精品解析：内蒙古赤峰第四中学2025-2026学年第二学期月考试题 高二生物

赤峰第四中学2025-2026学年第二学期月考试题 高二生物 注意事项： 1．试题满分：100分；考试时间：75分钟。 2．答题前，考生务必将自己的姓名、考号填写在答题卡上。 3．选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。不能答在本试卷上，否则无效。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 下列关于植物组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 只有植物体分生组织的细胞才能通过植物组织培养获得完整的植株 B. 愈伤组织属于未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强 C. 培养前需要用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液对外植体进行消毒 D. 为防止杂菌污染，从接种外植体到生成试管苗尽量在同一个锥形瓶内完成 2. 消毒和灭菌是生物学实验中的常规操作。下列有关叙述正确的是（　　） A. 涂布器及实验者的衣物、手等无需进行灭菌，消毒即可 B. 在高压蒸汽灭菌时，保温保压结束后应立即关闭电源、打开排气阀 C. 倒平板时在火焰附近敞开皿盖，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖 D. 用紫外线对实验室照射之前，适量喷洒苯酚等消毒液可以加强消毒效果 3. 下列有关制作泡菜的叙述，错误的是（ ） A. 乳酸菌是好氧细菌，在细胞质基质中产生乳酸和二氧化碳 B. 制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的 C. 腌制泡菜时可通过向坛盖边沿的水槽注水保持发酵所需环境 D. 制作泡菜过程中，蔬菜、蒜、姜及其他香辛料不能将泡菜坛装满 4. 如图表示实验小组培养某种细菌的结果，有关该接种方法下列叙述错误的是（　　） A. 接种时采用的接种工具是接种环 B. 需要对接种工具进行3次灭菌 C. 不能对培养液中细菌数目计数 D. 可以对培养液中的菌株分离纯化 5. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验，叙述错误的是（ ） A. 以尿素为唯一氮源的培养基可筛选出尿素分解菌 B. 常用液体培养基对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数 C. 为减小实验误差，使用稀释涂布平板法计数时平板应涂布均匀 D. 为了解培养基是否被污染，可用未接种的培养基相同培养条件培养检测 6. 刚果红是一种染料，它可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B. 菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 C. 图中I、II区的细菌数量均太多，应从III区挑取单菌落 D. III区的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的不含代谢废物的纯培养物 7. 如图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程。据图分析，下列叙述错误的是（ ） A. ①过程需用纤维素酶和果胶酶的混合物处理 B. ③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能 C. ④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理 D. ②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变 8. 下列有关植物细胞工程及其应用的叙述，错误的是（ ） A. 取香蕉茎尖分生组织进行组织培养，可获得脱毒苗 B. 利用植物组织培养过程中产生的突变体可培育新品种 C. 花药离体培养得到的单倍体植株可大田栽培提高作物产量 D. 利用植物细胞培养获得紫草宁，实现了细胞产物的工厂化生产 9. 对贴壁生长的动物细胞进行传代培养，图示操作简易流程。下列相关叙述错误的是（　　） A. 步骤①中的消化液通常含有胰蛋白酶 B. 步骤②中及时终止消化可防止消化过度损伤细胞 C. 步骤③中对细胞进行计数可用血细胞计数板 D. 步骤④中分瓶前无需灭菌，即可直接分装细胞悬液 10. 利用如图所示的植物体细胞杂交技术可获得杂种植株。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①应在等渗溶液中进行以维持原生质体的正常形态 B. 步骤②是该技术的关键环节，融合的细胞均具有两种细胞的遗传物质 C. ③过程中高尔基体、线粒体等细胞器参与细胞壁的形成 D. 步骤④⑤的原理是植物细胞的全能性，某些基因会在特定时期表达 11. 下图是单克隆抗体制备过程及原理示意图，其中抗原决定簇是指抗原表面或内部能决定抗原性的基团，骨髓瘤细胞是一种营养缺陷型细胞。相关叙述正确的是（ ） A. 动物免疫的原理是一种抗原决定簇直接诱导形成一种浆细胞 B. 图中a-d起源于造血干细胞，一种浆细胞可合成分泌多种抗体 C. 选用营养缺陷型骨髓瘤细胞有利于筛选杂交瘤细胞 D. 筛选a融合杂交瘤细胞时，通常采用选择培养基 12. 科研工作者将抗病基因M9导入水稻细胞，获得抗病植株。目的基因、质粒及限制酶的切割位点如图所示，限制酶的识别序列如下表所示。操作过程中选择的限制酶应为（ ） 限制酶 识别序列 EcoRI 5'-G↓AATTC-3′ HindⅢ 5'-A↓AGCTT-3' BamHI 5'-G↓GATCC-3′ XhoI 5'-T↓CTAGA-3′ Sau3AI 5'-↓GATC-3' A. EcoRI和BamHI B. HindⅢ和BamHI C. EcoRI和Sau3AI D. Sau3AI和XhoI 13. 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下列叙述正确的是（） A. 若要对猴胚胎进行性别鉴定则应从细胞③取样 B. 移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满的培养箱中进行 C. 囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因都不同 D. 猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同，但具有相同的基因组 14. 梅花鹿和马鹿的杂交后代生命力强、肉质好，但自然杂交很难完成。研究人员通过体外受精、胚胎移植等技术提高杂交后代的繁殖率，相关流程如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 对母梅花鹿甲和母梅花鹿丙注射激素进行同期发情处理 B. 从公马鹿乙采集的精子需进行获能处理才能用于体外受精 C. 后代丁的遗传物质一半来自母梅花鹿甲，一半来自马鹿乙 D. 可将早期胚胎中囊胚的内细胞团均等分割，以提高胚胎利用率 15. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如下图所示，图中a、b、c表示过程。下列叙述错误的是（　　） A. PCR循环过程控制的温度高低关系为a>c>b B. 延伸的温度和时间与引物和待扩增片段的长度均有关 C. 每次循环需要的引物I的数量与引物II的相同 D. 若设计的引物与模板不完全配对，可适当降低PCR复性的温度 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 葡萄酒是人类利用微生物发酵制作而成的佳酿，酿造历史源远流长。关于自制葡萄酒，下列叙述错误的是（ ） A. 自酿葡萄酒主要利用葡萄皮表面的野生酵母菌进行发酵 B. 应将新鲜葡萄去除枝梗和腐烂的籽粒用清水冲洗1-2次 C. 葡萄酒制作过程中要将温度控制在18-30℃ D. 酿造葡萄酒需使用密闭性较好的容器，定期打开盖子放气 17. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。下列叙述正确的是（ ） A. 体细胞培养时，需定期更换培养液以清除代谢废物和补充营养物质 B. 去核是指用显微操作法去除卵母细胞的染色体—纺锤体复合物 C. 需激活重构胚促使其完成细胞分裂和发育进程后移植 D. 丁牛的遗传物质来自甲牛和乙牛，丁牛的性状与甲、乙牛均有关 18. 菊花是一种双子叶植物，易感桃蚜而影响植物生长。某科研团队获得了转GNA基因（表达产物能有效抑制桃蚜生长）菊花，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程a、b分别表示逆转录和PCR，可获得大量GNA基因 B. 图中用到的Ti质粒是取自土壤中农杆菌的一种天然质粒 C. 图中c过程需要将GNA基因插入到Ti质粒的T-DNA中 D. 通过桃蚜接种实验可以检测图中菊花植株对桃蚜的抗性 19. 下图为科研人员利用多能干细胞（iPS细胞）培养多种细胞的相关流程。下列叙述正确的是（ ） A. 重编辑过程提高了体细胞的分化程度和分裂能力 B. 过程①体现了动物细胞的全能性 C. 过程②中需导入不同的基因诱导分化形成不同的组织 D. 使用iPS细胞治疗疾病可避免移植器官不足和伦理等问题 20. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 下列叙述错误的是（ ） A. 经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B. ①需获得MII期的去核卵母细胞 C. ②能大幅改良动物性状 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长，起到生物防腐的作用。请回答下列问题： （1）制作酸奶是利用乳酸菌在无氧条件下进行发酵，其原理是__________（填反应简式），该过程发生在乳酸菌细胞的__________中，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时能将奶酪蛋白水解为短肽和氨基酸的原因是__________。 （2）纯化乳酸菌时可选用__________或稀释涂布平板法接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明__________。MRS是针对乳酸菌的选择培养基，还应设置一组牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，其作用是__________。 （3）为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。 三种乳酸菌对各致病菌的抑菌圈直径/mm 乳酸菌编号 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 阪崎肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 大肠杆菌 PC3 16.2 2.0 14.4 13.1 11.9 PC15 18.2 15.3 12.1 13.0 10.5 GL5 22.5 9.6 16.2 15.3 13.5 ①实验的自变量是___________。 ②由实验结果可知，乳酸菌对_____（填致病菌）的抑菌效果比较突出；在生产应用中，不宜采用_____号乳酸菌进行防腐。 （4）从培养基的理化性质来看，工业生产上一般使用_______培养基进行扩大培养，________培养可用来观察菌落特征。 22. 紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用）。 （1）该研究应用的生物技术所依据的原理是________和________。 （2）获得原生质体最常用的方法是酶解法，先利用________去除植物的细胞壁。然后进行人工诱导使原生质体融合，人工诱导原生质体融合的物理方法有：________等（答出1种）。经过过程①，只有异源融合的原生质体能够存活的原因是________。 （3）过程③要进行照光培养，照光的作用是_______，所用的培养基与②过程的主要区别是_______。 （4）百脉根富含单宁，单宁不是百脉根生长和生存所必需的产物，属于______代谢物，在植物体内含量很低，化学合成困难。单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产品。若要获得高产单宁的突变体，适合作为诱变处理的对象的是：_______（填“茎尖”、“愈伤组织”或“试管苗”），原因是________。 23. 如下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题： （1）为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射________，不注射性激素的原因是________。 （2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是________。 （3）①指的是________。进行胚胎分割时，应选择发育到________时期的胚胎进行操作，在对上图的胚胎进行分割时，应注意________________。 （4）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________。 （5）胚胎分割技术的优势是________________。 24. 苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。 （1）配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH______（填“之前”或“之后”），培养基灭菌的常用方法是______。 （2）图中①过程取5g土壤加入______mL无菌水中，②③过程用______法获得芽孢杆菌单菌落，若10-1、10-2悬液对应平板上菌苔完全覆盖培养基，10-3、10-4、10-5对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则取样土壤中芽孢杆菌总数约______个。 （3）目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于______（填“A”或“B”）处，将芽孢杆菌接种______（填“A”或“B”）处。 （4）检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于苹果树腐烂病防治。与化学防治相比，该方法的优势是______。 25. 天然β淀粉酶大多耐热性差，不利于工业化应用。我国学者借助PCR改造β-淀粉酶基因，并将改造的基因与pLN23质粒重组后导入大肠杆菌，最终获得耐高温的β-淀粉酶。回答下列问题： （1）将改造的基因与pLN23质粒重组时用到的工具酶有_____。 （2）PCR中使用的聚合酶属于（ ）（填写编号）。 ①以DNA为模板的RNA聚合酶 ②以RNA为模板的RNA聚合酶 ③以DNA为模板的DNA聚合酶 ④以RNA为模板的DNA聚合酶 （3）某天然β-淀粉酶由484个氨基酸构成，研究发现，将该酶第476位天冬氨酸替换为天冬酰胺，耐热性明显提升。在图1所示的β-淀粉酶基因改造方案中，含已替换碱基的引物是_____（填写编号）。 （4）为了使上述改造后的基因能在大肠杆菌中高效表达，由图2所示的pLN23质粒构建得到基因表达载体。除图示信息外，基因表达载体中还应该有_____ 和 _____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 赤峰第四中学2025-2026学年第二学期月考试题 高二生物 注意事项： 1．试题满分：100分；考试时间：75分钟。 2．答题前，考生务必将自己的姓名、考号填写在答题卡上。 3．选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。不能答在本试卷上，否则无效。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 下列关于植物组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 只有植物体分生组织的细胞才能通过植物组织培养获得完整的植株 B. 愈伤组织属于未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强 C. 培养前需要用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液对外植体进行消毒 D. 为防止杂菌污染，从接种外植体到生成试管苗尽量在同一个锥形瓶内完成 【答案】B 【解析】 【分析】1、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料。 2、植物组织培养中植物激素使用：植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。 【详解】A、植物体分生组织的细胞全能性较高，通过植物组织培养获得完整的植株的能力较强，但其他的植物细胞也能通过植物组织培养获得完整的植株，A错误； B、愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，没有特定的结构和功能，B正确； C、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒，先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，C错误； D、植物组织培养包括脱分化和再分化两个过程，这两个过程的条件不同，从接种外植体到生成试管苗不能在同一个锥形瓶内完成，D错误。 故选B。 2. 消毒和灭菌是生物学实验中的常规操作。下列有关叙述正确的是（　　） A. 涂布器及实验者的衣物、手等无需进行灭菌，消毒即可 B. 在高压蒸汽灭菌时，保温保压结束后应立即关闭电源、打开排气阀 C. 倒平板时在火焰附近敞开皿盖，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖 D. 用紫外线对实验室照射之前，适量喷洒苯酚等消毒液可以加强消毒效果 【答案】D 【解析】 【详解】A、涂布器需灼烧灭菌，而实验者的手和衣物仅需消毒，A错误； B、高压蒸汽灭菌结束后应让压力自然下降至零，再打开排气阀，立即打开会导致培养基喷出，B错误； C、倒平板时应将皿盖打开一条缝隙进行操作，防止杂菌污染，C错误； D、紫外线可杀灭空气中的微生物，喷洒苯酚可增强物体表面消毒效果，两者结合能提高消毒效果，D正确。 故选D。 3. 下列有关制作泡菜的叙述，错误的是（ ） A. 乳酸菌是好氧细菌，在细胞质基质中产生乳酸和二氧化碳 B. 制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的 C. 腌制泡菜时可通过向坛盖边沿的水槽注水保持发酵所需环境 D. 制作泡菜过程中，蔬菜、蒜、姜及其他香辛料不能将泡菜坛装满 【答案】A 【解析】 【详解】A、乳酸菌是厌氧细菌，其无氧呼吸的产物仅为乳酸，不产生二氧化碳，且无氧呼吸的场所为细胞质基质，A错误； B、传统泡菜制作无需人工接种乳酸菌，是利用植物体表面天然存在的乳酸菌进行发酵的，B正确； C、泡菜发酵需要无氧环境，向坛盖边沿的水槽注水可起到水封作用，隔绝外界空气，维持发酵所需的无氧环境，C正确； D、制作泡菜时若将坛装满，发酵过程中发酵液易溢出，还可能影响无氧环境的维持，因此材料不能装满泡菜坛，D正确。 4. 如图表示实验小组培养某种细菌的结果，有关该接种方法下列叙述错误的是（　　） A. 接种时采用的接种工具是接种环 B. 需要对接种工具进行3次灭菌 C. 不能对培养液中细菌数目计数 D. 可以对培养液中的菌株分离纯化 【答案】B 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 (2)稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、由图可知，该接种方法是平板划线法，接种工具是接种环，A正确； B、平板划线法操作过程中，每次划线前和划线结束后都要对接种环灭菌，因此至少4次灭菌，B错误； C、平板划线法不能用于对培养液中细菌数目计数，稀释涂布平板法可用于计数，C正确； D、平板划线法可以通过多次划线，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，从而对培养液中的菌株分离纯化，D正确。 故选B。 5. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验，叙述错误的是（ ） A. 以尿素为唯一氮源的培养基可筛选出尿素分解菌 B. 常用液体培养基对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数 C. 为减小实验误差，使用稀释涂布平板法计数时平板应涂布均匀 D. 为了解培养基是否被污染，可用未接种的培养基相同培养条件培养检测 【答案】B 【解析】 【分析】 1、选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。 2、接种微生物常用的接种方法由平板划线法和稀释涂布平板法两种接种方法。 【详解】A、以尿素为唯一氮源的选择培养基可以初步筛选出能够分解尿素的细菌，之后还需要进行鉴定，A正确； B、常用固体培养基对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，B错误； C、为减小实验误差，使用稀释涂布平板法计数时平板应涂布均匀，若涂布不均匀会导致菌落重叠，导致统计实验结果误差较大，C正确； D、检测培养基是否被污染的方法是将未接种的培养基在相同的环境下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，D正确。 故选B。 6. 刚果红是一种染料，它可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B. 菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 C. 图中I、II区的细菌数量均太多，应从III区挑取单菌落 D. III区的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的不含代谢废物的纯培养物 【答案】C 【解析】 【详解】A、倒平板后不能间歇晃动，晃动反而容易产生气泡，导致培养基表面不平整，A错误； B、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌产生的纤维素酶可以水解纤维素而使菌落周围出现无色透明圈，B错误； C、平板划线法的原理是随划线次数增加，接种环上的细菌数量逐渐减少，图中I、II区细菌数量多、密度高，III区已经获得分散的单菌落，纯化菌种时需要从III区挑取单菌落，C正确； D、单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，但菌落中包含微生物的代谢废物，D错误。 7. 如图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程。据图分析，下列叙述错误的是（ ） A. ①过程需用纤维素酶和果胶酶的混合物处理 B. ③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能 C. ④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理 D. ②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变 【答案】D 【解析】 【详解】A、①表示去除植物细胞壁的过程，需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理，A正确； B、③是脱分化过程，该过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能，B正确； C、④表示再分化过程，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的共同作用在组织培养过程中非常重要，C正确； D、②表示人工诱变过程，其原理是基因突变，而基因突变是不定向的，D错误。 8. 下列有关植物细胞工程及其应用的叙述，错误的是（ ） A. 取香蕉茎尖分生组织进行组织培养，可获得脱毒苗 B. 利用植物组织培养过程中产生的突变体可培育新品种 C. 花药离体培养得到的单倍体植株可大田栽培提高作物产量 D. 利用植物细胞培养获得紫草宁，实现了细胞产物的工厂化生产 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物茎尖分生组织的细胞分裂旺盛，病毒极少甚至不含病毒，对该部位进行组织培养可获得无病毒的脱毒苗，A正确； B、植物组织培养过程中，愈伤组织细胞持续处于增殖状态，易受环境、诱变因素影响发生基因突变，筛选出具有有利变异的突变体可培育作物新品种，B正确； C、花药离体培养得到的单倍体植株通常植株弱小、高度不育，无法正常开花结果，不能直接大田栽培提高产量，需经染色体加倍处理后才可应用于生产，C错误； D、通过植物细胞培养技术可大量增殖紫草细胞，从中提取细胞产物紫草宁，实现次级代谢产物的工厂化生产，D正确。 9. 对贴壁生长的动物细胞进行传代培养，图示操作简易流程。下列相关叙述错误的是（　　） A. 步骤①中的消化液通常含有胰蛋白酶 B. 步骤②中及时终止消化可防止消化过度损伤细胞 C. 步骤③中对细胞进行计数可用血细胞计数板 D. 步骤④中分瓶前无需灭菌，即可直接分装细胞悬液 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长，当生长到接触抑制时，需用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等消化液处理，这些酶能分解细胞间及细胞与瓶壁间的蛋白质等物质，使细胞与瓶壁分离，便于后续分瓶培养，A正确； B、②步骤中吸出消化液，加入培养液，一方面消化液中的胰蛋白酶等会持续作用，吸除消化液可终止消化作用，避免过度消化导致细胞受损；另一方面加入培养液可对细胞进行稀释，提供适宜的营养环境和生存空间，B正确； C、细胞悬液常用血细胞计数板进行计数，C正确； D、在细胞培养中分瓶用的培养瓶必须是灭菌过，D错误。 故选D。 10. 利用如图所示的植物体细胞杂交技术可获得杂种植株。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①应在等渗溶液中进行以维持原生质体的正常形态 B. 步骤②是该技术的关键环节，融合的细胞均具有两种细胞的遗传物质 C. ③过程中高尔基体、线粒体等细胞器参与细胞壁的形成 D. 步骤④⑤的原理是植物细胞的全能性，某些基因会在特定时期表达 【答案】B 【解析】 【详解】A、步骤①是去除细胞壁，为了维持原生质体的正常形态，步骤①需要在等渗溶液中进行，A正确； B、步骤②是诱导植物细胞融合，可能会有同种细胞融合的现象，这种融合细胞只含有一种细胞的遗传物质，B错误； C、③是杂种细胞再生细胞壁的过程，植物细胞壁的形成与高尔基体相关，该过程需要线粒体提供能量，因此两种细胞器都参与了该过程，C正确； D、步骤④为脱分化，步骤⑤为再分化，杂种细胞经过步骤④⑤（植物组织培养技术）得到杂种植株，其原理是植物细胞的全能性，某些基因会在特定时期表达，D正确。 11. 下图是单克隆抗体制备过程及原理示意图，其中抗原决定簇是指抗原表面或内部能决定抗原性的基团，骨髓瘤细胞是一种营养缺陷型细胞。相关叙述正确的是（ ） A. 动物免疫的原理是一种抗原决定簇直接诱导形成一种浆细胞 B. 图中a-d起源于造血干细胞，一种浆细胞可合成分泌多种抗体 C. 选用营养缺陷型骨髓瘤细胞有利于筛选杂交瘤细胞 D. 筛选a融合杂交瘤细胞时，通常采用选择培养基 【答案】C 【解析】 【详解】A、由图可知，一种抗原表面有多种抗原决定簇，一种抗原决定簇诱导形成一种浆细胞，但体液免疫中大多数抗原需要经过抗原呈递细胞处理呈递，A错误； B、图中a~d表示淋巴细胞，淋巴细胞起源于造血干细胞，但是一种浆细胞只能合成分泌一种抗体，B错误； C、在选择培养基中，营养缺陷型骨髓瘤细胞以及骨髓瘤自身融合细胞不能增殖，这样有利于筛选杂交瘤细胞，C正确； D、图中"筛选a融合杂交瘤细胞"是指筛选出能产生针对a抗原决定簇的特异性抗体的杂交瘤细胞，该步骤需要用克隆化培养和专一抗体（抗原-抗体杂交）筛选；选择培养基仅用于第一步筛选，淘汰未融合细胞、同种融合细胞，获得所有杂交瘤细胞，D错误。 12. 科研工作者将抗病基因M9导入水稻细胞，获得抗病植株。目的基因、质粒及限制酶的切割位点如图所示，限制酶的识别序列如下表所示。操作过程中选择的限制酶应为（ ） 限制酶 识别序列 EcoRI 5'-G↓AATTC-3′ HindⅢ 5'-A↓AGCTT-3' BamHI 5'-G↓GATCC-3′ XhoI 5'-T↓CTAGA-3′ Sau3AI 5'-↓GATC-3' A. EcoRI和BamHI B. HindⅢ和BamHI C. EcoRI和Sau3AI D. Sau3AI和XhoI 【答案】A 【解析】 【详解】HindⅢ会破坏启动子，Sau3AI也能切割BamHI的识别序列，观察M9基因的结构可知，其内部含有XhoI的识别序列，其两侧含有EcoRI和BamHI的识别序列，综上所述，应选择的限制酶为EcoRI和BamHI，A正确，BCD错误。 13. 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下列叙述正确的是（） A. 若要对猴胚胎进行性别鉴定则应从细胞③取样 B. 移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满的培养箱中进行 C. 囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因都不同 D. 猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同，但具有相同的基因组 【答案】D 【解析】 【详解】A、对胚胎进行性别鉴定时，应从滋养层细胞（②）取样，而非内细胞团细胞（③），以避免对胚胎发育造成影响，A错误； B、细胞和囊胚的培养应放在含95%空气和5%CO₂的培养箱中，而非充满CO₂的环境，B错误； C、囊胚细胞②（滋养层）和③（内细胞团）均由细胞①（胚胎干细胞）分裂分化形成，两者表达的基因不完全相同，而非都不同，C错误； D、猴的成纤维细胞和胚胎干细胞由同一个受精卵分裂分化而来，遗传物质未改变，因此具有相同的基因组，D正确。 故选D。 14. 梅花鹿和马鹿的杂交后代生命力强、肉质好，但自然杂交很难完成。研究人员通过体外受精、胚胎移植等技术提高杂交后代的繁殖率，相关流程如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 对母梅花鹿甲和母梅花鹿丙注射激素进行同期发情处理 B. 从公马鹿乙采集的精子需进行获能处理才能用于体外受精 C. 后代丁的遗传物质一半来自母梅花鹿甲，一半来自马鹿乙 D. 可将早期胚胎中囊胚的内细胞团均等分割，以提高胚胎利用率 【答案】C 【解析】 【详解】A、胚胎移植前，需要对供体（甲）和受体（丙）进行同期发情处理，使它们的子宫环境同步，这样才能让移植的胚胎顺利着床，A正确； B、刚采集的精子不具备受精能力，必须经过获能处理（如培养法或化学诱导法），才能与成熟的卵细胞完成受精，B正确； C、受精卵的核遗传物质确实一半来自父方（公马鹿乙）、一半来自母方（母梅花鹿甲），但细胞质中的遗传物质几乎全部来自卵细胞（母梅花鹿甲）。 因此，后代丁的总遗传物质并不是严格的 “各占一半”，母方的贡献更多，C错误； D、在胚胎分割操作中，囊胚阶段必须对内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。这样做可以得到多个基因型相同的胚胎，从而提高胚胎利用率，D正确。 故选C。 15. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如下图所示，图中a、b、c表示过程。下列叙述错误的是（　　） A. PCR循环过程控制的温度高低关系为a>c>b B. 延伸的温度和时间与引物和待扩增片段的长度均有关 C. 每次循环需要的引物I的数量与引物II的相同 D. 若设计的引物与模板不完全配对，可适当降低PCR复性的温度 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR循环过程包括变性、复性和延伸三个步骤，其中变性温度（a）最高，超过90 ℃，目的是使DNA双链解开；复性温度（b）较低，一般为50 ℃左右，使引物与模板链结合；延伸温度（c）一般为72 ℃左右，是DNA聚合酶催化DNA合成的温度。因此，温度高低关系为a＞c＞b，A正确； B、延伸过程是在DNA聚合酶的作用下，以脱氧核苷酸为原料，按照碱基互补配对原则合成DNA的过程。延伸的时间与待扩增片段的长度有关，片段越长，所需的延伸时间越长；但延伸温度主要由DNA聚合酶的最适温度决定，B错误； C、PCR每次循环中，引物Ⅰ和引物Ⅱ都分别与模板链的两端进行结合，参与DNA的合成，所以每次循环需要的引物Ⅰ的数量与引物Ⅱ的数量是相同的，C正确； D、PCR技术中，复性过程是引物与模板链结合的过程，若设计的引物与模板不完全配对，适当降低PCR复性的温度，可使引物与模板更易结合，提高引物与模板的结合效率，D正确。 故选B。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 葡萄酒是人类利用微生物发酵制作而成的佳酿，酿造历史源远流长。关于自制葡萄酒，下列叙述错误的是（ ） A. 自酿葡萄酒主要利用葡萄皮表面的野生酵母菌进行发酵 B. 应将新鲜葡萄去除枝梗和腐烂的籽粒用清水冲洗1-2次 C. 葡萄酒制作过程中要将温度控制在18-30℃ D. 酿造葡萄酒需使用密闭性较好的容器，定期打开盖子放气 【答案】BD 【解析】 【详解】A、自酿葡萄酒不需要额外接种酵母菌，葡萄果皮表面天然附着野生型酵母菌，发酵就是依靠这些野生酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，A正确； B、葡萄处理的正确操作顺序：先清水冲洗 1~2 次 → 再去除枝梗、烂果，B错误； C、酵母菌酒精发酵的最适温度范围是18℃-30℃，在此温度下酵母菌代谢、产酒效率最高，C正确； D、开盖会让外界氧气、杂菌大量进入容器：氧气进入会抑制酵母菌无氧呼吸，停止产酒精，还会让酵母菌有氧大量繁殖、酒体变质； 杂菌进入会导致葡萄汁发霉腐败。 正确操作是用带排气阀的密闭容器（只排二氧化碳、不进空气），或拧松瓶盖排气，D错误。 17. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。下列叙述正确的是（ ） A. 体细胞培养时，需定期更换培养液以清除代谢废物和补充营养物质 B. 去核是指用显微操作法去除卵母细胞的染色体—纺锤体复合物 C. 需激活重构胚促使其完成细胞分裂和发育进程后移植 D. 丁牛的遗传物质来自甲牛和乙牛，丁牛的性状与甲、乙牛均有关 【答案】ABCD 【解析】 【详解】A、在动物细胞培养过程中，细胞会不断进行代谢，产生代谢废物，同时营养物质会被消耗。定期更换培养液能够为细胞提供新鲜的营养物质，还可以及时清除代谢废物，从而营造适宜细胞生长和增殖的环境，保证供体细胞培养的顺利进行，A正确； B、去核是指用显微操作法去除卵母细胞的纺锤体—染色体复合物，B正确； C、在体细胞核移植中，过程③用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、 乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚， 使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、丁牛是通过体细胞核移植技术获得的克隆牛，其细胞核遗传物质来自甲牛，但细胞质遗传物质来自乙牛。同时，代孕丙牛为胚胎发育提供了孕育环境，不过不影响丁牛的遗传物质，D正确。 18. 菊花是一种双子叶植物，易感桃蚜而影响植物生长。某科研团队获得了转GNA基因（表达产物能有效抑制桃蚜生长）菊花，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 过程a、b分别表示逆转录和PCR，可获得大量GNA基因 B. 图中用到的Ti质粒是取自土壤中农杆菌的一种天然质粒 C. 图中c过程需要将GNA基因插入到Ti质粒的T-DNA中 D. 通过桃蚜接种实验可以检测图中菊花植株对桃蚜的抗性 【答案】ACD 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、过程a是由mRNA合成DNA的过程，表示逆转录，b表示 PCR，PCR是一项体外扩增DNA的技术，可利用该技术获得大量 GNA基因，A正确； B、一般而言，基因工程中所用的质粒都是经改造后的，图示Ti质粒都是经过改造的，其标记基因可用于重组Ti质粒的筛选，B错误； C、由图可知，将目的基因导入受体细胞时采用的是农杆菌转化法，由于Ti质粒的T-DNA可以转移到受体细胞并与受体细胞的染色体DNA整合到一起，因此过程c需将GNA基因插入到Ti质粒的T-DNA中，C正确； D、可通过桃蚜接种实验可以检测图中菊花植株对桃蚜的抗性，该鉴定属于个体生物学水平的鉴定，D正确。 故选ACD。 19. 下图为科研人员利用多能干细胞（iPS细胞）培养多种细胞的相关流程。下列叙述正确的是（ ） A. 重编辑过程提高了体细胞的分化程度和分裂能力 B. 过程①体现了动物细胞的全能性 C. 过程②中需导入不同的基因诱导分化形成不同的组织 D. 使用iPS细胞治疗疾病可避免移植器官不足和伦理等问题 【答案】D 【解析】 【详解】A、重编辑过程是将分化体细胞重编程为iPS细胞，iPS细胞具有多能性，该过程降低了体细胞的分化程度，使其具有更强的分裂和分化能力，A错误； B、过程①为培养iPS细胞，未体现动物细胞的全能性，B错误； C、过程②是iPS细胞分化形成不同的体细胞，由于不同组织细胞的形成是基因选择性表达的结果，所以需导入不同的诱导分化因子诱导iPS细胞分化形成不同的组织，C错误； D、iPS细胞可以分化形成各种组织和器官，使用iPS细胞治疗可避免移植器官不足和伦理等问题，D正确。 故选D。 20. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 下列叙述错误的是（ ） A. 经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B. ①需获得MII期的去核卵母细胞 C. ②能大幅改良动物性状 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、子代动物的遗传性状与供体基本一致，但与受体无关，A错误； B、核移植过程中需要处于MII期的去核卵母细胞，而过程①是培育试管动物，需要培育到适宜时期（桑葚胚或囊胚等时期）进行胚胎移植，B错误； C、过程②得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状，C错误； D、过程②克隆技术可得到大量同种个体，为过程③提供了量产方式；过程③是转基因技术，转基因可导入外源优良基因，为过程①、②提供了改良性状的方式，D正确。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长，起到生物防腐的作用。请回答下列问题： （1）制作酸奶是利用乳酸菌在无氧条件下进行发酵，其原理是__________（填反应简式），该过程发生在乳酸菌细胞的__________中，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时能将奶酪蛋白水解为短肽和氨基酸的原因是__________。 （2）纯化乳酸菌时可选用__________或稀释涂布平板法接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明__________。MRS是针对乳酸菌的选择培养基，还应设置一组牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，其作用是__________。 （3）为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。 三种乳酸菌对各致病菌的抑菌圈直径/mm 乳酸菌编号 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 阪崎肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 大肠杆菌 PC3 16.2 2.0 14.4 13.1 11.9 PC15 18.2 15.3 12.1 13.0 10.5 GL5 22.5 9.6 16.2 15.3 13.5 ①实验的自变量是___________。 ②由实验结果可知，乳酸菌对_____（填致病菌）的抑菌效果比较突出；在生产应用中，不宜采用_____号乳酸菌进行防腐。 （4）从培养基的理化性质来看，工业生产上一般使用_______培养基进行扩大培养，________培养可用来观察菌落特征。 【答案】（1） ①. ②. 细胞质基质 ③. 乳酸菌在发酵过程中能分泌蛋白酶乳糖酶等 （2） ①. 平板划线法 ②. 培养基没有被杂菌污染 ③. 证明MRS对乳酸菌具有选择作用 （3） ①. 乳酸菌的种类和致病菌种类 ②. 金黄色葡萄球菌 ③. PC3 （4） ①. 液体 ②. 固体 【解析】 【分析】1、制作酸奶的原理是：常利用乳酸杆菌在适宜的温度下进行发解产生乳酸，即为乳酸菌的无氧呼吸过程，该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。 2、分析表格，该实验的自变量是乳酸菌的种类和致病菌种类．由实验结果可知，乳酸菌对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比较突出。 【小问1详解】 制作酸奶是利用乳酸菌在无氧条件下，原理是，该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时能将奶酪蛋白水解为短肽和氨基酸的原因是乳酸菌在发酵过程中能分泌蛋白酶乳糖酶等。 【小问2详解】 纯化乳酸菌时可选用平板划线法或稀释涂布平板法接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。MRS是针对乳酸菌的选择培养基，还应设置一组牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，其作用是证明MRS对乳酸菌具有选择作用。 【小问3详解】 ①为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，结合表格可知，该实验的自变量是乳酸菌的种类和致病菌种类。 ②由实验结果可知，金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径比较大，说明乳酸菌对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比较突出；PC3号菌株中的各致病菌的抑菌圈直径都比较小，说明乳酸菌对这些菌株的抑菌效果差，在生产应用中，不宜采用PC3号菌株进行防腐。 【小问4详解】 从培养基的理化性质来看，工业生产上一般使用液体培养基进行扩大培养，固体培养可用来观察菌落特征。 22. 紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用）。 （1）该研究应用的生物技术所依据的原理是________和________。 （2）获得原生质体最常用的方法是酶解法，先利用________去除植物的细胞壁。然后进行人工诱导使原生质体融合，人工诱导原生质体融合的物理方法有：________等（答出1种）。经过过程①，只有异源融合的原生质体能够存活的原因是________。 （3）过程③要进行照光培养，照光的作用是_______，所用的培养基与②过程的主要区别是_______。 （4）百脉根富含单宁，单宁不是百脉根生长和生存所必需的产物，属于______代谢物，在植物体内含量很低，化学合成困难。单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产品。若要获得高产单宁的突变体，适合作为诱变处理的对象的是：_______（填“茎尖”、“愈伤组织”或“试管苗”），原因是________。 【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性 ②. 植物细胞的全能性 （2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 离心、振动、电融合法 ③. IOA抑制百脉根原生质体及同源融合体的细胞呼吸第一阶段，R-6G阻止苜蓿原生质体及同源融合体的线粒体呼吸作用，只有异源融合的原生质体可互补缺陷从而存活 （3） ①. 促进叶绿素的合成，有利于光合作用进行 ②. 培养基中植物激素的种类和比例不同 （4） ①. 次生 ②. 愈伤组织 ③. 愈伤组织细胞分裂能力强，突变率高，易获得突变体 【解析】 【分析】分析题图：图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中①表示人工诱导原生质体融合；②表示脱分化过程；③表示再分化过程。 【小问1详解】 原生质体融合的原理是细胞膜的流动性，杂种细胞能够通过植物组织培养生长发育成植株的原理是植物细胞具有全能性。 【小问2详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故去除植物细胞壁可用纤维素酶和果胶酶进行酶解。人工诱导原生质体融合的物理方法有离心、振动、电融合法等。IOA抑制百脉根原生质体及同源融合体的细胞呼吸第一阶段，R-6G阻止苜蓿原生质体及同源融合体的线粒体呼吸作用，只有异源融合的原生质体可互补缺陷，能完整进行有氧呼吸的三个阶段可恢复生长并获得再生能力，从而存活。 【小问3详解】 过程③是再分化形成植株，照光的作用是促进叶绿素的合成，有利于光合作用进行（叶绿体在光下合成叶绿素，进而进行光合），过程②是脱分化形成愈伤组织，过程③是再分化，所用培养基与②过程的主要区别是培养基中植物激素的种类和比例不同（再分化需调整生长素和细胞分裂素的比例，促进芽分化）。  【小问4详解】 单宁不是百脉根生长和生存必需的产物，属于次生代谢物（次生代谢物是植物生长非必需、具特殊功能的代谢产物）。  ​ 适合作为诱变处理对象的是愈伤组织，原因是愈伤组织细胞分裂能力强，DNA复制时易发生基因突变，突变率高，易获得突变体。 23. 如下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题： （1）为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射________，不注射性激素的原因是________。 （2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是________。 （3）①指的是________。进行胚胎分割时，应选择发育到________时期的胚胎进行操作，在对上图的胚胎进行分割时，应注意________________。 （4）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________。 （5）胚胎分割技术的优势是________________。 【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 导致促性腺激素分泌减少，性腺退化 （2）诱导精子获能 （3） ①. 内细胞团 ②. 桑葚胚或囊胚 ③. 将内细胞团均等分割 （4）受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应 （5）可以促进优良动物品种的繁殖，产生遗传性状相同的后代 【解析】 【分析】分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团；②是囊胚腔。 【小问1详解】 据图可知，A可与精子结合为受精卵，故A为减数第二次分裂中期的卵母细胞，即次级卵母细胞；为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射促性腺激素，然后培养到MII期才能受精。直接注射性激素因为负反馈调节会导致促性腺激素分泌减少，性腺退化。 【小问2详解】 精子获能后才具备受精能力，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是诱导精子获能。 【小问3详解】 ①指的是内细胞团；进行胚胎分割时，应选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作；对囊胚进行胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割。 【小问4详解】 因为胚胎与母体只是建立生理和组织上的联系，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应。 【小问5详解】 胚胎分割可以促进优良动物品种的繁殖，产生遗传性状相同的后代，是进行遗传学研究的宝贵材料。 24. 苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。 （1）配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH______（填“之前”或“之后”），培养基灭菌的常用方法是______。 （2）图中①过程取5g土壤加入______mL无菌水中，②③过程用______法获得芽孢杆菌单菌落，若10-1、10-2悬液对应平板上菌苔完全覆盖培养基，10-3、10-4、10-5对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则取样土壤中芽孢杆菌总数约______个。 （3）目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于______（填“A”或“B”）处，将芽孢杆菌接种______（填“A”或“B”）处。 （4）检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于苹果树腐烂病防治。与化学防治相比，该方法的优势是______。 【答案】（1） ①. 之后 ②. 高压蒸汽灭菌法   （2） ①. 45 ②. 稀释涂布平板 ③. 5.6×107  （3） ①. A ②. B （4）降低环境污染；减少化学试剂的残留；对其他动物扰动小等   【解析】 【分析】1、题图分析：图中实验内容有三项，一是利用稀释涂布平板法从土壤中分离出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌；二是筛选出抑菌率最高的芽孢杆菌菌株；三是对苹果枝条打孔检测抑菌效果。 2、由题图信息分析可知，该实验的目的是探究不同稀释倍数的芽孢杆菌发酵原液对感染了苹果树腐烂病菌枝条的抑菌率的影响；实验通过芽孢杆菌的分离筛选、目的菌株筛选、抑菌效果测定得到不同稀释倍数的芽孢杆菌发酵原液对感染了苹果树腐烂病菌枝条的抑菌率的影响。 【小问1详解】 配制培养基时，培养基的灭菌应该在调PH之后，培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。 【小问2详解】 要获得稀释了10倍的土壤悬液，应该将5g土壤加入45mL无菌水中充分振荡。由图可知在不同的稀释度下取0.1mL接种到三个平板上，这种接种方法是稀释涂布平板法。根据平板上的菌落计数，选取菌落数为30-300的平板计数，取样土壤中（5g）芽孢杆菌总数为112÷0.1×104×5=5.6×107个。 【小问3详解】 目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于A处，将芽孢杆菌接种B处，以便筛选出目的菌株。 【小问4详解】 与化学防治相比，该生物防治方法的优势是：降低环境污染；减少化学试剂的残留；对其他动物扰动小等。 25. 天然β淀粉酶大多耐热性差，不利于工业化应用。我国学者借助PCR改造β-淀粉酶基因，并将改造的基因与pLN23质粒重组后导入大肠杆菌，最终获得耐高温的β-淀粉酶。回答下列问题： （1）将改造的基因与pLN23质粒重组时用到的工具酶有_____。 （2）PCR中使用的聚合酶属于（ ）（填写编号）。 ①以DNA为模板的RNA聚合酶 ②以RNA为模板的RNA聚合酶 ③以DNA为模板的DNA聚合酶 ④以RNA为模板的DNA聚合酶 （3）某天然β-淀粉酶由484个氨基酸构成，研究发现，将该酶第476位天冬氨酸替换为天冬酰胺，耐热性明显提升。在图1所示的β-淀粉酶基因改造方案中，含已替换碱基的引物是_____（填写编号）。 （4）为了使上述改造后的基因能在大肠杆菌中高效表达，由图2所示的pLN23质粒构建得到基因表达载体。除图示信息外，基因表达载体中还应该有_____ 和 _____。 【答案】（1）限制酶、DNA连接酶 （2）③ （3）② （4） ①. 目的基因 ②. 标记基因 【解析】 【小问1详解】 基因工程的三大工具：限制酶、DNA 连接酶、载体（质粒是载体的一种），因此将改造的基因与pLN23质粒重组时用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶。 【小问2详解】 PCR的原理是DNA双链复制，利用的酶是耐热的DNA聚合酶，合成子链时是以DNA为模板，故选③。 【小问3详解】 根据β-淀粉酶的编码序列，替换的碱基在编码序列中，则利用的引物应该把编码序列全部扩增在内，则所用的引物是②③。由题干信息可知，该酶是第476位天冬氨酸替换为天冬酰胺，说明改变的碱基在编码序列的后方，所以含替换碱基的引物是②。 【小问4详解】 作为基因工程载体的质粒应该包含：复制原点、限制酶的切割位点、标记基因、启动子和终止子，根据图示的表达载体可知应还要包括目的基因和标记基因。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $