四川内江市威远中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 以微生物发酵、基因工程等为载体，融合科技前沿（如人猴嵌合胚胎）与生活应用（泡菜腌制），考查生命观念与科学探究能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|15/45|微生物培养、发酵工程、细胞工程|结合药敏实验、平板划线等实验情境，考查科学思维| |非选择题|5/55|实验设计（泡菜亚硝酸盐检测）、技术应用（融合PCR、单克隆抗体制备）|以水果腐烂Pat检测、蛋白相分离检测为情境，突出探究实践与数据分析能力|

威远中学校2024级高二下期期中考试 生物试题 一．单选题（每个选项中只有一个符合要求，共15小题，每小题3分，共45分） 1. 为将尾菜（蔬菜废弃物）转化为优质饲料，研究人员常使用乳酸菌、酵母菌等进行混合发酵。下列叙述正确的是（　　） A. 发酵前对尾菜进行高温处理，为发酵提供了合适的温度 B. 发酵过程中控制pH稳定，有利于维持酶的空间结构和活性 C. 为获得优质乳酸菌，需用以纤维素为唯一碳源的选择培养基 D. 采用平板划线法计数，可有效监测发酵液中菌种数量的变化 2. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法不正确的是（ ） A. 若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍 B. 图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的 C. 若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是7×108个 D.图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物一定能合成脲酶 3.为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，图1为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图2。下列相关叙述正确的是(　　) A.为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中器材①②③ B.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果 C.图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下产生了突变株 D.图2中Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 4. 发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的是（　　） A．用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 B．菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来 C．发酵产品包括微生物菌体本身或代谢产物，可通过过滤、离心、蒸馏等方法纯化 D．筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产 5. 黄酮类物质具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性，传统提取方法效率低下，难以满足市场需求。为解决这一问题，科研人员利用芒果悬浮培养细胞技术提高黄酮类物质的产量。生产的基本流程如下图所示，下列叙述正确的是（ ） A. 芒果悬浮培养体系中需通过充气口通入无菌空气，满足细胞有氧呼吸的需求 B. 黄酮类物质是芒果细胞在生长过程中产生的初生代谢产物，对细胞生命活动至关重要 C. 愈伤组织是由外植体脱分化形成的，细胞排列紧密、形态规则 D. 该生产技术最终培育出完整芒果植株，充分体现了植物细胞的全能性 6．实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．丙过程是原代培养，往往会因为细胞密度过大、有害物质积累等分裂受阻 B．合成培养基是按细胞所需的营养物质的种类和所需量严格配制而成的 C．传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，无须再用酶处理 D．体外培养的细胞有的贴壁生长有的悬浮生长，都会发生接触抑制现象 7．线粒体遗传病是由线粒体DNA突变引起，也受核基因的影响。为研究线粒体遗传病的机制，需构建核基因相同的转线粒体永生细胞系。现利用线粒体遗传病患者的淋巴细胞和线粒体DNA缺失的骨肉瘤细胞（ρ°细胞）构建转线粒体永生细胞系，过程如图所示。淋巴细胞受EBV病毒感染后能无限增殖，会被BrdU杀死；ρ°细胞不会被BrdU杀死，但是在含有尿嘧啶的培养基中才能生长。下列叙述错误的是（    ） A．诱导细胞融合时，灭活病毒可使细胞接触处的蛋白质和脂质分子重新排布 B．淋巴细胞系作为线粒体DNA供体细胞，ρ°细胞作为核供体细胞 C．选择培养基中加BrdU不加尿嘧啶，可筛选出转线粒体永生细胞 D．通过克隆化培养和抗体检测，阳性细胞即为转线粒体永生细胞 8. 中外科学家团队成功构建了世界首例人猴嵌合胚胎，即同时具有人类细胞和猴细胞来源的胚胎，为解决异种嵌合效率低下等问题提供了新的思路，对器官再生研究具有指导意义。嵌合胚胎培育的部分过程如图所示。分析错误是（ ） A. 嵌合胚胎早期发育所依据的原理是细胞分裂和分化 B. 图中获得的胚胎发育成器官移植到个体用于治疗时，不会发生免疫排斥反应 C. 上述技术只能用于治疗性克隆，不能用于生殖性克隆 D. 嵌合胚胎研究为人类器官异体再生提供了潜在模型 9.基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中可能不发生碱基互补配对的步骤是（ ） A.利用 PCR获取和扩增目的基因 B.基因表达载体的构建 C.将目的基因导入受体细胞 D.检测目的基因是否转录出mRNA 10. “X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。下列叙述错误的是(　　) A.第一轮复制得到2个DNA分子，即①②各一个 B.第二轮复制得到4个DNA分子，即①②③④各一个 C.第四轮复制得到16个DNA分子，其中有4个X基因 D.经五轮循环后产物中有五种不同的DNA分子 11．Cre-loxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（loxP1和loxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是（　　） A．Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键 B．若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色 C．若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红或黄或蓝色 D．若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色 12．乳腺生物反应器是通过转基因技术，将外源基因导入动物（如牛、羊）基因组中，并使其在乳腺组织特异性表达，利用动物乳腺高效合成、分泌蛋白的能力，在乳汁中生产药用蛋白或其他高价值产品的生物技术体系。下列说法正确的是（ ） A．在构建基因表达载体时，需要将药物蛋白基因和该基因原来的启动子等重组在一起 B．与利用转基因大肠杆菌生产人干扰素相比，乳腺生物反应器得到的产物活性更高 C．乳腺生物反应器中，只有乳腺组织细胞才含有外源基因 D．若需要利用乳腺生物反应器生产速效胰岛素类似物，应从设计蛋白质的氨基酸序列出发 13．下列有关实验操作的叙述，正确的是（　　） A．可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 B．诱导愈伤组织和后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照 C．提取DNA时，在研磨液中加入切碎的洋葱，充分研磨后过滤，弃去上清液 D．体外受精时，用高浓度的ATP溶液处理采集到的精子使其获能 14.阿奇霉素是一种抗生素，它可通过与细菌50S核糖体的亚单位结合及阻碍细菌转肽(肽的一部分和其他肽的一部分或氨基酸的交换转移反应)过程，从而抑制细菌蛋白质的合成。除细菌外，支原体、衣原体等也可以被阿奇霉素有效地抑制。下列相关叙述正确的是(　　) A.支原体无细胞核，也无线粒体、核糖体等细胞器 B.细菌、支原体、衣原体的遗传物质都主要是DNA C.使用阿奇霉素时，细菌的基因转录过程仍能进行 D.人体患病毒性流感时，也宜服用阿奇霉素进行治疗 15.科学家试图用益生菌来治疗人体的某些胃肠道疾病。益生菌是一类包括酵母菌、双歧杆菌、乳酸菌等在内的多种微生物的统称，大多对氧气极为敏感。下列相关叙述正确的是(　　) A.益生菌都具有细胞→组织→器官→系统→个体生命系统层次 B.益生菌中都含有容易被碱性染料染成深色的染色质 C.有些益生菌能够通过有丝分裂进行增殖 D.大多数肠道微生物是需氧型的 二．非选择题（共5题，共55分） 16.(11分)泡菜是指为了长时间存放、在低浓度食盐溶液中腌制，并经过严格流程制作的蔬菜加工品。在腌制过程中由于微生物的作用会产生乳酸，同时也会生成亚硝酸盐。亚硝酸盐是世界卫生组织公布的主要致癌物质之一。芥菜是制作泡菜的常用的蔬菜之一，某研究小组做了以下实验。根据实验步骤和结果，分析回答下列问题。 步骤1：材料处理 将新鲜芥菜洗净后将水沥干，平均分为3份放入坛中，标为A、B、C组 步骤2： 实验操作 A组：5%食盐浓度 B组：10%食盐浓度 C组：15%食盐浓度 芥菜装菜时尽量将菜体压实，加入配好的食盐水，盐水要没过芥菜，盖盖子后还要用水封口。 步骤3：恒温培养 28 ℃ 28 ℃ ① 步骤4：分析实验结果 (1)本实验探究的问题是：______________________________________________。 (2)实验步骤2中尽量将菜体压实，盐水没过芥菜，既要加盖，还要用水来封口的原理是_________ _____________________________。实验步骤3中的“①”应该是________，这样做是为了____________。 (3)据实验结果可知，____组的食盐溶液腌制芥菜较为健康，且在第___天后食用较好。 (4)酸菜发酵主要利用乳酸菌，它以________的方式快速繁殖。与白菜叶肉细胞相比，乳酸菌的细胞中没有________(填结构名称)，只能利用现成的有机物生活。除了泡菜，利用乳酸菌发酵制成的食品还有________(写一种)。 17．（11分）水果在运输和储藏过程中的腐烂会对果农造成巨大损失。大多数的水果采后腐烂都是由病原菌引起的，如扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其代谢产物棒曲霉素（Pat）是一种具有致畸、致癌、致突变作用的毒素。为了解腐烂苹果中的Pat分布情况，研究人员将扩展青霉先活化再接种至苹果使其腐烂，苹果的病斑直径可代表腐烂程度。选择具有不同病斑直径的苹果，测定Pat含量，实验结果如下图所示。请回答以下问题： 菌种活化所需培养基配方： 组分 蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4 蒸馏水 含量 30g 2g 0.5g 0.5g 0.01g 1g 定容至1000mL （注：培养温度28℃，培养时间7d，振荡培养） (1)根据培养基成分和培养条件，可判断扩展青霉的代谢类型为______。微生物培养基中一般都含有______等营养物质。可采用______法对培养基进行灭菌。培养扩展青霉时，一般需要将培养基调至______性。 (2)实验中，除测定不同腐烂程度苹果中的Pat含量，还测定了同一腐烂程度苹果的不同部位的Pat含量。将各腐烂苹果分为5个部位：①号部位为已腐烂部分，②号部位为病健交界处（腐烂与未腐烂部位的交界处）起0~5mm，③号部位为病健交界处起5～10mm，④号部位为病健交界处起10～15mm，⑤号部位为去除①~④号部位后的剩余部分。由图1可知，苹果腐烂程度越大Pat含量______。图2所示实验的自变量为______。 (3)研究人员还绘制了图3来表示腐烂程度不同的苹果中，Pat含量在腐烂部位和未腐烂部位的分布。仅根据图3结果，______（填“能”或“不能”）判断病斑直径大的苹果相比病斑直径小的苹果，未腐烂部位Pat含量的大小关系，原因是______。 18.（10分）急性髓系白血病是由于造血干细胞癌变引发的，图1是癌变的造血干细胞的一种免疫逃逸机制。图2是科研人员利用动物细胞工程研制抗CD47的单克隆抗体（一种IgG）的过程示意图。请回答下列问题： （1）图1中癌变的造血干细胞过表达CD47实现免疫逃逸的机制是_____。 （2）图2中过程①诱导细胞融合的方法有PEG融合法、______（写出两种方法）。过程②的目的是筛选出_____。过程③利用了_____的原理。 （3）过程④使用无血清体外培养成为当前研究的主要方向，无血清体外培养的优点有_______（答出一点即可）。 （4）科研人员继续研究了抗CD47单克隆抗体对白血病小鼠的治疗效果，实验结果见下图。阿糖胞苷是一种常见的治疗白血病的药物。 ①IgG组是指给小鼠注射了一种抗体，这种抗体与抗CD47的单克隆抗体相比，最大的区别是______。 ②根据实验结果可以得出的结论有______。 19.（11分） 融合PCR技术(fusion PCR)采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来，为同源重组片段的构建提供了快速简捷的途径。图1表示融合PCR技术的过程示意图(P1～P4表示引物)，图2表示融合后产物的电泳图。 (1)从化学本质上来说，引物是________，其作用是________________。 (2)图1过程设计的P2与P3引物的添加序列必须能够发生____________。融合PCR步骤1中，至少进行________次循环才能获得基因A的PCR产物。 (3)融合PCR步骤2中基因A、B融合形成一个基因的机制是_______________________________ _____________________________。若要对A、B融合基因继续进行PCR扩增，则图1中的M、N处位置所需要的引物分别是________。 (4)图2中电泳图中________号条带最可能表示融合后片段，若PCR反应没有扩增出任何产物，则可能的原因是_______________________________(至少两点)。 20.（12分）相分离是蛋白质具有的一种物理特性，是驱动细胞内各类无膜凝聚体形成的重要机制。研究人员将未知蛋白与不具有相分离特性的Cry2蛋白相连，如果未知蛋白具有相分离特性，则在蓝光照射下会发生凝聚，从而开发出检测蛋白是否有相分离特性的工具。FUS蛋白作为经典的相分离蛋白，经常用作实验对照。为了探究X蛋白是否具备相分离特性，科学家需要构建能同时表达Cry2蛋白和X蛋白的重组质粒，质粒中LacZ基因编码产生的β—半乳糖苷酶可以分解X—gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。图1表示质粒的结构，图2表示含有目的基因的DNA片段，其中P1、P2、P3表示引物，其余箭头处表示相关限制酶的识别位点。回答下列问题： （1） 构建重组质粒的过程中需要用到E.coliDNA连接酶，该酶的作用是将具有 的DNA片段连接起来。据图1分析，应选用四种限制酶中的 和 切割质粒，以保证目的基因插入后能够正常表达出 Cry2蛋白和X蛋白。 （2）已知X蛋白基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG。研究发现在紧邻起始密码子AUG之前加入序列GCCACC，会显著提高基因的表达效率。利用PCR技术获取X蛋白基因时，为保证X蛋白基因能正确插入载体并高效表达，除选择引物P1外，还需要选择引物 （填“P2”或“P3”），并在该引物5端增加碱基序列5＇- -3＇。 （3）为筛选出成功导入重组质粒的目标菌，需要将重组质粒与经处理的大肠杆菌混匀，再将大肠杆菌接种到含有四环素和X-gal的培养基上。培养一段时间后，培养基中颜色为 的菌落为目标菌落，原因是 。 （4）为了确认X蛋白的相分离特性，还可以构建两种重组质粒作为对照，对照组质粒与实验组质粒相比，所含基因的差异分别是 、 。 威远中学校2024级高二下期期中考试 生物参考答案及解析 1． 单选题（每小题3分，共45分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 答案 B D B C A D D B C C B B A C C 二．非选择题（共5题，共55分） 16.(11分，除标注外，每空1分) (1)不同食盐浓度对芥菜中亚硝酸盐含量的影响（2分）　 (2)创造无氧环境，利于乳酸菌的发酵（2分）　 28 ℃ 控制单一变量　 (3) A　 4　 (4)二分裂　 叶绿体　 酸奶(合理即可) 17． （11分，除标注外，每空1分） (1)异养需氧型 水、‌碳源、‌氮源、‌无机盐等（2分） 高压蒸汽灭菌（湿热灭菌） 酸 (2) 越高 病斑直径及同一腐烂程度苹果的不同部位（2分） (3) 不能 仅根据图3结果可知随病斑直径增大，未腐烂部位Pat含量比例降低，但不能得出病斑直径大小与未腐烂部位Pat含量大小的关系（2分） 18.（10分，除标注外，每空1分） （1）巨噬细胞表面的信号识别蛋白与CD47结合，抑制了巨噬细胞的吞噬作用 （2分） （2）电融合法、灭活病毒诱导法（2分） 杂交瘤细胞 抗原与抗体特异性结合 （3）可以避免血清中某些未知成分对细胞的影响，实验结果更可靠；降低成本，便于大规模生产；减少病原体污染的风险等（答出一点即可，1分） （4）①无特异性 ②抗CD47单克隆抗体与阿糖胞苷联合使用对白血病小鼠的治疗效果更好（抗CD47单克隆抗体单独使用有一定治疗效果，联合阿糖胞苷效果更佳等)（2分） 19.（11分，除标注外，每空1分） (1)一小段单链DNA或RNA　 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 (2)碱基互补配对　2　 (3)引物P2与P3添加序列的互补链发生碱基互补配对，然后在Taq DNA聚合酶的作用下向两边延伸，基因A、B完成融合（2分）　 P1、P4（2分）　 (4) 4　 复性温度太高；引物设计不合理，无法与目的基因结合（2分） 20.（12分，除标注外，每空1分） (1) 互补黏性末端 MunI XhoI (2) P2（2分） GAATTCGCCACC（2分） (3) 白色 重组质粒中不含LacZ基因，不能编码产生的β-半乳糖苷酶，不能分解X-gal产生蓝色物质（2分） (4) 不含X蛋白基因 用FUS蛋白基因替换X蛋白基因（两个答案可以交换） ( 9 ) 学科网（北京）股份有限公司 $