部位结合，暴露酶的活性中心，使其更好地催化ATP水解。ATP水解产生能量可推动Na+-K+泵运输相关离子，所以Mg2+可通过促进ATP水解来提升Na+-K+泵运输相关离子的速率，C正确； D、在动物细胞中，Na+-K+泵每消耗1分子ATP，逆浓度梯度泵出3个Na+和泵入2个K+。这种离子的不均衡分布对于维持动物细胞膜电位（形成静息电位和动作电位等）和渗透平衡起着重要作用，D正确。 故选B。 5.答案：D 解析：本实验的自变量除了pH和温度，还有鱼的种类，A错误；不同鱼的ACP的最适温度和pH有差异，直接原因在于不同鱼体内的ACP结构不同，根本原因在于相关基因的碱基序列不同，B错误；H过低和温度过高造成酶活性降低的原理相同，都是破坏酶的空间结构，C错误；据图可知，蛔鱼在pH等于6.0、40℃条件下，ACP的相对酶活性最高，降解肌苷酸速率最快，导致鱼肉鲜味下降最快，D正确。 6.答案：C 解析：A、由图可知，实验组丙酮酸含量与对照组无显著差异，说明补剂X不抑制有氧呼吸第一阶段，A错误； B、实验在有氧条件下进行，无氧呼吸第二阶段不产生CO2，实验组CO2释放量升高应是有氧呼吸增强导致，B错误； C、酶乙是ATP合成酶，位于线粒体内膜，实验组酶乙活性升高，可加速有氧呼吸第三阶段ATP的生成，C正确； D、无氧条件下，两组细胞均进行无氧呼吸，补剂X影响线粒体功能，对无氧呼吸无显著影响，两组产生的乳酸量无显著差异，D错误。 故选C。 7.答案：B 解析：A、镁是叶绿素的组成元素，缺镁导致叶绿素合成不足，光反应减弱，ATP和NADPH生成减少，碳反应也随之减弱，A错误； B、t1~t4时段，t1之前光合速率小于呼吸速率，CO2浓度持续升高，t1时光合速率等于呼吸速率，CO2浓度达到最高；t1~t4光合速率大于呼吸速率，CO2浓度持续降低，t4时CO2浓度最低，B正确； C、t4补充CO2，CO2固定加快，C3生成增多，短时间内C3还原速率不变，因此叶绿体内C3含量增多，C错误； D、根据光合作用总反应式，O2与葡萄糖的摩尔质量比为6×32:180，O2增加128mg，葡萄糖积累量=128×180/（6×32）=120mg，D错误。 故选B。 8.答案：A 解析：A、图1过程①制备原生质体应在无菌的酶解液中进行，不能在无菌水中，避免原生质体吸水胀破，A错误； B、花椰菜原生质体（18条染色体）和紫罗兰原生质体（14条染色体）融合，最多可形成64条染色体（18+14+18+14），B正确； C、图2中4和5同时含有花椰菜和紫罗兰的特异性蛋白，属于杂种植株，1只含花椰菜的特异性蛋白，可能是花椰菜，C正确； D、测定病斑面积占比可筛选抗病性强的杂种植株，D正确。 故选A。 9.答案：B 解析：A、通过细胞克隆化培养（将杂交瘤细胞单个分离培养）和抗体检测（筛选出能产生特定抗体的细胞），可获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，A正确； B、一种B淋巴细胞只能产生一种特定的抗体，同时用CD3和EpCAM免疫小鼠，小鼠的免疫系统会针对这两种抗原产生两种B淋巴细胞，B错误； C、用灭活病毒诱导法可获得四源杂交瘤细胞，大鼠杂交瘤细胞以及小鼠杂交瘤细胞均是由骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成，均含4个染色体组，融合后的四源杂交瘤细胞含8个染色体组，在有丝分裂后期最多含16个染色体组，C正确； D、BsAb含有两个独立抗原结合位点，可同时结合EpCAM和CD3，招募并激活细胞毒性T细胞，利用细胞毒性T细胞杀伤肿瘤细胞，D正确。 故选B。 10.答案：C 解析：A、该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化的问题，但是没有解决精子不佳的问题，A错误； B、由于经过了受精作用，“三亲婴儿”的出生属于有性生殖，该婴儿的遗传物质来自提供细胞质的捐献者、提供细胞核的母亲和提供精子的父亲，B错误； C、高龄女性容易产生质量不佳的卵子，而重组的卵细胞成活力较强，该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率，C正确； D、体外受精不需要灭活病毒诱导，D错误。 故选C。 11.答案：D 解析：A（√）欲使A、B两处气体CO2浓度相同，即净光合速率为0，可以控制光照强度、温度、CO2浓度等条件使光合作用强度等于呼吸作用强度；B（√）若B处气体CO2浓度低于A处，则表示植物叶片的净光合速率大于0，即叶片的光合作用强度大于细胞呼吸强度；C（√）利用该同化箱在黑暗条件下研究叶片的细胞呼吸，测定同化箱通入气体和排出气体的体积，则体积差值表示的含义是细胞呼吸吸收O2量和产生CO2量的差值；D（×）该叶片在适宜条件下进行实验，光合作用1小时制造有机物的量为净光合作用量+细胞呼吸量=（c-b）+（a-b）=a+c-2b。 12.答案：C 解析：DNA不溶于酒精，所以提取SNAC1基因的过程中加入体积分数为95%的冷酒精是为了析出DNA,A正确。已知转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'，根据碱基互补配对原则以及RNA聚合酶结合位点，得出SNAC1基因以B链为转录模板链，B正确。Leap启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被RNA聚合酶识别并结合，驱动基因的转录；为使SNAC1基因在普通水稻植株中超量表达，必须含有强启动子，结合质粒上终止子的位置，若选用限制酶BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ切割，目的基因会反向插入载体，所以应选用限制酶BamH Ⅰ和Kpn Ⅰ切割图中的Ti质粒和DNA片段，C错误。重组质粒含有卡那霉素抗性基因，故若将重组质粒导入农杆菌中，农杆菌培养基中需添加卡那霉素进行筛选，D正确。 13．答案：CD 解析：A、甲组（未敲除stpK7、35S标记）上清液放射性高，说明噬菌体蛋白外壳未吸附；乙组敲除stpK7，噬菌体吸附能力更弱，35S标记外壳仍在上清液，上清液放射性高，而非沉淀物放射性高，A错误； B、甲、丙组仅分别标记蛋白质和DNA，无对照组，无法证明DNA是遗传物质；噬菌体侵染实验结论为“DNA是遗传物质”，不能说“主要遗传物质”，B错误； C、丙组（未敲除）沉淀物放射性高（DNA进入菌体），丁组（敲除）上清液放射性高（DNA未进入），说明stpK7基因提高噬菌体吸附能力，促进DNA注入，C正确； D、噬菌体为病毒，需在宿主细胞内增殖，标记噬菌体需先培养含35S/32P的未敲除stpK7基因的分枝杆菌，再用其培养噬菌体，D正确。 故选CD。 14．答案：CD 解析：A、实验需GA敏感型突变体（能响应GA），GA不敏感型无法检测GA作用；A错误。 B、甲组（完整植株）荧光强，乙组（去顶芽+IAA+GA）荧光弱，说明RGA蛋白抑制根生长；B错误。 C、GFP为绿色荧光蛋白，荧光强度与RGA蛋白含量正相关，可通过荧光强度判断含量；C正确。 D、甲组有IAA，荧光强；丙组无IAA，荧光强；乙组有IAA+GA，荧光弱，推测IAA通过GA降解RGA蛋白；D正确。 故选CD。 15．答案：ABD 解析：A、簇毛麦（2n=14）和普通小麦（6n=42）属于不同物种，自然状态下不能交配产生可育后代，存在生殖隔离，A正确； B、杂种幼胚离体培养，先脱分化形成愈伤组织，再再分化形成杂种植株，涉及脱分化和再分化过程，B正确； C、杂种植株染色体数=7（簇毛麦配子）+21（小麦配子）=28条，无同源染色体，减数分裂时染色体无法联会，不能产生正常配子，C错误； D、杂种植株染色体加倍后为56条（异源四倍体），染色体成对存在，减数分裂可正常联会，产生可育配子，植株可育，D正确。 故选ABD。 16.答案：BD 解析：A、抗体由4条肽链组成，至少含4个游离氨基，但抗体特异性由可变区（V区）的CDR区决定，并非恒定区（C区），A错误； B、表达载体构建是将鼠源V区基因、人源C区基因与载体连接，属于基因工程，利用基因重组的生物学原理，B正确； C、扩增目的基因时，限制酶酶切位点应添加在引物的5′端，3′端是子链延伸的起点，添加酶切位点会影响PCR扩增，C错误； D、鼠—人嵌合抗体是对天然抗体结构进行改造，属于蛋白质工程；将基因表达载体转入动物细胞（Sp2/0细胞）常用显微注射法，D正确。 故选BD。 17.答案：（1）类囊体膜；不同色素在层析液中的溶解度不同；叶绿素a （2）NADP+；A—P~P~P化学；C3还原 （3）增加、减少；一定范围内光合速率逐渐升高，到达光饱和点后保持不变（合理即可） （4）>24 解析：（1）叶绿体中吸收光能的色素分布在类囊体膜上。不同色素在层析液中的溶解度不同，可利用该原理分离绿叶中的色素，其中在滤纸条上分布最宽的条带对应的色素是含量最高的色素，即叶绿素a。 （2）图1中A可以与H+反应生成NADPH,A表示的物质是NADP+。物质B是ATP，其结构简式可以表示为A—P~P～P。膜上发生的生理过程将水分解成O2、H+和e-，光能先转化成电能，然后转化为化学能（储存在NADPH和ATP中），该过程产生的NADPH和ATP在叶绿体基质中参与暗反应阶段的C3还原过程。 （3） 如果光照强度不断增强，通常光合速率的变化趋势是在一定范围内光合速率逐渐升高，到达光饱和点后保持不变。 （4）有机物积累速率可用净光合速率表示，净光合速率=光合速率-呼吸速率，据图2可知，温度为a和c时叶片光合速率相同，呼吸速率不同，温度为c时呼吸速率大于温度为a时的，故温度为a时叶片有机物的积累速率大于温度为c时的。该植物叶片在温度为b的条件下，经过24小时（光照10小时，黑暗14小时）积累的有机物量的相对值为10×12-24×4=24。 18.答案：（1）无机盐；维生素；高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌） （2）平板划线法；将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；大小、形状、颜色（写出两个即可）；模拟胃酸环境，筛选出对胃酸有较强耐受力的乳酸菌菌株 （3）含等量无菌水的牛津杯；JYF2乳酸菌和JYF3乳酸菌均可抑制大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的生长，且JY2乳酸菌的抑制作用更强 （4）将JYF2乳酸菌添加到酸奶或其他乳酸菌发酵食品中，以增加肠道中益生菌含量，抑制有害微生物的生长，从而保持人体肠道菌群平衡 解析：（1）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐这几种主要的营养物质，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。例如，在培养乳酸菌时，还需要添加维生素。接种前，需要对培养基进行严格灭菌处理，可使用高压蒸汽灭菌法（或湿热灭菌法）对培养基进行灭菌，以防止杂菌污染。 （2）观察图1可知，过程Ⅰ中采用的接种方法是平板划线法，需要将接种环在培养基表面连续划线，目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。培养一段时间后，可根据菌落特征，如菌落的大小、形状、颜色或隆起程度等，来挑选目的菌株。富集培养过程中培养液的pH应控制在1.5左右，目的是模拟胃酸环境，筛选出对胃酸有较强耐受力的乳酸菌菌株。 （3）实验设计要遵循对照原则和单一变量原则等，若A、B分别表示含等量JYF2和JYF3乳酸菌菌液的牛津杯，则C表示的是含等量无菌水的牛津杯。4种培养基表面分别涂布有大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌，分析题图3可知，JYF2和JYF3乳酸菌均可抑制大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的生长，且JYF2乳酸菌的抑制作用更强。 （4）根据实验得到的结论可以为我们开发乳酸菌功能性食品提供指导，例如，可以将JY2乳酸菌添加到酸奶或其他乳酸菌发酵食品中，以增加肠道中益生菌含量，抑制有害微生物的生长，从而保持人体肠道菌群平衡。 19.答案：（1）HPV衣壳蛋白；能产生特异性抗体的淋巴细胞没有增殖能力；灭活病毒诱导法 （2）筛选出杂交瘤细胞；小鼠骨髓瘤细胞核苷酸的合成途径是全合成途径，会被HAT培养基中的物质A所阻断；B淋巴细胞中有转移酶和激酶，杂交瘤细胞可以通过补救合成途径合成核苷酸 （3）克隆化；在体外条件下大规模培养；注射到小鼠腹腔中培养 解析：（1）由于图1所示过程是制备针对HPV衣壳蛋白单克隆抗体的过程，所以给小鼠注射的特定抗原应是HPV衣壳蛋白。由于能产生特异性抗体的淋巴细胞（B淋巴细胞）没有增殖能力，所以为获得大量特异性抗体，B淋巴细胞需要与能无限增殖的小鼠骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。 （2）图1中诱导动物细胞融合后有两次筛选，第一次筛选是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞；第二次筛选是进行抗体阳性检测，最终获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。据图2可知，小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中生长的原因是小鼠骨髓瘤细胞核苷酸的合成途径是全合成途径，会被HAT培养基中的物质A所阻断，但杂交瘤细胞可以在该培养基中增殖，原因是B淋巴细胞中有转移酶和激酶，杂交瘤细胞可以通过补救合成途径合成核苷酸。 （3）获得的杂交瘤细胞种类有多种，需要对它们进行克隆化培养及抗体检测，才能获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。获得该类细胞后，可以将该类细胞在体外条件下大规模培养，也可以注射到小鼠腹腔中培养，以获取大量的单克隆抗体。 20.答案：（1）细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；保持原生质体的完整性 （2）将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况 （3）细胞分裂素和生长素的浓度和比例 （4）高Ca2+-高pH融合；35%；该浓度下异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小 解析：（1）由图可知，培育抗鼓胀病的新型苜蓿采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。将植物细胞的细胞壁去除即可获得原生质体。培养原生质体时，为了防止原生质体吸水涨破，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是保持原生质体的完整性。 （2）在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。 （3）步骤②是脱分化，步骤③是再分化。步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中细胞分裂素和生长素的浓度和比例是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。 （4）①诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。 ②已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。分析柱形图可知：当PEG浓度为35%时，异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低，对细胞的毒害作用较小，因此诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为35%。 21.答案：（1）逆转录；胰岛素基因在胰岛B细胞中才能表达 （2）②③；5'端；30 （3）BamH Ⅰ和Sal Ⅰ；GGATCCGCTGCATGTTTA （4）（经CaCl2溶液处理的）大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，再将大肠杆菌接种到添加了氨苄西林和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌 解析：（1）先提取胰岛B细胞中的总RNA，通过一定方法分离纯化出胰岛素基因的mRNA，经逆转录过程得到cDNA，然后设计引物并利用PCR扩增胰岛素基因。选择胰岛B细胞提取RNA是因为胰岛素基因在胰岛B细胞中才能表达。 （2）DNA复制时，子链延伸的方向是从5'端到3'端，因此PCR所需的引物组合是②③；据题干和题图1可知，在构建重组DNA分子时需要用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ酶切目的基因，已知胰岛素基因的α链为编码链，则β链为转录模板链，因此在引物②的5'端添加BamH Ⅰ识别序列和强启动子。1个胰岛素基因经过4个循环的PCR，共消耗引物的数量为24+1-2=30（个）。 （3）据题图和上述分析可知，为确保胰岛素基因正确插入题图2的载体中，需选择的限制酶组合是BamH Ⅰ和Sal Ⅰ。已知胰岛素基因α链的碱基序列为5'-TTTAAAGGG…-3'，强启动子的碱基序列为5'-GCTGCATG-3'，则胰岛素基因上游引物的碱基序列应依次包含BamH Ⅰ的识别序列、强启动子序列和β链3'端部分序列的互补序列，即其18个碱基序列为5'-GGATCCGCTGCATGTTTA-3'。 （4）将胰岛素基因导入大肠杆菌并利用“蓝白斑”法筛选工程菌的过程见答案。 学科网（北京）股份有限公司 $