湖南衡阳市衡阳县五中2025-2026学年高二下学期生物模块综合测评卷

**基本信息** 聚焦选择性必修3核心内容，融合癌症免疫疗法、抗体-药物偶联物等科技前沿与泡菜制作、食醋酿造等传统实践，通过图表分析与实验设计考查科学思维与探究能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|12题/24分|发酵技术、无菌技术、基因工程|第1题以"生物技术双刃剑"情境考查伦理安全，体现态度责任| |不定项选择|4题/16分|细胞杂交、胚胎发育、蛋白质工程|第16题结合鼠-人嵌合抗体改造，考查科学思维与创新应用| |非选择题|5题/60分|发酵工程、细胞工程、基因工程|第19题以ADC构建为载体，整合单克隆抗体制备与药物靶向运输，突出探究实践与综合应用|

衡阳县五中2026年春高二综合测评卷 生物学 分值：100 分 时间：75 分钟 考试范围：选择性必修3全册 一、选择题：本题共 12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是 符合题目要求的。 1.生物技术是一把双刃剑，生物技术的进步就是一首悲喜交加的交响曲，为人类生活带来巨大便利的同时，也可能给人类带来灾害。下列相关叙述正确的是（ ） A.克隆羊“多莉”的出现说明克隆技术已完全成熟 B.生殖性克隆人有利于人类基因多样性的形成，但不利于人类的进化 C.生物武器具有致病能力强、攻击范围广等特点，应禁止生物武器 D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 2.醋酸菌是一类能使糖类或酒精氧化成醋酸等产物的细菌。研究人员通过实验研究了传统食醋酿造过程中发酵液中相关指标的变化情况，实验结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A.在氧气充足的条件下，醋酸菌能将糖类或酒精直接转化为醋酸 B.第2~9天发酵液中细菌纤维素不断增加可能是菌体不断消耗残糖的结果 C.第7~11天影响发酵液中菌体密度的因素只有残糖含量 D.图中细菌纤维素含量曲线和残糖含量曲线的交点表示二者含量相等 3.下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（ ） A.图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率（V1）的影响 B.图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生醋酸速率（V2）的影响 C.图3能表示在利用乳酸菌制泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸的变化趋势 D.图4能表示在一普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化 4.无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列说法正确的是（ ） A.巴氏消毒的最大优点是能够杀死牛奶中的全部微生物 B.对接种室、涂布器、操作者的衣着和双手只需要进行消毒处理 C.培养基可借助高压蒸汽灭菌锅或干热灭菌箱进行灭菌 D.利用寄生于细菌体内的微生物裂解细菌来净化污水属于生物消毒法 5.变色圈法是将潜在的目标微生物样本接种到含有特定底物的培养基上，随着微生物在培养基上生长和繁殖，它们会分泌相应的酶来分解这些底物，该过程中产生的可溶性小分子化学物扩散会引起特定区域指示剂的颜色变化。下列相关分析错误的是（ ） A.变色圈的大小可作为评估微生物体内相关酶活性的重要指标 B.与透明圈相比，变色圈法中指示剂的使用让反应结果更直观 C.利用变色圈法筛选得到的微生物能直接接种于发酵罐内发酵 D.基于微型化培养及多种检测技术可实现微生物的高通量筛选 6.植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A.过程①用纤维素酶和果胶酶处理时间的差异，可能与两亲本细胞壁结构差异有关 B.过程②用PEG诱导原生质体融合和细胞壁再生，杂种细胞含有亲本的2个细胞核 C.过程④一般不需要光照，脱分化形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块 D.过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例有差异 7.植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术，通过对愈伤组织悬浮培养可获得植物次生代谢产物。某愈伤组织悬浮培养时细胞干重、蔗糖浓度和培养液pH的变化过程如图所示，下列有关叙述错误的是（ ） A.次生代谢物一般不是植物基本的生命活动所必需的代谢物 B.外植体再分化形成愈伤组织的过程需要植物激素的诱导作用 C.12d后细胞干重有所下降可能与培养液中蔗糖浓度和pH下降有关 D.培养液中添加蔗糖除了能为细胞生长提供能源外，还能调节渗透压 8.癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一（如图）。下列说法不正确的是（ ） A.某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD—L1，PD—L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸，临床上可利用PD—1的单克隆抗体进行癌症治疗 B.取小鼠的脾脏细胞用PEG试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞 C.加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表抗PD—1抗体的量 D.假设仅考虑某两个细胞的融合，则融合后有1种类型的细胞 9.我国研究人员经体细胞核移植技术成功克隆出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①~⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。下列说法错误的是（ ） A.过程①用含血清的液体培养基，置于含95%空气和5%CO2的培养箱中培养 B.过程⑤是将胚胎移入受体体内，移植前要激活重构胚 C.可用Ca2+载体或乙醇激活重构胚，使其完成分裂和发育进程 D.代孕母猴分娩的食蟹猴性状表现与提供卵母细胞的雌性食蟹猴无关 10.亚洲野猫是珍稀物种，可通过胚胎工程让家猫代孕繁育，流程如图。下列相关叙述正确的是（ ） A.对亚洲野猫超数排卵时注射的促性腺激素，可作用于全身细胞以促进排卵 B.步骤甲为体外受精，精子需经获能处理，卵母细胞需培养至MⅡ期才能完成受精 C.早期胚胎培养时，培养液成分与步骤甲所用培养液完全相同，且需通入纯氧维持细胞呼吸 D.若要获得多只遗传性状完全相同的亚洲野猫幼仔，可对早期胚胎进行任意分割后移植 11.在基因工程操作中，科研人员利用两种限制酶（R1和R2）处理基因载体，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A.两种限制酶在载体上识别的序列不相同 B.两种限制酶在载体上可能各有一个酶切位点 C.限制酶R1与R2的切割位点最短相距约为200 bp D.DNA在凝胶中迁移的速率与DNA构象无关 12.乙肝病毒基因工程疫苗的生产和使用流程如图，质粒中LacZ基因可使细菌能够利用物质X-gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。下列叙述错误的是（ ） A.过程①中目的基因和载体重组的效率与载体和目的基因的浓度及比例等有关 B.过程②需要在培养基中加青霉素和X-gal以获得呈蓝色的大肠杆菌菌落 C.大肠杆菌是否成功表达出乙肝病毒外壳，可用抗原—抗体杂交法进行检测 D.该基因工程疫苗不会出现乙肝病毒感染和增殖的情况，安全性高 二、不定项选择（本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分） 13.花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种，如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述正确的是（ ） A.图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B.图1过程①在无菌水中进行，过程②在固体培养基中进行 C.若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64 D.病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 14.瘤胃纤毛虫是一种能分泌纤维素酶的原生动物，生活在牛羊等反刍动物的瘤胃中。研究人员将纯化的瘤胃纤毛虫接种到含5mL改良培养液（由K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、NaCl等组成）的试管中，每天投喂100μL底物悬液（由淀粉和草粉组成），每3～4天换液一次，投喂和换液结束后均需充入某种气体再盖上盖子继续培养。每天进行计数，结果如图所示。相关叙述正确的是（ ） A.计数前应将瘤胃纤毛虫与培养液充分混匀 B.K2HPO4和KH2PO4共同作用能维持培养液的pH C.投喂和换液结束后充入的是O2，其目的是提供有氧环境 D.将等量瘤胃纤毛虫接种到含10mL改良培养液的试管中，其生长曲线将左移 15.图甲为受精作用的过程以及早期胚胎发育示意图，图乙表示早期胚胎发育的某个时期。下列叙述正确的是（ ） A.图甲中过程②细胞数量增加，胚胎的总体积和细胞的全能性几乎不变 B.受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期 C.图乙处于图甲中的a时期，细胞⑦将来发育成胎儿的胎膜和胎盘 D.胚胎发育至b时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层 16.抗体结构分为可变区（V区）和恒定区（C区），与抗原特异性结合的区域为CDR区，位于V区中。在医药领域，单克隆抗体在疾病诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，但鼠源的单抗容易在人体内引发人抗鼠抗体反应（HAMA），从而削弱其治疗的有效性。科学家对鼠源杂交抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，主要流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A.鼠—人嵌合抗体至少含有4个游离氨基，其抗体特异性由肽链的C区决定 B.上述表达载体的构建过程主要利用了基因重组的生物学原理 C.为提高嵌合基因与载体的连接效率，扩增时应在两条引物的3′端添加同种限制酶酶切位点 D.鼠—人嵌合抗体的研制过程属于蛋白质工程，图中转染细胞的方法可能是显微注射法 三、非选择题：本大题共 5 小题，共60分 17.（11分）利用微生物制作发酵食品在我国有着悠久的历史。如图1表示泡菜的制作方法。请回答下列问题： （1）制作泡菜利用的微生物是____________。发酵初期，泡菜坛水槽内经常有气泡产生，其主要原因是发酵初期酵母菌生长旺盛，产生了较多的________________________。 （2）装坛时往往加入“陈泡菜水”，是为了增加____________的量。调味料除了蒜瓣、生姜及其他香辛料外，还要加入少量白酒以使泡菜更加脆爽、清香，同时还能起到____________的作用。 （3）泡菜制作过程中，泡菜表面的杂菌产生的硝酸还原酶将硝酸盐还原成亚硝酸盐，在特定条件下能转变成有致癌作用的亚硝胺。如图2是三种食盐浓度的泡菜中亚硝酸盐含量与发酵天数的关系。 ①与食盐浓度为3%、7%的泡菜相比较，食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化的特点是________________________________________________。 ②发酵初期食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量较低的原因主要是____________________________________。 ③泡菜虽然美味却不宜过量食用。根据图中的相关数据，对泡菜腌制和食用的合理建议有________________________________________________。 18.（12分）利用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”杂种植株，实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄，地下结马铃薯的“超级作物”。 （1）材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用了植物组织培养和_____________技术，植物组织培养技术的理论基础是_________________。 （2）图中①步骤所示用_____________除去植物细胞的细胞壁，分离出有活力的原生质体。 （3）图中②过程细胞两两融合时，可用_____________（写两种物理方法）诱导融合，会出现_________种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有_________和_________两类激素。 （4）由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④_________和⑤_________过程。 （5）利用马铃薯和番茄的_________得到单倍体植株，然后取单倍体植株的细胞进行体细胞杂交，再用_________处理之后也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。 19.（13分）为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，给小鼠注射的特定抗原应取自_________________。 （2）步骤①常用方法包括_____________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是_____________________________。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_____________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，其特点是_________________________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行_____________培养的方式进行扩大培养。 （4）步骤④是将获得的a__________和b__________，通过接头结合在一起，从而获得ADC。 （5）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单克隆抗体除了运载药物外，还有_______________________等作用。 ②ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为_____________________能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖________________________的原理。 ③据图2写出ADC进入乳腺癌细胞后可导致癌细胞凋亡的具体过程（机理）：__________________________________________________________________________________________。 20.（11分）柴油是重要的能源物质，在现代社会能源体系中占有重要地位。在柴油生产与使用时，易使含柴油成分的污染物进入土壤并对土壤造成一定程度的污染。为从土壤中分离和筛选出能高效降解柴油的细菌，科研小组进行了图1所示实验。不考虑实验操作和计数误差。回答下列问题。 （1）分离柴油降解菌的培养基应以___________为唯一碳源，该培养基从功能上看，属于_____________培养基。 （2）平板划线法和稀释涂布平板法是常用的接种方法，两者的适用范围有所不同，计数时宜采用_________法接种。经统计，图1中A、B、C三个平板上的菌落数分别为66个、68个、70个，故1g土样中的细菌数约为_______个。 （3）研究小组发现：从土壤中分离柴油降解菌时，图2中所示的菌株对柴油的降解率均超过50%。15℃条件下，图2的Q21菌株细菌数量及对柴油的降解率随时间的变化情况如图3。综合分析，实践中应选用图2中的________菌株降解柴油。由图3可知，在72～84h内，柴油的降解率基本不变但细菌数量有所下降，不考虑氧气影响且柴油降解菌不处于休眠期，发生这些变化的主要原因是______________________________________________（回答一点）。 21.（13分）新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。 回答下列问题： （1）实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图甲所示。其中GtP为启动子，若使r2HN仅在水稻胚乳表达，GtP应为_____________启动子。Nos为终止子，其作用为_____________。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点。因此，可选择限制酶_____________和_____________对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 （2）利用_____________方法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测_____________，通过_____________技术检测是否翻译出r2HN蛋白。 （3）获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，r2HN纯合体植株的占比为_____________。选择纯合体进行后续研究的原因是_____________。 （4）制备r2HN疫苗后，为研究其免疫效果，对实验组鸡进行接种，对照组注射疫苗溶剂。检测两组鸡体内抗新城疫病毒抗体水平和特异应答的CD8+T细胞（细胞毒性T细胞）水平，结果如图乙所示。据此分析，获得的r2HN疫苗能够成功激活鸡的免疫和_____________免疫。 （5）利用水稻作为生物反应器生产r2HN疫苗的优点是_________________________________________________。（答出2点即可）。 答案及解析 1.答案：C 解析：克隆技术仍不够成熟，A错误；生殖性克隆人不利于人类基因多样性的形成，B错误；干扰素为细胞因子，并非生物武器，D错误。 2.答案：B 解析：醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误。由图可知，第2～9天发酵液中细菌纤维素含量不断增加，而残糖含量不断下降，可能原因是菌体消耗残糖从而产生了细菌纤维素，B正确。醋酸发酵过程中，营养物质、代谢产物的积累等都会影响菌体密度，C错误。图中关于细菌纤维素含量和残糖含量的纵坐标不同，二者的数值和单位存在差异，二者曲线的交点不能表示二者含量相等，D错误。 3.答案：D 解析：A、果酒制作过程中，酵母菌产生酒精的速率先增加后稳定，并非一直上升，图1不符合，A错误； B、醋酸菌是好氧菌，溶氧量越高，产生醋酸速率越快，图2不符合，B错误； C、乳酸菌制泡菜过程中，乳酸含量先增加后稳定，并非一直上升，图3不符合，C错误； D、密闭锥形瓶中酵母菌进行无氧呼吸产生CO2，溶液pH逐渐降低，图4符合，D正确。 故选D。 4.答案：D 解析：A、巴氏消毒法只能杀死牛奶中部分微生物，无法杀死全部微生物及芽孢，A错误； B、接种室、操作者双手进行消毒，涂布器需进行灭菌处理，消毒仅杀死部分微生物，灭菌可杀死全部微生物，B错误； C、培养基常用高压蒸汽灭菌，干热灭菌适用于玻璃器皿、金属工具，不能用于培养基灭菌，C错误； D、利用噬菌体裂解细菌净化污水，利用生物间寄生关系杀灭有害菌，属于生物消毒法，D正确。 故选D。 5.答案：C 解析：A、微生物产生的相关酶活性越高，分解底物产生的可溶性小分子化学物越多，扩散后引起的变色圈越大。所以变色圈的大小可作为评估微生物体内相关酶活性的重要指标，A正确； B、透明圈是通过底物被分解后形成的透明区域来判断，而变色圈法中指示剂的使用，能让反应结果以颜色变化的形式呈现，相比透明圈更直观，B正确； C、利用变色圈法筛选得到的微生物，需要先进行扩大培养、菌种鉴定等一系列操作，确保菌种的纯度、活性等符合要求后，才能接种于发酵罐内发酵，不能直接接种，C错误； D、基于微型化培养及多种检测技术，能够在较小的空间和较短的时间内对大量微生物样本进行检测和筛选，可实现微生物的高通量筛选，D正确。 故选C。 6.答案：B 解析：A、过程①为去除细胞壁，纤维素酶和果胶酶处理时间差异，与甲、乙植物细胞壁的成分、结构差异有关，A正确； B、过程②中PEG仅诱导原生质体融合，细胞壁再生是自然过程；杂种细胞含有2个完整染色体组，并非2个细胞核，B错误； C、过程④脱分化形成愈伤组织，该过程不需要光照，愈伤组织为薄壁、不定形的薄壁细胞团，C正确； D、脱分化与再分化的培养基中，生长素和细胞分裂素的浓度、比例不同，调控细胞发育方向，D正确。 故选B。 7.答案：B 解析：次生代谢物是由次生代谢产生的一类植物基本生命活动非必需的小分子有机化合物，A正确；外植体脱分化形成愈伤组织的过程需要植物激素（生长素和细胞分裂素）的诱导作用，B错误；据题图解读可知，12d后细胞干重有所下降可能与培养液中蔗糖浓度和pH下降有关，C正确；在细胞培养时，培养液中添加的蔗糖除了能为细胞生长提供能源外，还能够调节培养液的渗透压，D正确。 8.答案：D 解析：PD-1抗体可阻断PD-L1与PD-1结合，激活T细胞，A正确；脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合后用选择培养基筛选杂交瘤细胞，B正确；酶促反应底物显色深浅可代表抗PD-1抗体量，C正确；两个细胞融合有3种类型（B-B、瘤-瘤、B-瘤），D错误。故选D。 9.答案：D 解析：过程①用含血清的液体培养基，置于含95%空气和5%CO2的培养箱中培养，A正确；胚胎移植前要用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确；可用Ca2+载体或乙醇激活重构胚，使其完成分裂和发育进程，C正确；去核卵母细胞含有细胞质基因，也会遗传给食蟹猴，因此代孕母猴分娩的食蟹猴性状表现和提供卵母细胞的雌性食蟹猴有关，D错误。 10.答案：B 解析：激素需要与靶细胞上的受体结合后才能起作用，诱导超数排卵所注射的促性腺激素只能作用于特定的性腺细胞，不能作用于全身细胞，A错误。步骤甲为体外受精，精子需经获能处理，卵母细胞需培养至MⅡ期成熟后，才能进行体外受精，B正确。体外受精过程使用的培养液主要用于精子获能、卵母细胞的成熟和受精，早期胚胎培养的培养液用于早期胚胎细胞的培养，故步骤甲和早期胚胎培养所用的培养液成分有区别，且动物细胞培养时通入的是95%空气+5%CO2的混合气体，不是纯氧，C错误。胚胎分割一般选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，对早期胚胎不能任意分割，否则会影响后期的发育，D错误。 11.答案：D 解析：如果两种限制酶在载体上识别序列相同，则用两种酶切与一种酶切产生的DNA片段应该相同，与图示结果不符，因而可推测两种限制酶识别的序列不相同，A正确。当仅用R1或R2一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度的DNA片段，因此该载体最有可能为环状DNA分子；当用两种限制酶同时切割时，则产生两种不同长度的DNA片段，推测两种限制酶在载体上可能各有一个或多个酶切位点，且每种酶不同酶切位点间的距离相同，B正确；两种限制酶同时切割时产生600bp和200bp两种长度的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位点最短相距约200bp,C正确；DNA分子在凝胶中的迁移速率除了与DNA分子大小、构象等有关外，还与凝胶的浓度有关，D错误。 12.答案：D 解析：过程①表示构建重组质粒，增加载体和目的基因的浓度及比例，可以增加目的基因与质粒接触的机会，提高目的基因和载体重组的效率，A正确。过程②表示将重组质粒导入受体细胞，在构建重组质粒时，应选用限制酶BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ切割载体，限制酶BamH Ⅰ切割会破坏质粒LacZ基因，但保留了青霉素抗性基因，故可获得呈白色的大肠杆菌菌落，B错误。乙肝病毒外壳为蛋白质，可用抗原—抗体杂交法检测大肠杆菌是否成功表达出乙肝病毒外壳，C正确。该基因工程疫苗只含有乙肝病毒的外壳，不含乙肝病毒的遗传物质，故不会出现乙肝病毒增殖和感染的情况，D正确。 13.答案：ACD 解析：题图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤，其中①为获得原生质体的过程，A正确；为保证组织细胞的活性，题图1过程①应在等渗或略微高渗的溶液中进行，过程②应在液体培养基中进行，B错误；若只考虑原生质体两两融合，题图2中4、5植株具有花椰菜和紫罗兰的特异性蛋白，是杂种植株（2n=32），其体细胞在有丝分裂后期染色体数目达到最多，为64，C正确；病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例越小，则说明该植株抗病性越强，即病斑面积占叶片总面积比例最小的植株是抗病性最强的个体，D正确。 14.答案：AB 解析：计数前应将瘤胃纤毛虫与培养液充分混匀，否则瘤胃纤毛虫沉积将影响计数，A正确；K2HPO4和KH2PO4是缓冲物质，二者共同作用维持培养液的pH，B正确；瘤胃纤毛虫生活在牛羊等反刍动物的瘤胃中，为无氧环境，因此投喂和换液结束后充入的是CO2，其目的是提供无氧环境，C错误；将等量瘤胃纤毛虫接种到含10mL改良培养液的试管中，其生长曲线在早期呈“J”形曲线增长，中前期的曲线与之前基本相同，但环境容纳量将提高，D错误。 15.答案：A 解析：A、图甲中过程②为卵裂期，细胞通过有丝分裂增殖，细胞数量增加，胚胎总体积不变或略有缩小，细胞全能性几乎不变，A正确； B、受精卵发育为桑葚胚、囊胚的过程均在透明带内完成，囊胚后期孵化，桑葚胚后直接进入囊胚期，B错误； C、图乙为囊胚期，对应图甲中b时期，细胞⑦为内细胞团，将来发育为胎儿的组织器官，滋养层细胞发育为胎膜和胎盘，C错误； D、胚胎发育至囊胚期（b时期）开始细胞分化，桑葚胚期无分化，原肠胚期形成三个胚层，D错误。 故选A。 16.答案：BD 解析：A、抗体由4条肽链组成，至少含4个游离氨基，但抗体特异性由可变区（V区）的CDR区决定，并非恒定区（C区），A错误； B、表达载体构建是将鼠源V区基因、人源C区基因与载体连接，属于基因工程，利用基因重组的生物学原理，B正确； C、扩增目的基因时，限制酶酶切位点应添加在引物的5′端，3′端是子链延伸的起点，添加酶切位点会影响PCR扩增，C错误； D、鼠—人嵌合抗体是对天然抗体结构进行改造，属于蛋白质工程；将基因表达载体转入动物细胞（Sp2/0细胞）常用显微注射法，D正确。 故选BD。 21.答案：（1）乳酸菌；CO2 （2）乳酸菌；抑制杂菌生长 （3）亚硝酸盐含量变化最大、亚硝酸盐峰值最高；高盐浓度有利于抑制杂菌的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了硝酸盐还原；使用适宜浓度的食盐腌制泡菜；泡菜腌制到一定时间后才能食用 解析：（1）制作泡菜利用的微生物主要是乳酸菌，利用乳酸菌厌氧呼吸产生乳酸。发酵初期，发酵初期大肠杆菌、酵母菌等生长旺盛，产生较多的CO2，因此泡菜坛水槽内经常有气泡产生； （2）老泡菜水中含有乳酸菌，装坛时往往加入老泡菜水这是为了增加接种（乳酸菌）的量；调味料除了蒜瓣、生姜及其他香辛料外，还要加入少量白酒能使泡菜更加脆爽、清香同时还能起到抑制杂菌生长的作用； （3）①从图中可以看出，与食盐浓度为3%、7%相比较，食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化的特点是亚硝酸盐含量变化最快；亚硝酸盐峰值最高，最低值最低；②高盐浓度有利于抑制杂菌的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了硝酸盐还原，因此发初期食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量较低；③泡菜虽然美味却不宜过量食用。根据图中的相关数据，对泡菜腌制和食用的合理建议有使用适宜浓度（或5%浓度）的食盐腌制泡菜：泡菜腌制到一定时间后（或9~11天后）才能食用。 22.答案：（1）原生质体融合；植物细胞的全能性 （2）纤维素酶和果胶酶 （3）离心法、电融合法；3/三；细胞分裂素；生长素（顺序可颠倒） （4）脱分化；再分化 （5）花药离体培养；秋水仙素 解析：（1）植物体细胞杂交最终得到杂种植株，要应用到植物组织培养技术，其理论基础是植物细胞的全能性。 （2）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此除去细胞壁时，为分离出有活力的原生质体，利用酶的专一性，即用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 （3）图中步骤②过程的细胞两两融合时，可出现3种融合细胞，即马一马、番一番、杂种细胞，植物组织培养过程中需要使用的激素主要是生长素和细胞分裂素。 （4）由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④脱分化和⑤再分化过程。 （5）分别利用马铃薯和番茄的花药离体培养，得到两种植物的单倍体植株，然后取这两种单倍体植株的细胞进行体细胞杂交，再用秋水仙素处理，也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。 23.答案：（1）乳腺癌细胞 （2）PEG；病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 （3）抗体检测；既能大量增殖，又能产生特定抗体；体外 （4）单克隆抗体；治疗乳腺癌的药物 （5）①作为诊断试剂、治疗疾病；②单克隆抗体抗原—抗体特异性结合；③ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出药物作用于细胞核，导致癌细胞凋亡 解析：（1）要生产能识别并结合乳腺癌的单克隆抗体，给小鼠注射的特定抗原应取自乳腺癌细胞。 （2）步骤①表示动物细胞的融合，常用的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法；灭活的病毒诱导融合的原理见答案。 （3）步骤②表示筛选得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行步骤③克隆化培养和抗体检测；符合要求的杂交瘤细胞具有大量增殖且能产生特定抗体的特点；杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养。 （4）由图1可知，步骤④表示将单克隆抗体（a）和治疗乳腺癌的药物（b）结合形成ADC。 （5）①单克隆抗体还可以作为诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用；单克隆抗体自身也能用于治疗疾病。 ②ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，将药物运载到乳腺癌细胞起作用，而不伤害正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖抗原与抗体的特异性结合。 ③据图2可知，ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出药物作用于细胞核，导致癌细胞凋亡。 24.答案：（1）柴油；选择 （2）稀释涂布平板；6.8×108 （3）Q21；柴油降解的产物积累过多，抑制细菌生长；底物和生存空间不足，细菌停止增殖；代谢产物积累致细菌死亡 解析：（1）本实验的目的是从土壤中分离和筛选出能高效降解柴油的细菌，因此分离柴油降解菌的培养基应以柴油为唯一碳源。从功能上分析，该培养基为选择培养基。 （2）平板划线法和稀释涂布平板法是常用的接种方法，两者的适用范围有所不同，计数时宜采用稀释涂布平板法进行接种。经统计，图1中A、B、C三个平板上的菌落数分别为66个、68个、70个，且稀释倍数为106，故1g土样中的细菌数约为（66+68+70）÷3÷0.1×106=6.8×108（个）。 （3）研究小组发现：从土壤中分离柴油降解菌时，图2中所示的菌株对柴油的降解率均超过50%。15℃条件下，图2的Q21菌株细菌数量及对柴油的降解率随时间的变化情况如图3所示。图示结果显示Q21菌株降解率最高，因此，实践中应选用图2中的Q21菌株降解柴油。由图3可知，在72~84h内，柴油的降解率基本不变但细菌数量有所下降，该现象的原因可能是柴油降解的产物积累过多，抑制细菌生长；底物和生存空间不足，细菌停止增殖；代谢产物积累致细菌死亡等。 25.答案：（1）胚乳特异表达基因的；终止转录；Hind Ⅲ；EcoR Ⅰ（与前一空可互换） （2）农杆菌转化；r2HN是否转录；抗原-抗体杂交 （3）1/4；子代不发生性状分离 （4）体液；细胞（与前一空可互换） （5）生产成本低；转基因水稻易获得（或安全性高或种子蛋白易纯化或水稻自花传粉不易发生基因污染） 解析：（1）基因工程中常使用在特定组织中发挥功能的启动子，从而实现基因的选择性表达。若使r2HN仅在水稻胚乳中表达，GtP应为仅在水稻胚乳中特异性表达的基因启动子；终止子的作用是使转录在所需要的地方停下来；图甲为实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点，Kpn I会破坏启动子GtP，SacⅠ的一个识别序列位于终止子Nos之后，为保证r2HN基因正确插入启动子GtP与终止子Nos之间，应选择Hind Ⅲ与EcoR Ⅰ对载体和r2HN基因进行切割。 （2）水稻是植物，将基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法；基因的表达包括转录合成mRNA与翻译得到蛋白质两个过程，通过将mRNA逆转录得到cDNA，通过特异性引物对cDNA进行PCR扩增，若能得到产物说明r2HN基因转录得到了mRNA；抗体能特异性与抗原结合，通过抗原一抗体杂交能判断是否翻译出r2HN蛋白。 （3）目的基因只是单一位点的插入，所以得到的植物可以认为是“杂合子”，自交后含有r2HN基因的纯合体植株占1/4；纯合体自交后代不发生性状分离，能保证子代植株稳定地合成r2HN蛋白。 （4）由图乙可知，注射疫苗后，鸡体内的抗体水平提高，说明疫苗能激活鸡的体液免疫；CD8+T细胞水平提高，说明疫苗能激活鸡的细胞免疫。 学科网（北京）股份有限公司 $