河北省衡水市桃城区河北衡水中学2025-2026学年度高二年级下学期综合素质评价三生物科

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2026-05-23
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资源信息

学段 高中
学科 生物学
教材版本 高中生物学人教版选择性必修3 生物技术与工程
年级 高二
章节 -
类型 试卷
知识点 -
使用场景 同步教学-阶段检测
学年 2026-2027
地区(省份) 河北省
地区(市) 衡水市
地区(区县) 桃城区
文件格式 PDF
文件大小 8.60 MB
发布时间 2026-05-23
更新时间 2026-05-23
作者 匿名
品牌系列 -
审核时间 2026-05-23
下载链接 https://m.zxxk.com/soft/58010135.html
价格 0.00储值(1储值=1元)
来源 学科网

内容正文:

2025-2026学年度高二年级下学期综合素质评价三 生物学科 主命题人:李金其他命愿成员:冯金曼 本试卷共100分,考试时间75分钟. 一、单选题(1-20每题1分,21-25每题2分,共30分) 1.传统发醇技术在食品制作中应用广泛,下列叙述正确的是() A.果酒制作中宜选用新鲜水果并充分洗净 B.腌制泡菜时,加入“陈泡菜水相当于接种 C.果酒制作完成后,通入空气即可维续进行果醋的发酵 D。果醋和果酒发醇过程中,微生物繁殖越快发酵产物产串越高 2.下列关于植物组织培养的叙述,正确的是() A。外植体接种到培养基后需立即进行消毒,以防止杂曹污染 B.作物脱毒时常选茎尖作为外植体,因为该部位细胞分裂旺盛 C.培养基中生长素细胞分裂素的值较高时,有利于芽的分化 D.怠伤组织形成过程中,通常需避光培养 3.下列关于植物组织培养和动物细胞培养的叙述中,正确的是() A.培养基中均需要加入琼脂和抗生素 B.培养基均需湿热灭菌后才能使用 C.二者所用原理都是细胞的全能性 D.均需要经过脱分化形成愈伤组织 4.杂交搐技术可用于制备单克隆抗体,下列叙述正确的是() A.将抗原注入小鼠体内,获得的B淋巴细胞能不断增殖 B.用纤维素酶处理小鼠的骨健疱细胞能使粘洼在一起的细胞分收开来 C,可用离心法诱导融合,将融合后的细胞进行培养就可提取单克隆抗体 D.利用克隆化培养和抗体检测技术可筛选出能分泌特定抗体的杂交痛细胞 高二年级生物 5.下列关于体细胞核移植技术的叙述错误的是() A.体细胞核移植难度大于胚胎细胞核移植的原因是细胞分化程度高 B.在动物体细胞核移植中,非人灵长类动物的体细胞核移植非常因难 C.体细胞核移植技术的理论已经非常完普,绝大多数克隆动物不存在健康问题 D。通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞形成重构胚 6.下列有关受精过程的说法,错误的是() A.精子的细胞膜和卵细胞膜相互融合依赖于细胞膜的流动性 B.精子在睡性动物的生殖道中获能后可参与受精 C.受精过程中透明带和卵细胞膜都会发生相应生理反应来防止多精入卵 D。精子入卵后,保留原有的核膜,细胞核体积增大成为雄原核 7.下列关于哺乳动物胚胎早期发育的叙述,正确的是() A.受精卵形成后即在输卵管内进行减数分裂,开始发有 B.蓑胚阶段分化的溢养层细胞将来发育成胎膜和胎盘的一部分 C.桑甚胚阶段细胞开始出现分化,透明带肢裂称作解化 D。卵裂期胚胎的体积不断增大,细胞数量不断增加 8.下列生物工程技术中,不需要用到胚胎移植技术的是() A.利用成纤维细胞等培养出可供移植的皮肤 B。利用乳腺生物反应器生产珍贵的医用蛋白 C.利用本地黄牛快速大量察殖引进的良种奶牛 D.利用试管婴儿技术帮助有生育因难的夫妇 9、胚胎工程具有广阔的应用前景,如可用于繁殖高产奶牛,下列叙述错误的是() A。胚胎分制所需主要仪器是体视显微镜和显微操作仪 B.胚胎分割只能对桑甚胚进行操作,囊胚阶段无法分割 C.分割后的胚胎可直接移植给受体或经体外培养后再移植给受体 D.胚胎分割产生的遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料 学科第1页,共8页 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描ApP I0.以下是限制性内切核酸酶切脚DNA分子后形成的部分片段。下列叙述错误的是() SCTGCA-3 S-G 3-G ② 3-CTGCA-5' A.以上DNA片段是由2种限制醇切削后产生的 B.①②两个黜性末端,不能用DNA连接直接连接 C.上述连接两个黏性末端,其连接后形成的DNA序列是-GACGTC- -CTGCAG- D.限制薛切脚成酸二酯键,DXA连接酶能催化磷酸二酯键形成 11.下列关于PCR的叙述,正确的是() A.该技术一般需要两组引物,并且两组引物的碱基序列必须互补 B.PCR反应需要使用解旋酶将模板DNA解旋 C.为保证酶的活性,PC需要在恒温条件下进行 D.PCR的原理是双链DNA的半保留复制 12.下列关于Ti质粒的叙述正确的是() A.农杆菌转化法只适用于双子叶和裸子植物 B.TDNA进入受体细胞后不能利用植物体内的降进行转录和翻译 C.将目的基因与T质粒整合的过程称为转化 D,Ti质粒上的TDNA区段可整合到受体细胞的染色体上 13.PC仪实际上是一个温控设备,能在每次循环的3个步骤间进行温度切换,主要过程如图 所示,图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是( ) ■■■T厂 工 TTTTTTTTT 工 0 b 引物1 引物1 TTTTTr TTTP工 E 引物Π 引物ū A,a、b、c过程对应设置的温度依次降低 B.若1个DNA进行6轮循环,则需要消耗63个引物 C.高温能澈活TaqDNA聚合降,PCR反应体系中无须加入Mg D.c过程从引物的5'端开始违接4种脱氧核苷酸 高二年级生物学利 14.关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验,下列叙述正确的是() A.在电场作用下,DNA可向与它所带电荷相同的电极移动 B.琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂,其可以在紫外灯下被检测出来 C.根据待分高DNA片段的大小,用琼脂糖溶液配制电泳燬冲液 D.电泳缀冲液在电泳过程中能维持合适的pH,并具有一定的导电性 15.下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图,其中1~4表示DNA上引物可能结合的 位置,目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是() 1 ® 2 OH HO ll蛛丝蛋白基因ll ® 3 A.若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因,会破坏4个磷酸二酯键 B.若受体细胞为大肠杆菌,则需先进行适当处理,更利于实现转化 C.在PCR仪中完成扩增4次,得到含有两种引物的DNA片段占比为78 D.若用PCR技术获取目的基因,则图中的1、4分别是2种引物结合的位置 16.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,错误的是() 导入植 培养成 构建表达载体 转入农杆菌 物细胞 再生植株 含重组Ti质粒 T质粒含抗虫基因重组Ti质粒 的农杆菌 植物细胞 植物 ① 的DNA ② ③ ④ ⑤ A.①一②利用两种不同限制酶处理,能避免含抗虫基因的DNA片段自身环化 B.②→③可用C*处理农杆菌,有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中 C.③一→④用农杆苗侵染植物细胞,重组T质粒整合到植物细胞的染色体上 D.④一⑤用植物组织培养技术培养,利用了擅物细胞的全能性 第2页,共8页 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描App 17。下列有关基因过程中基因表达载体的构建叙述正确的是() A,启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 B。启动子驱动迪传信息的复制和转录 C.表达载体中胰岛素基因可以通过人肌细胞mRNA逆转录获得 D.不同目的基因所需的启动子不一定相同 18.转基因抗虫棉经棉怜虫饲喂实验,发现棉花植株并无抗虫性状,科学家提取棉花叶片细胞 中的有关成分进行了如下检测,下列分析正确的是() A.对细胞中蛋白质进行抗原抗体杂交检测,若无杂交带,说明B:基因不能转录 B.采用PCR技术检测细胞中mRNA,若无杂交带,说明Bt基因无法复制 C.采用PCR技术检测Bt基因,若能测到结果,说明可能Bt基因反向插入T-DNA D.采用PCR技术没有检测到Bt基因,说明B!基因没有成功导入土讓农杆菌质粒中 19.与传统发醇相比,发醇工程的产量和质量均明显提高。下列说法正确的是() A.传统发酵无需进行消毒、灭菌,而发酵工程禍要消毒、灭曹 B.发醇条件变化会影响徽生物生长繁殖,但不影响其代谢途径 C、发酵罐的控制系统可实时监测和控制,通过反愤控制使发酵过程处于最佳状态 D.发醇工程可获得大量微生物菌体并从菌体中提取单细胞蛋白 20.胞质杂交是植物体细胞杂交应用的一个重要方面,下图为将品种甲叶绿体中的优良基因导 入品种乙,从而获得抗病品种丙的实验流程。下列叙述错误的是() ① →叶肉细胞原生质体。 蓄外处耳 品种甲 叶绿体 细跑技失去活性 品种乙0,根尖细跑原生质体 杂种原生质体→抗病品种丙 A.过程①的操作需要在等渗或略高渗溶液中进行 B.过程②可以用聚乙二醇(PEG)诱导融合 高二年级生物学 C.过程②筛选同时具备叶绿体和细胞核的原生质体 D。品种丙能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状 21.天然胰岛素易形成二聚体,使得其疗效被延缎,通过蛋白质工程将胰岛素第28位的瞄氨酸 睿换为天冬氨酸,从而抑制了胰岛素的聚合,以下叙述错误的是() A.利用蛋白质工程对胰岛素的改造需要以基因工程为基础 B.通过蛋白质工程可得到自然界中不存在的蛋白质 C.改造前后胰岛素在细胞内合成过程中遗传倍息的流向不同 D、蛋白质工程难度很大是因为对蛋白质的高级结构了解不够 22.关于转基因技术应用的安全性,下列说法错误的是() A,我们国家要求对转基因生物产品及其加工品加贴标注 B.转基因农作物的外源DNA都是经过认真选择的,不会带来任何问题 C.一旦发现转基因生物出现了安全性问题,要马上停止实验,并销毁重组生物 D.面对转基因技术的相关问题,我们要理性看待,不能人云亦云 23.为鉴定目的基因是否正确插入质粒中,某同学准备设计引物进行PC鉴定,如图所示为、 b、c3种引物在正确重组质粒中的相应位置,Tc2为四环素抗在基因,下列说法错误的是() 150bp 终止了 63 500bp 目的基因 Ter 100bp A.可选择引物a和c进行扩增,来判断目的基因是否插入到质粒中 B.可选择引物b和c进行扩增,来判断目的基因是否正确插入质粒中 C.选择引物a和b进行扩增,若扩增产物约为650bp,说明基因反向插入质粒中 D.将质粒导入大肠杆菌后,若表现出四环素抗性,说明导入的质粒含有目的基因 第3页,共8页 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描App 24TCR由能识别肿痛抗原的胞外单链抗体可变区(基因片段A控制合成)和胞内信号传导区城 (基因片段B控制合成)组成,现欲通过3次PC℉将两部分基因融合在一起形成下图结构(数字 表示相应的引物),与载体连接后形成Ⅲ组DNA分子。下列叙述正确的是() 4 志因片母设A 陆因片设B A.首先需用引物②、④与引物⑤、⑦扩增两个基因片段 B.引物①与引物⑧的5'端需各添加一个启动子以促进转录 C.引物③与引物⑧需同时使用以加快PCR进程 D,第3次PCR无需加入引物即可获得图示完整片段 25.亚硫酸氢钠可以使DNA中未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶,经过PCR扩增,该位置的胞 磨啶将被胸腺嘧啶普代,甲基化的胞嘧啶不受影响。如图为某基因单链部分初始序列和经亚硫 酸氢钠处理并进行PCR后的序列。下列叙述错误的是() 3'TGA GCA ATT TGA CGC AGT CAT 5'a 3.-CGA GCA ATT CGA CGC AGC CAT ..5'b 第112位第113位 第112位第113位 注:AA、UAG、UGA为终止密码子,第112位、第113位代表该序列所讨应的复甚酸拉置 A.该基因转录时,图中单链作为转录模板链 B.经亚硫酸氢钠处理并PCR后的序列为a链 C.RNA聚合酶移动到114位对应碱基序列时终止转录 D.图示单链初始序列中共有3个未被甲基化的胞嘧啶 高二年级生物学 二、多选题(每题3分,少选得1分,错选得0分,共15分) 26.干扰素是动物细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白,可用于对抗病毒的感染和癌症,但体 外保存相当困难。如图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的部分过程,获得的基因DNA可导 入大肠杆菌进行表达,字母表示相关物质,数字代表相关过程。下列叙述错误的是() ④ 分子设计 基因 蛋白质 冬·预期功能 DNA 维结构 生物功能 ① ② ③折叠 A.a表示多肽链,b表示mRNA,步骤④需要用逆转录酶 B.利用蛋白质工程获得的mRNA序列与动物细胞内干扰素mRNA序列不一定相同 C.①②③表示中心法则中遗传信息流动的部分过程 D.用蛋白质工程生产干扰素所用的基因表达载体不需要启动子和终止子 27研究人员以耳朵皮肤成纤维细胞、胎儿皮肤成纤维细胞和卵丘细胞三种细胞分别作为供核细 胞进行核移植,研究结果如下表所示。下列说法正确的是( 供核细胞 重构胚数(枚) 卵裂串(%) 囊胚率(%) 孵化率(%) 耳朵皮肤成纤维细胞 39 78.0 19.7 50.0 胎儿皮肤成纤维细胞 33 79.4 35.6 63.9 卵丘细胞 50 85.7 38.0 722 A.从卵果采集到的卵母细胞,需体外培养到Ⅲ期再去核 B.卵母细胞进行“去核”处理,这里的“核”是指细胞核 C.激活里构胚时,需要电刺激或乙醇等诱导细胞分裂和发育 D.三种细胞中,卵丘细胞更适合用作核移植的供核细胞 科第4页.共8页 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描App 28.百岁兰是一种颜危物种。为研发稳定高效的百岁兰叶片愈伤组织诱导体系,科研人员探究 了避光与昼夜节律(16光照和8h黑暗)对诱导百岁兰叶片愈伤组织的影响,实验结果见下图。 相关叙述错误的是( 300 暗处理叶片 400 昼夜节律处理叶片 250 300 150 200 图 100 骂 100 50 00 02 4681012 0 234 5 时间/周 时间/周 A.愈伤组织诱导过程中基因发生选择性表达,该过程也可发生基因突变和染色体变异 B.外植体进行适当的消毒处理后,立即使用蒸馏水清洗2~3次 C.暗处理和昼夜节律处理所用培养基中均需要添加蔗糖 D.昼夜节律处理下百岁兰脱分化和再分化的速率更快,愈伤组织生长更好 29.天然B一淀粉酶由484个氨基酸构成。研究发现,利用PCR技术对天然B一淀粉酶基因进行 改造,将该酶第476位天冬氨酸替换为天冬酰胺,耐热性明显提升。下列叙述正确的是() B-淀粉酶的编码序列 m.hFmwwwww.th 3 ① ② (3 ④ 3 HfmmmmmmmiftHfmmmmm 5 转录的模板链 A.引物②中含突变碱基,利用引物②和引物③通过PCR可以获得改造基因 B.选择正确的引物进行PC扩增,可以在第三轮循环获得改造后的基因 C.引物中存在不能与模板结合碱基,所以复性温度可以适当降低 D.经过N轮循环,可以得到2N一2N个突变基因 高二年级生物学科 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描APp 30,如图所示为利用基因工程培育出转基因鱼、转基因牛、抗虫棉等的过程。下列相关叙述正 确的是() 调节因 药用蛋 子基因 白基因 受精卵 ① 。转入药用蛋白基因的牛一。乳汁中提取药用蛋白 受精卵 抗虫基因 )。棉花受体细胞一。转基因抗虫棉花 克隆 生长激素基因 无免疫排斥反应 的猪器宜 ®O ·鲤鱼受精卵◆转基因鲤鱼 A.应用①中,药用蛋白基因需与乳腺蛋白基因的启动子共同构建表达载体 B.应用②中,可用花粉管通道法将抗虫基因导入棉花细胞 C,应用③中,将生长激素基因导入鲤鱼受精卵最常用的方法是农杆菌转化法 D.应用④中,调节因子的作用可能是调控猪的某些器官组织细胞的抗原不表达 科第5页,共8页 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描APp 三、非选择愿(共55分) 31.2018年3月,世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡,该物种仅剩下两头谁性,在此之前, 研究人员设法保存了北方白犀牛的精子。多个研究团队试图通过多种技术手段繁育该物种,请 回答下列(一)(二)两小题。 (一)一个研究团队试图培育试管北方白犀牛,其主要流程如下图1。 ① 胚胎 北方白犀牛 卵母细胞“ +泗 受精卵早期胚胎 试管动物 保存的北方 南方白犀牛 白犀牛精子 图1 (1①过程騫要对雌性北方白犀注射 目的是使其超数排卵。利用该技术 培育新个体的繁殖方式属于 (有性无性)繁殖。 (2)胚胎移植过程中,需要对代孕母牛进行同期发情处理的目的是 (二)另一个团队试图培育克隆北方白犀牛,其主要流程如下图2. 胚胎 8 +⊙去接 ○但选龄合⊙一翻 Aat 一→9 南方白犀牛 卵母细胞 重构胚早期胚胎 南方白犀牛 克膛动特 分高培养 体细胞 图2 北方白岸牛 (③)体外培养动物细胞在使用合成培养基进行细胞培养时,通常需要加入 等天然成分,动 物细胞培养所需的气体条件是 (④)取自雌性南方白犀牛的卵母细胞需要去核,在去核操作中常采用的方法是 法。 (⑤该团队获得的克隆北方白犀牛的性别为 (填字母A雌性B雄性C雠性或雄 性)。对比两幅图中试管动物和克隆动物的培育过程,二者都必须用到技术(填字母)。 A.胚胎移植技术B.基因重组技术C.核移植技术D,体外受精技术 高二年级生物 32.现代转基因抗虫作物(如Bt棉花、Bt玉米)主要表达CyA类Bt毒蛋白,长期大面积栽 种后,多种农业事虫己产生B肚毒蛋白抗性,导致抗虫效果下降,中国农科院团队利用生物信息 学与祖先序列重建技术,逆向推算出Cy2A家族在进化早期的祖先基因序列,人工合成该基因 并在大肠杆菌中表达,成功获得远古B(毒蛋白Ac0。该蛋白抗虫谱广、活性高,且与现有Bt 蛋白无交互抗性,在抗虫育种中具有重要应用前景。回答下列问题: (1)若己知Ac0蛋白某一活性区域的氨基酸序列为“一甲硫氨酸一脯氨酸谷氨酸一”, (填“能”或“不能”)直接准确推导出其编码基因中对应的脱氧核苷酸序列,理由是 (2)为获得自身持续合成Anc0蛋白的转基因抗虫棉花,科研人员构建了Ac0基因费达载体(部 分结构如图所示): 启动子 Anc0基因 终止子 s1 S2 S3 a链 b链 R1 R2 R3 ①图中启动子的作用是与 结合并发挥驱动基因转录出mRNA的作用,若想要鉴定目 的基因是否插入到载体上且确保插入方向正确,可以选用图中的引物(填序号)组合进行 PCR检测.1)S1和R22)S2和R32)S2和R22)S3和R1 若图中Anc0基因的模板链为b链,则引物S2的序列应与Anc0基因的 (填“a链”或 “b链)相应部分的序列互补。 ②构建Ac0基因表达载体时,常选用两种不同限制醇进行双爵切,选择限制醇时,除考忠目 的基因的插入位置外,还需保证酶切后不会破坏表达载体上的 (答2点). ③诺要获得纯合转基因抗虫棉,可将转基因棉花自交多代,逐代筛选,也可采用 技术 快速获得纯系。 (3)有人担心Ac0基因可能通过花粉漂移与近缘野生棉杂交,造成基因污染,为避免该风险, 可将Anc0基因导入棉花细胞的, 中。 科第6页,共8页 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描App 33.已知3酸甘油脱氢酶(GPD)是假丝酵母中甘油合成代谢途径的关键酶,利用某假丝酵 ④欲进一步对重组菌株生产甘油能力进行分析:挑取出的重组菌株与 菌株相比 母菌株为材料,克隆具有高效催化效串的3隙酸甘油脱氢酶的基因(Gpd).通过农杆菌介导法, 在发酵中生产甘油的能力增强,培养过程中可定期取样并使用 工具对菌体进行直接 转化假丝酵母野生型菌株,获得转G印d的重组菌株,进而利用该菌株来生产甘油。 计数,以评估增殖情况。 (1)获取目的基因 34.苯丙酮尿症是单基因遗传病,科学家将正常基因D导入该病惠者的细胞,以治疗该病。图 Gpd基因 甲为A、B、C三种质粒,图乙为含有目的基因D的DNA片段,图丙为重组毅体的示意图。 号物P 号引物P2 AmpR为氨卡青霉素抗性基因,T心为四环素抗性基因,LacZ为蓝色显色基因,其表达产物可 Pst I 号物P3 号物P4 以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质,使菌落是蓝色,EcoRI(0.6kb)、Pvul(0.8kb)为限 先用限制摩Ps处理基因组DNA后,连接形成环形DNA,再依据已知序列设计一对引物,通 制酶及其切削位点与复制原点之间的距离,回答下列问题: 过PC℉扩增出该基因的两侧序列,最后进行测序并拼接获得完整基因的序列,如图1: 复厨原点 一原点 ①在DNA提取液中加入 ,使DNA沉淀而析出。在沸水浴条件下,DNA遇 EcoRI LacZ 0.8kb (1.2kb) Am】 试剂呈蓝色,②通过PCR扩增两侧序列应选择图1中的引物是 复制原点 ③为确定克隆获得的Gpd基因的准确性,可将获得的基因序列与已建立的 进行 26 」 比对。 甲 Pvul EcoRI (2)构建重组DNA分子 -3.0kb1 DXba I5'-T↓TCGAG-3" 目的基因D 鞋 ②EcoR I5-G↓AATTC-3 4.0kb) 终止子③sac s-C TCGAG-3 丙 注:ZeoR是话草避族抗生基因 肩动子③ KanR是卡那避紫亢生基因 图2 (1)基因工程操作的核心步骤是 图甲中三种质拉适宜作为载体的是质粒一 ①已知a链为Gpd基因编码链,为保证正确连接,应在Gpd基因编码区上下游分别添加 与另外两种质粒相比,其作为载体的优点是 的限制爵识别序列,A.②③B.①② C.③②D.③0 (2)获取目的基因D时,应选择图乙中的限制酶 ,对目的基因D所在的DNA进行切割, )导入、筛选和鉴定重组菌株 如果仅知道基因D首尾的部分核苷酸序列,需要根据基因D已知核苷酸序列合成一,以 ①在超净工作台中的酒精灯火焰劳,取野生型假丝醇母菌种,采用 方法接种在固 便利用PCR技术扩增目的基因 体培养基上培养,适时执选单菌落再接种到液体培养基进行培养。 (3)将目的基因D和图甲中相应质粒连接后,得到图丙中三种方式,为选出正向连接的重组质粒, ③取适量的假丝酵母与农杆菌进行共培养一段时间后,通常要使用抗生素,其目的是杀灭农杆 使用对质粒完全酶切后,进行电泳分析,若是正向连接数体,电泳图谱中出现长度为 菌,然后在含有 的选择培养基中筛选,最终获得重组菌株。 kb和 kb两条带 高二年级生物学科第7页,共8页 CS扫描全能王 F3亿人都在用的扫描App 35.除脂酸(PA)是调节植物生长发育和逆境响应的重要信使物质,为了解植物细胞中PA的 动态变化,研究人员利用重叠延伸PC℉(重叠链相互搭桥、互为棋板而延伸,最终将不同来源 的DXA片段拼接起来)将高度专一的PA结合蛋白(PABD)基因与绿色荧光蛋白(GFP)基 因融合,构建有效监测细跑PA变化的荧光探针,并测定拟南芥细胞内PA合量。利用重叠延伸 PC℉获取融合基因的基本过程如图1所示,所用的T质粒如图2所示,请回答下列问题: PABD基因 GFP基因 引物1 引物3 启动子1 启动子2 l PCRI 引物2 Sn+ PCR2 引物4 CS基国 T-DNA 3c链 BamH I 终止子 6链3 3d链 终止子 质位 终止子 混合、变性后杂交 复制原点 重透廷伸 启动子3 转录方向→ 酶切位点 醇切位点 PABD-GFP融合基因 图2 图1 注:NcoI、BamH I、SacI、SalI为限制酵酶切位点,启动子1、2属于真核细胞表达系统,Sm+ 是链霉素抗性基因,Amp叶是氨苄青霉素抗性基因,GUS基因编码的辞能将无色物质X-G加c分 解,使植物细胞呈蓝色 (I)PCR反应体系中器加入 (答两点)、4种脱氧核苷酸、引物、Mg、缓冲液等。PCR 反应中的每次循环一般分为变性、、延伸三步, (2)图1中的PCR1和PCR2不能置于一个PCR体系中同时进行,原因是 为了重叠链顺利延伸,杂交的两条链分别为(填“ab"“c“")。获得融合基因后,用引 物1和4继续进行PCR大量扩增该序列。 (3)根据图2中T了质拉的结构及后续筛选的需要分析,在设计引物1和4时孺分别加入限制酶 高二年级生物学 的识别序列。经过相应酶切处理后,将融合基因与该质粒在DNA连接酶作用下形成重 组质粒, (④)用农杆首侵染拟南芥后,为了将被侵染的拟南芥细胞进行脱菌处理以及筛选含有融合基因的 拟南芥细胞,培养基上需要添加 ,然后,通过 技术可培育出 完整的转基因拟南芥植株。 (⑤通过观测转基因拟南芥根尖细胞中 了解PA的分布和含量. 科第8页,共8页 CS扫描全能王 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