河北省衡水湖城中学2025-2026学年高二下学期生物二调

**基本信息** 以基因编辑猪异种器官移植、iPS细胞抗衰等科技前沿为情境，综合考查微生物发酵、细胞工程、基因工程等核心知识，注重科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|20题/30分|果酒发酵、平板划线、PCR原理等|结合运城苹果酒制作等生活实例，考查基础操作与原理| |多选题|5题/15分|限制酶作用、胚胎工程、微生物竞争等|通过限制酶识别序列表格，考查科学思维的比较分析能力| |解答题|5题/55分|核移植技术、植物体细胞杂交、单克隆抗体制备等|28题结合TSA浓度对囊胚形成率影响的实验数据，考查探究实践与结果分析|

衡水湖城高级中学2025-2026学年度第二学期29.（10分，除标注外每空1分） （1） （2） （2分） （3） （2分） （2分） 30.（7分，除标记外每空1分） （1） （2分） （2） （2分） （3） 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 26.（7分，每空1分） （1） （2） 27.（14分，每空2分） （1） （2） （3） 28.（17，除标注外每空2分） （1） （1分） （1分） （2） （1分） （3） （4） （5） 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 第一部分 客观题（请用2B铅笔填涂） 高二年级二调考试 生物答题卡 学 校 姓 名 班 级 考 场 座位号 准考证号 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 4 4 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 5 5 5 5 6 6 6 6 6 6 6 6 7 7 7 7 7 7 7 7 8 8 8 8 8 8 8 8 9 9 9 9 9 9 9 9 注 意 事 项 1、选择题部分必须使用2B铅笔填涂；非选择题部分必须使用0.5毫米的黑色签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。 2、请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 3、保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破，禁用涂改液，涂改胶条。 填涂样例 正确填涂 $ 错误填涂 %^&* 缺考标记 ` 是否借读 ` 是否作弊 ` 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 1 A B C D 6 A B C D 11 A B C D 2 A B C D 7 A B C D 12 A B C D 3 A B C D 8 A B C D 13 A B C D 4 A B C D 9 A B C D 14 A B C D 5 A B C D 10 A B C D 15 A B C D 16 A B C D 21 A B C D 17 A B C D 22 A B C D 18 A B C D 23 A B C D 19 A B C D 24 A B C D 20 A B C D 25 A B C D 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效 学科网（北京）股份有限公司 $Sheet1 衡水市湖城中学 生物 学科命题细则 考试名称： 高二年级生物期中考试 学科： 生物 日期： 5月 考试范围： 选择性必修 3 生物技术与工程（发酵工程、细胞工程、基因工程、胚胎工程） 题型及分值： 20道单项选择题（30分）+5道多项选择题（15分）+5道主观题（55分） 题号 知识点 题型 学习水平 分数 期望难度 1 发酵工程 — 啤酒工业生产 单选 识记 1 易 2 传统发酵 — 果酒果醋制 单选 掌握 1 易 3 细胞工程 单选 掌握 1 易 4 细胞工程 单选 识记 1 易 5 动物细胞培养、单克隆抗体制备 单选 识记 1 易 6 干细胞 单选 掌握 1 中 7 胚胎工程 — 体细胞克隆 单选 识记 1 中 8 基因工程 — 农杆菌转化法 单选 掌握 1 中 9 PCR 及 DNA 电泳鉴定实验操作 单选 识记 1 中 10 基因工程 单选 掌握 1 易 11 PCR 单选 掌握 2 难 12 发酵工程 单选 掌握 2 中 13 基因工程 单选 理解 2 中 14 PCR 技术原理 单选 掌握 2 易 15 基因工程 单选 理解 2 中 16 胚胎工程 / 基因工程 单选 识记 2 中 17 胚胎工程 单选 掌握 2 中 18 胚胎工程 — 试管动物、克隆动物 单选 理解 2 中 19 胚胎工程 单选 理解 2 中 20 微生物代谢 单选 掌握 2 难 21 基因工程 多选 掌握 3 难 22 基因工程 多选 掌握 3 难 23 传统发酵 多选 掌握 3 中 24 发酵工程 — 微生物纯培养 多选 识记 3 中 25 基因工程 多选 识记 3 中 26 基因工程 — PCR 引物、筛选标记、基因表达 主观题 运用 55 难 27 基因工程 — 限制酶选择、蓝白斑筛选、检测 主观题 理解 难 28 基因工程 + 单克隆抗体制备、PCR 方向、实验设计 主观题 理解 难 29 植物体细胞杂交、原生质体融合、意义 主观题 理解 中 30 传统发酵 — 微生物及代谢产物 主观题 运用 易 考试时长： 75分钟 试卷总分： 100分 模块占比：基因工程占比 57%；细胞工程占比 13%；胚胎工程占比 8%；发酵工程占比 12%；微生物培养与实验占比 10%。 难度梯度：基础题分值 22分，中档题分值 53 分，难题分值 25 分，占比 15%。。 能力考查：基础知识识记能力：侧重基本概念、原理、专业术语的辨析，如发酵工程流程、基因工程工具酶、细胞工程和胚胎工程基础概念等。 理解分析能力：考查对生理过程、实验原理、基因工程操作流程、细胞融合、胚胎发育过程的理解，能辨析知识点正误、区分易混淆概念。 实验探究与操作能力：涵盖传统发酵操作、PCR 及电泳鉴定、微生物分离培养、菌种筛选、单克隆抗体制备等实验流程、操作规范与实验结果分析。 综合应用与逻辑推理能力：结合图表流程、限制酶酶切、实验设计验证等情境，考查知识迁移、逻辑推理、综合解决实际问题的能力。 Sheet2 Sheet3 $励志名言:明天的你一定会感谢今天努力的自己! 使用日期： 月 日 高二生物二调考试答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 A D D C D C D B D B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 B B B D A D A B B B 题号 21 22 23 24 25 答案 AC ABC BC AB BC 26【答案】(1) 野生酵母菌 果酒 有氧 醋酸菌 (2) 体积分数为70%的酒精 18～30℃ 30～35℃ 27.【答案】(1) Xma Ⅰ和Bgl Ⅱ 使用这两种酶切割质粒可产生与改良基因两端相同的黏性末端 (2) Ca2+ 能吸收周围环境中DNA分子 (3) 不一定 白色 含铁量 28.(1) 液体 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏、接触抑制 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） (2) 显微操作 纺锤体—染色体复合物 MⅡ 中 (3)使其完成细胞分裂和发育进程 (4) 40 促进 (5)胚胎细胞分化程度低，全能性更容易恢复 29(1) 高Ca2+-高pH 细胞壁 生长素 细胞分裂素 (2)打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 (3) 植物细胞的全能性 单倍体育种 30.(1)人乳腺癌细胞 (2) 克隆化 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 腹腔 (3)单克隆抗体 高二生物二调考试答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 A D D C D C D B D B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 B B B D A D A B B B 题号 21 22 23 24 25 答案 AC ABC BC AB BC 26【答案】(1) 野生酵母菌 果酒 有氧 醋酸菌 (2) 体积分数为70%的酒精 18～30℃ 30～35℃ 27.【答案】(1) Xma Ⅰ和Bgl Ⅱ 使用这两种酶切割质粒可产生与改良基因两端相同的黏性末端 (2) Ca2+ 能吸收周围环境中DNA分子 (3) 不一定 白色 含铁量 28.(1) 液体 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏、接触抑制 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） (2) 显微操作 纺锤体—染色体复合物 MⅡ 中 (3)使其完成细胞分裂和发育进程 (4) 40 促进 (5)胚胎细胞分化程度低，全能性更容易恢复 29(1) 高Ca2+-高pH 细胞壁 生长素 细胞分裂素 (2)打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 (3) 植物细胞的全能性 单倍体育种 30.(1)人乳腺癌细胞 (2) 克隆化 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 腹腔 (3)单克隆抗体 ( 第 1 页 共 5 页 ) 学科网（北京）股份有限公司 $励志名言:明天的你一定会感谢今天努力的自己! 使用日期： 月 日 ( 侯荟玲 ) ( 衡水湖城中学 ) ( 命制人 ) ( 高二生物二调调研考试题 ) ( 审核人 ) ( 王娥 ) 1、 单项选择题（每题1.5分,共30分） 1．运城是山西最大的苹果产区，被誉为“北方苹果之乡”。苹果皮薄肉细、香气浓郁，常被用于酿造苹果酒，所酿苹果酒风味醇厚独特。下列叙述正确的是（　　） A．苹果酒生产初期通入空气的目的是使酵母菌数量增加 B．在进行传统果酒发酵前对苹果进行灭菌，有利于酒精发酵 C．可用酸性重铬酸钾溶液检测果汁发酵后是否有醋酸产生 D．为提高苹果酒的产出量，应尽量将苹果汁装满发酵瓶 2．某同学采用平板划线法分离某好氧细菌，操作步骤如下：①对接种环进行灼烧灭菌；②蘸取菌液；③在培养基上连续划线，每次划线后灼烧接种环；④将平板倒置培养。下列关于该操作的叙述，正确的是（　　） A．步骤①和②之间，接种环无须冷却，可直接蘸取菌液 B．步骤③中，划线时，最后一次的划线应与第一次的划线相连 C．接种时应使细菌深埋于培养基中，便于其与营养物质充分接触 D．步骤④中，倒置培养可防止皿盖上的冷凝水滴落，避免污染培养基 3．牛奶是微生物的良好培养基，故饮用前需要对牛奶进行消毒。牛奶也可以被加工成酸奶。某生物兴趣小组探究某品牌酸奶中乳酸菌数量时的实验操作如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．采用巴氏消毒法对牛奶进行消毒的优点是基本不破坏牛奶的营养成分 B．应统计a、b、c三个平板中菌落数的平均值，使实验结果更加准确可靠 C．该方法统计的结果往往较实际结果偏低 D．过程①②表示对酸奶样品进行梯度稀释，过程③利用了平板划线法 4．袋装酸奶的包装上通常都会注明“胀袋勿食”。某同学选择一过期的胀袋密封酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况，下列有关叙述正确的是（    ） A．巴氏消毒法可以杀死牛奶中的微生物和芽孢。 B．酸奶胀袋是由于其中的乳酸菌无氧呼吸产生了CO2 C．利用图示方法向培养基接种前和接种后都要对涂布器进行灼烧灭菌 D．若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为1.8×106个 5．人参皂苷具有抗肿瘤等作用。如图表示利用西洋参种子胚进行工厂化生产人参皂苷的过程示意图，下列相关叙述正确的是（　　） A．①为脱分化过程，在适宜光照下培养得到不定形薄壁组织团块 B．②过程需要用纤维素酶和果胶酶处理得到单个的完整植物细胞 C．过程①与②所用培养基的物理状态相同，植物激素比例不同 D．④过程培养液中的蔗糖浓度过高会导致细胞过度失水而死亡 6．紫罗兰的抗虫性强，它的种子富含亚麻酸。为了让油菜具有紫罗兰的优良性状，科研人员进行了如图所示实验。下列叙述错误的是（　　） A．制备原生质体需将植物组织切块用纤维素酶、果胶酶处理 B．细胞融合依赖生物膜的流动性，杂种细胞长出细胞壁标志着融合成功 C．由愈伤组织到杂种植株培养过程中，细胞分裂素含量高于生长素有利于诱导生根 D．获得杂种植株后，可借助病虫感染实验进行新性状表达的鉴定 7．黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分严重，黑芥能抗黑胫病，油菜和黑芥不能直接杂交。为解决该问题，科研人员通过下图所示过程获得抗病品系。下列叙述正确的是（　　） A．过程②可利用灭活的病毒诱导细胞融合 B．过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化 C．得到融合的原生质体是植物细胞融合成功的标志 D．最终获得的抗病植株具有完整的甘蓝型油菜和部分黑芥的遗传信息 8．间充质祖细胞是一种存在于多种组织中的成体干细胞。科学研究团队通过动物细胞培养技术，构建抗衰型人间充质祖细胞（SRC）模型，并在灵长类动物模型中验证了其抗衰效果。下列相关叙述正确的是（　　） A．培养SRC时，需要在培养基中添加血清，并通入CO2以刺激细胞呼吸 B．SRC增殖时若出现细胞贴壁生长特性，则应定期用胰蛋白酶处理后再用离心法收集 C．间充质祖细胞具有组织特异性，具有发育成完整个体的能力 D．若SRC能够悬浮在培养液中生长增殖，则不需要进行传代培养 9．研究人员将绿色荧光蛋白（GFP）基因导入小香猪体细胞并进行克隆猪的研究，其基本流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．过程①细胞培养液中加入血清的主要目的是调节培养液渗透压 B．过程③“去核”是通过显微操作法将卵母细胞的细胞核去除 C．常用电刺激或聚乙二醇激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育 D．过程⑤实现了早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 10．奶牛的奶产量主要由核基因控制，某科研小组培育高产奶牛的过程如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A．母牛Y表现为高奶产量 B．重构胚形成后可直接完成分裂和发育 C．去核指的是去除纺锤体-染色体复合物 D．犊牛W的部分性状与母牛Y的不同 11．我国科学家通过如图流程成功克隆出“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理、研发诊治药物等带来光明前景。下列相关叙述错误的是（    ） A．“中中”和“华华”的性别是由猕猴甲的遗传物质决定的 B．过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量与成活率 C．“中中”和“华华”的诞生说明已分化的动物体细胞核具有全能性 D．猕猴乙要用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 12．诱导多能干细胞（iPS细胞）在医学领域上有广泛应用，iPS细胞的制备及分化如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．与经典的胚胎干细胞技术相比，iPS细胞不涉及伦理问题 B．iPS细胞可以分化为心肌细胞，这体现了细胞全能性 C．一般iPS细胞分化为神经细胞的过程是不可逆的 D．用患者自己的体细胞制备iPS细胞，理论上可以避免免疫排斥反应 13．某生物公司从澳大利亚进口少量萨福克羊的冷冻雌性、雄性胚胎，将其移植到本地羊的子宫中用于生产萨福克羊。下列有关说法错误的是（    ） A．对进口胚胎适度胚胎分割能增加可用胚胎数量 B．选用遗传性状优秀的受体母羊能使其后代更优质 C．胚胎移植前对受体母羊同期发情处理利于胚胎存活和发育 D．生产的萨福克羊可自然交配或体外受精实现自主繁殖 14．在畜牧业生产上常应用到胚胎移植技术。下列叙述错误的是（　　） A．用于移植的胚胎可来自体外受精、体内受精和核移植等 B．用外源促性腺激素处理供体的目的是使其超数排卵 C．受体不会对来自同种供体的胚胎发生免疫排斥反应 D．经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致 15．我国在胚胎移植领域的成果已处于国际前沿，尤其在异种器官移植和高效繁育技术上。研究人员将基因编辑猪肾脏成功移植到终末期肾病患者体内（技术流程如图），术后血肌酐恢复正常，成为亚洲首例活体异种肾移植案例。下列相关叙述错误的是（    ） ①从猪耳提取体细胞→②基因编辑→③构建胚胎→④移植至代孕母猪体内→培育出无病原体供体 A．出现接触抑制时，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等分散成单个细胞后再进行原代培养 B．步骤②中基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原决定基因 C．步骤③构建胚胎时，需将基因编辑后的体细胞细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞中 D．步骤④为了使胚胎正常发育，常在移植胚胎前对代孕母猪用孕激素进行发情处理 16．下列关于PCR及电泳的叙述，错误的是（　　） A．利用PCR技术可以在生物体外进行DNA片段的扩增 B．PCR技术通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合 C．琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定DNA的方法 D．电泳中DNA分子的迁移速率与其大小成正比 17．分子生物学中常用5’→3’或3’→5’描述核酸分子的方向。下列有关叙述正确的是（　　） A．PCR扩增DNA时，引物结合在模板链的3’端 B．DNA复制时，子链的延伸方向必须是3’→5’ C．转录时，RNA聚合酶沿模板链的5’→3’移动 D．翻译时，核糖体沿着mRNA的3’→5’移动 18．为制备抗甲肝抗原的人源单克隆抗体，从病毒携带者的淋巴细胞获取抗体基因，通过基因工程使抗体展示在噬菌体表面，从中筛选携带目标抗体的噬菌体克隆。此过程中不需要的步骤是（　　） A．设计引物，通过PCR获取抗体基因 B．将分离的B细胞与骨髓瘤细胞融合并筛选 C．构建抗体基因—噬菌体表面蛋白基因融合基因 D．通过抗原—抗体杂交对噬菌体抗体库进行筛选 19．为了降低人葡萄糖脑苷脂酶（hGC）缺乏症的治疗成本，研究人员构建了含有hGC基因的重组Ti质粒，并通过农杆菌转化法将hGC基因导入烟草中，并高效表达，其过程如下图所示。下列叙述错误的是（    ） A．在基因工程中，构建基因表达载体是基因工程的核心步骤 B．含重组Ti质粒的农杆菌表达的hGC蛋白可以直接用于疾病治疗 C．从愈伤组织中提取蛋白质作为抗原进行抗原-抗体杂交检测hGC基因是否翻译 D．将含有hGC基因的重组质粒导入受体细胞后，还需要利用植物组织培养技术 20．从红豆杉树皮中提取出的紫杉醇是治疗某些癌症的特效药。研究人员构建了转紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程如下图。下列叙述错误的是（    ） 注：Apr表示氨苄青霉素抗性基因；GFP表示绿色荧光蛋白基因 A．利用PCR技术获取Bapt基因时，应选用引物2和引物3 B．构建基因表达载体时，宜选用EcoRⅠ和SacⅠ酶切 C．需先用Ca2+处理农杆菌细胞，再将基因表达载体导入 D．利用添加氨苄青霉素的培养基可初步筛选导入质粒的农杆菌 二、多选题（共15分，每题3分） 21．限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示六种限制酶的识别序列及切割位点。下列说法错误的是（　　） 限制酶 识别序列和切割位点 限制酶 识别序列和切割位点 BamH I 5'-G↓GATCC-3' Bgl Ⅱ 5'-A↓GATCT-3' Sau3 A I 5'-↓GATC-3' Kpn I 5'-GGTAC↓C-3' Acc65 I 5'-G↓GTACC-3' EcoR I 5'-G↓AATTC-3' A．限制酶、DNA聚合酶均作用于磷酸二酯键，解旋酶和DNA连接酶均作用于氢键 B．分别用Sau3A Ⅰ和Bgl Ⅱ切割同一种随机序列DNA，前者得到的片段数往往多于后者 C．Acc65 Ⅰ和Kpn Ⅰ切割产生的片段，经DNA连接酶连接后能重新被Kpn Ⅰ切割 D．BamH I和Sau3A I切割产生的片段，经DNA连接酶连接后能重新被Sau3 A I切割 22．某小组以香蕉为材料进行“DNA粗提取与鉴定”实验，其步骤为：研磨→过滤→析出→鉴定。下列说法正确的是（　　） A．研磨液中NaCl的作用是溶解DNA B．可选择将香蕉研磨液离心后获取上清液进行后续操作 C．在“析出”操作中使用未经过预冷的酒精溶液会导致DNA的粗提取量减少 D．在“鉴定”操作中观察到蓝色越深，说明DNA纯度越高 23．为解决良种奶牛快速繁殖问题，科研人员计划利用胚胎工程技术进行产业化生产。下列关于胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A．胚胎移植前，对供体和受体均需用激素进行超数排卵和同期发情处理 B．体外受精前，需对采集到的卵母细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理 C．若要选择特定性别的胚胎，需选择囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定 D．通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的方式都属于无性生殖 24．下图为iPS细胞的培养和利用过程。下列叙述正确的是（    ）    A．iPS细胞是由体细胞经体外诱导产生的多能干细胞 B．患者的成纤维细胞培养成的iPS细胞分化成的组织细胞移植后不会发生免疫排斥 C．由于iPS细胞的全能性低于胚胎干细胞，所以iPS细胞的应用前景低于胚胎干细胞 D．由于iPS细胞可以分化成多种组织细胞，所以可以将iPS细胞体外培养成个体 25．利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的流程如图所示。下列相关说法错误的是（　　） A．米曲霉分泌的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 B．发酵池中乳酸菌和酵母菌不存在竞争关系 C．发酵池中出现气泡与乳酸菌无氧呼吸产生的CO2有关 D．发酵池发酵过程中，搅拌可缩短发酵时间 三、解答题（共55分） 26．依据制作果酒和果醋的原理及流程，回答问题。 (1)发酵原理：许多新鲜水果的果皮表面附着有大量的______。在这些微生物的作用下，水果可以发酵成______。在______的条件下，果酒经______的作用还可以进一步发酵成果醋。 (2)方法步骤：①将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用______消毒，晾干备用。②取新鲜葡萄，用清水冲洗1～2次，再去除枝梗和腐烂的籽粒，沥干。③用榨汁机榨取葡萄汁，将葡萄汁装入发酵瓶中（注意：要留有大约1/3的空间），盖好瓶盖。④将温度控制在______进行发酵。在发酵过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次注意：不是打开瓶盖），此后再拧紧瓶盖。⑤当葡萄酒制作完成后，打开瓶盖，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵，发酵温度为______，时间为7～8d。 27．普通大豆含铁量极低，研究人员通过改良相关基因，培育出了铁含量比普通大豆明显升高的转基因大豆。如图为改良基因及Ti质粒的示意图，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点。LacZ基因编码产生的酶能分解β一半乳糖苷，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。回答下列问题： (1)将改良基因和农杆菌的Ti质粒连接时，需用限制性内切核酸酶_______对Ti质粒进行切割，选用上述酶进行切割的理由是_______。 (2)将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用_____处理农杆菌，使细胞处于一种_____的生理状态，从而易于重组Ti质粒导入。 (3)在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中________（填“一定”或“不一定”）含有改良基因，若含有改良基因重组质粒的农杆菌菌落呈_______颜色。欲对转基因大豆个体水平检测，需要检测转基因大豆的_________。 28．异种器官移植是解决人类供体器官短缺的核心途径。我国科学家于2025年成功培育出无特定病原体的10只基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10只基因编辑猪，为异种器官移植提供安全供体，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题： (1)图中过程①培养时，应使用_____培养基（按物理性质划分）；贴壁细胞培养一段时间后，会因_____（写两点）等因素停止增殖，因此需使用_____处理贴壁细胞，再使用离心法得到单个细胞后进行传代培养。 (2)过程②常用_____方法对卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是_____，“去核”前卵母细胞要培养至_____期。 (3)过程③形成的重构胚还需用物理或化学方法激活，其目的是_____。 (4)重构胚成活率低是限制核移植成功的主要因素之一、研究人员探究了不同浓度的TSA（组蛋白去乙酰化酶抑制剂）对猪重构胚发育成囊胚的影响，结果如下表所示： TSA浓度（nM） 0 20 40 60 囊胚的形成率（%） 13% 22.8% 35.7% 21% 由上表可知，选用浓度为_____nM的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率，由此推测组蛋白乙酰化程度的升高会_____（填“促进”或“抑制”）重构胚的发育。 (5)为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是_____。 29．科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①～⑤表示过程，a～f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的三组实验。据图回答下列问题： (1)图1的过程②中，所用的化学方法除PEG融合法外，还有____融合法；过程③是再生出____；过程④⑤中，培养基中____和____的浓度会影响植物细胞的发育方向。 (2)图1所示的过程与传统的杂交育种方式相比，该育种方式具有的优势是____。 (3)图2过程Ⅰ培育植物体A的过程主要应用的原理是____；培育植物体B的育种方法Ⅱ称为____。 30．为降低人乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图所示。 (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_______。 (2)用选择性培养基对步骤②的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行_______培养。杂交瘤细胞的特点是_______，杂交瘤细胞可采用注射到小鼠_______内增殖或进行体外培养的方式进行扩大培养。 (3)步骤④是将获得的a_______和b治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC。 ( 第 1 页 共 5 页 ) 学科网（北京）股份有限公司 $