精品解析：河南驻马店市平舆县第一高级中学2025-2026学年高二下学期5月月考生物试题

高二生物（B卷） 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 某校生物社团对食堂后厨不同区域进行了卫生取样检测，样本甲取自发酵面团，样本乙取自未及时清理的案板表面，镜检后发现样本甲细胞较大，部分细胞正在出芽；样本乙细胞较小，无成形细胞核。下列叙述正确的是（　　） A. 与样本乙生物相比，样本甲生物的遗传物质主要是DNA B. 样本甲生物和样本乙生物最本质的区别是有无细胞器 C. 样本乙生物无线粒体，一定不能进行有氧呼吸 D. 样本甲生物和样本乙生物可能都有细胞壁 2. 某同学用显微镜观察临时装片，已在低倍物镜下观察到图1的细胞图像。要观察到图2细胞下列操作错误的是（　　） A. 移动临时装片，使目标细胞移至视野中央 B. 转动转换器，并使高倍物镜对准通光孔中心位置 C. 调节反光镜或光圈，使视野亮度均匀合适 D. 先调节粗准焦螺旋，再调节细准焦螺旋直至物像清晰 3. 学校劳动实践基地种植的番茄在生长过程中出现了如表所示不同情况。下列叙述错误的是（　　） 实验组别 甲样地 乙样地 丙样地 植株生长状况 生长正常 叶片发黄 叶片呈暗绿偏紫色且植株矮小 A. 实验中甲样地为对照组 B. 乙样地可能缺少镁元素 C. 丙样地可能缺少钾元素 D. 番茄细胞中的无机盐大多以离子形式存在 4. 某科研团队研究“低温胁迫下草莓幼果细胞内糖类变化与抗逆性之间的关系”。他们将长势一致的草莓幼果分为甲、乙两组，并分别置于常温和低温环境48 h。检测结果显示：与甲组相比，乙组果肉细胞中可溶性糖含量明显升高，而淀粉含量下降；进一步分析发现，乙组细胞壁中纤维素含量基本不变。下列叙述正确的是（　　） A. 草莓幼果细胞中淀粉含量下降、可溶性糖含量升高，不利于提高细胞液浓度 B. 持续低温使合成淀粉的酶活性下降，影响可溶性糖合成淀粉 C. 淀粉和纤维素都是植物细胞的储能物质，低温时植物细胞优先分解淀粉 D. 可直接用斐林试剂鉴定草莓幼果细胞中的纤维素 5. 细胞中的脂质种类较多，在生命活动中具有重要作用。下列叙述正确的是（　　） A. 脂肪、磷脂和胆固醇都只含有C、H、O三种元素 B. 磷脂是细胞膜的重要组成成分，也是细胞内良好的储能物质 C. 等质量的脂肪彻底氧化分解释放的能量多于糖类，这与脂肪分子中氢含量较高有关 D. 植物脂肪大多含有饱和脂肪酸，在室温时呈液态 6. 科研人员从某受检者的血液样本中提取甲、乙两类生物大分子。检测发现：甲物质在细胞中含量相对稳定，主要存在于细胞核中；乙物质在细胞质中含量较多且某些细胞在合成特定蛋白质时，乙物质的含量会明显增加。下列叙述正确的是（　　） A. 甲物质和乙物质都是细胞内携带遗传信息的物质 B. 甲物质可与蛋白质结合，乙物质不能与蛋白质结合 C. 人体中不同种类体细胞中的甲物质和乙物质数目相同 D. 甲物质和乙物质的彻底水解产物完全不同 7. 如图是小麦细胞中由C、H、O、N、P等元素构成的大分子物质甲、乙、丙及结构丁的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 单体a为葡萄糖，则物质甲是淀粉 B. 若单体b为氨基酸，则结构丁可为某种细胞器 C. 若结构丁可被碱性染料染成深色，则其可存在于蓝细菌中 D. 小麦活细胞中物质乙的含量最高 8. 在“检测生物组织中的脂肪”实验中，某同学选用花生种子切片作为实验材料，按规范操作后在显微镜下观察到部分细胞中有被染成橘黄色的颗粒。下列叙述错误的是（　　） A. 为了切出薄的切片，花生种子应提前浸泡 B. 制片时可用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色 C. 在低倍镜下即可观察到清晰的橘黄色脂肪颗粒 D. 移动临时切片时，移动方向与视野中物像移动方向相反 9. 某高粱酒的酿造工艺如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 高粱蒸煮糊化便于后续分解，并减少杂菌数量 B. 高粱冷却后再加酒曲，是为了防止高温杀死酒曲中的微生物 C. 发酵过程中频繁开盖，会增加杂菌污染的风险，影响米酒品质 D. 若酒的表层出现白膜，可能是由于乳酸菌大量繁殖引起的 10. 某地农业技术推广站为了监测灌溉水中的细菌含量，取水样进行细菌培养。实验员先配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，灭菌后倒平板，再吸取经适当稀释后的0.1 mL水样涂布到培养基表面，培养后统计菌落数。下列做法正确的是（　　） A. 培养基灭菌后应立即倒平板，以防冷却后凝固 B. 接种操作应在酒精灯火焰附近进行，以减少杂菌污染 C. 涂布器灼烧灭菌后应立即进行涂布 D. 应选择菌落数最多的平板进行计数，以保证结果准确 11. 如图为谷氨酸发酵装置示意图，工业上常用谷氨酸棒状杆菌在30℃下发酵获得谷氨酸。下列叙述正确的是（　　） A. 冷却水的入口是1，出口是2 B. 发酵工程的中心环节是产物的提取与分离 C. 发酵工程生产谷氨酸所用的培养基属于液体培养基 D. 发酵罐内的pH应调至酸性以获得谷氨酸 12. 某地一种特色药用开花植物具有较高经济价值，但其野生资源少、种子萌发率低。科研人员取该植物幼嫩茎段进行离体培养，获得大量试管苗。下列叙述正确的是（　　） A. 茎段离体培养获得试管苗的过程，体现了植物细胞的全能性 B. 实验前需对操作人员的双手和超净工作台进行严格的灭菌 C. 该植物不同部位的细胞经离体培养获得的愈伤组织基因型完全相同 D. 愈伤组织应先转接到诱导生根的培养基再转接到诱导生芽的培养基上培养 13. 某生物公司在研发一种抗肿瘤药物时，需先利用动物细胞培养技术获得大量组织细胞，用来检测药物对细胞增殖的影响。下列叙述错误的是（　　） A. 动物细胞培养时通常需要提供95%空气和5%二氧化碳的混合气体 B. 培养动物细胞时，合成培养基中通常需加入血清 C. 培养过程需定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对细胞造成危害 D. 只要培养液中营养物质充足，动物细胞即可持续分裂而不会出现生长停止现象 14. 某科研团队为保护一种濒危野生牛，拟利用体细胞核移植技术获得克隆牛，相关过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 乙牛的卵母细胞需体外培养至M Ⅱ期再进行去核操作 B. ③过程需用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 C. 胚胎移植前，通常需要用促性腺激素对母牛丙进行同期发情处理 D. 通过体细胞核移植获得的后代，其遗传物质来自甲牛和乙牛 15. 某牧场的一头优良母羊甲体质良好、卵巢功能正常，但因输卵管病变，不能完成自然受精。技术人员欲利用胚胎移植技术获得其后代。下列叙述错误的是（　　） A. 精子需在人工配制的获能液中完成获能才能进行体外受精 B. 受精成功的标志是观察到两个极体或雌、雄原核 C. 在桑葚胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔 D. 可将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割以获得多个优良后代 16. 某科研团队在研究一种用于洗涤剂的酶时发现，该酶在常温下催化效果较好，但在较高温度和弱碱性条件下活性明显下降，难以满足洗衣液的使用要求。研究人员拟通过改造该酶的结构，获得一种在较高温度和弱碱性环境中仍能保持较高活性的新品种。下列叙述正确的是（　　） A. 蛋白质工程只能生产出自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程的直接操作对象是氨基酸 C. 蛋白质工程难度较大主要是因为蛋白质的高级结构往往很复杂 D. 蛋白质工程获得的新酶一定具有比天然酶更高的催化效率和更强的稳定性 二、非选择题：本题有5个小题，共52分。 17. 苹果在采摘、分选和运输过程中常因碰撞受损，受损部位会出现褐变，这与多酚氧化酶（PPO）和酚类物质的反应有关。研究发现，苹果细胞受损后，部分蛋白质用于补充和重建受损的细胞结构，某些酶促反应增强，从而加快果实成熟。回答下列问题： （1）自然状态下，酚类物质存在于细胞的液泡中，PPO存在于细胞其他的多个部位，受损苹果发生褐变的原因可能是_______。 （2）下列各种物质中，组成蛋白质的氨基酸是_______。 A B C D H−CH−CH2−CH2−COOHNH 2 CH2−CH2−COOHNH 2 连接两个氨基酸分子的化学键叫作______，脱去的水分子中的H来源于______（填基团名称）。某蛋白质由64个氨基酸（R基均不含氧原子）脱水缩合生成，共含有72个氧原子，则该蛋白质由______条肽链构成。 （3）材料中“苹果细胞受损后，部分蛋白质用于补充和重建受损的细胞结构”，体现了蛋白质具有______的功能；某些蛋白质能够加快反应速率的作用机理是______。由此说明蛋白质具有多种功能，这与蛋白质分子结构的多样性有关，从氨基酸角度分析，其原因是______。 （4）鉴定生物组织材料中的有机物可用一些特殊化学试剂，如鉴定花生种子中的脂肪用______染液。鉴定蛋白质的双缩脲试剂由A液和B液组成，检测时只加3～4滴双缩脲试剂B液而不能过量的原因是______。 18. 我国北方部分地区草莓种植中常因连作和高湿环境导致灰霉病频发。某农业技术团队计划从长期堆放草莓秸秆和腐熟有机肥的土样中筛选出能抑制灰霉病病原菌生长的有益细菌，并进一步扩大培养，用于生物防治。研究人员进行了如下实验。 回答下列问题： （1）步骤③中，制备系列稀释液的目的是_______，该步骤将土壤悬浮液稀释了_______倍。 （2）普通琼脂培养基一般应采用_______法灭菌。步骤④培养后，研究人员应选择菌落数为_______的平板进行计数。若3个平板上菌落数分别为32、36、40，则每克土样中活菌数约为_______个。 （3）经步骤⑤纯化培养后，将获得的细菌与灰霉病病原菌进行平板对峙培养，测定其抑菌效果。已知平板对峙培养指的是把一种拮抗菌接种在平板一侧，把病原菌接种在另一侧，培养后观察拮抗菌是否能抑制病原菌生长，实验时应设置“灰霉病病原菌单独培养”的对照组，目的是_______。若某菌株周围出现明显抑菌圈，则说明该菌株可能通过产生_______来抑制病原菌生长。 （4）在扩大培养该有益菌株时，通常选用液体培养基而不是固体培养基，原因是_______（答出2点）。 19. 某农业科研团队拟培育一种兼具耐盐性和高维生素C含量的新型经济作物。甲植物耐盐性强，但果实维生素C含量低；乙植物不耐盐，但果实维生素C含量高，研究人员决定采用植物体细胞杂交技术获得兼具两种优良性状的新品系。已知甲植物细胞在高盐培养基上能正常分裂，乙植物细胞不能；乙植物细胞含有较高活性的L酶，能将培养基中的无色底物X转化为蓝色产物，而甲植物细胞不能。回答下列问题： （1）过程a中常用的酶是_______。获得的原生质体一般要在较高的渗透压培养体系下培养，其目的是_______。 （2）过程b中，除了用PEG诱导原生质体融合外，还可用的化学方法有_______。细胞融合成功的标志是_______。 （3）应用含_______的选择培养基筛选杂种细胞，最终在培养基上挑选_______的细胞即为杂种细胞。 （4）过程d用到的技术是_______，该过程包括_______两个阶段。 （5）有人认为，只要获得了杂种细胞，就一定能得到符合育种要求的新品种，你是否赞同？_______，说明理由___________________。 20. 如图为一种生物导弹的作用原理示意图。已知处于游离状态的生物导弹更易被机体免疫系统清除掉，而与肿瘤细胞结合后的生物导弹，短时间内不易被清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，对正常细胞也有一定毒性，可抑制DNA和RNA的合成。回答下列问题： （1）制备单克隆抗体时，要用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的_______中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。推测_______细胞不能在第一次筛选使用的选择培养基上生长，经第一次筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______。 （2）在治疗中，应先注射生物导弹，待游离的生物导弹被消除后，再注射非活化磷酸阿霉素，采用这样治疗流程的原因是_______，该过程中主要利用了单克隆抗体_______作用。 （3）肿瘤细胞受到阿霉素作用后，可抑制细胞中基因的_______过程。 21. RNA干扰是指某基因转录形成的mRNA与其互补RNA结合后形成局部双链结构，从而阻碍该mRNA的翻译过程。Y菌是一种兼性厌氧菌，既能杀伤正常细胞，也能杀伤处于缺氧微环境中的肿瘤细胞。已知asd基因是Y菌生存必需基因，为提高其肿瘤靶向杀伤效果，研究人员在Y菌asd基因的上游和下游分别增加了启动子PT和PA，两种启动子的作用机制如图所示。回答下列问题： （1）改造Y菌时，科研人员需要先构建含有PT、PA和asd相关序列的基因表达载体。一个完整的基因表达载体，除目的基因及其调控序列外，通常还应具备_______和_______等结构。将目的基因导入受体菌常用的方法是_______。 （2）研究人员改造Y菌时，需将启动子PT和PA定向插入Y菌DNA中，这一过程需要使用的工具酶有_______。启动子是_______识别和结合的位点，启动子PT应该置于asd基因正常转录时模板链的_______（填“3'”或“5'”）端。 （3）改造之后的Y菌在_______（填“低氧”或“高氧”）环境中正常存活并增殖，原因是_______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物（B卷） 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 某校生物社团对食堂后厨不同区域进行了卫生取样检测，样本甲取自发酵面团，样本乙取自未及时清理的案板表面，镜检后发现样本甲细胞较大，部分细胞正在出芽；样本乙细胞较小，无成形细胞核。下列叙述正确的是（　　） A. 与样本乙生物相比，样本甲生物的遗传物质主要是DNA B. 样本甲生物和样本乙生物最本质的区别是有无细胞器 C. 样本乙生物无线粒体，一定不能进行有氧呼吸 D. 样本甲生物和样本乙生物可能都有细胞壁 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞生物的遗传物质都是DNA，样本甲（真核）和样本乙（原核）的遗传物质均为DNA，A错误； B、真核生物和原核生物最本质的区别是有无以核膜为界限的成形细胞核，原核生物也有核糖体这一种细胞器，B错误； C、样本乙是原核生物，无线粒体，但部分原核生物含有与有氧呼吸相关的酶，也可以进行有氧呼吸，如好氧细菌，C错误； D、样本甲酵母菌（真菌）具有细胞壁，样本乙大多数细菌也具有细胞壁，因此二者可能都有细胞壁，D正确。 2. 某同学用显微镜观察临时装片，已在低倍物镜下观察到图1的细胞图像。要观察到图2细胞下列操作错误的是（　　） A. 移动临时装片，使目标细胞移至视野中央 B. 转动转换器，并使高倍物镜对准通光孔中心位置 C. 调节反光镜或光圈，使视野亮度均匀合适 D. 先调节粗准焦螺旋，再调节细准焦螺旋直至物像清晰 【答案】D 【解析】 【详解】A、低倍镜视野范围大，高倍镜视野范围小，换高倍镜前需移动临时装片将目标细胞移至视野中央，避免换高倍镜后无法观察到目标，A正确； B、目标移至视野中央后，需转动转换器，使高倍物镜对准通光孔中心，保证光线正常通过，B正确； C、高倍镜下进光量更少，视野会变暗，需调节反光镜或光圈使视野亮度均匀合适，便于观察，C正确； D、高倍物镜与装片的距离非常近，调节粗准焦螺旋会大幅升降镜筒，极易压碎装片、划伤物镜，因此换高倍镜后仅能调节细准焦螺旋直至物像清晰，不能调节粗准焦螺旋，D错误。 3. 学校劳动实践基地种植的番茄在生长过程中出现了如表所示不同情况。下列叙述错误的是（　　） 实验组别 甲样地 乙样地 丙样地 植株生长状况 生长正常 叶片发黄 叶片呈暗绿偏紫色且植株矮小 A. 实验中甲样地为对照组 B. 乙样地可能缺少镁元素 C. 丙样地可能缺少钾元素 D. 番茄细胞中的无机盐大多以离子形式存在 【答案】C 【解析】 【详解】A、对照实验中生长状态正常的组别为对照组，用于和实验组的异常症状作对照，甲样地植株生长正常，属于对照组，A正确； B、镁是叶绿素的组成成分，土壤缺镁会导致叶绿素合成受阻，叶片发黄，因此乙样地可能缺镁，B正确； C、缺磷时植株会出现矮小、叶片暗绿偏紫色的症状，缺钾的典型症状是茎秆易倒伏、叶片边缘焦枯，因此丙样地可能缺少磷元素而非钾元素，C错误； D、细胞中的无机盐大多以离子形式存在，少部分参与构成化合物，D正确。 4. 某科研团队研究“低温胁迫下草莓幼果细胞内糖类变化与抗逆性之间的关系”。他们将长势一致的草莓幼果分为甲、乙两组，并分别置于常温和低温环境48 h。检测结果显示：与甲组相比，乙组果肉细胞中可溶性糖含量明显升高，而淀粉含量下降；进一步分析发现，乙组细胞壁中纤维素含量基本不变。下列叙述正确的是（　　） A. 草莓幼果细胞中淀粉含量下降、可溶性糖含量升高，不利于提高细胞液浓度 B. 持续低温使合成淀粉的酶活性下降，影响可溶性糖合成淀粉 C. 淀粉和纤维素都是植物细胞的储能物质，低温时植物细胞优先分解淀粉 D. 可直接用斐林试剂鉴定草莓幼果细胞中的纤维素 【答案】B 【解析】 【详解】A、可溶性糖是细胞液中的溶质，可溶性糖含量升高会增大细胞液的溶质浓度，该变化利于提高细胞液浓度，增强抗冻能力，A错误； B、酶的活性受温度影响，低温会降低催化可溶性糖合成淀粉的相关酶的活性，使可溶性糖合成淀粉的过程受阻，因此出现可溶性糖积累、淀粉含量下降的结果，B正确； C、纤维素是植物细胞壁的结构组成物质，不属于植物细胞的储能物质，C错误； D、斐林试剂仅用于检测还原糖，纤维素不属于还原糖，无法用斐林试剂鉴定，D错误。 5. 细胞中的脂质种类较多，在生命活动中具有重要作用。下列叙述正确的是（　　） A. 脂肪、磷脂和胆固醇都只含有C、H、O三种元素 B. 磷脂是细胞膜的重要组成成分，也是细胞内良好的储能物质 C. 等质量的脂肪彻底氧化分解释放的能量多于糖类，这与脂肪分子中氢含量较高有关 D. 植物脂肪大多含有饱和脂肪酸，在室温时呈液态 【答案】C 【解析】 【详解】A、脂肪和胆固醇的元素组成为C、H、O，磷脂还含有N、P元素，A错误； B、磷脂是细胞膜等生物膜的重要组成成分，但细胞内良好的储能物质是脂肪，磷脂不具备储能功能，B错误； C、脂肪分子中氢的含量远高于糖类、氧的含量低于糖类，等质量的脂肪和糖类彻底氧化分解时，脂肪的耗氧量更高，释放的能量也更多，C正确； D、植物脂肪大多含有不饱和脂肪酸，室温时呈液态，动物脂肪大多含有饱和脂肪酸，室温时呈固态，D错误。 6. 科研人员从某受检者的血液样本中提取甲、乙两类生物大分子。检测发现：甲物质在细胞中含量相对稳定，主要存在于细胞核中；乙物质在细胞质中含量较多且某些细胞在合成特定蛋白质时，乙物质的含量会明显增加。下列叙述正确的是（　　） A. 甲物质和乙物质都是细胞内携带遗传信息的物质 B. 甲物质可与蛋白质结合，乙物质不能与蛋白质结合 C. 人体中不同种类体细胞中的甲物质和乙物质数目相同 D. 甲物质和乙物质的彻底水解产物完全不同 【答案】A 【解析】 【详解】A、细胞内的核酸都携带遗传信息，DNA是细胞生物的遗传物质，储存遗传信息，RNA可传递DNA的遗传信息作为翻译的模板，二者都是携带遗传信息的物质，A正确； B、甲（DNA）可与组蛋白结合形成染色质，乙（RNA）也可与蛋白质结合，如rRNA和蛋白质结合形成核糖体，B错误； C、人体不同种类的体细胞由受精卵分化而来，核DNA（甲）一般相同，但由于基因的选择性表达，不同细胞中的RNA（乙）种类和数量存在差异，C错误； D、DNA彻底水解产物为磷酸、脱氧核糖、含氮碱基（A、T、C、G），RNA彻底水解产物为磷酸、核糖、含氮碱基（A、U、C、G），二者的水解产物均有磷酸和A、C、G三种碱基，并非完全不同，D错误。 7. 如图是小麦细胞中由C、H、O、N、P等元素构成的大分子物质甲、乙、丙及结构丁的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 单体a为葡萄糖，则物质甲是淀粉 B. 若单体b为氨基酸，则结构丁可为某种细胞器 C. 若结构丁可被碱性染料染成深色，则其可存在于蓝细菌中 D. 小麦活细胞中物质乙的含量最高 【答案】B 【解析】 【详解】A、若单体a为葡萄糖，小麦细胞中的多糖包括淀粉和纤维素，因此物质甲不一定是淀粉，也可能是纤维素，A错误； B、若单体b为氨基酸，则物质乙为蛋白质，物质丙为核酸，由蛋白质和核酸组成的结构丁可以是核糖体，B正确； C、若结构丁可被碱性染料染成深色，则丁为染色体，蓝细菌是原核生物，细胞中无染色体结构，C错误； D、活细胞中含量最高的化合物是水，而不是物质乙（蛋白质），蛋白质是细胞中含量最多的有机化合物，D错误。 8. 在“检测生物组织中的脂肪”实验中，某同学选用花生种子切片作为实验材料，按规范操作后在显微镜下观察到部分细胞中有被染成橘黄色的颗粒。下列叙述错误的是（　　） A. 为了切出薄的切片，花生种子应提前浸泡 B. 制片时可用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色 C. 在低倍镜下即可观察到清晰的橘黄色脂肪颗粒 D. 移动临时切片时，移动方向与视野中物像移动方向相反 【答案】C 【解析】 【详解】A、花生种子提前浸泡后质地变软，更容易切出薄而均匀的合格切片，操作符合实验要求，A正确； B、苏丹Ⅲ染液可溶于有机溶剂，制片时用体积分数为50%的酒精溶液可以洗去切片表面未与脂肪结合的染液浮色，B正确； C、脂肪颗粒体积很小，低倍镜放大倍数不足，无法观察到清晰的橘黄色脂肪颗粒，需要换用高倍镜才能清晰观察，C错误； D、显微镜下成的是上下、左右均颠倒的虚像，因此移动临时切片时，切片的移动方向与视野中物像的移动方向相反，D正确。 9. 某高粱酒的酿造工艺如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 高粱蒸煮糊化便于后续分解，并减少杂菌数量 B. 高粱冷却后再加酒曲，是为了防止高温杀死酒曲中的微生物 C. 发酵过程中频繁开盖，会增加杂菌污染的风险，影响米酒品质 D. 若酒的表层出现白膜，可能是由于乳酸菌大量繁殖引起的 【答案】D 【解析】 【详解】A、高粱蒸煮时高温使淀粉糊化，结构变得松散，便于后续被相关酶分解，同时高温可杀灭大部分杂菌，减少杂菌数量，A正确； B、酒曲中含有酵母菌等发酵菌种，高温会导致菌种的蛋白质变性失活，冷却后再加酒曲可避免高温杀死菌种，B正确； C、发酵需要无菌、无氧的环境，频繁开盖会使外界杂菌进入，提升杂菌污染的风险，同时会破坏无氧环境，影响酒精发酵，最终影响酒的品质，C正确； D、酒的表层与空气接触，氧气含量较高，乳酸菌是厌氧型微生物，有氧条件下其代谢和繁殖会被抑制，无法大量繁殖，表层白膜一般是好氧的醋酸菌等微生物大量繁殖形成的，D错误。 10. 某地农业技术推广站为了监测灌溉水中的细菌含量，取水样进行细菌培养。实验员先配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，灭菌后倒平板，再吸取经适当稀释后的0.1 mL水样涂布到培养基表面，培养后统计菌落数。下列做法正确的是（　　） A. 培养基灭菌后应立即倒平板，以防冷却后凝固 B. 接种操作应在酒精灯火焰附近进行，以减少杂菌污染 C. 涂布器灼烧灭菌后应立即进行涂布 D. 应选择菌落数最多的平板进行计数，以保证结果准确 【答案】B 【解析】 【详解】A、培养基灭菌后需冷却至约50℃时倒平板，立即倒平板会因培养基温度过高，使皿盖凝结大量冷凝水，易滴落污染培养基，且易烫伤操作人员，A错误； B、酒精灯火焰附近为无菌区域，接种操作在火焰附近进行可减少空气中杂菌的污染，B正确； C、涂布器灼烧灭菌后温度极高，立即涂布会杀死水样中的细菌，需待涂布器冷却后再进行涂布操作，C错误； D、统计菌落数时，应选择菌落数在30~300范围内的平板进行计数，菌落数过多会导致菌落重叠，计数误差大，结果不准确，D错误。 11. 如图为谷氨酸发酵装置示意图，工业上常用谷氨酸棒状杆菌在30℃下发酵获得谷氨酸。下列叙述正确的是（　　） A. 冷却水的入口是1，出口是2 B. 发酵工程的中心环节是产物的提取与分离 C. 发酵工程生产谷氨酸所用的培养基属于液体培养基 D. 发酵罐内的pH应调至酸性以获得谷氨酸 【答案】C 【解析】 【详解】A、微生物的呼吸作用以及搅拌等都能产生大量的热，使发酵液温度升高，为防止温度过高降低酶的活性，1、4处分别是发酵罐夹层中水的进入口和排出口，A错误； B、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，B错误； C、工业生产谷氨酸时使用液体培养基，便于搅拌、通气，能让菌种和营养物质充分接触，提高发酵效率，C正确； D、谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，需将pH调至中性或弱碱性，酸性条件下会生成其他代谢产物，不利于谷氨酸的积累，D错误。 12. 某地一种特色药用开花植物具有较高经济价值，但其野生资源少、种子萌发率低。科研人员取该植物幼嫩茎段进行离体培养，获得大量试管苗。下列叙述正确的是（　　） A. 茎段离体培养获得试管苗的过程，体现了植物细胞的全能性 B. 实验前需对操作人员的双手和超净工作台进行严格的灭菌 C. 该植物不同部位的细胞经离体培养获得的愈伤组织基因型完全相同 D. 愈伤组织应先转接到诱导生根的培养基再转接到诱导生芽的培养基上培养 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物细胞全能性是指已分化的植物细胞仍具有发育成完整个体或分化为其他各种细胞的潜能，已分化的茎段细胞经离体培养发育为完整试管苗，体现了植物细胞的全能性，A正确； B、实验前需对操作人员双手、超净工作台进行消毒，灭菌是指杀灭包括芽孢、孢子在内的所有微生物的操作，双手无法进行灭菌处理，B错误； C、若取该植物的生殖细胞（如花粉）和体细胞分别培养，获得的愈伤组织基因型不同，因此不同部位细胞培养获得的愈伤组织基因型不一定完全相同，C错误； D、植物组织培养时，愈伤组织需先转接到诱导生芽的培养基，待长出芽后再转接到诱导生根的培养基上，D错误。 13. 某生物公司在研发一种抗肿瘤药物时，需先利用动物细胞培养技术获得大量组织细胞，用来检测药物对细胞增殖的影响。下列叙述错误的是（　　） A. 动物细胞培养时通常需要提供95%空气和5%二氧化碳的混合气体 B. 培养动物细胞时，合成培养基中通常需加入血清 C. 培养过程需定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对细胞造成危害 D. 只要培养液中营养物质充足，动物细胞即可持续分裂而不会出现生长停止现象 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的气体环境为95%空气（满足细胞有氧呼吸对O₂的需求）和5%CO₂（维持培养液的pH稳定），A正确； B、当前人们尚未完全明确动物细胞所需的全部营养物质，因此合成培养基中通常需加入血清等天然成分补充未知营养，B正确； C、动物细胞培养过程中会产生有害代谢产物，积累后会对细胞造成毒害，因此需定期更换培养液清除代谢废物、补充营养，C正确； D、即使培养液营养充足，正常动物细胞生长到相互接触时会出现接触抑制现象，停止分裂增殖，且正常细胞的分裂次数存在上限，无法持续无限分裂，D错误。 14. 某科研团队为保护一种濒危野生牛，拟利用体细胞核移植技术获得克隆牛，相关过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 乙牛的卵母细胞需体外培养至M Ⅱ期再进行去核操作 B. ③过程需用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 C. 胚胎移植前，通常需要用促性腺激素对母牛丙进行同期发情处理 D. 通过体细胞核移植获得的后代，其遗传物质来自甲牛和乙牛 【答案】C 【解析】 【详解】A、体细胞核移植操作中，受体卵母细胞需体外培养至MⅡ（减数第二次分裂）期再去核，此时卵母细胞易操作且细胞质中存在促进细胞核全能性表达的物质，A正确； B、重构胚形成后，必须用物理或化学方法激活，才能使其启动细胞分裂和后续的发育进程，获得早期胚胎，B正确； C、同期发情处理使用的是孕激素（或雌激素），目的是让代孕母牛和供体母牛生理状态一致，为胚胎移入提供相同的生理环境，而促性腺激素的作用是对供体母牛进行超数排卵处理，C错误； D、克隆后代丁牛的细胞核遗传物质来自供体甲牛，细胞质遗传物质来自乙牛的卵母细胞，因此遗传物质来自甲牛和乙牛，D正确。 15. 某牧场的一头优良母羊甲体质良好、卵巢功能正常，但因输卵管病变，不能完成自然受精。技术人员欲利用胚胎移植技术获得其后代。下列叙述错误的是（　　） A. 精子需在人工配制的获能液中完成获能才能进行体外受精 B. 受精成功的标志是观察到两个极体或雌、雄原核 C. 在桑葚胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔 D. 可将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割以获得多个优良后代 【答案】C 【解析】 【详解】A、体外受精前需要对精子进行获能处理，通常将精子置于人工配制的获能液中完成获能后，才能具备和成熟卵细胞受精的能力，A正确； B、判断受精成功的标志是可在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，或观察到雌、雄原核形成，B正确； C、桑葚胚阶段胚胎细胞排列紧密，尚未形成空腔，胚胎内部出现含有液体的囊胚腔是囊胚阶段的特征，C错误； D、胚胎分割操作时，需选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割，分割后的胚胎移植后可获得多个基因型相同的优良后代，D正确。 16. 某科研团队在研究一种用于洗涤剂的酶时发现，该酶在常温下催化效果较好，但在较高温度和弱碱性条件下活性明显下降，难以满足洗衣液的使用要求。研究人员拟通过改造该酶的结构，获得一种在较高温度和弱碱性环境中仍能保持较高活性的新品种。下列叙述正确的是（　　） A. 蛋白质工程只能生产出自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程的直接操作对象是氨基酸 C. 蛋白质工程难度较大主要是因为蛋白质的高级结构往往很复杂 D. 蛋白质工程获得的新酶一定具有比天然酶更高的催化效率和更强的稳定性 【答案】C 【解析】 【详解】A、基因工程只能生产自然界中已存在的蛋白质，蛋白质工程可通过基因改造合成自然界不存在的新蛋白质，A错误； B、蛋白质工程的直接操作对象是基因，通过改造或合成基因实现对蛋白质结构的改造，而非直接操作氨基酸，B错误； C、蛋白质的高级结构（空间结构）十分复杂，目前人们对蛋白质高级结构和功能的对应关系了解仍有限，因此蛋白质工程实施难度较大，C正确； D、蛋白质工程的改造结果不一定符合预期，获得的新酶不一定具有比天然酶更高的催化效率和更强的稳定性，还需要经过筛选验证，D错误。 二、非选择题：本题有5个小题，共52分。 17. 苹果在采摘、分选和运输过程中常因碰撞受损，受损部位会出现褐变，这与多酚氧化酶（PPO）和酚类物质的反应有关。研究发现，苹果细胞受损后，部分蛋白质用于补充和重建受损的细胞结构，某些酶促反应增强，从而加快果实成熟。回答下列问题： （1）自然状态下，酚类物质存在于细胞的液泡中，PPO存在于细胞其他的多个部位，受损苹果发生褐变的原因可能是_______。 （2）下列各种物质中，组成蛋白质的氨基酸是_______。 A B C D H−CH−CH2−CH2−COOHNH 2 CH2−CH2−COOHNH 2 连接两个氨基酸分子的化学键叫作______，脱去的水分子中的H来源于______（填基团名称）。某蛋白质由64个氨基酸（R基均不含氧原子）脱水缩合生成，共含有72个氧原子，则该蛋白质由______条肽链构成。 （3）材料中“苹果细胞受损后，部分蛋白质用于补充和重建受损的细胞结构”，体现了蛋白质具有______的功能；某些蛋白质能够加快反应速率的作用机理是______。由此说明蛋白质具有多种功能，这与蛋白质分子结构的多样性有关，从氨基酸角度分析，其原因是______。 （4）鉴定生物组织材料中的有机物可用一些特殊化学试剂，如鉴定花生种子中的脂肪用______染液。鉴定蛋白质的双缩脲试剂由A液和B液组成，检测时只加3～4滴双缩脲试剂B液而不能过量的原因是______。 【答案】（1）细胞受损后生物膜结构被破坏，液泡中的酚类物质流出，与多酚氧化酶（PPO）接触，PPO催化酚类物质反应生成褐色物质，引发褐变  （2） ①. C ②. 肽键 ③. 氨基和羧基 ④. 8 （3） ①. 构成细胞和生物体结构 ②. 降低化学反应的活化能 ③. 氨基酸的种类、数目、排列顺序不同  （4） ①. 苏丹Ⅲ ②. 过量B液的蓝色会掩盖紫色反应；过量的CuSO4（双缩脲B液）也会与NaOH反应生成蓝色的Cu(OH)2沉淀，干扰对紫色反应的观察，影响实验结果 【解析】 【小问1详解】 题意显示，苹果在采摘、分选和运输过程中常因碰撞受损，受损部位会出现褐变，这与多酚氧化酶（PPO）和酚类物质的反应有关，而自然状态下，酚类物质存在于细胞的液泡中，PPO存在于细胞其他的多个部位，受损苹果发生褐变的原因可能是细胞受损后生物膜结构被破坏，液泡中的酚类物质流出，与多酚氧化酶（PPO）接触，PPO催化酚类物质反应生成褐色物质，引发褐变 。 【小问2详解】 根据氨基酸的结构通式可以判断，下列各种物质中，C表示组成蛋白质的氨基酸，连接两个氨基酸分子的化学键叫作肽键，脱去的水分子中的H来源于氨基和羧基，ABD均不符合氨基酸的结构通式。某蛋白质由64个氨基酸（R基均不含氧原子）脱水缩合生成，共含有72个氧原子，其中氧原子的位置为肽链一端的羧基和肽键所在的基团，羧基中含有2个氧原子，设该蛋白质由x条肽链组成，则有64-x+2x=72，解得x=8，即该蛋白质由8条肽链组成。 【小问3详解】 材料中“苹果细胞受损后，部分蛋白质用于补充和重建受损的细胞结构”，体现了蛋白质作为细胞的结构物质，参与构成细胞和生物体结构；某些蛋白质能够加快反应速率的作用，即表现为催化作用，催化作用是通过降低化学反应活化能实现的。由此说明蛋白质具有多种功能，这与蛋白质分子结构的多样性有关，从氨基酸角度分析，蛋白质结构多样性的原因是组成蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序不同。 【小问4详解】 鉴定生物组织材料中的有机物可用一些特殊化学试剂，其原理是特殊的化学试剂与相应的物质发生颜色反应来实现，如鉴定花生种子中的脂肪用苏丹Ⅲ染液，呈现橘黄色。鉴定蛋白质的双缩脲试剂由A液和B液组成，检测时只加3～4滴双缩脲试剂B液而不能过量的原因是B液的成分是CuSO4溶液，过量B液的蓝色会掩盖紫色反应；同时过量的双缩脲B液会与NaOH（双缩脲试剂A）反应生成蓝色的Cu(OH)2沉淀，干扰对紫色反应的观察，影响实验结果。 18. 我国北方部分地区草莓种植中常因连作和高湿环境导致灰霉病频发。某农业技术团队计划从长期堆放草莓秸秆和腐熟有机肥的土样中筛选出能抑制灰霉病病原菌生长的有益细菌，并进一步扩大培养，用于生物防治。研究人员进行了如下实验。 回答下列问题： （1）步骤③中，制备系列稀释液的目的是_______，该步骤将土壤悬浮液稀释了_______倍。 （2）普通琼脂培养基一般应采用_______法灭菌。步骤④培养后，研究人员应选择菌落数为_______的平板进行计数。若3个平板上菌落数分别为32、36、40，则每克土样中活菌数约为_______个。 （3）经步骤⑤纯化培养后，将获得的细菌与灰霉病病原菌进行平板对峙培养，测定其抑菌效果。已知平板对峙培养指的是把一种拮抗菌接种在平板一侧，把病原菌接种在另一侧，培养后观察拮抗菌是否能抑制病原菌生长，实验时应设置“灰霉病病原菌单独培养”的对照组，目的是_______。若某菌株周围出现明显抑菌圈，则说明该菌株可能通过产生_______来抑制病原菌生长。 （4）在扩大培养该有益菌株时，通常选用液体培养基而不是固体培养基，原因是_______（答出2点）。 【答案】（1） ①. 使样品中的微生物充分分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，便于计数和分离 ②. 100 （2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 30～300 ③. 3.6×106 （3） ①. 排除其他因素对实验结果的干扰，确保实验结果是由拮抗菌引起的 ②. 抑菌物质（如抗生素） （4）液体培养基能使菌株与营养物质充分接触，有利于菌株的大量繁殖；液体培养基便于进行振荡培养，增加溶解氧，满足菌株有氧呼吸的需求 【解析】 【小问1详解】 在微生物培养中，制备系列稀释液的目的是使样品中的微生物充分分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，便于计数和分离。稀释倍数计算：步骤②中10g土壤+90mL无菌水→稀释10倍（101）；步骤③中第一次取1mL土壤悬浮液+9mL无菌水→再稀释10倍（累计102）；第二次取1mL稀释液+9mL无菌水→再稀释10倍（累计103）； 最终取0.1mL 涂布，因此步骤③结束后，土壤悬浮液被稀释了100倍（总稀释倍数为104倍）。 【小问2详解】 普通琼脂培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，这是因为高压蒸汽灭菌能在高温高压条件下杀灭培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子。步骤④培养后，为了保证计数的准确性，应选择菌落数在30～300之间的平板进行计数，因为这个范围内的菌落数既能反映样品中的活菌数量，又不会因菌落数过多或过少而导致计数误差过大。平均菌落数= (32+36+40)÷3=36，稀释倍数104倍，涂布体积为0.1mL，每克土样活菌数=36÷0.1×104=3.6×106个。 【小问3详解】 实验时设置“灰霉病病原菌单独培养”的对照组，目的是排除其他因素对实验结果的干扰，确保实验结果是由拮抗菌引起的。若某菌株周围出现明显抑菌圈，说明该菌株可能通过产生抑菌物质（如抗生素）来抑制病原菌生长，因为抑菌物质能够在菌株周围区域抑制病原菌的生长繁殖，从而形成抑菌圈。 【小问4详解】 在扩大培养该有益菌株时，选用液体培养基而不是固体培养基，原因是液体培养基能使菌株与营养物质充分接触，有利于菌株的大量繁殖；液体培养基便于进行振荡培养，增加溶解氧，满足菌株有氧呼吸的需求。 19. 某农业科研团队拟培育一种兼具耐盐性和高维生素C含量的新型经济作物。甲植物耐盐性强，但果实维生素C含量低；乙植物不耐盐，但果实维生素C含量高，研究人员决定采用植物体细胞杂交技术获得兼具两种优良性状的新品系。已知甲植物细胞在高盐培养基上能正常分裂，乙植物细胞不能；乙植物细胞含有较高活性的L酶，能将培养基中的无色底物X转化为蓝色产物，而甲植物细胞不能。回答下列问题： （1）过程a中常用的酶是_______。获得的原生质体一般要在较高的渗透压培养体系下培养，其目的是_______。 （2）过程b中，除了用PEG诱导原生质体融合外，还可用的化学方法有_______。细胞融合成功的标志是_______。 （3）应用含_______的选择培养基筛选杂种细胞，最终在培养基上挑选_______的细胞即为杂种细胞。 （4）过程d用到的技术是_______，该过程包括_______两个阶段。 （5）有人认为，只要获得了杂种细胞，就一定能得到符合育种要求的新品种，你是否赞同？_______，说明理由___________________。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 防止原生质体吸水胀破，维持原生质体的正常形态 （2） ①. 高Ca2+-高pH诱导法 ②. 杂种细胞再生出细胞壁 （3） ①. 高盐和底物X ②. 能正常分裂（生长）且显蓝色 （4） ①. 植物组织培养技术 ②. 脱分化和再分化 （5） ①. 不赞同 ②. 杂种细胞中控制耐盐和高维生素C含量的基因不一定能正常表达 【解析】 【小问1详解】 过程a中常用的酶是纤维素酶和果胶酶，因为细胞壁的成分是纤维素和果胶。获得的原生质体一般要在较高的渗透压培养体系下培养，这样可以防止原生质体吸水胀破，保证原生质体的活性。 【小问2详解】 过程b为诱导原生质体融合的过程，该过程常用的方法分为物理法（离心、振动、电激）和化学法，常见化学法除PEG（聚乙二醇）诱导外，还有高Ca²⁺-高pH融合法；植物原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁。 【小问3详解】 杂种细胞同时具备甲（耐高盐）和乙（含L酶，可将X转化为蓝色产物）的特性，因此选择培养基需要添加高浓度盐（淘汰未融合的乙、乙-乙融合细胞）和无色底物X，最终能在高盐培养基上正常生长，且能将X转化为蓝色产物，即存活且显蓝色的就是目标杂种细胞。 【小问4详解】 过程d用到的技术是植物组织培养技术，该过程包括脱分化和再分化两个阶段，该过程依据的原理是植物细胞的全能性。 【小问5详解】 有人认为，只要获得了杂种细胞，就一定能得到符合育种要求的新品种，这种说法是不正确的，因为即使由杂种细胞经过植物组织培养技术获得了杂种植株，杂种植株中控制耐盐和高维生素C含量的基因不一定能正常表达。 20. 如图为一种生物导弹的作用原理示意图。已知处于游离状态的生物导弹更易被机体免疫系统清除掉，而与肿瘤细胞结合后的生物导弹，短时间内不易被清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，对正常细胞也有一定毒性，可抑制DNA和RNA的合成。回答下列问题： （1）制备单克隆抗体时，要用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的_______中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。推测_______细胞不能在第一次筛选使用的选择培养基上生长，经第一次筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______。 （2）在治疗中，应先注射生物导弹，待游离的生物导弹被消除后，再注射非活化磷酸阿霉素，采用这样治疗流程的原因是_______，该过程中主要利用了单克隆抗体_______作用。 （3）肿瘤细胞受到阿霉素作用后，可抑制细胞中基因的_______过程。 【答案】（1） ①. 脾脏 ②. 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 ③. 既能无限增殖，又能产生特异性抗体  （2） ①. 先清除游离的生物导弹，使非活化磷酸阿霉素仅在肿瘤细胞部位被活化，减少阿霉素对正常细胞的毒副作用 ②. 特异性识别肿瘤抗原  （3）复制和转录 【解析】 【小问1详解】 制备单克隆抗体时，要用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾脏中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。 单克隆抗体制备过程中第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，据此可知在选择培养基上不能生长的是未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞以及融合形成的同种核细胞都不能生长，经过选择培养筛选得到的杂交瘤细胞既能无限增殖，还能产生抗体。 【小问2详解】 题意显示，处于游离状态的生物导弹更易被机体免疫系统清除掉，而与肿瘤细胞结合后的生物导弹，短时间内不易被清除，阿霉素对正常细胞也有毒性，先注射生物导弹，待游离的生物导弹被免疫系统清除后，再注射非活化磷酸阿霉素，此时只有结合在肿瘤细胞上的生物导弹的碱性磷酸酶能活化阿霉素，可让阿霉素仅作用于肿瘤细胞，大大降低对正常细胞的毒副作用；该过程中单克隆抗体可以特异性识别肿瘤细胞的抗原，起到特异性识别肿瘤抗原的作用，将药物导向肿瘤部位。 【小问3详解】  阿霉素可抑制DNA和RNA的合成，DNA合成对应基因的复制过程，RNA合成对应基因的转录过程，因此阿霉素可抑制肿瘤细胞基因的复制和转录过程。 21. RNA干扰是指某基因转录形成的mRNA与其互补RNA结合后形成局部双链结构，从而阻碍该mRNA的翻译过程。Y菌是一种兼性厌氧菌，既能杀伤正常细胞，也能杀伤处于缺氧微环境中的肿瘤细胞。已知asd基因是Y菌生存必需基因，为提高其肿瘤靶向杀伤效果，研究人员在Y菌asd基因的上游和下游分别增加了启动子PT和PA，两种启动子的作用机制如图所示。回答下列问题： （1）改造Y菌时，科研人员需要先构建含有PT、PA和asd相关序列的基因表达载体。一个完整的基因表达载体，除目的基因及其调控序列外，通常还应具备_______和_______等结构。将目的基因导入受体菌常用的方法是_______。 （2）研究人员改造Y菌时，需将启动子PT和PA定向插入Y菌DNA中，这一过程需要使用的工具酶有_______。启动子是_______识别和结合的位点，启动子PT应该置于asd基因正常转录时模板链的_______（填“3'”或“5'”）端。 （3）改造之后的Y菌在_______（填“低氧”或“高氧”）环境中正常存活并增殖，原因是_______。 【答案】（1） ①. 标记基因 ②. 复制原点 ③. 感受态细胞法 （2） ①. 限制酶和DNA连接酶 ②. RNA聚合酶 ③. 3' （3） ①. 低氧 ②. 低氧环境中只有启动子PT启动转录，asd基因表达，可合成Y菌生存必需的蛋白，Y菌可以存活增殖；高氧环境中PA启动会产生与asd mRNA互补的RNA，引发RNA干扰，抑制相关基因的表达，Y菌无法存活 【解析】 【小问1详解】 一个完整的基因表达载体，除目的基因、启动子、终止子等调控序列外，还需要标记基因（筛选成功导入目的基因的受体细胞）和复制原点（保证载体在受体细胞中复制遗传）；将目的基因导入原核受体菌，常用方法是Ca2+ 处理的感受态细胞法。 【小问2详解】 构建重组DNA时，需要限制酶切割DNA片段，再用DNA连接酶连接，因此这一过程需要使用的工具酶是限制酶和DNA连接酶；启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录；转录时RNA沿5'→3'方向合成，模板链的转录方向是3'→5'，因此启动子位于目的基因模板链的3'端。 【小问3详解】 低氧时仅启动PT，驱动asd基因正常转录产生mRNA，可翻译出Y菌生存必需的asd蛋白，因此Y菌可存活增殖；高氧时PA启动，反向转录出互补RNA，和asd正常mRNA结合形成双链，阻碍翻译，asd蛋白无法合成，Y菌不能存活，因此改造后的Y菌仅在低氧环境中正常存活增殖。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $