辽宁大连市第十二中学2025-2026学年高二下学期期中生物试卷

2025-2026学年度下学期高二期中考试 生物学试卷 答案 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 B C D B D D A C B D D C C D B 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一 项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16 17 18 19 20 ABD AC ACD AD BCD 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21．（11分） (1) ①碳源 ②抑制微生物的生长，防腐保鲜(或答抑制杂菌的繁殖，防止蔬菜腐烂变质)（合理给分） ③阳光照射使得泡菜坛内温度上升（1分），有利于杂菌大量繁殖（1分），导致泡菜变质（共2分） (2) ①缺氧、酒精（2分） C2H5OH+O2 CH3COOH（乙酸）+H2O+能量（反应物加条件箭头1分，生成物、能量1分，共2分） 30-35℃ ②1.75×106 未接种的空白培养基（接种等量无菌水的培养基） 22．（11分） (1)纤维素酶和果胶酶 (2)异源融合体因代谢互补可恢复生长并获得再生能力（或答异源融合体具有完整的有氧呼吸过程，能存活和具有再生能力）（共2分）（合理给分） (3)脱分化 植物细胞的全能性 (4)谷蛋白 3 克隆化培养 (5)同一 胚胎分割 同期发情 23．（11分） (1)B淋巴细胞不能无限增殖（1分） 对培养液和所有培养用具进行灭菌处理、在无菌环境下进行操作；培养液需要定期更换 (2)患者体内的病毒直接诱导多个体细胞融合形成多核细胞 (3)EpCAM和CD3 (4)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 无胸腺的小鼠，细胞免疫和体液免疫均较差（或答无胸腺，T细胞无法分化成熟，无法杀死肿瘤细胞）（合理给分） 24.（11分） (1) ②③ 激活耐高温的DNA聚合酶（或答激活TaqDNA聚合酶） 复性 (2) Bgl Ⅱ（2分） Sal Ⅰ （2分） 提取受体细胞中mRNA作为模板，逆转录得到cDNA（2分） （合理给分） (3)次生 细胞增殖 25．（11分） (1)聚合酶链式反应 (2) b c BamHI SpeI（2分） （前后的引物和相应的酶对应） 860、2320 (3) 大肠杆菌 菌体生长阶段，BLDH酶活性低 可以先让菌体快速生长繁殖，积累足够的菌体量，再加入诱导物启动乳酸合成相关基因的表达，避免菌体生长阶段因乳酸合成消耗过多能量而影响菌体生长，从而大幅提高乳酸的总产量（或答避免菌体在生长阶段物质和能量的浪费）（合理给分，2分） ( 高二生物学试卷 第 1 页 共 2 页 ) 学科网（北京）股份有限公司 $2025-2026学年度下学期高二期中考试 生物学试卷 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名等信息填写在答题卡上。 2.答选择题时，选出每一小题答案后，用2B铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改 动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，用黑色签字笔将答案写在答 题卡上。写在本试卷上无效。 3.本试卷满分100分，答卷时间75分钟。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只 有一项是符合题目要求的。 1.酸笋具有浓郁的乳酸香味和丰富的文化内涵，赋予了柳州螺蛳粉浓郁的特殊臭味。酸 笋制作与泡菜相似，一般步骤为选笋、切块、煮笋、冷却、腌制、发酵等。下列叙述正 确的是() A在制作酸笋时坛口要密封，主要是为了避免外界杂菌的污染 B可用开水烫洗玻璃罐，并用酒精擦拭消毒 C酸笋发酵过程中，发酵液中不会有气泡产生 D.乳酸在乳酸菌的线粒体基质中产生 2.如图是果酒和果醋制作的实验流程及相应的发酵装置。下列相关叙述正确的是（) 充气 挑选葡萄→冲洗→榨汁 排气口 酒精发酵 料 果醋 果酒 A.果酒、果酒制作流程 B A制作葡萄酒时应先去除枝梗后再冲洗干净葡萄 B利用果酒进行果醋发酵时，应打开充气口，通入无菌空气，并适当降低温度 C.制作果酒时，关闭充气口，酒精发酵后期CO2产生速率会减慢 D.果酒、果醋制作过程中培养液的pH均升高 3.下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项() ①发酵工程的中心环节是灭菌，发酵设备必须经过严格的灭菌 ②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 ③利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长 ④发酵工程所用的菌种大多是混合菌种 高二生物学试卷第1页共12页 ⑤生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉 ⑥用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 A.4项 B.5项 C.2项 D.3项 4.下图为DNA分子的片段，其中a、b、c分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次 是() A a C CTTAAG ①限制性内切核酸酶②DNA连接酶③DNA聚合酶④RNA聚合酶⑤解旋酶⑥DNA酶 A.①②④ B.⑤①② C.①②③ D.⑤①③ 5.自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中氮气的细菌，科研人员进行了土壤中自生固氮 菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。下列叙述错误的是() 1mL1mL 0.1mL 扩大培养 固氮能力鉴定 土壤10g 90mL无菌水 土壤悬浮液 多次纯 9mL无菌水 化培养 ① ② ③ ④ ⑤ A.培养自生固氮菌时，一般不需要添加氮源，但需将培养基调至中性或弱碱性 B.培养自生固氮菌时，一般需要添加碳源 C.此实验若培养时间过长，固氮菌菌落周围可能出现不能固定氮气的杂菌 D.涂布平板时要用接种环均匀涂布 6培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 微生物培养时常用到无菌技术避免杂菌污染。下列相关叙述正确的是() A.培养基分装到培养皿时可能被污染，分装后需进行灭菌处理 B.为防止培养基溅到培养皿盖上，倒平板时应把培养皿盖完全打开 C.微生物培养时无机物可以作为碳源，但无机物不可以提供能量 D不同培养基的各种养分的浓度和比例可能存在差异 7.某人从温泉中筛选出高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得 到的菌悬液转接到同时以葡萄糖和淀粉作为碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后 用碘液进行显色处理，结果如图2所示。下列说法错误的是() 挑出菌落 周围显蓝 色的菌落 0 ① ② 周围不显蓝 I号培养基 Ⅱ号培养基 00 色的菌落 嗜热茵样品 分 丙 图1 图2 高二生物学试卷 第2页共12页 A.图1中I、Ⅱ培养基为选择培养基 B.实验使用的培养皿一般使用干热灭菌法进行灭菌 C.从Ⅱ号培养基上挑取单个菌落液体培养后，若借助细菌计数板采用显微镜直接计数，结 果可能偏大 D.图2培养皿要放在高温条件下培养，周围不显蓝色的菌落含有所需要的嗜热菌 8.精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，导致鸟氨酸在细胞内 积累，这种菌可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得 精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，其中，待培养基甲上的菌落不再增加时，经 过程②向培养基中添加物质a,继续培养。下列相关叙述正确的是( ) 紫外线 野生型菌液 甲 A.野生型菌株在甲培养基上无法生长 B紫外线照射可诱发基因突变或染色体变异，从而提高获得目的菌株的概率 C.菌落B是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种 D.过程②向培养基甲中添加的物质a是鸟氨酸 9.在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类 化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失 败。下列说法正确的是() A.宜选用蓝莓幼嫩叶片为材料制备外植体并用酒精消毒30min B增加培养基的更换频率或在培养基中添加适量的抗氧化剂可提高组培的成功率 C脱分化过程中光照有利于愈伤组织的形成，再分化过程中光照可诱导植物形态建成 D.组培后获得的试管苗需移栽到含蔗糖和多种植物激素的基质上以适应外界环境 10.苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能。科研人员将 这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程如图。微生物原生质体 的获得过程和植物体细胞杂交过程类似。下列说法错误的是() 亲本A 灭蚊球孢 (杀蚊) 影印选择板 对数期 离心洗涤后 培养液 加相关酶 亲本B 云金杆情 原生质体 融合体检出融合株，进行 混合后加 2 个体生物学测定 PEG ① 甲实验乙实验 A.图中过程与植物体细胞杂交过程所依据的原理不完全相同 高二生物学试卷第3页共12页 B.①过程还可用电融合、离心等方法促进原生质体融合 C离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶 D.获得的融合株染色体数目是两个亲本染色体数之和 11.甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同 学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是() 黄酮 路径一 ①芽、根②脱毒苗、 提取 高产→外植体→B 果胶酶悬浮振 细胞悬 检测 甘草 路径三 黄酮 荡培养 →浮培养 与继代 A.图中由外植体→B过程仅受细胞内基因选择性表达的控制 B.路径一获得脱毒苗时，常选取茎尖作为外植体，原因是茎尖细胞分裂旺盛且无病毒 C.一般对外植体进行诱变因素处理，从产生突变的个体中筛选有用的突变体 D.与路径一相比，路径二更有利于筛选高产细胞系 12.在畜牧生产中，利用动物细胞核移植技术可加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁 育。如图是利用动物细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列叙述正确的是 () 注射 甲生◆ 88 ①供体细胞培养 融合 激活并培养 移植 ③ →重构胚兽代孕丙牛 去核 乙牛 重组细胞 出生后代丁牛 A过程①供体细胞必须是从甲牛卵巢采集的卵母细胞 B.进行过程②操作时必须穿透受体细胞透明带 C图中过程②去除的是纺锤体—染色体复合物 D.后代丁牛的性别与甲牛相同，也为雌性 13.猪细小病毒(PPV)会导致猪患细小病毒传染病。NS1蛋白参与PPV的复制，猪感 染PPV后会产生抗NS1蛋白抗体。研究发现，金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)和NS1 蛋白均能与抗NS1蛋白抗体特异性结合。为探究它们与抗体的结合位点是否相同，研究 人员通过图1所示流程制备了抗NS1蛋白的单克隆抗体，并将其分为Fb和Fc两部分， 电泳后分别用SPA和NS1蛋白作探针进行杂交，结果如图2。下列说法正确的是() 高二生物学试卷第4页共12页 心免疫小鼠 + 5) ① (2 特定培养 专一抗体检测 基筛选 ③ 图1 Fab Fc NS1蛋白 SPA 图2 A.步骤①要多次注射NS1蛋白，其目的是刺激小鼠产生更多的抗NS1蛋白抗体 B.步骤③获得的杂交瘤细胞中具有来自B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的两个细胞核 C.经过步骤④可获得产生抗NS1蛋白抗体的杂交瘤细胞 D.分析图2可知，SPA和NS1蛋白分别与抗NSI蛋白抗体的Fab、Fc结合 14.图1表示我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和研究胚胎发育潜能的流程。野生 猴胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态和始发态。原始态干细胞具有最高的发育潜 能，始发态干细胞的全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎干细 胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋 白质上去除的酶。下列叙述正确的是() 野生猴 始发态干细胞 原始态 干细胞 猴子芽体 常 过程① 过程② 诱导培养基中的 始发态干细胞 神经干细胞 始发态」 原始态 过程③ 干细胞↓干细胞 过程④ OGA 间充干细胞 OGT 细胞骨架蛋白 图1 图2 A.过程④体现了动物体细胞核的全能性 高二生物学试卷第5页共12页 B.原始态干细胞只能分化成特定的细胞或组织，需要在其培养基中添加促进胚胎发育的 物质 C.图1中的猴子芽体是原肠胚 D根据图2结果推测，原始态干细胞发育潜能高可能与蛋白质的糖基化程度低有关 15.某小组以白色菜花为实验材料进行了“DNA的粗提取与鉴定”实验。下列叙述错误的 是() A将白色菜花研磨液的过滤液低温静置后，DNA主要分布在上清液中 B.用二苯胺对DNA进行鉴定时需在常温下进行，以保持DNA结构的稳定 C,粗提取的DNA中含有的蛋白质杂质可用双缩脲试剂进行鉴定 D.可利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度不同来粗提取DNA 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一 项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16.科研人员通过改良发酵工艺“把玉米变成衣服”，即利用大肠杆菌将玉米转化为戊 二胺，再将戊二胺转化为尼龙布，流程如图所示。其中，戊二胺不能从大肠杆菌体内排 出，且对细胞有毒害作用。同时环境中pH值低于6.5或高于8.0时，大肠杆菌生长会受 到不利影响，下列相关分析正确的是() 籽粒 淀粉 酶解 其他成分 聚合 尼龙布 非粮原料 大肠杆菌体内」 玉米精轩、玉来芯葡萄糖 戊二胺 A.该工业生产中要使用淀粉酶、纤维素酶等酶制剂 B.发酵结束后，可采用提取、分离和纯化措施来获得戊二胺 C,对操作空间要进行严格的灭菌处理 D,发酵过程中，最好将培养液置于pH中性或接近中性的条件下培养 17.人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，然而，为心肌梗死患 者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发顿内出血，其原因在于t-PA与血纤维蛋白结合的特 异性不高。研究证实，通过某技术，将PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，可制造出性 能优异的改良tPA蛋白，进而显著降低出血副作用。下列相关叙述中正确的是() A.该技术的关键工作是了解t-PA蛋白质分子结构 B.该技术是在蛋白质分子水平上直接改造蛋白质 C.该技术生产改良t-PA蛋白的过程遵循中心法则 D该技术属于基因工程 18.科研人员通过基因编辑技术将绿色荧光蛋白(GFP)基因整合到斑马鱼的DNA,最 终筛选获得纯合G品系斑马鱼。为研究GFP基因插入的位置，依据插入位点的上下游序 列设计了引物1、2，依据GFP基因上下游序列设计了引物3、4，各引物的位置如图1 所示。将杂合G品系斑马鱼相互交配，提取子代所有个体的DNA,选取不同的引物组合 进行PCR并电泳，得到电泳结果的类型如图2和图3所示。下列说法不正确的是() 高二生物学试卷第6页共12页 插入前引物1→ 一引物2 23 加样孔 加样孔言 GFP基因 插入后引物1 引物3←一引物2 电泳方向 电泳方向 引物4 图1 图2 图3 A.图2的电泳结果是选择了引物1、2得到的 B.为验证GFP基因插入方向是否正确可以选择引物1、3 C.图3的电泳结果是选择了引物1、3或引物2、4得到的 D.图2中代表纯合野生型个体的是1，图3中代表纯合G品系个体的是3 19.研究人员在培养液中分别添加适量的中药成分M和N,探究药物成分对猪胚胎体外 发育的影响，检测卵裂率和囊胚发育率（囊胚发育率=发育到囊胚的胚胎/所有胚胎 ×100%),结果如图所示。下列叙述错误的是() ☐卵裂率 ■囊胚发育率 80 74.93 70.22 63.28 30 23.87 21.96 20 17.92 求 10 0 对照 M N A.该实验对自变量的控制利用了“减法原理” B.若囊胚期不能正常孵化，则胚胎无法继续发育 C.M和N均可促进受精卵发育为囊胚，且M的作用大于N D.实验结果表明中药的种类及用量均会影响卵裂率和囊胚发育率 20.牛是一种反刍动物，其瘤胃内含有大量共生微生物，包括细菌、真菌和原生动物。 其中，纤维素分解菌是核心功能群体。科研人员为统计牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌 的数量并挑选出能高效分解纤维素的目的菌，进行了如下实验。平板①、②、③上菌落 数的最大值分别为60、63、66个。下列相关叙述正确的是( 1mL 1mL1mL 1mL 透明圈、 1 重复2次 刚果红 菌落甲 9mL 染液 菌落乙 无菌水十 牛瘤胃内的液体101102 105 各接种0.2mL 高二生物学试卷第7页共12页 A.平板①、②、③的数据差异属于偶然误差，可通过增加重复次数来完全消除 B.该牛瘤胃内的液体中纤维素分解菌约有3.15×107个mL C.从菌落甲中更有可能得到高效分解纤维素的目的菌 D.各平板中，纤维素是唯一的碳源，但不是唯一含碳的物质 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(11分)我国古代劳动人民用不同原料酿酒的历史己有五千多年，并总结了制作果 酒、果醋、泡菜等发酵食品的丰富经验和方法。 (1)《周礼天官》中记载“大羹不致五味，铡羹加盐菜”，所谓“盐菜”便是泡菜的雏形。几 千年文明传承中，泡菜已深刻融入了我国饮食文化。某种泡菜的制作流程如下所示。 1 2 3 将洗净晾干后的新鲜蔬 加入煮沸冷却后 放入蒜瓣、生姜及其他 密封泡菜坛，置 菜切块，混合均匀后装 5%~20%盐水， 于适宜温度下 香辛料，继续装至八成满 入泡菜坛内，装至半坛 没过全部材料 发酵 回答下列问题。 ①在泡菜制作过程中如果加入少量白糖，可缩短发酵周期，其原因可能是白糖为乳酸菌 提供了 ,有利于其繁殖和发酵 ②古代因缺乏冷藏技术，人们在制作泡菜的过程中往往会加入大量的食盐，其主要日的 是 ③某同学同一批次制作的多坛泡菜中，有一坛发生了变质。检查发现该坛泡菜位置每天 10:00~16:00会被阳光照射，推测发生质变的原因可能是 (2)下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。结合图示和相关知 识回答下列问题： 挑选蓝莓D>冲洗②>蓝莓汁 >蓝莓醋◇产品鉴定 ⑤ 产品鉴定<一蓝莓酒 ①在第④发酵阶段，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖， 因为绝大多数微生物都无法适应 (答出两点)的环境而受到抑制；第 ⑤发酵阶段生产蓝莓醋的原理是 (用反 应式表达)；此发酵阶段的适宜温度为 C。 ②为测定果园土壤中酵母菌的数量，将土壤溶液分别稀释102、103、104倍，并依次分别 吸取0.1L进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对每组的三个 平板进行菌落计数（如表）。则每L土壤溶液中的酵母菌数量约为 个。为使 实验所得数据更加可靠，在各稀释度下，还应增加的一组对照组是 高二生物学试卷第8页共12页 序号 Ⅱ I 稀释度104倍 5 8 稀释度103倍 178 191 156 稀释度102倍 418 511 389 22.(11分)紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家 畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培 育抗鼓胀病的新型牧草，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了 实践研究。研究主要流程如下图：（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻 止线粒体的功能) 清水紫花苜 蓿原生质体 用那-6G处理，原生质体及同源融合体不能再生愈伤组织 ① ② ③ 杂种细胞团 杂种愈伤组织 胚状体 再生植株 里奥百脉根 原生质体 用IOA处理 →原生质体及同源融合体不能再生愈伤组织 (1)在制备两种植物原生质体时，先将两种细胞分别置于0.5-0.6ol/L的甘露醇溶液中， 从而有利于用 去除细胞壁，分别获得两种植物的原生质体。 (2)①过程获得的只有异源融合体才能存活和具有再生能力，请推测原因是 (3)步骤②为 经过步骤②、③到形成再生植株，体现的主要原理 是 (4)谷蛋白是野生清水紫花首蓿中含量较高的一种蛋白质，科研人员为比较植株不同部位 谷蛋白的含量，想通过制备相应的单克隆抗体进行检测，部分流程如下图： 注射特 多种B淋 定的抗原 巴细胞 28型 培养骨 髓瘤细胞骨髓瘤细胞 图中注射的特定抗原是 经过a步骤，细胞两两融合的产物有 种。 在步骤b的基础上经过步骤c 和抗体检测筛选得到符合要求的杂 交瘤细胞。 (⑤)百脉根花的提取液可用于生产护肤品，为研究百脉根花提取液对受损皮肤的修复效果， 高二生物学试卷第9页共12页 需要一批遗传性状基本一致的实验小鼠，研究人员从 (填“同一”或“不同”) 小鼠个体中取出体细胞核进行体细胞核移植，形成的多个胚胎再通过 技术， 以进一步增加胚胎的数量，最后移植到经过处理 的受体雌鼠中获得实验 小鼠。 23.(11分)单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。卡妥索单抗是一种双特异 性单克隆抗体，主要用于治疗由胃癌、卵巢癌等引起的恶性腹水，它通过靶向结合肿瘤 细胞表面的ECAM抗原和T细胞表面CD3受体，激活T细胞杀伤肿瘤细胞，从而减少 积液生成。如图是卡妥索单抗的制备过程及结构。 细 细胞 注射抗原」B淋巴 EpCAM- CD3 鼠 A(或B) 细胞 杂交瘤 杂交瘤 培养杂交 筛选 细胞A 筛选二 瘤细胞 细胞 和杂交瘤 AB,获卡 骨髓瘤 A(或B) 卡妥索单抗 细胞B融合 妥索单抗 细胞 注：EpCAM是肿瘤细胞表面蛋白质； CD3是T细胞表面的蛋白质 ()一般无法通过只培养B淋巴细胞获取大量抗体，主要原因是 体外培养细胞时为保证无菌、无毒的环境，可采取的措施是 (答出两点)。 (2)科学家曾在患天花病人的病理组织中观察到多核细胞，这些多核细胞的来源可能是 (3)结合图中信息分析，第二次筛选时，向培养基中加入 (物质)筛选 能产生卡妥索单克隆抗体的杂交瘤细胞AB. (4)单克隆抗体具有的优点是 利用卡妥索单抗对无胸腺患肿瘤的小鼠进行治疗，发现效果很差，可能的原因是 24.(11分)千禧果果实富含维生素C、番茄红素等营养成分，具有较高的营养价值，但 喜温暖、不耐寒，提高其冷耐受性可拓展优质千禧果的种植区域。科研人员发现，野生 千禧果中M基因的表达与其冷耐受性调控有关，将该基因导入栽培千禧果中可显著增强 其抗寒能力。请回答下列问题： 限制酶 识别序列及切割位点 BglIⅡ 5'-AGATCT-3 3-TCTAGA-5 高二生物学试卷第10页共12页 Nde I 5'-CATATG-3 3-GTATAC-5 Xba I 5- CTCGAG-3 3-GAGCTC-5 SalI 5'、 GTCGAC-3 3'-CAG CTG-5' BamH I 5'- GGATCC-3 3-CCTAGG-5 BamH SalI Xba I 支3 限制酶 终止子启动子 TNA 启动子 入抗性基因2 中终止子 载体 抗性基因、 复制原点 B端 A端 M基因转录方向 Xba1 NdeI BamH I ® HO 基因 ②， ④D (I)用PCR技术扩增M基因时应选用图中①~④的 (填序号)作为引物，PCR 反应缓冲液中Mg2+的作用是 ,PCR过程循环的第二步为 (2)图中标识了载体和M基因中限制酶的切割位点。为将M基因正确插入载体，PCR扩 增M基因时需在引物的5'端添加限制酶识别序列，结合上表分析，上游引物应添加 酶的识别序列，下游引物5'端应添加 酶的识别序列，转 化后的植株还需进行检测与鉴定，要检测M基因是否成功转录出mRNA,简要写出需要 进行的操作是：先是 ,根据M基因特定序列设计 引物进行PCR扩增，检测是否存在M基因的特定片段。 (3)番茄红素主要在千禧果成熟后期积累，集中分布在果实，具有抗氧化损伤，吸引传粉 高二生物学试卷第11页共12页 的功能。番茄红素属于千禧果的 (“初生”或“次生”)代谢物，若要实 现番茄红素的工厂化生产，需要通过植物细胞培养愈伤组织细胞，植物细胞培养的原理 是 d 25.(11分)乳酸是制备可降解塑料的理想材料。为了实现以废弃油脂为碳源高效合成 乳酸，研究者利用PC扩增了凝结芽孢杆菌的乳酸合成相关酶基因BLDH,构建表达载 体，导入大肠杆菌，获得了乳酸的高产菌株，并优化了发酵工艺。 回答下列问题： 320bp 160bp 复制起点 Xba I EcoR I c ms n 3 BLDH基因 5 抗性基因 b d 终止子 700bp 限制酶识别序列及切割位点如下： BamH I:5'-G+GATCC-3' Spe I:5'-A+CTAGT-3 Xba I- 全长2700bp BamH I七 Xba I:5-TCTAGA-3 EcoR I:5'-GAATTC-3' 启动子 图1 2.4m 。30℃ 母2.0 -034℃ 37 1.6 0 1.2 E0.8 0.4 0306000 ☑ m 0 12 16 20 34 37 42 时间（小时） 温度（℃） 图2 (I)PCR是 的缩写。 (2)已知BLDH基因以链作为模板进行转录，参考限制酶的识别位点（图1），选择 在 处（填“a”、“b”、“c、“d”)设计引物，并且在引物的5'端依次添加 限制酶的识别序列，实现酶切后高效连接，从而获得表达载体。若将获得的表 达载体经Xbal、EcoRI酶切后电泳鉴定，预期出现的条带大小约为 bp(忽略 酶切时丢失的短片段)。 (3)表达载体中的启动子应为 (填“凝结芽孢杆菌”、“大肠杆菌”)的某 种启动子。已知含有该启动子的基因一直表达，但菌体生长阶段乳酸的产量低，根据图2 分析原因是 在选定的合适温度条件下，为获得高产量的乳 酸，有必要将该一直起作用的启动子换成诱导物诱导型启动子，请说明理由 高二生物学试卷第12页共12页