陕西宝鸡市某校2025-2026学年高二下学期第二次质量检测生物试卷

**基本信息** 聚焦细胞工程与基因工程核心内容，以CRISPR技术、三亲婴儿等前沿情境设计试题，非选择题如24题整合PCR与载体构建，考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|20/60|微生物发酵（第1题）、细胞工程（单克隆抗体第7题）、基因工程（限制酶第19题）|基础判断与情境分析结合，如第2题以农药降解实验考查种群数量变化| |非选择题|5/40|原生质体融合（21题）、基因表达载体构建（24题）、嵌合体胚胎（23题）|多技术综合，如24题结合PCR引物设计与筛选，体现探究实践；25题通过工程菌构建考查实验设计逻辑|

凤翔中学2025--2026学年度 第二学期高二年级第二次质量检测生物科 参考答案 一、单选题（每小题3分，共60分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D C C A A D B D B D 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 C A B C C C A A B D 二、非选择题：（除标注外，每空1分，共40分） 21（6分）(1) 去除细胞壁 纤维素酶和果胶 (2) 高Ca2+-高pH融合法 再生出细胞壁 (3)脱分化和再分化 (4)无性 22、（7分）(1)6/六 (2)酶解法 (3)茎尖 (4) 维持培养液的pH 清除代谢产物，防止代谢产物积累，对细胞自身造成危害（为细胞提供充足的营养） (5) 灭活的病毒 特异性强、灵敏度高、可大量制备 23、（7分）(1) MⅡ 获能 (2) 囊胚 具有发育的全能性 (3)动物细胞的培养、动物细胞融合和胚胎移植 (4)用ES细胞经嵌合体方法克隆的动物是完全的复制体而用核移植方法克隆的动物只是核型一致但胞质类型却不一定相同。（2分） 24、（11分）(1) 6/六 KpnI和HindⅢ (2) 引物2和引物3 在DNA聚合酶的催化下，在引物的3′端连接上脱氧核苷酸 5′ 耐高温（Taq）DNA聚合酶、Mg2+、dNTP、缓冲液等 16 (3) Ca2+ 能 能 只有T-DNA区段会导入植物受体细胞，氨苄青霉素抗性基因不会导入受体细胞中 25、（9分）(1) 引物1和引物4 下 （2）①EcoRV T4DNA ②启动子 终止子 XhoI和PstI （3）尚未在个体生物学水平上对MT工程菌吸附重金属的能力进行鉴定（2分） 学科网（北京）股份有限公司 $ 凤翔中学2025--2026学年度 第二学期高二年级第二次质量检测生物科试题 一、单选题：（每小题3分，共60分） 1．关于“利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜”的实验，下列叙述正确的是（    ） A．制作泡菜的菜料不宜完全淹没在煮沸后冷却的盐水中 B．制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌 C．发酵装置需加满菜料或牛奶并封装，以抑制乳酸菌的无氧呼吸 D．控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质 2．为研究土壤食细菌线虫对农药A降解菌的影响，研究人员在实验室适宜培养条件下，利用农药A污染已灭菌土壤，并设计实验：对照组接种农药A降解菌，实验组接种农药A降解菌和食细菌线虫，实验结果如图所示。下列说法错误的是（　　）    A．可用干热灭菌法对被污染的土壤进行灭菌 B．0～7d，食细菌线虫减少与适应环境有关 C．食细菌线虫种群数量到达K值后保持不变 D．食细菌线虫能增加农药A降解菌的数量 3、研究人员以拟南芥愈伤组织为材料，探究IAA诱导愈伤组织生根的作用，结果如下表。下列相关说法正确的是（　　） 组别 培养基 植物类型 生根数(条) 1组 RIM 野生型 75 2组 RIM W8突变体 60 3组 不含IAA的RIM 野生型 59 4组 不含IAA的RIM W8突变体 17 注：RIM为诱导生根的培养基，配方中含有IAA；W8为IAA合成基因 A．愈伤组织细胞排列疏松，高度液泡化，分化程度高 B．诱导愈伤组织生根需要避光，诱导生芽需要光照处理 C．野生型细胞自身产生的IAA促进了其在不含IAA的RIM生根 D．若增加1组培养基中IAA的浓度，推测其生根的效果会更好 4．人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列说法错误的是（    ） A．人参皂苷是人参的次生代谢产物，是其生长所必需的 B．细胞融合前必须先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 C．聚乙二醇、高Ca2+—高pH溶液均可促进细胞融合 D．上述融合细胞可能通过快速生长提高人参皂苷的产率 5．研究人员取胰岛B细胞功能受损的糖尿病患者的成纤维细胞，在加入特殊诱导因子促进Sox2，Klf4，Oct4，c-Myc（简称SKOM）4种基因表达的孵化器中培养得到多能干细胞（iPS细胞），再定向诱导分化为可移植的正常胰岛B细胞。下列叙述正确的是（    ） A．SKOM中可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期 B．孵化器中要加入动物血清来防止动物细胞受病原体侵染 C．导入的SKOM使成纤维细胞具有衰老细胞的特征 D．iPS细胞分化为胰岛B细胞的过程体现了细胞的全能性 6、下图为利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述正确的是（    ） A．过程①可以使用机械法或胃蛋白酶等将组织分散成细胞 B．过程②和过程④中细胞只能贴壁生长 C．培养细胞2需要贴附于基质表面生长，可直接用离心法进行收集 D．培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等 7．下图是制备单克隆抗体流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是（    ）    A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 C．②中使用活性较强的病毒有利于杂交瘤细胞的形成 D．③同时具有巨噬细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 8．细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述错误的是（　　） A．选择植物的茎尖分生区进行组织培养，可以获得脱毒植物幼苗 B．选择病人的核移植胚胎干细胞诱导分化后可形成免疫匹配的移植器官 C．选择去核卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率 D．选择分化程度较高的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞 9．如图为某哺乳动物生殖过程示意图（b 为卵母细胞）。下列相关叙述中错误的是（　　）    A．动物个体①②的产生分别属于有性生殖和无性生殖 B．按照动物个体②的产生方式，后代的性别比例仍为1:1 C．动物个体②的产生表明，动物细胞核也具有全能性 D．图中a、b、c 三种细胞的产生方式，仅c 为有丝分裂 10．某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（    ） A．若为植物体细胞杂交技术，则用聚乙二醇处理两种植物细胞后会直接出现膜融合 B．若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测就可得到大量的单克隆抗体 C．若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛 D．若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核 11．“三亲婴儿”的培育过程的技术流程如下图，相关叙述正确的是（    ） A．三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 B．图中MⅡ期卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用 C．该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精技术 D．卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿” 12．我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。获得耐盐基因后，为了构建重组DNA分子，在此过程中DNA连接酶作用的位点及相应的化学键为（    ）    A．a、磷酸二酯键 B．b、氢键 C．a、氢键 D．b、磷酸二酯键 13．某同学以鸡血细胞为材料进行“DNA粗提取和鉴定”实验。下列叙述错误的是（    ） A．向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可加快血细胞破裂，释放DNA B．向DNA溶液中加入2mol/LNaCl溶液，能析出DNA并提高其纯度 C．向DNA溶液中加入体积分数为95%的预冷酒精，可对DNA进行纯化 D．DNA溶液与二苯胺试剂反应后，溶液呈现的蓝色越深，说明提取的DNA越多 14．研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是（　　）    A．使用HindⅢ和XbaI进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B．目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C．Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D．含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 15．如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述错误的是（　　） A．①→②过程可用不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA B．②→③过程可用Ca2+处理农杆菌细胞 C．③→④过程是将重组Ti质粒整合到受体植物细胞的染色体DNA上 D．④→⑤过程体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的培养条件不同 16、CRISPR/Cas9技术在遗传病治疗中展现出巨大潜力。镰刀型细胞贫血症是因β-珠蛋白基因（HBB）发生点突变所致，患者红细胞呈镰刀状。科学家计划利用CRISPR/Cas9技术治疗该疾病，流程大致为：设计靶向突变HBB基因的单链向导RNA（SgRNA），引导Cas9蛋白切割突变序列，同时导入正常HBB基因片段作为修复模板，最终使细胞表达正常β-珠蛋白。下列叙述错误的是（    ） A．若sgRNA与某正常基因序列存在部分碱基互补，可能导致Cas9错误切割该基因（脱靶效应） B．Cas9切割突变HBB基因后，细胞可利用导入的正常基因片段进行修复，但该过程易受细胞内酶的影响，导致修复片段降解 C．构建重组表达载体时，需包含sgRNA基因、Cas9基因和正常HBB基因模板，无需添加启动子，需添加特定的标记基因 D．不同患者的HBB基因突变位点可能存在差异，因此需根据患者具体突变序列设计特异性sgRNA 17、用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb（1kb即1000个碱基对）的长链，而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端）。 若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为（    ） A．6和8 B．14 C．5.5和8.5 D．2.5和11.5 18、科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列，将猪流行性腹泻病毒的S基因插入，以构建pET-SEA-S重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。目的基因导入受体细胞后，可用PCR技术筛选出成功导入pET-SEA-S融合表达质粒的细菌。下列各项所列引物用来进行筛选最合适的是（　　） A．引物1和引物4 B．引物3和引物4 C．引物1和引物5 D．引物2和引物5 19．下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，下列说法错误的是（    ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC KpnI GGTAC↓C EcoRI G↓AATTC Sau3AI ↓GATC HindII GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG 注 ：Y=C或T，R=A或G。 A．所有的限制酶都具有专一性 B．Sau3A I限制酶不可切割BamH I限制酶的识别核苷酸序列 C．BamH I和Sau3A I两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 D．Hind Ⅱ识别多种核苷酸序列，EcoR I识别一种核苷酸序列 20．PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），利用大肠杆菌表达该蛋白。下图为所用载体示意图，phb2基因基因序列不含图中限制酶的识别序列。下列叙述错误的是（　　） A．将phb2基因与载体正确连接构建基因表达载体是培育转基因大肠杆菌的核心工作 B．为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端可分别引入PvuⅡ和EcoRI限制酶的识别序列 C．在使phb2基因与载体连接时，在扩增的phb2基因两端都引入PvuⅡ限制酶的识别序列可能导致目的基因环化 D．构建基因表达载体时，需选择BamHI限制酶破坏氨苄青霉素抗性基因，以便对目的基因是否正常转录进行检测与鉴定 二、非选择题：（除标注外，每空1分，共40分） 21．（6分）甲品种青花菜具有多种由核基因控制的优良性状，但其属于细胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，科研人员成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中，下图为该操作示意图。请据图回答下列问题： (1)图中A过程为 ，可采用 酶获得原生质体。 (2)诱导甲、乙原生质体融合的化学方法包括聚乙二醇融合法和 等，该过程成功的标志是 。 (3)杂种细胞诱导形成杂种植株的过程的两大关键步骤是 。 (4)植物体细胞杂交技术的生殖方式为 （填“有性”或“无性”）。 22、（7分）细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。 Ⅰ：为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题: (1)若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。这两个品种的花粉可用化学诱导剂诱导融合，共可产生 种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合）。 (2)若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，在细胞融合前，应使用 方法去壁，以便有利于两细胞融合。 (3)植物细胞工程有一项应用是培育“脱毒苗”，培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用 。 Ⅱ：美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题： (4)SP2/0细胞是骨髓瘤细胞的一种，在进行该细胞培养时，需要给细胞提供气体环境为95％空气和5％，其中5％的作用是 ，培养过程中我们需要定期更换培养液，目的是 。 (5) 诱导B淋巴细胞与SP2/0细胞融合除了物理和化学方法外， 还可以使用 进行诱导；产生的CD14的单克隆抗体的优点是 。 23．（7分）2n/4n嵌合体胚胎是指用四倍体(4n)胚胎与二倍体胚胎(2n)或胚胎干细胞(ES细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n嵌合体胚胎的构建常用方法如图，请据图分析回答：    (1)受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞发育到 时期，才具备受精的能力，而精子需经过 过程才能和卵细胞结合。 (2)2N的ES细胞来自胚胎发育过程的 期，本实验中从功能上说明了该细胞 。 (3)2n/4n嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有： 。 (4)ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是什么？ 。 24、（11分）科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因（Pin-Ⅱ）通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。如图表示利用含目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示，图中所示引物表示与相应链结合。回答下列问题： (1)EcoRⅠ识别的碱基序列是5′-GAATTC-3′，该序列中有 个嘌呤。为使目的基因与质粒高效重组，双酶切最好选用 。 (2)利用PCR技术进行目的基因的扩增，应选择的一对引物分别是 ，引物的作用为 ，并在引物的 端添加相应酶切位点。PCR过程除需要模板和引物外，还需要 （写两点）。若最初该反应体系中只有1个DNA分子模板，进行第4次循环时，需要消耗引物 个。 (3)为将表达载体导入农杆菌，可使用 对农杆菌进行处理提高导入的成功率，筛选成功导入重组质粒的农杆菌表现为：在含有氨苄青霉素的培养基中 （填“能”或“不能”）正常生长，在含有新霉素的培养基中 （填“能”或“不能”）正常生长。成功导入目的基因的杨树细胞只能表现出新霉素抗性，原因是 。 25．（每空1分，除标注外，共9分）微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。回答下列问题： (1)根据枣树的MTcDNA的核苷酸序列设计了相应的引物（图1甲），通过PCR扩增MT基因。已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置，选用的引物组合应为 。转录时以图1甲 （填写“上”或“下”）面一条链为模板。 (2)本实验中，PCR所用的DNA聚合酶扩增出的MT基因的末端为平末端。由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。 ①选用 酶将载体P切开，再用 （填“T4DNA或“E·coliDNA”）连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。 ②载体P′不具有表达MT基因 和 。选用 酶组合对载体P′和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用DNA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到钙离子处理的大肠杆菌，筛出MT工程菌。 (3)MT基因在工程菌的表达量如图2所示，结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是 （2分）。 学科网（北京）股份有限公司 $