2025-2026学年吉林长春市东北师范大学附中高二年级下学期期中生物试卷

2026～2027学年度下学期 高二年级期中考试 生物学答案 一、选择题：本题共30小题，每小题1分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B B C C C B C B C C 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 A B B B A B B C B D 题号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 答案 B B B D C D B B B A 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。全选对者得3分，选对但不全的得1分，有错选得0分。 题 号 31 32 33 34 35 答 案 AB AC BD ACD AD 三、非选择题：本题共5小题，共55分 36．（每空1分，共10分） （1）扩大培养 接种 异养兼性厌氧型 （2）淀粉酶 温度、pH、溶氧量等 微生物代谢物的形成（或代谢产物） （3）主发酵 密闭 （4）无菌水 1000 37．（每空1分，共8分） （1）动物细胞培养技术 增强小鼠机体的免疫反应，从而从该小鼠的脾中获得更多能产生抗A蛋白抗体的B淋巴细胞 （2）不需要 蛋白质分子和脂质分子 （3）未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞（合理即可） 体内培养 体内培养条件容易控制、不需要更换培养基、不需要考虑温度、pH是否合适等 （4）40～55 38．（除标注外，每空1分，共11分） （1）体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植（“核移植”“细胞融合”不得分） 有性患者猴的体细胞细胞核中含有2个染色体组，受精后形成的受精卵有3个染色体组，不能正常发育（2分） （2）促性腺激素 纺锤体、染色体（及第一极体，“细胞核”不得分） 供体猴 患者猴的第一极体中含有极少量细胞质，“三亲小猴”的mtDNA来源于供体猴卵母细胞细胞质，与代孕母体猴和患者猴无关 （3）囊胚 滋养层 雄 39．（除标注外，每空1分，共12分） （1）耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）、四种脱氧核苷酸（或dNTP）（2分） 两（2分） ②（2分） （2）Sma Ⅰ的酶切末端为平末端，无法与改良基因上的黏性末端连接（2分，写出黏性末端或平末端1分，写出目的基因两端是黏性末端或者便于和目的基因连接1分。） （3）β-半乳糖苷 白 构建改良基因组质粒时破坏了LacZ基因 （4）目的性强（精准、针对性强）、突变频率高（或准确，可控，高效，效率高，定向突变等合理答案均给分） 40．（除标注外，每空1分，共14分） （1）目的基因进入受体细胞内，在受体细胞内维持稳定（1分，“目地基因”“插入目的基因”“整合到基因”“稳定性遗传”不得分）和表达的过程（1分，“持续性表达”“翻译”“合成”不得分）（描述“农杆菌转化法过程”“基因表达载体过程”“具体目的基因操作过程”等均不得分） 不位于（2分，“不”“不在”不得分） （2）R2（2分，“2”“P2”不得分） GAATTC（2分，只写“AATT”不得分，“CTTAAG”不得分） Xho Ⅰ、Mun Ⅰ（2分，全部答对才能得分） （3）空质粒和重组质粒都含潮霉素抗性基因，导入水稻细胞后均可使水稻细胞在该培养基上生长 （4）核酸染料（或EB，溴化乙锭） 1、4、5、7、9 植株1、4、5、7、9对应电泳条带与重组质粒组相同，而重组质粒中含OCS基因和耐盐基因（或条带相同，位置相同，分子量相同） 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年下学期 东北师大附中 （生物）科试卷 高（二）年级期中考试 注意事项： 1．答题前，考生须将自己的姓名、班级、考场/座位号填写在答题卡指定位置上，并粘贴条形码。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。 3．回答非选择题时，请使用0.5毫米黑色字迹签字笔将答案写在答题卡各题目的答题区域内，超出答题区域或在草稿纸、本试题卷上书写的答案无效。 4．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄皱、弄破，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。 一、选择题：本题共30小题，每小题1分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1、下列关于果酒和果醋制作的叙述，正确的是 A．制作葡萄酒前，需反复冲洗葡萄以避免杂菌污染 B．将葡萄汁装入发酵瓶要留有大约1/3的空间 C．为保证无氧环境，果酒制作过程中不能拧松瓶盖 D．在O2和糖源充足时，醋酸菌将乙醇先转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸 2．腐乳是我国古代劳动人民通过微生物发酵制作而成的一种大豆食品。苏州的腐乳呈黄白色，口味细腻；北京的腐乳呈红色，略带甜味；四川的腐乳则香辣油润。下列有关叙述错误的是 A．各地腐乳的色泽风味各不相同可能与腌制过程中添加的香辛料不同有关 B．多种微生物参与了豆腐的发酵，起主要作用的毛霉属于原核生物 C．现代腐乳生产中，人工接种的毛霉菌种可从自然界中筛选，也可通过诱变育种获得 D．腐乳中的蛋白质可被微生物产生的蛋白酶分解成小分子的肽和氨基酸 3．下列关于泡菜制作的叙述，错误的是 A．泡菜的制作过程主要是由乳酸菌参与发酵，该菌属于厌氧菌 B．用水密封发酵坛的主要目的是保持无氧条件 C．泡菜制作的过程中，乳酸菌在产生乳酸的同时还会产生亚硝酸盐 D．泡菜腌制方法、腌制时间长短等都会影响亚硝酸盐的含量 4．获得纯净微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下列关于无菌操作的叙述，正确的是 A．牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味 B．在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30min来进行消毒 C．灼烧灭菌的对象可以是金属用具和试管口瓶口，在酒精灯火焰充分燃烧层进行 D．若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，必须将该处培养基去除后再用来培养微生物 5．高压蒸汽条件下持续20分钟会杀死芽孢，因此无菌操作中常利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为高压蒸汽灭菌的指示菌。使用时将其芽孢菌片放入待灭菌物品中，灭菌后将菌片浸没在含酸碱指示剂的培养液中，芽孢萌发繁殖会降低pH，使含指示剂的培养液由紫变黄，同时需设置未灭菌的阳性对照组（PC）和不含菌片的阴性对照组（NC）。下列叙述错误的是 A．配制好的培养基需先调pH后置于高压蒸汽灭菌锅内灭菌 B．设置NC组的作用是可以排除培养液自身pH变化对实验结果的干扰 C．若实验组培养液为紫色，NC组和PC组为黄色，则灭菌达到预期效果 D．若PC组培养液不变黄，说明芽孢可能已失活，需重新准备菌片实验 6．下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是 A．操作②到④的过程中，接种环至少需要进行6次灼烧灭菌处理 B．配置①中的培养基培养霉菌时，一般将培养基调至弱碱性后再进行湿热灭菌 C．接种结束后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息 D．通过平板划线法可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面 7．测定样品中所含单细胞微生物的数量可用显微镜计数法。将某大肠杆菌培养液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色后，用细菌计数板（规格为1mm×1mm×0.02mm）进行计数，观察到一个中格的菌体数如图所示。下列相关叙述正确的是 A．若图示中格内大肠杆菌数量代表所有中格大肠杆菌数量的平均数，则培养液中大肠杆菌的活菌密度为1.125×1010个·mL-1 B．细菌计数板广泛适用于细菌、酵母菌和霉菌等微生物的数量测定 C．台盼蓝染色鉴别细胞死活的原理是细胞膜具有选择透过性 D．细菌计数板使用时，应先在计数室上方加盖玻片，再沿凹槽边缘滴加样液 8．黄葛树的叶子、果实（榕果）和枝干含有独特的次生代谢产物酚类化合物。为探究校内黄葛树下土壤中分解酚类化合物的细菌数量，进行了相关实验。下列分析正确的是 A．甲组中a培养基上的菌落连成一片，可能是稀释度过低造成的 B．以乙组计数，5g土壤中酚类分解菌的估算数目是1.4×109个 C．土壤样液先在锥形瓶内进行富集培养，再等比稀释后涂布计数 D．以酚类为唯一碳源的培养基上生长的细菌都能合成酚类降解酶 9．养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，下列叙述正确的是 A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 10．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高，下列关于发酵工程的说法错误的是 A．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、产生的酶及菌体本身等 B．由黑曲霉发酵得到的柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂 C．利用酵母菌等发酵生产的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料 D．微生物肥料可以改良土壤结构，有的还可以抑制土壤中病原微生物的生长 11．下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是 A．用自然生长的茎进行组培消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性 B．培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并避免瓶内外的气体交换 C．组织培养的培养基中含有营养物质，因此整个过程不需要光照 D．诱导形成试管苗后，打开封口膜或瓶盖后，直接将试管苗移栽入土 12．我国科学家结合单倍体育种技术成功培育出玉米新品种，部分育种过程如图。下列相关叙述错误的是 玉米花药或花粉单倍体纯合二倍体优良品种 A．过程①包含脱分化和再分化，不同阶段激素含量及光照条件不同 B．过程②需用秋水仙素或低温诱导处理单倍体的种子以获得二倍体 C．过程③可从个体水平上进行筛选，从而获得稳定遗传的优良品种 D．该培育过程涉及的生物学原理有植物细胞的全能性和染色体变异 13．紫杉醇是一种从红豆杉树皮、根部等组织中分离出的具有抗肿瘤活性的化合物。红豆杉生长缓慢、野生资源匮乏，且紫杉醇含量低，从天然植物中提取已无法满足人类的生产需要。植物细胞培养是目前紫杉醇的主要生产途径之一，过程如图。下列叙述正确的是 A．紫杉醇是红豆杉植株生长和生存所必需的次生代谢物 B．诱导愈伤组织时，可向培养基中加入2，4-D、KT（细胞分裂素类似物）等物质 C．悬浮细胞培养时应将红豆杉愈伤组织置于固体培养基中 D．植物细胞培养技术能够实现红豆杉的快速繁殖 14．花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥（2n=16）对黑腐病等多种常见病害具有抗性。科研人员用射线照射处理黑芥叶肉原生质体后与花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株甲、乙、丙，它们均含有花椰菜的全部染色体。下列叙述错误的是 植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株甲 杂合新植株乙 杂合新植株丙 染色体数目 18 16 34 24 58 A．可以利用是否含有叶绿体作为初步筛选融合原生质体的依据 B．杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，因而可育 C．杂合新植株丙可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成 D．获得的杂种细胞需要经过脱分化和再分化才能培育成新植株 15．体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是 A．悬浮培养一般使用液体培养基 B．贴壁培养一般使用固体培养基 C．悬浮培养会发生接触抑制现象 D．血液中淋巴细胞适合贴壁培养 16．动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是 A．配制细胞培养基时，加血清（含细胞生长必需蛋白）和氯霉素后湿热灭菌 B．在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素 C．考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数 D．采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染 17．科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞（简称iPS细胞），iPS细胞增殖分化后可形成多种组织细胞，用于多种疾病的治疗。如图为该技术的实验示意图，下列有关说法错误的是 A．体外培养iPS细胞时，定期更换培养液可以清除细胞的代谢物 B．iPS细胞能够分化成神经细胞体现了细胞具有全能性 C．图中的诱导因子可能是特定基因、特定蛋白或小分子化合物 D．若iPS细胞来源于病人的体细胞，经诱导并移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应 18．2025年7月，世界首例克隆牦牛“纳木错1号”在我国西藏成功诞生，其原理是采集优质野牦牛的耳廓组织细胞进行培养，并将其注入到普通牦牛去核的卵母细胞，从而获得牦牛克隆胚胎，然后将牦牛克隆胚胎移植到本土母牦牛（受体）的子宫内获得克隆牦牛，下列叙述错误的是 A．用机械方法结合酶法处理耳廓组织获得分散的体细胞 B．克隆牦牛的细胞核DNA与优质野牦牛相同，克隆属于无性生殖 C．胚胎移植时需对受体牦牛注射免疫抑制剂，用于降低其对外来胚胎的排斥反应 D．用电刺激、乙醇等激活重构胚，可使其完成细胞分裂和发育进程 19．治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，流程如图。下列相关叙述错误的是 A．核移植前需将卵母细胞培养到MⅡ期 B．上述过程体现出动物细胞具有全能性 C．获得的组织器官移植给个体B一般不发生免疫排斥反应 D．胚胎干细胞需经过基因的选择性表达才能产生出所需的组织器官 20．为解决杂交瘤细胞在传代培养过程中出现的来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，但对Oua不敏感。如图表示操作过程，下列有关分析错误的是 A．B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的脾脏 B．HAT培养基可去除未与BBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞 C．杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降 D．杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力 21．下列关于哺乳动物受精的叙述，错误的是 A．一般情况下，卵子在输卵管内发育到MⅡ期时，才具备受精的能力 B．精子必须在雌性动物的生殖道获得能量才能参与受精 C．受精时，透明带和卵细胞膜都会发生相应的生理反应以防止多精入卵 D．精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体 22．下列关于高等哺乳动物从配子形成到早期胚胎发育的过程的叙述，正确的是 A．排卵就是从卵巢中排出初级卵母细胞的过程 B．常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志 C．透明带破裂标志着胚胎开始进入细胞分化的时期 D．出现囊胚腔的胚胎不能用来进行胚胎分割 23．华西牛是我国育种专家培育的具有完全自主知识产权的专门化肉牛新品种，打破了我国肉牛种源严重依赖进口的局面。科研人员在生产中采取胚胎工程的手段实现了华西牛的快速繁育。下列叙述错误的是 A．采集的精子需要进行获能处理后在适当的培养液中完成受精 B．胚胎移植过程中涉及到两次检查，且两次检查的对象是相同的 C．受体母牛需健康且具有正常的繁殖能力，胚胎移植前需要对其进行同期发情处理 D．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 24．多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。如图列举了几项技术成果。下列叙述正确的是 A．经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B．①需获得MⅡ期的去核卵母细胞 C．②能大幅改良动物性状 D．③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 25．质粒是基因工程中最常用的载体，质粒有标记基因（如图所示），通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。质粒上箭头表示三种限制酶的酶切位点。下表是外源基因插入（插入点有a、b、c）后细菌的生长情况。下列有关叙述正确的是 项目 细菌在含氨苄青霉素的培养基上生长情况 细菌在含四环素的培养基上生长情况 ① 能生长 不能生长 ② 能生长 能生长 ③ 不能生长 能生长 A．质粒的复制原点上有RNA聚合酶的结合位点 B．①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是a，②是c，③是b C．该质粒被一种限制酶切开时，被水解的磷酸二酯键有2个 D．将外源基因与质粒连接时需用DNA聚合酶 26．如图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是 A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板 B．PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制 C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗8个引物③ D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经2次循环才可获得该序列的双链产物 27．下列关于基因表达载体及其构建过程的说法，错误的是 A．构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代 B．一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、起始密码子和终止密码子等结构 C．诱导物与诱导型启动子结合可激活或抑制目的基因表达 D．基因表达载体中启动子是RNA聚合酶的结合部位，启动转录过程 28．图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ、Hind Ⅲ的酶切位点。下列有关叙述错误的是 A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoR Ⅰ B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoR Ⅰ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoR Ⅰ切割位点有1个 C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒和目的基因 D．一个如图1所示的质粒分子经EcoR Ⅰ切割后，含有2个游离的磷酸基团 29．如图所示，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBⅠ121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作不符合实验目的是 A．用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中 B．将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞 C．用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因 D．与只用KpnⅠ相比，KpnⅠ和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确 30．利用AⅠ（人工智能）破解蛋白质结构和功能之谜，建立蛋白质数据库，并在此基础上进行蛋白质结构设计和优化，会给未来蛋白质工程的发展带来翻天覆地的变化。关于该技术的实施，下列说法错误的是 A．AⅠ预测新型蛋白质的结构与功能的原理是中心法则 B．可以通过改造或合成基因来获得AⅠ设计的蛋白质 C．根据某种蛋白质的氨基酸序列推理的基因序列中不包含启动子和终止子 D．用蛋白质氨基酸序列推测的RNA编码序列有多种可能，原因是密码子具有简并性 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的，全选对但不全得1分，有选错得0分。 31．营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。如图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列相关说法错误的是 A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿立即进行倒置培养 B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基，再“复印”至基本培养基 C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选 D．统计菌落种类和数量时要每隔一定时间观察统计一次，直到各类菌落数目稳定为止 32．束顶病毒能够引起香蕉的严重病害，科研人员用感病植株的茎尖作为外植体进行培养获得脱毒苗，实验结果如图所示。下列有关叙述正确的是 A．感病植株的茎尖需经消毒处理后才能用于脱毒苗的培育 B．培养过程中培养基常添加生长激素、细胞分裂素等激素 C．超低温保存感病植株茎尖可提高其脱毒率，降低成活率 D．茎尖脱分化形成的愈伤组织是一团呈正方形的薄壁组织团块 33．乳腺癌化疗的药物在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，为降低药物对患者的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体-药物偶联物（ADC），过程如图所示。下列相关说法正确的是 A．过程①是进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可以获得能分泌所需抗体的细胞 B．ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，ADC起作用时会被细胞吞噬，并在溶酶体内被分解后释放药物 C．经步骤③筛选得到的杂交瘤细胞具有的特点是能准确识别抗原的细微差异并能大量制备 D．ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，原因是抗体能特异性地作用于乳腺癌细胞，避免其他细胞受损 34．单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法错误的是 A．为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术 B．为使野化单峰骆驼a超数排卵，可注射适量的外源促性腺激素 C．胚胎移植后，胚胎进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化 D．若①表示体外受精，可利用野化单峰骆驼b刚排出的精子与卵母细胞完成受精作用 35．荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA的含量。其原理是在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当子链延伸至探针处时，探针水解，使荧光监测系统接收到荧光信号，如图所示。下列叙述错误的是 A．引物中（G+C）含量越高，其与模板DNA结合的稳定性则越低 B．若引物1、2之间易发生碱基互补配对，则不能进行有效检测 C．实验后期荧光强度不再变化可能是因为荧光探针或原料等耗尽 D．若某次PCR反应共产生52个等长DNA，则需加入52个荧光探针 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 36．（10分） 我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如图所示。回答下列问题： （1）发酵工程一般包括菌种的选育、________________、培养基的配制、灭菌、____________、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面；酿酒酵母的新陈代谢类型是______________________。 （2）图中焙烤阶段应注意控制温度，不能使____________失活；发酵时要严格控制_______________________________（答出两点即可）等发酵条件，环境条件不仅会影响微生物的生长增殖，还会影响_____________________________。 （3）啤酒发酵过程可分为____________、后发酵两个阶段，其中酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温、____________的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。 （4）发酵阶段，从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌数量为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用_________________稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释___________________倍。 37．（8分） 尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，科学家利用该病毒的结构蛋白（蛋白A）作为抗原制备单克隆抗体的流程如图所示。回答下列问题： （1）制备单克隆抗体涉及多种技术手段，其中____________________是动物细胞工程的基础，实验时一般需要多次注射蛋白A免疫小鼠，目的是______________________________________________________。 （2）与骨髓瘤细胞融合前，B淋巴细胞________（填“需要”或者“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量。诱导细胞融合时，灭活病毒表面的糖蛋白和酶能与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上________________重新排布，使细胞融合。 （3）杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，在该培养基上____________细胞会死亡。经筛选②得到的细胞最简便的培养方法是____________（填“体内培养”或“体外培养”），原因是________________________________________。（答出1点即可） （4）为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（A蛋白）逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。 结果证明该单克隆抗体识别抗原（A蛋白）的区域大概为____________（填“40～50”、“40～55”或“40～60”）位氨基酸。 38．（11分） 为治疗mtDNA（线粒体DNA）突变导致的线粒体遗传病，某科研团队通过第一极体移植得到了“三亲小猴”，过程如图1所示。回答下列问题： （1）“三亲小猴”的诞生需依次用到动物细胞培养、第一极体移植、________________（答出2点即可）等技术，属于____________（填“有性”或“无性”）生殖。该过程不能直接用患者猴的体细胞作为核供体的原因是____________________________________________________。 （2）次级卵母细胞的获取过程中，需要对雌性猴注射____________进行超数排卵处理。图中过程②移除“原核”移除的是________________________________。研究人员对“三亲小猴”、供体猴、代孕母体猴和患者猴的mtDNA中某一特异性序列进行了检测、比对，结果如图2所示。分析可知，“三亲小猴”的mtDNA特异性序列与____________的一致，不同于另两种猴，原因是____________________________________________________________。 （3）过程⑥之前想要进行性别鉴定，应取____________时期的________细胞进行DNA检测，可优先选择是________性（填“雌”或“雄”）胚胎移入子宫发育以进一步避免线粒体遗传病遗传给后代。 39．（12分） 定点诱变技术可以在体外改造目的DNA分子，进而研究基因的表达以及蛋白质的结构与功能之间的关系。经典的大引物PCR定点诱变技术成为基于PCR的定点诱变技术中应用最普遍的方法，操作过程如图甲。研究者欲改造某基因并将其导入大肠杆菌的质粒中保存，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点，结构如图乙。回答下列问题： （1）PCR体系中，除了加入目的基因与引物外，还应加入____________________________等（答出两点即可）。利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR（PCR1和PCR2），在PCR1中，至少需要________个循环才能获得相应的大引物模板。在PCR2中，要获得带有诱变点的改良基因，引物应选用大引物两条链中的_______（填“①”或“②”）。 （2）为实现质粒和改良基因的高效连接，选用限制酶Xma Ⅰ切割质粒而不选用限制酶Sma Ⅰ的原因是________________________________________________________。 （3）在构建改良基因表达载体时，有的质粒含有改良基因，有的质粒为空白质粒，将含上述组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中，适宜温度下培养一段时间后，再将菌液涂布在含氨苄青霉素和________的平板上。一段时间后，在培养基上出现白色和蓝色两种菌落，其中_________色菌落含有重组质粒，判断的依据是________________________________________。 （4）与X射线诱变相比，该诱变技术的优点是____________________________。 40．（14分） 科研人员为了培育出耐盐水稻，从野生大豆中提取出了耐盐基因，先用PCR技术大量扩增耐盐基因，然后将该基因插入农杆菌的T-DNA中，获得重组质粒，再利用农杆菌转化法，将目的基因导入水稻细胞内，最终培育出了耐盐水稻。该培育实验所用农杆菌的Ti质粒的部分结构和耐盐基因的结构如图1所示。回答下列问题： （1）基因工程中的转化是指_______________________________________________________________。该农杆菌的Ti质粒中，潮霉素抗性基因的模板链与OCS基因的模板链_________（填“位于”或“不位于”）该质粒的同一条脱氧核苷酸链上。 （2）用PCR技术大量扩增耐盐基因时，为了提高耐盐基因与Ti质粒的正确拼接率，应在引物________的5′端添加碱基序列5′-____________-3′，并用限制酶___________切割Ti质粒。 （3）先用农杆菌感染水稻细胞，再用含潮霉素的培养基培养水稻细胞，能在该培养基上生长的水稻细胞不一定含目的基因，原因是__________________________________________________________________。 （4）根据耐盐基因和OCS基因序列合成相关引物，并利用PCR和电泳检测转基因植株中是否导入耐盐基因，得到的电泳图谱如图2所示。为了能在波长为300nm紫外灯下检测出DNA分子，电泳时需要在琼脂糖溶液中加入适量的____________________。据图2可知，转化成功的有植株________________________，理由是_________________________________________________________。 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