辽宁省大连华南中学2025-2026学年高二生物下学期期中测试

**基本信息** 以《齐民要术》“作酢法”、CAR-T细胞疗法等真实情境为载体，覆盖微生物发酵、细胞工程、基因工程等核心内容，融合生命观念与科学思维，注重探究实践与态度责任。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|20题/45分|微生物培养、细胞融合、基因工程工具酶|原创题结合传统文化（如第1题），多选考查实验分析（如16题抗生素作用）| |非选择题|5题/55分|发酵工程流程、植物体细胞杂交、CAR-T技术、胚胎工程、转基因玉米|综合题整合多技术（如23题CAR-T涉及基因表达载体构建与细胞培养），突出科技前沿（如25题THP9基因工程）|

2025～2026学年度第二学期高二期中考试 高二生物 时间：75分钟 满分：100分 1、 选择题：本题共15小题，每小题2分，共计30分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。 1. （原创）北魏贾思勰在《齐民要术》中详细记载了“作酢法”（酢，即醋）：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也……数十日，醋成。”结合所学生物学知识，下列分析错误的是（ ） A. 文中提到的“衣”即菌膜，其主要成分是醋酸菌在液面大量繁殖形成的 B. “置日中曝之”说明醋酸发酵过程需要适宜的温度，且醋酸菌属于异养需氧型生物 C. 现代工业生产食醋时，若发酵罐密封不严导致杂菌污染，可通过添加抗生素来杀灭杂菌 D. 从“酒”到“醋”的过程体现了发酵工程的原理，其本质是微生物代谢产物的转化 2.下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（    ） A．筛选硝化细菌的选择培养基中需添加碳源 B．稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数 C．巴氏消毒法能杀死牛奶中所有微生物且不破坏牛奶的营养成分 D．微生物实验中，使用过的培养基丢弃前需消毒处理，以免污染环境 3.某人从温泉中筛选出高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接到同时以葡萄糖和淀粉作为碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液进行显色处理，结果如图2所示。下列说法错误的是（　　） A．图1中过程①为用清水稀释，过程②为涂布接种 B．实验使用的培养皿一般使用干热灭菌法进行灭菌 C．从Ⅱ号培养基挑取单个菌落液体培养后，若借助血细胞计数板采用显微镜直接计数结果可能偏大 D．图2培养皿要放在高温条件下培养，周围不显蓝色的菌落含有所需要的嗜热菌 4.科学家利用如图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了利用乙醇梭菌高效生产乙醇和乙醇梭菌单细胞蛋白。下列叙述正确的是（ 　） A．采用过滤、沉淀等方法可分离得到乙醇梭菌单细胞蛋白 B．培养基和发酵设备不需要经过严格的灭菌，若被杂菌污染则可能会导致产量上升 C．获得的乙醇梭菌菌种直接接种到发酵罐进行发酵 D．乙醇梭菌属于异养型生物，需要外界提供有机物作为碳源 5.辣椒素是存在于辣椒细胞中的一种活性成分，具有抗癌、提高免疫力等功能。研究人员利用植物细胞培养技术实现了天然辣椒素的工厂化生产，其主要流程为：外植体→消毒→愈伤组织→悬浮培养→分离提纯。下列相关说法正确的是（     ） A．该过程体现了植物细胞的全能性 B．外植体应先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒 C．愈伤组织可合成辣椒素，因此辣椒素属于初生代谢产物 D．该工厂化生产利用悬浮培养的条件，提高了单个细胞中辣椒素的含量 6.实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．培养细胞1是原代培养，需要用胰蛋白酶将皮肤组织分散成单个细胞 B．培养基是按细胞所需营养物质种类和量配制的合成培养基，通常需要加入血清 C．传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，无需再用酶处理 D．体外培养的细胞既能贴壁生长又能悬浮生长，都会发生接触抑制现象 7.下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　） A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 8.科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞形成iPS细胞，iPS细胞可进一步分化为神经元细胞、胰岛细胞、肝细胞等组织细胞。下列说法错误的是（     ） A．iPS细胞是诱导多能干细胞，在诱导过程中不需要破坏胚胎 B．诱导过程中需在培养液添加适量的干扰素，以防止杂菌污染 C．iPS细胞分化为神经元细胞的过程并未体现出细胞的全能性 D．对iPS细胞进行定向诱导获得的胰岛细胞可用于治疗某些疾病 9.下列有关重组DNA技术所需的三种基本工具的描述，正确的是（　　） A．限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 C．有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，从而恢复断开的氢键 D．质粒通常采用抗生素合成基因作为标记基因，便于重组DNA分子的筛选 10.蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。下列说法错误的是（    ） A．用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B．科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C．在凝胶中DNA分子的迁移速率不只与DNA分子的大小有关 D．检测蛛丝蛋白基因在受体细胞中是否转录出mRNA，可用PCR等技术 11.某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（    ） A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E. coli DNA连接酶连接 B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接 C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接 D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E. coli DNA连接酶连接 12.（原创）下图是生物工程中某些技术的通用流程图。请据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 若此图表示核移植技术 ，则 A为供体细胞，B为去核的卵母细胞，C为重构胚，该技术体现了动物细胞的全能性 B. 若此图表示单克隆抗体的制备过程 ，则①过程常用灭活的病毒诱导融合，②过程筛选出的 D 细胞既能快速大量增殖又能产生多种抗体 C. 若此图表示植物体细胞杂交 ，则 ① 之前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，② 过程代表脱分化，③过程代表再分化 D. 若此图表示基因工程的操作程序 ，则 ① 代表构建基因表达载体，② 代表将目的基因导入受体细胞，常用Mg2+处理大肠杆菌 13.水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（     ） A．该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质 B．该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变 C．改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素 D．该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致 14.生物技术是一把双刃剑，生物技术的进步就是一首悲喜交加的交响曲，为人类生活带来巨大便利的同时，也可能给人类带来灾害。下列相关叙述正确的是（    ） A．生物武器具有致病能力强、攻击范围广等特点，应禁止生物武器 B．生殖性克隆人有利于人类基因多样性的形成，但不利于人类的进化 C．克隆羊“多莉”的出现说明克隆技术已经完全成熟 D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 15.（原创改编）生物技术与工程实践中常利用特殊的化学试剂或一定的物理刺激进行“激活”操作。下列叙述错误的是（     ） A．将果酒用于果醋发酵时，提高温度是“激活”醋酸菌的重要条件之一 B．制备单克隆抗体时，应先利用抗原“激活”小鼠，使其产生免疫反应 C．克隆高产奶牛时，获得的重构胚需要用Mg2+载体等试剂“激活” D．在受精过程中，精子入卵后会"激活"卵子完成减数第二次分裂 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0 分。 16.研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中（+代表含抗生素，+多少代表抗生素浓度，－代表不含抗生素），对两种抗生素药性分析。在37℃环境下培养24小时后，细菌生长情况如图。下列说法错误的是（     ） A．为排除杂菌的影响，倒平板前需对培养基采用高压蒸汽灭菌 B．为了防止杂菌污染，接种操作应该在酒精灯火焰附近进行 C．长期使用抗生素A不会增加结核杆菌的抗药性基因频率 D．与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B可显著增强对结核杆菌的抑制作用 17.植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体（A烟草的基因型为HH，B烟草的基因型为SS），为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是（     ） A．两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长 B．诱导两种突变体进行植物体细胞杂交得到的杂种细胞的基因型为HS C．可用高Ca2+—高pH诱导原生质体融合，细胞膜融合是细胞融合完成的标志 D．若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点不相同 18.细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞，但也会对健康细胞造成伤害，科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体药物偶联物（ADC），ADC可选择性杀伤肿瘤细胞，其作用机制如下图所示。下列叙述正确的是（     ） A．ADC中的抗体能特异性识别并杀伤肿瘤细胞 B．ADC进入肿瘤细胞的过程需蛋白质参与并消耗能量 C．含ADC的小泡与溶酶体融合后，溶酶体裂解释放药物引起细胞坏死 D．利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 19.人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态和始发态。原始态干细胞具有最高的发育潜能，始发态干细胞的全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎干细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。下列叙述错误的是（    ） A．过程①类似于愈伤组织再分化过程，即将始发态干细胞转化为原始态干细胞 B．原始态干细胞只能分化成特定的细胞或组织 C．图1中的猴子芽体是桑葚胚，将其导入受体母猴时，无须对受体母猴进行任何处理 D．根据图2结果推测，原始态干细胞发育潜能高的原因是细胞中的糖基化程度低 20.疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，从而获得了对氯喹的抗性。研究人员设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物用于扩增目的基因片段，如图1所示。为选出正确和有效的引物，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图2所示。下列叙述错误的是（     ） A．F1、F2、R1和R2等4种备选引物是根据pfcrt基因序列设计的 B．一个PCR循环包括高温变性、低温复性和中温延伸 C．由图2电泳结果可知，能用于特异性扩增pfcrt基因的引物为F1、R1、R2 D．疟原虫对氯喹产生抗性的实质是pfcrt基因的A-T被替换为C-G所致 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵为含酒的饮料。现在人们又利用工业化的生产方式，生产啤酒、味精乃至胰岛素等药物，可以说微生物发酵与人们的生活息息相关。请根据所学知识回答下列问题: （1）用于生产啤酒的酵母菌属于_______（填代谢类型）菌；在啤酒的工业化生产过程中，所用的原料一般为大麦，让大麦发芽的目的主要是_______；酒精的生成发生在_______阶段。（填"主发酵"或"后发酵"） （2）在制作果酒时，有时候酒会变酸，其反应简式为_______。 （3）工业上大规模生产时，发酵工程的中心环节是_______；由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为_______。 （4）某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，首先要配制以__________作为唯一氮源的培养基，并按照下图的步骤进行操作，根据图示结果估算每克土壤中的菌株数为______个，初步分离后得到的菌落用__________指示剂进行鉴别 22.如图所示为科学家利用番茄叶肉细胞和马铃薯叶肉细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程。请据图回答下列问题：    （1） ①②过程使用了__________酶去除细胞壁，以获得植物原生质体；此处使用的溶液浓度比番茄和马铃薯叶肉细胞的细胞液浓度略微较__________（填“高”或“低”），从而保持原生质体不被破坏。 （2）过程③利用__________的物理方法使发生原生质体融合；动物细胞融合的常用方法与植物细胞融合不相同的是可以使用__________法。 （3）过程⑤⑥⑦表示的细胞工程技术是_______。过程_____（填标号）属于脱分化，过程_____（填标号）属于再分化。在培养过程中应注意控制好培养基中__________这两种关键激素的浓度和比例。 （4）植物体细胞杂交技术的意义是___________________。 23.（原创）CAR-T 细胞（嵌合抗原受体 T 细胞）疗法是近年来肿瘤免疫治疗领域的重大突破。其基本原理是在体外将CAR基因转入T细胞，从而为 T 细胞装上“导航系统”（CAR），使其能精准识别并杀伤肿瘤细胞。下图为 CAR-T 细胞疗法的基本流程，请回答下列问题： （1） 在进行③之前为了使CAR基因能在T细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时能够___________和发挥作用，需要构建基因表达载体。基因表达载体必须有启动子、目的基因、终止子、_____________和复制原点等，启动子的本质是一段___________，是____________识别和结合的位点。 （2） 若要检测 CAR 基因是否成功导入并表达，在分子水平上可采用________________技术检测 T 细胞表面是否产生了嵌合抗原受体CAR。 （3）改造后的 T 细胞需在实验室中进行大规模扩增。培养CAR-T细胞的培养基按照物理性质划分属于____________培养基，通常需要加入_______等天然成分。此外还需保证__________的环境，以防止杂菌污染。 （4）从免疫学角度看，回输的 CAR-T 细胞攻击肿瘤细胞使其发生__________（填“细胞坏死”或“细胞凋亡”）。 （5）CAR-T 细胞疗法利用患者自身的 T 细胞进行改造。这种做法的优点是________________。 24.随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛。请据图回答下列问题： （1）应用1中，细胞的获取需对供体2进行__________处理以便获得更多的卵母细胞，然后使用__________技术获得重组细胞，最终获得良种小牛，该技术的原理是__________。 （2）应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫__________，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行__________处理，以提高成功率。 （3）在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行__________处理，使其具备受精的能力，得到的卵母细胞需要发育至__________时期才能受精。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过________技术获得二分胚①和②，对囊胚阶段的胚胎进行操作时要注意将_______均等分割。若想对胚胎做性别鉴定可以取囊胚的_______进行分析。 25.THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。回答下列问题： EcoRⅠ BamHⅠ KpnⅠ MfeⅠ HindⅢ 5'-G↓AATTC-3' 3'-CTTAA↑G-5' 5'-G↓GATCC-3' 3'-CCTAG↑G-5' 5'-G↓GTACC-3' 3'-CCATG↑G-5' 5'-C↓AATTG-3' 3'-GTTAA↑C-5' 5'-A↓AGCTT-3' 3'-TTCGA↑A-5' （1）PCR过程中需要添加缓冲液，缓冲液中的________可激活DNA聚合酶。若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则复制n代共需要引物________对，PCR依据的原理是__________。 （2）已知图中THP9基因转录方向为从左往右，则THP9基因转录时的模板链是________链。 （3）构建基因表达载体时，若科研人员需将THP9基因整合到如图质粒上，应使用限制酶________切割图中质粒，使用限制酶________切割图中含THP9基因的DNA片段，以获得能正确表达THP9基因的重组质粒。 （4）将THP9基因导入农杆菌中，在含氨苄青霉素的培养基上培养获得的菌落不一定含有重组质粒，原因是________。将从新鲜玉米叶片上取下的圆形小片与已成功导入THP9基因的农杆菌共同培养，筛选转化细胞并培育成转基因植株。欲从个体水平检测转基因玉米是否培育成功，实验方法是_______________ 试卷第1页，共3页 高二生物试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 2025～2026学年度第二学期高二期末考试 高二生物 答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C B A A B D B B B A 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 C D C A C CD AD BD ABC C 21.（11分，除注明外，每空1分） （1）（异养）兼性厌氧 产生淀粉酶（糖化淀粉） 主发酵 （2）C2H5OH+O2CH3COOH+H2O＋能量（2分） （3）发酵罐内的发酵 纯培养物 （4）尿素 1.7×109 （2分） 酚红 22．（9分，除注明外，每空1分） （1）纤维素酶和果胶 高 （2）电融合法/离心法 灭活病毒诱导 （3）植物组织培养 ⑤ ⑥ 生长素和细胞分裂素 （4）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 23．（12分，除注明外，每空1分） （1）表达；标记基因；有特殊结构的DNA片段（或“DNA序列”）（2分）；RNA聚合酶 （2）抗原—抗体杂交 （3）液体；血清；无菌、无毒 （4）细胞凋亡 （5）避免免疫排斥反应（或“无需使用免疫抑制剂”“提高治疗的安全性”等，合理即可）（2分） 24．（10分，除注明外，每空1分） （1）超数排卵 核移植 动物细胞核的全能性 （2）胚胎移植 同期发情 （3）（体外）获能 MⅡ （4） 胚胎分割 内细胞团 滋养层（细胞） 25．（13分，除注明外，每空1分） （1）Mg2+ 2n -1 DNA半保留复制 （2）乙（2分） （3） MfeⅠ、HindⅢ（2分） EcoRⅠ、HindⅢ（2分） （4）未重组Ti质粒含（或普通Ti质粒）的受体细胞也能正常生长（2分） 将转基因玉米在田间种植后收获玉米籽粒，检测其蛋白质含量 学科网（北京）股份有限公司 $Sheet1 双向细目表 题号 题型 分值 知识点 难度系数 1 选择题 2 传统发酵技术（腐乳、果醋、泡菜） 0.8 2 选择题 2 微生物实验操作（筛选、灭菌、计数） 0.7 3 选择题 2 嗜热菌筛选、淀粉酶、培养基、接种方法 0.65 4 选择题 2 厌氧发酵、单细胞蛋白、乙醇梭菌 0.75 5 选择题 2 植物细胞培养、辣椒素、愈伤组织 0.7 6 选择题 2 动物细胞培养（原代、传代、接触抑制） 0.68 7 选择题 2 体细胞核移植、克隆奶牛 0.72 8 选择题 2 iPS细胞、诱导分化、全能性 0.7 9 选择题 2 基因工程工具酶（限制酶、连接酶、质粒） 0.65 10 选择题 2 PCR引物设计、乳腺生物反应器、基因表达检测 0.6 11 选择题 2 限制酶切割、DNA连接酶、重组载体构建 0.58 12 选择题 2 基因工程应用（乳腺/膀胱生物反应器、工程菌） 0.65 13 选择题 2 蛋白质工程（水蛭素改造、发酵工程） 0.7 14 选择题 2 生物技术伦理与安全（生物武器、克隆） 0.82 15 选择题 2 生物工程中“激活”操作（醋酸菌、克隆、受精） 0.68 16 选择题 3 抗生素选择、抗药性基因频率、灭菌操作 0.62 17 选择题 3 植物体细胞杂交、硝酸还原酶突变体、融合检测 0.55 18 选择题 3 抗体药物偶联物（ADC）、单抗应用 0.65 19 选择题 3 胚胎干细胞状态、糖基化、发育潜能 0.58 20 选择题 3 PCR引物设计、疟原虫抗药性突变 0.55 21 非选择题 11 啤酒发酵、果酒变酸、发酵工程、尿素分解菌分离 0.68 22 非选择题 9 植物体细胞杂交（原生质体、融合、组织培养） 0.65 23 非选择题 12 CAR-T细胞治疗、基因表达载体、细胞培养、免疫 0.6 24 非选择题 10 胚胎工程（核移植、胚胎移植、胚胎分割、性别鉴定） 0.65 25 非选择题 13 基因工程（THP9基因克隆、限制酶选择、植物转化、检测） 0.55 Sheet2 Sheet3 $