河北廊坊市固安一中等校2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题

高二5月生物 参考答案及评分意见 1.C【解析】酵母菌的酒精发酵依靠无氧呼吸产生酒精，若不断通入无菌空气会抑制酵母菌的无 氧呼吸，无法生成酒精，A错误；酵母菌酒精发酵的最适温度为18~30℃，温度低于18℃时， 与酵母菌呼吸相关的酶活性会降低，呼吸作用受到抑制，但不会直接停止，B错误；发酵过程 排放CO2时仅需拧松瓶盖即可，C正确；醋酸菌为好氧菌，在有氧条件下可将果酒中的酒精转 化为醋酸，因此暴露在空气中的果酒变酸可能与空气中的醋酸菌有关，D错误。 2.B【解析】消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包含芽孢和孢子），灭菌可杀灭全 部微生物，二者对微生物的杀伤程度不同，A正确；灭菌是指杀灭物体上所有微生物（包括芽 孢和孢子)的措施，操作者的衣着和手仅能进行消毒处理，无法也不需要进行灭菌处理，B错 误；培养基中营养物质浓度过高会使外界渗透压高于微生物细胞内渗透压，导致微生物失水抑 制其生长，因此浓度过高不利于微生物的生长，C正确；紫外线照射可通过破坏微生物的核酸 结构起到消毒作用，喷洒石炭酸可使微生物蛋白质变性失活，二者配合使用能有效提升对接种 室的消毒效果，D正确。 3D【解析】平板划线法的原理就是通过连续划线，逐步将聚集的菌种稀释，最终得到单菌落， 该操作实现了菌种的稀释，A正确；涂布平板法（图乙）接种前，需要对高浓度的水样进行梯 度稀释，才能得到分散均匀的单菌落，B正确；平板划线法（图甲）只能分离纯化菌种，不能 用于细菌计数，稀释涂布平板法（图乙）可用于计数，计数时需要选择菌落数为30~300的平 板统计，C正确：稀释涂布平板法中，可能多个活菌聚集在一起，最终只形成一个菌落，因此 图乙的一个菌落不一定由一个活菌生长发育而来，统计结果往往比实际活菌数偏低，D错误。 4B【解析】该培养基配方中添加了琼脂作为凝固剂，属于固体培养基，A正确：碳源是为微生 物提供碳元素的营养物质，马铃薯中含有的淀粉等有机物也可作为碳源，因此该培养基的碳源 包括葡萄糖和马铃薯，并非只有葡萄糖，B错误；培养基需先完成灭菌操作后再倒平板，若倒 好平板后再灭菌会导致琼脂熔化、破坏培养基成分，不符合无菌操作逻辑，C正确；毛霉属于 霉菌（真菌），培养霉菌时需要将培养基调至酸性，培养细菌时需调至中性或弱碱性，D正确。 5.B【解析】A途径是植物组织培养进行快速繁殖，该过程主要是有丝分裂，有丝分裂过程中 可能发生基因突变，但不会发生基因重组（基因重组一般发生在减数分裂过程中），A错误：B 途径是通过花药离体培养获得单倍体幼苗，再经染色体加倍得到纯合子。单倍体中基因成单存 在，经染色体加倍后得到纯合子，其隐性性状容易显现出来，B正确：植物组织培养为无性生 第1页（共8页） 殖，D途径不改变植物的遗传物质，不能获得抗病毒的幼苗，C错误；通过植物组织培养（如A 途径)得到的植株体细胞染色体数与原植株相同：通过单倍体育种(B途径)先得到单倍体， 其染色体数是原植株的一半，再经染色体加倍后与原植株相同；植物体细胞杂交(F途径)得 到的植株体细胞中的染色体数是两融合细胞染色体数之和，与原植株不同，所以上述应用得到 的植株体细胞中的染色体数并不都相同，D错误。 6.C【解析】动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物体细胞的全能性受到严格限制，仅通过动物 细胞培养无法培育成完整动物个体，A错误；动物细胞培养基中需添加血清等天然成分，培养 的气体环境为95%空气和5%C02,并非通入纯氧气，其中CO2的作用是维持培养液的pH,B 错误：传代培养的细胞传至1050代时，大部分细胞会衰老调亡，少数细胞的遗传物质可能发 生癌变，癌变后的细胞出现无限增殖的特性，C正确；正常动物细胞培养时会出现贴壁生长和 接触抑制现象，癌细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞间黏着性降低，不存在接触抑制，可无限增 殖，D错误。 7.C【解析】体细胞核移植中，供体细胞需选择处于体细胞分裂间期的细胞，此时细胞核结构稳 定，染色质松散，更易激发全能性，有丝分裂后期染色体分离，细胞核完整性难以保证，A错 误：去核后的卵母细胞需在体外培养至适宜状态（维持细胞质的全能性激发能力），再与供体细 胞融合，直接融合无法保证重构胚的正常发育，B错误；重构胚自身无法独立完成胚胎发育， 必须移植到生理状态相同的代孕母体子宫内，借助代孕母体的营养和环境才能发育成完整个体， C正确：核移植形成的克隆动物，其遗传物质主要来自供体细胞的细胞核，少量来自受体卵母 细胞的细胞质（含少量线粒体DNA),D错误。 8.A【解析】人体内的干细胞主要有成体干细胞和胚胎干细胞(ES细胞)，诱导多能干细胞(PS 细胞)是通过人工诱导技术获得的类似胚胎干细胞的细胞，它并不属于人体内天然存在的干细 胞类别，A错误；造血干细胞属于成体干细胞，具有组织特异性，只能分化为特定的细胞或组 织，不具有发育成完整个体的能力，B正确：千细胞是指动物或人体内保留的具有分裂和分化 能力的细胞，C正确；干细胞可诱导培育为特定组织、器官用于再生医学治疗，也可分化为靶 细胞用于药物安全性、有效性检测，在多个领域发挥重要作用，D正确。 9B【解析】①处为氢键，是解旋酶的作用部位：②处为磷酸二酯键，是限制酶的作用部位：③ 处为两个DNA片段的缺口，是DNA连接酶的作用部位，B正确。 10.C【解析】质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之 外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子，无蛋白质，其上含有控制生物性状的基因， 第2页（共8页） 属于细胞质遗传物质，质粒不属于细胞器，A正确，C错误；质粒DNA分子上有一个至多个限 制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中，B正确：质粒上的抗生素抗性基因可作 为标记基因，便于重组DNA分子的筛选，D正确。 11.B【解析】猪的内脏构造、器官大小、血管分布都与人类高度相近，是异种器官移植的首选 供体生物，A正确；转基因技术的本质是基因工程，基因工程的核心步骤是基因表达载体的构 建，该过程需要限制酶切割目的基因和载体，DNA连接酶连接二者形成重组载体，没有用到解 旋酶，B错误；要获得所有细胞均携带改造后基因的转基因供体猪，需要将目的基因导入受精 卵，再培育为完整个体，C正确：异种器官移植的最大障碍是免疫排斥反应，敲除猪基因组中 会引发免疫排斥的关键基因，可降低移植后的排斥反应，是该技术成功的关键，D正确。 12A【解析】蛋白质工程的目标是改造或制造特定功能的蛋白质，其操作流程为：确定目标蛋 白质的功能→设计预期的氨基酸序列→反向推导对应的核苷酸序列（基因序列），A错误；定点 诱变技术通过特异性改变基因中特定碱基，实现对编码蛋白质的氨基酸序列进行精确修饰，从 而改变蛋白质结构，B正确：胚胎移植时，为使受体子宫与供体胚胎的生理状态同步，需对受 体进行同期发情处理（如激素调节），以提高胚胎着床率，C正确；胚胎分割技术将早期胚胎切 割为多份，每份可发育为遗传物质相同的个体，故能获得同卵双生或同卵多生后代，D正确。 13D【解析】转基因作物的基因可能通过花粉传播到近缘物种（基因漂移），①正确：转基因食 品可能含有新的蛋白质，存在过敏风险，②正确；治疗性克隆涉及胚胎操作，需严格监管以防 止滥用，③错误：治疗性克隆的原理是细胞核的全能性，而非整个细胞的全能性，④错误；我 国明确禁止任何生殖性克隆人实验，⑤正确：治疗性克隆因涉及胚胎使用，存在伦理争议，⑥ 错误；生物武器包括致病微生物（如细菌、病毒）及生化毒剂，⑦正确；生物武器（如病原微 生物武器)因可能造成大规模生物危害，已被《禁止生物武器公约》明令禁止研发和储备，⑧ 错误。①②⑤⑦正确，故选D。 14.BD【解析】大麦发芽过程中会产生淀粉酶，焙烤的主要目的是杀死种子的胚，终止发芽， 同时赋予啤酒风味：焙烤不会使淀粉酶失活，后续糖化过程仍需要淀粉酶分解淀粉，因此焙烤 的目的不是终止淀粉酶的分解作用，A错误；啤酒酿造接种的主要菌种是酵母菌，酒精发酵的 原理是利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精，B正确：主发酵阶段不需要等糖分完全分解后再终止， 会残留部分糖分供后发酵阶段利用，糖分完全分解会影响啤酒的风味，C错误；包装前的消毒 可以杀死大多数杂菌，减少微生物污染，延长保存时间，保证啤酒品质，D正确。 15.ABD【解析】题图显示，两种原生质体分别带有不同的荧光染料，因此可以将荧光染料的颜 第3页（共8页） 色作为初步筛选融合原生质体的依据，A正确；植物体细胞杂交技术流程完成的标志是形成杂 种植株，杂种细胞再生出细胞壁标志着植物体细胞融合完成，B正确；过程V脱分化形成的愈 伤组织是一团不定形的薄壁组织团块，该过程不需要照光培养，而V过程为脱分化过程，该过 程中需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用，C错误；该技术为植物体 细胞杂交技术，打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。 16.ABC【解析】细胞核中含有主要的遗传物质，在A猪的体细胞中植入人体基因，其细胞核中 遗传物质发生了变化，且D猪含有来自B猪的细胞质基因，故D猪出生后不会完全呈现A猪 的遗传性状，A正确：抗原是能引起淋巴细胞产生抗体的物质，抗原包括进入人体的微生物等 病原体、异物、异体器官等，可见，从免疫角度看移植到人体的猪心属于抗原，B正确；基因 通常是包含遗传信息（具有遗传效应）的DNA片段，猪与人的遗传物质均是DNA,因此植入 的基因是位于DNA上与遗传有关的片段，C正确：转基因技术是把一个生物体的基因转移到 另一个生物体DNA中的生物技术，所以往A猪的体细胞中植入人类基因，采用了转基因技术， D错误。 17AC【解析】卵裂期的细胞数目不断增加，胚胎总体积并不增加，A正确；图中①为黑色小 鼠囊胚中的滋养层细胞，不具有发育的全能性，将来发育成胎膜和胎盘的一部分，②为内细胞 团，将来发育为胎儿的各种组织，B错误；丁为胚胎移植，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同 生理环境条件下空间位置的转移，C正确；黑白花仔鼠为小鼠胚胎嵌合体，有的细胞含有黑鼠 的基因，有的细胞含有白鼠的基因，不是同时含有黑鼠和白鼠的基因，D错误。 18.BC【解析】图中的质粒还应该有复制原点、标记基因等结构，标记基因一般为抗生素抗性 基因，而不是抗生素基因，A错误；为保证基因M的反向插入，根据启动子的方向可知，在基 因M所用的引物1添加HindIII的识别序列，引物2添加EcoR I的识别序列；由于子链的延伸 在引物的3端，因此相应的识别序列应添加在引物的5'端，B正确；反义M基因转录产生的 RNA(反义RNA)与内源M基因转录产生的RNA序列互补，两者通过碱基互补配对结合形 成双链RNA,从而阻碍核糖体与RNA结合，阻断翻译过程，最终抑制M蛋白的合成，降低 木质素含量，C正确；引物1和引物2是依据基因M设计的，原黑麦草细胞含有基因M,因此 无论外援基因M是否插入，是正向插入还是反向插入，进行PCR后都会扩增出基因M的片段， 故该检测方法不可取，D错误。 19.(12分，除标注外，每空1分) (1)高压蒸汽灭菌法 酒精灯火焰 第4页（共8页） (2)纤维素 选择 增大目的菌的浓度（或数量） (3)3 刚果红 透明圈（或水解圈） (4)小麦根腐病病原菌菌液(2分) 抑菌圈(2分) 【解析】(1)微生物培养基常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法，为避免环境中的杂菌污染，接 种相关的无菌操作均需在酒精灯火焰附近的无菌区域进行。 (2)筛选纤维素分解菌时，富集培养的培养基需以纤维素为唯一碳源，仅能利用纤维素的微生 物可正常生长繁殖，以此增加目的菌株的相对数量，降低后续分离筛选的难度。 (3)刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被菌株分泌的纤维素酶分解后， 复合物无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈，因此可通过观察透明圈的大小，初 步判断菌株降解纤维素的能力强弱，透明圈越大说明菌株的纤维素分解能力越强。 (4)检测菌株的病原菌拮抗活性时，需先在固体平板上均匀涂布小麦根腐病病原菌菌液，再将 待检菌株的无菌发酵液滴加至牛津杯制造的小孔中，若菌株可产生抑菌物质，病原菌的生长会 被抑制，小孔周围会出现无菌的抑菌圈，因此可通过观察抑菌圈的有无及大小，判断菌株抑菌 活性的强弱。 20.(12分，除标注外，每空1分) (1)茎尖 茎尖细胞中病毒极少，甚至无病毒 (2)脱分化 未分化的不定形薄壁组织 生长素/细胞分裂素的比例<1（或细胞分裂素/ 生长素的比例>1) (3)将野生马铃薯种细胞与马铃薯栽培种细胞融合，经植物组织培养技术培养成植株(2分) (4)外植体消毒处理、培养基及器械灭菌处理、实验人员无菌操作（答出2点，2分） 温 度、光照、湿度、气体环境(O2、CO2)等（答出3点，3分） 【解析】（1)培育脱毒马铃薯时，一般选择茎尖作为外植体，因为茎尖细胞中病毒极少，甚至 无病毒。 (2)植物组织培养过程中，外植体经过脱分化形成的愈伤组织，愈伤组织是一团具有分生能力 的不定形薄壁组织。再分化形成芽和根的过程中，生长素和细胞分裂素的比例是有一定要求的， 与生根培养基相比，一般情况下生芽培养基中生长素/细胞分裂素的比例<1。 (3)根据题意分析，两种马铃薯之间存在生殖隔离，但是各有其优点，则可以通过体细胞杂交 技术将两者的优点集合到同一后代身上，即将野生马铃薯种细胞与马铃薯栽培种细胞融合，经 植物组织培养技术培养成植株。 第5页（共8页） (4)在植物组织培养时，为了减少污染，应该对外植体进行消毒处理、对培养基及器械灭菌处 理、实验人员无菌操作等；在培养室中培养时，注意优化培养环境，控制温度、光照、湿度、 气体环境(O2、CO2)等培养条件。 21.(11分，除标注外，每空1分) (1)PEDV抗原（或灭活的猪流行性腹泻病毒） B淋巴（或浆） 能在体外培养条件 下无限增殖(2分) (2)聚乙二醇（或PEG) 杂交瘤 既能迅速大量增殖(1分)，又能产生所需的特 异性抗体(1分) (3)抗体检测 (4)特定抗原(2分) 【解析】(1)制备单克隆抗体时，需先向实验动物体内注射PEDV抗原，刺激小鼠发生体液免 疫，分化出能分泌抗PEDV特异性抗体的B淋巴细胞（浆细胞）：骨髓瘤细胞的核心特性是可 在体外培养条件下无限增殖，可为杂交瘤细胞提供无限增殖的能力，满足后续大规模培养的需 求。 (2)诱导动物细胞融合的常用化学诱导剂为聚乙二醇(PEG):选择培养基的作用是特异性筛 选杂交瘤细胞，未融合的B淋巴细胞不能在体外无限增殖，未融合的骨髓瘤细胞、融合的同种 核细胞在选择培养基中均会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能在选择培养基中存活并增殖；筛选 得到的杂交瘤细胞兼具双亲细胞的遗传特性，核心优势是既能迅速大量增殖，又能产生所需的 特异性抗体。 (3)步骤⑤为单克隆化培养，常用有限稀释法，将细胞梯度稀释后接种到多孔培养板中，使每 个孔内尽可能只有一个细胞，实现单个细胞的克隆化培养，再经多次抗体检测筛选出阳性细胞 株。 (4)单克隆抗体最核心的特性是能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并 且可以大量制备，这也是其与多克隆抗体相比最核心的优势，可实现对病原体的高特异性检测。 22.(12分，除标注外，每空1分) (1)使DNA聚合酶能够从引物的3端开始连接脱氧核苷酸 使两种引物通过碱基互补配 对与两条单链DNA结合（或使引物与单链的互补序列结合） (2)不需要(2分) A和D(2分) (3)1(2分) 子链的延伸方向只能从5'→3'，以杂交物2作模板时子链不能延伸(2分) 第6页（共8页） (4)可以诱导定向变异，目的性强，突变概率高等（答出一点即可） (5)受精卵 【解析】(1)DNA聚合酶不能从头合成DNA链，只能催化脱氧核苷酸连接到已有的核苷酸片 段（物）的3端羟基上延伸DNA链，而引物能使DNA聚合酶从其3端开始连接脱氧核苷酸。 PCR过程包含变性（高温使DNA双链解旋）、复性（温度下降到50℃左右，让引物与互补的模 板单链通过碱基互补配对结合)、延伸（耐高温DNA聚合酶催化子链合成）三步。 (2)PCR3是让杂交物1和杂交物2依据碱基互补配对原则，以自身末端为起点延伸形成完整 双链，无需额外引物引导，故不使用引物。PCR4要扩增出完整的改造后目的基因，需要能结 合目的基因两端序列的引物，引物A可结合基因一端，引物D可结合另一端，所以选引物A 和D,保证扩增出全长基因。 (3)DNA子链的延伸方向为5'→3'，杂交物1的3端为游离状态，能作为引物延伸的起点， 使子链顺利延伸，而杂交物2的3端因方向限制，无法启动子链延伸，所以选杂交物1作模板。 (4)X射线诱变属于随机诱变，突变方向不可控，且大多是无用或有害突变，而重叠延伸PCR 是定点突变技术，能精准针对干扰素基因特定碱基进行替换，实现定向变异，只改变目标位点， 目的性强，且通过设计引物可高效引入突变，突变概率高，避免了随机诱变的盲目性 。 (5)要让干扰素基因在牛的泌乳期特异性表达，需将改造后的干扰素基因与乳腺中特异表达基 因的启动子重组，导入牛的受精卵中获得转基因小牛，在其进入泌乳期后即可获得改造后的干 扰素。 23.(12分，除标注外，每空1分) (1)蛋白质 基因（或DNA) 多肽链（或肽链） (2)引物 TagDNA聚合酶（或耐高温的DNA聚合酶、DNA聚合酶）（两空可互换） (3)XmaI和BglⅡ(2分) 新霉素 白色(2分) (4)性别（或生理状态、年龄等）(2分) 【解析】(1)图1所示运用蛋白质工程得到凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是 基因，因为蛋白质的结构由基因决定，改造基因才能定向改变蛋白质的结构和功能。图中物质 是多肽链，它是由基因转录、翻译后形成的，后续折叠成具有三维结构的蛋白质。 (2)PCR扩增时，反应体系中需要加入模板、4种脱氧核苷酸、引物、TagDNA聚合酶及缓冲 液等。 (3)由图可知，限制酶XmaI和BglIⅡ切割产生的黏性末端分别与目的基因两端的黏性末端相 第7页（共8页） 同，为使目的基因与质粒高效连接，应选用的限制酶是XmaI和BglIⅡ。malcZ的表达产物会 使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色，由于XmaI和BglIⅡ破坏了malcZ基因，所以重组质粒中malcZ 基因被破坏，但含有新霉素抗性基因，因而需要在培养基中加入新霉素，并选择颜色为白色的 大肠杆菌菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育出能生产改良水蛭素的工程菌株。 (4)膀胱生物反应器比乳腺生物反应器更有优势，因为它可以不受转基因动物的性别或生理 状态（如是否泌乳、年龄等）的限制，无论雌雄、任何生理阶段都能从尿液中获取产物： 第8页（共8页）高二5月生物 注意事项： 1答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改 动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在 本试卷上无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 考试时间为75分钟，满分100分 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项 中，只有一项是符合题目要求的。 1.《尚书·说命》中有“若作酒醴，尔惟曲蘖”的记载，其中的“曲”指含有酵母菌等菌种的谷 物。下列关于果酒制作的叙述，正确的是 A.酵母菌的酒精发酵过程中，需要不断通入无菌空气 B.温度一旦低于18℃，酵母菌的呼吸作用就会停止 C.发酵时，应定时将发酵器皿的瓶盖拧松以排放CO。 D,暴露于空气中的果酒会变酸，这可能与空气中的乳酸菌有关 2消毒和灭菌是微生物培养的必要措施。下列关于培养基配制及接种室的叙述，错误的是 A.灭菌和消毒对微生物的杀伤程度是不同的 B.对操作者的衣着和手进行灭菌处理 C,培养基中营养物质浓度过高可能不利于微生物的生长 D.喷洒石炭酸（苯酚）的同时配合紫外线照射可提高对接种室的清毒效果 3.为了调查某河流的水质情况，学习小组利用两种不同方法对该河流水样中的细菌进行分 离，结果如图甲、乙所示。下列叙述错误的是 888880 甲 乙 A.图甲对应平板划线法，连续划线操作将聚集的菌种稀释 B.图乙对应涂布平板法，若想要获得图乙所示结果，一般要对水样进行稀释 C.采用图乙对应方法对细菌进行计数，应选择菌落数为30~300的平板进行统计 D.图乙中的一个菌落由一个活菌生长发育而来，统计结果用活菌数表示 第1页（共8页） 4.现有一培养基的配方如下：去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15g,蒸馏水1000mL。 下列有关该培养基的叙述错误的是 A.该培养基属于固体培养基 B.该培养基中提供碳源的物质只有葡萄糖 C.为防止杂菌污染，培养基需先完成灭菌操作后再倒平板 D.若该培养基是用于培养毛霉，则需要将培养基调至酸性 5.植物细胞工程在新品种繁育、细胞工厂化生产等方面都有着广泛应用，并取得了显著的 社会效益和经济效益。如图表示植物细胞工程应用的相关操作，下列叙述正确的是 快速繁殖·— D 田→脱毒植株 优良加倍单倍体 B E 品种选择幼苗 曾→次生代谢产物 突变植株·一 E, 植物体细胞 ⊙ 杂交植株 紫外线 821 A.A途径中发生的可遗传变异有基因突变和基因重组 B.经B途径得到的大多数植株的隐性性状容易显现 C.D途径的理论依据是茎尖新生组织具有抗病毒的能力 D.上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同 6.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列关于动物细胞培养的叙述正确的是 A,动物细胞培养的原理是细胞的全能性，可培育成完整动物个体 B培养基中需添加血清等天然成分，同时通入纯氧气保证细胞呼吸 C.传代培养的细胞若遗传物质发生改变，可能出现无限增殖的细胞 D.培养过程中细胞会出现贴壁生长和接触抑制，癌细胞培养时也存在接触抑制 7.2026年，科研团队利用体细胞核移植技术成功克隆出黔东南黑香猪，进一步完善了地方 珍稀猪种的保护体系。下列关于该技术的叙述正确的是 A供体细胞需选择处于有丝分裂后期的细胞，以保证细胞核的完整性 B.去核后的卵母细胞无需培养，可直接与供体细胞融合构建重构胚 C.重构胚需移植到代孕母体的子宫内，才能发育成完整个体 D.核移植形成的克隆动物，其遗传物质全部来自供体细胞的细胞核 8.下列有关干细胞的叙述，错误的是 A.人体内的干细胞有胚胎干细胞、成体干细胞和PS细胞三类 B.造血干细胞不具有发育成完整个体的能力 C.干细胞是指动物或人体内具有分裂和分化能力的细胞 D.干细胞在再生医学、药物安全性检测等领域发挥重要作用 第2页（共8页） 9,如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依 次是 A.DNA连接酶、限制酶、解旋酶 1② B.解旋酶、限制酶、DNA连接酶 C.解旋酶、限制酶、RNA连接酶 D.限制酶、DNA连接酶、解旋酶 10.如图表示某种质粒的结构示意图，图中注明了两种限制酶的切割位点及质粒的部分特 定结构，下列相关叙述错误的是 A.质粒可从原核细胞或真核细胞中分离，其上含有控制生物性状 启动子 EcoR I Sau3A I 的基因 复制 原点 终止子 B.图中质粒DNA分子上的限制酶切割位点可供外源DNA片段插 入其中 抗生素抗性基因 C.质粒结构简单，由DNA和蛋白质构成，是可自我复制的小型细胞器 D.图中的抗生素抗性基因属于标记基因，可用于重组DNA分子的筛选 11.2025年3月，窦科峰院土团队在《自然》发文，报告了世界首例转基因技术猪肝到人体 (脑死亡)肝移植的成功案例。下列关于转基因克隆猪肝的叙述，错误的是 A.选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似 B.该操作的核心步骤是基因表达载体的构建，需用到解旋酶、限制酶、DNA连接酶 C,对该提供肝源的猪进行基因工程技术改造时，需要将目的基因导入受精卵 D,该技术成功的关键可能是敲除了猪基因中某些会引发免疫排斥反应的关键基因 12.下列关于生物技术与工程的叙述错误的是 A.蛋白质工程中，一般先设计核苷酸序列，再设计氨基酸序列 B.蛋白质工程中，可利用定点诱变技术改造基因，来改变表达的蛋白质结构 C胚胎工程中，胚胎移植的受体需要进行同期发情处理 D.胚胎工程中，可利用胚胎分割技术得到同卵双生或同卵多生后代 13.当代生物技术迅速发展，安全性问题引发社会的广泛关注，下列叙述正确的有 ①转基因栽培作物可能通过花粉发生基因漂移 ②转基因食品存在引发过敏的风险 ③治疗性克隆都不需要严格监管 ④治疗性克隆的原理是细胞的全能性 ⑤我国禁止进行任何生殖性克隆人实验 ⑥治疗性克隆不会产生道德、伦理问题 ⑦生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂等 ⑧生物武器具有传染性强、危害范围广等特点，各国可根据需要研发储备 A.7项 B.6项 C.5项 D,4项 第3页（共8页） 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项 中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1 分，有选错的得0分。 14.以大麦为原料酿造啤酒的流程如图所示。下列相关叙述正确的是 大孝一焙烤、一糖化一蒸煮一接种一主发酵一后发酵一消毒一包装 发芽·碾磨 A焙烤的主要目的是终止淀粉酶的分解作用 B.图中接种的菌种主要是酵母菌 C,主发酵阶段应该在发酵液中的糖分完全分解之后终止 D.包装前进行消毒可以杀死大多数微生物，从而保证啤酒的品质 15.豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强。科研人员欲 利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图，下列有关说法正确 的是 红色荧 光染料 闷 Q绿色荧 光染料 茶 b A.荧光染料的颜色可以作为初步筛选融合原生质体的依据 B.杂种细胞再生出细胞壁标志着植物体细胞融合完成 C.过程V、V需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 D.该技术打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种 16.2023年2月7日，美国马里兰医学院进行了全球首例猪心脏移植进入人体的手术，如图 为猪心脏移植过程示意图，下列有关叙述正确的是 ®刘 人体基因 植入 取胶 胚胎移植 A猪 体细胞 ⊙ 细胞 心脏移植 ● 。 重组 C猪 D猪 B猪 去核卵细胞 A.D猪出生后不会完全呈现A猪的遗传性状 B.从免疫角度看移植到人体的猪心属于抗原 C.植人的基因是位于DNA上与遗传有关的片段 D.向A猪的体细胞中植人人类基因，采用了克隆技术 第4页（共8页） 17.嵌合体动物是指由两种或两种以上具有不同遗传特性的细胞组成的聚合胚发育而成的 个体，如图表示采用注射法获得小鼠胚胎嵌合体（即黑白花仔鼠）的过程。下列叙述正确 的是 黑色小鼠 注入另一只 的囊胚 白色小鼠的 黑白花 囊胚腔中 仔鼠 A.卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不随之增加 B.图中②不具有发育的全能性，将来发育成胎膜和胎盘的一部分 C.丁的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D.黑白花仔鼠的任意一个细胞中同时含有黑鼠和白鼠的基因 18.黑麦草含有丰富的蛋白质和粗纤维，被誉为“冬季青饲料之王”。但其细胞壁中含有的木 质素会降低其作为饲料的品质。M蛋白是催化木质素合成的关键酶，某研究团队通过 将基因M反向插入载体，构建了反义M基因载体，获得了低木质素含量的转基因黑麦 草，实验部分流程如图所示。下列叙述正确的是 A.图中的质粒还应该有复制原点、抗生素基因 HindⅢ EcoR I 等结构 质粒 启动子 B.扩增基因M所用的引物1的5'端应添加限 (只标出部分结构 制酶HindⅢ的识别序列 T-DNA C.反义M基因转录产生的RNA与内源M基 重组质粒 因的mRNA互补结合，阻断其翻译过程 D.利用PCR技术，以引物1和引物2进行扩 引物2 31 增，可检测基因M是否反向插人黑麦草染色 引物1基因M 体DNA中 转录方向 三、非选择题：共5小题，共59分。 19.(12分)长期秸秆还田的农田土壤中，富集了可分泌纤维素酶的微生物类群，其中部分菌 株可产生次生代谢产物抑制小麦根腐病病原菌的繁殖。科研人员拟从该类农田土壤中 分离筛选兼具高效纤维素降解能力和病原菌拮抗活性的功能菌株，相关操作流程如图所 示。回答下列问题： A B 取土壤浸出液 --5 土壤 100ml 丙 C D ①制备土壤浸出液 ②培养基培养 ③稀释涂布平板 ④挑菌落培养 ⑤ (1)微生物培养基常用的灭菌方法为 ,为避免杂菌污染，接种相关的无菌操作均 需在 附近进行。 (2)步骤②为富集培养，该过程配制的培养基需以 为唯一碳源。从功能上说，该 培养基属于 培养基，富集培养的目的是 (3)梯度稀释后进行涂布培养时，为使实验结果更准确，每个梯度至少需要涂布 第5页（共8页） 个平板。步骤③稀释涂布平板后，为鉴定单菌落的纤维素分解能力，可向培养基中加入 染料，根据菌落周围 的大小，可初步判断菌株降解纤维素的能力强弱。 (4)步骤⑤为菌株的拮抗活性检测，需将牛津杯竖直立在已经凝固的不含营养物质的琼 脂凝胶平板上，再向牛津杯周围倒入混有 的培养基，待培养基凝固后将牛津杯 取出，再将待检菌株的无菌发酵液滴加至A、B、C、D四个牛津杯制造的小孔中，适宜条 件培养后，可通过观察 的有无及大小，判断菌株的抑菌活性强弱。 20.(12分)马铃薯是重要的经济作物，植物细胞工程在马铃薯的脱毒及育种等方面有着重 要应用。请回答下列问题： (1)培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用 (填“茎尖”或“叶片”)，理由是 (2)植物组织培养常用到愈伤组织培养基、生芽培养基和生根培养基。在愈伤组织培养 基上，外植体经 形成愈伤组织，愈伤组织是一团 。在再分化阶段，生 长素和细胞分裂素参与了细胞分化方向的调节，与生根培养基相比，一般情况下生芽培 养基中这两种激素的比例特点是 (3)马铃薯栽培种的抗病性和抗逆性较差，野生马铃薯种的抗病性和抗逆性较好，但二者 存在杂交不亲合性。利用野生马铃薯种通过细胞工程改进马铃薯栽培种品质的思路是 (4)避免微生物污染、优化培养条件可提高植物组织培养的成功率。在植物组织培养时， 通过 (至少答出2点)等措施，减少污染；在培养室中培养时，注意优化培养环 境，控制 (至少答出3点)等培养条件。 21.(11分)猪流行性腹泻是危害我国生猪养殖的高致病性肠道传染病，其致病原为猪流行 性腹泻病毒(PEDV)。科研人员拟制备针对PEDV的单克隆抗体，用于该病的现场快速 检测与紧急被动免疫，相关制备流程如图所示。回答下列问题： 注射X抗原。 能产生抗x① 1② 抗体的细胞照 8骨髓瘤细胞 融合 放在多孔培养板中生长③ ….0 ④ 检测上清液中抗X抗体并用阳⑤ 性细胞克隆，每孔一个细胞 c--c--coo-o 让细胞繁殖，检测上清液 中抗X抗体，阳性细胞连 ⑥ 续培养，提供抗X抗体 (1)步骤①中，需向健康小鼠体内反复注射 ,目的是刺激小鼠发生体液免 第6页（共8页） 疫，获得能分泌抗PEDV特异性抗体的 细胞；步骤②所用的骨髓瘤细胞， 需具备 的核心特性，以满足杂交瘤细胞体外大规模培养的需求。 (2)细胞融合过程中，常用的化学融合剂是 ;融合操作后经步骤④的选择培养基 培养，仅 细胞可以存活；筛选得到的杂交瘤细胞具备的独特优势是 (3)步骤⑤通过有限稀释法实现单个细胞的克隆化培养，再经过 ,经过多次筛选 最终获得能稳定分泌所需抗体的单克隆细胞株。 (4)与传统从免疫动物血清中提取的多克隆抗体相比，该方法制备的单克隆抗体能精准 识别PEDV抗原的细微差异，与 结合，适配高特异性的病毒检测场景。 22.(12分)干扰素具有抑制细胞增殖、调节免疫以及抗病毒等作用，但是干扰素在体外保存 困难，若将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，则可在一70℃条件下保存半年。科学 家通过重叠延伸PCR技术实现了干扰素基因的定点突变，部分操作如图所示。请回答 下列问题： 引物B 引物D 目的基因片段 引物A 引物C PCRI PCR2 PCRI、 2产物 混合、杂交 八3 3' 5'杂交物1 5'Λ -5 3'杂交物2 PCR3 PCR4 改造后的目的基因 注：图中“A”为碱基序列变化点 (1)PCR过程中添加引物的作用是 。 PCR扩增过程中，温度下 降到50℃左右的目的是 (2)4次PCR对引物的使用不完全相同，PCR1选择引物A和B,PCR2选择引物C和D, PCR3 (填“需要”或“不需要”)引物，PCR4选择引物 (3)PCR3过程中，选择杂交物 (填“1”或“2”)作模板，理由是 第7页（共8页） (4)与X射线诱变相比，写出该突变技术的一条优点 (5)将改造后的干扰素基因与乳腺中特异表达基因的启动子等调控元件重组在一起，导 入牛的 中，获得转基因小牛，在其进入泌乳期即可获得改造后的干扰素。 23.(12分)水蛭素是水蛭唾液腺分泌的一种蛋白质，具有良好的抗凝血作用。已知天然的 水蛭素抗凝血活性较低，产量和来源有限。研究发现，若将其第47位天冬酰胺替换成赖 氨酸，可以提高其抗凝血活性。某科研团队拟通过不同的生物技术获得活性高、产量大 的重组水蛭素。回答下列问题： (1)图1所示运用 工程得到凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是 ,图中的物质a是 设计 基因 改造或合成 推测 蛋白质 预期功能 DNA b 三维结构 折叠 生物功能 行使 图1 (2)基因工程中常利用PCR获取和扩增目的基因。PCR扩增时，反应体系中需要加入 模板、4种脱氧核苷酸、 及缓冲液等。 (3)利用基因工程生产水蛭素时，依据图2信息构建基因表达载体，为使水蛭素基因与质 粒高效连接，应选用的限制酶是 。 若采用大肠杆菌作为受体细胞，需要在培养 基中加入 以筛选转化成功的工程菌，并选择颜色为 的大肠杆菌菌落 进一步培养。 5CCGG水蛭素基因 限制酶识别序列和切割位点 CTAG 5' BglII5'-AGATCT-3 启动子 Sma I Xma I 加 Bgl lI mlacZ ②NheI Nhe I 5'-GCTAGC-3' PCLY11 Sma I 5'-CCCGGG-3' neo Xma I 5'-CCCGGG-3' 复制原点 图2 注：neor为新霉素抗性基因；nalcZ的表达产物会使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色。 (4)工业生产中，还可利用制备乳腺生物反应器来生产高抗凝血活性的水蛭素，某研究小 组大胆推测，用类似方法制备膀胱生物反应器比乳腺生物反应器更有优势，因为它可以 不受转基因动物的 (答1点)的限制。 第8页（共8页）