内蒙古杭锦后旗奋斗中学2025-2026学年高一下学期期中考试生物试题

**基本信息** 高二期中生物试卷聚焦现代生物技术，以基因工程、细胞工程等为核心，融合科研案例与实验操作，突出科学思维与探究实践能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题（单选+不定项）|20题/45分|基因工程工具（限制酶、载体）、PCR技术、发酵工程（黑曲霉、葡萄酒酿造）、细胞培养计数|结合转基因山羊乳腺生物反应器（第12题）、微生物筛选（第10题）等情境，考查基础概念与辨析能力| |非选择题|5题/55分|高通量筛选（21题）、不对称体细胞杂交（22题）、基因编辑猪克隆（23题）、转基因柑橘培育（24题）|以科研流程为载体（如22题红豆杉与柴胡融合），综合考查实验设计、结果分析及技术应用，体现探究实践与科学思维|

奋斗中学2025-2026-2高二期中考试生物试题 一、选择题：（1-15为单选题，每小题2分，共30分，16-20为不定项选择，每题3分，共15分，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分） 1．基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法错误的是（　　） A．限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定的核苷酸序列 B．质粒载体可导入任意类型的受体细胞并稳定表达 C．T4 DNA连接酶可以催化磷酸二酯键的形成，从而将两个DNA片段相连 D．限制酶切割DNA一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 2．DNA的粗提取和鉴定实验用到了多种试剂，若以鸡血为实验材料，下列试剂与其作用或处理方式对应错误的是（　　） A．蒸馏水——向鸡血中加入蒸馏水，可使细胞吸水涨破，释放核内DNA B．2mol/L的NaCl溶液——溶解DNA，便于后续DNA的鉴定 C．二苯胺试剂——在沸水浴条件下与DNA反应呈紫色，可用于鉴定DNA D．体积分数为95%的冷酒精——析出DNA，可去除溶于酒精的杂质 3．如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（　　） A．DNA连接酶、限制性内切核酸酶、解旋酶 B．解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA聚合酶 C．解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA连接酶 D．限制性内切核酸酶、DNA连接酶、解旋酶 4．下列关于PCR技术的相关叙述，正确的是（    ） A．PCR反应体系需加入4种核糖核苷酸作为原料 B．利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，将凝胶置于300nm紫外灯下可观察扩增结果 C．PCR利用了DNA的热变性原理，在反应体系中需添加耐高温的DNA聚合酶和DNA连接酶 D．一般加入的引物有2种，分别与两条模板链的5′端结合 5．作为基因工程的运输工具载体，必须具备的条件及理由对应叙述正确的是（　　） A．基因工程中目的基因的运输工具只能是质粒 B．具有某些标记基因，以便目的基因能够准确定位与其结合 C．只有一个限制酶切割位点，便于目的基因的插入 D．能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因 6．黑曲霉（好氧型真菌）能够以纤维素为原料生产柠檬酸。下列叙述错误的是（　　） A．黑曲霉有以核膜为界限的细胞核 B．纤维素的基本单位是葡萄糖 C．高产黑曲霉可来自自然选育或诱变育种 D．黑曲霉可直接从纤维素中获得碳源 7.我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。发酵工程通过选育菌种和控制发酵条件等措施可优化传统发酵工艺，改善葡萄酒品质。下列叙述错误的是（　 　） A．传统发酵时，葡萄酒的发酵过程中存在的菌种有葡萄果皮上的多种微生物 B．工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵 C．通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状 D．大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数 8．我国科学家在研究绵羊体外受精时发现，向获能液、受精液中添加适量褪黑素可显著提升精子获能效率与囊胚发育率。下列叙述不合理的是（    ） A．向获能液中添加适量褪黑素，可提高绵羊体外受精的成功率 B．受精液中添加的褪黑素不影响透明带阻止多精入卵的功能 C．受精液中添加褪黑素可为绵羊优良品种的繁育提供更多优质胚胎 D．褪黑素作用下形成的囊胚应在体外培养至原肠胚，再进行胚胎移植 9．某实验小组在对某大肠杆菌培养液中的大肠杆菌进行计数时，样品的稀释情况如图所示，涂布平板时各组所用稀释液的体积均为0.05 mL。若在F组稀释液对应的培养基中测得的菌落数的平均值为34个，则1 mL原培养液中大肠杆菌的活菌数约为（　　） A．6.8×106个 B．6.8×108个 C．1.7×107个 D．1.7×108个 10．厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列有关叙述正确的是（　　） A．为简化操作流程，可用蒸馏水替代无菌水进行梯度稀释后再涂布 B．培养基上的一个菌落一定是来源于样品稀释液中的一个活菌 C．为避免培养基灭菌不彻底对实验结果的干扰，需设置未接种的空白平板作为对照 D．透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该菌降解淀粉的能力越弱 11．为保护濒危珍稀植物云南红豆杉，并高效提取其抗癌物质紫杉醇，研究人员利用植物细胞工程进行快速繁殖与细胞悬浮培养，相关流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．利用植物组织培养技术获得紫杉醇，实现了细胞产物的工厂化生产 B．原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性 C．外植体选择云南红豆杉的幼嫩茎段，是因为该部位细胞的分化程度低和分裂能力强 D．组培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培养基 12．利用转基因山羊乳腺生物反应器生产丁酰胆碱酯酶，可治疗有机磷中毒。下列叙述错误的是（　　） A．应该用山羊乳腺细胞中特异表达的基因的启动子构建基因表达载体 B．乳腺生物反应器的优点在于可以生产大量的丁酰胆碱酯酶 C．该过程中丁酰胆碱酯酶基因表达载体的受体细胞的性染色体组成只能是XX D．常通过显微注射法将丁酰胆碱酯酶基因导入山羊的乳腺细胞来获得转基因山羊 13．番茄在较低温运输或储存时会被冻坏。科学家利用基因工程技术将抗冻基因AFPs插入表达载体（Ti质粒）后，通过农杆菌转化法导入番茄幼苗。下列叙述错误的是（　　） A．用PCR扩增基因AFPs时添加的两种引物的碱基间不能互补配对 B．构建重组Ti质粒时，需要将基因AFPs插入Ti质粒的T-DNA区域 C．当农杆菌感染番茄细胞时，T-DNA会转移并整合到其染色体DNA上 D．可通过抗原—抗体杂交技术检测农杆菌细胞中是否表达出抗冻蛋白 14．细胞融合技术有着广泛的应用，下图表示细胞融合的简略过程。下列叙述错误的是（　　） A．若a、b为植物体细胞，则用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体后再诱导融合 B．若a、b为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则诱导融合后得到的融合细胞c均可产生抗体 C．若a、b为不同植物的体细胞，则体细胞杂交获得的植株染色体数通常为两亲本之和 D．若a、b为动物体细胞，则融合过程中可以利用灭活病毒诱导其融合 15．科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，可用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（　　）    A．干细胞就是从胚胎中分离提取的细胞 B．造血干细胞分化程度低于iPS细胞，且具有组织特异性 C．成纤维细胞转化为iPS细胞，可通过直接将特定蛋白导入细胞中实现 D．获得iPS细胞后，细胞的分裂能力和分化潜能都低于小鼠成纤维细胞 16．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述正确的是（    ） A．实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞 B．将小鼠体内取出的脾脏剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞 C．筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交瘤细胞 D．筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 17．如图表示利用二倍体小鼠所做的实验，下列有关叙述正确的是（    ） A．16细胞胚中部分细胞同时有白鼠和黑鼠的遗传物质 B．过程①中细胞数目和有机物总量在不断增加 C．囊胚期的滋养层细胞可用于进行性别鉴定 D．嵌合体幼鼠属于二倍体，有丝分裂后期有4个染色体组 18．常见的启动子可分为三类：组成型启动子，驱动基因在所有细胞、组织和器官中持续表达；组织特异性启动子，调控基因只在某些特定的部位中表达；诱导型启动子，通常在光、盐等信号作用下，使目的基因的转录水平有所提高。下列叙述错误的是（　　） A．启动子是一段有特殊序列结构的核糖核苷酸片段，位于基因的上游 B．培育转基因动物时，若要让目的基因在肝脏细胞中特异性表达，可选用肝脏组织特异性启动子 C．细胞分化与组织特异性启动子的调控有关，与组成型启动子无关 D．盐诱导型启动子在高盐环境中被激活，可增加农作物的抗逆性 19．下列关于琼脂糖凝胶电泳的叙述，错误的是（    ） A．在凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小和构象有关 B．凝胶中的DNA分子被核酸染料染色后，可在自然光下被检测出来 C．将电泳液缓冲液加入电泳槽时，电泳缓冲液应没过凝胶1mm左右 D．待凝胶载样缓冲液中的指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，应停止电泳 20．用Xho I（C↓TCGAG）和Sal I（G↓TCGAC）两种限制性内切核酸酶分别处理图1 DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图1、图2所示。下列叙述错误的是（　　） A．图中两种酶识别的序列不同，但酶切产物可用于构建重组DNA B．图2中泳道②的酶切产物说明该限制酶断开了6个磷酸二酯键 C．若用两种限制酶同时切割该DNA,在泳道中将出现7个条带 D．泳道①是Sal I的酶切结果 二、非选择题 21．（共8分）科研人员试图从土壤中筛选出能高产淀粉酶的细菌，用于工业生产。传统方法是一个一个地培养和检测菌株，效率低下。现代微生物学常采用“高通量筛选”技术，其核心思想是微型化和自动化，能同时对大量候选菌株进行快速检测与评价（如图）。下面该高通量筛选流程： a．菌种分离与纯化：从土壤样品中分离纯化得到数百个不同的细菌单菌落。 b．接种与培养：将每个纯化的单菌落分别接种到96孔板的各个孔中。孔内装有含葡萄糖的液体培养基。然后将整块板置于恒温摇床中振荡培养。 c．诱导与反应：培养一定时间后，向每孔中加入可溶性淀粉溶液，继续培养。淀粉既作为诱导物诱导淀粉酶合成，也作为底物被酶催化水解。 d．检测与识别：反应结束后，向每孔中加入碘液。 e．结果分析：使用酶标仪自动检测每孔溶液的吸光值（吸光值大小与溶液颜色深浅呈正相关），快速识别出淀粉酶产量高的菌株。根据以上材料，回答下列问题： (1)做生物纯化培养常用的方法有___________和___________法。步骤b培养的目的是____________________________________。 (2)高通量筛选技术相比传统逐个筛选方法，其主要优势在于极大地提高了筛选的_______。本实验中，96孔板的每个小孔都相当于一个独立的培养单元，实现了培养和检测的微型化。 (3)步骤b中将纯化的不同单菌落接种到不同孔中，需确保每个孔中初始微生物的_______是一致的，从而确保后续检测结果的可比性。接种前，培养基需进行_______________灭菌；接种过程必须在_____________附近进行无菌操作。 (4)步骤d检测时，吸光值_______（大/小）的孔可能为目标菌种。 22．（共10分）不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 (1)过程①中需将外植体经________、 消毒处理后接种于MS培养基上诱导________过程，产生愈伤组织，该过程________光照（需要/不需要）。 (2)制备原生质体的过程不能在无菌水中进行，原因是____________________________。 (3)融合前需用X射线照射____________（红豆杉/柴胡）的原生质体，用碘乙酰胺处理另一亲本。 (4)利用图中技术进行育种的优点是_______________________________________________。 23．（共9分）异种器官移植是解决人类供体器官短缺的核心途径。我国科学家于2025年成功培育出无特定病原体的10基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10基因编辑猪，为异种器官移植提供安全供体，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题： (1)图中过程①培养时，应使用________培养基（按物理性质划分），并将其置于含有 的混合气体的CO2 培养箱中；贴壁细胞培养一段时间后，会因_________________（写两点）等因素停止增殖。 (2)过程②常用__________方法对卵母细胞进行“去核”，“去核”前卵母细胞要培养至_____期。 (3)为获得更多的克隆猪，可以对早期胚胎进行 操作后在进行胚胎移植，若对囊胚进行此操作，需要注意的是 。 24．（共14分）柑橘树生长过程中易受某种革兰氏阴性菌感染，严重危害柑橘产量。科研人员将M基因转入柑橘中，该基因控制合成的酶可抑制该种革兰氏阴性菌的生长与繁殖。如图是培育转基因柑橘的过程示意图，已知限制酶Hind Ⅲ、BamH I、Sal I的识别序列及切割位点分别为5’-A↓AGCTT-3’、5’-G↓GATCC-3’、5’-G↓TCGAC-3’。请回答下列问题。 (1)构建基因表达载体时，除含有目的基因外，还必须含有_______________（回答2点）等。据图1分析，在构建重组质粒过程中应选用_______________酶对M基因和质粒进行切割，酶切后通过 酶作用后获得重组质粒，以保证重组DNA序列的唯一性。 (2)PCR循环的三个步骤包括__________________。利用PCR技术扩增M基因时，应选择图2中的引物__________（填序号），引物的作用是_________________________________。 (3)为检测转基因柑橘幼苗是否可以抵抗革兰氏阴性菌的感染，在个体生物学水平上，操作方法是__________________________________________________________________。 25．（共14分）转基因抗虫水稻是我国自主研发的生物技术成果，可有效抵御水稻螟虫的危害，减少农药使用，在湖南等水稻主产区广泛推广。回答下列与基因工程相关的问题： (1)培育转基因抗虫水稻时，获取Bt抗虫蛋白基因的方法有人工合成、构建基因文库和 。 (2)基因工程的核心步骤是_______________________。质粒作为基因工程常用载体，需具备的条件有：①________________________；②____________________________；③对受体细胞无害；④有标记基因。 (3)将 Bt 抗虫蛋白基因导入水稻体细胞最常用的方法是________________；该方法将目的基因插入到Ti质粒的_______上，通过转化作用就可以使抗虫基因进入水稻细胞。 (4)目的基因导入水稻细胞后，需要进行检测和鉴定：可通过 技术检测目的基因是否翻译成Bt抗虫蛋白。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 《高二生物》期中考试参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B C C B D D B D B C 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 A D D B C AC CD AC AB BC 21【答案】(1) 平板划线法 稀释涂布平板法 使细菌大量增殖，获得足够菌量（用于后续诱导与检测） (2)效率（或速度）/通量（或规模）（合理即可） (3) 接种量（数量） 高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌） 酒精灯火焰（或超净工作台内） (4)小 22【答案】(1) 酒精 次氯酸钠 脱分化 不需要 (2) 防止原生质体发生渗透作用吸水涨破 (3) 红豆杉 (4) 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 23【答案】(1) 液体 95%的空气和5%的CO2 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏、接触抑制 (2) 显微操作 MⅡ (3) 胚胎分割 需将内细胞团均等分割 24【答案】(1) 启动子 终止子 标记基因 复制原点 SalⅠ和HindⅢ DNA连接 (2) 变性、复性、延伸 2和3 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 (3) 对柑橘幼苗接种该种革兰氏阴性菌，观察幼苗生长情况 25【答案】 (1)PCR技术扩增 (2) 构建基因表达载体； ①有一个至多个限制酶切割位点； ②能在受体细胞中自主复制 (3) 农杆菌转化法；T-DNA (4)抗原—抗体杂交 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $