精品解析：四川自贡市荣县四川省荣县中学校2025-2026学年高二下学期4月巩固练习生物试题

四川省荣县中学校2025-2026学年高二下学期4月巩固练习 生物试题 一、选择题（每题2分，共50分） 1. 西瓜黄豆酱是民间的一种酱料，参与其发酵的微生物有霉菌、酵母菌等，家庭制作时先将大豆蒸煮熟透后裹上面粉，均匀铺摊在适当通风处，待表面长满霉菌后，再与西瓜瓤混合并加入食盐和香辛料，定期翻酱后制成成品。下列叙述错误的是（　　） A. 霉菌产生的蛋白酶可将蛋白质和脂肪分解成小分子物质 B. 蒸煮可以使大豆中的蛋白质发生变性而更容易被酶分解 C. 通风不畅导致发酵温度升高会影响霉菌和酵母菌的繁殖 D. 定期翻酱可以加快发酵速率并能抑制厌氧微生物的生长 2. 下列关于果酒、果醋、泡菜及腐乳制作的叙述，正确的是（　　） A. 酵母菌无氧呼吸时产生酒精，因此果酒制作全程都要保持无氧环境 B. 果酒制作完成后，通入空气创造有氧环境便可在最适条件下制得果醋 C. 制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸的目的是除去溶解氧和杂菌 D. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的主要微生物均属于原核生物 3. 酿造白酒的过程中，酒曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物。先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料，对之前发酵留存的少量酒曲（曲种）进行扩大培养；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后完成初步发酵。下列说法错误的是（　　） A. 小麦、麸皮可为酒曲中微生物的生长繁殖提供碳源和氮源 B. 酒曲中存在能产生和分泌淀粉酶的微生物 C. 糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合不利于糖化过程的进行 D. 发酵装置密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 4. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列相关叙述正确的是（　　） A. 发酵工业体系形成得益于原料丰富价廉、产物种类多、生产条件严苛 B. 发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不影响微生物的代谢途径 C. 啤酒的工业化生产主发酵阶段完成酵母菌繁殖、大部分糖的分解及代谢物生成 D. 啤酒的工业化生产过程中，蒸煮的目的是使淀粉分解，形成糖浆 5. 工业上常用谷氨酸棒状杆菌作为生产谷氨酸的菌种，如图1是工业生产流程图，图2是菌种数量和谷氨酸产量随生物素浓度的变化过程。相关叙述正确的是（ ） A. 可通过人工诱变、基因工程、自然界直接筛选等方式获得高产谷氨酸菌种 B. 菌种扩大培养时最好在生物素浓度为a的条件下进行 C. 发酵过程中pH需一直保持酸性，利于获得更多的谷氨酸 D. 在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法提取谷氨酸 6. 抗生素是海水养殖中常用的有机抗菌药物，残留的抗生素会产生很多危害。研究人员欲从海水中筛选能高效降解不同抗生素的细菌，设计如下流程。下列相关叙述错误的是（　　） A. X培养基的作用是对采集到的微生物进行扩大培养 B. 组别1、2、3的培养基应以不同种类的抗生素作为唯一碳源 C. 不同组别的Z培养基上有可能分离出同种细菌 D. 图示流程、器材以及培养基也能用于筛选降解抗生素的真菌 7. 碳酸钙可被有机酸分解，为从酸奶中分离乳酸菌，用完全培养基进行筛选，结果如图。下列说法正确的是（ ） A. 完成倒平板后，需在平板上加入碳酸钙 B. Ⅲ区的菌落一定是由一个细胞增殖而来 C. 图中有三次划线，接种环需灼烧灭菌四次 D. 周围有透明圈的菌落均为乳酸菌菌落 8. 我国是全球最大的发酵产品生产国，下图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种，是发酵工程的中心环节 B. 啤酒发酵和果醋发酵时，②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养 C. 在③过程中，发酵罐与配制好的培养基都必须经过严格的灭菌处理 D. 如果要获得单细胞蛋白，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品 9. 安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A. 经过A处理，试管中只有极少数放线菌产生安莎霉素 B. 在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C. 赖氨酸缺陷型放线菌形成的原因可能是基因突变导致其不能编码催化赖氨酸合成的酶 D. D菌落能产生安莎霉素，而E菌落不能产生安莎霉素 10. 某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　） A. 配制图2培养基时加入了琼脂和少量色氨酸，pH通常呈酸性 B. 3种突变菌株均不能分泌中间产物到细胞外 C. TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 D. TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻 11. 科研人员从某真菌中提取了物质M，为检测不同浓度的物质M对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，将含有物质M的滤纸片分别置于涂布了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的平板上，在适宜条件下培养24h后，滤纸片周围出现了抑菌圈，结果如图所示。已知各滤纸片上的物质M的浓度可能不同。下列有关叙述错误的是（ ） A. 培养基中应含有微生物生长所需的碳源、水等营养物质 B. 虽然滤纸片C和D的抑菌圈大小相同，但C和D中物质M的浓度不一定相等 C. 含大肠杆菌的培养基中滤纸片上物质M的浓度关系是C＞A＞B D. 滤纸片F的周围未出现抑菌圈的原因可能是该浓度下的物质M无抑菌效果 12. 番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素。实验流程和培养装置如图。下列说法错误的是（ ） A. 过程②使用胰蛋白酶处理愈伤组织，将细胞分散开 B. 为获取植物细胞次生代谢物，使用植物细胞培养技术比直接从植物体中提取更有优势 C. 充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D. 增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 13. 毛花猕猴桃为二倍体，果实大，维生素C含量高。软枣猕猴桃为四倍体，极耐寒，在一40℃下可安全越冬。农科所想利用下图技术流程培育兼具这两种猕猴桃优点的新品种。下列叙述正确的是（　　） A. 获得原生质体时通常需用纤维素酶和果胶酶的等渗溶液处理 B. 新品种的体细胞只含3个染色体组 C. 植物体细胞杂交技术成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁 D. 该技术属于有性杂交育种，能克服远缘杂交不亲和障碍 14. 科研人员研究某种红豆杉的细胞悬浮培养和原生质体培养方式对合成紫杉醇的影响，做了甲、乙、丙三组实验。甲组为细胞悬浮培养，乙组为原生质体的液体静置培养，丙组为琼脂糖包埋后的原生质体悬浮培养。三组的培养基相同，其中乙、丙两组另加细胞壁合成抑制剂等，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 完整的细胞壁是红豆杉细胞合成与积累紫杉醇的必要条件 B. 细胞壁的存在会阻碍紫杉醇向胞外分泌，使用抑制剂有利于其向胞外分泌 C. 静置培养方式比悬浮培养更有利于紫杉醇的合成，但不利于其向胞外分泌 D. 以上实验表明丙组的培养方式有利于原生质体的增殖，从而提高紫杉醇总量 15. 如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或大量生产细胞产物的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 通过①④过程可将茎尖分生组织培养成脱毒苗 B. ②⑤过程为单倍体育种，可明显缩短育种年限 C. ①②脱分化过程没有发生基因的选择性表达 D. ⑥⑦过程均体现了植物细胞具有全能性 16. 今年5月12日，一头体重26公斤的克隆犏牛在西藏自治区拉萨市曲水县实验站顺利降生，科研人员从一头9岁的成年犏牛优质个体耳郭提取体细胞，并将细胞核移植到黄牛的去核卵母细胞中，构建克隆胚胎后植入代孕犏牛体内发育。下列叙述错误的是（ ） A. 培养箱中的作用是维持培养液pH B. 黄牛的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期 C. 需通过显微操作去除卵母细胞中完整的细胞核 D. 胚胎移植前需要对受体进行同期发情处理 17. 胰岛B细胞能特异性分泌Insulin。某科研单位用含不同浓度的ActivinA培养液体外定向诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成类胰岛细胞，28天后，用葡萄糖刺激类胰岛细胞后，检测其Insulin分泌水平，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 胰腺导管干细胞能分化形成类胰岛细胞，证明其具有全能性 B. 高葡萄糖刺激更有利于胰腺导管干细胞分化为类胰岛细胞 C. 20ng/mL的ActivinA培养液诱导胰腺导管干细胞分化的效果最佳 D. 类胰岛细胞移植到糖尿病动物体内，有可能缓解其高血糖症 18. 白藜芦醇由虎杖代谢产生，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功能。白藜芦醇直接作用于机体不能产生抗体，可将其与牛血清白蛋白偶联，进而诱导机体产生抗体。科研人员利用细胞工程技术制备抗白藜芦醇单克隆抗体的基本流程如图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 取虎杖茎尖作为外植体，经植物组织培养获得大量植株才能获取白藜芦醇 B. 抗原X为白藜芦醇和牛血清白蛋白偶联物，注射到小鼠体内会使其产生抗体 C. 根据单克隆抗体制备流程，过程③需对细胞A进行克隆化培养与抗体检测 D. 白藜芦醇单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与抗原发生特异性结合 19. 细胞工程中，正确选择实验材料是生物实验成功的关键。下列叙述不合理的是（ ） A. 选择马铃薯幼苗根尖分生组织培养，可获得脱毒苗 B. 选择单倍体植株经诱导染色体加倍，作为研究遗传突变的理想材料 C. 选择X射线处理培养瓶中的薄壁组织团块，进一步培养可获得突变体 D. 选择胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 20. 重构胚激活的终极目标是要使处于MⅡ期的卵母细胞恢复分裂周期。由于持续高水平的成熟促进因子（MPF）和细胞静止因子（CSF）的存在，MⅡ期的卵母细胞不能进入末期。研究表明，任何能够让细胞质中水平升高的机制都可以激活重构胚。下列错误的是（　　） A. 在核移植过程中通过电融合法可使供体细胞与去核卵母细胞融合，形成重构胚 B. 自然受精过程中，精子入卵可能促进了内流，升高了细胞质中水平 C. 蛋白酶合成抑制剂能抑制MPF和CSF的合成，故可通过蛋白酶合成抑制剂处理重构胚使其保持休眠 D. 通过核移植产生重构胚发育形成的个体不利于物种多样性的形成，但在畜牧业、医疗卫生领域有广泛应用 21. 如图所示是利用现代生物工程技术治疗某遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①、②所示的结构分别是细胞核和内细胞团 B. 技术Ⅰ中普遍使用的去核方法是显微操作法 C. 经过过程Ⅲ细胞中的内质网和高尔基体会明显增多 D. 利用动物体细胞核移植技术得到克隆动物是培育新物种的一种方式 22. 东北马鹿和天山马鹿杂交后代的鲜茸平均重量为3760g，比东北马鹿高50.4%。通过体外受精和胚胎移植技术，可提高后代繁殖率。下列相关叙述错误的是（ ） A. 体外受精前，需对采集到的卵细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理 B. 胚胎移植前，对供体和受体均需用激素进行超数排卵和同期发情处理 C. 胚胎移植是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 D. 若要选择特定性别的胚胎进行分割，需选择囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定 23. 胚胎干细胞能够分化成各种组织和器官。科学家利用实验鼠（二倍体）成功培育出单倍体胚胎干细胞，这有利于研究某一基因对动物性状的长期作用。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①精子进入卵母细胞，引发生化反应使卵母细胞完成减数分裂 B. 过程②经历了有丝分裂和分化，部分细胞含4个染色体组 C. 体外培养胚胎干细胞时，需向培养液中添加动物血清和生长因子 D. 单倍体胚胎干细胞缺乏同源染色体，有利于研究隐性基因的功能 24. 大熊猫是中国特有的珍稀物种，主要分布在四川、陕西和甘肃的部分山区，野生大熊猫的数量不足2 000只。科学家为扩大大熊猫培育，选择出生夭折的大熊猫与家兔巧妙构建出大熊猫—兔重构胚，实验及结果如下图所示。下列叙述错误的是（ ） 注：CB为细胞松弛素，Colc为秋水仙素，两者均为细胞骨架抑制剂，使用时用DMSO溶剂溶解。 A. DMSO组的作用是作为对照，DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响 B. 取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理 C. 需要对家兔进行超数排卵处理，以获得大量处于MⅡ期的卵母细胞 D. CB能够明显提高核移植成功率，其成功率高于对照组和其他实验组 25. 研究人员利用杏鲍菇(具有双核，AA) 和秀珍菇(具有单核，B) 进行体细胞杂交，以期培养食用菌新品种，流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性，表现出对亲株的拮抗作用，能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会。 注：高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。 下列叙述正确的是（ ） A. 步骤②中原生质体应在低渗溶液中进行培养并处理 B. 促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB C. 在培养基上可以观察到AA菌落、B菌落以及AAB菌落 D. 若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择有喙状结构的菌丝 二、非选择题（共50分） 26. 图1是以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程简图，图2是相关发酵装置。回答下列问题： （1）家庭制作葡萄酒时葡萄冲洗次数不能太多，原因是______。图1中制作果酒时猕猴桃可充分清洗干净（冲洗多次），原因是______。 （2）用图2所示装置制作果酒时，发酵液不能装满发酵瓶，目的是______（答出2点）。进行果酒发酵时，对充气口和排气口的控制情况是______。 （3）果酒发酵完成后可以继续进行果醋发酵，写出该过程产生醋酸的反应式：______。与果酒发酵相比，进入果醋发酵后，在温度和气体控制方面需要改变的是______、______。 27. 苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。 （1）配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH______（填“之前”或“之后”），培养基灭菌的常用方法是______。 （2）图中①过程取5g土壤加入______mL无菌水中，②③过程用______法获得芽孢杆菌单菌落，若10-1、10-2悬液对应平板上菌苔完全覆盖培养基，10-3、10-4、10-5对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则取样土壤中芽孢杆菌总数约______个。 （3）目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于______（填“A”或“B”）处，将芽孢杆菌接种______（填“A”或“B”）处。 （4）检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于苹果树腐烂病防治。与化学防治相比，该方法的优势是______。 28. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程①为脱分化。先将外植体_______（消毒/灭菌）处理，再接种于MS培养基上诱导其分裂形成。在MS培养基中需添加适量的蔗糖，蔗糖的作用有_______（至少答出2点）。 （2）过程②中可用含_______酶的溶液去除细胞壁以获得有活性的原生质体。通常添加适量甘露醇调节溶液的渗透压，溶液渗透压既不能太低也不能过高，原因是_______。 （3）图中，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理，其中B处理为_______，进行的A、B处理的意义是_______。 （4）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被胞内酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择_______（填“有”或“无”）荧光的原生质体用于融合。 （5）过程③可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有_______法等。 （6）过程④中，再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X的名称是_______。 （7）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下表。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 由表可知，后代植株中_______类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本_______的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进主要来源亲本的基因组。 29. 癌症免疫疗法是指重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。某些种类癌细胞表面有高表达的蛋白PSMA，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于癌细胞与T细胞聚集。图甲为科研人员尝试构建的双特异性抗体PSMA×CD28生产流程图；图乙为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理图。回答下列问题： （1）据图甲分析可知，制备双特异性抗体的过程中，涉及到的动物细胞工程技术主要有________、________。 （2）制备双特异性抗体时，应先将________（填物质的具体名称）分别注射到小鼠体内再分离出淋巴细胞。与诱导植物原生质体融合不同的是可用________法。将第一次筛选获得的细胞进行多倍稀释，借助多孔细胞培养板，利用________原理进行第二次筛选，选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 （3）抗体都是由两条链和两条链组成的条肽链对称结构。由于融合细胞会表达出两种链和两种链且链和链又能随机组合，因此杂交瘤细胞会产生________（填“一种”或“多种”）抗体。双特异性抗体协助杀伤癌细胞的机理是________。 30. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。 （1）过程①除图中所示方法外，还可以借助载体将_____导入细胞中，或直接将_____导入细胞中。过程②应选用处于_____的卵母细胞，采用显微操作法去“核”，其实是去除_____。 （2）重构细胞经分裂、发育至_____时期，可移植到受体子宫中。移植之前，需要对受体动物进行_____处理。若要获得遗传性状完全相同的多只幼鼠，可对重构胚进行_____，再进行移植。 （3）图中向重构胚中注入Kdm4d的mRNA和TSA说明组蛋白的_____和_____有利于重构胚的后续发育过程。 （4）科研人员为确定Kdm4d的mRNA的作用，进行了如下实验，其中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的重构胚，实验结果如图所示。根据实验结果推测Kdm4d的mRNA的作用是_____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 四川省荣县中学校2025-2026学年高二下学期4月巩固练习 生物试题 一、选择题（每题2分，共50分） 1. 西瓜黄豆酱是民间的一种酱料，参与其发酵的微生物有霉菌、酵母菌等，家庭制作时先将大豆蒸煮熟透后裹上面粉，均匀铺摊在适当通风处，待表面长满霉菌后，再与西瓜瓤混合并加入食盐和香辛料，定期翻酱后制成成品。下列叙述错误的是（　　） A. 霉菌产生的蛋白酶可将蛋白质和脂肪分解成小分子物质 B. 蒸煮可以使大豆中的蛋白质发生变性而更容易被酶分解 C. 通风不畅导致发酵温度升高会影响霉菌和酵母菌的繁殖 D. 定期翻酱可以加快发酵速率并能抑制厌氧微生物的生长 【答案】A 【解析】 【详解】A、霉菌产生的蛋白酶只能分解蛋白质，而分解脂肪需要脂肪酶，A错误； B、高温蒸煮使蛋白质变性，空间结构破坏，更易被酶水解，B正确； C、通风不畅导致热量积累，温度升高可能超过霉菌和酵母菌的最适生长温度，影响繁殖，C正确； D、翻酱增加溶氧量，促进好氧菌（如霉菌）代谢，同时抑制厌氧菌生长，D正确； 故选A。 2. 下列关于果酒、果醋、泡菜及腐乳制作的叙述，正确的是（　　） A. 酵母菌无氧呼吸时产生酒精，因此果酒制作全程都要保持无氧环境 B. 果酒制作完成后，通入空气创造有氧环境便可在最适条件下制得果醋 C. 制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸的目的是除去溶解氧和杂菌 D. 制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的主要微生物均属于原核生物 【答案】C 【解析】 【详解】A、酵母菌无氧呼吸时产生酒精，但果酒制作初期需提供少量氧气进行有氧呼吸，以促进酵母菌繁殖，增加菌体数量，之后才转为无氧环境进行酒精发酵；因此全程保持无氧环境会抑制初期繁殖，导致发酵效率降低，A错误； B、果醋制作需醋酸菌参与，醋酸菌为好氧菌，能将酒精氧化为醋酸；但仅通入空气创造有氧环境并不足以保证制得果醋，还需接种醋酸菌或利用自然存在的菌种，并控制最适温度（30-35℃）和pH等条件，否则无法有效发酵，B错误； C、制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸可高温灭菌，杀死杂菌（如腐败菌），同时除去溶解氧，创造无氧环境，利于乳酸菌进行无氧发酵产生乳酸，C正确； D、制作果酒的主要微生物是酵母菌（真核生物），果醋是醋酸菌（原核生物），泡菜是乳酸菌（原核生物），腐乳是毛霉（真核生物），因此并非所有微生物均属于原核生物，D错误。 故选C。 3. 酿造白酒的过程中，酒曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物。先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料，对之前发酵留存的少量酒曲（曲种）进行扩大培养；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后完成初步发酵。下列说法错误的是（　　） A. 小麦、麸皮可为酒曲中微生物的生长繁殖提供碳源和氮源 B. 酒曲中存在能产生和分泌淀粉酶的微生物 C. 糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合不利于糖化过程的进行 D. 发酵装置密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 【答案】D 【解析】 【详解】A、小麦、麸皮富含淀粉（多糖）和蛋白质，可为微生物提供碳源（淀粉）和氮源（蛋白质水解产物），A正确； B、酒曲中的微生物（如曲霉）能分泌淀粉酶，将糯米、大米中的淀粉水解为葡萄糖，实现糖化过程，B正确； C、蒸煮后的糯米、大米温度过高，立即与酒曲混合会破坏酒曲中微生物的活性及淀粉酶的空间结构，影响糖化效率，C正确； D、发酵装置密封不严时，氧气进入导致醋酸菌繁殖，将乙醇氧化为乙酸（醋酸），而非乳酸积累。乳酸发酵通常由乳酸菌在无氧条件下进行，D错误。 故选D。 4. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列相关叙述正确的是（　　） A. 发酵工业体系形成得益于原料丰富价廉、产物种类多、生产条件严苛 B. 发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不影响微生物的代谢途径 C. 啤酒的工业化生产主发酵阶段完成酵母菌繁殖、大部分糖的分解及代谢物生成 D. 啤酒的工业化生产过程中，蒸煮的目的是使淀粉分解，形成糖浆 【答案】C 【解析】 【详解】A、发酵工业体系形成的优势包括原料丰富价廉、产物种类多，但发酵工程的生产条件通常是温和的(如常温常压、适宜pH等)，而非“严苛”，A错误； B、发酵条件(如温度、pH、溶氧量等)的变化不仅会影响微生物的生长繁殖速率，还会通过调控酶的活性或基因表达，影响微生物的代谢途径(如产物种类的改变)，B错误； C、啤酒工业化生产中，主发酵阶段的主要任务是：酵母菌在适宜条件下大量繁殖，同时分解大部分糖类(如葡萄糖)，产生乙醇、CO2及风味物质等代谢产物，C正确； D、啤酒生产中蒸煮的目的是杀死原料中的杂菌，避免杂菌污染影响发酵；同时使原料中的蛋白质变性，便于后续糖化过程中酶的作用。淀粉分解形成糖浆是糖化阶段的作用，而非蒸煮的目的，D错误。 故选：C 5. 工业上常用谷氨酸棒状杆菌作为生产谷氨酸的菌种，如图1是工业生产流程图，图2是菌种数量和谷氨酸产量随生物素浓度的变化过程。相关叙述正确的是（ ） A. 可通过人工诱变、基因工程、自然界直接筛选等方式获得高产谷氨酸菌种 B. 菌种扩大培养时最好在生物素浓度为a的条件下进行 C. 发酵过程中pH需一直保持酸性，利于获得更多的谷氨酸 D. 在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法提取谷氨酸 【答案】A 【解析】 【详解】A、对菌种的选育可以从自然界中直接获取，也可以借助诱变育种和基因工程技术获得人们想要的菌种，只不过从自然界中直接筛选的概率较低，A正确； B、扩大培养的目的是获得大量菌体，应选择细菌数量最多的条件（生物素浓度更高的区间），而生物素浓度为 a 时谷氨酸产量较高，但细菌数量并非最高，B错误； C、发酵后期需调pH至酸性，使谷氨酸析出（图1中 “pH调至酸性，使谷氨酸晶体析出”），但发酵过程中在中性和弱碱性的条件下才会积累谷氨酸，C错误； D、谷氨酸是小分子有机物，发酵结束后可根据产物的性质适当的提取、分离和纯化来提取，D错误。 故选A。 6. 抗生素是海水养殖中常用的有机抗菌药物，残留的抗生素会产生很多危害。研究人员欲从海水中筛选能高效降解不同抗生素的细菌，设计如下流程。下列相关叙述错误的是（　　） A. X培养基的作用是对采集到的微生物进行扩大培养 B. 组别1、2、3的培养基应以不同种类的抗生素作为唯一碳源 C. 不同组别的Z培养基上有可能分离出同种细菌 D. 图示流程、器材以及培养基也能用于筛选降解抗生素的真菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、X培养基属于富集培养基，作用是对采集到的微生物进行扩大培养，增加目标微生物的数量，A正确； B、实验目的是筛选能高效降解不同抗生素的细菌，所以组别1、2、3的培养基需要以不同种类的抗生素作为唯一碳源，这样只有能降解对应抗生素的微生物可以生长，B正确； C、不同抗生素可能被同一种细菌降解，因此不同组别的Z培养基上有可能分离出同种细菌，C正确； D、图示流程、器材以及培养基是针对细菌的筛选设计的，真菌的培养条件和细菌不同（比如培养基成分、培养温度等），因此不能直接用于筛选降解抗生素的真菌，D错误。 故选D。 7. 碳酸钙可被有机酸分解，为从酸奶中分离乳酸菌，用完全培养基进行筛选，结果如图。下列说法正确的是（ ） A. 完成倒平板后，需在平板上加入碳酸钙 B. Ⅲ区的菌落一定是由一个细胞增殖而来 C. 图中有三次划线，接种环需灼烧灭菌四次 D. 周围有透明圈的菌落均为乳酸菌菌落 【答案】C 【解析】 【分析】灭菌后在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是使培养基不透明，从而使产有机酸菌落周围出现透明圈，这是因为有机酸可分解碳酸钙，产生透明圈。 【详解】A、灭菌后在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，A错误； B、Ⅲ区的单菌落可能由同一个细菌或多个细菌繁殖而来的子细胞群体，B错误； C、为保证无菌操作，接种针在使用前都必须经过灼烧灭菌，划完线后也灼烧灭菌，因此图中有三次划线，接种环需要灼烧灭菌四次，C正确； D、碳酸钙可被有机酸分解，故周围有透明圈的菌落不一定都为乳酸菌菌落，也可能是其他产酸的微生物，D错误。 故选C。 8. 我国是全球最大的发酵产品生产国，下图为发酵工程的基本环节，其中①～④代表不同的过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种，是发酵工程的中心环节 B. 啤酒发酵和果醋发酵时，②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养 C. 在③过程中，发酵罐与配制好的培养基都必须经过严格的灭菌处理 D. 如果要获得单细胞蛋白，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品 【答案】A 【解析】 【详解】A、①过程所需菌种可从自然界分离菌种，也可用基因工程或人工诱变选育菌种，发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节，A错误； B、②过程为扩大培养，酵母菌为兼性厌氧生物，大量增殖时进行有氧呼吸，需要通入无菌空气，醋酸菌为好氧细菌，扩大培养时也要通入无菌空气，B正确； C、③过程为发酵罐内发酵，该过程所需要的培养基和发酵设备均需进行严格的灭菌处理，C正确； D、发酵工程中，如果发酵产品是单细胞蛋白，可在发酵结束后，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品，D正确。 9. 安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A. 经过A处理，试管中只有极少数放线菌产生安莎霉素 B. 在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C. 赖氨酸缺陷型放线菌形成的原因可能是基因突变导致其不能编码催化赖氨酸合成的酶 D. D菌落能产生安莎霉素，而E菌落不能产生安莎霉素 【答案】B 【解析】 【分析】影印培养法是指确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。主要操作方法是：用灭菌的丝绒覆盖在一块与培养皿同样大小（或略小）的木制圆柱体上，轻轻地在母种培养皿的菌苔上印一下，把细菌菌落全部转移到丝绒面上，然后将这一丝绒面再印在另外的选择性培养基平板上，获得与原始平板完全相同的接种平板。待培养后，比对各培养皿在相同位置出现相同的菌落，从而筛选出适当的菌株。 【详解】A、基因突变是不定向的，且突变频率很低，紫外线处理后只有极少数放线菌可能成为赖氨酸缺陷型放线菌（能产生安莎霉素），A正确； B、在①中进行菌种的扩大培养时，接种前需对培养基进行灭菌处理，接种后不能灭菌，否则会杀死目标微生物，B错误； C、根据题意信息可知，赖氨酸缺陷型放线菌形成的原因可能是基因突变不能编码催化赖氨酸合成的酶，C正确； D、D菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明D菌落只能生活在完全培养基中，不能生活在缺赖氨酸的培养基中，即D菌落是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，可以产生安莎霉素，而E菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无赖氨酸均可生存。所以E菌落不是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，不能产生安莎霉素，D正确。 故选B。 10. 某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　） A. 配制图2培养基时加入了琼脂和少量色氨酸，pH通常呈酸性 B. 3种突变菌株均不能分泌中间产物到细胞外 C. TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 D. TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻 【答案】D 【解析】 【分析】依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。 【详解】A、依据题干信息“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，推断培养基中存在少量色氨酸，培养细菌一般将pH调至中性或弱碱性，A错误； B、根据题干信息“继续培养后发现I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖”，说明培养基中3种突变菌株均能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，B错误； C、依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。Ⅰ区域的TrpB-划线上端与Ⅱ区域临近，可利用Ⅱ区域TrpC-合成的邻氨基苯甲酸进一步合成吲哚及色氨酸生长增殖；Ⅰ区域的TrpB-划线下端与Ⅲ区域临近，可利用Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅱ区域的TrpC-划线上端自身不能合成吲哚，临近的Ⅰ区域TrpB-可利用Ⅱ区域合成的邻氨基苯甲酸合成吲哚并进一步合成色氨酸，无多余的吲哚反馈给Ⅱ区域上端，所以Ⅱ区域的TrpC-划线上端不生长；Ⅱ区域的TrpC-划线下端，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅲ区域TrpE-由于不能将吲哚转化为色氨酸，所以Ⅲ区域两端不生长增殖，所以Ⅱ区域的TrpC-划线下端靠近Ⅲ区域，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖，而不是靠近Ⅰ区域的一端，C错误； D、将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅲ区域，突变菌株能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，Ⅲ区域菌株不再生长，说明TrpE-阻断吲哚转化为色氨酸，即阻断③过程；TrpB-能够利用TrpC-和TrpE-合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明TrpB-阻断①过程；TrpC-只能利用TrpE-合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明阻断的是②过程，因此TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻，D正确。 故选D。 11. 科研人员从某真菌中提取了物质M，为检测不同浓度的物质M对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，将含有物质M的滤纸片分别置于涂布了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的平板上，在适宜条件下培养24h后，滤纸片周围出现了抑菌圈，结果如图所示。已知各滤纸片上的物质M的浓度可能不同。下列有关叙述错误的是（ ） A. 培养基中应含有微生物生长所需的碳源、水等营养物质 B. 虽然滤纸片C和D的抑菌圈大小相同，但C和D中物质M的浓度不一定相等 C. 含大肠杆菌的培养基中滤纸片上物质M的浓度关系是C＞A＞B D. 滤纸片F的周围未出现抑菌圈的原因可能是该浓度下的物质M无抑菌效果 【答案】C 【解析】 【分析】题意分析，本实验的目的是检测不同浓度的物质M对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，实验结果可通过抑菌圈的大小来确定杀菌能力，抑菌圈越大表示杀菌能力越强。 【详解】A、微生物生长需要碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，所以培养基中应含有微生物生长所需的碳源、水等营养物质，A正确； B、不同微生物对物质M的敏感程度可能不同，虽然滤纸片C和D的抑菌圈大小相同，但由于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对物质M的敏感性不一定一样，所以C和D中物质M的浓度不一定相等，B正确； C、一般情况下，抑菌圈越大，说明滤纸片上物质M的浓度越高，对微生物的抑制作用越强。 含大肠杆菌的培养基中，滤纸片的抑菌圈面积关系是A＞C＞B，所以滤纸片上物质M的浓度关系应该是A＞C＞B，C错误； D、滤纸片F的周围未出现抑菌圈，有可能是该浓度下的物质M对金黄色葡萄球菌无抑菌效果，D正确。 故选C。 12. 番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素。实验流程和培养装置如图。下列说法错误的是（ ） A. 过程②使用胰蛋白酶处理愈伤组织，将细胞分散开 B. 为获取植物细胞次生代谢物，使用植物细胞培养技术比直接从植物体中提取更有优势 C. 充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D. 增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 【答案】A 【解析】 【详解】A、过程②是将愈伤组织分散成单个细胞，而植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织，可去除细胞壁，将细胞分散开来，A错误； B、植物组织培养技术可实现大规模生产，不受季节、气候等环境因素限制，且能通过优化培养条件提高次生代谢产量，相比之下直接从植物体内提取可能需要大量资源，且产量不稳定，B正确； C、充气口增设无菌过滤器，可防止杂菌污染，加料口加入原料要进行灭菌处理，这样才能保证整个培养过程不受杂菌干扰，维持细胞培养的无菌环境，C正确； D、细胞培养需要适宜的温度条件，增设温度监测和控制设备可以实时监测和调节装置内的温度，维持装置适宜温度，有利于细胞的正常生长和代谢，D正确。  故选A。 13. 毛花猕猴桃为二倍体，果实大，维生素C含量高。软枣猕猴桃为四倍体，极耐寒，在一40℃下可安全越冬。农科所想利用下图技术流程培育兼具这两种猕猴桃优点的新品种。下列叙述正确的是（　　） A. 获得原生质体时通常需用纤维素酶和果胶酶的等渗溶液处理 B. 新品种的体细胞只含3个染色体组 C. 植物体细胞杂交技术成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁 D. 该技术属于有性杂交育种，能克服远缘杂交不亲和障碍 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物去除细胞壁必须用纤维素酶和果胶酶，且溶液通常等渗，防止原生质体破裂，A 正确； B、2 n + 4 n → 6 n，体细胞含 6 个染色体组，B错误； C 、植物体细胞杂交成功的标志是培育成新品种（杂种植物），C错误； D 、体细胞杂交为无性途径，不涉及配子结合，不属于有性杂交，D错误。 故选A。 14. 科研人员研究某种红豆杉的细胞悬浮培养和原生质体培养方式对合成紫杉醇的影响，做了甲、乙、丙三组实验。甲组为细胞悬浮培养，乙组为原生质体的液体静置培养，丙组为琼脂糖包埋后的原生质体悬浮培养。三组的培养基相同，其中乙、丙两组另加细胞壁合成抑制剂等，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 完整的细胞壁是红豆杉细胞合成与积累紫杉醇的必要条件 B. 细胞壁的存在会阻碍紫杉醇向胞外分泌，使用抑制剂有利于其向胞外分泌 C. 静置培养方式比悬浮培养更有利于紫杉醇的合成，但不利于其向胞外分泌 D. 以上实验表明丙组的培养方式有利于原生质体的增殖，从而提高紫杉醇总量 【答案】B 【解析】 【详解】A、比较甲组和乙组，乙组为原生质体（去除细胞壁）总紫杉醇的浓度高于甲组，可知细胞壁的完整反而不利于紫杉醇的合成和积累，A错误； B、从图中可见，去掉或抑制细胞壁形成的原生质体（乙组、丙组）相比于完整细胞（甲组），胞外紫杉醇的比例明显升高，说明细胞壁的存在在一定程度上阻碍了紫杉醇的向外分泌；而使用细胞壁合成抑制剂则有利于紫杉醇分泌到胞外，B正确； C、甲组和乙组，乙组和丙组变量不单一，无法得出静置培养和悬浮培养是否有利于代谢物的合成，C错误； D、由以上实验可知几组细胞紫杉醇的浓度，细胞的数量未知，无法确定丙组的培养方式是否有利于原生质体的增殖，D错误。 故选B。 15. 如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或大量生产细胞产物的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 通过①④过程可将茎尖分生组织培养成脱毒苗 B. ②⑤过程为单倍体育种，可明显缩短育种年限 C. ①②脱分化过程没有发生基因的选择性表达 D. ⑥⑦过程均体现了植物细胞具有全能性 【答案】A 【解析】 【详解】A、由于植物茎尖分生区附近的病毒极少甚至无病毒，因此可将茎尖分生组织通过①和④过程，培养成脱毒苗，A正确； B、②⑤过程是用花粉离体培养法获得单倍体的过程，再用秋水仙素处理单倍体获得植株的过程才是单倍体育种，单倍体育种可明显缩短育种年限，B错误； C、①②脱分化过程形成愈伤组织，实质上发生了基因的选择性表达，C错误； D、愈伤组织经⑥过程形成完整植株体现了植物细胞具有全能性，⑦过程培养愈伤组织细胞获得细胞产物，未体现植物细胞的全能性，D错误。 故选A。 16. 今年5月12日，一头体重26公斤的克隆犏牛在西藏自治区拉萨市曲水县实验站顺利降生，科研人员从一头9岁的成年犏牛优质个体耳郭提取体细胞，并将细胞核移植到黄牛的去核卵母细胞中，构建克隆胚胎后植入代孕犏牛体内发育。下列叙述错误的是（ ） A. 培养箱中的作用是维持培养液pH B. 黄牛的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期 C. 需通过显微操作去除卵母细胞中完整的细胞核 D. 胚胎移植前需要对受体进行同期发情处理 【答案】C 【解析】 【详解】A、在细胞培养中，CO₂培养箱通过CO₂与碳酸氢钠形成缓冲系统，维持培养液pH稳定，保证细胞正常代谢，A正确； B、核移植需使用处于减数第二次分裂中期（MⅡ期）的卵母细胞，因其细胞质中含有促进核重编程的物质，利于重组胚胎发育，B正确； C、去核操作需去除卵母细胞的纺锤体-染色体复合物（即含遗传物质的结构），而非仅去除核膜包裹的细胞核，C错误； D、胚胎移植前需对受体进行同期发情处理，使子宫生理状态与供体同步，提高胚胎着床率，D正确。 故选C。 17. 胰岛B细胞能特异性分泌Insulin。某科研单位用含不同浓度的ActivinA培养液体外定向诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成类胰岛细胞，28天后，用葡萄糖刺激类胰岛细胞后，检测其Insulin分泌水平，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 胰腺导管干细胞能分化形成类胰岛细胞，证明其具有全能性 B. 高葡萄糖刺激更有利于胰腺导管干细胞分化为类胰岛细胞 C. 20ng/mL的ActivinA培养液诱导胰腺导管干细胞分化的效果最佳 D. 类胰岛细胞移植到糖尿病动物体内，有可能缓解其高血糖症 【答案】A 【解析】 【详解】A、胰腺导管干细胞能分化形成类胰岛细胞，并没有分化形成完整有机体或全部种类的组织细胞，故不能证明胰腺导管干细胞具有全能性，A错误； B、据图可知，无论在低葡萄糖刺激还是高葡萄糖刺激下，空白对照组中细胞也有一定的Insulin分泌量，且高葡萄糖刺激下空白对照组中细胞的Insulin分泌量较高，故高葡萄糖刺激更有利于胰腺导管干细胞分化为类胰岛细胞，B正确； C、据图可知，20ng/mL的ActivinA诱导分化形成的类胰岛细胞的Insulin分泌量最高，而Insulin是胰岛B细胞特异性分泌的物质，可反映出ActivinA诱导分化形成的胰岛B细胞数量多，功能良好，C正确； D、类胰岛细胞能分泌Insulin，说明其具有胰岛B细胞的功能，可能合成分泌胰岛素，具有降血糖的功能，D正确。 故选A。 18. 白藜芦醇由虎杖代谢产生，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功能。白藜芦醇直接作用于机体不能产生抗体，可将其与牛血清白蛋白偶联，进而诱导机体产生抗体。科研人员利用细胞工程技术制备抗白藜芦醇单克隆抗体的基本流程如图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 取虎杖茎尖作为外植体，经植物组织培养获得大量植株才能获取白藜芦醇 B. 抗原X为白藜芦醇和牛血清白蛋白偶联物，注射到小鼠体内会使其产生抗体 C. 根据单克隆抗体制备流程，过程③需对细胞A进行克隆化培养与抗体检测 D. 白藜芦醇单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与抗原发生特异性结合 【答案】A 【解析】 【详解】A、白藜芦醇可以通过植物细胞培养的方式规模化生产，不需要将虎杖茎尖经植物组织培养获得完整植株再提取，直接培养愈伤组织即可产生白藜芦醇，A错误； B、白藜芦醇本身是小分子，不具备免疫原性，与牛血清白蛋白偶联后形成的抗原X可作为免疫原，注射到小鼠体内能诱导其产生特异性抗体，B正确； C、在单克隆抗体制备流程中，经细胞融合和初步筛选得到的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，以筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，C正确； D、单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高，能准确识别抗原的细微差异，与抗原发生特异性结合，D正确。 故选A。 19. 细胞工程中，正确选择实验材料是生物实验成功的关键。下列叙述不合理的是（ ） A. 选择马铃薯幼苗根尖分生组织培养，可获得脱毒苗 B. 选择单倍体植株经诱导染色体加倍，作为研究遗传突变的理想材料 C. 选择X射线处理培养瓶中的薄壁组织团块，进一步培养可获得突变体 D. 选择胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、选择马铃薯幼苗根尖分生组织培养，可获得脱毒苗，因根尖分生组织代谢旺盛且不含病毒，因而通过植物组织培养技术可获得脱毒苗，A正确； B、单倍体植株经秋水仙素诱导染色体加倍后获得纯合体，可排除杂合基因型干扰，是研究基因突变和性状遗传的理想材料，B正确； C、X射线可诱发基因突变，薄壁组织团块，即愈伤组织分生能力强，细胞中不断进行DNA复制过程，因而突变频率高，可进一步从突变体中筛选出目标类型，C正确； D、胃蛋白酶最适pH为1.5-2.0（强酸性），而动物细胞培养需中性环境（pH 7.2-7.4），在该条件下胃蛋白酶会失活，因而不能起到相应的作用，若胃蛋白酶起作用则酸性条件会破坏细胞结构。动物细胞分散应使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，D错误。 故选D。 20. 重构胚激活的终极目标是要使处于MⅡ期的卵母细胞恢复分裂周期。由于持续高水平的成熟促进因子（MPF）和细胞静止因子（CSF）的存在，MⅡ期的卵母细胞不能进入末期。研究表明，任何能够让细胞质中水平升高的机制都可以激活重构胚。下列错误的是（　　） A. 在核移植过程中通过电融合法可使供体细胞与去核卵母细胞融合，形成重构胚 B. 自然受精过程中，精子入卵可能促进了内流，升高了细胞质中水平 C. 蛋白酶合成抑制剂能抑制MPF和CSF的合成，故可通过蛋白酶合成抑制剂处理重构胚使其保持休眠 D. 通过核移植产生重构胚发育形成的个体不利于物种多样性的形成，但在畜牧业、医疗卫生领域有广泛应用 【答案】C 【解析】 【详解】A、在核移植技术中，电融合法是常用的物理方法，通过电流刺激使供体细胞与去核卵母细胞的质膜融合，形成重构胚，该描述符合核移植操作流程，A正确； B、自然受精时，精子入卵会触发Ca²⁺振荡，促进Ca²⁺内流，升高细胞质Ca²⁺水平，从而降解CSF并降低MPF活性，激活卵母细胞恢复分裂，该推测与题干所述激活机制一致，B正确； C、蛋白酶合成抑制剂旨在抑制蛋白酶的合成（蛋白酶负责蛋白质分解），但MPF和CSF的合成依赖于基因转录和翻译，与蛋白酶活性无关；题干指出激活需Ca²⁺升高以降解CSF （通过蛋白酶体途径），若需保持休眠应抑制降解而非合成，选项错误地将抑制剂作用描述为“抑制MPF和CSF合成”，不符合题意，C错误； D、核移植产生的个体为无性繁殖克隆体，遗传多样性低，不利于物种多样性，但在畜牧业（如优良畜种克隆）和医疗卫生（如器官移植、疾病模型）有重要应用，该描述符合生物学事实，D正确。 故选C。 21. 如图所示是利用现代生物工程技术治疗某遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①、②所示的结构分别是细胞核和内细胞团 B. 技术Ⅰ中普遍使用的去核方法是显微操作法 C. 经过过程Ⅲ细胞中的内质网和高尔基体会明显增多 D. 利用动物体细胞核移植技术得到克隆动物是培育新物种的一种方式 【答案】D 【解析】 【分析】据图分析：①所示的结构是细胞核；②所示的结构是内细胞团细胞；I所示的生物工程技术是核移植技术；II所示的生物工程技术是转基因技术。此外图中还运用到了动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎干细胞移植、显微操作等技术；图示是克隆性治疗，用克隆形成的器官进行移植属于自体移植，与异体移植相比最大的优点是没有排斥反应。 【详解】A、图中①是供体细胞的细胞核，②所示内细胞团，因为这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官，A正确； B、图中I所示的生物工程技术是核移植技术，普遍使用的去核方法是显微操作法，B正确； C、过程Ⅲ是诱导分化为能合成胰岛B细胞，胰岛素是分泌蛋白，需要内质网核高尔基体进行加工，所以细胞中高尔基体、内质网明显增多，C正确； D、利用动物体细胞核移植得到克隆动物，是无性繁殖，不会产生新物种，D错误。 故选D。 22. 东北马鹿和天山马鹿杂交后代的鲜茸平均重量为3760g，比东北马鹿高50.4%。通过体外受精和胚胎移植技术，可提高后代繁殖率。下列相关叙述错误的是（ ） A. 体外受精前，需对采集到的卵细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理 B. 胚胎移植前，对供体和受体均需用激素进行超数排卵和同期发情处理 C. 胚胎移植是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 D. 若要选择特定性别的胚胎进行分割，需选择囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定 【答案】B 【解析】 【详解】A、体外受精的前提是卵细胞发育到减数第二次分裂中期、精子完成获能，因此采集到的卵细胞需进行成熟培养，精子需进行获能处理，A正确； B、胚胎移植前，仅供体需要进行超数排卵处理以获取更多卵母细胞，受体不需要超数排卵；供体和受体均需进行同期发情处理，保证二者生理环境一致，B错误； C、胚胎移植的本质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，胚胎的遗传物质不会随移植发生改变，C正确； D、囊胚期的滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，取样进行性别鉴定不会损伤发育为胎儿的内细胞团，因此选择滋养层细胞做性别鉴定，D正确。 23. 胚胎干细胞能够分化成各种组织和器官。科学家利用实验鼠（二倍体）成功培育出单倍体胚胎干细胞，这有利于研究某一基因对动物性状的长期作用。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①精子进入卵母细胞，引发生化反应使卵母细胞完成减数分裂 B. 过程②经历了有丝分裂和分化，部分细胞含4个染色体组 C. 体外培养胚胎干细胞时，需向培养液中添加动物血清和生长因子 D. 单倍体胚胎干细胞缺乏同源染色体，有利于研究隐性基因的功能 【答案】B 【解析】 【详解】A、过程①为精子进入卵母细胞（受精步骤），精子入卵后会引发卵母细胞完成减数第二次分裂，排出第二极体，最终形成成熟的受精卵。这是受精作用中卵母细胞激活的关键生化反应，A 正确； B、过程②起始细胞是移除雄原核的单倍体细胞（1个染色体组），仅经有丝分裂（后期最多2个染色体组）和分化，不可能出现4个染色体组，B错误； C、体外培养胚胎干细胞时，培养液需模拟体内环境，添加动物血清（提供天然生长因子、营养物质）和特定生长因子（维持干细胞的全能性或增殖能力），以保证干细胞正常生长和未分化状态，C 正确； D、单倍体胚胎干细胞仅含1个染色体组，缺乏同源染色体，不存在等位基因的掩盖效应。隐性基因无需纯合即可表现出相应性状，便于直接研究其对动物性状的影响，D正确。 故选B。 24. 大熊猫是中国特有的珍稀物种，主要分布在四川、陕西和甘肃的部分山区，野生大熊猫的数量不足2 000只。科学家为扩大大熊猫培育，选择出生夭折的大熊猫与家兔巧妙构建出大熊猫—兔重构胚，实验及结果如下图所示。下列叙述错误的是（ ） 注：CB为细胞松弛素，Colc为秋水仙素，两者均为细胞骨架抑制剂，使用时用DMSO溶剂溶解。 A. DMSO组的作用是作为对照，DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响 B. 取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理 C. 需要对家兔进行超数排卵处理，以获得大量处于MⅡ期的卵母细胞 D. CB能够明显提高核移植成功率，其成功率高于对照组和其他实验组 【答案】A 【解析】 【详解】A、DMSO组的作用是作为对照，其目的是排除DMSO溶剂本身对核移植成功率的影响，根据实验中的数据不能得出DMSO溶剂本身对核移植成功率有显著影响的结论，A错误； B、取出生夭折的熊猫相应组织，剪碎后需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，其目的是获得单细胞悬液，B正确； C、实验过程中需要通过对家兔进行超数排卵处理，以获得大量处于MⅡ期的卵母细胞，为核移植提供更多的实验材料，C正确； D、实验数据显示，CB组的细胞数高于其他实验组和对照组，表明CB能够提高核移植成功率，D正确。 故选A。 25. 研究人员利用杏鲍菇(具有双核，AA) 和秀珍菇(具有单核，B) 进行体细胞杂交，以期培养食用菌新品种，流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性，表现出对亲株的拮抗作用，能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会。 注：高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。 下列叙述正确的是（ ） A. 步骤②中原生质体应在低渗溶液中进行培养并处理 B. 促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB C. 在培养基上可以观察到AA菌落、B菌落以及AAB菌落 D. 若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择有喙状结构的菌丝 【答案】D 【解析】 【分析】高温灭活使原生质体A仅能生存而无法繁殖，因此，培养基上不会有A的菌落。 【详解】A、步骤②中原生质体应在等渗溶液中进行培养并处理，A错误； BC、高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖，因此不会形成AAAA的融合菌株，也不会出现AA、AB菌落，BC错误； D、融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会，因此若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择有喙状结构的菌丝，D正确。 故选D。 二、非选择题（共50分） 26. 图1是以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程简图，图2是相关发酵装置。回答下列问题： （1）家庭制作葡萄酒时葡萄冲洗次数不能太多，原因是______。图1中制作果酒时猕猴桃可充分清洗干净（冲洗多次），原因是______。 （2）用图2所示装置制作果酒时，发酵液不能装满发酵瓶，目的是______（答出2点）。进行果酒发酵时，对充气口和排气口的控制情况是______。 （3）果酒发酵完成后可以继续进行果醋发酵，写出该过程产生醋酸的反应式：______。与果酒发酵相比，进入果醋发酵后，在温度和气体控制方面需要改变的是______、______。 【答案】（1） ①. 家庭制作葡萄酒时菌种主要来自葡萄表面携带的酵母菌，冲洗次数过多会造成菌种流失 ②. 该过程中的菌种可来自加入的酒曲 （2） ①. 保证初期酵母菌进行有氧呼吸，为自身繁殖提供大量能量；防止发酵旺盛时产生大量的CO2使菌液溢出 ②. 充气口关闭；排气口打开 （3） ①. C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O+能量 ②. 适当升高温度 ③. 打开充气口 【解析】 【分析】果酒发酵是在无氧条件下进行的，果醋发酵是在有氧环境中进行的（醋酸菌是好氧菌）； 酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，果醋发酵产生二氧化碳和醋酸； 酒精发酵时温度控制在18-30℃，醋酸发酵时温度一般应控制为30-35℃。 【小问1详解】 许多新鲜水果的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌，家庭发酵制作葡萄酒利用的是这些酵母菌，冲洗次数过多会造成酵母菌流失，果酒的制作会失败。图1中制作果酒时菌种可来自加入的酒曲，因此可将猕猴桃充分清洗干净。 【小问2详解】 果酒制作时，为了让酵母菌有氧呼吸大量繁殖，或防止发酵过程中产生的CO2使发酵液溢出，发酵瓶中不能装满果汁。酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精和二氧化碳，因此进行果酒发酵时，对充气口应关闭，排气口应打开。 【小问3详解】 醋酸菌可利用酒精发酵产生醋酸，因此果酒发酵完成后酿制成果醋过程的反应式为C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O+能量；果酒发酵时需要无氧环境，酵母菌发酵的最适温度为18-30℃，醋酸菌最适宜的生长温度为30-35℃，比酵母菌酒精发酵时的温度高，且醋酸菌是好氧菌，氧气必须充足才能发酵产生醋酸，因此由果酒转变成果醋的制作时，需要升高温度和打开软管夹和连接充氧泵，通入氧气（保持通氧）。 27. 苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。 （1）配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH______（填“之前”或“之后”），培养基灭菌的常用方法是______。 （2）图中①过程取5g土壤加入______mL无菌水中，②③过程用______法获得芽孢杆菌单菌落，若10-1、10-2悬液对应平板上菌苔完全覆盖培养基，10-3、10-4、10-5对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则取样土壤中芽孢杆菌总数约______个。 （3）目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于______（填“A”或“B”）处，将芽孢杆菌接种______（填“A”或“B”）处。 （4）检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于苹果树腐烂病防治。与化学防治相比，该方法的优势是______。 【答案】（1） ①. 之后 ②. 高压蒸汽灭菌法   （2） ①. 45 ②. 稀释涂布平板 ③. 5.6×107  （3） ①. A ②. B （4）降低环境污染；减少化学试剂的残留；对其他动物扰动小等   【解析】 【分析】1、题图分析：图中实验内容有三项，一是利用稀释涂布平板法从土壤中分离出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌；二是筛选出抑菌率最高的芽孢杆菌菌株；三是对苹果枝条打孔检测抑菌效果。 2、由题图信息分析可知，该实验的目的是探究不同稀释倍数的芽孢杆菌发酵原液对感染了苹果树腐烂病菌枝条的抑菌率的影响；实验通过芽孢杆菌的分离筛选、目的菌株筛选、抑菌效果测定得到不同稀释倍数的芽孢杆菌发酵原液对感染了苹果树腐烂病菌枝条的抑菌率的影响。 【小问1详解】 配制培养基时，培养基的灭菌应该在调PH之后，培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。 【小问2详解】 要获得稀释了10倍的土壤悬液，应该将5g土壤加入45mL无菌水中充分振荡。由图可知在不同的稀释度下取0.1mL接种到三个平板上，这种接种方法是稀释涂布平板法。根据平板上的菌落计数，选取菌落数为30-300的平板计数，取样土壤中（5g）芽孢杆菌总数为112÷0.1×104×5=5.6×107个。 【小问3详解】 目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于A处，将芽孢杆菌接种B处，以便筛选出目的菌株。 【小问4详解】 与化学防治相比，该生物防治方法的优势是：降低环境污染；减少化学试剂的残留；对其他动物扰动小等。 28. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程①为脱分化。先将外植体_______（消毒/灭菌）处理，再接种于MS培养基上诱导其分裂形成。在MS培养基中需添加适量的蔗糖，蔗糖的作用有_______（至少答出2点）。 （2）过程②中可用含_______酶的溶液去除细胞壁以获得有活性的原生质体。通常添加适量甘露醇调节溶液的渗透压，溶液渗透压既不能太低也不能过高，原因是_______。 （3）图中，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理，其中B处理为_______，进行的A、B处理的意义是_______。 （4）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被胞内酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择_______（填“有”或“无”）荧光的原生质体用于融合。 （5）过程③可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有_______法等。 （6）过程④中，再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X的名称是_______。 （7）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下表。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 由表可知，后代植株中_______类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本_______的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进主要来源亲本的基因组。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 作为碳源、能源、维持培养基渗透压的稳定、降低杂菌污染的概率 （2） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 低渗透压溶液中原生质体吸水张破，过高渗透压溶液中原生质体失水过多死亡 （3） ①. 碘乙酰胺 ②. 有利于筛选出杂种细胞 （4）有 （5）高Ca2+-高pH融合法 （6）细胞分裂素 （7） ①. 乙 ②. 柴胡 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 【小问1详解】 植物组织培养之前需要对外植体进行消毒，之后诱导脱分化形成愈伤组织。在植物组织培养的MS培养基中，加入适量的蔗糖，一是可以作为碳源，为植物组织细胞的生长提供能量；二是可以调节培养基的渗透压，维持细胞正常的形态和生理功能，除此之外还能降低杂菌污染的概率得作用。 【小问2详解】 过程②是去壁的过程，中可用含纤维素酶和果胶酶酶的溶液去除细胞壁以获得有活性的原生质体。通常添加适量甘露醇调节溶液的渗透压，溶液渗透压既不能太低也不能过高，原因是低渗透压溶液中原生质体吸水张破，过高渗透压溶液中原生质体失水过多死亡。 【小问3详解】 已知碘乙酰胺处理细胞后，会使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。由于杂种细胞在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，即柴胡原生质体用碘乙酰胺处理后酶失活，细胞生命活动受限；红豆杉原生质体经X射线处理后失去分裂能力，可以使细胞恢复正常分裂，所以只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。所以对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理，其中A处理为X射线处理，B处理为碘乙酰胺处理，进行的A、B处理的意义是有利于筛选出杂种细胞。 【小问4详解】 根据题干信息可知，荧光的强度与原生质体的活力呈正相关，因此应选择有荧光的原生质体用于融合。 【小问5详解】 过程③可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有高Ca2+-高pH融合法等，融合完成的标志是植物细胞再生出细胞壁，与该过程完成有关的细胞器是高尔基体。 【小问6详解】 在植物组织培养中，生长素/细胞分裂素比例高时有利于根的分化，比例低时有利于芽的分化，比例适中促进愈伤组织的形成，因此植物激素X的名称是细胞分裂素。 【小问7详解】 根据表格信息可知，植株后代乙无红豆杉DNA片段，说明其不是杂种植株。甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成。 29. 癌症免疫疗法是指重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。某些种类癌细胞表面有高表达的蛋白PSMA，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于癌细胞与T细胞聚集。图甲为科研人员尝试构建的双特异性抗体PSMA×CD28生产流程图；图乙为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理图。回答下列问题： （1）据图甲分析可知，制备双特异性抗体的过程中，涉及到的动物细胞工程技术主要有________、________。 （2）制备双特异性抗体时，应先将________（填物质的具体名称）分别注射到小鼠体内再分离出淋巴细胞。与诱导植物原生质体融合不同的是可用________法。将第一次筛选获得的细胞进行多倍稀释，借助多孔细胞培养板，利用________原理进行第二次筛选，选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 （3）抗体都是由两条链和两条链组成的条肽链对称结构。由于融合细胞会表达出两种链和两种链且链和链又能随机组合，因此杂交瘤细胞会产生________（填“一种”或“多种”）抗体。双特异性抗体协助杀伤癌细胞的机理是________。 【答案】（1） ①. 动物细胞融合 ②. 动物细胞培养 （2） ①. PSMA、CD28 ②. 灭活病毒诱导 ③. 抗原与抗体特异性结合（抗原-抗体杂交） （3） ①. 多种 ②. 双特异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA，又能结合CD28，使得癌细胞与T细胞可更好的聚集 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞融合（诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合）和动物细胞培养技术（培养B细胞等）等。 【小问2详解】 双特异性抗体PSMA×CD28制备时，PSMA、CD28相当于抗原，需要先将PSMA、CD28分别注射到小鼠体内刺激小鼠产生B淋巴细胞，再分离出B淋巴细胞。灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的诱导方法。抗原与抗体的结合具有特异性，故利用抗原与抗体特异性结合的原理可筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞； 【小问3详解】 融合细胞会表达出两种L链和两种H链，而L链和H链又是随机组合的，所以杂交瘤细胞A×B会产生多种抗体；双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是双特异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA，又能结合CD28，使CD28在癌细胞与T细胞结合部位聚集，从而有效激活T细胞杀伤癌细胞。 30. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。 （1）过程①除图中所示方法外，还可以借助载体将_____导入细胞中，或直接将_____导入细胞中。过程②应选用处于_____的卵母细胞，采用显微操作法去“核”，其实是去除_____。 （2）重构细胞经分裂、发育至_____时期，可移植到受体子宫中。移植之前，需要对受体动物进行_____处理。若要获得遗传性状完全相同的多只幼鼠，可对重构胚进行_____，再进行移植。 （3）图中向重构胚中注入Kdm4d的mRNA和TSA说明组蛋白的_____和_____有利于重构胚的后续发育过程。 （4）科研人员为确定Kdm4d的mRNA的作用，进行了如下实验，其中A组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d的mRNA的重构胚，实验结果如图所示。根据实验结果推测Kdm4d的mRNA的作用是_____。 【答案】（1） ①. 特定基因 ②. 特定蛋白 ③. 减数分裂Ⅱ中期##MII期 ④. 纺锤体—染色体复合物 （2） ①. 桑葚胚或囊胚 ②. 同期发情 ③. 胚胎分割 （3） ①. 去甲基化 ②. 乙酰化 （4）注入Kdm4d的mRNA通过翻译产生的去甲基化酶，促进了相关基因的表达，进而表现出既能提高融合细胞发育成囊胚的形成率，也能提高囊胚中内细胞团的形成率 【解析】 【分析】将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【小问1详解】 过程①中小分子化合物诱导成纤维细胞脱分化为iPS细胞，可借助载体将特定基因导入细胞中，或直接将特定蛋白导入细胞中。动物细胞核移植时，应选用处于减数第二次分裂中期的细胞，因为处于减数第二次分裂的次级卵母细胞体积较大，便于操作；并且其中含有易于激发细胞核全能性体现的物质，因此过程①应选用处于减数分裂Ⅱ中期(或MⅡ期)的卵母细胞。减数分裂Ⅱ中期（MI期)卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，采用显微操作法去“核”，其实是去除该复合物。 【小问2详解】 在核移植实验中，一般通过电脉冲（或电刺激）将重构细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段时，可移植到受体母牛子宫中。移植之前，需要对受体母牛进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境。若要获得遗传性状完全相同的多只犊牛，可对重构胚进行胚胎分割。 【小问3详解】 重构胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程。 【小问4详解】 据题意和题图可知，A 组用正常培养液培养重构胚，B组用正常培养液培养注入了Kdm4d 的mRNA 的重构胚，A组囊胚的形成率和内细胞团的形成率都低于B组，推测 Kdm4d的mRNA的作用是注入mRNA通过翻译产生的去甲基化酶，促进了相关基因的表达进而表现出既能提高融合细胞发育成囊胚的形成率，也能提高囊胚中内细胞团的形成率。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $