精品解析：四川达州市第一中学校2025—2026学年下学期高二第二次月考生物试题

达一中高2024级2026年春季第二次月考 生物试题 总分：100分时间：75分钟 一、单项选择题（每题2分，合计50分） 1. 下列关于生态系统的叙述，错误的是（　　） A. 生态系统的范围有大有小，地球上最大的生态系统是生物圈 B. 生态系统的结构是指非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者 C. 自养生物一定是生产者，是生态系统的基石 D. 食物链和食物网是生态系统中物质循环和能量流动的主要渠道 2. 生态金字塔是生态学中表示不同关系的一种形式，是定量研究生态系统的直观体现。某同学构建了一个金字塔模型(如图)，该模型不能表示（　　） A. 各营养级间的能量传递效率 B. 数量金字塔 C. 生物量金字塔 D. 能量金字塔 3. 下列关于图中不同食物链的叙述不正确的是（　　） A. 蛇类在森林生态系统中的该食物链中处于第三营养级 B. 在该农田生态系统中，蛇类粪便中的能量来自蛙的同化吸收 C. 在该水域生态系统中，浮游动物的信息传递可以发生在同种生物之间和不同生物之间 D. 生态系统具有自我调节能力，蛇类数量骤降不会对其稳定性造成影响 4. 2026年中央一号文件提出：全面推进“三北”工程建设，推广以工代赈（增加当地居民收入）等项目实施方式，巩固扩大防沙治沙成果。“三北”工程全称三北防护林体系建设工程，其核心是构筑北方生态安全屏障、遏制风沙与水土流失。下列叙述错误的是（　　） A. 全面推进“三北”工程建设有利于遏制风沙与水土流失，体现了生物多样性的直接价值 B. 合理种植草本和灌木有利于防风固沙和水土保持，利用了生态工程的协调原理 C. 以工代赈等项目实施方式巩固扩大防沙治沙成果，利用了生态工程的整体原理 D. 全面推进“三北”工程建设期间，应加强立法，合理的开发和利用生物资源 5. 下列关于传统发酵技术及应用的相关叙述正确的是（　　） A. 传统发酵以单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 果酒、果醋发酵过程中PH均有先升高后明显下降的现象 C. 多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是曲霉 D. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料 6. 某研究团队从土壤中筛选获得某菌的纯培养物并对其进行计数，部分步骤如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 纯培养的目的是获得纯净的微生物产物 B. 图中所示接种方法为稀释涂布平板法，也可以使用平板划线法接种 C. 1g样品中该菌的数量约为8.0×108个 D. 这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 7. 发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的是（　　） A. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 B. 优良菌种可从自然界筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得 C. 发酵结束后，采取提取、分离和纯化等方法将菌体分离 D. 筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产 8. 植物体细胞杂交使远缘杂交不亲和的植物有可能实现遗传物质重组，创造和培养植物新品种。科研人员为改良猕猴桃品质特性，通过PEG融合，进行了中华猕猴桃与美味猕猴桃种间体细胞杂交并成功获得了杂种植株。下列叙述正确的是（　　） A. 过程a表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体 B. 过程b除了使用物理法电融合法、离心法或化学法，还可用低Ca2+—低pH融合法 C. 可以根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生 D. 过程f获得的杂种植株能表现出中华猕猴桃与美味猕猴桃的各种优良性状 9. 研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不受季节和天气等的限制 B. 利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物时体现了细胞全能性 C. 在适当条件下给予适宜光照，①愈伤组织能进行光合作用 D. 植物细胞培养技术提高了单个细胞中次生代谢物的含量 10. 间充质祖细胞是一种存在于多种组织中的成体干细胞。科学研究团队通过动物细胞培养技术，构建抗衰型人间充质祖细胞（SRC）模型，并在灵长类动物模型中验证了其抗衰效果。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养SRC时，需要在培养基中添加血清，并通入CO2以刺激细胞呼吸 B. 对SRC进行传代培养时，则应用胰蛋白酶处理后再用离心法收集 C. 间充质祖细胞具有组织特异性，具有发育成完整个体的能力 D. 若SRC能够悬浮在培养液中生长增殖，则不需要进行传代培养 11. 如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图，相关叙述错误的是（ ） A. 在培养iPS细胞的过程中定期更换培养液的目的是清除细胞代谢物，防止对细胞自身造成伤害 B. 过程③④分化得到的细胞不同，是因为iPS细胞在培养过程中发生了遗传物质的改变 C. 若iPS细胞来源于病人自身体细胞，再将其分化出的细胞移入患者体内可以避免免疫排斥反应发生 D. 若要了解这4个关键基因在诱导产生iPS细胞时每个基因作用的相对大小，可以在各实验组中依次去掉1个基因来进行推测 12. 科研人员基于单克隆抗体技术构建了抗体—药物偶联物（ADC）以提升宫颈癌治疗效果并降低药物副作用，具体过程如下图所示。已知YL201是一种新型ADC，由人源抗B7H3单克隆抗体与新型拓扑异构酶I抑制剂通过可被蛋白酶降解的接头偶联而成。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程①形成的融合细胞均为杂交瘤细胞 B. 过程①形成的融合细胞无需筛选即可进行克隆化培养和抗体检测 C. 杂交瘤细胞的培养只能在细胞培养液中进行 D. YL201由人源抗B7H3单克隆抗体a、新型拓扑异构酶I抑制剂b和接头组成 13. 中国科学家成功克隆了一只濒危物种北极狼，由于雌性北极狼稀缺，科学家选择了比格犬作为受体及代孕母亲，通过克隆技术获得北极狼的基本过程如图 所示。下列叙述错误的是（ ） A. 通常采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核 B. 需对代孕比格犬注射激素使其同期发情以接受移植的胚胎 C. 克隆狼的线粒体基因与提供卵母细胞的比格犬相同 D. 将重组细胞直接移植到代孕犬子宫中可缩短克隆周期 14. 下图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关阶段。下列叙述错误的是（　　） A. a过程表示卵裂，胚胎总体积不增加，有机物含量减少 B. Ⅰ阶段形成的致密细胞团，形似桑葚，称为桑葚胚 C. Ⅱ阶段的细胞逐渐分化，分化出了内细胞团和滋养层 D. Ⅲ阶段随着胚胎逐步扩大，透明带破裂，发生孵化 15. 胚胎工程作为一种可以实现大型家畜高水平快速扩繁的辅助生殖手段，在荷斯坦奶牛（2n=60）快速繁殖中的应用已相当成熟，基本过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①获得的精子培养在获能液中使其获能，获能液中常见有效成分有肝素、Ca2+ B. 过程②获得的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期 C. 过程③为体外受精是在体外模拟体内受精环境的条件下进行的 D. 过程④中发生的细胞分裂方式是有丝分裂，过程⑤不会发生免疫排斥 16. 下列关于基因工程的原理与操作说法错误的是（　　） A. 基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的 B. 基因工程的核心原理是基因突变，可定向改造生物的遗传性状 C. 基因工程中用作载体的质粒通常是经过人工改造的 D. 基因工程需用的工具有限制酶、DNA连接酶和载体 17. 关于重组DNA技术的基本工具，下列说法正确的是（　　） A. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B. 限制酶能切割T2噬菌体和烟草花叶病毒的核酸 C. 质粒是独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外的环状双链DNA分子 D. 只有用相同限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，才能形成重组质粒 18. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A. 菜花、猪血、酵母菌均可作为DNA粗提取的实验材料 B. 将洋葱研磨液离心后保留沉淀物并加入冷酒精静置后，可收集到DNA C. 将琼脂糖融化后再稍冷却后，加入适量的核酸染料并进行混匀 D. 可用电泳缓冲液中的指示剂显示DNA分子电泳时的位置 19. 下列有关获取目的基因的叙述，错误的是（　　） A. 目的基因主要是指编码蛋白质的基因 B. 从相关的已知结构和功能清晰的基因中筛选目的基因是较为有效的方法之一 C. 可人工合成目的基因或通过构建基因文库来获取目的基因 D. PCR扩增目的基因的过程中，模板和引物的数量逐渐减少 20. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B. c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C. 高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D. 若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 21. 为提高番茄的储藏时间，研究人员将乙烯受体基因（Ers1）重新导回番茄细胞，使其原有Ers1基因的翻译受抑制，具体过程如图。已知限制酶EcoRⅠ、XhoⅠ和BamHⅠ切割后露出的黏性末端碱基序列不同，下列说法错误的是（　　） 注：LB、RB分别为T-DNA的左边界、右边界；KanR为卡那霉素抗性基因 A. Ers1基因A、B两端需分别添加XhoⅠ和EcoRⅠ的识别序列 B. 载体构建完成后将其导入农杆菌细胞，可利用卡那霉素进行筛选 C. 将番茄叶圆片与农杆菌共培养，质粒会进入到叶肉细胞并稳定存在 D. 利用乙烯受体蛋白抗体鉴定转基因番茄时，可能无法获得清晰条带 22. 将目的基因导入受体细胞是基因工程的重要操作，下列方法的选择中正确的是（ ） A. 常用Ca2+处理小鼠受精卵使其易吸收周围环境中的DNA分子 B. 可用花粉管通道法将目的基因导入玉米的茎尖分生区细胞中 C. 常用显微注射法将目的基因导入大肠杆菌细胞中 D. 农杆菌转化法需先将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中 23. 下列关于基因工程中目的基因的检测和鉴定步骤的叙述，错误的是（　　） A. 可用PCR技术检测受体细胞染色体是否插入目的基因 B. 可用PCR技术检测目的基因是否完成转录和翻译过程 C. 可用抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否合成相应蛋白质 D. 可在个体水平检测和鉴定目的基因是否稳定表达 24. 利用膀胱生物反应器生产人血清白蛋白，基本流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 操作②是对早期胚胎进行移植，移植前需对受体母猪进行超数排卵处理 B. 膀胱生物反应器不受性别及发育限制，产量一定高于乳腺生物反应器 C. 若操作①和操作②成功，则操作③就能从尿液中检测到人血清白蛋白 D. 操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子可避免对其他组织产生影响 25. 基因工程在农牧业、医药卫生领域、食品工业方面都有广泛的应用，以下叙述错误的是（　　） A. 将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速率 B. 将病原体的相关抗原转入适当的微生物细胞，可生产相关疫苗 C. 用基因工程技术获得的工业酶的优点：纯度高、生产成本低、生产效率高 D. 将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 二、简答题（除标注外每空1分，合计50分） 26. 奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。请回答下列问题： （1）发芽的大麦释放________酶，参与糖化过程的发生。如果利用________处理大麦种子，可以使大麦种子无需发芽就能产生该酶。 （2）发酵原料中的淀粉主要为微生物的生长繁殖提供______（营养物质）。扩大培养时所用的培养基属于______（填“固体”或“液体”）培养基。调节培养基pH应在灭菌_____（填“前”或“后”）进行 （3）接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，________（填“能”或“不能”）同时产生乙酸和乳酸。 （4）主发酵阶段在菌种活化的过程中，需定时取样，检测酵母的生长状况。可利用稀释涂布平板法检测酵母菌的数量，其原理是________________。 （5）整个发酵过程的中心环节是__________； 在制作果酒时，有时候酒会变酸，其反应简式为__________________。 27. 骆驼是被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝。近些年，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题： （1）①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有____，受精的标志是_____。 （2）经过过程③操作后，可采用物理或化学方法，如____________（答出一种即可）方法激活重构胚，欲获得更多的胚胎，可以对囊胚进行________操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将_______________，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）获得的F后代与B驯养单峰骆驼性状__________（填“完全”或“不完全”）相同，从遗传物质的角度分析，其原因是_______________（答出2点）。 （4）与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为_______，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选____________细胞，避免对胚胎造成影响。 28. 图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图，图2为pBR322质粒的结构示意图，图中EcoRI、Smal、BamHI和HindIII为限制酶，箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题： （1）人工构建基因表达载体时，该载体除了含特定限制酶切割位点外，还要有________（答出两点）等，切割质粒和目的基因通常使用两种限制酶，是为了防止__________。 （2）采用PCR技术对图1中胰岛素基因进行扩增时，除了向反应体系中加入相应模板和引物外，还需要加入________（答出2点），DNA新链的合成方向是_______，扩增过程中应该选择引物_________，其原因是_____________________。 （3）成功构建的基因表达载体含有人胰岛素基因及其启动子，其作用是___________，若利用酵母菌作受体细胞生产胰岛素等分泌蛋白，与大肠杆菌相比，酵母菌的优势有________。 （4）为筛选出含有重组质粒的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“＋”代表生长，“-”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是_______（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是______________。  菌落类型平板类型 无抗生素 氨苄青霉素 四环素 氨苄青霉素＋四环素 A + + + + B + + - - C + - - - 29. 低温是限制农作物产量的重要胁迫因子。科学家将寒带植物中的抗寒基因CBFs转移到拟南芥中构建拟南芥耐寒模型，用于植物低温胁迫机制的相关研究。回答下列问题： （注：Ampr代表氨苄青霉素抗性基因） 限制酶 识别序列 限制酶 识别序列 EcoR Ⅰ 5′-G↓AATTC-3′ XmaⅠ 5′-C↓CCGGG-3′ BamH Ⅰ 5′-G↓GATCC-3′ AscⅠ 5′-G↓GCGCGCC-3′ Sph Ⅰ 5′-CGTAC↓G-3′ MunⅠ 5′-C↓AATTG-3′ Sau3A 5′-↓GATC-3′ （1）为了后续能将目的基因正确连接到载体上，应在CBFs基因上游引物的________端添加________（“EcoR Ⅰ”或“BamH Ⅰ”或“Mun Ⅰ”）识别序列。 （2）根据图示Ti质粒的结构，应选用限制酶_______切割Ti质粒，并通过_____酶进行连接。 （3）在培养基中添加_______来筛选成功导入质粒的农杆菌。将拟南芥叶片浸泡在转基因农杆菌菌液中一段时间对其进行转化，然后提取叶片中的DNA，通过PCR对CBFs基因是否整合到拟南芥基因组中进行检测，结果如下图所示。该转基因叶片的基因组中可能已整合CBFs基因，PCR结果中显示出小分子非目标条带，产生的原因可能是_______（填字母）。 A．变性温度太低    B．复性温度太低     C．复性温度太高    D．引物特异性弱 （4）已获取成功转入CBFs基因的拟南芥植株，将其放置在________环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 达一中高2024级2026年春季第二次月考 生物试题 总分：100分时间：75分钟 一、单项选择题（每题2分，合计50分） 1. 下列关于生态系统的叙述，错误的是（　　） A. 生态系统的范围有大有小，地球上最大的生态系统是生物圈 B. 生态系统的结构是指非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者 C. 自养生物一定是生产者，是生态系统的基石 D. 食物链和食物网是生态系统中物质循环和能量流动的主要渠道 【答案】B 【解析】 【详解】A、生态系统是生物群落与它的无机环境相互作用形成的统一整体，范围有大有小，生物圈是地球上所有生物及其生存的无机环境的总和，是地球上最大的生态系统，A正确； B、生态系统的结构包括两部分：一是生态系统的组成成分（非生物的物质和能量、生产者、消费者、分解者），二是营养结构（食物链和食物网），选项仅表述了组成成分，未提及营养结构，表述不完整，B错误； C、自养生物可将无机物转化为有机物，一定是生产者，生产者是生态系统的基石，C正确； D、食物链和食物网是生态系统的营养结构，是生态系统中物质循环和能量流动的主要渠道，D正确。 2. 生态金字塔是生态学中表示不同关系的一种形式，是定量研究生态系统的直观体现。某同学构建了一个金字塔模型(如图)，该模型不能表示（　　） A. 各营养级间的能量传递效率 B. 数量金字塔 C. 生物量金字塔 D. 能量金字塔 【答案】A 【解析】 【详解】A、生态系统中相邻营养级的能量传递效率一般稳定在10%~20%，不会随营养级升高而逐级减小，不能用正金字塔模型表示，A符合题意； B、多数生态系统中，生产者数量最多，初级消费者次之，顶级消费者最少，符合图中正金字塔形，B不符合题意； C、陆地生态系统中，低营养级生物量远大于高营养级，符合正金字塔形，C不符合题意； D、能量在流动中逐级递减，是正金字塔形，完全符合图中模型，D不符合题意。 3. 下列关于图中不同食物链的叙述不正确的是（　　） A. 蛇类在森林生态系统中的该食物链中处于第三营养级 B. 在该农田生态系统中，蛇类粪便中的能量来自蛙的同化吸收 C. 在该水域生态系统中，浮游动物的信息传递可以发生在同种生物之间和不同生物之间 D. 生态系统具有自我调节能力，蛇类数量骤降不会对其稳定性造成影响 【答案】D 【解析】 【详解】A、森林生态系统对应食物链为草→鼠→蛇→鹰，其中生产者草为第一营养级，鼠为第二营养级，蛇处于第三营养级，A正确； B、生物粪便中的能量属于该生物未同化的能量，归属于其上一营养级的同化量，农田生态系统中蛇捕食蛙，因此蛇类粪便中的能量来自蛙的同化量，B正确； C、生态系统的信息传递可发生在同种生物之间、不同种生物之间，也可发生在生物与无机环境之间，因此浮游动物的信息传递可以在同种生物和不同生物之间发生，C正确； D、生态系统的自我调节能力具有一定限度，蛇是食物链中的重要消费者，蛇类数量骤降会导致其捕食对象、天敌的数量发生大幅波动，若超过生态系统的自我调节限度，就会破坏生态系统的稳定性，D错误。 4. 2026年中央一号文件提出：全面推进“三北”工程建设，推广以工代赈（增加当地居民收入）等项目实施方式，巩固扩大防沙治沙成果。“三北”工程全称三北防护林体系建设工程，其核心是构筑北方生态安全屏障、遏制风沙与水土流失。下列叙述错误的是（　　） A. 全面推进“三北”工程建设有利于遏制风沙与水土流失，体现了生物多样性的直接价值 B. 合理种植草本和灌木有利于防风固沙和水土保持，利用了生态工程的协调原理 C. 以工代赈等项目实施方式巩固扩大防沙治沙成果，利用了生态工程的整体原理 D. 全面推进“三北”工程建设期间，应加强立法，合理的开发和利用生物资源 【答案】A 【解析】 【详解】A、遏制风沙与水土流失属于生态系统的生态调节功能，体现的是生物多样性的间接价值，A错误； B、生态工程的协调原理要求处理好生物与环境、生物与生物的协调与适应，兼顾环境容纳量。三北地区降水较少，合理种植耐旱的草本、灌木适应当地环境，可实现防风固沙和水土保持的效果，利用了协调原理，B正确； C、生态工程的整体原理要求生态建设要综合考虑自然、经济、社会的整体效益。以工代赈在治理生态的同时增加居民收入，兼顾了生态效益和民生效益，利用了整体原理，C正确； D、加强立法、合理开发利用生物资源，是实现生态保护和可持续发展的必要措施，符合“三北”工程的建设要求，D正确。 5. 下列关于传统发酵技术及应用的相关叙述正确的是（　　） A. 传统发酵以单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 果酒、果醋发酵过程中PH均有先升高后明显下降的现象 C. 多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是曲霉 D. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料 【答案】D 【解析】 【详解】A、传统发酵利用的是原材料中天然存在的混合菌种，以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，A错误； B、果酒发酵过程中酵母菌呼吸产生的CO2溶于水形成碳酸，果醋发酵过程中醋酸菌代谢产生醋酸，二者发酵过程中pH均持续下降，不存在先升高的现象，B错误； C、豆腐发酵制作腐乳的过程中，有毛霉、酵母、曲霉等多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉，C错误； D、制作果酒时葡萄汁不超过发酵瓶体积的2/3，既可以为酵母菌初期有氧呼吸提供氧气，也能防止发酵过程中发酵液溢出；制作泡菜时盐水淹没全部菜料可创造无氧环境，利于乳酸菌的无氧发酵，D正确。 6. 某研究团队从土壤中筛选获得某菌的纯培养物并对其进行计数，部分步骤如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 纯培养的目的是获得纯净的微生物产物 B. 图中所示接种方法为稀释涂布平板法，也可以使用平板划线法接种 C. 1g样品中该菌的数量约为8.0×108个 D. 这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 【答案】C 【解析】 【详解】A、纯培养的目的是获得由单个微生物繁殖形成的纯培养物（单菌落），实现菌株的纯化，不是获取微生物产物，A错误； B、图中接种方法为稀释涂布平板法，可用于活菌计数，平板划线法仅能用于微生物的分离纯化，无法实现计数，本实验需要计数，不能使用平板划线法接种，B错误； C、三个平板的平均菌落数为（75+80+85）÷3=80个，由图可知稀释倍数为106倍，取0.1mL稀释液涂布，则1g样品中菌的数量为80÷0.1×106=8.0×108个，C正确； D、若两个或多个活菌连在一起，平板上只会形成一个菌落，因此该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，D错误。 7. 发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的是（　　） A. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 B. 优良菌种可从自然界筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得 C. 发酵结束后，采取提取、分离和纯化等方法将菌体分离 D. 筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产 【答案】B 【解析】 【详解】A、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，可直接作为微生物饲料，不需要从微生物细胞中提取，A错误； B、发酵工程的优良菌种既可以从自然界的菌群中筛选获得，也可以通过诱变育种（诱变处理获得突变株）或基因工程育种（定向改造菌种性状）获得，B正确； C、发酵结束后，若要分离菌体通常采用过滤、沉淀的方法；提取、分离和纯化是获取发酵代谢产物的常用方法，C错误； D、筛选出的高产菌种不能直接接种到发酵罐，需要先经过逐步扩大培养，且发酵罐和培养基需经过严格灭菌、在无菌条件下才能接种，避免杂菌污染，D错误。 8. 植物体细胞杂交使远缘杂交不亲和的植物有可能实现遗传物质重组，创造和培养植物新品种。科研人员为改良猕猴桃品质特性，通过PEG融合，进行了中华猕猴桃与美味猕猴桃种间体细胞杂交并成功获得了杂种植株。下列叙述正确的是（　　） A. 过程a表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体 B. 过程b除了使用物理法电融合法、离心法或化学法，还可用低Ca2+—低pH融合法 C. 可以根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生 D. 过程f获得的杂种植株能表现出中华猕猴桃与美味猕猴桃的各种优良性状 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程a为酶解法去除细胞壁获得原生质体，无细胞壁的原生质体在低渗溶液中会吸水涨破，因此该过程需在等渗或略高渗溶液中进行，A错误； B、原生质体融合的化学法包括PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法，不是低Ca2+-低pH融合法，B错误； C、质壁分离发生的前提是活的植物细胞具有细胞壁和原生质层，因此可根据杂种细胞能否发生质壁分离判断其细胞壁是否再生，C正确； D、杂种植株虽含有两种猕猴桃的遗传物质，但基因表达存在选择性表达及基因间的相互调控，无法表现出两个物种的各种优良性状，D错误。 9. 研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. 通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不受季节和天气等的限制 B. 利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物时体现了细胞全能性 C. 在适当条件下给予适宜光照，①愈伤组织能进行光合作用 D. 植物细胞培养技术提高了单个细胞中次生代谢物的含量 【答案】A 【解析】 【详解】A‌、植物细胞培养技术是在无菌、人工控制的环境条件下进行的，因此通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不受季节和天气等自然条件的限制，A正确‌； B‌、细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物的过程中，并没有发育成完整的个体，所以没有体现细胞的全能性，B错误‌； C‌、①为愈伤组织，它是一种未分化的细胞团，细胞内无叶绿体，即使在适当条件下给予适宜光照，也不能进行光合作用，C错误‌； D‌、植物细胞培养技术是通过大量培养植物细胞来获得次生代谢物，提高了次生代谢物的总产量，D错误‌。 10. 间充质祖细胞是一种存在于多种组织中的成体干细胞。科学研究团队通过动物细胞培养技术，构建抗衰型人间充质祖细胞（SRC）模型，并在灵长类动物模型中验证了其抗衰效果。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养SRC时，需要在培养基中添加血清，并通入CO2以刺激细胞呼吸 B. 对SRC进行传代培养时，则应用胰蛋白酶处理后再用离心法收集 C. 间充质祖细胞具有组织特异性，具有发育成完整个体的能力 D. 若SRC能够悬浮在培养液中生长增殖，则不需要进行传代培养 【答案】B 【解析】 【详解】A、培养动物细胞时添加血清可提供细胞生长所需的未知营养，通入CO2的作用是维持培养液的pH，并非刺激细胞呼吸，A错误； B、对贴壁生长的SRC进行传代培养时，需先用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离并分散为单个细胞，再用离心法收集细胞进行分瓶培养，B正确； C、间充质祖细胞是成体干细胞，属于多能干细胞，仅能分化为特定的多种组织细胞，不具有发育成完整个体的能力，C错误； D、悬浮生长的细胞增殖到一定密度后，也会出现营养消耗、代谢废物积累的问题，仍需要进行传代培养，D错误。 11. 如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图，相关叙述错误的是（ ） A. 在培养iPS细胞的过程中定期更换培养液的目的是清除细胞代谢物，防止对细胞自身造成伤害 B. 过程③④分化得到的细胞不同，是因为iPS细胞在培养过程中发生了遗传物质的改变 C. 若iPS细胞来源于病人自身体细胞，再将其分化出的细胞移入患者体内可以避免免疫排斥反应发生 D. 若要了解这4个关键基因在诱导产生iPS细胞时每个基因作用的相对大小，可以在各实验组中依次去掉1个基因来进行推测 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：（1）充足的营养供给，微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。（2）适宜的温度：36.5°，适宜的pH:7.2~7.4。（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（4）气体环境：95%空气+5% CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、定期更换培养液的目的是为细胞提供充足营养物质，并清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身的伤害，因此，体外培养小鼠成纤维细胞和iPS细胞时，可通过定期更换培养液以清除细胞的代谢产物，A正确； B、过程③④分化得到的细胞不同，是因为iPS细胞在培养过程中发生了基因的选择性表达，B错误； C、若iPS细胞来源于病人自身体细胞，经诱导产生的组织和器官再移植回病人体内后，由于移植的组织或器官是由病人自身的细胞经过分裂、分化产生的，因此，理论上可避免发生免疫排斥反应，C正确。 D、若要了解这4个关键基因在诱导产生iPS细胞时每个基因作用的相对大小，可以应用“减法原理”，即在各实验组中依次去掉1个基因来进行推测，D正确。 故选B。 12. 科研人员基于单克隆抗体技术构建了抗体—药物偶联物（ADC）以提升宫颈癌治疗效果并降低药物副作用，具体过程如下图所示。已知YL201是一种新型ADC，由人源抗B7H3单克隆抗体与新型拓扑异构酶I抑制剂通过可被蛋白酶降解的接头偶联而成。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程①形成的融合细胞均为杂交瘤细胞 B. 过程①形成的融合细胞无需筛选即可进行克隆化培养和抗体检测 C. 杂交瘤细胞的培养只能在细胞培养液中进行 D. YL201由人源抗B7H3单克隆抗体a、新型拓扑异构酶I抑制剂b和接头组成 【答案】D 【解析】 【详解】A、过程①是细胞融合，融合细胞除了杂交瘤细胞（B淋巴细胞 + 骨髓瘤细胞），还有B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞，并非均为杂交瘤细胞，A错误； B、过程①形成的融合细胞有同种类型融合细胞和不同类型融合细胞，需要经过特定的选择培养基进行筛选，才能获得杂交瘤细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、杂交瘤细胞可以注射到小鼠腹腔内或在体外培养条件下进行培养，以达到增殖的目的，C错误； D、根据题干和图示，YL201由人源抗B7H3单克隆抗体a、新型拓扑异构酶I抑制剂b和可被蛋白酶降解的接头组成，D正确。 13. 中国科学家成功克隆了一只濒危物种北极狼，由于雌性北极狼稀缺，科学家选择了比格犬作为受体及代孕母亲，通过克隆技术获得北极狼的基本过程如图 所示。下列叙述错误的是（ ） A. 通常采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核 B. 需对代孕比格犬注射激素使其同期发情以接受移植的胚胎 C. 克隆狼的线粒体基因与提供卵母细胞的比格犬相同 D. 将重组细胞直接移植到代孕犬子宫中可缩短克隆周期 【答案】D 【解析】 【详解】A、在核移植技术中，通常采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核，这是克隆动物的常规操作，A正确； B、胚胎移植前，需要对代孕母犬注射激素进行同期发情处理，使子宫环境适合接受移植的胚胎，B正确； C、克隆动物的核基因来自供体（北极狼），而线粒体基因来自卵母细胞（比格犬），所以克隆狼的线粒体基因与提供卵母细胞的比格犬相同，C正确； D、重组细胞需要先在体外培养到早期胚胎（如桑葚胚、囊胚阶段），才能移植到代孕犬子宫中，不能直接移植，D错误。 14. 下图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关阶段。下列叙述错误的是（　　） A. a过程表示卵裂，胚胎总体积不增加，有机物含量减少 B. Ⅰ阶段形成的致密细胞团，形似桑葚，称为桑葚胚 C. Ⅱ阶段的细胞逐渐分化，分化出了内细胞团和滋养层 D. Ⅲ阶段随着胚胎逐步扩大，透明带破裂，发生孵化 【答案】D 【解析】 【详解】A、a过程为卵裂，此阶段细胞通过有丝分裂增殖，但胚胎总体积不增加甚至略有减小，胚胎无法从外界获取营养，细胞呼吸不断消耗有机物，因此有机物含量减少，A正确； B、Ⅰ阶段为桑葚胚，细胞聚集形成致密的细胞团，形态类似桑葚，因此得名桑葚胚，B正确； C、Ⅱ阶段为囊胚期，细胞开始出现分化，可分化为内部的内细胞团和外层的滋养层，C正确； D、孵化发生在囊胚阶段：囊胚扩大，透明带破裂，胚胎从透明带中伸展出来；Ⅲ阶段已经是原肠胚，孵化在Ⅲ阶段之前完成，D错误。 15. 胚胎工程作为一种可以实现大型家畜高水平快速扩繁的辅助生殖手段，在荷斯坦奶牛（2n=60）快速繁殖中的应用已相当成熟，基本过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①获得的精子培养在获能液中使其获能，获能液中常见有效成分有肝素、Ca2+ B. 过程②获得的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期 C. 过程③为体外受精是在体外模拟体内受精环境的条件下进行的 D. 过程④中发生的细胞分裂方式是有丝分裂，过程⑤不会发生免疫排斥 【答案】A 【解析】 【详解】A、将过程①获得的精子置于人工配制的获能液中使其获能，常见的获能液的有效成分有肝素、钙离子载体等，A错误； B、体外受精前，采集得到的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期，才具备与获能精子结合的受精能力，B正确； C、体外受精需要模拟雌性动物体内输卵管的受精环境，保证精子和卵母细胞能正常完成受精过程，C正确； D、过程④是受精卵发育为早期胚胎，细胞分裂方式为有丝分裂；胚胎移植过程中，受体母牛的免疫系统会将供体胚胎识别为“自身”成分，不会发生免疫排斥反应，D正确。 16. 下列关于基因工程的原理与操作说法错误的是（　　） A. 基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的 B. 基因工程的核心原理是基因突变，可定向改造生物的遗传性状 C. 基因工程中用作载体的质粒通常是经过人工改造的 D. 基因工程需用的工具有限制酶、DNA连接酶和载体 【答案】B 【解析】 【详解】A、基因工程的操作对象是DNA分子，对目的基因的剪切、拼接等操作都在DNA分子水平进行，A正确； B、基因工程的核心原理是基因重组，可按照人们的意愿定向改造生物的遗传性状，并非基因突变，B错误； C、天然质粒通常不具备载体所需的全部条件（如多个限制酶切割位点、标记基因等），因此基因工程中用作载体的质粒大多是经过人工改造的，C正确； D、基因工程的操作工具包括切割DNA的限制酶、连接DNA片段的DNA连接酶，以及将目的基因导入受体细胞的载体，D正确。 17. 关于重组DNA技术的基本工具，下列说法正确的是（　　） A. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B. 限制酶能切割T2噬菌体和烟草花叶病毒的核酸 C. 质粒是独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外的环状双链DNA分子 D. 只有用相同限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，才能形成重组质粒 【答案】C 【解析】 【详解】 A、DNA连接酶的作用是连接两个DNA片段形成磷酸二酯键；将单个脱氧核苷酸加到已有核苷酸片段上的酶是DNA聚合酶，A错误； B、限制酶只能特异性识别并切割双链DNA的特定序列，烟草花叶病毒的核酸是RNA，无法被限制酶切割，B错误； C、质粒是独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，具有自我复制能力的环状双链DNA分子，符合质粒的定义，C正确； D、若两种不同的限制酶切割后可产生相同的黏性末端（同尾酶），分别处理含目的基因的DNA片段和质粒，也可以形成重组质粒，D错误。 18. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A. 菜花、猪血、酵母菌均可作为DNA粗提取的实验材料 B. 将洋葱研磨液离心后保留沉淀物并加入冷酒精静置后，可收集到DNA C. 将琼脂糖融化后再稍冷却后，加入适量的核酸染料并进行混匀 D. 可用电泳缓冲液中的指示剂显示DNA分子电泳时的位置 【答案】C 【解析】 【详解】A、猪是哺乳动物，其成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，几乎不含DNA，因此猪血不能作为DNA粗提取的实验材料，A错误； B、洋葱研磨液离心后，DNA溶解在上清液中，沉淀物是细胞残渣等杂质，应取上清液加入冷酒精静置析出DNA，B错误； C、制备琼脂糖凝胶时，将琼脂糖加热融化后稍冷却，再加入核酸染料混匀，可避免高温破坏染料活性，该操作符合实验要求，C正确； D、指示剂存在于凝胶载样缓冲液中，电泳缓冲液不添加指示剂，D错误。 19. 下列有关获取目的基因的叙述，错误的是（　　） A. 目的基因主要是指编码蛋白质的基因 B. 从相关的已知结构和功能清晰的基因中筛选目的基因是较为有效的方法之一 C. 可人工合成目的基因或通过构建基因文库来获取目的基因 D. PCR扩增目的基因的过程中，模板和引物的数量逐渐减少 【答案】D 【解析】 【详解】A、目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，也可以是具有调控作用的因子，A正确； B、若已知基因的结构和功能，直接从中筛选所需目的基因针对性强、效率高，是较为有效的获取方法，B正确； C．获取目的基因的方法包括人工合成（如逆转录法、化学合成法）、从构建的基因组文库或cDNA文库中获取等，C正确； D、PCR扩增过程中，每一轮扩增产生的目的基因片段均可作为下一轮扩增的模板，因此模板数量逐渐增多；引物会与模板结合参与子链合成，数量逐渐减少，D错误。 20. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B. c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C. 高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D. 若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 【答案】D 【解析】 【详解】A、PCR的3个步骤依次是a变性（高温，95℃左右，双链解旋）、b复性（退火，55℃左右，引物结合模板）、c延伸（72℃左右，Taq酶合成DNA），对应温度是先升高、再降低、再升高，不是依次降低，A错误； B、c是延伸过程，DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸DNA链，B错误； C、TaqDNA聚合酶是耐热的DNA聚合酶，在PCR反应体系中需要加入Mg2+来激活该酶的活性，C错误； D、1个DNA进行n轮循环，最终得到2ⁿ个DNA分子，每个DNA复制时都需要2个引物（引物Ⅰ和引物Ⅱ），若1个DNA进行6轮循环，共合成26=64个DNA分子，其中只有最初的模板DNA分子不需要引物Ⅰ和引物Ⅱ，所以需要消耗引物Ⅰ和引物Ⅱ的数量都是64-1=63，D正确。 21. 为提高番茄的储藏时间，研究人员将乙烯受体基因（Ers1）重新导回番茄细胞，使其原有Ers1基因的翻译受抑制，具体过程如图。已知限制酶EcoRⅠ、XhoⅠ和BamHⅠ切割后露出的黏性末端碱基序列不同，下列说法错误的是（　　） 注：LB、RB分别为T-DNA的左边界、右边界；KanR为卡那霉素抗性基因 A. Ers1基因A、B两端需分别添加XhoⅠ和EcoRⅠ的识别序列 B. 载体构建完成后将其导入农杆菌细胞，可利用卡那霉素进行筛选 C. 将番茄叶圆片与农杆菌共培养，质粒会进入到叶肉细胞并稳定存在 D. 利用乙烯受体蛋白抗体鉴定转基因番茄时，可能无法获得清晰条带 【答案】C 【解析】 【详解】A、该技术是通过反义RNA抑制原有基因的翻译，需要将Ers1基因反向插入到质粒的启动子和终止子之间。质粒中启动子下游依次是EcoRⅠ、XhoⅠ位点，要实现反向插入，需要Ers1基因A端加XhoⅠ识别序列、B端加EcoRⅠ识别序列，A正确； B、该质粒上卡那霉素抗性基因（KanR）是标记基因，导入重组质粒的农杆菌可在含卡那霉素的培养基中存活，因此可以用卡那霉素筛选，B正确； C、农杆菌转化法中，仅Ti质粒上的T-DNA（携带目的基因）会从农杆菌的质粒上切割下来，进入番茄细胞并整合到植物细胞染色体DNA上，整个质粒不会进入叶肉细胞稳定存在，C错误； D、转基因番茄中原有Ers1基因的翻译被抑制，乙烯受体蛋白含量很低，进行抗原-抗体杂交时，会因为蛋白含量过低无法获得清晰条带，D正确。 22. 将目的基因导入受体细胞是基因工程的重要操作，下列方法的选择中正确的是（ ） A. 常用Ca2+处理小鼠受精卵使其易吸收周围环境中的DNA分子 B. 可用花粉管通道法将目的基因导入玉米的茎尖分生区细胞中 C. 常用显微注射法将目的基因导入大肠杆菌细胞中 D. 农杆菌转化法需先将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中 【答案】D 【解析】 【详解】A、Ca2+处理法仅适用于原核细胞制备感受态细胞，使其易于吸收外源DNA；小鼠受精卵为动物细胞，常用显微注射法导入目的基因，A错误； B、花粉管通道法是利用植物授粉后形成的花粉管通道，将目的基因导入胚囊中的受精卵或早期胚细胞，无法用于导入茎尖分生区细胞，B错误； C、大肠杆菌为原核生物，常用Ca2+处理成感受态细胞导入目的基因；显微注射法是将目的基因导入动物细胞的常用方法，C错误； D、农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的特点，因此农杆菌转化法需先将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，D正确。 23. 下列关于基因工程中目的基因的检测和鉴定步骤的叙述，错误的是（　　） A. 可用PCR技术检测受体细胞染色体是否插入目的基因 B. 可用PCR技术检测目的基因是否完成转录和翻译过程 C. 可用抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否合成相应蛋白质 D. 可在个体水平检测和鉴定目的基因是否稳定表达 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR技术可特异性扩增目的基因序列，若受体细胞染色体插入了目的基因，根据目的基因设计引物就能通过PCR得到对应的扩增产物，A正确； B、PCR技术的检测对象是核酸，无法检测翻译过程（翻译产物为蛋白质，不能用PCR检测），B错误； C、目的基因翻译出的蛋白质可作为抗原与对应的特异性抗体发生特异性结合，因此抗原—抗体杂交技术可检测目的基因是否合成了相应蛋白质，C正确； D、可在个体水平通过生物学实验检测性状，例如对转基因抗虫棉进行抗虫接种实验，鉴定目的基因是否稳定表达出相应性状，D正确。 24. 利用膀胱生物反应器生产人血清白蛋白，基本流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 操作②是对早期胚胎进行移植，移植前需对受体母猪进行超数排卵处理 B. 膀胱生物反应器不受性别及发育限制，产量一定高于乳腺生物反应器 C. 若操作①和操作②成功，则操作③就能从尿液中检测到人血清白蛋白 D. 操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子可避免对其他组织产生影响 【答案】D 【解析】 【详解】A、操作②是胚胎移植，移植前需要对受体母猪进行同期发情处理，目的是让供体和受体的生理状态一致，为胚胎着床提供相同的生理环境；而超数排卵处理是针对供体母猪的，用来获得更多的卵母细胞，A错误； B、膀胱生物反应器确实不受性别及发育阶段限制，相比乳腺生物反应器只能在雌性成体动物泌乳期发挥作用有优势，产量会受到基因表达效率、个体健康状况等多种因素影响，不能直接判定膀胱生物反应器产量更高，B错误； C、操作①是将目的基因导入受精卵，操作②是胚胎移植获得转基因个体，但只有当目的基因在膀胱上皮细胞成功表达时，才能从尿液中检测到人血清白蛋白，仅仅操作成功不代表目的基因一定在特定组织顺利表达，C错误； D、操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子，能够驱动目的基因只在膀胱组织中表达，避免在其他组织中表达产生不必要的影响，这是利用特异性启动子实现基因定向表达的典型应用，D正确。 25. 基因工程在农牧业、医药卫生领域、食品工业方面都有广泛的应用，以下叙述错误的是（　　） A. 将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速率 B. 将病原体的相关抗原转入适当的微生物细胞，可生产相关疫苗 C. 用基因工程技术获得的工业酶的优点：纯度高、生产成本低、生产效率高 D. 将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 【答案】B 【解析】 【详解】A、生长激素具有促进动物生长的作用，将外源生长激素基因导入动物受精卵培育得到的转基因动物可正常表达生长激素，进而提高生长速率，A正确； B、基因工程的核心是导入目的基因使其在受体细胞中表达，生产疫苗时需要将病原体编码抗原的基因转入微生物细胞，而非直接转入抗原（多为蛋白质类物质），抗原本身导入微生物后无法被复制、持续合成，不能用于疫苗生产，B错误； C、用基因工程培育的工程菌可特异性表达目标工业酶，相比传统从生物组织中提取酶的方法，具有纯度高、生产成本低、生产效率高的优势，C正确； D、来源于病毒的外壳蛋白基因、复制酶基因等属于抗病毒基因，部分来源于真菌的抗真菌相关功能基因也属于抗病基因，将这类基因导入植物可使植物获得相应抗病性状，培育转基因抗病植物，D正确； 二、简答题（除标注外每空1分，合计50分） 26. 奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。请回答下列问题： （1）发芽的大麦释放________酶，参与糖化过程的发生。如果利用________处理大麦种子，可以使大麦种子无需发芽就能产生该酶。 （2）发酵原料中的淀粉主要为微生物的生长繁殖提供______（营养物质）。扩大培养时所用的培养基属于______（填“固体”或“液体”）培养基。调节培养基pH应在灭菌_____（填“前”或“后”）进行 （3）接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，________（填“能”或“不能”）同时产生乙酸和乳酸。 （4）主发酵阶段在菌种活化的过程中，需定时取样，检测酵母的生长状况。可利用稀释涂布平板法检测酵母菌的数量，其原理是________________。 （5）整个发酵过程的中心环节是__________； 在制作果酒时，有时候酒会变酸，其反应简式为__________________。 【答案】（1） ①. 淀粉##α-淀粉 ②. 赤霉素 （2） ①. 碳源 ②. 液体 ③. 前 （3）不能 （4）当样品的稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 （5） ①. 发酵罐内发酵 ②. C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量 【解析】 【小问1详解】 发芽的大麦会释放淀粉酶 ，能将淀粉水解为可发酵的糖，参与糖化过程。如果用赤霉素处理大麦种子，即使不发芽，也能诱导种子合成淀粉酶，从而简化生产流程。 【小问2详解】 淀粉属于糖类，主要为微生物生长繁殖提供碳源。扩大培养时为使微生物充分接触营养物质，所用培养基为液体培养基。为避免杂菌污染，调节培养基pH应在灭菌前进行。 【小问3详解】 醋酸菌是好氧菌，乳酸菌是厌氧菌，二者的代谢条件相互矛盾，在同一容器中发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸（有氧时乳酸菌受抑制，无氧时醋酸菌无法代谢）。 【小问4详解】 稀释涂布平板法检测酵母菌数量的原理是当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有的活菌数。 【小问5详解】 整个发酵过程的中心环节是发酵罐内发酵；制作果酒时酒变酸是因为醋酸菌将乙醇变为乙酸，反应简式为C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。 27. 骆驼是被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝。近些年，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题： （1）①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有____，受精的标志是_____。 （2）经过过程③操作后，可采用物理或化学方法，如____________（答出一种即可）方法激活重构胚，欲获得更多的胚胎，可以对囊胚进行________操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将_______________，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）获得的F后代与B驯养单峰骆驼性状__________（填“完全”或“不完全”）相同，从遗传物质的角度分析，其原因是_______________（答出2点）。 （4）与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为_______，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选____________细胞，避免对胚胎造成影响。 【答案】（1） ①. 透明带反应、卵细胞膜反应 ②. 在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体或雌、雄原核 （2） ①. 电刺激##Ca2+载体##乙醇##蛋白酶合成抑制剂 ②. 胚胎分割 ③. 囊胚的内细胞团均等分割 （3） ①. 不完全 ②. F后代的核遗传物质主要来自B骆驼，细胞质遗传物质来自A骆驼，另外生物的性状还受环境因素的影响 （4） ①. 有性生殖 ②. 滋养层 【解析】 【小问1详解】 ①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有透明带反应和卵细胞膜反应，受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体或雌、雄原核。 【小问2详解】 经过过程③操作后，可采用物理或化学方法，如电刺激（或Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）方法激活重构胚。欲获得更多的胚胎，可以对囊胚进行胚胎分割操作，操作过程中必须将囊胚的内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【小问3详解】 获得的F后代的细胞核遗传物质来自B驯养单峰骆驼♀，细胞质遗传物质来自A野化单峰骆驼♀，同时生物的性状还受环境因素的影响，所以F后代与B驯养单峰骆驼性状不完全相同。 【小问4详解】 与F相比，E更具有多样性，原因是E的产生过程经过了受精作用，其生殖方式为有性生殖，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。进行性别鉴定应选滋养层细胞，因为该部位的细胞将来发育成胎盘和胎膜，可以避免对胚胎造成影响。 28. 图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图，图2为pBR322质粒的结构示意图，图中EcoRI、Smal、BamHI和HindIII为限制酶，箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题： （1）人工构建基因表达载体时，该载体除了含特定限制酶切割位点外，还要有________（答出两点）等，切割质粒和目的基因通常使用两种限制酶，是为了防止__________。 （2）采用PCR技术对图1中胰岛素基因进行扩增时，除了向反应体系中加入相应模板和引物外，还需要加入________（答出2点），DNA新链的合成方向是_______，扩增过程中应该选择引物_________，其原因是_____________________。 （3）成功构建的基因表达载体含有人胰岛素基因及其启动子，其作用是___________，若利用酵母菌作受体细胞生产胰岛素等分泌蛋白，与大肠杆菌相比，酵母菌的优势有________。 （4）为筛选出含有重组质粒的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“＋”代表生长，“-”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是_______（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是______________。  菌落类型平板类型 无抗生素 氨苄青霉素 四环素 氨苄青霉素＋四环素 A + + + + B + + - - C + - - - 【答案】（1） ①. 标记基因、复制原点、启动子、终止子 ②. 质粒和目的基因自身环化及反向连接 （2） ①. 四种脱氧核苷酸、Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）、缓冲液 ②. 5'→3' ③. 引物4和引物5 ④. 扩增所得的DNA片段需要限制酶（BamH Ⅰ和Hind Ⅲ）的切割位点 （3） ①. 提供RNA聚合酶特异性识别和结合位点，驱动基因的转录 ②. 酵母菌为真核细胞，含有内质网和高尔基体，可对核糖体合成的蛋白质进行加工 （4） ①. B ②. A类菌落导入pBR322质粒（普通质粒或空质粒）、C类菌落没有导入质粒 【解析】 【小问1详解】 基因表达载体的构件有：标记基因、复制原点、启动子、终止子、目的基因。构建载体时一般选用双酶切，优点是防止质粒和目的基因自身环化及反向连接。 【小问2详解】 PCR反应体系中有缓冲液（加Mg2+）、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶等。在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，DNA新链的合成方向是5‘→3’。由于在目的基因和载体连接时，需要限制酶切割（BamH Ⅰ和Hind Ⅲ），所以扩增所得的DNA片段需要限制酶（BamH Ⅰ和Hind Ⅲ）的切割位点，需要在目的基因两侧添加该酶切位点，且引物与模板链的3'端结合，故选用引物4和引物5扩增。 【小问3详解】 启动子的作用是提供RNA聚合酶特异性识别和结合位点，驱动基因的转录。大肠杆菌是原核细胞，只有核糖体一种细胞器，而酵母菌为真核细胞，含有内质网和高尔基体，可对核糖体合成的蛋白质进行加工。 【小问4详解】 酶切时会破坏四环素的抗性基因，氨苄青霉素抗性基因完整，导入了目的基因的受体细胞可以在氨苄青霉素的培养基上生存，在四环素的培养基上不能生存，应选择的菌落是B。C在抗生素的培养基上都不能生存，没有导入质粒，A都能生存，A类菌落导入pBR322质粒。 29. 低温是限制农作物产量的重要胁迫因子。科学家将寒带植物中的抗寒基因CBFs转移到拟南芥中构建拟南芥耐寒模型，用于植物低温胁迫机制的相关研究。回答下列问题： （注：Ampr代表氨苄青霉素抗性基因） 限制酶 识别序列 限制酶 识别序列 EcoR Ⅰ 5′-G↓AATTC-3′ XmaⅠ 5′-C↓CCGGG-3′ BamH Ⅰ 5′-G↓GATCC-3′ AscⅠ 5′-G↓GCGCGCC-3′ Sph Ⅰ 5′-CGTAC↓G-3′ MunⅠ 5′-C↓AATTG-3′ Sau3A 5′-↓GATC-3′ （1）为了后续能将目的基因正确连接到载体上，应在CBFs基因上游引物的________端添加________（“EcoR Ⅰ”或“BamH Ⅰ”或“Mun Ⅰ”）识别序列。 （2）根据图示Ti质粒的结构，应选用限制酶_______切割Ti质粒，并通过_____酶进行连接。 （3）在培养基中添加_______来筛选成功导入质粒的农杆菌。将拟南芥叶片浸泡在转基因农杆菌菌液中一段时间对其进行转化，然后提取叶片中的DNA，通过PCR对CBFs基因是否整合到拟南芥基因组中进行检测，结果如下图所示。该转基因叶片的基因组中可能已整合CBFs基因，PCR结果中显示出小分子非目标条带，产生的原因可能是_______（填字母）。 A．变性温度太低    B．复性温度太低     C．复性温度太高    D．引物特异性弱 （4）已获取成功转入CBFs基因的拟南芥植株，将其放置在________环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 【答案】（1） ①. 5′ ②. Mun Ⅰ （2） ①. EcoR Ⅰ和Sph Ⅰ ②. DNA连接 （3） ①. 氨苄青霉素 ②. BD （4）寒冷 【解析】 【小问1详解】 为保证目的基因正确连接到载体，需在引物5'端添加限制酶识别序列，据表可知，EcoR Ⅰ和Mun Ⅰ所产生的黏性末端相同，是同尾酶，EcoR Ⅰ能切割目的基因不能用，结合后续Ti质粒切割使用的酶（见第2问）及图示酶切位点分布，上游片段中EcoR Ⅰ靠近目的基因起始端，EcoR Ⅰ能切割目的基因不能用，则使用其同尾酶Mun Ⅰ，且不切割基因内部，因此上游引物的5'端 添加Mun Ⅰ识别序列。 【小问2详解】 BamHⅠ 切割标记基因不能用，Sau3A的识别序列包含BamH Ⅰ的识别序列也不能用，Ti质粒的T-DNA区域需保留完整以确保目的基因转移，图示中EcoR Ⅰ和Sph Ⅰ位于T-DNA内且无重叠，切割后可产生互补末端便于连接，故选用EcoR Ⅰ和Sph Ⅰ，切割后通过DNA连接酶将目的基因和切割后的Ti质粒进行连接。 【小问3详解】 在培养基中添加氨苄青霉素来筛选成功导入质粒的农杆菌，因为Ti质粒上有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）。PCR结果中显示出小分子非目标条带，原因可能是复性温度太低，导致引物与模板的结合特异性降低；引物特异性弱也会出现非特异性扩增，产生小分子条带，BD正确，AC错误。 【小问4详解】 将成功转入CBFs基因的拟南芥植株放在寒冷环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $