四川高二生物下学期期中测试2025-2026学年人教版选择性必修三1-4章

**基本信息** 高二生物期中测试以原创题为主，融合传统发酵、发酵工程、细胞工程等核心知识，情境涵盖培育肉、嵌合体小鼠等科技前沿，注重科学思维与探究实践。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|15题/45分|传统发酵技术（第1题）、发酵工程（谷氨酸棒状杆菌，第2题）、植物细胞工程（原生质体融合，第4题）等|原创题占比高，结合青霉菌发酵（第3题）等真实科研情境，考查结构与功能观| |非选择题|5题/55分|微生物培养（滚管培养法，第16题）、植物体细胞杂交（第17题）、单克隆抗体偶联药物（第18题）等|突出实验流程分析（如第20题定点诱变PCR技术），体现探究实践，适配期中综合能力评估|

Sheet1 题号 题型 分值 知识点 难度系数（预估） 1 单选题 3 传统发酵技术（菌种、发酵条件、产物） 0.75 2 单选题 3 发酵工程（谷氨酸发酵、菌种代谢、中心环节 0.7 3 单选题 3 青霉素发酵、代谢调控、菌种选育 0.7 4 单选题 3 植物体细胞杂交（原生质体融合、筛选、再分化） 0.65 5 单选题 3 胞质杂交、原生质体制备、基因导入 0.6 6 单选题 3 植物细胞工程应用（脱毒苗、突变体、单倍体） 0.65 7 单选题 3 动物细胞培养（酶、气体、培养液更换） 0.7 8 单选题 3 胚胎嵌合体、免疫排斥、染色体倍性 0.6 9 单选题 3 胚胎发育、全能性、基因表达调控 0.6 10 单选题 3 人-猪嵌合胚胎、iPSCs、加法原则 0.55 11 单选题 3 胚胎工程（体外受精、胚胎移植、同期发情） 0.65 12 单选题 3 基因表达载体结构（启动子、终止子、密码子） 0.7 13 单选题 3 基因突变、PCR-RFLP、抗药性检测 0.6 14 单选题 3 转基因食品安全性（标识、基因整合、蛋白分解） 0.7 15 单选题 3 生物安全（克隆政策、基因污染、生物武器） 0.75 16 非选择题 10 厌氧微生物培养、纤维素分解菌筛选、刚果红染色 0.65 17 非选择题 10 植物体细胞杂交（去壁、融合、染色体组、遗传规律） 0.6 18 非选择题 10 单克隆抗体-药物偶联物（ADC）、细胞凋亡、动物实验 0.6 19 非选择题 12 体细胞克隆、胚胎干细胞、异源二倍体、生殖隔离 0.55 20 非选择题 13 大引物PCR定点诱变、质粒构建、蓝白斑筛选 0.55 $ 高二生物下学期期中测试 （考试时间：75分钟，分值100分） 第一部分（选择题 共45分） 一、选择题：本题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 （原创题）1.关于传统发酵技术，下列说法正确的是（ ） A.传统发酵技术以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B.制作葡萄酒和葡萄醋时利用的菌种在细胞结构上具有一致性 C.果酒制作完成后主要利用其中葡萄糖作为底物在有氧条件下进行醋酸发酵 D.在泡菜制作过程中乳酸菌产生了乳酸和CO2，所以制作过程需要时常拧松瓶盖 （原创题）2.谷氨酸棒状杆菌是一种好氧菌，其可以利用碳水化合物转化为谷氨酸，它是谷氨酸发酵的常用菌种。不能合成生物素的细菌细胞膜存在缺陷，导致膜通透性增加，下图通过发酵工程生产谷氨酸的流程。下列说法错误的是（ ） A.谷氨酸棒状杆菌的代谢类型为异养需氧型 B.生产谷氨酸的过程中中心环节为发酵罐内发酵 C.欲获得产物需要将将发酵环境的PH调至中性和弱酸性 D.改变谷氨酸棒状杆菌的遗传特性可以通过定点基因组编辑来实现 （原创题）3.青霉菌通过分泌青霉素，抑制周边细菌的生长，，人们常提取青霉素作为抗生素，但在青霉素的发酵过程中总伴随有头孢霉素的产生，研究发现在青霉素与头孢霉素的合成过程中，他们有一个共同的前体，这个前体经过不同的酶的作用分别合成两种产物，下列说法错误的是（ ） A.虽然青霉素是抗生素，但在其生产过程中也需要无菌操作 B.提取青霉素时需要采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥 C.可以通过敲除头孢霉素合成的关键酶可以提高青霉素的产量 D.欲获得青霉素产量高的青霉菌，可以通过诱变育种或基因工程育种获得 4.如图是利用甲、乙两种植物的各自优势通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐杂种植株的实验流程图。下列叙述正确的是（ ） A．①过程前，需用次氯酸钠和酒精混合液对外植体进行消毒 B．②过程提供高pH-低Ca2+环境，有利于促进原生质体融合 C．③是在液体培养基上培养后得到的具有耐盐性状的幼芽 D．④过程需将植株种在高盐环境中，并检测目的植株的产量 5.用蜗牛提取液处理植物细胞，可以去除植物细胞的细胞壁，胞质杂交是植物体细胞杂交应用的一个重要方面。下图为将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙，从而获得抗病品种丙的实验流程。下列叙述正确的是（ ） A.过程①可以在等渗或低渗溶液中进行 B.过程①可以利用蜗牛提取物是因为其含有胰蛋白酶 C.过程②筛选同时具备叶绿体和细胞核的原生质体 D.品种丙能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状 6.植物细胞工程的几项应用如图所示，下列相关叙述正确的是（ ） A．若外植体为茎尖分生组织，则脱毒植株a有抗病毒能力 B．除植株b、c外，另两类植株的基因型一般与外植体相同 C．突变体植株c的获得说明该过程中能发生定向突变 D．若外植体为花粉，则得到单倍体植株b的过程即单倍体育种 7.培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（ ） A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应充入一定量的CO2，主要作用是刺激细胞呼吸 C．培养液中的支架提供了更大的附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．人造牛肉的培养不需要更换培养液，有利于牛肉的工厂化生产 8.下图是科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体小鼠的流程，相关叙述正确的是（ ） A．代孕母鼠对早期胚胎不发生免疫排斥反应 B．过程②中可利用灭活的病毒诱导卵裂球细胞发生融合 C．代孕母鼠生产的嵌合鼠毛色黑白相间，是四倍体小鼠 D．嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因 9.某实验室通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚胚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段。下列叙述错误的是（ ） A．桑葚胚和囊胚期的所有细胞都具有发育的全能性，属于全能细胞 B．据图推测，桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3基因的表达下降 C．卵裂期细胞进行有丝分裂，细胞数目变多但胚胎的体积不会增大 D．诱导桑葚胚样细胞时，基因的碱基序列没有发生改变，但表达的情况发生改变 10.为解决器官移植供体短缺问题，研究人员尝试培育含有人源化肾脏组织的人-猪嵌合胚胎。研究中构建了肾脏发育缺陷的猪胚胎，将过量表达MYCN和BCL2基因的人诱导多能干细胞（iPSCs）注入桑葚胚或囊胚后进行移植。实验流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） 注：SIXl和SALLl基因缺失导致肾脏发育异常；MYCN基因具有促进细胞增殖等功能；BCL2基因能够抑制细胞凋亡 A．可用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等化学方法激活重构胚 B．将猪胎儿成纤维细胞注入去核猪卵母细胞的过程直接体现了动物细胞核的全能性 C．与①相比，向桑葚胚中注入iPSCs后进行移植，利用了实验设计的加法原则 D．嵌合胚胎肾脏组织的形成完全依赖于注入的iPSCs，与猪胚胎自身细胞无关 11.华西牛是我国育种专家培育的具有完全自主知识产权的专门化肉牛新品种，打破了我国肉牛种源严重依赖进口的局面。科研人员在生产中采取胚胎工程的手段实现了华西牛的快速繁育。下列叙述错误的是（ ） A．采集的精子需要进行获能处理后在适当的培养液中完成受精 B．胚胎移植过程中涉及到两次检查，且两次检查的对象是相同的 C．受体母牛需健康且具有正常的繁殖能力，胚胎移植前需要对其进行同期发情处理 D．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 12.下列关于基因表达载体及其构建过程的说法，错误的是（ ） A．构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代 B．一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、起始密码子和终止密码子等结构 C．诱导物与诱导型启动子结合可激活或抑制目的基因表达 D．基因表达载体中启动子是RNA聚合酶的结合部位，启动转录过程 13.疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。若疟原虫pfcrt基因编码的蛋白质第76位的赖氨酸被苏氨酸替换（如图甲所示），会获得对氯喹的抗性。现有6个人的血样，处理后进行PCR扩增pfcrt基因，产物用限制酶ApoⅠ切割，酶切产物的电泳结果如图乙所示。下列说法正确的是（ ） A．可以用氯喹对1号和6号血样的提供者进行治疗 B．结果显示只有1号和6号血样来自于疟原虫感染者 C．3号和5号血样未电泳出条带的原因是pfcrt基因发生突变 D．对氯喹产生抗性的疟疾患者的成熟红细胞发生了基因突变 14.关于转基因食品的安全性，下列叙述正确的是（ ） A．人食用转基因食品后，其中的外源基因会整合到人的基因组中 B．只要转基因植物的外源基因来源于自然界，就不存在安全性问题 C．转基因食品需要明确标识，以保障消费者的知情权和选择权 D．人食用耐盐转基因水稻后，其产生的耐盐蛋白会直接进入内环境，破坏稳态 15.现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及到生物安全问题。下列叙述错误的是（ ） A．我国禁止一切与生殖性克隆和治疗性克隆有关的研究 B．基因污染可能对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在威胁 C．消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 D．为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 16.滚管培养法是分离厌氧微生物的常用方法，其过程是先将样品稀释液注入盛有50℃左右培养基的密封试管中，然后将试管平放于盛有冰块的盘中迅速滚动，带菌的培养基会在试管内壁凝固成薄层，培养一段时间后即可获得单菌落。研究小组按照如图所示流程分离反刍动物瘤胃中的纤维素分解菌。回答下列问题： (1)获得纯净的微生物培养物的关键是_____，获得某菌种的纯培养物的方法有_____。 (2)为了筛选纤维素分解菌，从培养基成分角度分析，配制过程②所用培养基应_____。该培养基按功能来分应为_____培养基。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中加入刚果红（可与纤维素形成红色复合物），可通过观察是否产生_____来筛选纤维素分解菌。 (3)滚管培养法也可以用于细菌计数，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____，原因是_____。 17.甲植物（2n=18）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n=32）的细胞质中存在抗除草剂基因，科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗除草剂性状的优良品种丙，途径如图所示。已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂。回答下列问题： (1)利用植物体细胞杂交技术获得新植物体，利用的生物学原理是________。取植物的顶芽细胞进行培育，有利于获得脱毒苗，原因是________。 (2)过程①常用酶解法去除细胞壁，利用的酶是________。过程②可采用物理方法进行诱导，能用的物理方法有________法等。 (3)过程⑤先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，此时生长素与细胞分裂素的比值_______（填“＞1”、“＜1”或“=1”）。 (4)与其他育种方式相比，植物体细胞杂交的突出优点是________。杂种植株丙的染色体组数为_______组，其体内抗除草剂基因的遗传________（填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律。 18.HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： (1)在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②筛选出的细胞为________，经过程②筛选的细胞还需进行过程③_______________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 (2)过程④是将细胞毒素类药物与能特异性识别HER2抗原的单克隆抗体结合，与传统化疗药物相比，其优点是_______________。 (3)为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。 ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明__________。 19.近年来，我国科研工作者在国际上首次利用体细胞成功创建克隆猕猴中中、华华和梦梦。体细胞克隆猴的诞生，是人类认识克隆技术，研究细胞功能和治疗性克隆的里程碑式研究结果。同时，也是人类干细胞研究方兴未艾事业的一个开始。克隆上述猕猴的操作流程如图1.与此同时，我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞（AdESCs），操作流程如图2.请回答下列问题： (1)利用___________酶处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。然后放入气体条件是_________的恒温箱中培养；培养细胞时要定期更换培养液的目的是________。 (2)请你推测图1中注入的神秘浓度比的药物的作用是__________，注入细胞的方法是________。 (3)通常情况下，卵母细胞要发育到________期时才适合核移植，早期胚胎要发育到_________时才适合进行胚胎移植。 (4)我们大胆推测，通过体细胞克隆猴的研究，将来会找到让高度分化的人体细胞逆向生成胚胎干细胞的方法，进而诱导克隆出_______用于替换人体相应病变的结构。 (5)图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和_______，不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞的原因是二者之间存在。 20.定点诱变技术可以在体外改造目的DNA分子，进而研究基因的表达以及蛋白质的结构与功能之间的关系。经典的大引物PCR定点诱变技术成为基于PCR的定点诱变技术中应用最普遍的方法，操作过程如图甲。研究者欲改造某基因并将其导入大肠杆菌的质粒中保存，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点，结构如图乙。回答下列问题： (1)PCR体系中，除了加入目的基因与引物外，还应加入________等（答出两点即可）。利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR（PCR1和PCR2），在PCR1中，至少需要________个循环才能获得相应的大引物模板。在PCR2中，要获得带有诱变点的改良基因，引物应选用大引物两条链中的________（填“①”或“②”）。 (2)为实现质粒和改良基因的高效连接，选用限制酶XmaⅠ切割质粒而不选用限制酶SmaⅠ的原因是________。 (3)在构建改良基因表达载体时，有的质粒含有改良基因，有的质粒为空白质粒，将含上述组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中，适宜温度下培养一段时间后，再将菌液涂布在含__________和__________的平板上。一段时间后，在培养基上出现白色和蓝色两种菌落，其中________色菌落含有重组质粒，判断的依据是________。 (4)与X射线诱变相比，该诱变技术的优点是________（答出两点）。 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物下学期期中测试 选择性必修三 答案及解析 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 A C B D C B C A A C B B A C A 一、选择题：本题共15小题，每小题5分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1．【答案】A 【详解】A、传统发酵技术以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主,A正确 B、制作葡萄酒时利用酵母菌进行发酵，酵母菌为真核生物，制作葡萄醋时利用醋酸菌进行发酵，醋酸菌为原核生物，两者菌种在细胞结构上具有差异性,B错误； C、果酒制作完成后主要利用其中酒精作为底物在有氧条件下进行醋酸发酵，C错误 D、在泡菜制作过程中乳酸菌产生了乳酸,不产生CO2，所以制作过程不需要时常拧松瓶盖，D错误 2.【答案】C 【详解】A、谷氨酸棒状杆菌是好氧菌，利用碳水化合物合成产物，故其为异养需氧型，A正确； B、发酵工程的中心环节为发酵罐内发酵，B正确； C、欲获得产物需要将将发酵环境的PH调至中性和弱碱性，C错误； D、改变一个生物的遗传特性可以通过定点基因组编辑来实现，D正确 3.【答案】B 【详解】A、虽然青霉素是抗生素，但在其生产过程中也需要无菌操作，如果污染了某些杂菌，杂菌分泌青霉素酶，导致青霉素被分解，A正确； B、青霉素为青霉菌的分泌产物，提取青霉素时应采用提取、分离和纯化等方法获得产品，B错误 C、同一个前体在不同酶的作用下合成不同物质，敲除头孢霉素合成的关键酶可以使更多的前体物质转化为青霉素，从而提高青霉素的产量C正确 D、选育菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，D正确 4.【答案】D 【详解】A、外植体消毒需依次用酒精、次氯酸钠单独处理，而非二者的混合液，且消毒是获取甲、乙植物细胞之前的操作，并非①去壁过程前的操作，A错误； B、诱导原生质体融合的高Ca2+-高pH融合法需要高pH、高Ca2+的环境，低Ca2+不利于原生质体融合，B错误； C、③是愈伤组织再分化形成幼芽的过程，植物组织培养的再分化阶段使用固体培养基，而非液体培养基，C错误； D、实验目的是获得高产、耐盐的杂种植株，因此④筛选过程需将植株种在高盐环境中筛选耐盐个体，同时检测产量筛选高产个体，D正确。 5.【答案】C 【详解】A、过程①是去除细胞壁获得原生质体，原生质体无细胞壁保护，在低渗溶液中会吸水涨破，A错误； B、过程①可以利用蜗牛提取物是因为其含有纤维素酶和果胶酶，B错误； C、本实验目的是获得含品种乙细胞核、品种甲叶绿体的杂种原生质体，因此过程②需要筛选同时具备叶绿体和细胞核的原生质体，C正确； D、该过程仅将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙，品种甲核基因控制的性状并未转移给丙，因此丙不可能获得甲的所有优良性状，D错误。 6.【答案】B 【详解】A、茎尖分生组织病毒极少甚至无病毒，培养得到的脱毒植株a仅不带病毒，不具备抗病毒能力，抗病毒能力需要转入抗病毒基因才能获得，A错误； B、脱毒植株a、植株d均是通过植物组织培养的无性生殖得到的，基因型一般与外植体相同；单倍体植株b是配子发育而来，基因型与外植体不同，突变体植株c发生了基因突变，基因型也发生改变，B正确； C、基因突变具有不定向性，突变体植株c是不定向突变后经人工筛选得到的，C错误； D、单倍体育种包括花药离体培养获得单倍体植株、秋水仙素处理使染色体数目加倍两个步骤，仅得到单倍体植株b的过程不属于单倍体育种，D错误。 7.【答案】C 【详解】A、动物细胞培养时分散组织细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，胃蛋白酶最适pH为酸性，在动物细胞培养的中性偏碱环境中会失活，无法发挥作用，A错误； B、生物反应器中充入CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误； C、动物细胞存在贴壁生长的特点，培养液中的支架能提供更大的附着面积，有利于细胞贴壁生长，C正确； D、细胞培养过程中会消耗营养物质，同时积累代谢废物，必须定期更换培养液，否则会导致细胞活性下降甚至死亡，不利于工厂化生产，D错误。 8.【答案】A 【详解】A、在胚胎移植过程中，受体（代孕母鼠）对植入子宫的外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应，这是胚胎移植能够成功的生理学基础之一，A正确； BCD、过程②中是将两个卵裂球重组形成嵌合胚胎，但并未诱导卵裂球细胞融合，故代孕母鼠生产的嵌合鼠仍是二倍体，其一个细胞中应含有白鼠或黑鼠的基因，BCD错误。 9.【答案】A 【详解】A、桑葚胚阶段的所有细胞都具有发育的全能性，属于全能细胞； 但囊胚期细胞已经出现分化，内细胞团细胞具有发育的全能性，可发育为胎儿的各种组织； 滋养层细胞会发育为胎膜和胎盘，不具有发育的全能性，A错误； B、实验中，从囊胚内细胞团细胞提高 pSTAT3 基因表达，才能制备出桑葚胚样细胞，恢复了桑葚胚期细胞的特性； 这说明桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3 基因的表达水平是下降的，B正确； C、卵裂期细胞进行有丝分裂，细胞数目不断增多，但整个胚胎的总体积基本不变或略有缩小，不会增大，C正确； D、诱导桑葚胚样细胞，是通过调控基因的表达水平实现的，没有改变基因的碱基序列，只是基因的表达情况发生了改变，D正确。 10.【答案】C 【详解】A、可用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、 乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚， 使其完成细胞分裂和发育进程，其中电刺激属于物理方法，A错误； B、体细胞核移植过程中，将猪胎儿成纤维细胞注入去核猪卵母细胞只是完成了重组胚胎的构建，该过程并不能直接体现动物细胞核的全能性，B错误； C、①是SIXl和SALLl双基因敲除的桑葚胚，向桑葚胚中注入iPSCs后进行移植，这是利用了实验设计的加法原则，C正确； D、嵌合胚胎的发育依赖猪胚胎提供的微环境，例如营养供应、发育信号调控等，人源化肾脏组织的形成虽然以注入的iPSCs为核心，但与猪胚胎自身细胞也存在密切关联，D错误。 11.【答案】B 【详解】A、体外受精时，采集的精子必须先进行获能处理，才能与培养至减数第二次分裂中期的卵母细胞在适当的培养液中完成受精作用，A正确； B、胚胎移植的两次检查中，第一次是对早期胚胎进行质量检查，第二次是移植后对受体母牛是否妊娠进行检查，两次检查的对象不同，B错误； C、胚胎移植时受体母牛需要健康且具备正常繁殖能力，移植前需对供体、受体母牛进行同期发情处理，以保证二者生殖器官的生理状态一致，为胚胎移入提供相同的生理环境，C正确； D、转基因、核移植、或体外受精等技术获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。 12.【答案】B 【详解】A、构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在且能遗传给下一代，同时可使目的基因表达和发挥作用，A正确； B、基因表达载体一般包括目的基因、启动子、终止子、标记基因，起始密码子和终止密码子是mRNA上的序列，不属于基因表达载体（DNA分子）的结构，B错误； C、诱导型启动子的转录活性受诱导物调控，诱导物与该类启动子结合后可激活或抑制目的基因的表达，C正确； D、启动子是位于基因上游的一段有特殊序列结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点，可启动基因的转录过程，D正确。 13.【答案】A 【详解】A、结合图示可知，未突变的基因有酶切位点，可以被酶切为两个片段，电泳后有两个条带，突变后基因不能被酶切，只能获得一个电泳条带，图乙说明1号和6号血样扩增出的基因是未突变的pfcrt基因，2号和4号血样扩增出的基因是突变的pfcrt基因，因此可以用氯喹对1号和6号血样的提供者进行治疗，A正确； B、1号、2号、4号和6号血样都来自于疟原虫感染者，B错误； C、pfcrt基因是疟原虫的基因，所以未被感染的人是不会扩增出pfcrt基因的，可看出3号和5号血样来自于未被感染的人，C错误； D、对氯喹产生抗性的是pfcrt基因突变了的疟原虫，不是患者，哺乳动物成熟红细胞也没有基因，D错误； 故选A。 14.【答案】C 【详解】A、外源基因的本质是DNA，进入人体消化道后会被核酸酶分解为脱氧核苷酸，无法以完整的基因形式存在，更不可能整合到人的基因组中，A错误； B、即使外源基因来源于自然界，其插入受体植物基因组的位置具有随机性，可能干扰原有基因的表达，甚至产生致敏蛋白、有毒代谢产物，依然存在安全性隐患，B错误； C、我国对转基因食品实行强制标识制度，要求转基因食品明确标识，以此保障消费者的知情权和选择权，C正确； D、耐盐蛋白的本质是蛋白质，进入人体消化道后会被蛋白酶分解为氨基酸后才被吸收，不会以完整的蛋白质形式进入内环境，不会破坏内环境稳态，D错误。 15.【答案】A 【详解】A、我国明确禁止生殖性克隆的相关研究，但不反对治疗性克隆的研究，治疗性克隆可用于组织器官移植等疾病治疗场景，具有积极应用价值，并非禁止一切与生殖性克隆和治疗性克隆有关的研究，A错误； B、基因污染指外源基因通过转基因生物扩散进入其他野生生物中，可能改变原有物种的遗传特性，进而对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在威胁，B正确； C、生物武器致病性强、传播范围广、危害极大，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，C正确； D、基因检测结果包含个人的特有遗传信息，随意泄露可能引发基因歧视等伦理问题，因此基因检测机构不能随意泄露基因检测结果，D正确。 二、非选择题：本题共5小题，共55分 16.（10分）除标注外，每空一分 【答案】(1) 防止杂菌污染 平板划线法、稀释涂布平板法（2分） (2) 以纤维素为唯一碳源（2分） 选择 透明圈 (3) 偏少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分） 【详解】（1）获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，获得某菌种的纯培养物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，即通过平板划线法和稀释涂布平板法均可分离菌种。 （2） 为了筛选纤维素分解菌，根据选择培养基的原理，配制过程②所用培养基应以纤维素为唯一碳源。该培养基按功能来分应为选择培养基。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是刚果红，因为刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 （3）滚管培养法用于细菌计数时，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少。 17.（10分）除标注外，每空一分 【答案】(1)细胞膜的流动性和植物细胞的全能性（2分） 顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病毒 (2)纤维素酶和果胶酶 电融合法/离心法 (3)＜1 (4) 克服远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交（2分） 6/六 不遵循 【详解】（1）植物体细胞杂交利用细胞膜的流动性，杂种细胞形成新植物体利用植物细胞的全能性。植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗。 （2）植物细胞的主要成分是纤维素和果胶，去壁可以使用纤维素酶和果胶酶。步骤②是促进原生质体融合，可以采用物理方法有：电融合法、离心法等。 （3） ⑤为再分化形成杂种植株的过程，植物组织培养时，细胞分裂素用量较高，即生长素与细胞分裂素的比值＜1，有利于芽的分化，抑制根的形成。 （4）植物体细胞杂交的突出优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交。甲植物（2n=18），含2个染色体组，植物乙（4n=32），含4个染色体组，杂种植株丙的染色体组数为4+2=6组，其体内抗除草剂基因存在于细胞质，不遵循孟德尔遗传定律。 18.（10分）除标注外，每空两分 【答案】(1) HER2（1分） 杂交瘤细胞（1分） 克隆化培养和抗体检测 (2)可实现对肿瘤细胞的精准杀伤 (3)等剂量的磷酸缓冲液 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好 【详解】（1）在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用HER2对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②筛选出的细胞为杂交瘤细胞，过程②筛选的细胞还需通过过程③克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，最终筛选得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （2）过程④是将细胞毒素类药物与能特异性识别HER2抗原的单克隆抗体结合，与传统化疗药物相比，其优点是可实现对肿瘤细胞的精准杀伤，降低药物的副作用。 （3）①该实验的自变量为处理条件的不同，实验组的处理条件依次为HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物，这些都是治疗癌细胞的药物，空白对照组应注射等剂量的磷酸缓冲液，排除缓冲剂的影响。 ②根据实验结果可知，抗HER2-ADC组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。 19.（12分）除标注外，每空一分 【答案】(1) 胰蛋白酶 95%空气和5%的CO2 清除代谢物防止其积累对细胞自身造成危害 (2)激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 （2分） 显微注射法 (3)MⅡ 桑葚胚或囊胚（2分） (4)相应器官 (5)动物细胞融合 生殖隔离 【详解】（1）用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织可分散成单个细胞，故利用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。动物细胞培养过程中，培养箱的气体条件是95%空气和5%的CO2。培养细胞时要定期更换培养液的目的是清除代谢物防止其积累对细胞自身造成危害。 （2）结合图可知，注入的神秘浓度比的药物的作用是激活重构胚， 使其完成细胞分裂和发育进程。图1中的重组细胞是动物细胞，将神秘浓度比的药物注入细胞的方法是显微注射法。 （3）卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时，细胞已经成熟，具备受精能力，故卵母细胞要发育到减数第二次分裂中期时才适合核移植，早期胚胎要发育到桑葚胚或囊胚时才适合进行胚胎移植。 （4）通过体细胞克隆猴的研究，我们将来会找到方法，让高度分化的人体细胞逆向生成胚胎干细胞，并定向诱导胚胎干细胞克隆出相应器官用于替换人体相应病变结构。 （5）图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和动物细胞融合（孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞融合）。由题干可知，大鼠和小鼠是两个远亲物种，二者之间存在生殖隔离，自然状态下无法完成受精作用，或者即便能完成也不能发育，因此不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞。 20.（13分）除标注外，每空一分 【答案】(1)耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）、四种脱氧核苷酸（或dNTP） （2分） 2/二/两 ② (2)SmaⅠ的酶切末端为平末端，无法与改良基因上的黏性末端连接 （2分） (3)氨苄青霉素 β-半乳糖苷 白 构建改良基因组质粒时破坏了LacZ基因 （2分） (4)目的性强（精准、针对性强）、突变频率高 （2分） 【详解】（1） PCR反应体系需要模板（目的基因）、引物、原料（四种脱氧核苷酸）、酶（热稳定Taq酶）、缓冲液等。由图可知，大引物的两条链均带有突变位点，进行第一轮循环，得到的DNA有一个不含突变位点，另一个有一条链含有突变位点，进行第二轮循环，即可得到DNA有三个不含突变位点和一个两条链均含突变位点的DNA，即大引物，所以需要经过2个循环才能获得相应的大引物模板。从大引物和目的基因的结合位点分析，要获得带有诱变点的改良基因，引物应选用大引物两条链中的②链。 （2）根据SmaⅠ的酶切位点，如果选择SmaⅠ，则获得的是平末端，无法与改良基因上的黏性末端连接，因此，为实现质粒和改良基因的高效连接，选用限制酶XmaⅠ。 （3）因LacZ基因编码的酶能分解β-半乳糖苷，产生蓝色物质，如果没有分解，则菌落为白色，因此可以将菌液涂布在含氨苄青霉素和β-半乳糖苷的平板上。由于重组质粒的LacZ基因在重组过程中被切断，即构建改良基因组质粒时破坏了LacZ基因，不能编码相应的酶分解β-半乳糖苷，呈现白色，所以白色菌落含有重组质粒。 （4）X射线诱变具有不定向性、低频性，故与X射线诱变相比，该诱变技术的优点是目的性强、突变频率高。 学科网（北京）股份有限公司 $