精品解析：四川自贡市荣县中学校2025-2026学年高二下学期半期考试生物试题

2025-2026学年高二下学期半期考试生物试题 一、单选题（每题2分，共50分） 1. 科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ） A. 超数排卵 B. 精子获能处理 C. 细胞核移植 D. 胚胎培养 2. 某团队为提升猪α干扰素（PoIFN－α）的抗病毒活性，针对其8个关键氨基酸位点进行改造，构建突变体PoIFN－α8s。测序显示，改造后的DNA非模板链序列第5位点由“TAC”突变为“TGC”，导致编码的氨基酸由酪氨酸变为半胱氨酸，其余位点突变未改变氨基酸种类。下列分析错误的是（ ） A. 提升猪α干扰素的抗病毒活性是通过改造基因来完成的 B. 第5位点突变可能导致猪α干扰素的空间结构发生改变 C. 密码子AUG、ACG决定的氨基酸依次是酪氨酸、半胱氨酸 D. 其余位点突变未改变氨基酸种类与密码子的简并性有关 3. 细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞 C. 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D. 采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 4. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B. 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C. 培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D. 可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 5. 香豆素是一类结构多样的天然产物，广泛应用于制药、化妆品等工业。在香豆素的合成途径中存在一种限速酶，是其合成速率较低的原因，科研人员对该酶进行改造，香豆素的合成速率提高了5至22倍。在生产中需动态调控，及时排出产物香豆素。下列叙述错误的是（　　） A. 上述改造限速酶的过程利用了蛋白质工程 B. 可直接对限速酶的空间结构或氨基酸顺序进行改造 C. 该技术的实质是基因突变，即对限速酶的基因序列定向改造 D. 限速酶活性提高可能导致代谢中间产物积累，导致代谢紊乱 6. 下列有关生物工程的叙述，错误的有（　　） ①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能③利用核移植可以培养试管婴儿④PCR技术需要利用限制性内切核酸酶打开DNA双链⑤利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项 7. 乳腺生物反应器是动物基因工程的重要应用方向。我国科研人员成功培育出泌乳期能分泌人凝血因子Ⅷ的转基因牛，为治疗血友病提供了新思路。下列关于乳腺生物反应器培育的叙述，错误的是（　　） A. 可采用显微注射技术将重组载体导入牛的乳腺细胞中 B. 需要将人凝血因子Ⅷ基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组 C. 相比于工程菌生产凝血因子Ⅷ，乳腺生物反应器生产的凝血因子Ⅷ具有更完善的翻译后修饰，生物活性更高 D. 为了获得雌性转基因牛，可在胚胎移植前，从囊胚中取滋养层细胞进行性别鉴定 8. 豆瓣酱是我国地方特色调味品，生产豆瓣酱时要将蚕豆瓣制作成豆瓣曲，再添加调料进一步发酵，下列说法错误的是（ ） A. 沸水浸泡能杀死蚕豆细胞，减少有机物消耗 B. 面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养 C. 菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物 D. 豆瓣酱的制备主要是利用厌氧微生物发酵 9. 镰状细胞贫血是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因（HbA）突变为异常血红蛋白基因（Hbs）引起，它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测，主要原理：限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA，加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述不正确的是（　　） A. 提取胎儿DNA样品后，扩增DNA需要添加特定的引物 B. 若该胎儿检测结果为图乙-b，则其为镰状细胞贫血患者 C. 若缩短荧光标记序列，图乙-c中两个DNA条带间的距离会变小 D. 用限制酶MstⅡ处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者 10. 富含赖氨酸的蛋白质编码基因编码区共含678个碱基对，某生物兴趣小组利用了XbaI和SacI两种限制酶，运用农杆菌转化法，将该基因导入某植物叶片细胞，再经植物组织培养获得转基因植株。使转基因植物中赖氨酸的含量比对照组明显提高，如图所示是相关培育过程，下列说法错误的是（ ） A. Ti质粒是一种独立于拟核DNA之外，有自我复制能力的环状双链DNA分子 B. 图②过程采用农杆菌转化法，自然条件下农杆菌对大多数单子叶植物没有侵染能力 C. 植物组织培养过程中，培养基可添加卡那霉素或新霉素对转基因植株进行筛选 D. 利用SacI和HindⅢ切割重组质粒后能得到1500bp片段，则表明目的基因插入了质粒中 11. 图展示了一种改良后的克隆技术，甲和乙代表不同的物种。关于该克隆技术，下列说法正确的是（　　） A. 需要对物种甲和物种乙进行同期发情处理 B. 该技术的改良价值在于能提高囊胚的着床率 C. 图中的“发育”过程经历了桑葚胚和原肠胚等阶段 D. 宜选取囊胚③的滋养层细胞鉴定克隆动物的性别 12. 间充质干细胞（MSC）是一类起源于中胚层，在成年人的牙髓、脂肪等组织中存在的多能干细胞。MSC具有一种特殊的“内源性不对称分裂”增殖方式，其分裂产生的子细胞中只有一个会进一步分化，另一个则保持原状。此外，不同器官血管内皮细胞还能够与MSC互相识别，并介导后者穿透血管帮助修复受损的器官。下列叙述正确的是（ ） A. 培养MSC的培养基中应加入无机盐、水、琼脂和血清等 B. MSC分化为功能细胞来修复器官时，MSC数量会逐渐减少 C. MSC分裂、分化为功能细胞的过程中发生了基因重组 D. 利用MSC治疗受损器官时，可将培养的MSC通过静脉注入体内 13. 为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母（无法利用赖氨酸），其能在WL培养基上形成奶油状略带绿色、球形的菌落。下列相关说法正确的是（　　） 注：YPD培养基和WL培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL培养基含有指示剂溴甲酚绿 A. III属于选择培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种 B. 进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基 C. 从III中挑取菌种接种到IV上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母 D. I、II均为液体培养基，图中重复操作可提升酿酒酵母的酒精发酵能力 14. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 15. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. ①为脱分化过程，该过程需要光照 B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C. 3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 16. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞融合前应去除细胞壁 B. 高Ca2+—高pH溶液可促进细胞融合 C. 融合的细胞即为杂交细胞 D. 杂交细胞可能具有生长快速的优势 17. 用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TerR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述正确的是（ ） A. 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物一定相同 B. 若用PvuI酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，一定含有目的基因 C. 若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D. 若用SphI酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 18. 孤雌激活是指在无精子受精的情况下，通过化学、物理或遗传手段诱导卵母细胞发育为胚胎的技术。科研人员为获得仔猪，构想出的两条途径如下图。下列叙述正确的是（ ） A. ①处理可能为孤雌激活，⑥处理可能使用电刺激 B. ③过程需先对受体进行超数排卵和同期发情处理 C. ④过程需对受体使用免疫抑制剂以保证胚胎的发育 D. 仔猪Ⅰ和仔猪Ⅱ的性别不同，基因也完全不同 19. 甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图甲至少需用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶 B. 图乙进行琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率就越慢 C. 根据图乙HindIII酶切结果推测，该重组质粒长度可能是2000bp D. 根据图乙酶切结果推测，BamHI在重组质粒上有6个酶切位点 20. 宫颈癌是发生在女性宫颈的恶性肿瘤。大多数的宫颈癌都与一种叫作人乳头瘤病毒（HPV）的感染有关。为降低宫颈癌治疗的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC）,其释放的细胞毒素类药物作用于细胞周期的关键节点，下图是ADC作用的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 宫颈癌的单克隆抗体可使癌细胞裂解死亡 B. ADC中的药物部分可以是DNA损伤剂和抑制纺锤体形成的药剂 C. 该宫颈癌ADC还可以用于乳腺癌患者的治疗 D. ADC在溶酶体中较稳定，在内环境中稳定性较低 21. 研究人员用X基因和pBR322质粒构建基因表达载体，图中X基因转录方向为从左向右。对受体细胞大肠杆菌（对四环素和氯霉素均没有抗性）进行转化和筛选，导入基因表达载体过程中，受体菌存在未导入质粒、导入空质粒（不含目的基因的pBR322质粒）或导入重组质粒的情况。下列叙述正确的是（ ） A. 用BamHI和SalI同时切割后X基因不能正确插入pBR322质粒 B. 培养基添加氯霉素可将未导入质粒和导入质粒的受体菌分离 C. 该实验也可以使用没有复制原点的质粒与X基因构建基因表达载体 D. 用X基因的引物进行PCR扩增可对转化后的大肠杆菌进行个体生物学水平鉴定 22. 研究人员欲将某动物体内基因X导人大肠杆菌的质粒中保存.质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述正确的是（ ） A. 可使用HindⅢ和XbaⅠ同时切割质粒和目的基因X B. 图中目的基因X与质粒经相应酶切后无法进行连接 C. 含基因X的大肠杆菌会被培养基中的氨苄青霉素杀死 D. 导入该大肠杆菌中的基因X可稳定存在，但无法表达 23. 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ） A. ①+③ B. ③+④ C. ③+② D. ①+④ 24. 在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A. 相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B. 发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C. 发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D. 发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 25. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　） 注：+表示该孔中存在对应蛋白的抗体，-表示没有对应抗体 A. 应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间 B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML 蛋白免疫而获得 C. 步骤 2 的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D. 应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 二、非选择题 26. 古代劳动人民意外发现在特殊环境下生产得到的食物别有风味，并将这些生产环节口耳相传，就得到了我们现在美味的发酵食品。 （1）泡菜的酿造一般用到的菌种为________，其代谢类型为________。从结构方面分析，其与酵母菌的本质区别是________。 （2）工厂进行米酒生产一般需要进行包括“原料准备→原料蒸熟→冷却→加酒曲→密封发酵→检测成品”等几个阶段。 ①生产中冷却操作的目的是__________。 ②若酿造不成功，最终产生的甜酒会有酸味，在变酸的甜酒表面可以观察到什么现象？_________。请描述该过程酵母菌含量变化____________。 27. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。 回答下列问题： （1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。 （2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。 （3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。 （4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。 （5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。 28. 如图是构建口蹄疫病毒2A肽（FMDV2A）介导的白细胞介素（hIL—2）基因和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因乳腺特异性表达载体，并验证其在乳腺上皮细胞中表达的主要过程，以期为提高乳腺生物反应器生产药物的效能奠定基础。请回答下列问题： （1）在图示操作过程中，步骤_______是基因工程的核心步骤。 （2）过程①应选用的引物是______，该过程除加入引物外，还需要加入_______。 （3）下列4种引物可用于过程①的是_______。 P1：5′-CCCTCGAGATGTACAGGATCCTGTACAT-3′ P2：5'-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3' P3：5'-CCGGGCCCATGTACAGGATGCAACTCCT-3' P4：5′-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATCGATC-3' （4）完整的基因表达载体通常需要包括目的基因、标记基因、启动子、终止子等，其中启动子的作用是_______。 （5））过程④应先将处理后的乳腺上皮细胞置于含________的培养液中初选；再将选出的细胞放在荧光显微镜下观察，能够_______的细胞是符合要求的 （6）研究人员试图以成功导入目的基因的奶牛乳腺上皮细胞作为供体，培养转基因克隆胚胎，主要涉及的现代生物技术有___________（答两点）。 29. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②筛选出的细胞为________，经过程②筛选的细胞还需进行过程③_______________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （2）过程④是将细胞毒素类药物与能特异性识别HER2抗原的单克隆抗体结合，与传统化疗药物相比，其优点是_______________。 （3）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。 ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明__________。 30. Ⅰ、下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： Ⅱ、银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题： 外植体愈伤组织试管苗植株 （1）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类-物理法和化学法，其中化学法包括_____和_____。 （2）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含_____条染色体，属于_____倍体植株。 （3）研究表明，选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成_____的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在_____时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用_____多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 （4）为获得银杏的次生代谢产物，_____（“需要”或“不需要”）走完上述流程图的全过程。 （5）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是_____胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期半期考试生物试题 一、单选题（每题2分，共50分） 1. 科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ） A. 超数排卵 B. 精子获能处理 C. 细胞核移植 D. 胚胎培养 【答案】C 【解析】 【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。 （1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 （2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法；②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。 （3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 【详解】由题干信息可知，该过程通过体外受精获得胚胎，再通过胚胎移植，使长角羚羊成功妊娠并产仔，因此需要进行超数排卵、精子获能处理，并对获得的受精卵进行胚胎培养；由于该过程为有性生殖，因此不需要涉及细胞核移植，所以C正确、ABD错误。 故选C。 2. 某团队为提升猪α干扰素（PoIFN－α）的抗病毒活性，针对其8个关键氨基酸位点进行改造，构建突变体PoIFN－α8s。测序显示，改造后的DNA非模板链序列第5位点由“TAC”突变为“TGC”，导致编码的氨基酸由酪氨酸变为半胱氨酸，其余位点突变未改变氨基酸种类。下列分析错误的是（ ） A. 提升猪α干扰素的抗病毒活性是通过改造基因来完成的 B. 第5位点突变可能导致猪α干扰素的空间结构发生改变 C. 密码子AUG、ACG决定的氨基酸依次是酪氨酸、半胱氨酸 D. 其余位点突变未改变氨基酸种类与密码子的简并性有关 【答案】C 【解析】 【分析】转录是以DNA的一条链为模板根据碱基互补配对形成RNA的过程。mRNA上每三个相邻的碱基决定一个氨基酸，为一个密码子，即密码子中碱基与DNA模板链中碱基互补。 【详解】A、因为对编码猪α干扰素的基因进行改造，从而构建突变体提升其抗病毒活性，所以提升猪α干扰素的抗病毒活性是通过改造基因来完成的，A正确； B、第5位点氨基酸由酪氨酸变为半胱氨酸，氨基酸的改变可能会影响蛋白质的空间结构，所以第5位点突变可能导致猪α干扰素的空间结构发生改变，B正确； C、DNA非模板链第5位点由“TAC”突变为“TGC”，则模板链由“ATG”突变为“ACG”，转录形成的密码子由“UAC”变为“UGC”，所以密码子“UAC”决定的是酪氨酸，“UGC”决定的氨基酸是半胱氨酸，C错误； D、由于密码子具有简并性，即一种氨基酸可能由多种密码子决定，所以其余位点突变未改变氨基酸种类与密码子的简并性有关，D正确。 故选C。 3. 细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞 B. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞 C. 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D. 采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。 【详解】A、胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A错误； B、将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞，B正确； C、融合细胞有具有同种核的融合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、囊胚细胞已开始分化，D错误。 故选B。 4. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B. 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C. 培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D. 可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件（1）营养条件。（2）无菌、无毒的环境：培养液和培养用具灭菌处理、无菌环境下操作、定期更换培养液。（3）适宜的温度、pH和渗透压。（4）气体环境：95%空气和5%CO2。 【详解】A、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行核移植操作，A正确； B、卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误； C、在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C正确； D、PCR技术可以扩增特定的DNA片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA片段，就可以鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。 故选B。 5. 香豆素是一类结构多样的天然产物，广泛应用于制药、化妆品等工业。在香豆素的合成途径中存在一种限速酶，是其合成速率较低的原因，科研人员对该酶进行改造，香豆素的合成速率提高了5至22倍。在生产中需动态调控，及时排出产物香豆素。下列叙述错误的是（　　） A. 上述改造限速酶的过程利用了蛋白质工程 B. 可直接对限速酶的空间结构或氨基酸顺序进行改造 C. 该技术的实质是基因突变，即对限速酶的基因序列定向改造 D. 限速酶活性提高可能导致代谢中间产物积累，导致代谢紊乱 【答案】B 【解析】 【详解】A、改造限速酶以获得符合预期功能的蛋白质，属于蛋白质工程的应用范畴，A正确； B、蛋白质工程的操作对象是基因，无法直接对限速酶的空间结构或氨基酸序列进行改造，改造后的基因才可稳定遗传并表达出目标酶，B错误； C、该技术对控制限速酶合成的基因进行定向改造，本质是基因中碱基对的增添、缺失或替换，属于基因突变，C正确； D、限速酶活性大幅提高后，若后续代谢步骤的反应速率未同步提升，会导致代谢中间产物大量积累，引发代谢紊乱，D正确。 6. 下列有关生物工程的叙述，错误的有（　　） ①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能③利用核移植可以培养试管婴儿④PCR技术需要利用限制性内切核酸酶打开DNA双链⑤利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项 【答案】D 【解析】 【详解】①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，可保证目的基因在受体细胞中稳定存在、表达并遗传，①正确； ②蛋白质工程的操作对象是基因，需通过改造或合成基因间接改造蛋白质，不能直接改造蛋白质结构，②错误； ③试管婴儿培育采用体外受精、胚胎移植技术，属于有性生殖；核移植是克隆动物的技术，属于无性生殖，不能用于培养试管婴儿，③错误； ④PCR技术通过高温加热使DNA双链解旋，不需要限制酶，限制酶的作用是切割DNA的磷酸二酯键，④错误； ⑤单克隆抗体制备时，先通过细胞融合技术获得杂交瘤细胞，再通过动物细胞培养技术扩增获得大量抗体，⑤正确； ⑥植物茎尖培养脱毒苗时，脱分化阶段不需要光照，再分化阶段才需要光照，并非全程需要光照，⑥错误。 ABC不符合题意，D符合题意。 7. 乳腺生物反应器是动物基因工程的重要应用方向。我国科研人员成功培育出泌乳期能分泌人凝血因子Ⅷ的转基因牛，为治疗血友病提供了新思路。下列关于乳腺生物反应器培育的叙述，错误的是（　　） A. 可采用显微注射技术将重组载体导入牛的乳腺细胞中 B. 需要将人凝血因子Ⅷ基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组 C. 相比于工程菌生产凝血因子Ⅷ，乳腺生物反应器生产的凝血因子Ⅷ具有更完善的翻译后修饰，生物活性更高 D. 为了获得雌性转基因牛，可在胚胎移植前，从囊胚中取滋养层细胞进行性别鉴定 【答案】A 【解析】 【详解】A、可采用显微注射技术将重组载体导入动物的受精卵中，而不是直接导入乳腺细胞，高度分化的乳腺细胞全能性受限制，不能作为该过程的受体细胞，A错误； B、将人凝血因子Ⅷ基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，才能让目的基因仅在乳腺细胞中特异性表达，使泌乳期牛的乳汁中含人凝血因子Ⅷ，B正确； C、生产药用蛋白的工程菌多为原核生物，无内质网、高尔基体等可对分泌蛋白进行翻译后修饰的细胞器，乳腺细胞是真核细胞，具备完善的蛋白质翻译后修饰系统，可对凝血因子Ⅷ进行加工修饰，因此产物生物活性更高，C正确； D、囊胚的滋养层细胞将来发育为胎盘和胎膜的一部分，不会影响胎儿发育，因此胚胎移植前可取滋养层细胞进行性别鉴定，筛选出符合要求的雌性胚胎（因为只有雌性动物能分泌乳汁），D正确。 8. 豆瓣酱是我国地方特色调味品，生产豆瓣酱时要将蚕豆瓣制作成豆瓣曲，再添加调料进一步发酵，下列说法错误的是（ ） A. 沸水浸泡能杀死蚕豆细胞，减少有机物消耗 B. 面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养 C. 菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物 D. 豆瓣酱的制备主要是利用厌氧微生物发酵 【答案】D 【解析】 【详解】A、沸水浸泡能使蚕豆细胞死亡，从而减少细胞呼吸等对有机物的消耗，A正确； B、面粉中含有淀粉等营养物质，可为菌种的快速繁殖和生长提供营养，B正确； C、在发酵过程中需要将蛋白质和淀粉等分解，所以菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物，C正确； D、从图中可以看出，在制作豆瓣曲过程中有翻拌操作，且整个过程不是完全密封的，说明主要利用的是好氧微生物发酵，而不是厌氧微生物发酵，D错误。 故选D。 9. 镰状细胞贫血是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因（HbA）突变为异常血红蛋白基因（Hbs）引起，它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测，主要原理：限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA，加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述不正确的是（　　） A. 提取胎儿DNA样品后，扩增DNA需要添加特定的引物 B. 若该胎儿检测结果为图乙-b，则其为镰状细胞贫血患者 C. 若缩短荧光标记序列，图乙-c中两个DNA条带间的距离会变小 D. 用限制酶MstⅡ处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者 【答案】C 【解析】 【详解】A、提取胎儿DNA样品后，扩增DNA需要添加特定的引物，两种引物是根据目的两端的核苷酸序列合成的，A正确； B、据图分析可知，若出现图乙一aDNA条带，则表示含有正常血红蛋白基因（HbA）；若出现图乙-bDNA条带，则表示含有异常血红蛋白基因（HbS）；若出现图乙-cDNA条带，则表示含有异常血红蛋白基因（Hbs）和正常血红蛋白基因（HbA）。因此若某胎儿检测结果为图乙-b，则该胎儿为镰状细胞贫血患者，B正确； C、凝胶电泳中，DNA分子量越大迁移速率越慢，因此图乙-c中两个DNA条带间的距离与切割后DNA分子量的大小有关，与荧光标记序列长短无关，C错误； D、据图可知，正常血红蛋白基因（HbA）中含有限制酶MstⅡ的酶切位点，而异常血红蛋白基因（Hbs）中没有，用限制酶MstII处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者，D正确。 故选C。 10. 富含赖氨酸的蛋白质编码基因编码区共含678个碱基对，某生物兴趣小组利用了XbaI和SacI两种限制酶，运用农杆菌转化法，将该基因导入某植物叶片细胞，再经植物组织培养获得转基因植株。使转基因植物中赖氨酸的含量比对照组明显提高，如图所示是相关培育过程，下列说法错误的是（ ） A. Ti质粒是一种独立于拟核DNA之外，有自我复制能力的环状双链DNA分子 B. 图②过程采用农杆菌转化法，自然条件下农杆菌对大多数单子叶植物没有侵染能力 C. 植物组织培养过程中，培养基可添加卡那霉素或新霉素对转基因植株进行筛选 D. 利用SacI和HindⅢ切割重组质粒后能得到1500bp片段，则表明目的基因插入了质粒中 【答案】C 【解析】 【分析】题图分析：该质粒上含有三个限制酶切点，科学家利用如图所示质粒，以及XbaⅠ和SacⅠ两种限制酶，运用农杆菌转化法，将目的基因导入受体细胞，说明目的基因插入的位置为1900bp所在位置，即目的基因片段替代了质粒中1900bp片段。若用SacⅠ和HindⅢ切割重组质粒后，会得到822+678=1500bp的新片段。 【详解】A、Ti质粒是一种独立于拟核DNA之外，有自我复制能力的环状双链DNA分子，经常作为基因工程中目的基因的运载体，A正确； B、图中②过程采用农杆菌转化法，农杆菌易侵染双子叶植物和裸子植物，自然条件下农杆菌对大多数单子叶植物没有侵染能力，B正确； C、目的基因插入两个限制酶酶切位点之间，对卡那霉素抗性基因和新霉素抗性基因都无影响。之所以不能用卡那霉素筛选，是因为插入植物细胞染色体上的是质粒的T-DNA片段，而卡那霉素抗性基因不在此片段上，导入成功的植物细胞对卡那霉素无抗性，即植物组织培养过程中，培养基可添加新霉素对转基因植株进行筛选，C错误； D、由于重组质粒上移除1900bp而补充了目的基因的678个碱基对，加上未移除的822bp，所以用SacⅠ和HindⅢ切割重组质粒后，可得到822+678=1500bp的新片段，据此可确定目的基因正确插入了质粒，D正确。 故选C。 11. 图展示了一种改良后的克隆技术，甲和乙代表不同的物种。关于该克隆技术，下列说法正确的是（　　） A. 需要对物种甲和物种乙进行同期发情处理 B. 该技术的改良价值在于能提高囊胚的着床率 C. 图中的“发育”过程经历了桑葚胚和原肠胚等阶段 D. 宜选取囊胚③的滋养层细胞鉴定克隆动物的性别 【答案】B 【解析】 【详解】A、该技术中只有接受胚胎移植的受体乙需要进行同期发情处理，物种甲仅提供体细胞核，不需要做同期发情处理，A错误； B、该改良技术将核移植获得的甲来源的内细胞团，与乙来源的滋养层重构为新囊胚；滋养层和受体乙遗传背景一致，可降低免疫排斥，有效提高囊胚的着床率，这是该技术的改良价值，B正确； C、图中两次“发育”的终点都是囊胚（①、②），仅发育到囊胚阶段，还没有经历原肠胚阶段，C错误； D、囊胚③的滋养层细胞来自物种乙，克隆动物的核遗传物质来自甲，因此不能用该滋养层细胞鉴定克隆动物的性别，应选取囊胚①的滋养层细胞，D错误。 12. 间充质干细胞（MSC）是一类起源于中胚层，在成年人的牙髓、脂肪等组织中存在的多能干细胞。MSC具有一种特殊的“内源性不对称分裂”增殖方式，其分裂产生的子细胞中只有一个会进一步分化，另一个则保持原状。此外，不同器官血管内皮细胞还能够与MSC互相识别，并介导后者穿透血管帮助修复受损的器官。下列叙述正确的是（ ） A. 培养MSC的培养基中应加入无机盐、水、琼脂和血清等 B. MSC分化为功能细胞来修复器官时，MSC数量会逐渐减少 C. MSC分裂、分化为功能细胞的过程中发生了基因重组 D. 利用MSC治疗受损器官时，可将培养的MSC通过静脉注入体内 【答案】D 【解析】 【分析】细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：基因的选择性表达。 【详解】A、动物细胞培养通常用液体培养基，无需加入琼脂，A错误； B、由题干“MSC分裂产生的子细胞中只有一个会进一步分化，另一个则保持原状”推测，由MSC的特殊分裂方式可知，一部分子细胞会保持干细胞的特性，因此在适当条件下，MSC数量不会逐渐减少，B错误； C、基因重组通常发生在有性生殖过程中（如减数分裂），而MSC的分裂和分化过程不涉及基因重组，C错误； D、MSC可以在血管内皮细胞的辅助下穿透血管帮助修复受损的器官，因此利用MSC治疗受损器官时，可将培养的MSC通过静脉注入体内，D正确。 故选D。 13. 为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母（无法利用赖氨酸），其能在WL培养基上形成奶油状略带绿色、球形的菌落。下列相关说法正确的是（　　） 注：YPD培养基和WL培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL培养基含有指示剂溴甲酚绿 A. III属于选择培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种 B. 进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基 C. 从III中挑取菌种接种到IV上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母 D. I、II均为液体培养基，图中重复操作可提升酿酒酵母的酒精发酵能力 【答案】B 【解析】 【详解】A、WL培养基Ⅲ含有指示剂溴甲酚绿，且优良酿酒酵母能在其上形成奶油状略带绿色、球形的菌落，它属于鉴别培养基，而非选择培养基，A错误； B、进行酒精耐受力检测时，需要重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基，以此来筛选出酒精耐受力强的酵母菌，B正确； C、优良酿酒酵母无法利用赖氨酸，而培养基Ⅳ是以赖氨酸作为唯一氮源的培养基，因此优良酿酒酵母无法在Ⅳ上生长，C错误； D、YPD培养基Ⅰ一般为固体培养基，YPD培养基Ⅱ为液体培养基；重复操作是为了筛选出更符合要求的酵母菌，而不是直接提升其酒精发酵能力，D错误。 故选B。 14. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 【答案】C 【解析】 【分析】由图可知，所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂。图中②筛选的是不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验。 【详解】A、平板划线法无需稀释，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选C。 15. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A. ①为脱分化过程，该过程需要光照 B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C. 3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 【答案】D 【解析】 【详解】A、在脱分化过程中，1号培养基中的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A错误； B、愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞的分化过程是有丝分裂，所以不会发生基因重组，B错误。 C、3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于1，C错误； D、百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该研究中的外植体，D正确。 16. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞融合前应去除细胞壁 B. 高Ca2+—高pH溶液可促进细胞融合 C. 融合的细胞即为杂交细胞 D. 杂交细胞可能具有生长快速的优势 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、在细胞融合前，必须先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，再诱导原生质体融合，A正确； B、人工诱导原生质体融合有物理法和化学法，用高Ca2+—高pH溶液可促进细胞融合，B正确； C、融合的细胞中有人参根-人参根细胞、人参根-胡萝卜根细胞、胡萝卜根-胡萝卜根细胞，只有人参根-胡萝卜根细胞才是杂交细胞，C错误； D、杂交细胞含两种细胞的遗传物质，可能具有生长快速的优势，D正确。 故选C。 17. 用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TerR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述正确的是（ ） A. 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物一定相同 B. 若用PvuI酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，一定含有目的基因 C. 若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D. 若用SphI酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 【答案】C 【解析】 【分析】图中质粒内，氨苄青霉素抗性基因（AmpR）内含有ScaI和PvuI的酶切位点，四环素抗性基因（TetR）内含有HindIII、SphI和SalI的酶切位点。 【详解】A、若用HindⅢ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，转录的产物可能不同，A错误。 B、若用PvuⅠ酶切，重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因（TetR），因此在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因，B错误； C、若用SphI酶切，由于重组质粒和普通质粒的碱基对数不同，因此可通过 DNA 凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否，C正确； D、SphⅠ的酶切位点位于四环素抗性基因中，若用SphⅠ酶切，重组质粒中含氨苄青霉素抗性基因（AmpR），因此携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）的培养基中能形成菌落，在含Tet的培养基中不能形成菌落，D错误。 故选C。 18. 孤雌激活是指在无精子受精的情况下，通过化学、物理或遗传手段诱导卵母细胞发育为胚胎的技术。科研人员为获得仔猪，构想出的两条途径如下图。下列叙述正确的是（ ） A. ①处理可能为孤雌激活，⑥处理可能使用电刺激 B. ③过程需先对受体进行超数排卵和同期发情处理 C. ④过程需对受体使用免疫抑制剂以保证胚胎的发育 D. 仔猪Ⅰ和仔猪Ⅱ的性别不同，基因也完全不同 【答案】A 【解析】 【详解】A、结合题图信息判断，①对次级卵母细胞进行的处理可能是孤雌激活，⑥是重组细胞逐渐发育成胚胎的过程，可用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等方式处理激活重构胚，A正确； B、③过程需对受体进行同期发情处理，不需要进行超数排卵处理，B错误； C、经同期发情处理的受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应，因此无须对受体使用免疫抑制剂，C错误； D、仔猪Ⅰ和仔猪Ⅱ的性别不同，但细胞质基因相同，D错误。 故选A。 19. 甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图甲至少需用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶 B. 图乙进行琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率就越慢 C. 根据图乙HindIII酶切结果推测，该重组质粒长度可能是2000bp D. 根据图乙酶切结果推测，BamHI在重组质粒上有6个酶切位点 【答案】D 【解析】 【分析】图甲中①是逆转录过程，②是经过复制形成双链cDNA，③是将R蛋白基因和质粒结合形成基因表达载体，图乙是用限制酶切割后形成的电泳图。 【详解】A、图甲获得重组质粒过程，需要逆转录、形成双链cDNA分子以及R蛋白基因与质粒的重组，所以至少需要应用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶，A正确； B、待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率，DNA分子越小，迁移的速率越快，DNA分子越大， 迁移速率越慢，B正确； CD、用Hind III将质粒切割后形成了200bp、400bp和1400bp共3个片段，说明Hind III在重组质粒上有3个酶切位点，由此可知该重组质粒长度可能是200bp+400bp+1400bp=2000bp，用Hind III和Bam HI将质粒切割后形成了200bp、420bp、560bp的片段，2000=420×2+560+200×3，所以一共形成了6个片段，因此共有6个酶切位点，因此Bam HI在重组质粒上有6-3=3个酶切位点，C正确、D错误。 故选D。 20. 宫颈癌是发生在女性宫颈的恶性肿瘤。大多数的宫颈癌都与一种叫作人乳头瘤病毒（HPV）的感染有关。为降低宫颈癌治疗的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC）,其释放的细胞毒素类药物作用于细胞周期的关键节点，下图是ADC作用的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 宫颈癌的单克隆抗体可使癌细胞裂解死亡 B. ADC中的药物部分可以是DNA损伤剂和抑制纺锤体形成的药剂 C. 该宫颈癌ADC还可以用于乳腺癌患者的治疗 D. ADC在溶酶体中较稳定，在内环境中稳定性较低 【答案】B 【解析】 【详解】A、从图中及相关知识可知，单克隆抗体只是起到识别并结合癌细胞的作用，并不会使癌细胞裂解死亡，A错误； B、DNA 损伤剂可作用于细胞周期的间期（DNA 复制期），阻止癌细胞DNA复制，抑制增殖； 抑制纺锤体形成的药剂可作用于细胞周期的分裂期（前期），阻止纺锤体形成，使癌细胞无法完成分裂，最终凋亡。 两类药剂均作用于细胞周期关键节点，符合 ADC 药物的设计原理，B正确； C、ADC的抗体部分具有高度特异性，仅识别宫颈癌细胞特有的抗原，无法识别乳腺癌细胞的抗原，因此不能用于乳腺癌的治疗，体现了单克隆抗体的靶向性，C错误； D、由图可知，ADC在溶酶体中会被分解从而释放药物，说明在溶酶体中稳定性不高，且ADC在体内发挥作用，在内环境中也应具有一定的稳定性，D错误。 21. 研究人员用X基因和pBR322质粒构建基因表达载体，图中X基因转录方向为从左向右。对受体细胞大肠杆菌（对四环素和氯霉素均没有抗性）进行转化和筛选，导入基因表达载体过程中，受体菌存在未导入质粒、导入空质粒（不含目的基因的pBR322质粒）或导入重组质粒的情况。下列叙述正确的是（ ） A. 用BamHI和SalI同时切割后X基因不能正确插入pBR322质粒 B. 培养基添加氯霉素可将未导入质粒和导入质粒的受体菌分离 C. 该实验也可以使用没有复制原点的质粒与X基因构建基因表达载体 D. 用X基因的引物进行PCR扩增可对转化后的大肠杆菌进行个体生物学水平鉴定 【答案】B 【解析】 【详解】A、在构建表达载体时，使用双酶切割能使目的基因正确插入质粒中，故用BamHI和SalI同时切割有利于X基因正确插入pBR322质粒，A错误； B、未导入质粒的受体菌不能在含有氯霉素的培养基上生长，培养基添加氯霉素可筛选出导入质粒的受体菌，B正确； C、没有复制原点的质粒没有自我复制能力，无法在细胞内扩增，C错误； D、在鉴定导入重组质粒的受体菌时，重组质粒中含有X基因，因此可用X基因的引物来扩增，若扩增出目的产物，则说明受体菌含有重组质粒，这属于分子水平上的鉴定，D错误。 故选B。 22. 研究人员欲将某动物体内基因X导人大肠杆菌的质粒中保存.质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述正确的是（ ） A. 可使用HindⅢ和XbaⅠ同时切割质粒和目的基因X B. 图中目的基因X与质粒经相应酶切后无法进行连接 C. 含基因X的大肠杆菌会被培养基中的氨苄青霉素杀死 D. 导入该大肠杆菌中的基因X可稳定存在，但无法表达 【答案】D 【解析】 【详解】A、基因X上没有XbaⅠ的切割位点，A错误； B、XbaⅠ和SpeⅠ属于同尾酶，虽然切割位点不同，但切割后的黏性末端相同，可以连接，B错误； C、质粒上含有氨苄青霉素基因，成功导入质粒的大肠杆菌因获得抗性，不会被氨苄青霉素杀死，C错误； D、由于质粒上没有启动子和终止子，导入的目的基因X可以随质粒复制而复制，但无法表达。导入大肠杆菌的目的主要是为了保存该基因。如果将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，这样的细菌群体就是基因文库。D正确。 故选D。 23. 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ） A. ①+③ B. ③+④ C. ③+② D. ①+④ 【答案】D 【解析】 【分析】根据图示中引物的位置可知，引物①扩增的片段含有启动子和HMA3基因，引物③扩增的片段不含启动子，引物②扩增的片段既含有启动子，又含有HMA3基因序列。 【详解】图示中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中，若要检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因和高效启动子，需要检测是否含有高效启动子序列和HMA3基因序列，可根据PCR产物的片段大小判断是否含有外源HMA3基因序列，应选择的引物组合是①+④，即D正确，ABC错误。 故选D。 24. 在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A. 相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B. 发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C. 发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D. 发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程：（1）定义：利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品；主要为微生物细胞本身或者其代谢产物。（2）分离、提纯产物：产品若是微生物细胞，在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥；产品若是微生物代谢物，则根据产物的性质采取 适当的提取、分离和纯化措施。 【详解】A、黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧，相同菌体密度下，菌球体越大越不利于菌体与氧气接触，柠檬酸产生速率越慢，A正确； B、菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制，发酵中期添加一定量的硫酸铵，提高铵离子浓度，菌体内可提高柠檬酸产量，B正确； C、发酵过程中pH下降导致细菌生命活动所必须的酶失活，可抑制大部分细菌的生长，C正确； D、发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行分离、纯化、浓缩、干燥等一系列操作后才能获得柠檬酸产品，D错误。 故选D。 25. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　） 注：+表示该孔中存在对应蛋白的抗体，-表示没有对应抗体 A. 应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间 B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML 蛋白免疫而获得 C. 步骤 2 的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D. 应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 【答案】D 【解析】 【详解】A、应使用 PML蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间，目的是获得更多的能产生PML蛋白抗体的B淋巴细胞，A错误； B、W细胞是先用 PML蛋白免疫而获得相应的B淋巴细胞，后通过筛选提取能产生单一抗体的B淋巴细胞，B错误； C、由图可知，步骤1是诱导W细胞与骨髓瘤细胞融合，步骤2是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，C错误； D、根据电泳结果可知，应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体，因为孔2中的细胞能特异性产生高纯度PML蛋白，D正确。 二、非选择题 26. 古代劳动人民意外发现在特殊环境下生产得到的食物别有风味，并将这些生产环节口耳相传，就得到了我们现在美味的发酵食品。 （1）泡菜的酿造一般用到的菌种为________，其代谢类型为________。从结构方面分析，其与酵母菌的本质区别是________。 （2）工厂进行米酒生产一般需要进行包括“原料准备→原料蒸熟→冷却→加酒曲→密封发酵→检测成品”等几个阶段。 ①生产中冷却操作的目的是__________。 ②若酿造不成功，最终产生的甜酒会有酸味，在变酸的甜酒表面可以观察到什么现象？_________。请描述该过程酵母菌含量变化____________。 【答案】（1） ①. 乳酸菌 ②. （异养）厌氧型 ③. 乳酸菌无以核膜为界的细胞核 （2） ①. 高温会杀死菌种，导致酿造失败 ②. 在甜酒表面可以观察到产生一层特有的菌膜 ③. 先增加后减少 【解析】 【小问1详解】 泡菜的酿造用到乳酸菌，其中包括乳酸杆菌和乳酸链球菌；乳酸菌是异养厌氧细菌；从结构方面分析，乳酸菌与酵母菌的本质区别是（乳酸菌）无以核膜为界限的细胞核，为原核生物。 【小问2详解】 ①高温会杀死菌种，导致酿造失败，因此需要冷却操作。 ②酒精产生酸味一般是因为有氧环境有利于醋酸菌的生长，在甜酒表面可以观察到产生一层特有的菌膜。酵母菌开始进行有氧呼吸从而大量繁殖，但后续因为酒精的产生以及醋酸菌的有氧呼吸产生大量醋酸，抑制了酵母菌的繁殖，进而数量下降，即该过程中酵母菌含量变化为先增加后减少。 27. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。 回答下列问题： （1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。 （2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。 （3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。 （4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。 （5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。 【答案】 ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 琼脂 ③. 选择 ④. 104 ⑤. S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长 ⑥. 取淤泥加入无菌水，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后计数 ⑦. 水、碳源、氮源和无机盐 【解析】 【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。 常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。 常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。 【详解】（1）常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶，乙为固体培养基，故需要加入Y琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培养基。 （2）若要在每个平板上涂布100μL稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为2×107÷1000×100÷200=1×104倍。 （3）当培养基中的S超过某一浓度后，可能会抑制菌株的生长，从而造成其对S的降解量下降。 （4）要测定淤泥中能降解S的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培养基上，培养后进行计数。 （5）甲和乙培养基均含有水、无机盐、碳源、氮源。 【点睛】培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，接种工具应该进行灼烧灭菌，玻璃器皿等耐高温的、需要干燥的物品，常采用干热灭菌。 28. 如图是构建口蹄疫病毒2A肽（FMDV2A）介导的白细胞介素（hIL—2）基因和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因乳腺特异性表达载体，并验证其在乳腺上皮细胞中表达的主要过程，以期为提高乳腺生物反应器生产药物的效能奠定基础。请回答下列问题： （1）在图示操作过程中，步骤_______是基因工程的核心步骤。 （2）过程①应选用的引物是______，该过程除加入引物外，还需要加入_______。 （3）下列4种引物可用于过程①的是_______。 P1：5′-CCCTCGAGATGTACAGGATCCTGTACAT-3′ P2：5'-CCATCGATTCAAGTTAGTGTTGAGATGA-3' P3：5'-CCGGGCCCATGTACAGGATGCAACTCCT-3' P4：5′-CCGAGCTCAGTGTTGAGATGAATCGATC-3' （4）完整的基因表达载体通常需要包括目的基因、标记基因、启动子、终止子等，其中启动子的作用是_______。 （5））过程④应先将处理后的乳腺上皮细胞置于含________的培养液中初选；再将选出的细胞放在荧光显微镜下观察，能够_______的细胞是符合要求的 （6）研究人员试图以成功导入目的基因的奶牛乳腺上皮细胞作为供体，培养转基因克隆胚胎，主要涉及的现代生物技术有___________（答两点）。 【答案】（1）② （2） ①. 引物2和引物3 ②. 耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、原料（dNTP）等 （3）P1和P2 （4）RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录为mRNA （5） ①. 新霉素 ②. 发绿色荧光 （6）动物细胞培养技术、体细胞核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植（任答两点） 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，即步骤②。 【小问2详解】 引物需要与模板的3'端结合，驱动子链的复制，且一对引物方向通常是相反的，据图可知，要步骤①要扩增目的基因，应保证引物在其两端，故选择的是引物2和引物3；PCR扩增过冲除加入引物外，还需加入耐高温的TaqDNA聚合酶、原料等。 【小问3详解】 为避免反向连接和自身环化，构建基因表达载体时通常需要两种酶进行，图示质粒上有四种酶的酶切位点，结合目的基因、质粒及最终重组质粒的位点可知，限制酶应选择XhoI和ClaI，根据两种酶的识别序列可知，应选择P1和P2。 【小问4详解】 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录为mRNA。 【小问5详解】 据图可知，质粒和重组质粒中的标记基因是NeoR，因此将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养；利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中是否有绿色荧光，能够发绿色荧光的细胞是符合要求的。 【小问6详解】 研究人员试图以转染成功的奶牛乳腺上皮细胞作为供体，培养转基因克隆胚胎，主要涉及的现代生物技术有：动物细胞培养技术（培养奶牛乳腺上皮细胞）、体细胞核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植等。 29. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②筛选出的细胞为________，经过程②筛选的细胞还需进行过程③_______________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （2）过程④是将细胞毒素类药物与能特异性识别HER2抗原的单克隆抗体结合，与传统化疗药物相比，其优点是_______________。 （3）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。 ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明__________。 【答案】（1） ①. HER2 ②. 杂交瘤细胞 ③. 克隆化培养和抗体检测 （2）可实现对肿瘤细胞的精准杀伤 （3） ①. 等剂量的磷酸缓冲液 ②. 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好 【解析】 【小问1详解】 在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用HER2对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②筛选出的细胞为杂交瘤细胞，过程②筛选的细胞还需通过过程③克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，最终筛选得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 【小问2详解】 过程④是将细胞毒素类药物与能特异性识别HER2抗原的单克隆抗体结合，与传统化疗药物相比，其优点是可实现对肿瘤细胞的精准杀伤，降低药物的副作用。 【小问3详解】 ①该实验的自变量为处理条件的不同，实验组的处理条件依次为HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物，这些都是治疗癌细胞的药物，空白对照组应注射等剂量的磷酸缓冲液，排除缓冲剂的影响。 ②根据实验结果可知，抗HER2-ADC组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。 30. Ⅰ、下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： Ⅱ、银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题： 外植体愈伤组织试管苗植株 （1）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类-物理法和化学法，其中化学法包括_____和_____。 （2）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含_____条染色体，属于_____倍体植株。 （3）研究表明，选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成_____的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在_____时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用_____多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 （4）为获得银杏的次生代谢产物，_____（“需要”或“不需要”）走完上述流程图的全过程。 （5）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是_____胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 【答案】（1） ①. PEG融合法 ②. 高Ca2+-高pH融合法 （2） ①. 38 ②. 四 （3） ①. 愈伤组织 ②. 消毒 ③. 无菌水 （4）不需要 （5）低氧 【解析】 【小问1详解】 人工诱导原生质体融合的方法很多，基本可分为两大类，物理法和化学法，其中化学法主要使用PEG（或聚乙二醇）融合法和高Ca2+-高pH融合法。 【小问2详解】 “矮牵牛——粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含有的染色体数目是矮牵牛和粉蓝烟草的体细胞中染色体数目之和，为14+24=38，属于异源四倍体植株。 【小问3详解】 选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，因为叶片细胞分化程度高，脱分化形成愈伤组织的难度较大。选材用的外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在消毒时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用无菌水多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 【小问4详解】 为获得银杏的次生代谢产物，只需要培养到愈伤组织阶段就可以，不需要走完如上述流程图的全过程。 【小问5详解】 研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能的原因是在低氧胁迫条件下，可诱导细胞产生次生代谢物，因而产量上升。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $