广东深圳市龙翔学校等校2025-2026学年度第二学期高二年级第二阶段质量监测生物学试题

2025-2026学年度第二学期高二年级第二阶段质量监测 生物学试题 (出题人：张文俊、张港旅) 本试卷共8页，15小题，满分100分。考试用时75分钟。 注意事项： 1.答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的姓名、考生号、试室号和座 位号填写在答题卡上。用2B铅笔将试卷类型(B)填涂在答题卡相应位置上，并在答题卡 相应位置上填涂考生号。 2、作答选择题时，选出每小题答素后，用2B铅笔把答题卡对应题目选项的答案信息 点涂黑：如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答素不能答在试卷上。 3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答策必须写在答题卡各题目指定区 域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改 液。不按以上要求作答的答案无效。 4.考生必须保持答题卡的整洁。考试结束后，将答题卡交回。 一、单项选择题：本大题共16小题，共40分。第1-12小题，每小题2分；第13-16小 题，每小题4分。在每小题列出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1.宋代苏轼在《菜羹赋》中描述了泡菜的腌制：“菘芥诸菜，渍以寒泉，盐醯相和，味兼 脆酸。”泡菜的制作利用了中国传统发酵技术。下列叙述错误的是() A.泡菜坛子用水封的目的是提供无氧环境，利于乳酸菌发酵 B.若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是大量的食盐抑制了乳酸菌的发酵过程 C.发酵初期会有气泡产生，这是乳酸菌无氧呼吸产生C02的结果 D.在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素 2.下列关于两种分离与纯化微生物的实验操作，错误的是（) A.稀释涂布平板法易形成单菌落并可对微生物进行计数 B.用蘸有菌液的接种环划一条线后，再次蘸取菌液继续划线 C.二者接种菌液时分别需要用到的工具是接种环和涂布器 D.用两种方法分别将同种霉菌接种于同一培养基上，.得到的菌落特征基本一致 3.细胞学说的提出为生物学的发展奠定了基础。下列叙述正确的是() A.细胞学说认为细胞可分为真核细胞和原核细胞 B.病毒无细胞结构，既不属于生命系统，也不属于生物 C.细胞学说揭示了动物和植物的统一性和生物界的多样性 D.“所有动植物都由细胞构成”结论的得出运用了完全归纳法 4.人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并 进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（) A.细胞融合前应去除细胞壁 B.高Ca+一高pH溶液可促进细胞融合 C.融合的细胞即为杂交细胞 D,杂交细胞可能具有生长快速的优势 第1页共7页 5.深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下.该细荫在以纤维素或淀粉 为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适直，实验处理及结果如表所示。下列 说法正确的是( 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 + ② 常压 ③ 高压 + ④ 高压 注： “+”表示有： “一”表示无 A.可用平板划线法对该菌计数 B.制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C.由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D.由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 6.阝-淀粉样蛋白(AB)的异常聚集是阿尔茨海默症的致病因素之一。研究者拟利用小鼠作 为实验动物，通过细胞融合技术制备抗AB的单克隆抗体以用于该病的研究。下列叙述错误 的是.() A.产生抗Aβ抗体的B细胞来自于用Aβ抗原免疫的小鼠 B.杂交瘤细胞来自于小鼠B细胞与骨髓瘤细胞的融合 C.杂交瘤细胞产生的抗体即为抗Aβ的单克隆抗体 D.抗AB的单克隆抗体可辅助该病的特异性诊断 7.科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于 对照组的优良品系。下列叙述错误的是() A.为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B.为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C.受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D.对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 8.利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（) 牛甲耳部的体细胞 培养 转基因体细胞 转基因 核移植 牛乙部越的不一含一→斜灯 A.对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B.卵母细胞去核应在其减数分裂[中期进行 C.培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D.可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 第2页共7页 9.我国科学家用4种小分了化合物诱导小鼠已分化的成纤维细胞转变成PS细胞。PS细 胞与胚胎干细胞类似，可用于获得多种细胞。下列说法错误的是() A.相比于成纤维细胞，PS细胞的分化程度更低 B.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，后者具有组织特异性 C.成纤维细胞能形成PS细胞，证明其具有全能性 D.PS细胞可用于治疗镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等 10.抗体药物偶联物(ADC)通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克 隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述错误的是 () ADC被细胞吞噬 抗体 ⑤ 药物 A 细胞凋亡 裂解 A.ADC的抗体具有靶向运输作用，可以将药物输送到靶细胞 B.制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测 C.用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可以确定肿瘤的复发与转移 D.与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 11.PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列相关叙述错误的是() A.在PCR过程中可通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合 B.在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小、构象等有关 C.PCR反应的缓冲液中需添加Mg2+、~引物、模板、耐高温的DNA聚合酶等 D.PCR技术与人体细胞内DNA复制的特点相似，都是边解旋边复制 12.人类辅助生殖技术是指采用医疗辅助手段使不孕不育夫妇生育后代的技术，包括人工授 精、体外受精、胚胎移植等技术。下列叙述错误的是() A。胚胎移植实质为早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 B.受体一般不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应 C.可以将采集到的精子和卵子直接用于体外受精 D.我国严格禁止非医学需要的胎儿性别鉴定与选择 13.兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术 获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是() 愈伤组织 芽 脱毒苗 取材 ① ② 转接 兰州百合 分生区 1号培养基 2号培养基 3号培养基 A.①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B.②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C.3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D.百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 第3页共7页 14.“黄金大米”是一种转基因水稻，通过转入外源基因（如ctI)使大米胚乳富含-胡萝卜 素，该物质可在人体内转化为维生素A。下列叙述正确的是（) HndΠBamHI SalI 农杆菌 愈伤组织 Sall CtI基因 转录方向 Sall 凰组 质粒 抗四环素基因 Bam旺I 质粒 大米细胞 “黄金大米” 素基因 终止子 `hdΠ 植株 A.用PCR扩增ctI基因时需在反应体系中添加耐高温的DNA聚合酶和解旋酶 B.构建重组质粒时应选择HindⅢ和SalI同时切割质粒和含crtI的DNA片段 C.大米细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，可合成B胡萝卜素 D.用抗原-抗体杂交技术检测相关蛋白质可确定ctI基因在大米细胞中的表达 15.通过动物细胞工程技术，可以利用患者自身的细胞在体外诱导发育成特定的组织器官， 然后再移植回患者体内。图1和图2表示利用自身细胞进行器官移植的两种方法，其中诱 导多能干细胞(PS细胞)类似于人类的胚胎干细胞。下列叙述正确的是() Oct3/4基因、Sox基因、cMyc基因、KIf基因 去 导入 卵母细胞 诱导特定的组 患者→成纤维细胞一→诱导特定的、 注入 ◆重构胚 分化织器官 细胞分化组织器官 期者 移植 体细胞 移植 图1 图2 A.两种方法均需进行动物细胞培养，动物细胞培养时会出现细胞贴壁生长现象，原代培 养结束后直接更换培养液即可完成传代培养 B.利用两种方法所获得的组织器官的遗传物质均与患者的完全相同，因此移植后不会发 生免疫排斥反应 C.可利用农杆菌转化法或显微注射法将Oct3/4基因、Sox基因、c-Myc基因和KIf基因 导入成纤维细胞 D.图2中卵母细胞去核实际去除的是纺锤体染色体复合物，核移植时供体细胞不用去 核，可整个注入去核的卵母细胞中 16.质粒K中含有B-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解 X-gl,产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用 基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是() 启动子 BamHI 蓝色菌落 质粒K 导入 跳 表达活性半乳糖苷酶 ®半乳糖苷酶基因 卡那番素抗性基因 大肠杆菌 筛选平板 (含Xg和卡那莓素) A.使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数 B.如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株 C.质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为成功表达目标蛋白的菌株 D.若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌 第4页共7页 二、非选择题：本题共5小题，共60分。 17.(14分)地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中某些 微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤 维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。 当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物：而当纤维 素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。 请回答下列问题： (1)分离纤维素分解菌时，应从 的土壤中取样，原因是 (2)筛选纤维素分解菌的培养基中，需以 作为唯一碳源，该培养基从功能上 属于 培养基：培养基中加入刚果红后，可通过观察 来 鉴别纤维素分解菌。 (3)有同学提出“把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解 菌”，请评价这一做法的可行性并说明理由： (4④)筛选得到的4株纤维素分解菌在刚果红培养基上的菌落直径()和透明圈直径(D)如 下表： 菌株编号 ① ② ③ ④ d/cm 1.2 1.5 1.0 1.8 D/cm 3.6 3.0 2.5 3.6 其中降解纤维素能力最强的菌株是 判断依据是 若要进一步纯化该菌株，可采用的接种方法有 (答出1种即可)。 18.(10分)单克隆抗体技术是现代生物工程的重要技术，在疾病诊断、靶向治疗中应用极 为广泛，其中早早孕检测试剂盒、ADC抗肿瘤药物是典型应用成果。回答下列问题： (1)制备单克隆抗体的过程中，诱导动物细胞融合不同于植物原生质体融合的方法 是 (②)早早孕检测试剂盒利用单克隆抗体 、 灵敏度高的优点，快速精准检测人绒毛 膜促性腺激素，其检测原理为 (3)ADC抗体药物偶联物，将单克隆抗体与细胞毒性药物结合，治疗肿瘤时，抗体的作用 是 与传统化疗相比，该技术治疗肿瘤的优势是 第5页共7页 19.(12分)除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内 多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使作 物受损。解决这个问题的方法之一就是培育抗草甘膦的作物。 (I)下面是探究“转入外源EPSP合酶基因能否使矮牵牛抗草甘膦”的流程，请补充完整： ①用」 等处理含有目的基因的DNA片 段和载体，构建基因表达载体： ②将基因表达载体导入矮牵牛受体细胞： ③ ④用适量且适宜浓度的草甘膦分别喷洒转基因矮牵牛组和 组，观察 两组矮牵牛的生长状况。 (2)若 则说明转入外源EPSP 合酶基因能使矮牵牛抗草甘膦。 (3)除了导入外源EPSP合酶基因外，还可以通过 (填育种方法)获得抗草 甘膦作物，其原理是 20.(12分)体细胞克隆猴的一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差，胚胎发育障碍与克 隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。在体细胞克隆猴的培育过程中，为了调节相 关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，科学家将组蛋白去甲基化酶K①M4D的mRNA 注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂T$A处理，具体流程如图所示。 回答下列问题： 用灭活的仙合 胎猴 取出 体细胞 病毒短暂处理 母猴 采集 卵母细胞 去核 去核卵 母细胞 Kdm4d的 mRNA 注入 克隆 生出 代孕 胚胎移植 小猴 母猴 重构胚 处理 TSA (1)图中选择胎猴而非成年期猴的体细胞的原因是 在体细胞培养的过程中需要创造的气体环境是 (2)卵母细胞通过 去核，去核的原因是 (3)用灭活的仙台病毒进行短暂处理的目的是 。 在进行 胚胎移植前，可通过胚胎分割增加克隆数量，应选择 期的胚胎 进行分割。 第6页共7页 21.(12分)鹅源星状病毒属于RNA病毒，鹅群感染后死亡率高，对鹅类养殖构成巨大威胁。 其全基因组结构模式图如图甲所示，OF2区域编码的纤突蛋白是该病毒的主要抗原性蛋白。 研究人员以疑似感染该病毒死亡鹅的组织为样本，通过研磨提取上清液，进而制备单克隆抗 体。回答下列问题： 11 13265 4807 6939 ORF1a ORF1b ORF2 图甲 (I)鹅死亡的原因还可能包括感染鹅细小病毒（一种DNA病毒）或感染致病细菌。为确定感 染源，研究人员以样本总DNA为模板，在PCR反应体系中通过加入 进行特 定片段的扩增并进行相应检测；同时，将样本上清液接种于固体培养基上，在适宜的条件下 培养一段时间后，观察并鉴定培养基上是否出现 (②)成功分离出鹅源星状病毒后，研究人员提取了该病毒的RNA,并通过 获 得该病毒的cDNA作为纤突蛋白基因序列的扩增模板。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行 鉴定，图乙电泳结果中最有可能代表纤突蛋白基因序列的是 (填字母)。 M A B 50006p 3000bp 2000bg 10006 750hp 500tp 注：M条示标准DNA片段，AC为特测样品， bp指枝昔酸对。 图乙 (3)从凝胶中分离得到纤突蛋白基因序列并扩增， 导入特定受体 细胞， 进行细胞培养后可从中获得纤突蛋白。 第7页共7页 高二年级第二阶段质量监测生物学科参考答案及评分标准 一、单项选择题：本大题共 16 小题，共 40 分。第 1-12 小题，每小题2分;第 13-16 小题，每小题4分。在每小题列出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 答案 C 解析 A、泡菜制作依靠乳酸菌无氧发酵，泡菜坛子用水封可隔绝空气，提供无氧环境，利于乳酸菌发酵，A 正确；B、食盐浓度过高会抑制乳酸菌的生长繁殖与代谢，导致泡菜咸而不酸，B 正确；C、乳酸菌无氧呼吸产物只有乳酸，不产生 CO₂，发酵初期气泡是发酵初期杂菌呼吸产生，C 错误；D、乳酸杆菌自身不能合成部分维生素，配制其培养基时需要加入维生素，D 正确。 2. 答案 B 解析 A、稀释涂布平板法能将菌液稀释后涂布形成单菌落，且可用于微生物活菌计数，A 正确；B、平板划线法每次划线不能再次蘸取菌液，只需从上一次划线末端开始划线，B 错误；C、平板划线法使用接种环，稀释涂布平板法使用涂布器，二者接种工具不同，C 正确；D、同种微生物在相同适宜培养基上，菌落的形态、大小、颜色等特征基本一致，D 正确。 3. 答案 D 解析 A、细胞学说提出时还没有发现原核细胞，真核细胞和原核细胞的分类不属于细胞学说的内容；B、病毒无细胞结构，不属于生命系统结构层次，但仍属于生物，B 错误；C、细胞学说只揭示了动植物的统一性，未揭示生物界多样性，C 错误；D、“所有动植物都由细胞构成” 是由部分动植物实例归纳得出，运用了不完全归纳法，D 正确。 4. 答案 C 解析 A、植物体细胞融合前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，A 正确；B、植物原生质体融合可采用高 Ca²⁺— 高 pH 溶液诱导融合，B 正确；C、细胞融合会产生同种细胞融合和异种细胞融合，只有人参和胡萝卜原生质体融合的才是杂交细胞，并非所有融合细胞都是杂交细胞，C 错误；D、杂交细胞可兼具两种植物细胞的优良特性，可能具有生长快速、人参皂苷产率高的优势，D 正确。 5. 答案 D 解析 A、平板划线法只能分离纯化微生物，不能用于菌落计数，稀释涂布平板法才可计数，A 错误；B、培养基制备需先高压蒸汽灭菌，再在无菌条件下倒平板，先倒平板再灭菌会造成杂菌污染，B 错误；C、②组常压、纤维素为唯一碳源无菌落，说明该菌常压下不能利用纤维素生长，C 错误；D、③组高压、淀粉为唯一碳源无菌落，④组高压、纤维素为唯一碳源有菌落，说明高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长，D 正确。 6. 答案 C 解析 A、需用 Aβ 抗原对小鼠进行免疫，使小鼠产生能分泌抗 Aβ 抗体的 B 淋巴细胞，A 正确；B、单克隆抗体制备中，杂交瘤细胞由免疫的小鼠 B 细胞与骨髓瘤细胞融合形成，B 正确；C、细胞融合后会形成多种融合细胞，需经筛选、克隆化培养和抗体检测，才能获得专一产生抗 Aβ 抗体的杂交瘤细胞，并非所有杂交瘤细胞都能产生所需抗体，C 错误；D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可用于阿尔茨海默症的特异性辅助诊断，D 正确。 7. 答案 C 解析 A、对供体绵羊注射促性腺激素，可促进超数排卵，从而获取足够数量的卵母细胞，A 正确；B、同期发情处理能使受体和供体绵羊生理状态保持一致，为胚胎着床创造相同生理环境，B 正确；C、受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量增多，但胚胎总体积基本不变，单个细胞体积减小，C 错误；D、实验中对照组需保持年龄、性别、生理状况等无关变量一致，排除无关变量干扰，D 正确。 8. 答案 B 解析 A、对牛乙注射促性腺激素可实现超数排卵，便于收集更多卵母细胞用于核移植，A 正确；B、体细胞核移植时，卵母细胞需培养至 ** 减数第二次分裂中期（MⅡ 中期）** 再去核，不是减数分裂 Ⅰ 中期，B 错误；C、动物体细胞培养时定期更换培养液，可清除代谢废物、补充营养物质，防止细胞代谢产物积累毒害细胞，C 正确；D、PCR 技术可特异性扩增目的基因，能快速鉴定犊牛丁是否导入目的基因、为转基因牛，D 正确。 9. 答案 C 解析 A、iPS 细胞类似胚胎干细胞，分裂能力强、分化程度远低于已分化的成纤维细胞，A 正确；B、干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，成体干细胞只能分化为特定组织细胞，具有组织特异性，B 正确；C、细胞全能性是指已分化的细胞发育成完整个体的潜能，成纤维细胞仅重编程为 iPS 细胞，未发育成个体，不能证明具有全能性，C 错误；D、iPS 细胞具有多向分化潜能，可分化为多种组织细胞，能用于治疗镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等，D 正确。 10. 答案 D 解析 A、ADC 中的单克隆抗体能特异性识别肿瘤抗原，具有靶向运输作用，可将药物精准输送到靶细胞，A 正确；B、制备单克隆抗体时，初次筛选得到的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生所需抗体的细胞，B 正确；C、利用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可定位肿瘤细胞位置，判断肿瘤的复发与转移情况，C 正确；D、ADC 可靶向杀伤肿瘤细胞，对正常细胞损伤小，相比普通细胞毒素化疗，副作用更小，D 错误。 11. 答案 D 解析 A、PCR 通过高温变性、低温复性、中温延伸，依靠温度变化控制 DNA 双链解聚与碱基互补结合，A 正确；B、琼脂糖凝胶电泳中，DNA 分子迁移速率与分子大小、空间构象、凝胶浓度等均有关，B 正确；C、PCR 反应缓冲液体系需添加 Mg²⁺、特异性引物、模板 DNA、耐高温 Taq DNA 聚合酶等，C 正确；D、PCR 是DNA 双链完全解旋后再进行复制，人体细胞内 DNA 复制为边解旋边复制，二者复制方式不同，D 错误。 12. 答案 C 解析 A、胚胎移植是将早期胚胎移入受体子宫，实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移，A 正确；B、受体母体对移入子宫的同种外来胚胎，一般不会发生免疫排斥反应，B 正确；C、采集的精子需进行获能处理，卵母细胞需培养至 MⅡ 中期，不能直接用于体外受精，C 错误；D、我国法律法规严格禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和性别选择，D 正确。 13. 答案 D 解析 A、①为脱分化形成愈伤组织，愈伤组织是排列疏松、无规则的薄壁细胞团，不是排列规则，A 错误；B、②为再分化过程，愈伤组织细胞分化只进行有丝分裂，不会发生基因重组，可能发生基因突变，B 错误；C、生长素与细胞分裂素比值高利于生根，诱导生根培养基中生长素 / 细胞分裂素比值大于 1，C 错误；D、植物分生区细胞分裂快，病毒极少甚至无病毒，可作为组织培养获得脱毒苗的外植体，D 正确。 14. 答案 D 解析 A、PCR 扩增目的基因时，Taq 酶（热稳定 DNA 聚合酶） 负责催化子链合成，但 PCR 过程中 DNA 双链的解开依赖高温变性（90℃以上），A错误；B、构建重组质粒时，需保证目的基因（crtI 基因）完整且质粒与目的基因的黏性末端能互补配对；结合图示，crtI 基因内部无 HindⅢ 切点，但 SalⅠ 和 HindⅢ 切割会导致目的基因与质粒连接时方向错误，所以不能选择Hind Ⅲ和Sal Ⅰ同时切割质粒和含crt Ⅰ的DNA片段，B错误；C、植物细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞失去分化状态，成为高度液泡化的薄壁细胞，此时细胞不具备合成 β- 胡萝卜素的分化功能，C错误。目的基因（crtI 基因）表达的产物是β- 胡萝卜素合成相关蛋白质，抗原 - 抗体杂交技术的核心是利用抗体特异性识别其对应的抗原（蛋白质）。若检测到杂交带，说明目的基因已成功表达出蛋白质，D正确。 15. 答案 D 解析 A．动物细胞培养时会出现细胞贴壁生长现象，原代培养结束后用胰蛋白酶处理后，A 错误；B、图 2 核移植重构胚胎遗传物质有少量来自卵母细胞细胞质，并非与患者完全相同，B 错误；C、农杆菌转化法多用于植物细胞，动物成纤维细胞导入基因常用显微注射法，不用农杆菌转化法，C 错误；D、卵母细胞去核实际去除纺锤体 — 染色体复合物，体细胞核移植可将整个供体细胞直接注入去核卵母细胞中，D 正确。 16. 答案 C 解析 A、氯化钙处理大肠杆菌可增大细胞膜通透性，提高转化效率，能增加平板上白色和蓝色菌落总数，A 正确；B、若平板仅含卡那霉素抗性筛选，未考虑蓝白斑筛选，长出的白色菌落无法直接判定含目的基因，B 正确；C、质粒含标记基因，但白色菌落只能说明目的基因插入破坏显色基因、质粒导入成功，不一定能正常表达目标蛋白，不能直接判定为表达目标蛋白的菌株，C 错误；D、蓝色菌落偏多，大概率是质粒经限制酶酶切后发生自身环化，未插入目的基因就导入大肠杆菌，形成蓝色菌落，D 正确。 二、非选择题：本题共5小题，共60分。 17.答案（14分） (1) 富含纤维素（或腐殖质丰富、枯枝落叶多）（2分） 纤维素分解菌主要分布在富含纤维素的环境中（如枯枝落叶、腐烂植物等），在该环境中更容易分离到目标菌。（2分）。 (2) 纤维素（1分） 选择（1分） 以菌落为中心的透明圈（1分）。 (3) 可行（1分） 滤纸的主要成分是纤维素，埋在土壤中可作为纤维素分解菌的碳源，从而富集纤维素分解菌，提高筛选效率（2分）。 (4) ①（1分） 圈直径与菌落直径的比值（D/d）最大，比值越大说明分解能力越强。（2分） 平板划线法（稀释涂布平板法）（1分）。 解析： （1）纤维素分解菌能分解纤维素，在纤维素丰富的土壤中数量更多，因此取样时应选择纤维素含量高的土壤，以提高分离成功率。 （2）以纤维素为唯一碳源，只有能分解纤维素的微生物才能生长，从而筛选出纤维素分解菌。刚果红与纤维素形成红色复合物，若纤维素被分解则出现透明圈，透明圈越大说明分解能力越强。 （3）该做法利用了纤维素分解菌的趋化性和纤维素作为诱导底物的原理，是一种富集培养的方法，可提高分离效率。 （4）D/d反映了单位菌体产生纤维素酶的能力，比值越大，降解纤维素能力越强。纯化时常用平板划线或涂布平板法获得单菌落。 18.答案（10分） (1) 用灭活的病毒诱导融合（2分） (2) 特异性强（2分） 抗原-抗体特异性结合（2分） (3) 特异性识别肿瘤细胞，靶向运送毒性药物（2分） 精准杀伤肿瘤细胞，对正常细胞伤害小，副作用更小。（2分） 【解析】 （1）动物细胞融合常用的方法有聚乙二醇（PEG）、电融合和灭活病毒诱导，其中灭活病毒诱导是动物细胞特有的方法。植物原生质体融合因有细胞壁（虽已去除，但表面性质不同）通常不使用病毒诱导，而是采用PEG、高pH-高钙离子或电融合法。因此，两者主要区别在于动物细胞可用灭活病毒。 （2）单克隆抗体由单一杂交瘤细胞产生，只识别一种抗原表位，因此特异性强，同时由于抗体纯度高、亲和力强，灵敏度也高（题目已给出“灵敏度高”，故填另一优点“特异性强”）。早早孕检测利用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）的单克隆抗体，与尿液或血液中的HCG抗原发生特异性结合，通过胶体金显色、酶催化显色等方式呈现阳性结果，这是典型的抗原-抗体反应。 （3）抗体药物偶联物（ADC）中，抗体作为“导航分子”，能识别肿瘤细胞表面特异性抗原（如HER2、CD20等），将偶联的细胞毒性药物精准带到肿瘤部位，减少药物在正常组织的分布。传统化疗药物无选择性，在杀伤肿瘤的同时也损伤快速分裂的正常细胞（如骨髓、消化道黏膜），导致严重副作用。ADC通过抗体靶向，提高肿瘤局部药物浓度，降低全身毒性，因此治疗窗口更宽，疗效和安全性更高。 19.答案（12分） （1） ①限制酶和DNA连接酶（2分） ③筛选获得转基因矮牵牛植株（2分） ④非转基因矮牵牛（或野生型矮牵牛） （2分） （2）转基因矮牵牛组正常生长，非转基因矮牵牛组死亡（或生长受严重抑制）（2分） （3）诱变育种（2分） 基因突变 （2分） 【解析】 （1）构建基因表达载体需用限制酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接。将基因导入受体细胞后，需通过植物组织培养技术将细胞培育成完整植株，才能进行后续的草甘膦抗性检测。实验需设置对照组，即未转基因的矮牵牛，以排除环境因素影响，证明抗性确实由外源基因引起。 （2）草甘膦通过抑制EPSP合酶导致植物死亡。若外源EPSP合酶基因在矮牵牛中成功表达，则能替代被抑制的内源酶活性，使植物在草甘膦存在下仍能合成芳香族氨基酸等代谢物，从而正常生长。对照组无抗性，应全部死亡。该结果证明外源基因赋予了抗性。 （3）除了转基因技术，还可通过物理（如γ射线、紫外线）或化学（如EMS）诱变剂处理种子或组织，使EPSP合酶基因发生定点突变，从而获得对草甘膦不敏感（即抗性）的突变体。这种方法的本质是利用基因突变产生新的等位基因，再通过筛选获得抗性植株。另外，也可采用杂交育种（若存在抗性种质资源），但题目强调“除了导入外源基因”，最常见的替代方法是诱变育种。 20.（12分） （1）幼龄动物的细胞增殖能力强，易于培养（2分） 95%的空气和5%的二氧化碳（2分） （2）显微操作（法）（2分） 使核移植胚胎的核遗传物质全部来自提供体细胞的动物（2分） （3）诱导细胞融合（2分） 桑葚胚或囊胚（2分） 【解析】 （1）图中选择胎猴而非成年期的体细胞进行培养，其原因是幼龄动物体细胞增殖能力更强，分化程度低，更易于培养。动物细胞培养过程中所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，通常将细胞置于95%的空气和5%的二氧化碳的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 （2）为了使核移植胚胎的核遗传物质全部来自提供体细胞的动物，得到的克隆动物更像供体，需要采用显微操作法去掉卵母细胞的核。 （3）将供体细胞注入去核卵母细胞后，通过灭活的仙台病毒可以用于诱导细胞融合。宜选用发育良好的桑葚胚或囊胚期的胚胎进行分割。 21.（12分） （1）鹅细小病毒DNA引物（2分） 致病细菌菌落（2分） （2）逆转录（2分） B（2分） （3）构建基因表达载体（2分） 检测鉴定转基因成功（2分） 【解析】 （1）实验目的是获得鹅细小病毒的DNA，因此PCR扩增时需要加入鹅细小病毒DNA引物，以保证能扩增出鹅细小病毒的DNA。将样本上清液接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间后，观察并鉴定培养基上是否出现致病细菌菌落，以确定是否感染致病细菌。 （2）以该病毒的RNA为模板，在逆转录酶的作用下通过逆转录可获得该病毒的cDNA。根据图甲可知，ORF2区域编码的纤突蛋白是该病毒的主要抗原性蛋白，ORF2区域含有的碱基对数为6939-4807=2132，因此图乙电泳结果中最有可能代表纤突蛋白基因序列的是B。 （3）基因工程的操作步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此从凝胶中分离得到纤突蛋白基因序列并扩增，构建基因表达载体，导入特定受体细胞，检测鉴定转基因成功。 学科网（北京）股份有限公司 $