专题02 细胞工程及胚胎工程（期末真题汇编，天津专用）高二生物下学期

**基本信息** 聚焦细胞工程及胚胎工程三大核心考点，整合天津多区期末真题，突出科技前沿情境与实验探究能力考查，如“人造咖啡”“抗体-药物偶联物”等实例。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|约30题|植物组织培养、单克隆抗体制备、胚胎移植等|结合“红豆杉紫杉醇生产”“蝴蝶兰微型繁殖”等实际应用，考查操作原理与技术细节| |非选择题|约8题|细胞融合、基因编辑、胚胎工程流程|以“兰花组织培养”“双特异性抗体制备”等流程图为载体，综合考查实验设计与结果分析能力|

专题02 细胞工程及胚胎工程 3大高频考点概览 考点01 植物细胞工程及其应用（植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术等） 考点02 动物细胞工程及其应用（动物细胞培养、融合及其单克隆抗体制备、体细胞和移植技术及克隆动物等） 考点03 胚胎工程及其应用 （体内受精及受精作用、体外受精、胚胎移植等） 地 城 考点01 植物细胞工程及其应用（植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术等） 一、单选题 1．（24-25高二下·天津滨海新·期末）红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对癌症有一定的疗效。下图是植物组织培养和细胞培养的流程图，图中②为愈伤组织，通过B过程可最终产生新的植株。通过C过程可产生大量细胞。下列相关叙述中错误的是（    ） A．A过程是脱分化，该过程中细胞中增殖的方式是有丝分裂 B．B是再分化，此过程的实质是基因的选择性表达 C．紫杉醇属于初生代谢物，可以从⑤中获取 D．培养⑤一般采用液体培养基，有利于细胞的增殖 2．（24-25高二下·天津河西·期末）蝴蝶兰（4N＝76）的观赏价值极高，是切花市场的热销产品。西青区蝴蝶兰产业园利用微型繁殖技术进行快速培育，2024年白色蝴蝶兰鲜切花产量超过300万枝。下列说法错误的是（　　） A．微型繁殖技术能保持优良品种的遗传特性实现快速繁殖 B．细胞分裂素和生长素的比值会影响培育过程中基因表达的顺序 C．蝴蝶兰幼嫩茎段组织培养过程中细胞中会出现38个四分体 D．微型繁殖时使用的培养基要严格灭菌，外植体只需要进行消毒即可 3．（24-25高二下·天津部分区·期末）右图为玉米（染色体数为2n）组织培养的相关研究，亲本植物的基因型为Aa，A、B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，图中融合细胞只考虑两两融合。下列叙述正确的是（　　） A．图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，接着用次氯酸钠处理30min后，最后用无菌水清洗2~3次 B．研究中A、B、C、D的染色体数分别是1n、2n、2n、4n C．图中①表示再分化过程，A过程得到的子代植株基因型为Aa D．在研究过程中，用显微镜可以观察到愈伤组织的各细胞形态大小一致 4．（24-25高二下·天津部分区·期末）与常规栽培技术相比，利用植物细胞培养进行药用次生代谢产物的生产具有显著的优越性，根据不同的需求可以采用不同的技术流程（如图）。相关叙述正确的是（　　） A．培养体系1中的外源基因导入前需用Ca2+处理受体细胞 B．培养体系2中获得的愈伤组织细胞应具有全能性，其细胞形态和结构与外植体细胞相同 C．在将经灭菌处理后的外植体诱导形成愈伤组织期间，一般不需要光照 D．在由外植体诱导形成愈伤组织的过程中，细胞发生了分裂及基因的选择性表达 5．（24-25高二下·天津南开·期末）辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变 B．①过程受外源激素的调控，②过程只受内源激素的调控 C．用幼嫩的根和茎作为外植体，获得的脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D．通过细胞培养获得辣椒素的过程未体现细胞的全能性 6．（24-25高二下·天津河西·期末）甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的甘草西定具有抗癌作用。通过植物细胞工程对甘草进行相关处理，过程如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．过程①为接种外植体，过程②应避光处理从而获得愈伤组织 B．过程③④培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 C．过程⑤获得原生质体的过程需要用到纤维素酶和果胶酶 D．过程⑥获得大量的甘草西定体现了愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点 7．（24-25高二下·天津西青·期末）科研人员将苜蓿与百脉根（富含单宁，单宁可减少膨胀病的发生）进行植物体细胞杂交以期获得抗膨胀病苜蓿新品种，技术路线如图所示。下列说法正确的是（　　） A．图中①过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶去除细胞壁 B．愈伤组织细胞通过减数分裂和有丝分裂形成了植物体 C．相比于生芽培养基，生根培养基中生长素含量比例较低 D．融合细胞生成细胞壁时，高尔基体和线粒体的活动可能增强 8．（24-25高二下·天津西青·期末）利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列说法，不正确的是（    ） A．利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B．利用“细胞农业”获得植物产品，可减少对森林的大面积砍伐 C．“人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D．“人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 9．（24-25高二下·天津西青·期末）大豆属于一年生经济作物。图中甲、乙表示大豆两个品种，基因A/a、B/b位于两对同源染色体上。为培育基因型为AAbb的新品种，研究人员尝试了图中培育方案，①~⑥为不同育种过程。下列叙述正确的是（    ） A．①②表示杂交育种，第四年才能筛选出基因型为AAbb的植株 B．③表示单倍体育种，可获得基因型为Ab、AB、aB、ab的植株 C．④需要X射线等处理，可定向得到基因型为Aabb的新品种 D．②和⑥需自交处理，⑤需用秋水仙素处理单倍体的种子或幼苗 10．（24-25高二下·天津西青·期末）研究表明，高浓度乙醇会使菌体表面蛋白迅速脱水凝固，从而影响乙醇继续渗入菌体发挥作用，降低杀菌效果。以下说法正确的是（    ） A．涂布器在灼烧前通常要浸泡在一定浓度的乙醇中 B．植物组织培养时，不能使用乙醇对外植体消毒 C．适宜浓度的乙醇能杀死物体内外所有的微生物 D．无水乙醇的消毒效果优于其他浓度的乙醇 11．（24-25高二下·天津河东·期末）胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（    ）    A．制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁 B．聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合 C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 12．（24-25高二下·天津河北·期末）兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（    ）    A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 13．（24-25高二下·天津和平·期末）如图为植物细胞融合及组织培养过程的示意图，下列有关叙述不正确的是（    ） A．植物体细胞杂交的最大优点在于克服远缘杂交不亲和的障碍 B．杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性 C．愈伤组织不可以进行光合作用，其培养基中需要糖类、氨基酸等有机营养 D．原生质体A和B融合可以用灭活的病毒诱导 二、非选择题 1．（24-25高二下·天津西青·期末）兰花象征高贵、优雅、纯洁。野生兰花多生于幽谷，品类繁多，具有极高的观赏价值，数量稀少。兰花种子小如粉末，无胚乳，成熟需半年。成熟后随风飘散，遇到合适的土壤与菌结合形成“龙蛋”，“龙蛋”从萌发到出苗还需要一年，自然繁殖困难。在云南兰花种植地主要通过植物组织培养快速繁殖再放归野外。培养过程及MS培养基部分成分如图和如表。 MS培养基的主要成分 大量元素 如硝酸铵、硝酸钾、磷酸盐、钙盐、镁盐等 微量元素 铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、硼酸等 有机物 包括维生素（如维生素B1、维生素B6、生物素等）和糖类（主要是蔗糖） 植物激素 生长素、细胞分裂素等 (1)①过程表示__________。②过程一般需要光，作用是__________。 (2)筛选遗传性状优良的外植体作为实验材料，接种时防止倒插与__________有关。 (3)培养基中蔗糖作用__________（答出1点即可）。 (4)为了方便运输将培养得到的胚状体包裹上人工种皮制备人工种子，结合题中信息和植物组织培养的条件推测人工种子中还应该包含什么成分__________（答出1点即可）。 2．（24-25高二下·天津滨海新·期末）下图为细胞融合技术的一些过程，请分析并回答下列问题： (1)若A、B细胞为植物细胞，在细胞融合之前去除细胞壁需______酶处理。 (2)若A、B细胞为动物细胞，区别于植物原生质体诱导融合的方法有______。细胞融合的原理是______。 (3)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为______细胞，该细胞的特点是______。 3．（24-25高二下·天津和平·期末）植物组织培养技术应用广泛，科研人员用拟南芥探索获得大量愈伤组织的途径。 (1)组培的理论基础是植物细胞具有_____，即细胞经过分裂分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。切取外植体时的损伤可促进内源生长素（IAA）合成并运输到受伤部位，诱导细胞分裂分化。因此，组培时常添加2，4-D、NAA等生长素类调节剂。 (2)含较高浓度2，4-D的培养基（2，4-D-CIM）可促进愈伤组织增殖，但在实践中发现，2，4-D-CIM中的外植体脱分化形成愈伤组织延退。为探究其原因，进行相关实验。 ①检测不同培养基中叶片外植体细胞中IAA合成酶基因（YUC）的表达量，由图1结果可知：较高浓度2，4-D_____（促进，抑制）IAA的合成。 ②研究者推测，一定量IAA有利于愈伤组织的形成。为此，在2，4-D-CIM的基础上，再分别添加IAA、NAA、检测接种后外植体细胞IAA响应基因W1的表达情况，结果如图2所示，同时还测量了各组愈伤组织形成量，结果显示其与W1表达量正相关，证明推测成立。添加NAA组是为了进一步确认_____。 (3)根据上述所有实验结果，在答题卡方框中填相关基因，括号中填“+”（表示促进）或“-”（表示抑制），完善在愈伤组织形成和增殖过程中相关物质的关系模式图_____。 4．（24-25高二下·天津河北·期末）基因递送是植物遗传改良的重要技术之一，我国多个实验室合作开发了一种新型基因递送系统（切—浸—生芽（Cut-Dip-Budding,简称 CDB法）。图1与图2分别是利用常规转化法和CDB法在某植物中递送基因的示意图。 回答下列问题。 (1)图1中，从外植体转变成愈伤组织的过程属于________；从愈伤组织到幼苗的培养过程需要的激素有生长素和__________，该过程还需要光照，其作用是__________。 (2)图1中的愈伤组织，若不经过共培养环节，直接诱导培养得到的植株可以保持植株A的_。图1中，含有外源基因的转化植株A若用于生产种子，其包装需标注________。 (3)图1与图2中，农杆菌侵染植物细胞时，可将外源基因递送到植物细胞中的原因是_________。 (4)已知某酶（PDS）缺失会导致植株白化。某团队构建了用于敲除PDS 基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体（含有绿色荧光蛋白标记基因），利用图2中的CDB法将该重组载体导入植株B，长出毛状根，成功获得转化植株B。据此分析，从毛状根中获得阳性毛状根段的方法是________________，图2中，鉴定导入幼苗中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是___________，依据是_________。 地 城 考点02 动物细胞工程及其应用（动物细胞培养、融合及其单克隆抗体制备等） 一、 单选题 （24-25高二下·天津部分区·期末）阅读下面的材料，完成问题。 利用基因工程对动植物的遗传物质进行改造，可制作动植物生物反应器，在药物蛋白，疫苗等的生产上有着广泛的应用，我国在这方面也取得重大进展 材料一：动物生物反应器的研究开发重点是动物乳腺反应器和动物血液反应器。我国“动物乳腺生物反应器”研究取得重要成果，7只含有人生长激素基因的兔子在深圳培育成功，还有一批已接受转基因胚胎移植的牛和羊等待最后检测。 材料二：我国对植物生物反应器研究的成果有： 成果1将乙型肝炎病毒包膜的蛋白基因导入马铃薯和番茄中，获得了高效表达该外源基因的工程植株。 成果2已将产毒素大肠杆菌热敏毒素b亚基及定居因子CS6B抗原蛋白基因导入马铃薯中，获得了高效表达重组抗原蛋白的转基因马铃薯植株。 成果3已成功地在烟草叶片中大量表达出与TMV外壳蛋白融合的多个口蹄疫病毒表面抗原小肽，并成功从烟草叶肉细胞中提取了该物质。 成果4建立了农杆菌介导的胡萝卜转化系统，已在胡萝卜中表达出了霍乱毒素b亚单位（CTB）。 1．下列关于动植物生物反应器的描述正确的是（　　） A．7只含有人生长激素基因的兔子所含目的基因和人体内生长激素基因的启动子相同 B．动物血液反应器和动物乳腺反应器相比的优点是没有性别和年龄的限制 C．制作动物乳腺生物反应器需要利用显微注射法把目的基因导入雌牛的乳腺细胞中 D．农杆菌介导的胡萝卜转化系统中，农杆菌的Ti质粒进入受体细胞完成转化 2．利用动植物生物反应器生产疫苗、药物蛋白等产品是一个复杂的过程，下面分析正确的是（　　） A．植物生物反应器生产的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物质属于单克隆抗体 B．动植物生物反应器生产多肽、蛋白质都一定需核糖体、内质网和高尔基体的参与 C．由上述材料可大致推测出不同生物共用一套遗传密码 D．利用转基因马铃薯的块茎进行繁殖，后代会发生性状分离 3．（24-25高二下·天津部分区·期末）线粒体DNA突变会导致多种线粒体遗传病。为了研究线粒体遗传病的分子机制，可构建永生淋巴细胞系和转线粒体细胞系，构建过程如图所示。淋巴细胞被EB病毒（EBV）感染后能获得可无限增殖的永生淋巴细胞，但该细胞会被BrdU杀死，p°细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶和丙酮酸的培养基中才能生长。下列叙述错误的是（　　） A．诱导细胞融合时，灭活病毒可使细胞接触处的蛋白质和脂质分子重新排布 B．由图可知，永生淋巴细胞提供线粒体DNA，P°细胞提供细胞核 C．为了筛选出转线粒体细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸 D．经选择培养基筛选后，还需要进行克隆化培养和抗体检测 4．（24-25高二下·天津部分区·期末）下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（　　） A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 5．（24-25高二下·天津滨海新区·期末）抗体-药物偶联物（ADC）通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列说法错误的是（    ） A．单克隆抗体可用于疾病的治疗和运载药物 B．制备单克隆抗体时，用特定选择培养基就能筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞 C．体外培养特定杂交瘤细胞时需加入，目的是维持培养液的pH D．ADC中的抗体起靶向识别肿瘤细胞的作用，连接的药物起到杀伤肿瘤细胞的作用 6．（24-25高二下·天津部分区·期末）为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（X蛋白）进行逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。下列叙述错误的是（　　） A．单克隆抗体的制备过程中涉及动物细胞融合、动物细胞培养技术 B．给小鼠同时注射2种抗原可刺激其B细胞分化为产双抗的浆细胞 C．利用同位素标记单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 D．据图可知，该单克隆抗体识别抗原的区域大概为40～55位氨基酸 7．（24-25高二下·天津部分区·期末）下列有关动物细胞培养的表述正确的是（　　） A．动物细胞培养需使用液体培养基，其应用的原理是细胞增殖 B．体外培养细胞时，必须保证环境是无菌的，因此培养液需要定期更换，以防杂菌污染 C．动物细胞培养所需气体主要是氧气，不需CO2 D．悬浮培养的细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖 （24-25高二下·天津南开·期末）阅读下列材料，完成下面小题。 癌症是严重威胁人类健康的重大疾病，全球每年近1000万人死于癌症。癌变后的细胞会发生一系列显著的形态和代谢等方面的改变。生物学家奥托·瓦尔堡提出的“瓦堡效应”理论认为：癌细胞生长速度远大于正常细胞的重要原因是能量的来源差别，即使在氧气供应充足的条件下癌细胞也主要依赖无氧呼吸产生ATP。 近年来，我国在抗体—肺癌药物偶联物（ADC）研发领域取得了显著突破，ADC的单抗部分主要结合肿瘤细胞表面的跨膜蛋白，通过内化作用将细胞毒素等药物传递至肿瘤细胞内，实现精准杀伤。如图为抗体——肺癌药物偶联物（ADC）的制备过程。 8．下列关于癌细胞代谢的叙述，错误的是（    ） A．癌细胞中丙酮酸转化为乳酸的过程会生成少量的ATP B．“瓦堡效应”导致癌细胞需要大量吸收葡萄糖 C．癌细胞无氧呼吸时，葡萄糖分解释放的能量大部分以热能形式散失 D．人体内癌细胞产生的CO2只来自线粒体 9．关于抗体——肺癌药物偶联物（ADC）制备的叙述，正确的是（    ） A．体外培养骨髓瘤细胞时应提供95%O2和5%CO2的气体环境 B．过程①可用灭活的病毒作为诱导剂促进细胞融合，灭活的病毒无感染能力且其抗原结构被破坏 C．过程②进行筛选时，融合的具有同种核的细胞都会死亡 D．抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞 10．（24-25高二下·天津河西·期末）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（    ） A．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量 B．诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点 C．在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 D．将待筛选抗体与该病毒基因A进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体 11．（24-25高二下·天津西青·期末）抗CD20抗体可用于治疗淋巴瘤等疾病。研究人员将表达抗CD20单克隆抗体的 DHFR-CHO杂交瘤细胞接种于反应器中培养，培养过程中不补充培养液，抽样检测产物浓度和细胞生长情况（通过台盼蓝染色结合显微镜直接计数统计细胞密度和活性）。下列叙述，正确的是（　　）    A．杂交瘤细胞培养过程中需置于37℃、含5%O2的气体条件下进行培养 B．显微镜下只统计单位体积中被染色的细胞数量，即可得到活细胞密度 C．随着培养过程的进行，产物持续增多，最高浓度约为95mg·L-1 D．培养一段时间后，培养液中营养物质的减少制约了细胞的生长和活性 12．（24-25高二下·天津河东·期末）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（    ） A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术 B．该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合 C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤 D．该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测 二、非选择题 1．（24-25高二下·天津西青·期末）为降低肺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。回答下列问题：        (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自__________。 (2)为了获得杂交瘤细胞，需要进行筛选。图1中过程②所采用的培养基属于__________；使用该培养基进行细胞培养的结果是__________。 (3)单克隆抗体是图1ADC中的__________（填“a”或“b”）部分。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。    (4)①据图2回答，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于__________（填结构名称），可导致癌细胞凋亡。 ②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为__________（答出2点）。 2．（24-25高二下·天津部分区·期末）人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。 (1)细胞培养应在5%的CO2培养箱中进行，CO2的作用是________，为防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物。多次注射抗原cTnI，取___________内的B淋巴组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，不同于诱导植物原生质体融合的方法是________。融合的细胞将________（填“贴壁生长”/“悬浮生长”）生长。 (2)①②为筛选过程，则甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，通过多次的________最终筛选得到的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部分结合。据图可知该检测方法中，酶标抗体的作用是_______，可通过测定产物量来判断待测抗原量，若酶标抗体是抗cTnI的单克隆抗体，则固相抗体可以用__________。 (4)为鉴定抗cTnI单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将对应抗原（cTnI蛋白）进行逐步截短，分别与纯x蛋白示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。结果证明该单克隆抗体识别抗原（cTnI蛋白）的区域大概为__________（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸。 3．（24-25高二下·天津部分区·期末）EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1、EV71外壳蛋白VP2和非EV71蛋白分别注射到4组小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体_______（填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是_______。 (2)制备抗EV71单克隆抗体流程图如下： ①相比较植物细胞，诱导动物细胞融合特有的方法是_______。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选的目的是获得杂交瘤细胞，然后将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测获得__________的杂交瘤细胞。 ②图中体外的扩大培养，是从细胞培养液中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法_______，获取的单克隆抗体具有的优点是________________。 4．（24-25高二下·天津河北·期末）双特异性抗体可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。CD19是癌细胞表面的抗原蛋白，CD3蛋白受体位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题： (1)给小鼠注射CD19蛋白，是为了从小鼠的脾脏中分离得到_________；注射的抗原A是指_________。 (2)过程②和④所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方法的不同之处是_________。过程③培养杂交瘤细胞时需提供的气体条件是95%空气加5%CO2的混合气体，其中CO2的主要作用是__________。过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是__________。过程⑥提取双特异性单克隆抗体的途径有_________。 (3)与从血清中提取的CDI9抗体，抗A抗原的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是_________（答两点）。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用，原因是_________。 地 城 考点03 胚胎工程及其应用 （体内受精及受精作用、体外受精、胚胎移植等） 一、 单选题 1．（24-25高二下·天津部分区·期末）下图表示某胚胎工程的流程图，下列相关叙述错误的是（　　） ①→早期胚胎培养→早期胚胎→②→新个体 A．①处的胚胎可来自转基因技术、体外受精、核移植技术 B．若要通过该流程获得多个遗传性状相同的新个体，可对早期胚胎进行胚胎分割，分割时需将内细胞团均等分割 C．早期胚胎培养至原肠胚阶段，需检查胚胎质量后再进行②过程 D．②过程前，需对供体和受体母畜进行同期发情处理 2．（24-25高二下·天津河西·期末）胚胎工程的迅猛发展实现了家畜繁殖模式的改变，如图所示为某科研小组培育幼猪的两种模式。下列说法正确的是（　　） A．哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在子宫中完成 B．被阻止释放的极体会成为胚胎的组成部分，发挥重要作用 C．分析图示可知，两种繁殖模式得到的幼猪所含核基因相同 D．图示流程涉及了体细胞核移植、胚胎移植、重组DNA等技术 3．（24-25高二下·天津河西·期末）科学家尝试采用多种方法获得多能干细胞（iPS细胞），目前iPS细胞可用于治疗人的阿尔兹海默症，骨关节炎等疾病，下列叙述错误的是（    ） A．iPS细胞可由成纤维细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等诱导生成 B．可以用红绿色盲患者自身细胞培养的iPS细胞治疗自身红绿色盲 C．iPS细胞体外增殖方式为有丝分裂，体外分化过程与细胞内基因表达的调控有关 D．可借助载体将特定基因导入细胞或直接将特定蛋白导入细胞来诱导形成iPS细胞 4．（24-25高二下·天部分区津·期末）第三代试管婴儿俗称PGD/PGS，指在试管婴儿（IVF-ET）的胚胎移植前，取胚胎的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康胚胎移植。其过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．采卵的过程中可以给母亲注射性激素，促进卵细胞的生成，使其排出更多成熟的卵子 B．采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中获取能量，与卵细胞膜接触后阻止后续的精子进入透明带 C．受精过程中精子核膜破裂形成雄原核，卵子排出第二极体形成雌原核，二者融合完成受精作用 D．胚胎发育过程中，原肠胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化 5．（24-25高二下·天津部分区·期末）在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，使胚胎的发育率和妊娠率提高，具体培育流程如图所示。下列说法错误的是（    ）    A．去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物 B．胚胎移植前应对代孕母猴进行同期发情处理 C．将组蛋白去甲基化和去（脱）乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育 D．形成重构胚后可加入化学药物将其激活，待发育至桑葚胚或囊胚再进行胚胎移植 6．（24-25高二下·天津滨海新区·期末）多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体 才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 下列叙述正确的是 （    ） A．经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B．①需获得MII期的去核卵母细胞 C．②能大幅改良动物性状 D．③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 7．（24-25高二下·天津和平·期末）治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（    ）    A．细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞 B．该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 C．胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果 D．动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体 8．（24-25高二下·天津河北·期末）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，abc表示现代工程技术，①②③分别表示其结果，下列说法正确的是 A．若a是体细胞核移植技术，则①反映了动物体细胞也具有全能性 B．若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表现型一定相同 C．若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 D．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 9．（24-25高二下·天津河东·期末）某生物科技公司尝试利用体细胞核移植技术批量繁殖优质奶牛。实验中选择成年奶牛的耳部皮肤细胞作为核供体，将其细胞核移植到去核的卵母细胞中形成重构胚。重构胚在体外培养至早期胚胎后移植到代孕母牛子宫，但多批次实验均出现胚胎着床后早期流产。经检测发现，代孕母牛体内孕酮水平正常，但重构胚的滋养层细胞未能正常形成胎盘结构。据此推测，实验失败的最可能原因是（    ） A．供体细胞核的端粒长度不足 B．卵母细胞去核时损伤了细胞质中的调控因子 C．体外培养时未添加动物血清提供营养 D．未对代孕母牛进行免疫抑制处理 二、非选择题 1．（24-25高二下·天津西青·期末）2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，标志着中国在非人灵长类疾病动物模型研究中处于国际领先地位。培育克隆猴的流程如下图所示，请结合图回答下列问题。 (1)选择从胎猴提取体细胞而不是成年猴的原因是__________。 (2)从母猴体内采集的卵母细胞需培育至__________期可作为受体细胞。 (3)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是__________。 (4)重构胚胎发育早期，在透明带内进行卵裂，卵裂的特点是__________。 (5)胚胎移植前需要对代孕母猴进行__________处理，以保证胚胎能够继续发育。 2．（24-25高二下·天津和平·期末）利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题： (1)对1号猪使用促性腺激素处理，使其超数排卵，收集并选取处在_____时期的卵母细胞用于核移植。 (2)采集2号猪的组织块，用胰蛋白酶、_____等处理获得分散的成纤维细胞，放置于含有_____。 (3)为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行分割。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_____号猪。 (4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有_____（多选）。 A．DNA测序 B．染色体倍性分析 C．体细胞结构分析 D．抗原—抗体杂交 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题02 细胞工程及胚胎工程 3大高频考点概览 考点01 植物细胞工程及其应用（植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术等） 考点02 动物细胞工程及其应用（动物细胞培养、融合及其单克隆抗体制备、体细胞和移植技术及克隆动物等） 考点03 胚胎工程及其应用 （体内受精及受精作用、体外受精、胚胎移植等） 地 城 考点01 植物细胞工程及其应用（植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术等） 一、单选题 1．（24-25高二下·天津滨海新·期末）红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对癌症有一定的疗效。下图是植物组织培养和细胞培养的流程图，图中②为愈伤组织，通过B过程可最终产生新的植株。通过C过程可产生大量细胞。下列相关叙述中错误的是（    ） A．A过程是脱分化，该过程中细胞中增殖的方式是有丝分裂 B．B是再分化，此过程的实质是基因的选择性表达 C．紫杉醇属于初生代谢物，可以从⑤中获取 D．培养⑤一般采用液体培养基，有利于细胞的增殖 【答案】C 【知识点】植物细胞工程的实际应用、细胞的分化 【详解】A、脱分化（A过程）中细胞通过有丝分裂增殖，A 正确； B、再分化（B过程）实质是基因选择性表达，B 正确； C、紫杉醇是植物特殊次生代谢物，并非初生代谢物，C 错误； D、细胞培养（C过程）用液体培养基利于细胞增殖，D 正确。 故选C 。 2．（24-25高二下·天津河西·期末）蝴蝶兰（4N＝76）的观赏价值极高，是切花市场的热销产品。西青区蝴蝶兰产业园利用微型繁殖技术进行快速培育，2024年白色蝴蝶兰鲜切花产量超过300万枝。下列说法错误的是（　　） A．微型繁殖技术能保持优良品种的遗传特性实现快速繁殖 B．细胞分裂素和生长素的比值会影响培育过程中基因表达的顺序 C．蝴蝶兰幼嫩茎段组织培养过程中细胞中会出现38个四分体 D．微型繁殖时使用的培养基要严格灭菌，外植体只需要进行消毒即可 【答案】C 【知识点】植物细胞工程的实际应用、植物组织培养技术综合 【详解】A、微型繁殖技术属于无性繁殖，通过植物细胞的全能性实现快速繁殖，能保持亲本的优良遗传特性，A正确； B、在植物组织培养中，细胞分裂素与生长素的比值调控细胞分化方向（如芽或根的形成），不同比值会激活不同基因的表达顺序，B正确； C、四分体仅出现在减数第一次分裂过程中，而蝴蝶兰（4N=76）的幼嫩茎段组织培养中细胞进行的是有丝分裂，不会形成四分体，C错误； D、培养基需严格灭菌（如高压蒸汽灭菌），而外植体需消毒处理（如酒精擦拭），以避免杂菌污染且不损伤细胞活性，D正确； 故选C。 3．（24-25高二下·天津部分区·期末）右图为玉米（染色体数为2n）组织培养的相关研究，亲本植物的基因型为Aa，A、B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，图中融合细胞只考虑两两融合。下列叙述正确的是（　　） A．图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，接着用次氯酸钠处理30min后，最后用无菌水清洗2~3次 B．研究中A、B、C、D的染色体数分别是1n、2n、2n、4n C．图中①表示再分化过程，A过程得到的子代植株基因型为Aa D．在研究过程中，用显微镜可以观察到愈伤组织的各细胞形态大小一致 【答案】B 【知识点】植物组织培养技术综合、植物体细胞杂交技术 【分析】植物组织培养是指通过无菌操作，将离体的植物器官（如根、茎、叶、花、果实等）、组织（如形成层、皮层、胚乳等）、细胞（如体细胞、生殖细胞等）以及原生质体，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其生长、分化并发育成完整植株的技术。 【详解】A、植物组织培养中，外植体消毒时，先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2～3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次，A错误； B、研究中A为单倍体植株，体细胞中含有的染色体数目为n；B植株是植物组织培养的产物，其中含有的染色体数目为2n，C植株也是植物组织培养的产物，染色体数目也为2n，D植株是通过植物体细胞杂交获得的多倍体植株，其中含有的染色体数分别是4n，B正确； C、①表示脱分化和再分化过程，A过程为单倍体育种，单倍体植株基因型为A或a，经秋水仙素处理后A过程得到的子代植株基因型为AA或aa，C错误； D、愈伤组织是植物组织培养过程中经过脱分化过程产生的一团无定型状态的薄壁细胞，因而在研究过程中，用显微镜可以观察到愈伤组织的各细胞形态大小未必一致，D错误。 故选B。 4．（24-25高二下·天津部分区·期末）与常规栽培技术相比，利用植物细胞培养进行药用次生代谢产物的生产具有显著的优越性，根据不同的需求可以采用不同的技术流程（如图）。相关叙述正确的是（　　） A．培养体系1中的外源基因导入前需用Ca2+处理受体细胞 B．培养体系2中获得的愈伤组织细胞应具有全能性，其细胞形态和结构与外植体细胞相同 C．在将经灭菌处理后的外植体诱导形成愈伤组织期间，一般不需要光照 D．在由外植体诱导形成愈伤组织的过程中，细胞发生了分裂及基因的选择性表达 【答案】D 【知识点】植物组织培养技术综合、将目的基因导入受体细胞 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、将基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，导入微生物中常用Ca2+处理法，培养体系1中的外源基因导入的是植物细胞，不需要用Ca2+处理受体细胞，A错误； B、细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能，培养体系2中获得的愈伤组织细胞没有形成完整个体，不具有全能性，愈伤组织是由脱分化形成的无定型细胞团，其细胞形态和结构与外植体细胞不同，B错误； C、外植体经消毒后进诱导形成愈伤组织，不是灭菌，C错误； D、在愈伤组织诱导过程中，外植体细胞经历了分裂增殖与基因选择性表达（关闭分化基因、激活脱分化相关基因），从而实现从分化状态向未分化状态的转变，D正确。 故选D。 5．（24-25高二下·天津南开·期末）辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变 B．①过程受外源激素的调控，②过程只受内源激素的调控 C．用幼嫩的根和茎作为外植体，获得的脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D．通过细胞培养获得辣椒素的过程未体现细胞的全能性 【答案】D 【知识点】植物组织培养技术综合 【分析】由题图信息分析可知，过程①是脱分化，过程②是再分化的过程。上面一种途径是通过植物组织培养获得脱毒苗，再从果实中获取相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术，实现工业化生产获得大量的细胞产物。 【详解】A、①过程是外植体细胞脱分化，失去高度分化的状态，没有发生基因突变，A错误； B、①脱分化和②过程再分化都会受外源激素的调控，B错误； C、获得脱毒苗常用的外植体是幼嫩的根和茎，脱毒苗是含病毒少，不代表具有抗病毒能力，C错误； D、通过细胞培养获得辣椒素的过程中获得大量细胞即可，不需要实现细胞的全能性，D正确。 故选D。 6．（24-25高二下·天津河西·期末）甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的甘草西定具有抗癌作用。通过植物细胞工程对甘草进行相关处理，过程如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．过程①为接种外植体，过程②应避光处理从而获得愈伤组织 B．过程③④培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 C．过程⑤获得原生质体的过程需要用到纤维素酶和果胶酶 D．过程⑥获得大量的甘草西定体现了愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点 【答案】D 【知识点】植物组织培养技术综合 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、过程①为接种外植体，过程②获得愈伤组织的过程是植物组织培养中的脱分化过程，需要避光进行，A正确； B、③④的培养过程均为植物组织培养的再分化过程。植物组织培养的培养基中除了含有植物激素（如生长素、细胞分裂素等）和多种无机盐外，还需要添加蔗糖等能源物质，蔗糖可以为植物细胞提供碳源和能量，C正确； C、过程⑤获得原生质体的过程需要用到纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，C正确； D、过程⑥获得大量的甘草西定体现了愈伤组织分裂能力强的特点，但由于未发育成完整植株，未体现全能性，D错误。 故选D。 7．（24-25高二下·天津西青·期末）科研人员将苜蓿与百脉根（富含单宁，单宁可减少膨胀病的发生）进行植物体细胞杂交以期获得抗膨胀病苜蓿新品种，技术路线如图所示。下列说法正确的是（　　） A．图中①过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶去除细胞壁 B．愈伤组织细胞通过减数分裂和有丝分裂形成了植物体 C．相比于生芽培养基，生根培养基中生长素含量比例较低 D．融合细胞生成细胞壁时，高尔基体和线粒体的活动可能增强 【答案】D 【知识点】植物体细胞杂交技术、细胞器的结构、功能及分离方法 【分析】分析题图：该图为将苜蓿与百脉根进行植物体细胞杂交以获得抗臌胀病苜蓿新品种的过程，①为去除细胞壁，制备原生质体，②为诱导原生质体融合的过程，③为融合细胞脱分化形成愈伤组织的过程，④再分化形成根、芽等器官的过程，⑤为形成植物体的过程。 【详解】A、图①为去除细胞壁过程，植物细胞壁的成分为纤维素和果胶，根据酶专一性的特点可知，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误； B、愈伤组织细胞通过有丝分裂和细胞分化形成了植物体，B错误； C、生长素/细胞分裂素的比例高，利于生根，相比于生芽培养基，生根培养基中生长素含量比例较高，C错误； D、植物细胞壁的形成与高尔基体有关，且需要消耗能量，而线粒体是细胞的动力车间，故融合细胞生成细胞壁时，细胞内高尔基体和线粒体活动可能增强，D正确。 故选D。 8．（24-25高二下·天津西青·期末）利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列说法，不正确的是（    ） A．利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B．利用“细胞农业”获得植物产品，可减少对森林的大面积砍伐 C．“人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D．“人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 【答案】A 【知识点】细胞的全能性、植物细胞工程的实际应用 【分析】初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个 生命过程中它一直进行着。初生代谢物有糖类、脂质、蛋白质和核酸等。次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在一定的环境和时间条件下才进行。 【详解】A、利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”只是获得了大量植物细胞及其产物，没有发育成完整个体，也没有发育成其他各种细胞，不能体现细胞的全能性，A 错误； B、利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”可以不用种植咖啡树便能产生咖啡因，从而减少咖啡的种植面积，可减少对森林的大面积砍伐，B 正确； C、液体悬浮培养可以增加细胞与培养液的接触面积，有利于细胞生长繁殖，从而增加“人造咖啡”的产量，C正确； D、“人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或 器官中，并在一定的环境和时间条件下才能产生，属于植物细胞的次生代谢产物，D正确。 故选A。 9．（24-25高二下·天津西青·期末）大豆属于一年生经济作物。图中甲、乙表示大豆两个品种，基因A/a、B/b位于两对同源染色体上。为培育基因型为AAbb的新品种，研究人员尝试了图中培育方案，①~⑥为不同育种过程。下列叙述正确的是（    ） A．①②表示杂交育种，第四年才能筛选出基因型为AAbb的植株 B．③表示单倍体育种，可获得基因型为Ab、AB、aB、ab的植株 C．④需要X射线等处理，可定向得到基因型为Aabb的新品种 D．②和⑥需自交处理，⑤需用秋水仙素处理单倍体的种子或幼苗 【答案】A 【知识点】杂交育种、单倍体育种、诱变育种 【分析】根据题意和图示分析可知：①②为杂交育种，①③⑤为单倍体育种，④⑥为诱变育种。 【详解】A、大豆属于一年生经济作物，①②表示杂交育种，第一年甲与乙杂交得到AaBb的种子，第二年将AaBb播种，自交得到基因型为A_B_、A_bb、aaB_、aabb的种子，第三年将第二年得到的种子种植，且单株自交，收集每颗植株上的种子，在第四年时分区播种每棵植株上的种子，植株表型与A_bb对应且分区种植时子代没有性状分离的区域中的植株基因型为AAbb，A正确； B、①③⑤表示单倍体育种过程，③为花药离体培养过程，可获得基因型为Ab、AB、aB、ab的植株，B错误； C、④⑥为诱变育种过程，④需要X射线、亚硝酸盐等处理，提高基因突变的频率，但由于基因突变的方向是不定向的，可从突变个体中筛选出基因型为Aabb的新品种，C错误； D、②和⑥需要通过自交得到基因型为AAbb的纯合子，⑤用秋水仙素处理单倍体幼苗得到染色体正常的植株，单倍体高度不育，一般无种子，D错误。 故选A。 10．（24-25高二下·天津西青·期末）研究表明，高浓度乙醇会使菌体表面蛋白迅速脱水凝固，从而影响乙醇继续渗入菌体发挥作用，降低杀菌效果。以下说法正确的是（    ） A．涂布器在灼烧前通常要浸泡在一定浓度的乙醇中 B．植物组织培养时，不能使用乙醇对外植体消毒 C．适宜浓度的乙醇能杀死物体内外所有的微生物 D．无水乙醇的消毒效果优于其他浓度的乙醇 【答案】A 【知识点】植物组织的培养及基本过程、无菌技术 【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法系死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】A、涂布器灼烧前是浸泡在乙醇中的，A正确； B、植物组织培养时，使用了体积分数为70%的乙醇来消毒外植体，B错误； C、灭菌才能杀死全部微生物，乙醇只是消毒，C错误； D、根据题干信息可知，过高浓度的乙醇反而会导致杀菌效果下降，D错误。 故选A。 11．（24-25高二下·天津河东·期末）胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（    ）    A．制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁 B．聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合 C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 【答案】C 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、植物组织培养技术综合、植物体细胞杂交技术、植物细胞工程的实际应用 【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。 【详解】A、制备原生质体时需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误； B、灭活的病毒不能用于植物原生质体的诱导，B错误； C、雄性不育的胞质杂种华柚2号的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，融合后品种A的细胞核消失，控制雄性不育的基因可能位于线粒体中，C正确； D、GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中，而融合后的华柚2号不含品种A的细胞核，因此发绿色荧光的杂种细胞应被淘汰，D错误。 故选C。 12．（24-25高二下·天津河北·期末）兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（    ）    A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 【答案】D 【知识点】植物组织培养技术综合 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、在脱分化过程中，1号培养基中的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A错误； B、愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞的分化过程是有丝分裂，所以不会发生基因重组，B错误。 C、3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于1，C错误； D、百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该研究中的外植体，D正确； 故选D。 13．（24-25高二下·天津和平·期末）如图为植物细胞融合及组织培养过程的示意图，下列有关叙述不正确的是（    ） A．植物体细胞杂交的最大优点在于克服远缘杂交不亲和的障碍 B．杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性 C．愈伤组织不可以进行光合作用，其培养基中需要糖类、氨基酸等有机营养 D．原生质体A和B融合可以用灭活的病毒诱导 【答案】D 【知识点】植物体细胞杂交技术、植物组织的培养及基本过程 【分析】分析题图：①表示去除细胞壁，获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合的过程；③表示再生形成新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。 【详解】A、植物体细胞杂交的最大优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确； B、杂种细胞培育成杂种植株需经过④和⑤过程，采用了植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性，因此杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性，B正确； C、愈伤组织细胞内没有叶绿体，不能进行光合作用，其培养基中需要糖类、氨基酸等有机营养，C正确； D、诱导原生质体A和B融合的物理方法有离心或电刺激等，化学方法用聚乙二醇(PEG)来诱导，而灭活的病毒适合诱导动物细胞的融合，D错误。 故选D。 二、非选择题 1．（24-25高二下·天津西青·期末）兰花象征高贵、优雅、纯洁。野生兰花多生于幽谷，品类繁多，具有极高的观赏价值，数量稀少。兰花种子小如粉末，无胚乳，成熟需半年。成熟后随风飘散，遇到合适的土壤与菌结合形成“龙蛋”，“龙蛋”从萌发到出苗还需要一年，自然繁殖困难。在云南兰花种植地主要通过植物组织培养快速繁殖再放归野外。培养过程及MS培养基部分成分如图和如表。 MS培养基的主要成分 大量元素 如硝酸铵、硝酸钾、磷酸盐、钙盐、镁盐等 微量元素 铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、硼酸等 有机物 包括维生素（如维生素B1、维生素B6、生物素等）和糖类（主要是蔗糖） 植物激素 生长素、细胞分裂素等 (1)①过程表示__________。②过程一般需要光，作用是__________。 (2)筛选遗传性状优良的外植体作为实验材料，接种时防止倒插与__________有关。 (3)培养基中蔗糖作用__________（答出1点即可）。 (4)为了方便运输将培养得到的胚状体包裹上人工种皮制备人工种子，结合题中信息和植物组织培养的条件推测人工种子中还应该包含什么成分__________（答出1点即可）。 【答案】(1) 脱分化 有利于叶绿素的合成和组培苗的光合作用 (2)生长素的极性运输 (3)提供碳源、调节渗透压、抑制杂菌污染等 (4)营养物质、植物激素、抗生素、兰菌等 【知识点】植物细胞工程的实际应用、植物组织培养技术综合 【分析】在植物组织培养过程中涉及有丝分裂，没有减数分裂；植物组织培养技术包括脱分化和再分化两个阶段，在植物组织培养过程中，培养基中需要添加生长素和细胞分裂素。 【详解】（1）过程①是脱分化形成愈伤组织，培养基中的生长素和细胞分裂素的比值为1时有利于愈伤组织的形成，②过程是再分化形成胚芽和胚根等结构，由于叶绿素的合成需要光，且形成的幼苗光合作用需要光，因此②过程一般需要光。 （2）外植体是指组织培养过程中所用的离体的植物器官、组织或细胞。由于生长素可促进生根，且生长素的运输是从产生生长素的形态学上端运到下端，因此接种时需要将形态学下端插入培养基，不能倒插。 （3）培养基中蔗糖可为组织细胞提供碳源、并为植物生长提供营养和维持一定的渗透压的功能，由于蔗糖能增加培养基的渗透压，因此也具有一定的抑制细菌生长的作用。 （4） 人工种子加兰菌的应用在兰花栽培中具有多重作用，不仅提高了种子的萌发率，还增强了根系的吸收能力，改善了土壤环境，促进了兰花的生长，并在一定程度上增强了兰花的抗逆性。因此人工种子中除了充入各种营养物质外，还应该充入生长素和细胞分裂素等植物激素以及抗生素、兰菌等。 2．（24-25高二下·天津滨海新·期末）下图为细胞融合技术的一些过程，请分析并回答下列问题： (1)若A、B细胞为植物细胞，在细胞融合之前去除细胞壁需______酶处理。 (2)若A、B细胞为动物细胞，区别于植物原生质体诱导融合的方法有______。细胞融合的原理是______。 (3)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为______细胞，该细胞的特点是______。 【答案】(1)纤维素酶、果胶酶 (2) 灭活病毒 细胞膜具有一定的流动性 (3) 杂交瘤 既能大量增殖，又能产生单一抗体 【知识点】植物体细胞杂交技术、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】1、若A、B为植物细胞，则图示为植物体细胞杂交过程，在细胞融合之前应用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞壁，C为正在融合的细胞，诱导原生质体融合时常用化学法（聚乙二醇），形成杂种细胞后要利用植物的组织培养技术将细胞培养成植株。 2、若A、B是动物细胞，则一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，然后使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使之分散成单个细胞，再进行培养，在进行动物细胞融合时，诱导方法有化学法、物理法和生物法（灭活病毒），植物体细胞杂交则只能使用化学法和物理法。 【详解】（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前需用酶处理去掉细胞壁，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，所用的酶可能是纤维素酶和果胶酶。 （2）在进行动物细胞融合时，诱导方法有化学法、物理法和生物法（灭活病毒），植物体细胞杂交则只能使用化学法和物理法。因此若A、B是动物细胞，区别于植物原生质体诱导融合的方法是灭活病毒诱导法。细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。 （3）若A为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，则D细胞为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 3．（24-25高二下·天津和平·期末）植物组织培养技术应用广泛，科研人员用拟南芥探索获得大量愈伤组织的途径。 (1)组培的理论基础是植物细胞具有_____，即细胞经过分裂分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。切取外植体时的损伤可促进内源生长素（IAA）合成并运输到受伤部位，诱导细胞分裂分化。因此，组培时常添加2，4-D、NAA等生长素类调节剂。 (2)含较高浓度2，4-D的培养基（2，4-D-CIM）可促进愈伤组织增殖，但在实践中发现，2，4-D-CIM中的外植体脱分化形成愈伤组织延退。为探究其原因，进行相关实验。 ①检测不同培养基中叶片外植体细胞中IAA合成酶基因（YUC）的表达量，由图1结果可知：较高浓度2，4-D_____（促进，抑制）IAA的合成。 ②研究者推测，一定量IAA有利于愈伤组织的形成。为此，在2，4-D-CIM的基础上，再分别添加IAA、NAA、检测接种后外植体细胞IAA响应基因W1的表达情况，结果如图2所示，同时还测量了各组愈伤组织形成量，结果显示其与W1表达量正相关，证明推测成立。添加NAA组是为了进一步确认_____。 (3)根据上述所有实验结果，在答题卡方框中填相关基因，括号中填“+”（表示促进）或“-”（表示抑制），完善在愈伤组织形成和增殖过程中相关物质的关系模式图_____。 【答案】(1)全能性 (2) 抑制 影响愈伤组织形成的是生长素类激素的种类而非含量 (3) 【知识点】植物组织培养技术综合、不同的植物激素对植物生命活动的调节、生长素类似物在农业生产中的应用 【分析】植物体各部分的组织细胞，有着不同的结构和功能，当被接种在人工培养基上，受到植物激素等物质和外界条件的作用，一般先脱分化，成为一团没有特定结构和功能的分生状态的细胞（愈伤组织），然后在一定条件下再分化长出根和芽，形成完整植株。植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。 【详解】（1）植物组培的一般过程是剪接植物器官或组织→经过脱分化（也叫去分化）形成愈伤组织→再经过再分化形成组织或器官→经过培养发育成一颗完整的植株，植物组织培养的理论基础是植物细胞具有全能性，全能性是指细胞经过分裂分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。 （2） ①观察图1，与对照组相比，在2，4-D-CIM组中IAA合成酶基因（YUC）的表达量明显降低，说明较高浓度2，4-D抑制IAA的合成；②因为研究者推测一定量IAA有利于愈伤组织的形成，并且要证明IAA响应基因W1的表达情况与某一指标正相关来确认推测成立，所以同时还测量了各组愈伤组织的形成量；添加NAA组是为了进一步确认影响愈伤组织形成的是生长素类激素的种类而非含量。 （3） 根据实验结果可知，较高浓度2，4-D抑制IAA合成酶基因（YUC）的表达，从而抑制IAA合成，而IAA有利于愈伤组织形成，所以模式图为： 4．（24-25高二下·天津河北·期末）基因递送是植物遗传改良的重要技术之一，我国多个实验室合作开发了一种新型基因递送系统（切—浸—生芽（Cut-Dip-Budding,简称 CDB法）。图1与图2分别是利用常规转化法和CDB法在某植物中递送基因的示意图。 回答下列问题。 (1)图1中，从外植体转变成愈伤组织的过程属于________；从愈伤组织到幼苗的培养过程需要的激素有生长素和__________，该过程还需要光照，其作用是__________。 (2)图1中的愈伤组织，若不经过共培养环节，直接诱导培养得到的植株可以保持植株A的_。图1中，含有外源基因的转化植株A若用于生产种子，其包装需标注________。 (3)图1与图2中，农杆菌侵染植物细胞时，可将外源基因递送到植物细胞中的原因是_________。 (4)已知某酶（PDS）缺失会导致植株白化。某团队构建了用于敲除PDS 基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体（含有绿色荧光蛋白标记基因），利用图2中的CDB法将该重组载体导入植株B，长出毛状根，成功获得转化植株B。据此分析，从毛状根中获得阳性毛状根段的方法是________________，图2中，鉴定导入幼苗中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是___________，依据是_________。 【答案】(1) 脱分化 细胞分裂素 诱导叶绿素的形成；满足叶绿体利用光能制造有机物的需要 (2) 遗传特性 转基因标识 (3)Ti 质粒中的T-DNA能将外源基因递送到植物细胞中，并与植物细胞的染色体DNA整合到一起 (4) 荧光检测选择带有绿色荧光标记的毛状根 观察幼苗是否表现出白化特征 PDS缺失会导致植株白化，白化苗的出现意味着通过基因编辑技术成功实现PDS基因的敲除 【知识点】植物组织培养技术综合、目的基因的检测与鉴定、将目的基因导入受体细胞 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，其原理为植物细胞的全能性。植物组织培养中细胞表现出全能性的条件为：离体、严格的无菌条件、适宜的培养条件及适宜浓度和比例的激素。 【详解】（1）已经分化的细胞转变为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块(这称为愈伤组织)的过程叫做脱分化。从愈伤组织到幼苗的培养过程叫作再分化，该过程中生长素和细胞分裂素起关键作用，此外，为了诱导叶绿素的形成；满足叶绿体利用光能制造有机物的需要，再分化过程还需要光照。 （2）图1中共培养环节实质是利用农杆菌转化法将目的基因导入愈伤组织细胞，可改变愈伤组织细胞中的遗传物质，若不经过共培养环节，则愈伤组织细胞中无外源基因，其遗传物质与植株A几乎相同，则直接诱导培养得到的植株可以保持植株A的遗传特性；图1中，含有外源基因的转化植株A若用于生产种子，则该种子细胞中含有目的基因，属于转基因种子，其包装需标注转基因种子，即进行转基因标识。 （3）图1与图2中，农杆菌侵染植物细胞属于利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，利用了农杆菌含有的Ti质粒的作用，Ti质粒中的T-DNA能将外源基因递送到植物细胞中，并与植物细胞的染色体DNA整合到一起。 （4）根据题意，导入植株B的重组载体中含有绿色荧光蛋白标记基因，若将重组载体成功导入受体细胞并成功表达，则获得的阳性毛状跟段应具有绿色荧光标记，因此该过程中通过荧光检测选择带有绿色荧光标记的毛状根即为阳性毛状根段；导入植株B的目的基因为具有敲除PDS基因功能的基因编辑载体，因此导入幼苗中的基因编辑载体若成功发挥作用，则会敲除细胞中的PDS基因，根据题意，该基因指导合成的PDS酶确实会导致植株白化，因此鉴定导入幼苗中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是观察幼苗是否表现出白化特征。 地 城 考点02 动物细胞工程及其应用（动物细胞培养、融合及其单克隆抗体制备等） 1、 单选题 （24-25高二下·天津部分区·期末）阅读下面的材料，完成问题。 利用基因工程对动植物的遗传物质进行改造，可制作动植物生物反应器，在药物蛋白，疫苗等的生产上有着广泛的应用，我国在这方面也取得重大进展 材料一：动物生物反应器的研究开发重点是动物乳腺反应器和动物血液反应器。我国“动物乳腺生物反应器”研究取得重要成果，7只含有人生长激素基因的兔子在深圳培育成功，还有一批已接受转基因胚胎移植的牛和羊等待最后检测。 材料二：我国对植物生物反应器研究的成果有： 成果1将乙型肝炎病毒包膜的蛋白基因导入马铃薯和番茄中，获得了高效表达该外源基因的工程植株。 成果2已将产毒素大肠杆菌热敏毒素b亚基及定居因子CS6B抗原蛋白基因导入马铃薯中，获得了高效表达重组抗原蛋白的转基因马铃薯植株。 成果3已成功地在烟草叶片中大量表达出与TMV外壳蛋白融合的多个口蹄疫病毒表面抗原小肽，并成功从烟草叶肉细胞中提取了该物质。 成果4建立了农杆菌介导的胡萝卜转化系统，已在胡萝卜中表达出了霍乱毒素b亚单位（CTB）。 1．下列关于动植物生物反应器的描述正确的是（　　） A．7只含有人生长激素基因的兔子所含目的基因和人体内生长激素基因的启动子相同 B．动物血液反应器和动物乳腺反应器相比的优点是没有性别和年龄的限制 C．制作动物乳腺生物反应器需要利用显微注射法把目的基因导入雌牛的乳腺细胞中 D．农杆菌介导的胡萝卜转化系统中，农杆菌的Ti质粒进入受体细胞完成转化 2．利用动植物生物反应器生产疫苗、药物蛋白等产品是一个复杂的过程，下面分析正确的是（　　） A．植物生物反应器生产的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物质属于单克隆抗体 B．动植物生物反应器生产多肽、蛋白质都一定需核糖体、内质网和高尔基体的参与 C．由上述材料可大致推测出不同生物共用一套遗传密码 D．利用转基因马铃薯的块茎进行繁殖，后代会发生性状分离 【答案】1．B 2．C 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、基因工程在农牧业、制药及环境等方面的应用、将目的基因导入受体细胞 【分析】转基因动物生产药物： （1）基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子（原理：基因的选择性表达）。 （2）成果：乳腺生物反应器。 （3）过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁产生所需要的药物。 1．A、7只含有人生长激素基因的兔子能够生产人的生长激素，其细胞中所含目的基因和人体内生长激素基因的启动子不同，其含有的启动子应该是兔子乳腺细胞中特异性表达的启动子，A错误； B、动物血液反应器和动物乳腺反应器相比的优点是没有性别和年龄的限制，因而生产能力更强，B正确； C、制作动物乳腺生物反应器需要利用显微注射法把目的基因牛的受精卵中，培育出转基因牛，C错误； D、农杆菌介导的胡萝卜转化系统中，农杆菌的T-DNA进入受体细胞完成转化，D错误。 故选B。 2．A、植物生物反应器生产的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物质不属于单克隆抗体，是基因工程在医学上的应用，A错误； B、动植物生物反应器生产多肽、蛋白质未必都一定需核糖体、内质网和高尔基体的参与，但一定需要核糖体的参与，B错误； C、由上述材料可大致推测出不同生物共用一套遗传密码，否则基因工程无法实现，这是生物具有共同起源的证据，C正确； D、利用转基因马铃薯的块茎进行繁殖，这种生殖方式为无性繁殖，产生的后代不会发生性状分离，D错误。 故选C。 3．（24-25高二下·天津部分区·期末）线粒体DNA突变会导致多种线粒体遗传病。为了研究线粒体遗传病的分子机制，可构建永生淋巴细胞系和转线粒体细胞系，构建过程如图所示。淋巴细胞被EB病毒（EBV）感染后能获得可无限增殖的永生淋巴细胞，但该细胞会被BrdU杀死，p°细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶和丙酮酸的培养基中才能生长。下列叙述错误的是（　　） A．诱导细胞融合时，灭活病毒可使细胞接触处的蛋白质和脂质分子重新排布 B．由图可知，永生淋巴细胞提供线粒体DNA，P°细胞提供细胞核 C．为了筛选出转线粒体细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸 D．经选择培养基筛选后，还需要进行克隆化培养和抗体检测 【答案】D 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物细胞培养技术 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法以及密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。 【详解】A、灭活的病毒能够使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，A正确； B、由图可知，永生淋巴细胞提供线粒体DNA，P°细胞提供细胞核，B正确； C、因为永生淋巴细胞会被BrdU杀死，P°细胞在不含尿嘧啶和丙酮酸的培养基中不能生长，所以在选择培养基中添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸，可以筛选出转线粒体细胞(既含有永生淋巴细胞的线粒体又含有P°细胞核的细胞)，C正确； D、转线粒体细胞系的构建不需要抗体检测，因为研究的是线粒体疾病，而不是抗体生产，D错误。 故选D。 4．（24-25高二下·天津部分区·期末）下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（　　） A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 【答案】C 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【详解】A、图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，以刺激机体产生相应的B细胞，A正确； B、诱导动物细胞融合的方法有物理方法、化学方法等，利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合法等方法均可诱导动物细胞融合获得乙，B正确； C、用特定的选择培养基对乙筛选，只有杂种融合细胞能生长，未融合细胞和同种细胞的融合体不能生长，C错误； D、对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得既能无限增殖又能产生单一抗体的杂交瘤细胞丁，D正确。 故选C。 5．（24-25高二下·天津滨海新区·期末）抗体-药物偶联物（ADC）通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列说法错误的是（    ） A．单克隆抗体可用于疾病的治疗和运载药物 B．制备单克隆抗体时，用特定选择培养基就能筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞 C．体外培养特定杂交瘤细胞时需加入，目的是维持培养液的pH D．ADC中的抗体起靶向识别肿瘤细胞的作用，连接的药物起到杀伤肿瘤细胞的作用 【答案】B 【知识点】动物细胞培养技术、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【详解】A、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的优点，可作为诊断试剂，准确识别各种抗原物质的差异，用于治疗疾病和运载药物，A正确； B、在特定的选择培养基上筛选出的是杂交瘤细胞，要获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养及抗体检测，多次筛选才达到目的，B错误； C、体外培养特定杂交瘤细胞获取单克隆抗体时需加入CO2，目的是维持培养液的pH，C正确； D、ADC中的单克隆抗体只起靶向识别肿瘤细胞的作用，ADC中连接的药物才能起到杀死肿瘤细胞的作用，D正确。 故选B。 6．（24-25高二下·天津部分区·期末）为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（X蛋白）进行逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。下列叙述错误的是（　　） A．单克隆抗体的制备过程中涉及动物细胞融合、动物细胞培养技术 B．给小鼠同时注射2种抗原可刺激其B细胞分化为产双抗的浆细胞 C．利用同位素标记单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 D．据图可知，该单克隆抗体识别抗原的区域大概为40～55位氨基酸 【答案】B 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫，之后取出已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，体外（培养基培养）或体内（注入小鼠腹腔）培养，最后获取单克隆抗体。 【详解】A、单克隆抗体的制备过程，先将免疫过的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞通过动物细胞融合技术进行融合，然后对杂交瘤细胞进行动物细胞培养，以获得大量单克隆抗体，A正确； B、单个B细胞通常仅表达一种B细胞受体，因此只能分化为分泌一种抗体的浆细胞，双特异性抗体（双抗）并非由单一B细胞自然产生，而是通过生物工程技术人为制备，B错误； C、利用同位素标记单克隆抗体，基于抗原-抗体特异性结合原理，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，这是单克隆抗体在医学诊断中的常见应用，C正确； D、根据图可知，1~50氨基酸序列片段与抗体无反应，而1~55氨基酸序列片段与抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域大概为50~55位氨基酸。50~153氨基酸序列片段与抗体无反应，而40~153氨基酸序列片段与抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域大概为40~50位氨基酸，综上分析可知，该单克隆抗体识别抗原（X蛋白）的区域大概为40~55位氨基酸，D正确。 故选B。 7．（24-25高二下·天津部分区·期末）下列有关动物细胞培养的表述正确的是（　　） A．动物细胞培养需使用液体培养基，其应用的原理是细胞增殖 B．体外培养细胞时，必须保证环境是无菌的，因此培养液需要定期更换，以防杂菌污染 C．动物细胞培养所需气体主要是氧气，不需CO2 D．悬浮培养的细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖 【答案】A 【知识点】动物细胞培养技术 【详解】动物细胞培养是指从动物体中取出相关组织，将其分散成单个细胞后，在适宜的体外环境中让这些细胞生长、增殖的技术，其核心是模拟体内生理环境，支持细胞存活和增殖。 【分析】A、动物细胞培养使用液体培养基（如培养液），其原理是细胞通过分裂（增殖）进行生长，A正确； B、培养液定期更换的主要目的是清除代谢废物并补充营养，而非防止杂菌污染（无菌操作和抗生素起主要防污染作用），B错误； C、动物细胞培养需要CO₂，通常用5% CO₂维持培养液的pH（与缓冲系统协同作用），C错误； D、悬浮培养的细胞直接分瓶即可传代，无需胰蛋白酶处理（胰蛋白酶用于贴壁细胞的消化分离），D错误。 故选A。 （24-25高二下·天津南开·期末）阅读下列材料，完成下面小题。 癌症是严重威胁人类健康的重大疾病，全球每年近1000万人死于癌症。癌变后的细胞会发生一系列显著的形态和代谢等方面的改变。生物学家奥托·瓦尔堡提出的“瓦堡效应”理论认为：癌细胞生长速度远大于正常细胞的重要原因是能量的来源差别，即使在氧气供应充足的条件下癌细胞也主要依赖无氧呼吸产生ATP。 近年来，我国在抗体—肺癌药物偶联物（ADC）研发领域取得了显著突破，ADC的单抗部分主要结合肿瘤细胞表面的跨膜蛋白，通过内化作用将细胞毒素等药物传递至肿瘤细胞内，实现精准杀伤。如图为抗体——肺癌药物偶联物（ADC）的制备过程。 8．下列关于癌细胞代谢的叙述，错误的是（    ） A．癌细胞中丙酮酸转化为乳酸的过程会生成少量的ATP B．“瓦堡效应”导致癌细胞需要大量吸收葡萄糖 C．癌细胞无氧呼吸时，葡萄糖分解释放的能量大部分以热能形式散失 D．人体内癌细胞产生的CO2只来自线粒体 9．关于抗体——肺癌药物偶联物（ADC）制备的叙述，正确的是（    ） A．体外培养骨髓瘤细胞时应提供95%O2和5%CO2的气体环境 B．过程①可用灭活的病毒作为诱导剂促进细胞融合，灭活的病毒无感染能力且其抗原结构被破坏 C．过程②进行筛选时，融合的具有同种核的细胞都会死亡 D．抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞 【答案】8．A 9．C 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、细胞癌变的原因及防治、无氧呼吸过程 【分析】图中①-④依次表示动物细胞融合、杂交细胞筛选、克隆化培养和抗体检测、ADC的组装。 8．A、癌细胞中丙酮酸转化为乳酸的过程会为无氧呼吸第二阶段，无ATP生成，A错误； B、“瓦堡效应”理论认为：癌细胞生长速度远大于正常细胞的重要原因是能量的来源差别，即使在氧气供应充足的条件下癌细胞也主要依赖无氧呼吸产生ATP，所以癌细胞需要大量吸收葡萄糖以保证ATP的供给，B正确； C、癌细胞无氧呼吸时，葡萄糖分解释放的能量大部分以热能形式散失，少部分用于合成ATP，C正确； D、人体内癌细胞产生的CO2只来自线粒体，即有氧呼吸第二阶段，D正确。 故选A。 9．A、体外培养骨髓瘤细胞时应提供95%空气和5%CO2的气体环境，A错误； B、过程①表示动物细胞融合，可用灭活的病毒作为诱导剂促进细胞融合，灭活的病毒无感染能力，但其抗原结构未被破坏，B错误； C、过程②进行筛选时，未融合的和融合具有同种核的细胞都会死亡，只有杂交瘤细胞可以正常生长，C正确； D、抗体—肺癌药物偶联物中的a（抗体）能特异性结合肿瘤细胞，杀死肿瘤细胞的是b（药物），D错误。 故选C。 10．（24-25高二下·天津河西·期末）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（    ） A．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量 B．诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点 C．在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 D．将待筛选抗体与该病毒基因A进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体 【答案】A 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、细胞膜的功能 【详解】A、已免疫的B细胞是高度分化的细胞，不能分裂，故不需要进行原代培养，A正确； B、诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要利用的是细胞膜的流动性，即细胞膜的结构特点，B错误； C、诱导细胞融合时，同种核型融合的细胞（即B细胞相互融合、骨髓瘤细胞相互融合）不能在选择培养基上正常增殖，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才能在选择培养基上正常增殖，C错误； D、待筛选的抗体是蛋白质，无法与基因A进行杂交，应与蛋白A进行杂交，D错误。 故选A。 11．（24-25高二下·天津西青·期末）抗CD20抗体可用于治疗淋巴瘤等疾病。研究人员将表达抗CD20单克隆抗体的 DHFR-CHO杂交瘤细胞接种于反应器中培养，培养过程中不补充培养液，抽样检测产物浓度和细胞生长情况（通过台盼蓝染色结合显微镜直接计数统计细胞密度和活性）。下列叙述，正确的是（　　）    A．杂交瘤细胞培养过程中需置于37℃、含5%O2的气体条件下进行培养 B．显微镜下只统计单位体积中被染色的细胞数量，即可得到活细胞密度 C．随着培养过程的进行，产物持续增多，最高浓度约为95mg·L-1 D．培养一段时间后，培养液中营养物质的减少制约了细胞的生长和活性 【答案】D 【知识点】动物细胞培养技术、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、进行杂交瘤细胞培养时，需置于37℃、含有95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中培养，A错误； B、死细胞会被台盼蓝染成颜色，活细胞不会，因此，显微镜下应该统计单位体积中没有被染色的细胞数量，B错误； C、由于培养过程中不补充培养液，随着培养过程的进行，产物先增多后减少，C错误； D、结合图可知，培养一段时间后，活细胞密度会减小，细胞活性会降低，由于培养过程中不补充培养液，故培养一段时间后，培养液中营养物质的减少制约了细胞的生长和活性，D正确。 故选D。 12．（24-25高二下·天津河东·期末）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（    ） A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术 B．该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合 C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤 D．该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测 【答案】D 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、体液免疫 【分析】单克隆抗体的制备利用了动物细胞培养、动物细胞融合等技术。 【详解】A、依据题干信息，戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果，单克隆抗体制备过程需要已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，所以动物细胞融合技术，A正确； B、该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合，B正确； C、依据题干信息，该试剂盒以尿液中的抗原为靶标，所以该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤，C正确； D、抗体具有特异性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性肝炎的检测，D错误。 故选D。 二、非选择题 1．（24-25高二下·天津西青·期末）为降低肺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。回答下列问题：        (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自__________。 (2)为了获得杂交瘤细胞，需要进行筛选。图1中过程②所采用的培养基属于__________；使用该培养基进行细胞培养的结果是__________。 (3)单克隆抗体是图1ADC中的__________（填“a”或“b”）部分。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。    (4)①据图2回答，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于__________（填结构名称），可导致癌细胞凋亡。 ②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为__________（答出2点）。 【答案】(1)肺癌细胞 (2) 选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 (3)a (4) 细胞核 ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。且单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物就可以有效地治疗疾病 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1） 给小鼠注射抗原的目的是使小鼠产生能分泌相应抗体（针对肺癌细胞）的B淋巴细胞，故小鼠注射的特定抗原应取自肺癌细胞。 （2）经过程②培养基培养后可把杂交瘤细胞筛选出来，故该培养基是起筛选作用的选择培养基。使用该培养基进行细胞培养的结果是：未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞不能在该培养基上生存，只有杂交瘤细胞才能在该培养基中生存。 （3）ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，其中抗体起特异性识别作用，据图1可知，a是单克隆抗体，b是药物。 （4）①据图2可知，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，药物被释放至细胞质基质中，释放出的药物再进入细胞核，最终作用于细胞核，导致癌细胞凋亡。 ②ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物，就可以有效地治疗疾病，因而可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用。 2．（24-25高二下·天津部分区·期末）人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。 (1)细胞培养应在5%的CO2培养箱中进行，CO2的作用是________，为防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物。多次注射抗原cTnI，取___________内的B淋巴组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，不同于诱导植物原生质体融合的方法是________。融合的细胞将________（填“贴壁生长”/“悬浮生长”）生长。 (2)①②为筛选过程，则甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，通过多次的________最终筛选得到的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部分结合。据图可知该检测方法中，酶标抗体的作用是_______，可通过测定产物量来判断待测抗原量，若酶标抗体是抗cTnI的单克隆抗体，则固相抗体可以用__________。 (4)为鉴定抗cTnI单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将对应抗原（cTnI蛋白）进行逐步截短，分别与纯x蛋白示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。结果证明该单克隆抗体识别抗原（cTnI蛋白）的区域大概为__________（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸。 【答案】(1) 维持溶液的PH 定期更换培养基 脾脏 灭活的病毒 悬浮生长 (2) 乙、丙 克隆化培养和抗体检测 (3) 既能与待测抗原结合，又能催化待测底物反应 另一种抗cTnI的单克隆抗体 (4)“40~55” 【知识点】动物细胞培养技术、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】动物细胞培养是指在体外模拟体内环境，将动物细胞从机体中取出，在无菌、适宜温度、pH值和营养条件下，使其生长、增殖并维持一定结构和功能的技术。单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆产生的、只针对某一特定抗原决定簇的抗体，具有特异性强、纯度高、可大量制备等特点。制备原理基于杂交瘤技术，将能产生特定抗体的B淋巴细胞（不能无限增殖）与骨髓瘤细胞（能无限增殖但不能产生抗体）融合，获得既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，再通过培养或小鼠腹腔接种等方式获得大量单克隆抗体。 【详解】（1）在细胞培养中，5%的CO2的作用是维持培养液的pH。因为细胞培养过程中，细胞的代谢活动会影响培养液的酸碱度，CO2可以与水反应生成碳酸，参与调节培养液的pH值，使其保持相对稳定。为防止有害代谢物的积累，可采用定期更换培养液的方法。随着细胞培养时间的延长，代谢废物会在培养液中积累，定期更换培养液可以清除这些代谢废物，为细胞提供良好的生长环境。 多次注射抗原cTnI，取脾脏内的B淋巴组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合。因为脾脏是机体重要的免疫器官，其中含有大量经过抗原刺激后活化的B淋巴细胞。诱导植物原生质体融合常用物理法（如离心、振动、电激等）和化学法（如聚乙二醇），而诱导动物细胞融合除了物理法和化学法外，还可以用灭活的病毒，这是动物细胞融合特有的方法。融合的细胞将悬浮生长。因为杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特性，骨髓瘤细胞在体外培养时呈悬浮生长状态。 （2）在①②筛选过程中，甲是经过融合后的细胞混合物，其中有未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B - B融合细胞、骨髓瘤 - 骨髓瘤融合细胞以及杂交瘤细胞；乙是经过第一次筛选（如用选择培养基筛选）后得到的杂交瘤细胞；丙是经过第二次筛选（如抗体检测等）后只含产生特异性抗体的杂交瘤细胞，所以只含杂交瘤细胞的是乙、丙。 ②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，通过多次的克隆化培养和抗体检测最终筛选得到的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。克隆化培养可以使杂交瘤细胞大量增殖，抗体检测可以筛选出能产生特异性抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。   （3）据图可知该检测方法中，酶标抗体的作用是既能与待测抗原结合，又能催化待测底物反应。因为酶标抗体具有特异性，能与抗原结合，同时其携带的酶可以催化底物反应生成特定产物，通过检测产物量来反映与酶标抗体结合的抗原量，进而判断待测抗原量。 若酶标抗体是抗cTnI的单克隆抗体，则固相抗体可以用抗cTnI的单克隆抗体（或其他能与cTnI结合的抗体 ）。因为不同抗体可与同一抗原表面的不同部分结合，只要能与cTnI结合且不与酶标抗体竞争同一结合位点的另一种抗cTnI的单克隆抗体都可以作为固相抗体。 （4）观察表格，当截短的抗原片段包含40 - 55位氨基酸时，抗cTnI单克隆抗体有反应，而去掉55位之后无反应，所以结果证明该单克隆抗体识别抗原（cTnI蛋白）的区域大概为40 - 55位氨基酸。 3．（24-25高二下·天津部分区·期末）EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1、EV71外壳蛋白VP2和非EV71蛋白分别注射到4组小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体_______（填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是_______。 (2)制备抗EV71单克隆抗体流程图如下： ①相比较植物细胞，诱导动物细胞融合特有的方法是_______。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选的目的是获得杂交瘤细胞，然后将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测获得__________的杂交瘤细胞。 ②图中体外的扩大培养，是从细胞培养液中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法_______，获取的单克隆抗体具有的优点是________________。 【答案】(1) 不是 用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高 (2) 灭活病毒诱导法 既能大量增殖又能产生大量特异性抗体 注入小鼠腹腔培养（体内培养） 特异性强、灵敏度高、可大量制备 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体的制备是将产生特异性抗体的B淋巴细胞与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，获得既能增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体的过程。 【详解】（1）观察所示的实验结果图，用EV71免疫的小鼠血清中的抗体，不仅能与EV71抗原结合，还与VP1和VP2抗原的结合强度都较高 。如果是单一抗体，应该只特异性地与EV71抗原结合，所以EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体。 （2）①相比较植物细胞，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，是因为只有杂交瘤细胞能在这种培养基上存活，从而获得杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞接种到96孔板，进行克隆化培养可以让其大量增殖，进行抗体检测是为了挑选出既能大量增殖又能产生大量特异性抗体的杂交瘤细胞。 ②图中是体外扩大培养从细胞培养液中获取单克隆抗体，除此之外，还可以将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养（体内培养）。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的优点，这是因为它是由单一的杂交瘤细胞产生的，能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以通过细胞培养大量生产。 4．（24-25高二下·天津河北·期末）双特异性抗体可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。CD19是癌细胞表面的抗原蛋白，CD3蛋白受体位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题： (1)给小鼠注射CD19蛋白，是为了从小鼠的脾脏中分离得到_________；注射的抗原A是指_________。 (2)过程②和④所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方法的不同之处是_________。过程③培养杂交瘤细胞时需提供的气体条件是95%空气加5%CO2的混合气体，其中CO2的主要作用是__________。过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是__________。过程⑥提取双特异性单克隆抗体的途径有_________。 (3)与从血清中提取的CDI9抗体，抗A抗原的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是_________（答两点）。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用，原因是_________。 【答案】(1) 能产生抗CD19抗体的B淋巴细胞 CD3蛋白受体 (2) 灭活的病毒 维持培养液的pH 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 用作体外诊断试剂 (3) 双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原 既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）给小鼠注射CD19蛋白，是为了从小鼠的脾脏中获得能产生抗CD19抗体的B淋巴细胞；分析题意，本过程的目的是得到双特异性抗体，故为保证最终双特异性抗体的产生，注射的抗原A应是CD3蛋白受体。 （2）过程②和④是诱导动物细胞融合，该过程所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方法的不同之处是用灭活的病毒诱导；过程③培养杂交瘤细胞时需提供的气体条件是95%空气加5%CO2的混合气体，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH；过程⑤是融合细胞的筛选，筛选后得到的细胞杂交瘤细胞，特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体；过程⑥提取双特异性单克隆抗体的途径有：用作体外诊断试剂等。 （3）与从血清中提取的CDI9抗体，抗A抗原的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是能同时识别CDI9和A两种抗原，作用效果更显著；双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用，原因是该特异性抗体可以借助单克隆抗体的识别作用，将药物带到癌细胞位置，既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。 地 城 考点03 胚胎工程及其应用 （体内受精及受精作用、体外受精、胚胎移植等） 1、 单选题 1．（24-25高二下·天津部分区·期末）下图表示某胚胎工程的流程图，下列相关叙述错误的是（　　） ①→早期胚胎培养→早期胚胎→②→新个体 A．①处的胚胎可来自转基因技术、体外受精、核移植技术 B．若要通过该流程获得多个遗传性状相同的新个体，可对早期胚胎进行胚胎分割，分割时需将内细胞团均等分割 C．早期胚胎培养至原肠胚阶段，需检查胚胎质量后再进行②过程 D．②过程前，需对供体和受体母畜进行同期发情处理 【答案】C 【难度】0.85 【知识点】胚胎移植技术、胚胎分割技术 【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。在进行胚胎时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚。 胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、①处的胚胎可以是转基因技术处理的受精卵、体外受精形成的受精卵或核移植得到的重组细胞发育而来，A正确； B、胚胎分割需在桑椹胚或囊胚阶段进行，且需均等分割内细胞团以保证分割后的胚胎正常发育，B正确； C、早期胚胎培养通常在体外进行到囊胚阶段即进行移植，原肠胚阶段已无法在体外完成培养，且胚胎移植前检查质量应在囊胚阶段而非原肠胚阶段，C错误； D、胚胎移植前需对供体和受体进行同期发情处理，使生理状态同步以提高胚胎着床率，D正确。 故选C。 2．（24-25高二下·天津河西·期末）胚胎工程的迅猛发展实现了家畜繁殖模式的改变，如图所示为某科研小组培育幼猪的两种模式。下列说法正确的是（　　） A．哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在子宫中完成 B．被阻止释放的极体会成为胚胎的组成部分，发挥重要作用 C．分析图示可知，两种繁殖模式得到的幼猪所含核基因相同 D．图示流程涉及了体细胞核移植、胚胎移植、重组DNA等技术 【答案】B 【难度】0.65 【知识点】胚胎移植技术、克隆 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。 【详解】A、在自然条件下，哺乳动物的受精过程在输卵管中完成，受精卵形成后在输卵管内进行有丝分裂，发育到一定阶段后进入子宫继续进行胚胎发育，A错误； B、由图可知，孤雌生殖技术通过阻止次级卵母细胞释放极体，激活孤雌生殖从而获得早期胚胎，B正确； C、孤雌生殖得到的幼猪的核基因来自良种母猪，细胞核移植得到的幼猪的核基因来自良种公猪，故两种幼猪的核基因不同，C错误； D、图示流程涉及了体细胞核移植、胚胎移植等技术，未涉及重组DNA技术，D错误。 故选B。 3．（24-25高二下·天津河西·期末）科学家尝试采用多种方法获得多能干细胞（iPS细胞），目前iPS细胞可用于治疗人的阿尔兹海默症，骨关节炎等疾病，下列叙述错误的是（    ） A．iPS细胞可由成纤维细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等诱导生成 B．可以用红绿色盲患者自身细胞培养的iPS细胞治疗自身红绿色盲 C．iPS细胞体外增殖方式为有丝分裂，体外分化过程与细胞内基因表达的调控有关 D．可借助载体将特定基因导入细胞或直接将特定蛋白导入细胞来诱导形成iPS细胞 【答案】B 【难度】0.85 【知识点】干细胞工程、胚胎干细胞技术 【分析】1、iPS细胞是诱导多能干细胞，具有产生多种类型细胞的能力，其功能类似胚胎干细胞。2、细胞分化的实质是基因的选择性表达。 【详解】A、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞，A正确； B、红绿色盲患者基因发生改变，用红绿色盲患者自身细胞培养的iPS细胞无法治疗自身红绿色盲，B错误； C、iPS 细胞体外增殖方式为有丝分裂，体外分化过程与细胞内基因表达的调控有关，细胞分化的实质是基因的选择性表达，C正确； D、科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用特定蛋白等来诱导形成iPS细胞，D正确。 故选B。 4．（24-25高二下·天部分区津·期末）第三代试管婴儿俗称PGD/PGS，指在试管婴儿（IVF-ET）的胚胎移植前，取胚胎的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康胚胎移植。其过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．采卵的过程中可以给母亲注射性激素，促进卵细胞的生成，使其排出更多成熟的卵子 B．采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中获取能量，与卵细胞膜接触后阻止后续的精子进入透明带 C．受精过程中精子核膜破裂形成雄原核，卵子排出第二极体形成雌原核，二者融合完成受精作用 D．胚胎发育过程中，原肠胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化 【答案】C 【难度】0.85 【知识点】胚胎发育、动物的体外受精、胚胎移植技术 【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。 【详解】A、采卵的过程中可以给母亲注射促性腺激素，促进卵细胞的生成，使其排出更多成熟的卵子，A错误； B、采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中获能是获得受精的能力，但不是获得能量，B错误； C、受精的过程中精子核膜破裂，形成雄原核，卵细胞排出第二极体形成雌原核，二者融合形成受精卵，完成受精作用，C正确； D、胚胎发育过程中，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化，D错误。 故选C。 5．（24-25高二下·天津部分区·期末）在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，使胚胎的发育率和妊娠率提高，具体培育流程如图所示。下列说法错误的是（    ）    A．去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物 B．胚胎移植前应对代孕母猴进行同期发情处理 C．将组蛋白去甲基化和去（脱）乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育 D．形成重构胚后可加入化学药物将其激活，待发育至桑葚胚或囊胚再进行胚胎移植 【答案】C 【难度】0.65 【知识点】动物体细胞核移植技术和克隆、胚胎移植技术、表观遗传 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、将卵母细胞培养到M II期后进行去核操作，此时细胞核退化，出现的是纺锤体—染色体复合物，故去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物，A正确； B、胚胎移植前需对供体和代孕母猴注射孕激素进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，不发生免疫排斥反应，B正确； C、结合题意和图示操作可知，将组蛋白去甲基化和增加乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误； D、重组细胞融合后，可以用物理或化学方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，发育至桑葚胚或囊胚期再进行胚胎移植，D正确。 故选C。 6．（24-25高二下·天津滨海新区·期末）多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体 才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 下列叙述正确的是 （    ） A．经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B．①需获得MII期的去核卵母细胞 C．②能大幅改良动物性状 D．③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】D 【难度】0.65 【知识点】基因工程在农牧业、制药及环境等方面的应用、动物体细胞核移植技术和克隆、胚胎移植技术 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、子代动物的遗传性状与供体基本一致，但与受体无关，A错误； B、核移植过程中需要处于MII中期的去核卵母细胞，而过程1是培育试管动物，需要培育到适宜时期（桑葚胚或囊胚等时期）进行胚胎移植，B错误； C、过程2得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状，C错误； D、过程2克隆技术可得到大量同种个体，为过程3提供了量产方式；过程3是转基因技术，转基因可导入外源优良基因，为过程1、2提供了改良性状的方式，D正确。 故选D。 7．（24-25高二下·天津和平·期末）治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（    ）    A．细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞 B．该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 C．胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果 D．动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体 【答案】B 【难度】0.85 【知识点】动物细胞培养技术、动物体细胞核移植技术和克隆、胚胎干细胞技术 【分析】分析题图： ①表示核移植，②表示胚胎干细胞的增殖分化。 【详解】A、细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞，因为去核卵母细胞有激活动物细胞全能性的物质，且细胞体积大，易操作，所含营养物质丰富，A正确； B、 ①表示核移植，②表示胚胎干细胞的增殖分化，该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养技术，并未涉及胚胎移植技术，B错误； C、细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，C正确； D、动物细胞的培养需提供95%空气（有利于细胞呼吸，进行正常代谢活动）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，D正确。 故选B。 8．（24-25高二下·天津河北·期末）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，abc表示现代工程技术，①②③分别表示其结果，下列说法正确的是 A．若a是体细胞核移植技术，则①反映了动物体细胞也具有全能性 B．若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表现型一定相同 C．若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 D．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 【答案】C 【难度】0.65 【知识点】动物体细胞核移植技术和克隆、体外受精和早期胚胎的培养、胚胎分割技术 【分析】 【详解】A、若a是体细胞核移植技术，则①反应了动物体细胞的细胞核具有全能性，A错误； B、胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同,但表现型不一定完全相同，因为表现型还受环境的影响，B错误； C、若b是体外受精技术,则②为试管动物,这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，C正确； D、①②③中作为供体的动物品种必须是珍稀的或存量少的动物，而作为受体的动物只要健康和具有良好的繁殖能力即可,不需要是珍稀的或存量少的雌性动物，D错误。 故选C。 9．（24-25高二下·天津河东·期末）某生物科技公司尝试利用体细胞核移植技术批量繁殖优质奶牛。实验中选择成年奶牛的耳部皮肤细胞作为核供体，将其细胞核移植到去核的卵母细胞中形成重构胚。重构胚在体外培养至早期胚胎后移植到代孕母牛子宫，但多批次实验均出现胚胎着床后早期流产。经检测发现，代孕母牛体内孕酮水平正常，但重构胚的滋养层细胞未能正常形成胎盘结构。据此推测，实验失败的最可能原因是（    ） A．供体细胞核的端粒长度不足 B．卵母细胞去核时损伤了细胞质中的调控因子 C．体外培养时未添加动物血清提供营养 D．未对代孕母牛进行免疫抑制处理 【答案】B 【知识点】胚胎移植技术、胚胎工程综合 【分析】端粒是染色体末端的一段重复序列，端粒长度与细胞的衰老和寿命等有关。 【详解】A、端粒是染色体末端的一段重复序列，端粒长度与细胞的衰老和寿命等有关。在体细胞核移植中，供体细胞经过多次分裂后端粒可能会缩短。但是已经发育成胚胎，重构胚的滋养层细胞未能正常形成胎盘结构，与供体细胞核的端粒长度不足关系不大，A不符合题意； B、卵母细胞细胞质中含有多种调控因子，这些调控因子对于激活供体细胞核、启动胚胎发育程序起着关键作用。如果卵母细胞去核时损伤了细胞质中的调控因子，那么重构胚在发育过程中就可能无法正常进行细胞分化等过程。滋养层细胞的形成和发育依赖于胚胎正常的早期发育调控，当调控因子受损时，滋养层细胞可能无法正常分化形成胎盘结构，从而导致胚胎着床后早期流产，B符合题意； C、动物血清在体外培养体系中主要提供一些生长因子、激素、维生素等营养成分以及维持渗透压等作用。现代的体细胞核移植技术中，若未添加动物血清提供营养，可能都发育不成早期胚胎，C不符合题意； D、胚胎移植时，受体（代孕母牛）对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植能够成功的一个重要生理基础。所以未对代孕母牛进行免疫抑制处理一般不会导致胚胎着床后早期流产，D不符合题意。 故选B。 2、 非选择题 1．（24-25高二下·天津西青·期末）2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，标志着中国在非人灵长类疾病动物模型研究中处于国际领先地位。培育克隆猴的流程如下图所示，请结合图回答下列问题。 (1)选择从胎猴提取体细胞而不是成年猴的原因是__________。 (2)从母猴体内采集的卵母细胞需培育至__________期可作为受体细胞。 (3)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是__________。 (4)重构胚胎发育早期，在透明带内进行卵裂，卵裂的特点是__________。 (5)胚胎移植前需要对代孕母猴进行__________处理，以保证胚胎能够继续发育。 【答案】(1)胎猴体细胞分化程度低，表现全能性相对容易 (2)减数第二次分裂中 (3)诱导细胞融合 (4)细胞进行有丝分裂，细胞数量增加，总体积基本不变，每个细胞体积变小 (5)同期发情 【知识点】胚胎移植技术、胚胎发育、克隆 【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 【详解】（1）选择从胎猴提取体细胞而不是成年猴的原因是胎猴体细胞分化程度低，表现全能性相对容易。 （2）从母猴体内采集的卵母细胞需培育至减数第二次分裂中期可作为受体细胞，该阶段卵母细胞含有促进核全能性表达的物质。 （3）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是诱导细胞融合。 （4）重构胚胎发育早期，在透明带内进行卵裂，卵裂的特点是细胞进行有丝分裂，细胞数量增加，总体积基本不变，每个细胞体积变小。 （5）胚胎移植前需要对代孕母猴进行同期发情处理，为胚胎移入受体提供相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。 2．（24-25高二下·天津和平·期末）利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题： (1)对1号猪使用促性腺激素处理，使其超数排卵，收集并选取处在_____时期的卵母细胞用于核移植。 (2)采集2号猪的组织块，用胰蛋白酶、_____等处理获得分散的成纤维细胞，放置于含有_____。 (3)为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行分割。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_____号猪。 (4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有_____（多选）。 A．DNA测序 B．染色体倍性分析 C．体细胞结构分析 D．抗原—抗体杂交 【答案】(1)MII (2) 胶原蛋白酶 含动物血清、无机盐、葡萄糖 等的培养液 (3)2 (4)AD 【难度】0.65 【知识点】目的基因的检测与鉴定、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、克隆 【分析】据图分析：图示基因编辑猪培育过程涉及的技术手段有转基因技术、核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因（目的基因）导入2号猪的体细胞核中，然后将2号猪的体细胞核移植到1号猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到囊胚并移植到3号猪的子宫中去，最后分娩产生了4号转基因克隆猪。 【详解】（1）核移植中，卵母细胞需处于减数第二次分裂中期 ，此时细胞质环境最利于核全能性的恢复，是核移植的标准受体细胞时期 。 （2）动物细胞培养中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理组织块，可分解细胞间的蛋白质连接，获得分散的成纤维细胞 。成纤维细胞培养需置于含动物血清、无机盐、葡萄糖 等的培养液中，血清提供天然生长因子，满足细胞增殖需求 。 （3）基因编辑猪的核遗传物质来自2号猪（基因编辑的成纤维细胞为核供体 ），性染色体由核供体（2 号猪 ）决定，故性染色体来自2号猪 。 （4）A、DNA测序可检测目的基因（病毒外壳蛋白基因 ）是否导入基因组，A正确； B、染色体倍性分析可得知到染色体组的数目，B错误； C、体细胞结构分析可得知细胞结构的种类，C错误； D、抗原—抗体杂交可检测目的基因是否翻译出蛋白质（正常表达 ），D正确。 故选AD。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题02 细胞工程及胚胎工程 地 城 考点01 植物细胞工程及其应用（植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术等） 一、单选题 1．【答案】C 2．【答案】C 3．【答案】B 4．【答案】D 5．【答案】D 6．【答案】D 7．【答案】D 8．【答案】A 9．【答案】A 10．【答案】A 11．【答案】C 12．【答案】D 13．【答案】D 二、非选择题 1． 【答案】 (1) 脱分化 有利于叶绿素的合成和组培苗的光合作用 (2)生长素的极性运输 (3)提供碳源、调节渗透压、抑制杂菌污染等 (4)营养物质、植物激素、抗生素、兰菌等 2． 【答案】 (1)纤维素酶、果胶酶 (2) 灭活病毒 细胞膜具有一定的流动性 (3) 杂交瘤 既能大量增殖，又能产生单一抗体 3． 【答案】 (1)全能性 (2) 抑制 影响愈伤组织形成的是生长素类激素的种类而非含量 (3) 4． 【答案】 (1) 脱分化 细胞分裂素 诱导叶绿素的形成；满足叶绿体利用光能制造有机物的需要 (2) 遗传特性 转基因标识 (3)Ti 质粒中的T-DNA能将外源基因递送到植物细胞中，并与植物细胞的染色体DNA整合到一起 (4) 荧光检测选择带有绿色荧光标记的毛状根 观察幼苗是否表现出白化特征 PDS缺失会导致植株白化，白化苗的出现意味着通过基因编辑技术成功实现PDS基因的敲除 地 城 考点02 动物细胞工程及其应用（动物细胞培养、融合及其单克隆抗体制备等） 1、 单选题 1．【答案】B 2．【答案】C 3．【答案】D 4．【答案】C 5．【答案】B 6．【答案】B 7．【答案】A 8．【答案】A 9．【答案】C 10．【答案】A 11．【答案】D 12．【答案】D 二、非选择题 1． 【答案】 (1)肺癌细胞 (2) 选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 (3)a (4) 细胞核 ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。且单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物就可以有效地治疗疾病 2． 【答案】 (1) 维持溶液的PH 定期更换培养基 脾脏 灭活的病毒 悬浮生长 (2) 乙、丙 克隆化培养和抗体检测 (3) 既能与待测抗原结合，又能催化待测底物反应 另一种抗cTnI的单克隆抗体 (4)“40~55” 3． 【答案】 (1) 不是 用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高 (2) 灭活病毒诱导法 既能大量增殖又能产生大量特异性抗体 注入小鼠腹腔培养（体内培养） 特异性强、灵敏度高、可大量制备 4． 【答案】 (1) 能产生抗CD19抗体的B淋巴细胞 CD3蛋白受体 (2) 灭活的病毒 维持培养液的pH 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 用作体外诊断试剂 (3) 双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原 既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量 地 城 考点03 胚胎工程及其应用 （体内受精及受精作用、体外受精、胚胎移植等） 1、 单选题 1．【答案】C 2．【答案】B 3．【答案】B 4．【答案】C 5．【答案】C 6．【答案】D 7．【答案】B 8．【答案】C 9．【答案】B 2、 非选择题 1． 【答案】 (1)胎猴体细胞分化程度低，表现全能性相对容易 (2)减数第二次分裂中 (3)诱导细胞融合 (4)细胞进行有丝分裂，细胞数量增加，总体积基本不变，每个细胞体积变小 (5)同期发情 2． 【答案】 (1)MII (2) 胶原蛋白酶 含动物血清、无机盐、葡萄糖 等的培养液 (3)2 (4)AD 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $