山东济南市商河县弘德中学2025-2026学年高二下学期第二次月考生物试题

**基本信息** 以发酵工程、基因工程等真实情境为载体，覆盖选修3核心知识，注重科学思维与探究实践能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|20/45|微生物培养、细胞工程、胚胎工程|结合果酒制作、抗虫棉培育等实例，考查基础概念与分析判断| |非选择题|5/55|发酵流程、固氮菌分离、基因表达载体构建|以啤酒生产、不对称体细胞杂交等为情境，综合考查实验操作与原理应用|

【我们的信念】勤学苦练携恩师只争朝夕，坚持到底一本榜必定有我！ 【我们的学风】尊师上进、比拼赶超、崇尚奋斗、进步为荣、规范认真、永不言弃！ 保密★启用并使用完毕前 高中2024级高二下学期第二次月考 生物试题 学科组长： 命题人： 考试时间：2026年5月 第I卷（选择题 共45分） 注意事项：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。不涂在答题卡上，只答在本卷上无效。 1、 单项选择题(本题共15小题，每小题2分，共30分。) 1. 约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵成含酒精的饮料。如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，下列说法正确的是（ ） A. 酿酒和制醋所用微生物都是能在有氧条件下存活的真核生物 B. 过程①和③分别发生在酵母菌细胞的线粒体基质和线粒体内膜上 C. 产生乙醇后进行过程④会产生一层菌膜是由醋酸菌大量繁殖所致 D. ④过程是生产果醋的唯一途径 2. 研究发现，优质酿酒酵母的选择，对啤酒的酿造品质至关重要。科研人员将新鲜的葡萄或土样，加入含富集培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养1d，进行不同浓度梯度稀释后，将样液涂布于YEPD平板培养基，获得多个单菌落。下列说法错误的是（ ） A. YEPD培养基应添加碳源、氮源等，并将pH调至碱性 B. YEPD培养基需通过湿热灭菌法进行严格灭菌 C. 富集培养基为液体培养基，摇床温度应在28℃下进行 D. 对获得的多个单菌落需进一步筛选，并对特定菌落进行纯化培养 3.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析，下列叙述正确的是（　　） A. 5号试管的结果表明土壤中的菌株数约为个1.7×109个/g B. 可以从4号试管取0.1mL菌液进行涂布培养后计数 C. 土样需要灭菌处理后再加入盛有无菌水的锥形瓶中 D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌的数目多 4. 紫草宁是从紫草愈伤组织细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。下列关于植物细胞工程的说法，正确的是（ ） A．植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物 B．植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染 C．在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，可直接获得染色体加倍的细胞 D．叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片 5. 自从人类创立农业开始，就未停止过对农作物的改良。某科研小组以某种二倍体农作物①、②（分别具有不同的优良性状）为亲本进行杂交，然后通过不同途径获得了新品种④、⑧、⑨、⑩，下列有关分析错误的是（　　） A. 与③→⑧相比，③→⑩过程的育种进程更快 B. ③→④过程能提高植物突变频率且能使植物出现新的基因 C. 用秋水仙素处理③或⑦植株刚萌发的种子，都是为了诱导染色体数目加倍 D. 图中⑥⑨⑩分别为四倍体、三倍体、二倍体 6. 瘤胃是牛、羊等反刍动物具有的特殊的器官，其中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡。已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员对瘤胃中的纤维素分解菌进行了分离、鉴定，过程如下图所示。下列有关说法正确的是（ ） A. 实验时，牛体内提取的瘤胃液不能使用干热灭菌，应使用湿热灭菌 B. 为分离出纤维素分解菌，甲、乙、丙培养基应以纤维素为唯一营养成分 C. 通过向乙和丁培养基中加入刚果红，可对纤维素分解菌进行鉴定和计数 D. 在甲、乙、丙、丁的培养基表面加入一层无菌石蜡能有效获得目标菌落 7. Vero细胞是非洲绿猴肾细胞，易于培养，生物安全性高，对多种病毒的感染敏感，是很多病毒培养的理想基质。培养 Vero细胞能广泛地用于人和动物疫苗的生产，下列有关叙述错误的是（　　） A. 贴壁生长的细胞需用胰蛋白酶处理后再进行离心收集 B. 培养正常的 Vero细胞时，在培养瓶上可形成多层细胞 C. 定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质 D. 培养动物细胞的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH 8. 研究人员取胰岛B细胞功能受损的糖尿病患者的成纤维细胞，在加入特殊诱导因子促进Sox2，Klf4，Oct4，c-Myc（简称SKOM）4种基因表达的孵化器中培养得到多能干细胞（iPS细胞），再定向诱导分化为可移植的正常胰岛B细胞。下列叙述正确的是（ ） A. SKOM中可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期 B. 孵化器中要加入动物血清来防止动物细胞受病原体侵染 C. 导入的SKOM使成纤维细胞具有衰老细胞的特征 D. iPS细胞分化为胰岛B细胞的过程体现了细胞的全能性 9. 下列有关细胞工程的叙述，正确的有（ ） ①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍 ②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞 ③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体 ④受精完成的标志是雌雄原核融合 ⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 10. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B. 重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定 C. 可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D. 将重组胚胎移到雌性奶牛体内，需要注射免疫抑制剂降低免疫排斥 11. 动物细胞融合是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。下列关于动物细胞融合的叙述，错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备过程中需要进行动物细胞融合 B. 动物细胞融合的原理与植物体细胞杂交的原理不完全相同 C. 两个单倍体细胞融合后，形成的细胞中含有2个染色体组 D. 若将两种细胞置于培养基中进行两两细胞融合，则共有3种融合类型 12. 科学家将苏云金杆菌中的Bt抗虫蛋白基因（抗虫基因）导入棉花的愈伤组织细胞，鉴定后，将含抗虫基因的受体细胞组织培养获得棉花植株。经棉铃虫饲喂实验，发现棉花植株并无抗虫性状，科学家提取棉花叶片细胞中的有关成分进行了如下操作，下列分析错误的是（    ） A．提取细胞中的蛋白质，采用抗原—抗体杂交技术进行检测，若能检测到Bt抗虫蛋白，则可能是抗虫基因表达效率低 B．若经A检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白，可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的RNA，若测到Bt抗虫蛋白的mRNA，则可能是抗虫基因能转录，但不能正常翻译 C．若经B检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA，可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA，若能检测到抗虫基因，则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中 D．若经C检测确定细胞中无抗虫基因，则可能只是载体DNA分子导入受体细胞 13. 幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶Xho I和Xba I切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组 B. 基因表达载体导入之前，可用Ca2+处理大肠杆菌 C. 培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D. 能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 14. 自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图，Pme1、BamH1、Spe1、SacI为不同限制酶），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列说法错误的是（ ） A. 上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因 B. 将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是BamHI C. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上 D. sfp和idgS基因表达时可能是以T-DNA的同一条链为模板进行转录 15. 利用某限制酶Ⅰ、酶Ⅱ对提取的莱茵衣藻某DNA进行单酶切和双酶切后的电泳结果，据此推测，下列叙述不正确的是（　　） A. 电泳时，核酸的移动方向是从负极到正极的 B. 莱茵衣藻某DNA最可能为环状DNA分子 C. 限制酶Ⅰ、酶Ⅱ的切点最长相距约600bp D. 两种限制酶在载体上识别的序列可能相同 二、不定项选择题（共5题，每题3分） 16. 桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满足人们的需求。图1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述正确的是（ ） A. 桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同 B. 图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置 C. 由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大 D. 花色苷含量随桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，质量比为4：1时酒的感官评分最高 17. 以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法错误的是（　　） A. 重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化 B. 单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测 C. 杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失 D. 该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/1600时对RecQ解旋酶与DNA的结合抑制最大 18. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 19. 为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作（如图所示）。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列说法正确的是（ ） A. T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上 B. 利用物质K和氨苄青霉素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落 C. 利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株 D. 培养基中细胞分裂素和生长素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向 20. 人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细胞最多只能产生100～1000个干扰素分子，而用基因工程技术改造的大肠杆菌发酵生产（原理如图），在1～2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。天然的干扰素在体外保存相当困难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，在一定条件下可以延长保存时间。下列说法正确的是（    ） A．基因工程核心步骤需要的工具酶有DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶，其作用部位都是磷酸二酯键 B．将重组质粒导入大肠杆菌常用显微注射技术 C．酵母菌或大肠杆菌都可作受体菌，二者生产的干扰素在结构上没有区别 D．为延长保存时间，对干扰素进行改造，需通过改造干扰素基因来实现 三、非选择题（共5题，55分） 21. 我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如下图所示。 发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 （1）发酵工程一般包括菌种的选育、__________、培养基的配制、灭菌、_______、发酵罐内发酵、分离提纯产物等方面。 （2）在酿酒过程中常加入__________（填某种植物激素）以缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使__________失活。 （3）发酵过程可分为_____________、后发酵两个阶段，其中酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在前一阶段完成。后一阶段要在低温_________的环境下储存一段时间才能形成澄清、成熟的啤酒。 （4）从发酵罐中取样装入甲瓶，初步估测甲瓶中酵母菌数量为3×106个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL用______稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将甲瓶的菌液稀释__________倍。 22.自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答： （1）步骤①土样应取自当地____________（填“表层”或“深层”）土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是____________。 （2）步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍，步骤④所用的接种工具是____________。 （3）下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的____________培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是____________。 Ashby培养基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40.2g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，K2SO40.3g，CaCO35g，蒸馏水1000mL。 LB培养基：蛋白胨1g，酵母提取物5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7.0－7.2 （4）将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12为进一步鉴定其固氮，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。 CK：对照处理组 N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有氮全营养液：成份为在1000mL无氮植物营养液中加入0.12g尿素）CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL接种自身固氮菌的无氮植物营养液） ①对照组（CK）的处理为_____________。 ②自生固氨菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是________。 23. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合、所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程②中将愈伤组织加入_____酶去壁，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为______、______。 （2）③过程结束后，只有异源融合原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______。 （3）过程④中，植物激素中的生长素和细胞分裂素是启动______、脱分化、再分化的关键激素。 （4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和 DNA 分子标记鉴定，结果如表所示。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA 分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA 片段 由表可知，后代植株中______类型一定不是所需植株。科研人员推测：杂种植株细胞中某一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在，而是以DNA片段的方式整合进另一方亲本______（填“红豆杉”或“柴胡”）的染色体DNA 上，从而实现不对称杂交后的稳定遗传。 24. 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示。回答下列问题：    (1)在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射___（填“相同”或“不同”）特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的___（填“细胞”或“体液”）免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 (2)与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用___（填具体方法）诱导动物细胞融合。 (3)过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是___。过程④对细胞丙进行___培养和___检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是___。 (4)与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有___（答出2点）。 25..I．某种能以甲醇为唯一碳源的酵母菌可作为生产抗原蛋白的工程菌。研究人员以图1所示质粒为载体，构建含乙型肝炎病毒表面抗原蛋白（HBsAg）基因的重组质粒，将重组质粒导入组氨酸缺陷型大肠杆菌（在缺失组氨酸的培养基中无法生存）中进行扩增，再经酶切后导入酵母菌，经同源重组整合到其染色体DNA上。请回答下列问题： (1)科研人员构建HBsAg基因表达载体时，应选用______酶对质粒进行酶切处理，并使用E．coliDNA连接酶将扩增后的HBsAg基因正确插入图1所示质粒。启动子的作用是______。 (2)已知HBsAg基因的a链的部分序列为5'-CGCTACTCATTGCTGCG……CGGATGAGCGCGTAGAT-3’。利用PCR技术获取HBsAg基因时，引物M与________（填“a链”或“b链”）的部分序列相同。某同学设计了如下的4种引物，引物M、N对应的序列分别为________、_________。 A．5'-GGATCCATCTACGCGCTCATCCG-3' B．5'-CCCGGGCGCTACTCATTGCTGCG-3' C．5'-CGCAGCAATGAGTAGCGGGGCCC-3' D．5'-CGGATGAGCGCGTAGATGGATCC-3' (3)将重组载体导入大肠杆菌时，应在_______的培养基上进行筛选。欲从大肠杆菌中提取DNA，需向含DNA的滤液中加入预冷的酒精溶液后进行离心，取_______（选填“上清液”或“沉淀物”）即获得大肠杆菌的DNA。将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______。 (4)转化的酵母菌在培养基上培养时，需向其中加入甲醇，目的是______。 Ⅱ．运用乳房生物反应器可以从转基因牛的乳汁中获得t-PA改良蛋白，具体流程如图4。 (5)过程②运用的具体方法为_______；④过程前需取_______（填部位）的细胞进行性别鉴定。若改用膀胱生物反应器在尿液中获得t-PA改良蛋白，在构建基因表达载体时，需要添加______。 生物月考2答案 1. 【答案】C【详解】A、酿酒所需菌种是酵母菌，是真核生物，而醋酸菌好氧型细菌，属于原核生物，A错误； B、过程①是呼吸作用第一阶段，场所是细胞质基质，③包括有氧呼吸第二阶段和第三阶段，场所是线粒体基质和线粒体内膜，B错误； C、醋酸菌是好氧菌，产生乙醇后进行过程④醋酸发酵会产生一层菌膜，是由醋酸菌大量繁殖所致，C正确； D、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）转化为乙醛，再将乙醛转化为成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，故④过程不是生产果醋的唯一途径，D错误。 2. 【答案】A【详解】A、配制培养基时需要加入碳源、氮源，但酵母菌适宜在弱酸性环境中生长，需要将将pH调至弱酸性，A错误； B、培养基常用的灭菌方法为湿热灭菌（高压蒸汽灭菌法），B正确； C、富集培养基放在锥形瓶中，说明其为液体培养基；酵母菌的适宜生长温度为28℃，应将摇床温度应在28℃下进行，C正确； D、获得单菌落后需进一步筛选和纯化，从而分离出纯培养物，D正确。 3. 【答案】A【详解】A、据图可知，5号试管中稀释了106倍，5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明1g土壤样液中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个，A正确； B、稀释涂布平板法计数时应选择菌落数在30-300之间的统计，5号试管的菌落是168、175、 167个，若从4号试管取0．1mL菌液进行涂布培养后计数可能导致数目过多，B错误； C、土壤灭菌处理后会导致菌种被杀死，实验失败，C错误； D、该实验采用稀释涂布平板法统计菌落数，由于可能存在两个或多个细菌连在一起形成一个菌落的情况，所以统计得到的结果往往会比实际活菌的数目少，D错误。 4. 【答案】D【详解】A、植物细胞培养的主要目的是通过大规模的细胞培养，以获得人类所需的细胞次生代谢产物，细胞次级代谢产物不是植物细胞生长所必须得，A错误； B、植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理，培养基需要进行灭菌处理，这样可以防止杂菌污染，B错误； C、在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，不能直接获得染色体加倍的细胞，因为植物细胞具有细胞壁，阻止了原生质体的融合，C错误； D、叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，而茎尖不仅不带毒，而且全能性较高，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片，D正确。 5.【答案】C【详解】A、与③→⑧相比，③→⑩过程属于单倍体育种，其最明显的优点就是明显缩短育种年限，A正确； B、③到④过程发生多次射线处理种子，属于诱变育种，原理是基因突变，能提高植物突变频率且能使植物出现新的基因，B正确； C、⑦植株是单倍体植株，高度不育，不会产生种子，C错误； D、图中⑥是多倍体育种的植株，⑨是四倍体和二倍体杂交的植株，⑩是单倍体育种的结果，分别为四倍体、三倍体、二倍体（秋水仙素加倍），D正确。 6. 【答案】D【详解】A、从牛体内提取的瘤胃液不能灭菌，否则不能分离出目标微生物，A错误； B、为分离出纤维素分解菌，甲、乙、丙培养基应以纤维素为唯一碳源，还需要添加氮源等营养成分，B错误； C、由图可知，将菌液接种到乙上所用的方法是平板划线法，不能用于计数，C错误； D、牛、羊等反刍动物具有特殊的瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，在甲、乙、丙、丁的培养基表面加入一层无菌石蜡能有效获得目标菌落，D正确。 7. 【答案】B【详解】A、贴壁生长的细胞需用胰蛋白酶处理成为单个细胞后，再进行离心收集，A正确； B、培养正常的 Vero细胞时会出现接触抑制现象，不会形成多层细胞，B错误； C、代谢产物积累会导致细胞生长受阻，定期更换培养基能及时去除代谢废物并提供营养物质，C正确； D、培养动物细胞的气体环境中CO2的作用是维持培养液的pH，故动物细胞培养时的气体条件是95%的空气＋5%的CO2，D正确。 8. 【答案】A【详解】A、SKOM中具有全套遗传物质，可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期，A正确； B、孵化器中要加入动物血清，可保证细胞营养需要，B错误； C、导入SKOM基因的目的是将成纤维细胞重编程为多能干细胞（iPS细胞），此过程逆转了细胞分化状态，而非使其衰老，C错误； D、细胞全能性需发育为完整个体，而iPS细胞分化为胰岛B细胞仅体现细胞分化能力，D错误。 9. 【答案】B【详解】①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍，①正确； ②在进行细胞培养时，将动物组织分散成单个细胞，可采用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，②错误； ③制备单克隆抗体的过程利用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，③正确； ④雌雄原核融合是受精完成的标志，④正确； ⑤囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”⑤错误； 综上，①③④正确，共3项正确，B正确，ACD错误。 10. 【答案】D【详解】A、在进行细胞培养时，取材的动物组织可以用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一段时间，将组织分散成单个细胞，A正确； B、对转基因奶牛进行克隆，供核奶牛细胞来自雌性奶牛，所以重组胚胎是雌性，不需要进行性别鉴定，B正确； C、可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚，C正确； D、在胚胎移植过程中，供体牛的早期胚胎被植入代孕牛体内，代孕牛通常不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，因此一般不需要对代孕牛注射免疫抑制剂，D错误。 11. 【答案】C【详解】A、单克隆抗体的制备需要骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，A正确； B、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，结果形成杂种细胞。植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞全能性，结果是形成杂种植株，B正确； C、如果单倍体细胞只含一个染色体组，且两个单倍体细胞来源不同，细胞中含的染色体组也不同，那么融合后细胞中没有同源染色体，仍然是1个染色体组。如果单倍体细胞含多个染色体组，那么融合后细胞中也是多个染色体组，而不是2个染色体组，C错误； D、若将两种细胞（假设为A型、B型）置于培养基中进行两两细胞融合，会出现AA型、BB型、AB型3种类型，D正确。 12. 【答案】D【详解】A、提取细胞中的蛋白质，采用抗原-抗体分子杂交技术进行检测，若能检测到bt毒蛋白质，说明抗虫基因已经表达，可能是抗虫基因表达效率低，A正确； B、若经A检测确定细胞中无bt毒蛋白质，可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的RNA，若能检测到bt毒蛋白的mRNA，则可能是抗虫基因能转录，但不能正常翻译出蛋白质，B正确； C、若经B检测确定细胞中无bt毒蛋白的mRNA，可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA，若能检测到抗虫基因，则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中，导致其不能正常表达，C正确； D、根据题干信息“鉴定后，将含抗虫基因的受体细胞组织培养获得棉花植株”可知，导入受体细胞的是重组DNA分子，D错误。 13.【答案】C【详解】A、基因重组是指控制不同性状的基因发生重新组合，主要发生在有性生殖过程中，但通过基因工程将不同来源的 DNA 拼接，可以赋予生物新的遗传特性，也属于基因重组的范畴，故利用基因工程将Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组，A正确； B、原核细胞作为受体细胞时，可用Ca2+处理受体细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，更容易将基因表达载体导入其中，B正确； CD、该过程使用了限制酶 Xho I和Xba I切割质粒和Ipp20基因，结合图示可知，在构建目的基因表达载体的过程中氯霉素抗性基因被切割掉，保留了潮霉素抗性基因，不管是正常质粒还是重组质粒都含有潮霉素抗性基因，但只有正常质粒才同时含有氯霉素抗性基因，因此，可以先用含有潮霉素的培养基A筛选出导入正常质粒、重组质粒的大肠杆菌，再采用同位影印接种到含有氯霉素的培养基B和含有潮霉素的培养基A中，此时含有重组质粒的大肠杆菌不能在含有氯霉素的培养基 B上生长，从而与培养基A（对照）相比会消失一些菌落，对照两个平板上减少的菌落就是符合要求的大肠杆菌菌落，结合图示可知，符合要求的大肠杆菌菌落是3和5，C错误，D正确。 14. 【答案】D【详解】A、靛蓝能够稳定显色，不受pH的影响，故本题方案中无需转入能调控液泡pH的基因，A正确； B、将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI，B正确； C、将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，C正确； D、sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的，转录是以DNA的一条链为模板进行的，由启动子方向可知：两基因转录的模板不同，D错误。 15. 【答案】D【详解】A、据图可知，上端是点样位点，是负极，所以电泳时，核酸的移动方向是从负极到正极，A正确； B、由题意可知，只用一种限制酶进行酶切时产生一种长度的DNA片段，莱茵衣藻某DNA最可能为环状DNA分子，B正确； C、两种酶切时会产生600bp和200bp长度的DNA片段，由此可知，限制酶Ⅰ、酶Ⅱ的切点最长相距约600bp，最短相距约200bp，C正确； D、 如果两种限制酶在载体上识别序列相同，两种酶切时与一种酶切产生结果应该相同，据图可知并不相同，D错误。 16. 【答案】BCD【详解】A、桑葚玫瑰酒发酵利用的菌种是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，醋酸菌是异养好氧型细菌，A错误； B、图1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免空气中其他微生物进入装置，避免污染，B正确； C、由图2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大，C正确； D、由图2可知，花色苷含量随着桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，桑葚汁和玫瑰最佳质量比为4：1，此时酒的感官评分最高，D正确。 17. 【答案】BD【详解】A、重组大肠杆菌RecQ解旋酶相当于抗原，能刺激机体产生相应的体液免疫，因此，重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A正确； B、单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和1次抗原检测，第一次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次是通过克隆化培养和抗体检测，进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、融合后的染色体数为两者之和，在102到108之间，图中染色体数为80到108之间，因此，融合过程中染色体数存在丢失现象，C正确； D、由图B可知，1/800时，RecQ解旋酶与DNA结合活性最低，抑制效果最好，D错误。 18. 【答案】AC【详解】A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误； B、②代表体外早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B正确； C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑椹胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误； D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。 19. 【答案】ACD【详解】A、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因（基因G）插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，A正确； B、农杆菌属于原核生物，含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，故不会出现农杆菌的蓝色菌落，B错误； C、根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株，C正确； D、提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生芽，降低培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于生芽，所以培养基中细胞分裂素和生长素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向，D正确。 20. 【答案】D【详解】A、基因工程核心步骤是基因表达载体的构建，需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶，不需要DNA聚合酶，A错误； B、将重组质粒导入大肠杆菌时，要用Ca2+处理，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，B错误； C、酵母菌是真核生物，大肠杆菌是原核生物，干扰素是糖蛋白，蛋白质的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的，所以二者生产的干扰素在结构上会存在一定的区别，C错误； D、为延长保存时间，对干扰素进行改造，可以利用基因工程生产干扰素，所以需通过改造干扰素基因来实现，D正确。 21. 除标注外，每空1分（共9分） 【答案】（1） ①. 扩大培养 ②. 接种 （2） ①. 赤霉素 ②. 淀粉酶 （3） ①. 主发酵 ②. 密闭 （4） ①. 无菌水 ②. 1000（2分） 22. 除标注外，每空1分（共11分） 【答案】（1） ①. 表层 ②. 使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 （2） ①. 1000（2分） ②. 涂布器 （3） ①. Ashby培养基（2分） ②. 检测培养基是否被杂菌污染 （4） ①. 每盆土壤浇50mL无氮植物营养液 ②. 自生固氮菌能在土壤中独立固氮，不受宿主的限制（2分） 23. 除标注外，每空1分（共9分） 【答案】（1） ①. 纤维素酶、翟胶（2分） ②. X射线 ③. 碘乙酰胺 （2）异源混合原生质体在细胞核和细胞质的功能上实现了互补，使细胞分裂恢复正常 （2分） （3）细胞分裂 （4） ①. 乙 ②. 柴胡 24. 除标注外，每空1分（共11分） 【答案】(1) 相同 体液 (2)灭活病毒诱导法 (3) 既能无限增殖，又能产生抗体 （2分） 克隆化 抗体 抗原和抗体特异性结合（2分） (4)特异性强，可大量制备（答出2点即可）（2分） 25. 除标注外，每空1分（共15分） 【答案】(1) XmaⅠ、BclⅠ RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA（2分） (2) a链 B A (3) 含有氨苄青霉素、不含组氨酸 （2分） 沉淀物 大量扩增含目的基因的重组质粒 (4)诱导HBsAg基因表达，为酵母菌提供碳源（2分） (5) 显微注射技术 滋养层 膀胱上皮细胞特异性表达基因的启动子 【详解】（1） 在构建重组DNA分子时，质粒用XmaⅠ酶切，与目的基因用Xma Ⅰ酶切获得的黏性末端一侧相连；质粒用Bcl Ⅰ酶切获得的黏性末端和目的基因用BamII Ⅰ酶切获得的黏性末端相连，以防止目的基因、载体自身环化或目的基因反向连接，因此科研人员利用限制酶XmaⅠ、BclⅠ和E.coliDNA连接酶将HBsAg基因正确插入图1所示质粒。启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。 （2）在PCR技术获取HBsAg基因时，引物是与模板链的3'端结合，因此，引物M结合的单链是b链，部分序列与a链相同。在PCR扩增过程中应在5'端添加相应的酶切位点。利用PCR扩增目的基因时，引物需要与模板的3'端（b链的左边）结合，并遵循碱基互补配对原则，同时在引物的5'端添加限制酶酶切位点。根据给出的序列和PCR引物的设计原则，可以判断引物M的序列应为5′−CCCGGGCGCTACTCATTGCTGCG−3′，B正确。 故选B。 而引物N与a链的3’端结合互补配对，引物N的前六个碱基是在引物N的5’端加上了限制酶序列GGATTC，即5′−GGATCCATCTACGCGCTCATCCG−3′，A正确。 故选A。 （3）将重组载体导入大肠杆菌时，应在含有氨苄青霉素、不含组氨酸的培养基上进行筛选。提取DNA时需向含DNA的滤液中加入预冷的酒精溶液后进行离心，取沉淀物，获得大肠杆菌的DNA。将重组质粒导入大肠杆菌的目的是让重组质粒在大肠杆菌中大量扩增。 （4）将大肠杆菌中获取的HBsAg基因导入酵母后，转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入甲醇。加入甲醇的作用有两点：一是提供碳源，促进酵母菌的生长和代谢；二是启动甲醇代谢相关的基因表达，从而启动目的基因的表达。 （5）图中过程②是将目的基因（t - PA蛋白改良基因）导入受精卵。 将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术。 ④过程是将早期胚胎移植到代孕母牛体内，在胚胎移植前进行性别鉴定，一般取滋养层细胞进行，因为滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，取其细胞进行鉴定不影响内细胞团将来发育成胎儿的各种组织。 若要在尿液中获得相应蛋白，需要让目的基因在膀胱上皮细胞特异性表达，所以在构建基因表达载体时，需要添加膀胱上皮细胞特异性表达基因的启动子，以驱动目的基因在膀胱上皮细胞中表达。 第 1页，共14页 第 2页，共14页 学科网（北京）股份有限公司 $