陕西西安市某校2025-2026学年高二下学期5月月考生物试卷

高二生物试题 一、选择题：本题共20小题，1-10每小题2分，11-20每小题3分，共50分。在每小题给 出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1.宋代朱肱在《北山酒经》中记载了“卧浆”法：“造酒最在浆，.，不得过夏。”其核心是在 三伏天将小麦煮粥，借助空气中的乳酸菌等自然发酵成酸浆。次年酿酒时，以此酸浆浸米、 蒸煮，再加入酒曲发酵。此法可有效抑制杂菌，提升酒质。下列关于“卧浆法的现代生物学 解释，错误的是() A.“浆不得过夏”：酸浆若储存过久，其积累的酒精可能被醋酸菌转化为乙酸导致酸败 B.“三伏天卧浆”：夏季温度较高有利于乳酸菌等微生物快速繁殖，缩短酸浆成熟时间 C.“以酸浆浸米'：酸浆的较低H值可抑制大多数杂菌生长，为酵母菌创造竞争优势环境 D.“酸浆煮粥”：蒸煮酸浆目的是为了彻底杀菌，确保后续的酿酒过程为纯种酵母菌发酵 2.中国酒文化博大精深，酿酒技术在我国已有上千年的历史。以下是用苹果酿造果酒果醋的 过程，以下说法正确的是() 苹果 加白砂糖 酒精 过 稀释果酒，加 醋酸 苹果 处理 和酵母菌 发 分离 人醋酸杆菌 发酵 果醋 A.酵母菌与醋酸杆菌的代谢类型均为异养好氧型 B.果酒转化为果醋所需的酶存在于细胞质基质和线粒体 C.添加白砂糖有利于酒精的产生，加入醋酸杆菌后发酵条件只需要改变通气情况 D.醋酸发酵前，加入无菌水对苹果果酒进行稀释 3.抗原表位是位于抗原表面决定抗原特异性的特殊化学基团，一种抗原表位只能与T细胞或 B细胞表面一种受体结合，刺激机体产生一种抗体。如图为利用具有三种抗原表位的抗原制 备单抗的过程，下列说法正确的是( ) 表位3 (抗原产一表位1 一装馆2 选释培荞基 充化培养 2号 筛选 抗体检刹 3得 B细胞臀髓瘤细胞 杂交瘤细胞 单克隆抗体 A,用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理脾脏获得B细胞悬液 B.培养杂交瘤细胞需定期更换培养液以保证无菌环境 C.经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞群至少产生3种抗体 D.该抗原制备的单克隆抗体的特异性与传统方式制备的一样高 4.近日科学家首次利用多能干细胞在体外培育输尿管类器官，为肾脏再生医学铺路。下图是 部分分化过程的示意图，下列有关叙述错误的是() 多能干细胞(PSCs)→输尿管间质祖细胞(SPs)→输尿管 A.输尿管细胞、SPs和PSCs再次发育成多种细胞的潜能依次升高 B.有些基因在输尿管细胞中表达，但是不能在PSCs和SPs中表达 C.检测三种细胞中ATP合成酶基因是否表达可判断细胞是否发生分化 D.PSCs、SPs与输尿管细胞中RNA和细胞器的种类和数量有所不同 5.重构胚激活的终极目标是要使处于MⅡ期的卵母细胞恢复分裂周期。由于持续高水平的成 试题第1页，共10页 熟促进因子(MPF)和细胞静止因子(CSF)的存在，MⅢ期的卵母细胞不能进入末期。研究 表明，任何能够让细胞质中Ca+水平升高的机制都可以激活重构胚。下列正确的是(·) A.通过核移植产生重构胚发育形成的个体有利于物种多样性的形成，在畜牧业、医疗卫 生领域有广泛应用 B.需将重构胚置于含有95%空气和5%C02的恒温箱中培养得到个体 C.蛋白酶合成抑制剂能抑制MP℉和CSF的合成，故可通过蛋白酶合成抑制剂处理重 构胚使其保持休眠 D.自然受精过程中，精子入卵可能促进了Ca+内流，升高了细胞质中Ca2+水平 6.研究人员利用体外受精及其他生物技术成功建立了小鼠(2=40)单倍体胚胎干细胞系，相 关过程如图所示。下列叙述错误的是() 精子 移除雄原核早期胚脆一 单倍体胚 受精卵 胎干细胞 卵细胞」 培养液 A.除体外受精外，图示过程还运用了动物细胞培养、胚胎移植等技术 B.对图示早期胚胎进行胚胎分割可获得更多的单倍体胚胎干细胞 C.单倍体胚胎干细胞具有发育成所有组织器官的潜能，还可能代替配子完成受精 D.与二倍体相比，单倍体胚胎利于进行基因筛选和基因功能的研究 7.关于DNA粗提取与鉴定”和琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物”实验，下列说法错误的是() A.DNA粗提取实验所用的研磨液中含有抑制DNA酶活性的物质 B.DNA鉴定过程中，DNA的双螺旋结构会发生改变 C.凝胶载样缓冲液中的指示剂可使DNA在紫外灯下被检测出来 D.若PCR过程中复性温度过低，电泳时可能会出现非特异性条带 8.人干扰素(FN)是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细 胞最多只能产生100~1000个干扰素分子，而用基因工程技术改造的大肠杆菌发酵生产（原 理如图)，在1~2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。天然的干扰素在体外保存相当困 难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，在一定条件下可以延长保存时间。下 列说法正确的是() 干扰素基因 （。提取逆转录=PC白 淋巴细胞 干扰素干扰素基因 mRNA 、筛选 四环素抗性基因质粒 工程菌 A.基因工程核心步骤需要的工具酶有DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶，其作用部位 都是磷酸二酯键 B.将重组质粒导入大肠杆菌常用显微注射技术 C.酵母菌或大肠杆菌都可作受体菌，二者生产的干扰素在结构上没有区别 D.为延长保存时间，对干扰素进行改造，需通过改造干扰素基因来实现 9.近日，我国科学家利用基因编辑技术修复了某患者造血干细胞中导致镰状细胞贫血的缺陷 基因，并将修复后的细胞回输到该患者体内，从而治疗该遗传病。下列叙述错误的是() A.修复后的细胞回输到患者体内容易引发免疫排斥反应 试题第2页，共10页 B.体外培养造血干细胞的培养箱需含95%空气和5%C02 C.缺陷基因修复后所表达的蛋白质的氨基酸序列发生改变 D.可通过光学显微镜判断修复后的造血干细胞的治疗效果 10.我国科研人员借助CRISPR/Cas9技 靶基因 术对小麦的基因进行编辑，获得了抗白 粉病小麦。CRISPR/Cas9基因编辑工作 Cas9蛋白 原理如图所示。下列说法错误的是( sgRNA(人工设计的单链向导RNA) A.基因编辑过程中通过Cas9特异 切断 DⅢ 性识别目标DNA的碱基序列 修复 B.Cas9-SgRNA复合物与限制酶均 mmmit 可断开特定部位的磷酸二酯键 C.基因编辑小麦没有引入外源基因，理论上来说其安全性高于传统转基因作物 D.SgRNA序列越短，进行基因编辑的过程中“脱靶”的风险越大 l1.细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞 6 争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人 4 乙组 员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体 培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴 2 甲组 丙组 加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层 0 菌)，共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下 上层菌：野体型 野生型 野生型 下层菊：野生型 tcel-tcil te突变体 列叙述正确的是() 双突变统 A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理 B.对上、下层活菌计数时常使用接种环接种 C.由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcl蛋白的毒性 D.野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势 12.科研人员将等量对T1噬菌体敏感的大肠杆菌接种到12个相同固体培养基上，培养后各 平板均长出大量微菌落，接着进行如下表所示实验。下列说法正确的是() 分组 实验处理 培养后统计抗T噬菌体的菌落数 A组(6个平板) 直接喷T1噬菌体 28个 先把平板上的微菌落重新均匀涂布 B组(6个平板) 353个 遍，再喷等量T噬菌体 A.该实验用于培养大肠杆菌的培养基属于选择培养基 B.B组的涂布使单个突变大肠杆菌形成一个菌落的概率增加 C.若两组在喷噬菌体前都用适宜紫外线诱变，A、B两组的抗性菌落数差异会消失 D.该实验证明重新涂布后再喷T1噬菌体导致了抗性突变的大量发生 13.几种限制酶的识别序列及切割位点(Y=C或T,R=A或G)如表所示。下列叙述错误的 是( 限制酶 HindII AluI BamHI Sau3AI 识别序列及切割位点 5'-GTY↑RAC-3' 5'-AG↑CT-3' 5-G↑GATCC-3' 5'-↑GATC-3' 试题第3页，共10页 A.限制酶切割一次可断开2个磷酸二酯键，增加2个游离的磷酸基团 B.HindII可识别不同的核苷酸序列，其切割后产生的是平末端 C.若两种酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶连接 D.BamHI和Sau3AI切割形成的片段进行重组后，仍能被Sau3AI识别并切割 14.ε-聚赖氨酸(8-PL)是一种优良的天然食 士样 品防腐剂。ε-PL能抑制多种微生物的活性， 接种 培养 接种 且在人体内可被分解为赖氨酸。从土壤中分离 乙培养感 丙培养悉 甲培养基 出能分泌ε-PL的微生物的流程如图所示。8-PL 可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列叙述正 种 培养 确的是() 丁培养基 A.步骤I、Ⅲ的接种方法分别是涂布平板 法、平板划线法 B.土样、培养基和接种工具等均需要严格灭菌处理，以防止杂菌污染 C.步骤Ⅲ中应挑选菌落③接种到固体培养基表面培养，进一步筛选出目的菌株 D.若要从丁培养基中收集ε-PL,则采用过滤、沉淀等方法将菌体分离提纯干燥 15.2014年出生在澳大利亚的一对姐弟被确认为一种极其罕见的半同卵双胞胎。该对半同卵 双胞胎的受精及胚胎发育过程如下图所示，下列正确的是() 3烫精卵分裂我3刺 $内细胞团…分为二，各自带有 1.两个精了斑入同一卵了 徵染色体细胞 不同比例的P1粗M2细胞 精子1 )父系P1 圳子 母系M(》 精学2 ●父系 2受褙哪内有3套染色体金父茶P1P2死亡4，细胞分裂增殖 6半简够双胞胎形成 A.受精准备阶段，精子需要获得能量，卵子需要培养到MⅡ期 B.受精卵分裂成3种二倍染色体细胞的过程中发生了染色体变异 C.过程3为发生在输卵管内的有丝分裂，过程4中早期胚胎的体积并不增加 D.这对姐弟来源于母亲和父亲的染色体完全相同 16.如图甲是患有某单基因遗传病家系的系谱图，该病由某基因单碱基突变(A→T)引起。 对该家系成员包含该位点的DNA片段进行PCR扩增后，用MstⅡ酶切（相关基因内部最多 有一个酶切位点)并电泳，结果如图乙。不考虑X、Y染色体的同源区段，下列分析错误的 是() □正常男性 bp,I1L2Ⅱ-112即-1里-2 535 ○正常女性 病男性 335 200 ⊙待分析的胎儿 图甲 圈乙 A.该病为常染色体隐性遗传病 B.单碱基突变后，MsI酶切位点消失 C.经分析，Ⅲ-2为女孩且不患病D.若Ⅱ-1和Ⅲ-2再生一孩子，患病的概率为1/4 17.双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶，同时驱动两个基因的转录。研究人员构建了含 双向启动子的基因表达载体，以检测双向启动子的作用效果。LUC基因编码荧光素酶，可催 化底物产生荧光。GUS基因编码阝-葡萄糖苷酶，催化底物生成蓝色物质，且-葡萄糖苷酶稳 试题第4页，共10页 定性比荧光素酶高。下列说法错误的是() 双海热动子 Age I Sph I Sa!I Not I ShI3pe美 S猴a美 物霉素抗性基因 GUS基因 →任观露素抗性基因一】 T-DNA 注：→启动子着终止子4ge1等表示限制酶 A.为排除载体干扰，对照组应设置不含双向启动子的空载质粒转化相同受体细胞 B.为连入GUS基因，需用AgeI和SalI酶切已整合双向启动子及LUC基因的质粒 C.若出现蓝色但未检测到荧光，说明双向启动子未发挥驱动双向转录的作用 D.GUS基因和LUC基因转录的模板链不是所在T-DNA的同一条链 18.假丝酵母中甘油合成代谢途径的关键酶是3-磷酸甘油脱氢酶，将3-磷酸甘油脱氢酶基因 (Gd)构建到表达载体上，如图1所示。通过农杆菌可将假丝酵母野生型菌株转化，获得 转Gd的重组菌株。野生型菌株与某重组菌株分别进行发酵实验，生产甘油的结果如图2所 示（注：ZeoR是腐草霉素抗性基因，KanR是卡那霉素抗性基因）。下列说法错误的是() 2d知 …售…黛组菌株 (ipd 一◇…野生烈麴终 d孤 BH】 时 图！ 2 A.将图1中重组质粒用EcoRI和HindⅢ酶切后电泳，可出现4条条带 B.在含有卡那霉素的选择培养基中筛选，获得最终重组菌株 C.与野生型菌株相比，该重组菌株可提高发酵液中甘油的含量、缩短发酵时间 D,转基因生物可能对环境造成新污染或破坏，需灭菌处理后再丢弃 19.DNA子链延伸过程若插入双脱氧核苷酸(ddNTP,如图1中*C表示ddCTP),则不能形 成磷酸二酯键，使DNA子链的延伸停止。在四个反应体系中除加入原料外，另外分别加入 一种特定碱基标记的dNTP,经扩增后可得到长度不同的DNA片段，这些片段经电泳分离 和放射性检测，即可根据终止位置对应的碱基种类读取序列。某DNA链经合成后测序列结 果如下图2所示，则该DNA模板链的序列为( 分子 5 3 GAATTC ......GTT 正常延伸CAA5 停止延伸*CAA5 图1 2 A.5'-TCGAAGTCAG-3' B.5-GACTGAAGCT-3' C.5-CTGACTTCGA-3' D.5-AGCTTCAGTC-3' 试题第5页，共10页 20.抗体由4条肽链构成，结构分为可变区(V区)和恒定区(C区，是抗体分子中相对较 为保守的区域，在不同物种间的差异较大)，与抗原特异性结合的区域为CD区，位于V区 中。单克隆抗体在疾病诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，但鼠源的单抗容易在人体内引发 人抗鼠抗体反应(HAMA),从而削弱其治疗的有效性。科学家对鼠源杂交抗体进行改造，生 产出效果更好的鼠一人嵌合抗体，主要流程如图所示。下列叙述正确的是() V基因 人C基因*L链嵌合基因 鼠源V区 构 V基因 人C基因→H链嵌合基因 银人嵌分抗体 基因我法载体 S2/0细胞 鼠一人嵌合抗体 A. 鼠一人嵌合抗体至少含有4个游离氨基，其抗体特异性由肽链的C区决定 B.鼠源单抗易引发人体免疫排斥反应与其可变区有关 C.构建鼠一人嵌合抗体表达载体时需限制酶和DNA聚合酶 D.鼠一人嵌合抗体的研制过程属于蛋白质工程，图中转染细胞的方法可能是显微注射法 二、非选择题：本题共5小题，共50分。 21.(11分)我国科学家成功地用PS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中 Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。 小分子化合物 小鼠成纤 ① ·PS细胞 Kdm4d的mRNA 维细胞 ④ →重构胚 →克隆鼠 卵母细胞②去核卵母细胞； 个 TSA (1)过程①除图中所示方法外，还可以借助载体将 导入细胞中，或直 接将 导入细胞中。过程②应选用处于 的卵母细胞，采用显 微操作法去“核”，其实是去除 (2)重构细胞经分裂、发育至 时期，可移植到受体子宫中。移植之前， 需要对受体动物进行 处理。若要获得遗传性状完全相同的多只幼 鼠，可对重构胚进行 再进行移植。 (3)图中向重构胚中注入Kdm4d的mRNA和TSA说明组蛋白的， 和 有 利于重构胚的后续发育过程。 (4)科研人员为确定Kdm4d的mRNA的作用，进行了如下实验，其中A组用正常培养液培养 重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的重构胚，实验结果如图所示。根 据实验结果推测Kdm4d的mRNA的作用是 囊胚形成率% 内细胞团形成率% 50 80 40 60 30 20 10 20 0A组B缠 0A组B组 试题第6页，共10页 22.（10分)奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转 化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。 请回答下列问题： 原料乳预处理 接种 发酵乳 稳定剂 分级 成品 麦州 谷料 选 芽 过滤 麦芽 料 菌 过滤 粉碎 煮沸 酵 入库 ① 罐装 上市 (1)酵母不能直接利用淀粉，可用赤霉素溶液浸泡大麦种子，诱导种子无需发芽也能产生α 淀粉酶，同时粉碎过程有利于大麦粉与酶的充分接触，以缩短图中所示的 过程的时间。 (2)接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进 行发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸，原因是 为了提高奶啤品质，筛选产酸量高的醋酸菌，研究人员分离出A1~A4四种菌株，并做了相关 发酵实验，醋酸菌的产酸量结果见下表（单位：g/100mL)。由表可知选择菌株 适合 进行后续的发酵，理由是 发酵时间/d 菌株 2 3 5 7 9 A0 1.20 4.00 4.86 5.62 5.62 A1 1.68 4.18 4.90 5.80 5.70 A2 1.48 3.68 4.68 5.54 5.50 A3 2.16 4.32 5.60 6.22 5.89 A4 1.68 3.80 4.88 5.60 5.62 注：A0为对照菌株：奥尔兰醋酸杆菌 (3)主发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期应 (从“延长“缩短”中选填)排气时 间间隔。酒精发酵一定时间后，当观察到发酵装置内 ,说 明发酵完毕。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是 (4)敲除酿酒酵母中的某个蛋白酶基因，减少发酵液中蛋白的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳 定性。用蛋白固体培养基筛选敲除了该基因的酵母菌，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周围 形成透明圈。需要筛选透明圈 的菌落，表明其蛋白酶活性 23.(10分)不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受 体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产 物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低， 导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2=24) 与柴胡(2n=12)进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 试题第7页，共10页 A处理 红豆杉 愈伤组织② 原生质体 ③异源融合 再生 ④ 】杂种 @ 原生质体 细胞团 植株 柴胡 愈伤组织 原生质体 B处理 (1)过程①中需将外植体经 后接种于MS培养基上诱导形成愈伤组织。 (2)过程②中将愈伤组织加入经过滤灭菌处理的一定渗透压的无菌酶液中，离心后弃去 (填“上清液”或“沉淀物)，加入洗涤液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是 (3)已知X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再 持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。分析上图，为培育能 产生紫杉醇的柴胡，融合前对红豆杉和柴胡的原生质体分别进行的“A处理”、“B处理”依次 为 (填正确选项前的字母)。 a.X射线、X射线 b.X射线、碘乙酰胺 c.碘乙酰胺、X射线 d.碘乙酰胺、碘乙酰胺 (4)过程③常用的化学试剂是 。经诱导融合后，再生细胞团只能来自于异源融合 的原生质体，这是因为只有杂种细胞才具备 能力。 (5)采用二乙酸荧光素(FDA)法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后 可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞膜，会留在细胞内发出 荧光。据此方法选择有活性的原生质体用于融合。为监测原生质体密度，融合前需对原生质 体用血细胞计数板计数。将培养液经2次10倍稀释后，用25×16型(1mm×lmm×0.1mm)血细 胞计数板计数5个中格中的原生质体数，理论上 (填“有”或“无)荧光的原生质体 的个数应不少于 才能达到每毫升2×103个有活性原生质体的预期密度。 24.(8分)猴痘是由猴痘病毒(MPXV)引发的传染性疾病。E8L蛋白是MPXV的核心结构蛋 白，获得针对E8L蛋白的抗体对于猴痘的诊断和治疗十分重要。为快速获得抗E8L蛋白的 单克隆抗体，研究人员利用下图创新技术路线进行制备。 ①用EgLm歌NA ②检测血清至8篷抗体 ③筛选并获得 疫苗免疫小鼠 水平，确认免疫效果 相应的细胞 ⑥检测单克隆 ⑤导入细胞，表达和 ④获取抗体基因， 抗体的亲和力 纯化得到单克隆抗体 构建基因表达载体 回答下列问题 (1)被脂质体包裹的E8LRNA疫苗注入小鼠体内后，与小鼠细胞融合，该融合细胞表达出的 是 (填“E8L蛋白”或抗E8L蛋白的抗体”。为快速产生大量抗体，①处可采 取的措施是 (2)经②检测小鼠血清抗体水平后，从小鼠脾脏获取B细胞，用APC/FITC荧光分选技术对目 标细胞进行筛选。该技术用偶联APC荧光的抗体(IgG)去识别分泌抗体的浆细胞，并呈现出 APC信号；用生物素先标记E8L蛋白，使其与浆细胞表面的受体(BCR)特异性结合，同时用 生物素与FTC标记的链霉亲和素结合，使其呈现TC+信号。图1是用流式细胞仪的检测 试题第8页，共10页 结果，则 (填图中的字母)区域的细胞为目标细胞，依据是 10 APC A APC FITC 104 FITC+ 102 102 104 10 AP 1 (3)步骤⑥用抗体检测牛痘病毒、水痘病毒、甲流病毒等病毒。结果除牛痘病毒的D8蛋白外， 抗体无法与其他病毒蛋白结合，请推测出现该现象的原因是 (4)该抗体未来可以用于猴痘疫情暴发时的免疫诊断和免疫治疗。图2是用于疾病诊断的抗原 检测试剂盒原理示意图，图3是检测阳性和阴性的结果示意图，若检测结果为阳性，在正常 情况下应该发生了 次特异性结合。 样品液流方向 丫显色剂结合的可移动的抗体1 待测样品 丫固定的抗体2 ￥固定的抗体3 家盛 样品垫 结合垫 吸水垫 检测线(T线，质控线(C线) 图2 阳性©。 阴性⊙ 图3 25.（11分)多种霉菌都能产生T一2毒素污染饲料，引起家猪中毒。科研人员将C3A酶基 因导入家猪受精卵内，获得肝脏细胞具有降解T一2毒素能力的转基因家猪。C3A酶含有R、 Q两个功能区，其对应的C3A基因片段及质粒的结构如图所示。 终止子 BamH I neor 5'-G↓GATCC-3 引物间距离HsV 约3000kb Hind III 5'-A↓AGCTT-3 注 启动子 有neo基因的细胞具有G418抗性，Hsv基因 的产物能把D川PG转化成有毒物质使细胞死亡 试题第9页，共10页 送…-丙氨酸-天冬酰胺精氨酸苯丙氨酸赖氨酸-丙氨酸-C00H C3A部分序列对应氨基酸 C3A GCTAACAGATTCAAGGCG- (1600kb) CGATTGTCTAAGTTCCGC- A端 R C3AAR C3AAQ 注1.密码子：丙氨酸：GCU,CCC.GCA,GCG;天冬酰胺：AAU,AAC:精氨 酸：AGA:AGG:苯丙氨酸：UU,UC赖酸AAA,AAG:亮氨酸：CUC,CUU。 2,肽链的合成方向是氨基端→羧基端 (I)图中no基因的作用作为标记基因，筛选出成功导入目的基因的受体细胞。为实现目的基 因仅在家猪的肝脏细胞中表达，需保证运载体中含有 (2)科研人员在对C3A基因扩增时选用的A、B两端引物分别是 为使目的基因与载 体正确连接，在A、B端加上的限制酶识别序列分别是 。通 过PCR技术扩增图中C3A、C3A△R、C3A△Q三种不同长度的目标DNA片段，共需要的引 物有 种。 (3)若两限制酶序列之间距离约为2100kb,为检测目的基因是否插入运载体，可将引物R0 Fa共同加入反应体系后，PCR扩增后并电泳，观察在 kb处是否存在产物。用 法将基因表达载体导入受精卵后在含 的培养液中培养，能 存活的细胞即为含有基因表达载体的受精卵。 (4)成功培育的转基因家猪对T一2毒素的解毒效果不佳，科研人员发现家猪体内的PM蛋白 能抑制C3A酶活性，据此研发了对应的药物X。为探索药物X提高解毒效果的机理，将扩增 出的3种基因片段插入带有FLAG标签序列的质粒中，构建3种融合基因：FLAG一C3A, FLAG-C3A△R,FLAG一C3A△Q,再将分别含有3种融合基因的质粒转染受体细胞。3种融 合蛋白成功表达后，与PM蛋白、药物X按照表中的组合方式分成7组各组样品混合后分别 流经含FLAG抗体的介质，分离出与介质结合的物质再用PM抗体检测，结果如表所示。对 照组①的作用是说明PM蛋白不与 蛋白结合。药物X的作用机理 是 0 组别 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ FLAG-C3A FLAG—C3A△R FLAG-C3A△Q 药物X V PM PM抗体检测结果 ++ ++ 注：“V代表施加相应物质，“+”代表检测结果呈阳性。 试题第10页，共10页