专题11 发酵与细胞工程（3大考点）（北京专用）2026年高考生物二模分类汇编

**基本信息** 北京多区二模生物试题汇编，聚焦发酵与细胞工程三大考点，精选16道题，融合科研案例与实验情境，突出能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|12题|发酵工程（酵母菌培养、耐药性探究）、植物细胞工程（组织培养、原生质体融合）、动物细胞工程（细胞培养、杂交瘤技术）|以北京二模真题为素材，情境贴近科研（如工程菌株选育）和实验操作（如抑菌圈分析）| |非选择题|4题|含植物细胞杂交（乙酰化调控）、动物干细胞培养（基因表达分析）等综合题|注重科学思维（如实验变量控制）和探究实践（如结果图表分析），符合高考命题趋势|

专题11 发酵与细胞工程 4大考点概览 考点01 发酵工程 考点02 植物细胞工程 考点03 动物细胞工程 发酵工程 考点1 1、（2026·北京西城·二模）下列高中生物学探究实践中，需要使用显微镜的是（    ） A．培养液中酵母菌种群数量的变化 B．利用酵母菌制作传统发酵食品 C．探究酵母菌细胞呼吸的方式 D．酵母菌的纯培养 2、（2026·北京丰台·二模）为探究大肠杆菌对中药黄芩的耐药性，研究人员在接种了大肠杆菌的培养基中放置含等量黄芩或四环素的滤纸片，培养一段时间后，从抑菌圈边缘挑取细菌重复培养，结果如下图所示。下列叙述错误的是（    ） A．药物诱导基因定向突变，使大肠杆菌产生耐药性 B．抑菌圈直径越大，说明药物的杀菌作用越强 C．黄芩可作为抗菌药物，不易使细菌产生耐药性 D．交替使用不同药物可降低产生耐药性的速度 3、（2026·北京昌平·二模）酵母菌可利用甲醇生产单细胞蛋白，野生型菌株甲醇利用率低，我国科研人员选育出高效利用甲醇的工程菌株并实现工业化生产。相关叙述正确的是（　　） A．甲醇为酵母菌提供碳源和氮源 B．菌种扩大培养是发酵工程的中心环节 C．提高通气量与搅拌速率可增加溶氧，提升产量 D．单细胞蛋白是通过分离纯化获得的代谢产物 4、（2026·北京海淀·二模）某同学进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，结果在以尿素为唯一氮源的选择培养基上没有出现菌落。该同学进行反思时，对可能原因的分析，不合理的是（    ） A．土壤样品稀释度过高 B．接种时未设置对照 C．涂布器灼烧后未彻底冷却 D．培养时间不足尚未形成菌落 5、（2026·北京石景山·二模）利用灰色链霉菌（一种需氧细菌）发酵生产链霉素。生产中相关操作不恰当的是（    ） A．接种前对菌种进行扩大培养 B．监控pH、温度、溶解氧等参数 C．用稀释涂布平板法实时监测活菌数量 D．通过提取、分离和纯化获取链霉素 6、（2026·北京房山·二模）家庭版水果酵素制作：将水果切碎、加糖，利用酵母菌、乳酸菌、醋酸菌依次进行发酵，先后出现酒味、酸味，最终得到酸性发酵液。下列相关叙述正确的是（    ） A．整个发酵过程须持续通入氧气 B．发酵过程中有机物的种类会减少 C．产生酒味主要与乳酸菌的无氧呼吸有关 D．酵母菌、乳酸菌、醋酸菌均能使发酵液pH下降 植物细胞工程 考点2 1、（2026·北京丰台·二模）北京天安门广场大型立体花坛中的花卉是通过植物组织培养获得的，呈现出高度一致的颜色和形态，下列叙述错误的是（    ） A．进行植物组织培养时必须选取离体的植物器官、组织或细胞等 B．花卉组织培养时，脱分化形成愈伤组织的过程需要充足光照 C．调控植物激素的比例，能诱导愈伤组织分化成根、芽等不同器官 D．植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性 2、（2026·北京丰台·二模）以下实验中，酒精的用途错误的是（    ） A．观察花生种子的脂肪时，苏丹Ⅲ染液染色后用50%酒精洗去浮色 B．观察植物有丝分裂实验中，解离液中含体积分数为95%的酒精 C．绿叶中色素的提取和分离实验中，用无水乙醇提取色素 D．植物组织培养实验中，使用95%酒精对外植体进行消毒 3、（2026·北京东城·二模）将口蹄疫病毒衣壳蛋白P1的基因导入水稻愈伤组织，筛选后获得表达P1蛋白的转基因水稻。给小鼠饲喂该转基因水稻能激活针对口蹄疫病毒的肠道黏膜免疫反应。下列叙述错误的是（　　） A．将P1基因导入愈伤组织的常用方法是显微注射法 B．导入P1基因的愈伤组织经再分化获得转基因植株 C．可利用抗原-抗体杂交检测P1蛋白来筛选转基因植株 D．该种转基因水稻有望作为口蹄疫疫苗直接饲喂动物 4、（2026·北京昌平·二模）油菜是我国第一大油料作物，受菌核病威胁严重。用一定剂量的射线照射板蓝根原生质体，可以使其染色体片段化，再利用此原生质体与油菜原生质体融合，获得杂种细胞，经组织培养获得抗病植株。相关叙述正确的是（　　） A．需用胰蛋白酶去除植物细胞的细胞壁 B．可用灭活的病毒诱导两种原生质体融合 C．依据染色体数量筛选含抗病基因的杂种细胞 D．抗病植株的遗传性状与油菜更接近 5、（2026·北京房山·二模）某研究小组利用品种1（2N=28）和品种2（2N=40）的两个鸢尾属远缘种为亲本，通过植物体细胞杂交技术，培育出了结实率高、观赏性和适应性更强的品种3，如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．过程①需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．过程②可用灭活病毒诱导 C．④和⑤需要植物激素的调控 D．培育品种3的过程中发生了染色体变异 6、（2026·北京东城·二模）将橘柚N品系和柚H品系进行体细胞杂交，培育出柑橘新品种NH，并对亲本与NH展开分析。 (1)体细胞杂交中，需将两个亲本用______处理得到原生质体，诱导融合后获得杂交细胞，最终培育出NH。 (2)柑橘类植物果实品质与其酸度、黄酮醇含量有关。酶G可催化柠檬酸转化为非酸类物质；酶F可催化黄酮醇的合成。测定亲本与NH果实的相关指标，结果如图1。表明酶G和酶F的乙酰化水平与其酶活性分别呈______（填“正”或“负”）相关。 (3)NH中蛋白质的乙酰化水平对蛋白质积累量的影响结果如图2，图中斜实线表示mRNA与蛋白质含量变化完全同步，说明斜实线上蛋白质含量主要受______水平的调控。据图可知，比亲本乙酰化水平高的蛋白质含量与mRNA含量的相关性______（填“高于”“等于”或“低于”）乙酰化水平低的蛋白质；比亲本乙酰化水平高的蛋白质大量集中在图中第四象限，说明NH中蛋白质的高乙酰化水平会______其积累。 (4)蛋白质乙酰化修饰发生在其特定位点的赖氨酸上。将赖氨酸改变为谷氨酰胺可模拟乙酰化的赖氨酸；改变为精氨酸会抑制乙酰化发生。酶S为蔗糖合成酶，欲培育出蔗糖含量提升的NH，可将酶S基因中特定位点编码赖氨酸的序列突变为______对应序列，请说明理由______。 动物细胞工程 考点3 1、（2026·北京西城·二模）先体外培养脂肪细胞，然后去除细胞获得脂肪条件培养基（ACM）。用ACM培养前列腺癌细胞，48h后检测细胞数量，结果如图。下列说法错误的是（    ） A．用胰蛋白酶处理脂肪组织获得分散的脂肪细胞 B．对照组应该用无菌水培养前列腺癌细胞 C．ACM可能促进前列腺癌细胞的增殖 D．肥胖可能会加重前列腺癌患者病情 2、（2026·北京海淀·二模）双特异性抗体可以同时识别两种不同的抗原。研究者用过氧化物酶免疫大鼠，取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞（甲细胞），用生长抑素免疫同品系大鼠，获得脾脏细胞（乙细胞）。将甲、乙细胞融合获得杂交-杂交瘤细胞，筛选获得分泌双特异性抗体的细胞株，流程如下图。 下列选项错误的是（    ） A．①过程可用PEG或灭活的病毒诱导细胞融合 B．②过程中未融合的乙细胞不能长时间存活并增殖 C．③过程需在单一培养孔中接种多个杂交-杂交瘤细胞 D．④过程需筛选过氧化物酶和生长抑素阳性反应细胞 3、（2026·北京石景山·二模）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果见下图。下列叙述不正确的是（    ） A．在配制培养基时通常需要加入适量血清 B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C．不能直接用离心法收集细胞进行传代培养 D．细胞增长进入平台期可能与接触抑制有关 4、（2026·北京昌平·二模）牛多能性拓展干细胞（bEPSCs）是育种、培育优质牛肉等应用的核心材料，为建立可长期自我更新的bEPSCs系，科研人员开展系列实验。 (1)bEPSCs可从牛囊胚的______中分离获取，培养过程中需定期更换培养液的目的是补充营养物质、______。 (2)培养的bEPSCs呈致密、饱满的圆顶状克隆生长，细胞克隆边界清晰、结构规整。取部分bEPSCs均分为2组，第1组加入CHIR和XAV试剂，第2组仅添加CHIR。在相同适宜条件下培养一段时间，观察早期传代细胞，第1组细胞呈致密圆顶状克隆，边缘整齐，第2组细胞由致密变扁平、克隆松散。结果表明______。 (3)bEPSCs建系过程中，研究人员比较不同培养条件对长期传代细胞的影响，结果如下表。 组别 培养基成分 POU5F1基因表达 SOX2基因表达 对照组 CHIR+XAV ++ ++ A CHIR ++++ ++++ B iCRT3 +++ +++ C CHIR+iCRT3 +++++ +++++ 注：“+”数量表示相对表达量；POU5F1和SOX2表达量越高，干细胞特性保持越好 ①结果表明CHIR与iCRT3对bEPSCs分化的作用是______关系。 ②Wnt和β-catenin是调控干细胞分化关键通路的信号分子，XAV抑制Wnt/β-catenin通路。TCF1和TCF4均为功能性蛋白，iCRT3特异性破坏β-catenin-TCF1蛋白复合物形成。下图为bEPSCs的Wnt/β-catenin调控机制。 Ⅰ．写出早期传代调节过程中表示调控效应的关键词： 第1组：【Ⅰ+Ⅱ】（调节平衡）→Ⅲ→Ⅴ（b1______）→Ⅶ（c1______） 第2组：【Ⅰ】（a1______）→Ⅲ→Ⅴ（b1______）→Ⅶ（e1______） Ⅱ．写出晚期传代C组实验调节过程中表示调控效应的关键词：d______，b2______，c2______。 （a1和d选填“促进”、“抑制”或“无影响”，b1和b2选填“上调”、“下调”或“不变”，c1和c2选填“维持”或“脱离”）。 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $命学科网 专题11 ☆ 考点01发酵工程 考点02植物细胞工程 考点03动物细胞工程 考点1 发酵工程 1、A 2、A 3、C 4、B 5、C 6、D 考点2 植物细胞工程 1、B 2、D 3、A 4、D 5、B 6、【答案】(1)纤维素酶、果胶酶 (2)负、负 (3) 转录 低于 抑制 w.zxxk.com 让教与学更高效 发酵与细胞工程 4大考点概览 1 命学科网 www zxxk (4) 精氨酸 将酶S特定位点赖氨酸变为精氨酸 促进蔗糖合成 考点3 动物细胞工程 1、B 2、C 3、B 4、【答案】(1) 内细胞团 及时清除代谢废物 (2)单独使用CHIR会诱导早期传代bEPSCs分化，而加入 3) 协同 下调 维持 促进 下调 2 com 让教与学更高效 降低酶S的乙酰化水平，增加酶S的活性和含量， XAV后可逆转这一效应，维持细胞的干细胞特性 脱离 抑制 上调 维持 专题11 发酵与细胞工程 4大考点概览 考点01 发酵工程 考点02 植物细胞工程 考点03 动物细胞工程 发酵工程 考点1 1、（2026·北京西城·二模）下列高中生物学探究实践中，需要使用显微镜的是（    ） A．培养液中酵母菌种群数量的变化 B．利用酵母菌制作传统发酵食品 C．探究酵母菌细胞呼吸的方式 D．酵母菌的纯培养 【答案】A 【知识点】微生物的培养与应用综合、探究培养液中酵母菌种群数量的变化、探究酵母菌细胞呼吸的方式、显微镜的种类、构造及使用 【详解】A、培养液中酵母菌种群数量的变化实验采用血细胞计数板计数法，需要借助显微镜观察、统计单位体积内的酵母菌数量，A符合题意； B、利用酵母菌制作传统发酵食品，只需观测发酵宏观现象、检测发酵产物即可，不需要观察酵母菌个体，无需使用显微镜，B不符合题意； C、探究酵母菌细胞的呼吸方式是营造有氧和无氧条件实现的，不需要使用显微镜，C不符合题意； D、酵母菌的纯培养实验通过观察菌落的宏观特征判断纯化结果，不需要使用显微镜观察酵母菌个体，D不符合题意。 2、（2026·北京丰台·二模）为探究大肠杆菌对中药黄芩的耐药性，研究人员在接种了大肠杆菌的培养基中放置含等量黄芩或四环素的滤纸片，培养一段时间后，从抑菌圈边缘挑取细菌重复培养，结果如下图所示。下列叙述错误的是（    ） A．药物诱导基因定向突变，使大肠杆菌产生耐药性 B．抑菌圈直径越大，说明药物的杀菌作用越强 C．黄芩可作为抗菌药物，不易使细菌产生耐药性 D．交替使用不同药物可降低产生耐药性的速度 【答案】A 【知识点】基因突变、培养基的类型及其应用 【详解】A、突变本身是不定向的，药物的作用是选择，把已经有耐药性的个体选出来，不是诱导定向突变，A错误； B、抑菌圈是滤纸片周围细菌无法生长的区域，直径越大，说明药物抑制 / 杀死细菌的范围越大，杀菌作用越强，B正确； C、黄芩组第 1 次和第 3 次培养的抑菌圈大小几乎不变，说明大肠杆菌对黄芩的耐药性发展缓慢，因此黄芩不易使细菌产生耐药性，适合作为抗菌药物，C正确； D、不同药物的作用机制不同，交替使用可以减少单一药物对细菌的定向选择压力，降低耐药菌被筛选出来的概率，从而延缓耐药性的产生，D正确。 3、（2026·北京昌平·二模）酵母菌可利用甲醇生产单细胞蛋白，野生型菌株甲醇利用率低，我国科研人员选育出高效利用甲醇的工程菌株并实现工业化生产。相关叙述正确的是（　　） A．甲醇为酵母菌提供碳源和氮源 B．菌种扩大培养是发酵工程的中心环节 C．提高通气量与搅拌速率可增加溶氧，提升产量 D．单细胞蛋白是通过分离纯化获得的代谢产物 【答案】C 【知识点】培养基的成分及其功能、发酵工程的基本环节、发酵工程的应用 【详解】A、甲醇仅含C、H、O三种元素，不含N元素，只能为酵母菌提供碳源，无法提供氮源，A错误； B、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，菌种扩大培养是发酵前的种子制备环节，并非中心环节，B错误； C、酵母菌为兼性厌氧型微生物，有氧条件下可大量繁殖，单细胞蛋白是酵母菌菌体本身，提高通气量与搅拌速率可增加溶氧量，促进酵母菌有氧呼吸大量增殖，进而提升产量，C正确； D、单细胞蛋白是微生物菌体本身，并非微生物的代谢产物，不需要分离纯化代谢产物，D错误。 4、（2026·北京海淀·二模）某同学进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，结果在以尿素为唯一氮源的选择培养基上没有出现菌落。该同学进行反思时，对可能原因的分析，不合理的是（    ） A．土壤样品稀释度过高 B．接种时未设置对照 C．涂布器灼烧后未彻底冷却 D．培养时间不足尚未形成菌落 【答案】B 【知识点】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 【详解】A、若土壤样品稀释度过高，涂布的菌液中分解尿素的细菌活菌数量极少，甚至平板上不存在目的菌，就无法形成菌落，A不符合题意； B、接种时设置对照的作用是检测培养基是否被杂菌污染、验证选择培养基的筛选功能，对照是否设置不会影响实验组本身的菌落生长情况，未设置对照不是实验组无菌落的原因，B符合题意； C、涂布器灼烧后未彻底冷却，高温会直接杀死待接种的目的菌，导致无法形成菌落，C不符合题意； D、若培养时间不足，目的菌还未繁殖到形成肉眼可见菌落的数量，会暂时观察不到菌落，D不符合题意。 5、（2026·北京石景山·二模）利用灰色链霉菌（一种需氧细菌）发酵生产链霉素。生产中相关操作不恰当的是（    ） A．接种前对菌种进行扩大培养 B．监控pH、温度、溶解氧等参数 C．用稀释涂布平板法实时监测活菌数量 D．通过提取、分离和纯化获取链霉素 【答案】C 【知识点】微生物的接种方法、微生物的培养与菌种保藏、其他微生物的分离与计数、发酵工程的基本环节 【详解】A、接种前对菌种进行扩大培养，可增加接种时的菌种量，缩短发酵过程的调整期，提高发酵效率，操作恰当，A正确； B、灰色链霉菌为需氧细菌，其生长代谢和链霉素的合成受pH、温度、溶解氧等环境因素影响，发酵过程中监控这些参数可保证发酵正常进行，操作恰当，B正确； C、稀释涂布平板法统计活菌数量需要对样品稀释后接种到培养基上培养一段时间才能计数，无法实现实时监测，且频繁取样易造成发酵体系杂菌污染，操作不恰当，C错误； D、链霉素是灰色链霉菌产生的次级代谢产物，发酵结束后需要通过提取、分离和纯化步骤才能获得纯净的链霉素产品，操作恰当，D正确。 6、（2026·北京房山·二模）家庭版水果酵素制作：将水果切碎、加糖，利用酵母菌、乳酸菌、醋酸菌依次进行发酵，先后出现酒味、酸味，最终得到酸性发酵液。下列相关叙述正确的是（    ） A．整个发酵过程须持续通入氧气 B．发酵过程中有机物的种类会减少 C．产生酒味主要与乳酸菌的无氧呼吸有关 D．酵母菌、乳酸菌、醋酸菌均能使发酵液pH下降 【答案】D 【知识点】无氧呼吸过程、果酒和果醋的制作原理 【详解】A、酵母菌无氧呼吸才能产生酒精，因此发酵产生酒味的阶段需要保持无氧环境，不能持续通入氧气，A错误； B、发酵过程中微生物会分解大分子有机物，产生多种小分子代谢产物，因此有机物的种类会增加，B错误； C、酒味是酵母菌无氧呼吸产生酒精导致的，乳酸菌无氧呼吸产物为乳酸，C错误； D、酵母菌呼吸作用产生的CO₂溶于水形成碳酸可使pH下降，乳酸菌代谢产生乳酸、醋酸菌代谢产生醋酸都可使发酵液pH下降，D正确。 植物细胞工程 考点2 1、（2026·北京丰台·二模）北京天安门广场大型立体花坛中的花卉是通过植物组织培养获得的，呈现出高度一致的颜色和形态，下列叙述错误的是（    ） A．进行植物组织培养时必须选取离体的植物器官、组织或细胞等 B．花卉组织培养时，脱分化形成愈伤组织的过程需要充足光照 C．调控植物激素的比例，能诱导愈伤组织分化成根、芽等不同器官 D．植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性 【答案】B 【知识点】植物组织的培养及基本过程 【详解】A、植物组织培养的外植体需要选取离体的植物器官、组织或细胞，未离体的植物细胞在植株上只会发生基因的选择性表达，无法发育为完整个体，A正确； B、花卉组织培养脱分化形成愈伤组织的过程需要避光处理，光照会抑制愈伤组织的形成，该阶段不需要光照，B错误； C、培养基中生长素和细胞分裂素的比例是诱导愈伤组织分化方向的关键，生长素比例偏高时诱导生根，细胞分裂素比例偏高时诱导生芽，因此调控植物激素比例可诱导愈伤组织分化为不同器官，C正确； D、植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性，即已分化的植物细胞仍具有发育为完整个体的潜能，D正确。 2、（2026·北京丰台·二模）以下实验中，酒精的用途错误的是（    ） A．观察花生种子的脂肪时，苏丹Ⅲ染液染色后用50%酒精洗去浮色 B．观察植物有丝分裂实验中，解离液中含体积分数为95%的酒精 C．绿叶中色素的提取和分离实验中，用无水乙醇提取色素 D．植物组织培养实验中，使用95%酒精对外植体进行消毒 【答案】D 【知识点】检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质、绿叶中色素的提取和分离实验、有丝分裂实验、植物组织的培养及基本过程 【详解】A、观察花生种子脂肪的实验中，苏丹Ⅲ染液为脂溶性染料，染色后会在装片表面形成浮色干扰观察，50%酒精可溶解苏丹Ⅲ染液洗去浮色，A正确； B、观察植物有丝分裂实验中的解离液由质量分数15%的盐酸和体积分数95%的酒精按1:1比例混合配制，作用是使组织细胞相互分散开，B正确； C、绿叶中的光合色素属于有机物，易溶于有机溶剂，因此可用无水乙醇提取色素，C正确； D、植物组织培养实验中，外植体消毒使用的是70%的酒精，95%酒精浓度过高，会使微生物表面蛋白质瞬间凝固形成保护膜，无法进入微生物内部，消毒效果差，且易损伤外植体，D错误。 3、（2026·北京东城·二模）将口蹄疫病毒衣壳蛋白P1的基因导入水稻愈伤组织，筛选后获得表达P1蛋白的转基因水稻。给小鼠饲喂该转基因水稻能激活针对口蹄疫病毒的肠道黏膜免疫反应。下列叙述错误的是（　　） A．将P1基因导入愈伤组织的常用方法是显微注射法 B．导入P1基因的愈伤组织经再分化获得转基因植株 C．可利用抗原-抗体杂交检测P1蛋白来筛选转基因植株 D．该种转基因水稻有望作为口蹄疫疫苗直接饲喂动物 【答案】A 【知识点】植物组织的培养及基本过程、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 【详解】A、将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法、花粉管通道法，显微注射法是将目的基因导入动物细胞的常用方法，不适用植物细胞，A错误； B、导入目的基因的愈伤组织可经再分化过程发育为完整转基因植株，B正确； C、抗原-抗体杂交技术可检测目的基因是否翻译出对应蛋白质，因此可通过该技术检测P1蛋白筛选转基因植株，C正确； D、由题意可知，饲喂该转基因水稻可激活小鼠针对口蹄疫病毒的免疫反应，因此其有望作为口蹄疫疫苗直接饲喂动物，D正确。 4、（2026·北京昌平·二模）油菜是我国第一大油料作物，受菌核病威胁严重。用一定剂量的射线照射板蓝根原生质体，可以使其染色体片段化，再利用此原生质体与油菜原生质体融合，获得杂种细胞，经组织培养获得抗病植株。相关叙述正确的是（　　） A．需用胰蛋白酶去除植物细胞的细胞壁 B．可用灭活的病毒诱导两种原生质体融合 C．依据染色体数量筛选含抗病基因的杂种细胞 D．抗病植株的遗传性状与油菜更接近 【答案】D 【知识点】细胞壁的成分及功能、染色体数目的变异、植物体细胞杂交技术 【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，去除植物细胞壁需使用纤维素酶和果胶酶，胰蛋白酶用于动物细胞培养过程中分散动物细胞，无法去除植物细胞壁，A错误； B、诱导植物原生质体融合的方法包括物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇诱导等），灭活的病毒是诱导动物细胞融合的特有方法，不能诱导植物原生质体融合，B错误； C、题干明确射线处理使板蓝根染色体片段化，无法通过染色体数量判断杂种细胞是否携带抗病基因，需通过分子检测或抗病性状检测筛选目标杂种细胞，C错误； D、由于板蓝根染色体被片段化，杂种细胞中完整的遗传物质主要来自油菜，因此最终获得的抗病植株的遗传性状与油菜更接近，D正确。 5、（2026·北京房山·二模）某研究小组利用品种1（2N=28）和品种2（2N=40）的两个鸢尾属远缘种为亲本，通过植物体细胞杂交技术，培育出了结实率高、观赏性和适应性更强的品种3，如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．过程①需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．过程②可用灭活病毒诱导 C．④和⑤需要植物激素的调控 D．培育品种3的过程中发生了染色体变异 【答案】B 【知识点】植物组织的培养及基本过程、植物体细胞杂交技术 【详解】A、过程①是去除细胞壁获得原生质体的步骤，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A正确； B、过程②是原生质体融合，诱导植物原生质体融合的方法有物理法（离心法、电融合等）和化学法（聚乙二醇诱导），灭活病毒是诱导动物细胞融合的特有方法，不能用于植物原生质体融合，B错误； C、④是脱分化过程、⑤是再分化过程，植物组织培养的脱分化和再分化阶段都需要生长素和细胞分裂素的调控，C正确； D、品种1染色体数为28，品种2染色体数为40，体细胞杂交得到的品种3的染色体数为两个亲本染色体数之和，发生了染色体数目变异，D正确。 6、（2026·北京东城·二模）将橘柚N品系和柚H品系进行体细胞杂交，培育出柑橘新品种NH，并对亲本与NH展开分析。 (1)体细胞杂交中，需将两个亲本用______处理得到原生质体，诱导融合后获得杂交细胞，最终培育出NH。 (2)柑橘类植物果实品质与其酸度、黄酮醇含量有关。酶G可催化柠檬酸转化为非酸类物质；酶F可催化黄酮醇的合成。测定亲本与NH果实的相关指标，结果如图1。表明酶G和酶F的乙酰化水平与其酶活性分别呈______（填“正”或“负”）相关。 (3)NH中蛋白质的乙酰化水平对蛋白质积累量的影响结果如图2，图中斜实线表示mRNA与蛋白质含量变化完全同步，说明斜实线上蛋白质含量主要受______水平的调控。据图可知，比亲本乙酰化水平高的蛋白质含量与mRNA含量的相关性______（填“高于”“等于”或“低于”）乙酰化水平低的蛋白质；比亲本乙酰化水平高的蛋白质大量集中在图中第四象限，说明NH中蛋白质的高乙酰化水平会______其积累。 (4)蛋白质乙酰化修饰发生在其特定位点的赖氨酸上。将赖氨酸改变为谷氨酰胺可模拟乙酰化的赖氨酸；改变为精氨酸会抑制乙酰化发生。酶S为蔗糖合成酶，欲培育出蔗糖含量提升的NH，可将酶S基因中特定位点编码赖氨酸的序列突变为______对应序列，请说明理由______。 【答案】(1)纤维素酶、果胶酶 (2)负、负 (3) 转录 低于 抑制 (4) 精氨酸 将酶S特定位点赖氨酸变为精氨酸，降低酶S的乙酰化水平，增加酶S的活性和含量，促进蔗糖合成 【知识点】酶的作用及机理、基因突变、植物体细胞杂交技术、表观遗传 【详解】（1）植物体细胞杂交过程中，需要先去除细胞壁获得有活力的原生质体。植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，根据酶的专一性，使用纤维素酶和果胶酶处理即可分解细胞壁得到原生质体。 （2）结合图1分析，酶G的功能是催化柠檬酸转化为非酸物质，因此酶G活性越高，果实总酸量越低，从图1可知：总酸量NH>H>N，而酶G乙酰化水平为NH≈H>N，可见乙酰化水平越高，酶G活性越低，酶F的功能是催化黄酮醇合成，因此酶F活性越高，果实黄酮醇含量越高，从图1可知：黄酮醇含量NH>N>H，因此酶F活性为NH>N>H，而酶F乙酰化水平为H>N≈NH，可见乙酰化水平越高，酶F活性越低，由此可知酶G和酶F的乙酰化水平与其酶活性都是负相关。 （3）mRNA是基因转录的产物，蛋白质是以mRNA为模板翻译合成的，若mRNA含量和蛋白质含量变化完全同步，说明蛋白质的含量变化主要由mRNA的量决定，因此蛋白质含量主要受转录水平的调控（转录产生的mRNA量直接决定后续蛋白质的合成量）；斜实线代表mRNA和蛋白质含量变化完全同步，即相关性最高，对比图中两类蛋白质：比亲本乙酰化水平低的蛋白质，其拟合虚线更接近斜实线，说明含量和mRNA的相关性更高，而高乙酰化的蛋白质分布偏离同步线更远，因此比亲本乙酰化水平高的蛋白质，其蛋白质含量与mRNA含量的相关性低于乙酰化水平低的蛋白质；该坐标系中，横坐标为与亲本相比的mRNA相对含量（大于0代表mRNA含量高于亲本），纵坐标为与亲本相比的蛋白质相对含量（小于0代表蛋白质积累量低于亲本）。第四象限的特点是：mRNA相对含量>0（转录出的mRNA更多），但蛋白质相对含量<0（蛋白质积累量更低），说明NH中蛋白质的高乙酰化水平会抑制蛋白质的积累。 （4）酶S是蔗糖合成酶，蔗糖含量提升需要酶S有更高的活性和更多的积累量，根据题干信息可知，赖氨酸改变为精氨酸会抑制乙酰化发生，结合前面推出的结论：高乙酰化会抑制酶活性、抑制蛋白质积累，因此要让酶S活性和积累量升高，需要抑制酶S的乙酰化，所以将酶S特定位点赖氨酸变为精氨酸，降低酶S的乙酰化水平，增加酶S的活性和含量，最终促进蔗糖合成，得到蔗糖含量提升的品种。 动物细胞工程 考点3 1、（2026·北京西城·二模）先体外培养脂肪细胞，然后去除细胞获得脂肪条件培养基（ACM）。用ACM培养前列腺癌细胞，48h后检测细胞数量，结果如图。下列说法错误的是（    ） A．用胰蛋白酶处理脂肪组织获得分散的脂肪细胞 B．对照组应该用无菌水培养前列腺癌细胞 C．ACM可能促进前列腺癌细胞的增殖 D．肥胖可能会加重前列腺癌患者病情 【答案】B 【知识点】验证性实验与探究性实验、动物细胞培养技术 【详解】A、进行动物细胞体外培养时，需要用胰蛋白酶处理动物组织，使组织细胞分散为单个细胞，A正确； B、本实验探究ACM对前列腺癌细胞的影响，对照组需遵循单一变量原则，应使用不含ACM的普通动物细胞培养基培养前列腺癌细胞；若用无菌水培养，前列腺癌细胞会因低渗吸水死亡，不符合细胞培养要求，B错误； C、由柱形图可知，随着ACM浓度升高，前列腺癌细胞的相对数量逐渐升高，说明ACM可以促进前列腺癌细胞增殖，C正确； D、脂肪细胞产生的 ACM 能促进前列腺癌细胞增殖，而肥胖患者体内脂肪细胞数量更多，产生的 ACM 也更多，因此可能会加重前列腺癌患者的病情，D正确。 2、（2026·北京海淀·二模）双特异性抗体可以同时识别两种不同的抗原。研究者用过氧化物酶免疫大鼠，取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞（甲细胞），用生长抑素免疫同品系大鼠，获得脾脏细胞（乙细胞）。将甲、乙细胞融合获得杂交-杂交瘤细胞，筛选获得分泌双特异性抗体的细胞株，流程如下图。 下列选项错误的是（    ） A．①过程可用PEG或灭活的病毒诱导细胞融合 B．②过程中未融合的乙细胞不能长时间存活并增殖 C．③过程需在单一培养孔中接种多个杂交-杂交瘤细胞 D．④过程需筛选过氧化物酶和生长抑素阳性反应细胞 【答案】C 【知识点】动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物细胞培养技术 【详解】A、动物细胞融合的常用诱导方法包括：化学法PEG（聚乙二醇），生物法灭活的仙台病毒，A 正确； B、乙细胞是已免疫的B淋巴细胞，体外培养条件下无法无限增殖，会很快衰老死亡，B正确； C、③是克隆化培养，目的是获得能分泌单一抗体的细胞株，因此需要在单一培养孔中接种单个杂交 - 杂交瘤细胞，C错误； D、我们需要的是能同时识别两种抗原的双特异性抗体，因此④过程需要筛选出同时对过氧化物酶和生长抑素都呈阳性反应的细胞株，D正确。 3、（2026·北京石景山·二模）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果见下图。下列叙述不正确的是（    ） A．在配制培养基时通常需要加入适量血清 B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C．不能直接用离心法收集细胞进行传代培养 D．细胞增长进入平台期可能与接触抑制有关 【答案】B 【知识点】动物细胞培养技术 【详解】A、动物细胞培养配制培养基时，由于人们对细胞所需的全部营养物质尚未完全搞清楚，通常需要加入血清、血浆等天然成分，A正确； B、②时细胞增长开始变得缓慢，选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错误； C、本题中细胞为贴壁培养，细胞贴附在培养容器壁上，需要先用胰蛋白酶处理使细胞分散脱离容器壁，才能收集，不能直接用离心法收集，C正确； D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D正确。 4、（2026·北京昌平·二模）牛多能性拓展干细胞（bEPSCs）是育种、培育优质牛肉等应用的核心材料，为建立可长期自我更新的bEPSCs系，科研人员开展系列实验。 (1)bEPSCs可从牛囊胚的______中分离获取，培养过程中需定期更换培养液的目的是补充营养物质、______。 (2)培养的bEPSCs呈致密、饱满的圆顶状克隆生长，细胞克隆边界清晰、结构规整。取部分bEPSCs均分为2组，第1组加入CHIR和XAV试剂，第2组仅添加CHIR。在相同适宜条件下培养一段时间，观察早期传代细胞，第1组细胞呈致密圆顶状克隆，边缘整齐，第2组细胞由致密变扁平、克隆松散。结果表明______。 (3)bEPSCs建系过程中，研究人员比较不同培养条件对长期传代细胞的影响，结果如下表。 组别 培养基成分 POU5F1基因表达 SOX2基因表达 对照组 CHIR+XAV ++ ++ A CHIR ++++ ++++ B iCRT3 +++ +++ C CHIR+iCRT3 +++++ +++++ 注：“+”数量表示相对表达量；POU5F1和SOX2表达量越高，干细胞特性保持越好 ①结果表明CHIR与iCRT3对bEPSCs分化的作用是______关系。 ②Wnt和β-catenin是调控干细胞分化关键通路的信号分子，XAV抑制Wnt/β-catenin通路。TCF1和TCF4均为功能性蛋白，iCRT3特异性破坏β-catenin-TCF1蛋白复合物形成。下图为bEPSCs的Wnt/β-catenin调控机制。 Ⅰ．写出早期传代调节过程中表示调控效应的关键词： 第1组：【Ⅰ+Ⅱ】（调节平衡）→Ⅲ→Ⅴ（b1______）→Ⅶ（c1______） 第2组：【Ⅰ】（a1______）→Ⅲ→Ⅴ（b1______）→Ⅶ（e1______） Ⅱ．写出晚期传代C组实验调节过程中表示调控效应的关键词：d______，b2______，c2______。 （a1和d选填“促进”、“抑制”或“无影响”，b1和b2选填“上调”、“下调”或“不变”，c1和c2选填“维持”或“脱离”）。 【答案】(1) 内细胞团 及时清除代谢废物 (2)单独使用CHIR会诱导早期传代bEPSCs分化，而加入XAV后可逆转这一效应，维持细胞的干细胞特性 (3) 协同 下调 维持 促进 下调 脱离 抑制 上调 维持 【知识点】细胞的分化、干细胞工程、动物细胞培养技术 【详解】（1）bEPSCs可从牛囊胚的内细胞团分离获取，内细胞团细胞具有发育的全能性，可分化为胎儿的各种组织。动物细胞培养过程中，细胞会不断产生乳酸、氨等代谢废物，这些物质积累会毒害细胞。定期更换培养液既能补充消耗的营养物质，又能及时清除代谢废物，维持细胞正常的生存环境。 （2）本实验的自变量是XAV的有无，因变量是bEPSCs的克隆形态（反映分化状态）。第1组（CHIR+XAV）：细胞呈致密圆顶状、边缘整齐，这是未分化干细胞的典型形态。第2组（仅CHIR）：细胞变扁平、克隆松散，说明细胞发生了分化。对比可知，单独使用CHIR会诱导早期传代bEPSCs分化，而加入XAV后可逆转这一效应，维持细胞的干细胞特性。 （3）①分析表格数据：单独使用 CHIR（A 组）或 iCRT3（B 组），POU5F1 和 SOX2 的表达量均高于对照组（CHIR+XAV）。两者联合使用（C 组）时，表达量显著高于单独使用的任何一组，且达到最高水平。由于 POU5F1 和 SOX2 表达量越高，干细胞特性保持越好（即抑制分化的效果越强），说明 CHIR 和 iCRT3 在抑制 bEPSCs 分化、维持干细胞特性方面具有协同作用（共同作用效果大于单独作用之和）。 ②早期传代 bEPSCs 主要通过β-catenin-TCF1 通路调控，晚期传代主要通过β-catenin-TCF4 通路调控。CHIR：促进Wnt/β-catenin 通路激活，增加细胞内 β-catenin 的含量。XAV：抑制Wnt/β-catenin 通路激活，减少细胞内 β-catenin 的含量。iCRT3：特异性抑制β-catenin 与 TCF1 的结合（破坏 β-catenin-TCF1 复合物形成）。β-catenin-TCF1 复合物：下调POU5F1 和 SOX2 的表达（促进分化）。β-catenin-TCF4 复合物：上调POU5F1 和 SOX2 的表达（维持干细胞特性）。 Ⅰ. 早期传代调节过程 第 1 组（CHIR+XAV）：β-catenin-TCF1 复合物的固有作用是抑制（下调）多能性基因的表达。CHIR（促进通路）与 XAV（抑制通路）达到平衡，β-catenin-TCF1 复合物含量适中，多能性基因表达量足以维持干细胞特性，细胞不分化。 第 2 组（仅 CHIR）：CHIR 的作用是激活（促进）Wnt/β-catenin 通路，使细胞内 β-catenin 含量显著升高。与第 1 组相同，β-catenin-TCF1 复合物仍发挥下调多能性基因的作用。β-catenin 含量升高导致 β-catenin-TCF1 复合物大量积累，多能性基因表达被显著抑制，细胞丧失干细胞特性，发生分化。 Ⅱ. 晚期传代 C 组（CHIR+iCRT3）调节过程 iCRT3 的特异性作用是抑制 β-catenin 与 TCF1 的结合，阻断 β-catenin-TCF1 通路。CHIR 使 β-catenin 含量升高，同时 iCRT3 阻断了 TCF1 通路，因此大量 β-catenin 转向与 TCF4 结合，形成 β-catenin-TCF4 复合物，该复合物显著上调多能性基因的表达。多能性基因表达量达到最高水平，干细胞特性得到最有效的维持，细胞可长期自我更新。 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $